Efecto sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de solanum sessiliflorum “cocona” y vancomicina sobre el crecimiento de staphylococcus aureus resistente a meticilina

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. IN. A. -U. NT. ESCUELA DE MEDICINA. IC. EFECTO SINÉRGICO IN VITRO ENTRE EL EXTRACTO ETANÓLICO DE. ED. Solanum sessiliflorum “COCONA” y VANCOMICINA SOBRE EL. DE. M. CRECIMIENTO DE Staphylococcus aureus RESISTENTE A METICILINA. TESIS. AD. PARA OPTAR GRADO DE:. CU. LT. BACHILLER EN MEDICINA AUTOR:. FA. KARLA YULISSA PALOMINO TANTALEÁN ASESOR: Dra. ELVA MEJÍA DELGADO. TRUJILLO-PERU 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 3.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A Dios, a mis padres y a mi hermana.. NT. A Dios porque ha estado conmigo a cada paso que doy,. -U. cuidándome y dándome fortaleza para continuar;. IN. A. a mis Padres, quienes a lo largo de mi vida han velado por. ED. IC. mi bienestar y educación siendo mi apoyo en todo momento,. FA. CU. LT. AD. DE. M. depositando su entera confianza en cada reto que se me. presentasin dudar ni un solo momento en. mi inteligencia y capacidad.. A mi hermana, mi gran amiga, ella representó. gran esfuerzo y tesón en momento. de decline y cansancio.. Es por ellos que soy lo que soy ahora.. Los amo con mi vida.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 4.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTOS. NT. A Dios, por estar conmigo en cada paso que doy, por fortalecer mi corazón e. IN. A. soporte y compañía durante todo el periodo de estudio.. -U. iluminar mi mente y por haber puesto en mi camino aquellas personas que han sido. IC. A mis queridos Padres, por su amor, paciencia, comprensión y motivación,. M. DE. y cariño sin ningún interés.. ED. personas que desde el primer momento me brindaron todo el apoyo, y colaboración. A mi querida Hermana, por creer y confiar siempre en mí, apoyándome en. AD. todas las decisiones que he tomado.. CU. LT. A mis maestros, en especial a la Dra. Elva Mejía Delgado, por sus consejos,. FA. tiempo y dedicación y por compartir desinteresadamente sus amplios conocimientos. y experiencia.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 5.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. INDICE. RESUMEN………………………………………………………………………….7 ABSTRACT………………………………………………………………………...8. NT. I. INTRODUCCION…………………….………………….……………………..9. -U. 1.1. PROBLEMA……………………………………………………………….14 1.2. OBJETIVO GENERAL…………………………………………………..14. A. 1.3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………….15. IN. II. MATERIAL Y METODOS…………………………………………………....16. IC. 2.1. MATERIAL………………………………………………………………..16. ED. 2.1.1. POBLACIÓN OBJETIVO ………………………………………..16 UNIDAD DE ANÁLISIS……………………………..……16. 2.1.1.2.. TAMAÑO DE MUESTRA……………………..…………….16. DE. M. 2.1.1.1.. 2.1.2. VARIABLES Y ESCALAS DE MEDICION……….……………17. AD. DEFINICIÓN DE VARIABLES…………………………………………..18 2.1.1. MODELO EXPERIMENTAL……………………………….……19. LT. 2.2. MÉTODOS: PROCEDIMIENTO………………………………………..22. CU. 2.3. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE INFORMACIÓN……………..28. FA. III. RESULTADOS…………………………………………………………………29 IV. DISCUSIÓN…………………………………………………………………….46 V. CONCLUSIONES……………………………………………………………...49. VI. RECOMENDACIONES……………………………………………………….50 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………..51 ANEXOS………………………………………………………………………..56. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 6.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. Se realizó un estudio tipo experimental con el objetivo de determinar si existe efecto sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ y Vancomicina sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus resistente a meticilina. -U. NT. (SARM).. Dado que la resistencia del SARM a diversos antibióticos ha sido emergente en todo el mundo como uno de los principales patógenos nosocomiales en los hospitales.. IN. A. Siendo la prevalencia en el Perú de cepas MRSA en pacientes hospitalizados de 70% y de 89.4%1 en unidades de cuidados intensivos (UCI). Por lo que hay la necesidad. IC. de buscar nuevas alternativas de tratamiento, con una tendencia de volver a las. ED. costumbres ancestrales del uso de plantas, debido a las múltiples ventajas que aporta. M. tanto en el aspecto medicinal como económico.. DE. Solanumsessiliflorum dunal es una especie nativa de la región Amazónica que ha sido extensamente estudiado por sus componentes alcaloides y compuesto fenólicos, que exhiben un interesante rango de bioactividad, entre las cuales se encuentra la. AD. inhibición tumoral, actividad antifúngica, antihepatotóxica, antiviral, antimicrobiana,. LT. antioxidante, teratogénica y embriotóxica.. CU. En conclusión, se demostró la existencia de efecto sinérgico in vitro mediante el promedio de los halos de inhibición de la concentración inhibitoria mínima del. FA. extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ y Vancomicina fue de 26 mm, el cual es el mayor promedio de diámetro de inhibición (duraffourd) de los grupos de investigación y según la escala de Duraffourd fue ―Sumamente sensible‖ en su totalidad.. Palabras clave: Efecto sinérgico, extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖, Vancomicina, Staphylococcus aureus resistente a meticilina.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 7.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. An experimental study was realizedin order to determine whether in vitro synergistic effect between the ethanol extract of Solanum sessiliflorum " COCONA" and. NT. Vancomycin on the growth of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.. -U. Since MRSA resistance to various antibiotics has been emerging worldwide as a major nosocomial pathogens in hospitals. Thereforethe prevalence in Peru of strains. IN. A. MRSA in hospitalized patients 70% and 89.4% 1 inIntensive Care Unit (ICU). So. IC. there is the need for new treatment options, with a tendency to return to the ancestral. ED. traditions of plant use because of the many advantages of both the medical and economic implications.. M. Solanumsessiliflorum dunal is a species native to the Amazon has been extensively. DE. studied for its alkaloids and phenolic compound components, which exhibit an interesting range of bioactivity, including tumor inhibition is, antifungal activity,. AD. antihepatotoxic, antiviral, antimicrobial, antioxidant, teratogenic and embryotoxic.. LT. In conclusion, the existence of synergistic effect in vitro was demonstrated by the. CU. average of the zones of inhibition of the minimum of the ethanol extract of Solanumsessiliflorum "COCONA" and Vancomycin inhibitory concentration was 26. FA. mm, which is the highest average diameter of inhibition (duraffourd) of research groups and according to the scale of duraffourd was "Highly sensitive" in its entirety.. Keywords: Synergistic effect, ethanol extract of Solanum sessiliflorum "COCONA" Vancomycin resistant Staphylococcus aureus.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 8.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. La medicina actual se desarrolla en medio de una crisis global de resistencia a los. NT. antimicrobianos, tanto en el ambiente hospitalario como ambulatorio. Cada vez es más común que sean resistentes a prácticamente todos los antibacterianos disponibles,. A. -U. dejando escasas alternativas para el tratamiento.1, 2, 3. IN. El ingreso a un hospital presenta un riesgo de contraer una infección nosocomial en 5. IC. a 10% y la estancia en una Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) incrementa este. ED. riesgo en 20 a 40%; por lo que el uso de antibióticos es un tratamiento habitual en el. M. paciente hospitalizado. Reiteradamente se reporta una creciente gravedad del paciente debido a una cada vez más alta frecuencia de infecciones por gérmenes resistentes y. AD. DE. sus reducidas opciones terapéuticas.4. La resistencia de las bacterias a los antibióticos que apareció con mayor incidencia en. LT. los ambientes hospitalarios, por ejemplo las reportadas a Klebsiella, Pseudomonas. CU. aeruginosa y Acinetobacter, en especial en las Unidades de Cuidados Intensivos, y a. FA. Staphylococcus aureus meticilino resistentes y vancomicino resistentes, se han ido difundiendo a infecciones bacterianas adquiridas en la comunidad, tales como neumonía, gonorrea e infecciones del tracto urinario, cada vez más difíciles de tratar con los antibióticos usuales.5 Staphylococcus aureus es un patógeno complejo causante de infecciones en diversos órganos y con un alto impacto epidemiológico, principalmente a nivel hospitalario, lo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 9.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cual se refleja en elevadas tasas de morbimortalidad. La importancia de la infección nosocomial por S. aureus meticilino resistente (SAMR) está ampliamente reconocida, tanto por la dificultad que plantea el tratamiento de estas infecciones, como por los. NT. problemas de control epidémico. Este microorganismo ha sufrido varios cambios genéticos y epidemiológicos, que han logrado convertirlo en un patógeno que puede. -U. ser encontrado en pacientes hospitalizados o en personas con algún tipo de contacto. para. infecciones. hospitalarias.. Habitualmente. son. responsables. de. IN. riesgo. A. con los servicios de salud, así como también, en individuos sanos y sin factores de. IC. enfermedades graves, como neumonía asociada a ventilación mecánica, peritonitis,. ED. bacteriemia asociada a catéter venoso central e infección de herida operatoria, entre. M. otras. La resistencia a S. aureus ocurre por la adquisición del gen mecA, el cual codifica una proteína ligadora de penicilinas "alterada" (PBP2a), que no permite la. DE. unión con los β-lactámicos. Este gen mecA es transportado en un segmento de ADN. AD. llamado el cassette cromosomal (SCCmec).6, 7. LT. Los antibióticos útiles para su manejo son pocos, prácticamente se reducen. CU. únicamente al uso de vancomicina, un antibiótico de alto costo y cuya efectividad. FA. depende de la eventual adquisición de factores de resistencia desde otras bacterias ya resistentes y que pueden transferírselos.7 La vancomicina es un antibiótico del grupo. de los glicopéptidos que tiene como blanco principal las subunidades D-Ala-D-Ala en los monómeros del peptidoglicano de las bacterias Gram positivas, que sirven como precursores de la síntesis de la pared celular. La resistencia no está mediada por un. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 10.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. mecanismo único, sino que parece involucrar una compleja reorganización de la síntesis de la pared celular.8. los países en vías de desarrollo en general muestran niveles de resistencia. NT. En. mayores que en países industrializados y a su vez cuentan con menos recursos para el. -U. desarrollo de estrategias para su contención. Es claro que la aparición de resistencia. A. bacteriana conlleva al fracaso de tratamientos, al uso de antibióticos cada vez más. IN. potentes, aumento del consumo de estos fármacos buscando sinergismo o diferentes. ED. IC. mecanismos de acción y por esto un aumento vertical de los costos.6. M. En el Perú la prevalencia de cepas MRSA en pacientes hospitalizados es de 70%, ésta. DE. aumenta en el servicio de UCI a 89.4%1. 10. AD. La aparición de cepas resistentes a los fármacos tradicionales ha dado origen a la necesidad de buscar nuevas alternativas de tratamiento, con una tendencia de volver a. LT. las costumbres ancestrales del uso de plantas para la cura de enfermedades, debido a. CU. las múltiples ventajas que aporta tanto en el aspecto medicinal como económico. En. FA. el Perú, como en otros países en vías de desarrollo, las plantas medicinales representan aún la principal herramienta terapéutica en medicina tradicional. Al respecto la Organización Mundial de la Salud estima que más de la mitad de los 4000 millones de habitantes de la tierra confía en la medicina tradicional para resolver sus principales necesidades de salud.11,12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 11.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las plantas, por su biodiversidad y riqueza en metabolitos secundarios, proporcionan una interesante fuente de posibles sustancias activas contra muchas bacterias. Por esto, en los últimos años se ha ido desarrollando un creciente interés en varios centros. NT. de investigación de todo el mundo en búsqueda de efectos antibacterianos de. -U. extractos de múltiples especies vegetales. 12. A. Diversas plantas de la familia de las solanáceas, especialmente las del género. IN. Solanum, son conocidas como fuentes de sustancias estructuralmente muy. IC. relacionadas con las saponinas esteroidales, llamados glicoalcaloides. Gallo menciona. ED. a los glicoalcaloides como metabolitos con propiedades antibacterianas contra. M. diversos microorganismos gram positivos y gram negativos. Solanum sessiliflorum. DE. Dunal es una especie nativa de la región Amazónica que fue domesticada por las tribus indígenas. Es una planta que crece mejor a pleno sol que en sombra. Pertenece. AD. a la sección Lasiocarpa de la familia de las solanáceas, lo que la relaciona filogenéticamente con la naranjilla o lulo (Solanum quitoense).Se encuentran reportes. LT. de que la cocona es un fruto con una cantidad considerable de hierro, vitaminas A y. CU. C, lo cual la hace una posibilidad importante para disminuir los problemas. FA. nutricionales de la región amazónica. 13. Especíﬁcamente, el género Solanum ha sido extensamente estudiado por sus alcaloides esteroidales, sus saponinas esteroidales y sus isoprenoides. Los alcaloides del género Solanum exhiben un interesante rango de bioactividad, entre las cuales se encuentra la inhibición tumoral, actividad antifúngica, antihepatotóxica, antiviral,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 12.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. teratogénica y embriotóxica. Se buscó el contenido total de compuestos fenólicos y tipo flavonoide de 19 plantas amazónicas entre las cuales se encuentra Solanum sessiliflorum y se determinó su actividad antioxidante. Se encontraron valores de. NT. 0,96mg/g de compuestos fenólicos, 0,07mg/g de flavonoides. Además se le atribuyen propiedades hipoglicemiantes, de disminuir la concentración de lípidos y triglicéridos. -U. en sangre, así como para el tratamiento de mordeduras de serpientes, picaduras de. A. alacrán infecciones de la piel y antihipertensivo. Se ha comprobado mediante ensayos. IN. in vivo que el extracto de cocona presenta actividad antimicrobiana contra. ED. IC. Helicobacter pylori.14, 15, 16,17,18. M. Con respecto a la terapia a seguir para la erradicación de S. aureus resistente a. DE. meticilina, existen diversos esquemas terapéuticos basados en la erradicación de estas bacterias, y resistencia a éstos; por tanto, es importante utilizar nuevas alternativas. AD. terapéuticas, especialmente en pacientes hospitalizados debido a pocas alternativas existentes y el progresivo desarrollo de resistencia a estas alternativas; así como, a su. LT. mal uso porque se utilizan dosis subterapeúticas o bien por periodos de tiempo largos. CU. e innecesarios.Por lo que el presente trabajo Pretende hacer un estudio sobre elefecto. FA. sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ y vancomicinasobre el crecimiento de Staphylococcus aureusresistente a meticilina, para lo cual se plantea el siguiente problema y objetivos:. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 13.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1.1. PROBLEMA ¿Existe efecto sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de Solanum ―COCONA‖. sessiliflorum. y. Vancomicina. sobre. el. crecimiento. de. -U. NT. Staphylococcus aureus resistente a meticilina?. 1.2. HIPÓTESIS. ―COCONA‖. y. Vancomicina. sobre. el. crecimiento. de. IC. sessiliflorum. IN. A. Sí existe efecto sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de Solanum. M. ED. Staphylococcus aureus resistente a meticilina.. DE. 1.3. OBJETIVOS. AD. 1.3.1. OBJETIVO GENERAL. LT.  Conocer el efecto sinérgico in vitro entre el extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ y Vancomicina sobre el crecimiento de. FA. CU. Staphylococcus aureus resistente a meticilina.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 14.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1.3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS  Determinar la concentración inhibitoria mínima del extracto etanólico de Solanum. sessiliflorum. ―COCONA‖. sobre. Staphylococcus. aureus. NT. resistente a meticilina.. Staphylococcusaureusresistente a meticilina.. -U.  Determinar el tamaño de halo de inhibición de la Vancomicina sobre el. A.  Determinar el tamaño de halo de inhibición de etanol de 70º GL sobre el. IN. Staphylococcus aureus resistente a meticilina.. IC.  Determinar la susceptibilidad del extracto etanólico de Solanum. ED. sessiliflorum ―COCONA‖ a concentración mínima inhibitoria en. M. sinergismo con Vancomicina sobre Staphylococcus aureus resistente a. DE. meticilina..  Comparar el tamaño de halo de inhibición entre Vancomicinay el. AD. sinergismo de: vancomicina y el extracto etanólico de Solanum. FA. CU. LT. sessiliflorum ―COCONA‖ a concentración mínima inhibitoria.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 15.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIALY METODO. 2.1. MATERIAL. Unidad de Análisis. -U. 2.1.1.1.. NT. 2.1.1. Población Objetivo. La unidad de análisis está constituida por todas las cepas de. IN. A. Staphylococcus aureus resistente a meticilina aisladas e identificadas. IC. en el laboratorio de Microbiología de la Facultad de Medicina de la. Tamaño de la muestra. M. 2.1.1.2.. ED. UNT.. FA. CU. LT. AD. DE.  Para determinar CMI:. n = 12. = 1.64 Para una seguridad del 95% (α = 0,05). = 0.84 Coeficiente para una potencia de prueba del 80% σδ = δ Reemplazando las variables se determina un tamaño de muestra mínimo n = 12 para cada grupo de estudio. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 16.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación.  Para sinergismo: vancomicina + extracto etanólico de Solanum. NT. sessiliflorum “COCONA”. -U. n=8. IN. A. = 1.96 Para una seguridad del 95% (α = 0,05). IC. = 0.84 Coeficiente para una potencia de prueba del 80%. ED. Debido a la no existencia de antecedentes: =1. M. =1. DE. Reemplazando las variables se determina un tamaño de muestra mínimo. AD. n = 8. Se tomarán= 10. En consecuencia, la muestra estará conformada por 10 halos por tratamiento de cada grupo.. CU. LT. 2.1.2. Variables y escala de medición. FA. VARIABLES. SEGÚN SU. TIPO. INFLUENCIA. ESCALA DE MEDICION. Tratamiento. Independiente. Cualitativa. Nominal. Diámetro del Halo de. dependiente. Cuantitativa. Continua. inhibición. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 17.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEFINICIÓN DE LAS VARIABLES -. Sinergismo: Cuando la acción bacteriana de 2 o más antibióticos es mayor, que la que se obtiene con cada una de las drogas utilizadas individualmente.. -. NT. Será valorado de acuerdo al diámetro del halo de inhibición.20 Concentración inhibitoria mínima (CIM): Es la concentración mínima del. -U. antibiótico requerida para impedir el crecimiento bacteriano visible, luego de. Halo de Inhibición: Zona alrededor del disco donde una sustancia. IN. -. A. entre 18 y 24 horas de cultivo.21. IC. antibacteriana es capaz de impedir el crecimiento de la bacteria al cabo de 18. ED. a 24 horas de incubación. Para valoración del efecto inhibitorio se utilizará la. -. M. escala cualitativa de Duraffourd correlacionándola con su respectivo CIM.22 Escala de Duraffourd: Escala cualitativa que determina el efecto inhibitorio. DE. in vitro, según diámetro de inhibición22: Nula (-): para un diámetro inferior a 8 mm.. . Sensibilidad límite (sensible = +): para un diámetro comprendido entre 8 a. LT. AD. . 14 mm.. Medio (muy sensible = ++): para un diámetro entre 14 y 20 mm.. CU. . Sumamente sensible (+++): para un diámetro superior a 20 mm.. FA. . -. Susceptibilidad: Determina la cantidad de droga que se requiere para matar o inhibir el crecimiento de un microorganismo patógeno. Se considera sinónimo de sensibilidad.23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 18.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Grado Gay Lussac: Unidad alcoholimétrica que expresa las partes, en volumen, de alcohol etílico absoluto contenidas en 100 partes de una mezcla de alcohol y agua. Se usa para expresar la riqueza alcohólica de bebidas y. NT. soluciones.24. -U. 2.1.3. Modelo Experimental. Diseñode Contrastación:Experimental. 2.1.3.2.. Esquema de Contrastación. FA. CU. LT. AD. DE. M. ED. IC. IN. A. 2.1.3.1.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 19.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. NT. CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA. 1ml. 1ml. 1ml. Bacterias. 0.8ml de Cocona. 0.8ml de. 0.8ml de Cocona al. al 25% + 0.2ml. Cocona al 50%. 75% + 0.2ml de. de bacterias. + 0.2ml de. bacterias. IN. A. -U. 1ml. ED. IC. bacterias. x 12. x 12. x 12. Placas Petri con Agar Muller Hilton. FA. CU. LT. AD. DE. M. Incubar a 37°C por 24 horas. Determinación de las UFC y determinación del CIM. Leyenda CIM: Concentración Inhibitoria Mínima UFC: Unidad formadora de colonias. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 20.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. SINERGISMO: VANCOMICINA + EXTRACTO ETANÓLICO DE Solanum sessiliflorum “COCONA” (x10). NT. 0.5ml de CIM de Vancomicina. COMPARAR. Bacterias. IC. IN. A. 0.5ml de CIM de Solanum sessiliflorum“Cocona”. -U. +. ED. 0.5ml de CIM de Solanum sessiliflorum“Cocona”. AD Bacterias. FA. CU. LT. 0.5ml de CIM de Vancomicina. DE. M. Bacterias. 0.5ml de etanol de 70º Gay Lussac Bacterias Leyenda CIM: Concentración Inhibitoria Mínima. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 21.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2. MÉTODO: PROCEDIMIENTO. a. Obtención de las Cepas de Staphylococcus aureus resistente a meticilina. NT. La cepa obtenida en el laboratorio de Microbiología de la Facultad de. -U. Medicina de la UNT, se replicó en Agar nutritivo y se confirmó que la cepa sea S. aureus. Utilizando el medio de cultivo específico para esta bacteria,. A. Agar Chapman y la prueba de confirmación coagulasa. Luego se procedió a. antibiótica se realizó. usando vancomicina. y. ED. El perfil de resistencia. IC. IN. conservar a la cepa en Agar soya tripticasa (TSA).. ampicilina, por medio de la técnica de discos de difusión (Zanpar®, Biodis®).. M. Se colocarón los discos en la superficie del Agar Muller-Hinton, las zonas de. DE. inhibición se medió a las 24 horas de incubación. La cepa aislada susceptible a. AD. vancomicina y resistente a oxacilina y ampicilina se considerarónS. aureus meticilino- resistente (MRSA) según los criterios de Clinica and Laboratory. LT. Standards Institute(CLSI). La cepa de S. aureus resistente a meticilina se. CU. mantuvo en Agar Soya Tripticasa. 19. FA. Una vez obtenida la cepa, ésta se cultivó en tubos de ensayo con tapa rosca conteniendo el medio Soya Tripticasa, incubándose a 37 °C con el fin de obtener colonias jóvenes. Luego de 24 horas de cultivadas se les agregó solución salina estéril, obteniéndose una turbidez semejante al tubo número 0,5 de la escala de Mac Farland (dilución de la cepa).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 22.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los tubos que contienen la bacteria estudiada, fueron girados entre las manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado, para distribuir los microorganismos adecuadamente.. NT. b. Extracto etanólico de Solanum sessiliflorum “Cocona”. -U. Para la Identificación y determinación taxonómica de la especie se llevó unejemplar completo de la planta al Herbarium Truxillense(HUT) de la. IN. A. Universidad Nacional de Trujillo para su identificación y su verificación. IC. taxonómica según el sistema filogenético de la especie.. ED. Preparación de la muestra:. M. Selección de la muestra: El material vegetal recolectado fue transportado al. DE. laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se eliminó las sustancias extrañas. AD. presentes en el material vegetal.. LT. Lavado de la droga: Luego de la separación de las sustancias extrañas, se. CU. procedió a lavar el material vegetal con agua destilada, seguido de una Posteriormente se. FA. desinfección, utilizando hipoclorito de sodio al 0.5%.. realizó un enjuague de la planta con suficiente agua destilada estéril, esto es para retirar los residuos de hipoclorito.25 Secado: Una vez lavados los frutos se procedió a cortar en trozos pequeños y se colocarán sobre papeles Kraft y se secó a temperatura ambiente por 7 días.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 23.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Pulverización: Una vez secados los frutos, estos se pulverizaron con ayuda de un molino. Tamizaje: El material obtenido de la pulverización, se pasó a través de los. NT. tamices Nº 2, 1.2, 0.7, 0.3. La muestra de trabajo deberá corresponder al tamiz. -U. 0.7.. Almacenamiento: El polvo de los frutos de Solanum sessiliflorum dunal. IC. ancha, para su posterior utilización.26. IN. A. (cocona) obtenidos, se guardaron en frascos de vidrio de color ámbar de boca. ED. Preparación del extracto etanólico de los frutos de Solanum sessiliflorum. M. dunal (Cocona). DE. Método maceración: Se colocaron 100 g de frutos secos, pulverizados y tamizados, en un recipiente de vidrio de boca ancha. Luego, se añadió etanol. AD. de 75º Gay Lussac (GL) cantidad suficiente hasta cubrir la muestra por sobre. LT. 2 cm de altura. Se mezcló bien, teniendo en cuenta que la mezcla debe ocupar. CU. como máximo las ¾ partes del recipiente. Se tapó el recipiente y se maceró. FA. por 7 días, agitándose 15 minutos, dos veces al día. Transcurrido el tiempo de maceración, se filtró el líquido al vacío, con papel de filtro Whatman N° 1. Al líquido filtrado se le denominó extracto etanólico. A continuación, el extracto etanólico se concentró en un rotavapor hasta obtener una masa siruposa. Ésta se llevó a secar a la estufa a 30 º C. Al. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 24.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. producto resultante se le denominó extracto seco. De éste, se prepararon las concentraciones de 25%, 50% disueltas en etanol de 70 º GL. Finalmente, los extractos etanólicos se guardaron en frascos de vidrio de color ámbar y en. NT. refrigeración hasta su utilización.27. -U. c. Determinación de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) del extracto etanólico de Solanum sessiliflorum “Cocona”. IN. A. La determinación de la CIM se realizó por el método de Diluciones en tubos,. IC. utilizándose 03 tubos de ensayo para las concentraciones del extracto. ED. etanólico de Solanum sessiliflorum ―Cocona‖ al 25, 50 y al 75%. De cada concentración se colocó 0.8mL en tubos de ensayo y luego se colocará 0.2ml. M. de la dilución de la cepa (la cual se preparó de tal manera que la turbidez sea. DE. semejante al tubo N°05 de la escala de Mac Farland), agitándolos para. AD. uniformizarlos. Los tubos fueron colocados en la estufa a 37°C por 24 horas. Este procedimiento se realizó con cada una de las diferentes concentraciones. LT. del extracto etanólico de cocona.. CU. Luego, se llevó a cabo la determinación de las Unidades Formadoras de. FA. Colonias, proceso que será detallado a continuación.. Determinación de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC): Para determinar las UFC (cuentas viables), se sembró 0.1 ml. de las soluciones de cada uno de los tubos en placas petri con medio Mueller Hinton, luego utilizó el asa de Driglasky se dispersó la muestra. Dichas placas fueron. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 25.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. colocadas en estufa por 24 h. a 37°C, luego de lo cual se procedió a la observación del crecimiento bacteriano mediante el conteo de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC), considerándose como la CMI a la menor. NT. concentración en la cual no se observaran UFC. Todo el procedimiento se. -U. llevará a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de la llama de un mechero. SINERGISMO: VANCOMICINA + EXTRACTO ETANÓLICO DE. A. Solanum sessiliflorum “COCONA”. IN. Para la determinación del sinergismo se llevó a cabo en primer lugar el. IC. sembrado de cepas de Staphyloccocus aureus meticilino resistente en medios. ED. de cultivo.. M. Con un hisopo estéril, el cual fue embebido en el tubo que contiene la dilución. DE. de la cepa bacteriana y a una distancia de 10 cm de la llama del mechero, se hizo el sembrado en placas petri, conteniendo Agar Mueller Hinton,. AD. hisopando uniformemente sobre toda la superficie del agar y girando cada. LT. placa 30 grados por 10 veces aproximadamente. Las placas recién sembradas. CU. fueron colocadas dentro de una estufa a 37 ºC de temperatura durante 10 minutos.. FA. Antibiograma: Técnica de. Kirby Bauer o el método de Difusión en. Discos. Teniendo en cuenta la concentración inhibitoria mínima del extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―Cocona‖ obtenido anteriormente, se procedió a la. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 26.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. combinación de vancomicina (CIM 0,5 a 2mg/mL) y el CIM del extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―Cocona‖. Se prepararon discos de papel de filtro estériles, los cuales fueron sumergidos. NT. dentro de cada combinación antes mencionada, posteriormente estos fueron colocados sobre los cultivos de Staphyloccocus aureus meticilino resistente,. -U. en placas petri previamente preparados con agar Mueller Hinton.. A. Paralelamente se realizó la determinación de la susceptibilidad de los. IN. controles, constituidos por el antibiótico de elección para la bacteria, por. IC. extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―Cocona‖ y por el etanol de 70º. ED. Gay Lussac.. M. Posteriormente las placas se incubaron a 37°C. Todo el procedimiento se llevó. DE. a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de la llama de un mechero. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas. Se midieron los halos de inhibición. AD. (efecto sinérgico) de cada concentración del extracto, incluyendo el área del disco de papel de filtro, con una regla milimetrada, así mismo los controles,. CU. LT. para su posterior comparación.. FA. Procesamiento de los datos: Instrumento de muestreo: La información fue registrada en fichas elaboradas especialmente para la recolección de datos (ANEXO 1). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 27.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Método de muestreo: Se midieron los halos de inhibición (efecto sinérgico) de cada concentración del extracto, incluyendo el área del disco de papel de filtro, con una regla. NT. milimetrada, así mismo los controles.. -U. 2.3. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LA INFORMACIÓN. A. Para Analizar la información se construyó tablas de Frecuencia de 1 entrada. IN. con sus valores absolutos. Para ver si hay diferencia entre los tratamientos se. IC. hizo la prueba de ANOVA (análisis de varianza) y luego se hizo una prueba. ED. de comparaciones múltiples. La prueba de ANOVA de un diseño. M. completamente aleatorizado y luego la prueba de Duncan ambas con un nivel. FA. CU. LT. AD. DE. de significancia de 0.05 (0.5%).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 28.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. RESULTADOS. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA. NT. (CIM) Se procedió a determinar de la concentración Inhibitoria Mínima (CIM) del extracto. -U. etanólico de Solanum sessiliflorum ―Cocona‖ mediante el conteo de las UFC de las. A. concentración de extracto al 25, 50 , 75% y grupo control, con repeticiones de 12. IC. IN. cada uno las que se muestra en la Tabla N°1.. ED. La Tabla N°2 muestra que se usó la media aritmética para obtener los promedios y. M. análisis de desviación estándar de cada grupo:. DE.  Promedio de las UFC de 29.33 a la concentración de 25 % (0. 25 mg/dl), 2.58 de concentración de 50 % (0.5 mg/dl),. 0.25 a la concentración de 75 %. AD. (0.75 mg/dl) y el grupo control de 8,076.22. 0.9. LT.  Desviaciones estándar de 13.159 a la concentración de 25 %,. concentración de 50 % ,0.452 a la concentración de 50 %, y 1,066.354 el. FA. CU. grupo control.. En el Gráfico N°1 se puede apreciar que el mayor efecto antimicrobiano sobre el crecimiento de SARM corresponde a la concentración del extracto etanólico de Solanum sessiliflorum. ―Cocona‖ de 75 % (0.75. mg/dl), seguidamente de la. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 29.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. concentración de 50%(0.5 mg/dl), concentración de 25 % (0. 25 mg/dl) y grupo control.. NT. En la Tabla N°3 se utilizó el análisis estándar donde se muestra si existen diferencias significativas entre las concentraciones de Cocona grupos de investigación. -U. significativas, acá se muestra que si existe diferencia significativa entre grupos de. IN. A. investigación dado que el valor de P de es menor que 0.05. (p = 0.000).. IC. La Tabla N°4 muestra que existen 4 grupos significativamente diferentes sobre el. ED. crecimiento de SARM; se usó la prueba de DUNCAN para determinar esto. Esta. M. prueba muestra que el promedio más bajo de UFC está en el grupo de cocona al 75%,. DE. seguido de cocona al 50% y cocona al 25%; estos a su vez son estadísticamente. AD. diferentes con el grupo control cuyo promedio de UFC es muy alto (8076.22).. La Tabla N°5 permite corroborar lo obtenido en el análisis de varianza, mediante la. LT. prueba de Kruskal Wallis, pues muestra que existe diferencias significativas entre los. CU. grupos de investigación dado que el valor de P de la prueba es menor que 0.05 (P =. FA. 0.000 ).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 30.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA 1: DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA EN UFC DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. Solanum. sessiliflorum ―COCONA‖ A LAS CONCENTRACIONES DE 25%, 50%, 75% Y. NT. CONTROL SOBRE EL CRECIMIENTO DE SARM. -U. UFC por Concentración de Cocona. 50%. 0. 9463.47. 2. 36. 2. 1. 6823.24. 3. 20. 1. 7077.72. 4. 48. 2. 0. 8191.08. 36. 2. 0. 6584.67. 6. 20. 3. 0. 6870.96. 7. 45. 2. 0. 9201.87. 20. 2. 0. 7698.02. 9. 45. 2. 1. 9364.56. 10. 36. 4. 0. 7968.405. 11. 20. 2. 0. 9049.95. 12. 8. 2. 0. 8620.75. FA. CU. 8. M. 4. DE. 5. IC. 4. ED. 18. (ufc/ cm2). AD. 1. Control. LT. N° de placa. 75%. IN. 25%. A. Concentración. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 31.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 2: RESUMEN DESCRIPTIVO DE UFC por DEL EXTRACTO ETANÓLICO. DE. Solanum. ―COCONA‖. sessiliflorum. A. LAS. CONCENTRACIONES DE 25%, 50%, 75% Y CONTROL SOBRE EL. ni. Promedio. Cocona 25%. 12. 29.33. 13.159. Cocona 50%. 12. Cocona 75%. 12. IN. 0.900. 0.25. 0.452. 12. 8,076.22. 1,066.354. M. A. Investigación. 2,027.10. 3,566.950. IC. 2.58. ED. Control. 48. DE. Total. Desv. Est.. -U. Grupo de. NT. CRECIMIENTO DE SARM. FA. CU. LT. AD. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 32.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRAFICA N°1: COMPARACIÓN ENTRE EL PROMEDIO DE UFC DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE Solanum sessiliflorum “COCONA” A LAS CONCENTRACIONES DE 25%, 50%, 75% Y VANCOMICINA SOBRE EL. FA. CU. LT. AD. DE. M. ED. IC. IN. A. -U. NT. CRECIMIENTO DE SARM. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 33.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 3: ANÁLISIS DE VARIANZA PARA DE DETERMINAR DIFERENCIAS. SIGNIFICATIVAS. ENTRE. UFC. POR. EFECTO. ANTIMICROBIANO IN VITRO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. NT. Solanum sessiliflorum “COCONA” A LAS CONCENTRACIONES DE 25%,. G.L.. 585,477,222.. F. P. 686.403. 0.000. 195,159,074.1. Tratamientos. 3. 4. 44. 284,321.26. M. 12,510,135.6. ED. 4 Error. C. M.. IN. S. C.. IC. F. V.. A. -U. 50%, 75% Y VANCOMICINA SOBRE EL CRECIMIENTO DE SARM. 597,987,358.. 47. DE. Total. AD. 1. FA. CU. LT. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 34.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 4: PRUEBA DE DUNCAN PARA DETERMINAR PARA DETERMINAR GRUPOS SIGNIFICATIVOS DE UFC POR. EFECTO. ANTIMICROBIANO IN VITRO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. NT. Solanum sessiliflorum “COCONA” A LAS CONCENTRACIONES DE 25%,. A. -U. 50%, 75% Y VANCOMICINA SOBRE EL CRECIMIENTO DE SARM. ni. Grupos para Alfa = 0.05. IC. Investigación. IN. Grupo de. ED. G1. 12. M. Cocona 75%. Cocona 25%. 12. 0.25 2.58 29.33. 12. 8,076.22. LT. AD. Control. 12. DE. Cocona 50%. G2. FA. CU. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 35.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 5: PRUEBA DE KRUSKAL-WALLIS PARA DETERMINAR GRUPOS SIGNIFICATIVOS DE UFC POR EFECTO ANTIMICROBIANO IN VITRO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE Solanum sessiliflorum. A. Prueba de Kruskal-Wallis. -U. VANCOMICINA SOBRE EL CRECIMIENTO DE SARM. NT. “COCONA” A LAS CONCENTRACIONES DE 25%, 50%, 75% Y. 44.632. IN. Chi Cuadrado. 3. IC. GL. 0.000. M. ED. P. FA. CU. LT. AD. DE. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 36.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. SINERGISMO: VANCOMICINA + EXTRACTO ETANÓLICO DE Solanum sessiliflorum “COCONA”. NT. Considerándose como la CMI a la menor concentración en la cual no se observaran UFC y de acuerdo a lo obtenido anteriormente se concluye que la concentración. -U. inhibitoria mínima es la concentración de 75 % (0.75 mg/dl) y se procedió a la. A. medición de los halos de inhibición (efecto sinérgico) de los grupos de investigación:. IN. CIM de Cocona, Vancomicina, CIM +vancomicina y Etanol 70 ° de Gay Lussac, se. ED. IC. muestra en la Tabla N°6.. M. En la Tabla N°7 se usó la media aritmética para obtener los promedios y análisis de desviación estándar de cada grupo:. DE.  Promedio de los halos de inhibición fue de 26 mm con el grupo de CIM. AD. (concentración 75 %) + vancomicina, 25.20mm con el grupo de CIM de cocona, 15.6mm con el grupo de vancomicina y 6.9 mm del grupo de etanol. LT. 70°.. CU.  Desviaciones estándar de 3.458 con el grupo de CIM de cocona, 2.00 con el. FA. grupo de CIM (concentración 75 %) + vancomicina, 1.101 del grupo de etanol 70° y 0.699 y 15.6mm con el grupo de vancomicina.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 37.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En el Gráfico N°2 se puede apreciar que el mayor promedio de diámetro de inhibición (duraffourd) de los grupos de investigación corresponde al el grupo de. NT. CIM (concentración 75 %) + vancomicina y el menor al grupo de etanol 70°.. En la Tabla N°8 muestra si existendiferencias significativas entre los diámetros. -U. inhibitorios de los grupos de investigación significativas para lo que se utilizó el. A. análisis estándar; acá se muestra que si existe diferencia significativa entre grupos de. IN. investigación dado que el valor de P de la tabla de ANOVA es menor que 0.05. (p =. ED. IC. 0.000).. M. En la Tabla N°9 se usó la prueba de DUNCAN para determinar que grupos son. DE. estadísticamente diferentes entre sí. Se muestra que existe diferencia entre en los halos de inhibición entre CIM del extracto etanólico de. solanum sessiliflorum. AD. ―cocona‖, vancomicina , CIM + vancomicina y etanol de 70° gay Lussac. Esta prueba muestra que el promedio más bajo de los diámetros inhibitorios que está en el. LT. grupo de Etanol 70° Gay Lussac, seguido grupo de vancomicina, CIM de cocona y. CU. CIM + vancomicina; estos a su vez son estadísticamente diferentes y que el grupo. FA. CIM junto a vancomicina presentó un promedio de diámetros de inhibición es muy alto (26mm).. Teniendo en cuenta escala cualitativa de Duraffourd, en la Tabla N°10 muestra efecto inhibitorio in vitro según diámetro de inhibición por grupos de investigación. Correspondiendo a la de ―Sumamente sensible‖ al grupo CIM + vancomicina en un. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 38.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 100% y al grupo de CIM de cocona en un 90%; ―Sensibilidad Medio‖ al grupo vancomicina en un 100% y al grupo de CIM de cocona en un 10%; ―Sensibilidad límite‖ al grupo de etanol de 70º Gay Lussac en un 30% ; y ―Sensibilidad nula‖ al. NT. grupo de etanol de 70º Gay Lussac en un 70 %.. -U. De acuerdo a lo obtenido anteriormente se concluye que el 100% del grupo de. A. investigación CIM + vancomicina fue sumamente sensible a diferencia que el 100%. FA. CU. LT. AD. DE. M. ED. IC. IN. del grupo de vancomicina que presento una sensibilidad media.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 39.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA N°6: DATOS RECOLECTADOS DE LOS HALOS DE INHIBICIÓN POR GRUPOS DE INVESTIGACIÓN DE CONCENTRACION MÍNIMA INHIBITORIA DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. Solanum sessiliflorum. NT. “COCONA”, VANCOMICINA , CIM + VANCOMICINA Y ETANOL DE 70°. -U. GAY LUSSAC. vancomicina. etanol de. cocona. 70º Gay. 24. 2. 26. 3. Lussac. 15. 20. 9. 16. 28. 8. 16. 23. 7. 25. 15. 22. 8. 5. 26. 15. 21. 6. 6. 30. 17. 28. 6. 7. 26. 15. 30. 7. 8. 28. 16. 28. 6. 9. 25. 16. 26. 6. 10. 23. 15. 26. 6. ED. 1. DE. 27. AD LT CU. CIM. IN. placa. 4. FA. Vancomicina. IC. CIM +. M. N° de. A. Diámetro de inhibición. (Duraffourd). FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 40.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 7: RESUMEN DESCRIPTIVO DE LOS HALOS DE INHIBICIÓN POR GRUPOS DE INVESTIGACIÓN DE CONCENTRACION MÍNIMA INHIBITORIA DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. Solanum sessiliflorum. NT. “COCONA” , VANCOMICINA , CIM + VANCOMICINAY ETANOL DE 70°. ni. CIM + Vancomicina. 10. Vancomicina. 10. 15.60. 0.699. 10. 25.20. 3.458. 10. 6.90. 1.101. 40. 18.43. 8.165. 26.00. IC. DE. Etanol de 70º Gay Lussac. Desv. Est. 2.000. ED M. CIM Cocona. AD. Total. Promedio. IN. Grupo de Investigación. A. -U. GAY LUSSAC. FA. CU. LT. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 41.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. GRAFICA N°2: COMPARACIÓN ENTRE EL PROMEDIO DE DIAMENTRO DE INHIBICIÓN (DURAFFOURD)DE LOS GRUPOS DE INVESTIGACIÓN DE. CONCENTRACION. MÍNIMA. INHIBITORIA. DEL. EXTRACTO. NT. ETANÓLICO DE Solanum sessiliflorum “COCONA” , VANCOMICINA ,. FA. CU. LT. AD. DE. M. ED. IC. IN. A. -U. CIM + VANCOMICINA Y ETANOL DE 70° GAY LUSSAC. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 42.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 8: ANÁLISIS DE VARIANZA PARA DE DETERMINAR DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS EN LOS HALOS DE INHIBICIÓN ENTRE. EL. EFECTO. ANTIMICROBIANO. IN. VITRO. TRES Solanum. NT. CONCENTRACIONES DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE. DE. sessiliflorum “COCONA” Y VANCOMICINA SOBRE EL CRECIMIENTO DE. G.L.. 2,440.875. 3. F. P. 813.625. 184.333. 0.000. C. M.. IC. Tratamientos. S. C.. ED. F. V.. IN. A. -U. SARM. 158.900. 36. Total. 2,599.775. 4.414. M. Error. DE. 39. FA. CU. LT. AD. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 43.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA Nº 09: PRUEBA DE DUNCAN PARA DETERMINAR GRUPOS SIGNIFICATIVOS ENTRE EL EFECTO ANTIMICROBIANO IN VITRO DE TRES CONCENTRACIONES DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE Solanum. NT. sessiliflorum “COCONA” Y VANCOMICINA SOBRE EL CRECIMIENTO DE. ni. Grupos para Alfa = 0.05 G2. G3. 10. 6.90. Vancomicina. 10. IC. CIM Cocona. 10. CIM + Vancomicina. ED. Etanol de 70º Gay Lussac. M. IN. G1. A. Grupo de Investigación. -U. SARM. 25.20 26.00. DE. 10. 15.60. FA. CU. LT. AD. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 44.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA N°10:RESUMEN DESCRIPTIVO DEL EFECTO INHIBITORIO IN VITRO. SEGÚN. DIÁMETRO. DE. INHIBICIÓNPOR. GRUPOS. DE. INVESTIGACIÓN DE CONCENTRACION MÍNIMA INHIBITORIA DEL Solanum sessiliflorum “COCONA” ,. NT. EXTRACTO ETANÓLICO DE. A. -U. VANCOMICINA , CIM + VANCOMICINA Y ETANOL DE 70° GAY LUSSAC. IN. Grupo de Investigación. IC. CIM + Sensibilidad. Vancomicina. ni. %. ni. %. ni. %. M. Sensibilidad nula. 0. 0.0. 0. 0.0. 0. 0.0. 7. 70.0. Sensibilidad límite. 0. 0.0. 0. 0.0. 0. 0.0. 3. 30.0. 0.0. 10. 100.0. 1. 10.0. 0. 0.0. 10. 100.0. 0. 0.0. 9. 90.0. 0. 0.0. 10. 100.0. 10. 100.0. 10. 100.0. 10. 100.0. Sensibilidad. AD. 0. DE. %. Lussac. LT. ni. ED. Vancomicina. Etanol de 70º Gay. CIM Cocona. Medio Sumamente. CU. sensible. FA. Total. FUENTE: Datos obtenidos por el grupo investigador. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 45.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. Dado que la resistencia del SARM a diversos antibióticos ha sido emergente en todo. NT. el mundo como uno de los principalespatógenos nosocomiales en los hospitales. Ciertos antibióticos son generalmente elegidos para el tratamiento de infecciones por. -U. SARM. Sin embargo, su uso no sólo sufre de inesperado efectos secundarios sino que. A. también reduce la susceptibilidad a ellos por alteración sitio objetivo, la modificación. IN. de la enzima y el cambio de la permeabilidad para seleccionar resistente cepas.28. IC. Aunque la vancomicina es reconocida como el más eficaz agente contra MRSA, es. ED. estrechamente relacionado con nefrotoxicidad y ototoxicidad. Por lo que ha llevado a. DE. M. los estudios en curso para encontrar alternativas contraSARM.29. Las plantas son una fuente importante para diversos productos farmacéuticos y su útil. AD. actividad farmacológica ha sido ampliamente explotado con sus fitoquímicos.30 El Mana-cubiu (Solanums essiliflorum) es una fruta que pertenece a laFamilia de las. LT. solanáceas. Las propiedades antioxidantes de los compuestos bioactivos presente en. CU. mana-cubiu contribuyen probablemente a los beneficiososefectos en la salud. FA. atribuidos a su consumo.En el fruto se encontraron valores de 0,96mg/g de compuestos fenólicos, 0,07mg/g de flavonoides; entre los que tenemos el ácido 5cafeoilquínico (CQA) principal compuesto fenólico encontrado, representa más del 78% de los compuestos fenólicos totales, junto con otras dos tipos de ácido conjugados de hidroxicinámicos de espermidina. A pesar del bajo contenido de carotenoides y vitamina A, el extracto de carotenoides de mana-cubiu es un potente. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 46.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. secuestrador de radicales peroxilo (ROO•). Los principales carotenoides encontrados son: (all-E) β-caroteno y (all-E) luteína. 16, 31. NT. Muchos estudios han informado de que los compuestos fenólicos en especies y hierbas contribuyeron significativamente a sus propiedades antioxidantes y. -U. farmacéuticas. Algunos estudios afirman que los compuestos fenólicos presentes en. A. las especias y las hierbas también pueden desempeñar un importante papel en sus. IN. efectos antimicrobianos. Los compuesto fenólicos, de acuerdo al lugar y número de. IC. grupos hidroxilo (OH) en el anillo fenólico parece que están relacionado directamente. ED. con la toxicidad frente a microorganismos, de forma que un aumento en la. M. hidroxilación está ligado a un a mayor toxicidad. El mecanismo parece estar. DE. relacionado con la inhibición enzimática por los compuestos oxidados. 32, 33. AD. Estos compuestos han revelado actividad antimicrobiana emergente con potencial contra cepas multirresistentes. Se han realizado estudios de los compuestos fenólicos. LT. y suactividad antimicrobianaresultando que los compuestos con actividad anti-MRSA. CU. presentan grupos OH (donador de protones) y COH3 (aceptor de protones) en las. FA. posiciones para y meta del anillo de benceno.La presencia de ácido carboxílico (COOH); dos grupos hidroxilo (OH) en posiciones para y orto del benceno,y también un anillo de metoxilo (OCH3) en la posición meta parece jugar un papel importante en la estudiada actividad anti-MRSA de los compuestos fenólicos. 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 47.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Otros estudios muestran que la actividad antibacteriana está estrechamente relacionada con la concentración de compuestos fenólicos y por lo tanto a la. NT. capacidad antioxidante de los extractos.32. Los derivados del Ácido cafeoilquínico responsables de secuestrar radicales peroxilo. -U. (ROO•) además de tener una variedad de bioactividad estales como: antioxidante,. A. antibacteriano, anticancerígeno, antihistamínico, y otros efectos. De igual forma los. IN. ácido conjugados de hidroxicinámicos de espermidina que exhiben actividades. IC. biológicas, tales como la diferenciación de células del sistema inmunológicoy la. M. ED. regulación de las reacciones inflamatorias.31, 35. DE. Los flavonoides, compuestos polifenólicos se encuentran ampliamente en diversos tipos de plantas comestibles, son potentes antioxidantes, eliminadores de radicales. AD. libres y quelantes de metales; que inhiben la peroxidación lipídica y exhiben diversas actividades fisiológicas incluyendo anti-inflamatoria, antialérgico, anticancerígeno,. LT. antihipertensivo, actividades antiartríticos y antimicrobianas.La actividad frente a. CU. microorganismo de los flavonoides probablemente se debe a que forman complejos. FA. con las proteínas solubles y extra celulares y con células de la pared bacteriana, de forma similar a quinonas. 33, 36. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 48.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V. . CONCLUSIONES. El promedio de los halos de inhibición dela concentración inhibitoria mínima del extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ y Vancomicina fue de. NT. 26 mm, el cual es el mayor promedio de diámetro de inhibición (duraffourd) de los grupos de investigación y según la escala de Duraffourd fue ―Sumamente. La concentración inhibitoria mínima del extracto etanólico de Solanum. A. . -U. sensible‖ en su totalidad.. . IC. ED. la concentración de 75 % (0.75 mg/dl).. IN. sessiliflorum ―COCONA‖ sobre Staphylococcus aureus resistente a meticilina es. El promedio del halo de inhibición de la Vancomicina sobre el Staphylococcus. . DE. M. aureus resistente a meticilina es 15.6mm. El promedio del halo de inhibición de etanol de 70º GL sobre el Staphylococcus. La suceptibilidad del grupo de extracto etanólico de Solanum sessiliflorum. LT. . AD. aureus resistente a meticilina es 6.9 mm.. CU. ―COCONA‖ a CIM en sinergismo con Vancomicina sobre Staphylococcus aureus. FA. resistente a meticilina se obtuvo que es ―Sumamente sensible‖ en un 100%. . El Promedio de los halos de inhibición fue de 26 mm con el grupo de CIM. (concentración 75 %) + vancomicina y 15.6mm con el grupo de vancomicina, concluyendo que el mayor promedio de diámetro de inhibición (duraffourd) de los grupos de investigación corresponde al el grupo de vancomicina y el extracto etanólico de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖ a CMI (concentración de 75%).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 49.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. . RECOMENDACIONES. Sería recomendable la realización de nuevos trabajos en nuestra localidad con. Realizar estudios comparativos sobre los el efecto antimicrobiano de Solanum. -U. . NT. estudios y muestras más amplios.. sessiliflorum ―COCONA‖ en diferentes lugares para comprobar la variabilidad de este. IN. . A. efecto en nuestra localidad. Realización de nuevos trabajos para determinar con exactitud la concentración. Se recomienda realizar trabajos in vivos para valorar la efectividad y toxicidad. M. . ED. IC. inhibitoria de Solanum sessiliflorum ―COCONA‖.. que podría producir los componentes activos del extracto etanólico de Solanum ―COCONA‖,. obteniendo. DE. sessiliflorum. valores. de. mayor. certeza. que. AD. homogenicen las discrepancias obtenidas in vitro, así como la dosis terapéuticas. FA. CU. LT. para la población humana.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 50.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Boucher H, Talbot G, Bradley J, Edwards J, Gilbert D, Rice L, et al. Bad. NT. bugs, no drugs: No ESKAPE! An Update from de Infectious Diseases Society of America. Clin Infect Dis. 2009; 48: 1-12.. -U. 2. Snydman DR. Clinical implications of multidrug resistance in the intensive. A. care. Scand J Infect Dis. 1991; 78:54-63. IN. 3. Jacoby G, Archer G. New mechanism of bacterial resistance to antimicrobial. Resistencia Bacteriana en la Unidad de Cuidados. ED. 4. Briceño I, Suarez M.. IC. agents. N Engl J Med. 1991; 324:601-612.. M. Intensivos del Hospital Universitario de Los Andes. Medicrit. 2006; 3(2): 30 –. DE. 42.. 5. Pérez J, Isaza G, Acosta S. Actividad antibacteriana de extractos de. AD. Phenaxrugosusy Tabebuiachrysantha. Biosalud. 2007; 6: 59 – 68. 6. García C. Resistencia antibiótica en el Perú y América Latina. Acta Med Per.. LT. 2012; 29(2): 99- 103. CU. 7. Muñoz A. La infección nosocomial y los trabajadores de la salud portadores. FA. de Staphylococcusaureusmeticilo resistente. Rev Semillas. 2008; 10: 59 – 62.. 8. Rodríguez A, Vesga O. Staphylococcusaureus resistente a Vancomicina. Biomédica. 2005; 25(4): 575-587. 9. Velásquez J, Lizaraso F, Wong W, Alfaro C, Véliz J, Salazar J, et al. Vigilancia de la resistencia de Staphylococcusaureus. a la oxacilina-. vanconicina y patrones de corresistencia. Per. Soc. Med. Intern. 2002; 15 (4).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 51.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 10. Alvarado G, Alcalá K, Alvarado P, Champi R. Riesgo de aparición de cepas Staphylococcusaureus resistente a vancomicina en pacientes hospitalarios de un hospital del Perú, 2008. CIMEL. 2010; 15(2): 59-62.. Peruano. Ciencia e Investigación. 2009; 12(1): 41-47.. NT. 11. Ruiz J., Roque M. Actividad antimicrobiana de cuatro plantas del Nor-Oriente. -U. 12. Vega O. Etnobotánica de la amazonía peruana. 1° Edición. Ecuador.. A. Ediciones digitales Abya-Yala; 2001.. IN. 13. Quiroz J., Espinoza M. Evaluación de la actividad citotóxica y antimicrobiana. IC. de glicoalcaloides esteroidales de las hojas de Solanum albidum Dunal y. ED. Solanum oblongifolium Dunal [Tesis]. Lima: Universidad Nacional Mayor de. E.. Solanaceae. and. Convolvulaceae:. secondary. metabolites.. DE. 14. Eich,. M. San Marcos, Facultad de Farmacia y Bioquímica; 2009.. Biosynthesis, chemotaxonomy, biological and economic significance (a. AD. handbook). Springer: Berlin. 2008; p 644. 15. Sayed K, Hamann M, Abd H, Zaghloul A. New Pyrrole Alkaloids from. LT. Solanumsodomaeum. Journal of Natural Products.1998; 61(6): 848-850.. CU. 16. Salick, J. Cocona (Solanum sessiliflorum) production and breeding potential. FA. of the Peach-tomato. In: Wickens H, Day P. New crops for food and industry. USA: Chapman and Hall; 1987. p. 258-264.. 17. Lizcano L, Bakkali F, Ruiz B, Ruiz J. Antioxidant activity and polyphenol content of aqueous extracts from Colombian Amazonian plants with medicinal use. Food Chemistry. 2010; 119 (4): 1566-1570.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 52.

(51) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 18. Efecto in vitro del extracto de Solanum sessiliflorum―Cocona‖ sobre el crecimiento de Helicobacter pylori.Ciencia e Investigación. 2010; 13(1): 3033.. NT. 19. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Seventeenth Informational Supplement. Clinical and Laboratory Standards Institute. -U. (―CLSI‖); 2007. 27 (1): 1- 177.. A. 20. Jackson L., Machado L., Cordiés L. Principios generales de la terapéutica. IN. antimicrobiana. Acta Médica. 1998; 8(1):13-27. IC. 21. Errecalde J. Uso De Antimicrobianos En Animales De Consumo.. ED. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación. 2004.. Disponible. en:. M. Roma,. DE. http://www.fao.org/docrep/007/y5468s/y5468s0g.htm. 22. Duraffourd C, Lapraz J.L. d' Hervicourt. Cuaderno de Fitoterapia Clínica.. AD. Francia: Masson, 1983.. LT. 23. John L. Ingraham, Catherine A. Introducción a la microbiología II. Edición 2.. CU. España. Editorial reverté, S.A; 1998.. FA. 24. Rodríguez E. Manual de Física General y aplicada a la Agricultura y a la Industria. Edición 1. Madrid. Editorial Fundición y Librería de Don Eusebio Aguado; 1858.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/. 53.