Efecto del extracto de Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio, 2014

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. PARASITOLOGÍA. :. Br. Omar Antonio Patiño Hermoza. :. Dr. Luis Alberto Llenque Díaz. DE. AUTOR. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. Efecto del extracto de Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio, 2014. DI. RE. CC. IO. N. ASESOR. TRUJILLO – PERÚ 2015. i. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. Orlando Gonzáles Nieves. ÁT. IC. A. Y. CO. M. RECTOR. RM. Dr. Rubén Vera Véliz. AS. DE. IN FO. VICERECTOR ACADÉMICO. EM. Dr. Weyder Portocarrero Cárdenas. Dr. Steban Ilich Zerpa SECRETARIO GENERAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. VICERECTOR DE INVESTIGACIÓN. ii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. M. Dr. José Mostacero León. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. DECANO. DE. Dr. William Zelada Estraver. Dra. Bertha Soriano Bernilla. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. SECRETARIO. DI. RE. CC. DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. N. A mi asesor, Dr. Luis Alberto Llenque Díaz, por su constante seguimiento. AC IÓ. brindándome su tiempo y apoyo durante el desarrollo del presente trabajo, así como sus. UN IC. conocimientos, sus orientaciones, sus relevantes aportes, sus comentarios, su manera de trabajar, su paciencia y su motivación, que han sido fundamentales para mi formación. CO. M. como investigador y como profesional. A. Y. A mis compañeros y amigos Jorge, Arturo, Jimmy y Christian por brindarme su. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. apoyo en parte del desarrollo de la presente tesis.. iv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. DEDICATORIAS. UN IC. A Dios. Ante todo gracias a Dios, por guiarme, cuidarme y estar conmigo en todos los. A. Y. CO. M. momentos de mi vida y permitirme hacer realidad este sueño anhelado.. ÁT. IC. A mi padre Orlando. RM. Por su sacrificio y esfuerzo al darme una carrera, por sus sabios consejos que. A mi madre Graciela. EM. AS. DE. IN FO. me ayudaron a seguir adelante para que sea perseverante y cumpla con mis ideales.. SI ST. Por creer en mi capacidad como profesional, por su ayuda incondicional, por. A mis hermanos Cynthia, Paul y Gustavo. RE. CC. IO. N. DE. darme esa fuerza, motivación y empuje para lograr mis objetivos.. DI. Les agradezco no solo por haber estado siempre presentes, sino por haber. aportado buenas cosas en mi vida los grandes momentos de felicidad y diversas emociones que siempre me han causado.. v. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores Miembros del jurado: En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y. UN IC. Títulos de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología de la. M. Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra. CO. consideración y criterio el presente trabajo de tesis titulado:. A. Y. “Efecto del extracto de Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus. ÁT. IC. aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio, 2014” con el cual. AS. DE. IN FO. RM. pretendo obtener el Título profesional de Biólogo Microbiólogo.. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Trujillo, Agosto del 2015. RE. _______________________________. DI. Br. Omar Antonio Patiño Hermoza. vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CERTIFICACIÓN DEL ASESOR. N. El que suscribe, docente asesor de la tesis titulada:. UN IC. aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio, 2014”. AC IÓ. “Efecto del extracto de Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus. M. Certifica que la tesis ha sido desarrollada, de acuerdo al reglamento establecido por la. CO. Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en. ÁT. IC. acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas.. A. Y. conformidad con su correspondiente proyecto, y que el informe ha sido redactado. RM. Por lo tanto, autorizo a Omar Antonio Patiño Hermoza continuar con el trámite del. DE. IN FO. reglamento correspondiente.. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Trujillo, Agosto del 2015. RE. __________________________. DI. Dr. Luis Alberto Llenque Díaz ASESOR. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MIEMBROS DEL JURADO. N. Los suscritos, miembros del jurado, declaran que la presente tesis ha sido ejecutada en. AC IÓ. concordancia con las normas de la escuela Académico Profesional de Microbiología y. Y. CO. M. UN IC. Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo.. IC. A. _______________________________________. ÁT. Dra. Icela Rodríguez Haro. EM. AS. DE. IN FO. RM. PRESIDENTE. SI ST. _______________________________________ Dr. Luis Alberto Llenque Díaz. DI. RE. CC. IO. N. DE. SECRETARIO. _______________________________________ Ms. C. Jaime Agreda Gaitán VOCAL. viii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los docentes que suscriben, miembros del jurado Examinador, declaran que el presente. AC IÓ. N. Informe de tesis titulado: “Efecto del extracto de Averrhoa carambola sobre el. UN IC. crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio, 2014”, ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo. ÁT. IC. A. Y. CO. M. APROBADO por UNANIMIDAD.. RM. _______________________________________. IN FO. Dra. Icela Rodríguez Haro. SI ST. EM. AS. DE. PRESIDENTE. Dr. Luis Alberto Llenque Díaz SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. _______________________________________. _______________________________________ Ms. C. Jaime Agreda Gaitán VOCAL. ix. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. ii. Autoridades de la Facultad de Ciencias Biológicas. iii. AC IÓ. Autoridades de la universidad Nacional de Trujillo. N. Pág.. UN IC. Agradecimientos. CO. M. Dedicatorias. v vi. A. Y. Presentación. iv. ÁT. IC. Certificación del Asesor. IN FO. RM. Miembros del Jurado. DE. Aprobación. ix. xii. SI ST. EM. Resumen. viii. x. AS. Índice. vii. 1. OBJETIVOS. 11. N. DE. INTRODUCCIÓN. 12. CC. IO. MATERIAL Y MÉTODOS. 12. B. Procedimiento. 12. DI. RE. A. Material Biológico. 1. Recolección de los frutos. 12. 2. Obtención del extracto de Averrhoa carambola. 12. 3. Preparación de las concentraciones del extracto de Averrhoa carambola. 13. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 4. Reactivación y preparación de inóculos de los cultivos. 13. 5. Determinación del efecto del extracto de Averrhoa carambola. 13 13. 5.2. Colocación del extracto y discos. 14. AC IÓ. N. 5.1. Siembra en placas. 14. UN IC. 5.3. Lectura. M. C. Análisis de resultados. CO. RESULTADOS. 16 24. IC. A. Y. DISCUSIÓN. 15. 29. RM. ÁT. ENUNCIADO RESUMEN. DE. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. IN FO. RECOMENDACIONES. 31 37. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. ANEXOS. 30. xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. N. El objetivo del trabajo de investigación fue determinar el efecto de las diferentes. AC IÓ. concentraciones del extracto del fruto de Averrhoa carambola “carambola”. UN IC. sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en condiciones de laboratorio. Se recolectaron los frutos de Averrhoa carambola. CO. M. del mercado y transportados al laboratorio, donde se realizó un machacado en un. Y. mortero y se filtró en un colador con papel filtro, siendo este el 100% de la. IC. A. concentración. Luego se hicieron diluciones seriadas con agua destilada para. ÁT. obtener las concentraciones de 75% y 50%. La determinación del efecto. RM. antibacteriano se realizó haciendo pocillos de 6 mm de diámetro en el medio de. IN FO. cultivo de cada placa y luego se agregó 30 uL de cada concentración del. DE. extracto, además del antibiótico Control, cefalexina para S. aureus y. AS. ciprofloxacina para P. aeruginosa. Se realizaron 3 repeticiones con cada. EM. bacteria. Finalmente se incubó a 37ºC por 24 horas, y se midió el diámetro. SI ST. promedio de los halos de inhibición del crecimiento bacteriano. De los. DE. resultados se observó que al incrementar la concentración del extracto aumentó. N. el diámetro del halo de inhibición del crecimiento bacteriano; entonces, se. CC. IO. concluye que el extracto del fruto de Averrhoa carambola tiene efecto. DI. RE. inhibitorio significativo sobre el crecimiento de las bacterias S. aureus y P.. aeruginosa a las concentraciones evaluadas, pero que dicho efecto fue menos eficaz que la del Control en cada caso.. xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN El interés de muchos investigadores por combatir las enfermedades trasmitidas. AC IÓ. N. ya sea a través de los alimentos o de manera endógena es muy grande ya que la mayoría de las bacterias que la producen han adquirido cierta resistencia a los. UN IC. antibióticos y esto se reconoce ampliamente como una amenaza para el ejercicio. M. médico en todo el mundo. Esta resistencia que apareció con mayor incidencia en. CO. los ambientes hospitalarios, por ejemplo las reportadas a Klebsiella,. A. Y. Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter, en especial en la Unidad de Cuidados. ÁT. IC. Intensivos, y a Staphylococcus aureus meticilino resistentes y vancomicino. RM. resistentes, se ha ido difundiendo a infecciones bacterianas adquiridas en la. IN FO. comunidad, tales como neumonía, gonorrea e infecciones del tracto urinario,. DE. cada vez más difíciles de tratar con los antibióticos usuales1.. AS. Las plantas, por su biodiversidad y riqueza en metabolitos secundarios,. SI ST. EM. proporcionan una interesante fuente de posibles sustancias activas contra muchas bacterias; por esto, en los últimos años se ha ido desarrollando un. DE. creciente interés en varios centros de investigación de todo el mundo en. IO. N. búsqueda de efectos antibacterianos de extractos de múltiples especies. DI. RE. CC. vegetales1. En este sentido, se han realizado numerosas investigaciones empleando plantas medicinales, en unos casos extracto de canela, en otros el ajo bajo la forma de extracto, aceite o polvo. En Pardo (2010), los investigadores Jones y Tamariz emplearon sangre de grado obtenida del Croton lechleri, logrando un efecto inhibidor sobre Helicobacter pylori. Lengsfeld, utilizó el extracto seco del zumo del Ribes nigrum, con lo que se consiguió bloquear los. 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. receptores de la mucosa gástrica impidiendo con ello la adhesión del H. pylori a la mucosa. Estudios realizados con extracto de cocona puro, utilizado a diversas. N. concentraciones desde 0,1 a 0,5 mL, mostró una gran actividad inhibiendo el. AC IÓ. crecimiento de H. pylori en un 100%, lo que se considera un hallazgo valioso,. UN IC. que amerita la realización de una posterior investigación in vivo; a fin de determinar la efectividad del extracto de cocona en el tratamiento de las. Y. CO. M. infecciones humanas por H. pylori2.. IC. A. Así mismo las propiedades medicinales del ajo, se conocen desde la antigüedad. ÁT. en donde los Chinos y Egipcios ya lo utilizaban alimentando con ajos a los. RM. esclavos que construían las pirámides porque creían que el ajo les aportaba. IN FO. energía, también se empleaba en el proceso de momificación y como moneda, el. DE. naturalista romano Plinio “el viejo” citó numerosos usos terapéuticos del ajo y la. AS. cebolla que eran invocados como deidades por los Egipcios en la toma de. EM. juramentos y en el año 1550 A.C. se dan recetas curativas en el papiro egipcio. SI ST. de Ebbers, el cual incluye 800 fórmulas magistrales de las cuales 22 hacen referencia al ajo, se recomienda contra las infecciones, los tumores,. IO. N. DE. enfermedades cardiacas, dolores de cabeza, mordiscos y parásitos intestinales3, 4.. DI. RE. CC. En los últimos años, se ha demostrado también una acción antibacteriana más directa del arándano relacionado con distintos grupos de constituyentes. Se ha observado in vitro que las tres fracciones constituida por azúcares y ácidos orgánicos, compuestos fenólicos o por las antocianinas, poseen acción antibacteriana frente a Escherichia coli. La acción de los compuestos fenólicos. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. y antocianinas se produce a través de una interacción específica que induce la desintegración localizada de la membrana exterior de la bacteria, y que podría. N. estar relacionada con la quelación de iones metálicos y por la inducción de. AC IÓ. cambios en la expresión de diferentes genes; sin embargo, la actividad de la. UN IC. fracción de azúcares y ácidos orgánicos parece estar relacionada con un efecto. CO. M. de shock osmótico5.. Y. Los protocolos para evaluar los principios activos de las plantas sobre los. IC. A. microbios se ha logrado estandarizar, tal es así que Ardila y cols realizaron. ÁT. ensayos para determinar la actividad antibacteriana de extractos de Allium. RM. sativum, Coriandrum sativum, Eugenia Caryophyllata, Origanum vulgare,. IN FO. Rosmarinus officinalis y Thymus vulgaris frente a Clostridium perfringens (cepa. DE. ATCC: 13124) por el método de Kirby Bauer en agar SPS, utilizando la. AS. vancomicina como control en el cual se observa cómo los extractos hexano-. EM. cloroformo y hexano-acetona de Origanum vulgare y Thymus vulgaris, no. SI ST. produjeron un efecto inhibitorio sobre Clostridium perfringens; en cambio Eugenia caryophyllata y Allium sativum, muestran efectos inhibitorios6. De la. DE. misma manera García y Herrera (2007) determinaron la inhibición de. IO. N. crecimiento de Escherichia coli, Salmonella spp, Staphylococcus aureus,. DI. RE. CC. Pseudomona aeruginosa y Bacillus cereus por extractos acuosos de Allium sativum, Allium fistulosum y Allium cepa en el cual los resultados son más eficientes para Staphylococcus aureus el cual presenta halos de mayor tamaño7.. Por otro lado Arilmi et al determinaron la actividad antimicrobiana de Allium sativum L y Bixa orellana L en el cual los resultados del análisis antimicrobiano. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de ambos extractos, indican formación de halos de inhibición de crecimiento microbiano de Escherichia coli, Enterobacter aeruginosa, Klebsiella sp, Proteus. N. vulgaris, Staphylococcus aureus y Candida albicans cuando los que evaluaron. AC IÓ. frente al extracto hidroalcohólico de Bixa orellana por el método de placas Petri. UN IC. excavadas y de Aspergillus niger sobre placas CCD de silicagel cuando se realizaron el ensayo empleando el extracto de Allium sativum y cuyos resultados. Y. CO. M. validan sus actividades antimicrobianas8.. IC. A. La carambola tiene un buen potencial antimicrobiano y eficacia antioxidante, y. ÁT. los extractos probados de frutos maduros o verdes han demostrado la eficacia. RM. antimicrobiana frente a la mayoría de los microbios examinados. La actividad. IN FO. antimicrobiana y antioxidante de los extractos frente a diferentes bacterias puede. compuestos. fenólicos,. terpenoides,. y. alcaloides. son. AS. antimicrobianos,. DE. deberse a presentar de diferentes fitoquímicos activos. Entre los compuestos. EM. compuestos muy importantes en los efectos antimicrobianos o antioxidantes9. P-. SI ST. anisaldehído y β-sitosterol se aislaron a partir de tetracloruro de carbono y cloroformo porción soluble del extracto de metanol de corteza del tallo de. DE. Averrhoa carambola. Un análisis preliminar fitoquímico de frutas carambola por. IO. N. Thomas et al., indicaron la presencia de saponinas, taninos y flavonoides.. DI. RE. CC. Nordby y Hall informó de que los principales esteroles presentes en los frutos de la carambola son β-sitosterol, campesterol e isofucosterol; también contenía los cuatro principales ácidos grasos vegetales palimitic, oleico, linoleico y ácido linolénico10.. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Los frutos de Averrhoa carambola L. son una muy buena fuente de antioxidantes naturales por la presencia de L-ascórbico ácido, (-). epicatequina y ácido gálico en formas galotanino. También contiene ácido oxálico, ácido. AC IÓ. N. tartárico, ácido cítrico, α-cetoglutarato, succinato y trazas de ácido fumárico.. UN IC. Según Patil et al., el contenido de azúcares reductores, azúcares totales, proteínas solubles, aminoácidos y ácido oxálico aumentó con la maduración de. CO. M. la fruta. Las paredes celulares de la carambola se componen principalmente de. Y. celulosa (60%) y la hemicelulosa (27%), con pectina polímeros que representa. IC. A. sólo el 13%. La porción de hidratos de carbono de la pared celular de la. ÁT. carambola se compone principalmente de celulosa (60%) y la hemicelulosa. RM. (27%), con polímeros de pectina que representa sólo el 13%. Las principales. IN FO. clases de aroma volátiles activos que contribuyen al aroma afrutado fueron los. DE. ésteres, aldehídos, alcoholes, cetonas y los isoprenoides, que contribuir notas. AS. verdes y dulces de aroma de frutas. Frutas Carambola son ricos en fibra. EM. dietética, especialmente insoluble fibra y contiene una alta concentración de. SI ST. insoluble en agua fracción rica en fibra (50,8 g/100 g de pulpa de peso seco), que se predominar fracción de fibra (aproximadamente 80% del total fibra. IO. N. DE. dietética)10.. DI. RE. CC. El género Pseudomonas pertenece a la familia Pseudomonadaceae es muy versátil nutritivamente, y algunas especies pueden utilizar carbohidratos, alcoholes y aminoácidos como fuente de carbón11. Pseudomonas aeruginosa es un bacilo gramnegativo aerobio con un flagelo polar. Cuando se cultiva en medios adecuados produce piocianina, un pigmento azulado no fluorescente.. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Muchas cepas producen también el pigmento verde fluorescente pioverdina. Al igual que otras Pseudomonas fluorescentes, produce catalasa y oxidasa, así. N. como amoniaco a partir de la arginina, y puede utilizar citrato como única fuente. AC IÓ. de carbono. La mayoría de especies del género Pseudomonas, no crecen bajo. UN IC. condiciones ácidas (pH 4.5 o menor). Crecen en agar MacConkey, y como no fermenta lactosa, poseen un metabolismo aeróbico estricto con el oxígeno como. M. aceptor final de electrones, aunque algunos aislados pueden crecer lentamente en. Y. CO. condiciones anaerobias utilizando el nitrato (𝑁𝑂3− ) o la arginina como aceptores. IC. A. finales de electrones. Cuando crecen en medio liquido se puede observar la. ÁT. formación de una película superficial, que refleja la preferencia de este. RM. microorganismo por las condiciones aeróbicas, puede degradar la glucosa. DE. IN FO. oxidativamente y convertir el nitrógeno en nitrito o nitrógeno gas12.. AS. Pseudomonas aeruginosa puede causar diversos tipos de infecciones pero rara. EM. vez causa enfermedades graves en personas sanas sin algún factor. SI ST. predisponente. Coloniza predominantemente partes dañadas del organismo, como quemaduras y heridas quirúrgicas, el aparato respiratorio de personas con. DE. enfermedades subyacentes o las lesiones físicas en los ojos. Desde estos lugares. IO. N. puede invadir el organismo y causar lesiones destructivas o septicemia y. DI. RE. CC. meningitis. Las personas con fibrosis quística o inmunodeprimidas son propensas a la colonización por P. aeruginosa, que puede conducir a infecciones pulmonares progresivas graves. Las foliculitis y las otitis relacionadas con el agua se asocian con ambientes húmedos y cálidos como las piscinas y bañeras de hidromasaje. Muchas cepas son resistentes a diversos antibióticos, lo que. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. puede aumentar su relevancia en el ámbito hospitalario13, 14.. N. Los estafilococos son células esféricas Gram positivas, generalmente dispuestas. AC IÓ. en racimos irregulares parecidos a racimos de uvas, crecen con rapidez sobre. UN IC. muchos tipos de medios. El género Staphylococus contiene al menos 30 especies, tres de importancia clínica son Staphylococcus aureus, Staphylococcus. CO. M. epidermidis y Staphylococcus saprophyticus. El primero es coagulasa-positivo,. Y. que lo diferencia de las otras especies15; generalmente, es agente etiológico de. IC. A. diversas patologías, incluyendo infecciones de piel y tejidos blandos, bacteremia. ÁT. endocarditis, infección del sistema nervioso central (SNC) y del tracto. RM. genitourinario. Por su ubicuidad y en función de los procedimientos médicos y. considerando. su. rol. primordial. en. las. infecciones. DE. epidemiológico,. IN FO. uso de antimicrobianos, se confiere especial énfasis al aislamiento y estudio. EM. AS. nosocomiales16.. SI ST. En la comunidad, las infecciones por S. aureus son a menudo agudas, piogénicas y superficiales, aunque también puede producir, con menor frecuencia,. DE. infecciones profundas como osteomielitis, neumonía y endocarditis aguda. A. IO. N. nivel nosocomial S. aureus es un importante agente de infecciones de herida. DI. RE. CC. quirúrgica, de prótesis y otras. También S. aureus es causa de una serie de infecciones producidas por toxinas como el síndrome del shock tóxico, la intoxicación alimentaria y el síndrome de piel escaldada. Se caracteriza por poseer resistencia para diferentes antimicrobianos, mediante la producción de penicilinasa. Otras cepas comunitarias son resistentes a meticilina u oxacilina, y. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. en cuanto a los aislamientos de origen nosocomial, un elevado porcentaje de los mismos tienen varios determinantes de resistencia y fundamentalmente resistencia a meticilina, asociada a resistencia a aminoglucósidos, macrólidos y. UN IC. AC IÓ. N. quinolonas17.. Los antimicrobianos se definen, como medicamentos que destruyen los. CO. M. microorganismos o impiden su multiplicación o desarrollo y puede ser. Y. producido en forma natural por microorganismos o sintéticamente en el. IC. A. laboratorio y se dividen en antibacterianos, antivirales, antimicóticos,. ÁT. antimicobacterianos, antiparasitarios y antirretrovirales. La primera familia de. RM. medicamentos antibacterianos que aparecieron en la terapéutica son las. IN FO. penicilinas. El mecanismo de acción de las penicilinas consiste en una inhibición. DE. de la síntesis de la pared celular a través de la inhibición de la enzima. EM. AS. transpeptidasa18.. SI ST. Las penicilinas se dividen en diferentes grupos. El primer grupo incluye a las penicilinas G y V. Las penicilinas G más utilizadas son la penicilina G. DE. procainica y la penicilina G benzatinica. Estas tienen un amplio espectro de que. incluye. streptococcus,. enterococos,. listeria,. meningococo,. IO. N. acción. DI. RE. CC. espiroquetas, entre otros. El segundo grupo se conoce como penicilinas penicilinasa-resistente, o isoxazolilpenicilinas, e incluye a la meticilina, oxacilina, cloxacilina, dicloxacilina y nafcilina. Su espectro de acción es, principalmente en cocos Gram (+) productores de β-lactamasas, como el Staphylococcus aureus y el Staphylococcus epidermidis. El tercer grupo se les. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. llama aminopenicilinas, y sus ejemplos clásicos son la ampicilina y la amoxicilina. Tienen un espectro similar a las penicilinas G y V, pero son. E.. coli,. Proteus. mirabilis,. Salmonella,. Shigella,. AC IÓ. enterobacteriaceae,. N. inactivados por la lactamasa β. Además, este grupo amino incluye acción contra. UN IC. Haemophilus influenzae y Helicobacter pylori19, 20.. CO. M. El antibiograma define la actividad in vitro de un antibiótico frente a un. Y. microorganismo determinado y refleja su capacidad para inhibir el crecimiento. IC. A. de una bacteria o población bacteriana20. El antibiograma disco-placa basado en. ÁT. el trabajo de Bauer - Kirby y colaboradores es uno de los métodos que el. RM. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) recomienda. IN FO. para la determinación de la sensibilidad bacteriana a los antimicrobianos. Este. DE. método consiste en depositar, en la superficie de agar de una placa Petri. AS. previamente inoculada con el microorganismo, discos de papel secante. EM. impregnados con los diferentes antibióticos; tan pronto, el disco impregnado de. SI ST. antibiótico se pone en contacto con la superficie húmeda del agar, el filtro absorbe agua y el antibiótico difunde al agar. El antibiótico difunde radialmente. DE. a través del espesor del agar a partir del disco formándose un gradiente de. IO. N. concentración, y transcurridas 18-24 horas de incubación los discos aparecen. DI. RE. CC. rodeados por una zona de inhibición21.. En la actualidad existen enfermedades recurrentes causadas por muchas bacterias constituyendo un problema de salud pública y dentro de las cuales se encuentran Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa; además que. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. cada vez están siendo resistentes a los antibióticos tradicionales por el uso irracional de los mismos, se pretende investigar ¿Cuál es el efecto del extracto. N. del fruto maduro de Averrhoa carambola a concentraciones de 100%, 75% y. AC IÓ. 50% sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa,. CO. M. UN IC. en condiciones de laboratorio?. Y. JUSTIFICACIÓN. IC. A. El fruto maduro de la carambola es consumido por la población como parte de la. inocuas. como. conservantes,. RM. sustancias. ÁT. dieta alimentaria sin generar problemas alimentarios. Por otro lado, el uso de. IN FO. investigaciones a nivel industrial y clínico.. constituye. un. reto. para. las. En este sentido, se pretende. DE. investigar el efecto del extracto del fruto de la carambola sobre el crecimiento de. AS. una población bacteriana de patógenos, como es el caso de Pseudomonas. EM. aeruginosa y S. aureus que podrían estar presente en los alimentos,. SI ST. constituyendo un riesgo latente para los consumidores de alimentos frescos y envasados comerciales. Un resultado positivo, abriría una posibilidad de. DE. encontrar un valor agregado a dicho fruto maduro que puede ser procesado e. IO. N. industrializado para la preparación de ungüentos o cremas para tratar heridas de. DI. RE. CC. animales y humanos; así también, ser utilizado como un conservante natural en los alimentos envasados que se comercializan en los grandes supermercados a nivel local, regional y nacional.. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. OBJETIVOS. N. General:. AC IÓ. 1. Determinar el efecto del extracto del fruto de Averrhoa carambola. UN IC. sobre el crecimiento de bacterias aisladas de S. aureus y P. aeruginosa. CO. M. a las concentraciones de 100%, 75% y 50%.. Y. Específico:. IC. A. 1. Comparar el efecto de las concentraciones 100%, 75% y 50% del. RM. ÁT. extracto del fruto de Averrhoa carambola sobre el crecimiento de S.. IN FO. aureus y P. aeruginosa.. DE. 2. Determinar la significancia o no entre los promedios de los halos de. AS. inhibición obtenidos a 100%, 75% y 50% del extracto del fruto de. EM. Averrhoa carambola sobre el crecimiento de S. aureus y P.. SI ST. aeruginosa, y también con el antibiótico Control.. DI. RE. CC. IO. N. DE. .. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODOS. AC IÓ. N. A. MATERIAL BIOLÓGICO Cultivos de Staphylococcus aureus, proporcionado por el laboratorio de Fisiología. UN IC. y Genética Bacteriana.. CO. M. Cultivos de Pseudomonas aeruginosa, proporcionado por el laboratorio de. Y. Fisiología y Genética Bacteriana.. IC. A. Frutos de Averrhoa carambola procedentes de la provincia de Virú, Región La. IN FO. RM. ÁT. Libertad, y obtenidos del mercado mayorista Palermo, Trujillo, La Libertad.. 1. Recolección de los frutos. DE. B. PROCEDIMIENTO. AS. Los frutos maduros de Averrhoa carambola (Anexo 01) se recolectaron en. SI ST. EM. recipientes plásticos, y transportados al laboratorio. Luego fueron lavados con agua corriente y desinfectados con una solución de hipoclorito de sodio al 0,1%. DE. durante 3 minutos. Posteriormente fueron lavados progresivamente con agua. IO. N. destilada estéril (ADE) 5 veces22. Luego, fueron depositados en recipientes. RE. CC. estériles y tapados hasta su procesamiento posterior.. DI. 2. Obtención del extracto de Averrhoa carambola A los frutos, se les separó las cascaras y las pepas, después se hizo un machacado en un mortero estéril, se filtró en un colador y papel filtro. El filtrado. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. se guardó en frascos ámbar en refrigeración hasta su evaluación, lo que. AC IÓ. 3. Preparación de las concentraciones del extracto de Averrhoa carambola. N. constituyó la concentración 100 %. (Anexo 02). UN IC. A partir del filtrado obtenido anteriormente (100%), se hicieron diluciones seriadas con ADE para obtener las concentraciones de 75% y 50%,. Y. CO. M. respectivamente. (Anexo 02). IC. A. 4. Reactivación y preparación de inóculos de los cultivos. ÁT. A partir de cada cultivo de Staphylococcus aureus, conservado en refrigeración,. RM. se hizo una siembra en agar nutritivo (Anexo 06) y se incubó a 37ºC por 18 h.. IN FO. (Anexo 03 y 04) Luego se recogió varias colonias con un asa bacteriológica y se. DE. preparó una suspensión bacteriana equivalentes al tubo 0.5 de la escala de Mac. AS. Farland en solución salina fisiológica (1.5 x 108 UFC/ml), se agitó manualmente. SI ST. EM. por 30 segundos, lo que constituyó el inóculo23. (Anexo 05). Este mismo procedimiento se siguió para Pseudomonas aeruginosa, pero se. IO. N. DE. sembró en Agar cetrimide. (Anexo 07). DI. RE. CC. 5. Determinación del efecto del extracto de Averrhoa carambola. 5.1. Siembra en placas. Antes de que transcurran 15 minutos de haber ajustado el inóculo, se introdujo un hisopo estéril dentro de la suspensión, se retiró y se hizo presión sobre la pared del tubo por encima del nivel del líquido con la finalidad de eliminar el. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. exceso de inóculo. Seguidamente, se sembró en la superficie de las placas con Agar Mueller-Hinton (Anexo 08) para Staphylococcus aureus y para. N. Pseudomonas aeruginosa.; esto se consiguió deslizando el hisopo por la. AC IÓ. superficie del agar tres veces, rotando la placa, unos 60º cada vez, y pasándola. CO. M. Luego se dejó secar de 5 a 10 minutos en estufa a 37ºC23.. UN IC. por último por la periferia del agar para conseguir una siembra uniforme.. Y. 5.2. Colocación del extracto y discos.. IC. A. Con un sacabocado de vidrio estéril de 6 mm diámetro, se hicieron tres. ÁT. excavaciones en la superficie de agar Mueller-Hinton de la placa Petri; luego se. RM. colocó 30 µl de cada concentración del extracto a evaluar. Luego, con la ayuda. IN FO. de una pinza estéril, se colocó el disco de antibiótico (Control) sobre la. DE. superficie de la placa sembrada con la bacteria, asegurándose un contacto. AS. perfecto con la superficie del agar. Finalmente, las placas se incubaron a 37°C. EM. por 24 h24, 25. (Anexo 05). SI ST. Se utilizó como controles, disco de cefalexina para Staphylococcus aureus y. DE. ciprofloxacina para Pseudomonas aeruginosa.. IO. N. 5.3. Lectura.. bacteriano con una regla milimetrada. (Anexo 09 y 10). DI. RE. CC. Se midió el diámetro de las zonas de completa inhibición del crecimiento. Todo este procedimiento se realizó para cada cultivo bacteriano por tres veces consecutivas.. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. C. ANÁLISIS DE RESULTADOS Los promedios de los halos de inhibición del crecimiento bacteriano obtenido para. N. cada una de las concentraciones ensayadas (Anexo 11, 13 y 15) fueron sometidos al. AC IÓ. análisis estadístico ANAVA para establecer o no la diferencia significativa de los. UN IC. resultados; y la prueba de Tukey y Duncan, para comparar el efecto entre las diferentes concentraciones evaluadas, y del Control con un nivel de significancia de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. 0.05% y con intervalos de confianza de 0 a 95%26. (Anexo 12, 14 y 16). 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. N. En la Fig. 01, se presentan los promedios de los halos neto de inhibición del crecimiento. AC IÓ. de Staphylococcus aureus a las concentraciones ensayadas del extracto Averrhoa. UN IC. carambola y de la cefalexina (Control), observándose que a la concentración del 50 % tuvo un diámetro del halo neto promedio de inhibición de 13 mm, mientras que a la. M. tuvo 16 mm de diámetro del halo neto promedio de. CO. concentración del 100 %. Y. inhibición; en tanto que el Control tuvo un diámetro del halo neto promedio de. RM. ÁT. IC. A. inhibición de 31 mm.. IN FO. En la Tabla Nº 01, se presenta el análisis de varianza (ANAVA), entre los promedios. DE. de los halos de inhibición por el efecto de las concentraciones ensayadas del extracto. AS. Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus, donde se observó. DE. SI ST. EM. que si hay diferencia significativa (α=0.05) en las concentraciones de 50%, 75 y 100%.. N. En la Fig. 02, se presentan los promedios de los halos neto de inhibición del crecimiento. CC. IO. de Pseudomonas aeruginosa a las concentraciones ensayadas del extracto Averrhoa. RE. carambola y del Ciprofloxacina (Control), observándose que a la concentración del 50. DI. % tuvo un diámetro del halo neto promedio de inhibición de 11 mm; mientras que, a la concentración del 100 %. tuvo 15 mm de diámetro del halo neto promedio de. inhibición; en tanto que el Control tuvo un diámetro del halo neto promedio de inhibición de 30 mm.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En la Tabla Nº 02, se presenta el análisis de varianza (ANAVA), entre los promedios de los halos de inhibición por el efecto de las concentraciones ensayadas del extracto Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Pseudomonas aeruginosa, donde se. AC IÓ. N. observa que si hay diferencia significativa (α=0.05) en las concentraciones de 50%, 75 y. CO. M. UN IC. 100%.. Y. En la Fig. 03, se presenta la comparación entre los halos de inhibición del crecimiento. IC. A. de Staphylococcus aureus y de Pseudomonas aeruginosa, observándose que a la. ÁT. concentración del 50 % se obtuvo un diámetro del halo neto promedio de inhibición de. RM. 13 y 11 mm respectivamente; mientras que, a la concentración del 100 % tuvo 16 y 15. AS. DE. IN FO. mm de diámetro del halo neto promedio de inhibición.. EM. En la Tabla Nº 03, se presenta el análisis de varianza (ANAVA), entre los promedios. SI ST. de los halos de inhibición por el efecto de las concentraciones ensayadas del extracto Averrhoa carambola sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas. DE. aeruginosa. Donde se obtuvo que no hay diferencia significativa (α=0.05) en las. IO. N. concentraciones de 50% y 75%, sin embargó en la prueba de Duncan demostró que si. DI. RE. CC. hay diferencia significativa en las concentraciones de 50%, 75 y 100%.. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) N AC IÓ. 35. 31. UN IC. 30. CO. M. 25. Y. 20. 15. IC. A. 16. 14. RM. ÁT. 13. IN FO. 10. 5. DE. Promedio de los diámetros de halos de inhibición (mm). Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 0. AS. 50%. 75%. 100%. CONTROL. SI ST. EM. Concentración del extracto y la Cefalexina (Control). de Staphylococcus aureus a las concentraciones de 50%, 75% y 100% del extracto Averrhoa carambola y del antibiótico Cefalexina (Control).. DI. RE. CC. IO. N. DE. Fig. 01. Promedios de los diámetros de los halos netos de inhibición del crecimiento. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. Tabla Nº 01: Análisis de varianza unidireccional (ANAVA) del efecto de las. AC IÓ. diferentes concentraciones del extracto de los frutos de. UN IC. Averrhoa carambola “carambola” sobre el crecimiento de. N. 50% 75% 100% Control Sig. 50% 75% 100% Control 50% 75% 100% Control Sig.. 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4. 4. 14,2500. ÁT. IC. A. Subconjunto 2 3. 1,000 12,5000. 15,7500 1,000. 1,000. 30,7500 1,000. 14,2500 15,7500 30,7500 12,5000 14,2500 15,7500 1,000. 1,000. 1,000. 30,7500 1,000. DE. SI ST. Duncan. EM. AS. DE. Tukey Ba,b. RM. DHS de Tukeya,b. a,b. 1 12,5000. Y. Concentración. IN FO. Análisis Estadístico. CO. M. Staphylococcus aureus.. DI. RE. CC. IO. N. Se muestran las medias de los grupos de subconjuntos homogéneos. Basadas en las medias observadas. El término de error es la media cuadrática (Error) = 0,174. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 4,000 b. Alfa = 0,05. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) N. 35 30. UN IC. 30. AC IÓ. Promedio de los diámetros de halos de inhibición (mm). Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 20. Y. 15 15. CO. M. 25. A. 13. IC. 11. RM. ÁT. 10. IN FO. 5 0. 75%. 100%. CONTROL. DE. 50%. EM. AS. Concentracion del extracto y la Ciprofloxacina (Control). SI ST. Fig. 02. Promedios de los diámetros de los halos netos de inhibición del crecimiento de Pseudomonas aeruginosa a las concentraciones de 50%,. DE. 75% y 100% del extracto Averrhoa carambola y del antibiótico. DI. RE. CC. IO. N. Ciprofloxacina (Control).. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. Tabla Nº 02: Análisis de varianza unidireccional (ANAVA) del efecto de las. “carambola” sobre el crecimiento de Pseudomonas. UN IC. carambola. AC IÓ. diferentes concentraciones del extracto de los frutos de Averrhoa. AS. Y. A 13,0000. 1,000 11,0000. 15,2500 1,000. 1,000. 30,2500 1,000. 13,0000 15,2500 30,2500 11,0000 13,0000 15,2500 1,000. 1,000. 1,000. 30,2500 1,000. DE. SI ST. Duncan. EM. a,b. 4 4 4 4 4 4 4 4. 4. IC. 4 4 4 4. 1 11,0000. Subconjunto 2 3. ÁT. 50% 75% 100% Control Sig. 50% 75% 100% Control 50% 75% 100% Control Sig.. DE. Tukey Ba,b. N. RM. DHS de Tukeya,b. Concentración. IN FO. Análisis Estadístico. CO. M. aeruginosa.. DI. RE. CC. IO. N. Se muestran las medias de los grupos de subconjuntos homogéneos. Basadas en las medias observadas. El término de error es la media cuadrática (Error) = 0,083. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 4,000 b. Alfa = 0,05.. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) 18 16. UN IC. 15. 14 14. 13. 12. M. 13. CO. 11. Y. 10. IC. A. 8. ÁT. 6. RM. 4 2 0. 75%. 100%. DE. 50%. IN FO. Promedio de halo de inhibición (mm). 16. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. S. aureus. P. aeruginosa. SI ST. EM. AS. Concentración del extracto. DE. Fig. 03. Comparación de promedios de los diámetros de los halos netos de. aeruginosa a las concentraciones de 50%, 75% y 100% del extracto Averrhoa carambola.. DI. RE. CC. IO. N. inhibición del crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. Tabla 03: Análisis de varianza unidireccional (ANAVA) de la comparación. UN IC. del efecto de las diferentes concentraciones del extracto Averrhoa carambola “carambola” sobre el crecimiento de Pseudomonas. CO. M. aeruginosa y Staphylococcus aureus.. Subconjunto 2 3. Y. N. 1 12,0000 13,5000. A. Concentración. 4. IC. Análisis Estadístico. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. 50% 2 75% 2 DHS de 100% 2 15,5000 Tukeya,b Control 2 30,5000 Sig. ,070 1,000 1,000 50% 2 12,0000 75% 2 13,5000 Tukey Ba,b 100% 2 15,5000 Control 2 30,5000 50% 2 12,0000 75% 2 13,5000 a,b Duncan 100% 2 15,5000 Control 2 30,5000 Sig. 1,000 1,000 1,000 1,000 Se muestran las medias de los grupos de subconjuntos homogéneos. Basadas en las medias observadas. El término de error es la media cuadrática (Error) = 0,125. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 2,000 b. Alfa = 0,05.. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. N. En la Fig. 01 se presentan los promedios del halo de inhibición del. AC IÓ. crecimiento de Staphylococcus aureus a las concentraciones del extracto. UN IC. Averrhoa carambola, Observándose que el efecto inhibitorio en las concentraciones de 100%, 75% y 50% presentaron halos de inhibición del. CO. M. crecimiento de la bacteria de 16, 14 y 13 mm, respectivamente. Pero que en. Y. todos los casos, el efecto inhibitorio es reducido respecto a la acción del. IC. A. antibiótico Control Cefalexina que fue de 31 mm. Un resultado similar. ÁT. obtuvo Wakte y Patil27 quienes usando el extracto metanólico de esta fruta,. RM. mediante la técnica de difusión en disco en agar lograron inhibir el. DE. IN FO. crecimiento de S. aureus ATCC6538P.. AS. Por otro lado, Kannan y col28 demostraron que los compuestos puros. EM. aislados de extractos metanólicos de Passiflora mollisima, tuvieron poco. SI ST. efecto contra bacterias Gram positivas, y específicamente un menor efecto. DE. en la inhibición del crecimiento de Staphylococcus aureus, con un halo de. N. inhibición de 10 mm. Este hallazgo es superado por el extracto empleado de. CC. IO. Averrhoa carambola que tuvo un halo de inhibición de 16 mm. Esta. de acuerdo al método de extracción.. DI. RE. diferencia del efecto se debería a la composición de los extractos evaluados. Das y Ahmed29, en su ensayo con el extracto de metanol de Averrhoa carambola para determinar la actividad antibacteriana y citotóxica contra un. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. número de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, demostraron una actividad antibacteriana moderada contra Staphylococcus aureus y que tuvieron un halo de inhibición de 7 mm utilizando discos conteniendo 300. AC IÓ. N. μg del extracto de metanol. Este hallazgo demostraría un efecto reducido en. UN IC. comparación con lo obtenido en este trabajo que fue de 16, 14 y 13 mm del halo de inhibición a las concentraciones de 100%, 75% y 50%,. Y. CO. M. respectivamente.. IC. A. Según Calderón30, trabajando con extractos de especies vegetales de cidrón. ÁT. (Aloysia triphylla), malva (Malva sylvestris), toronjil (Melissa officinalis),. RM. perejil (Petroselinum sativum) y ortiga (Urtica dioica), en n-hexano,. IN FO. diclorometano y metanol para evaluar la actividad antibacteriana frente a. DE. Staphylococcus aureus y otras bacterias, usando la metodología de. AS. perforación de agar en placa a las concentraciones de 250-4000 mg/L, donde. EM. la cantidad de principios activos antibacterianos extraídos en solventes. SI ST. orgánicos ha sido reducido en relación a la presencia de estos en los zumos. DE. naturales.. IO. N. La concentración al 100% del extracto de Averrhoa carambola evaluado. DI. RE. CC. tuvo un mayor efecto (16 mm) sobre S. aureus. En cambio, Lizcano y Vergara31, al evaluar la actividad antimicrobiana de extractos y aceites esenciales de las especies de Valeriana pilosa, Hesperomeles ferruginea, Myrcianthes rhopaloides y Passiflora manicata frente a S. aureus , utilizando el método de difusión en agar (Kyrby-Bauer) con 300 ug del. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. extracto etanólico, encontró que únicamente el extracto de M. rhopaloides tuvo un efecto inhibitorio reducido frente al patógeno, con un promedio del. N. halo de inhibición de 7.4 mm, que según Tavares32, se debería a la existencia. AC IÓ. de mecanismos de resistencia por parte de la bacteria, relacionados con la. UN IC. activación de la síntesis de la pared celular y con hiperproducción de. CO. M. proteínas ligadoras de penicilina.. de. Pseudomonas. aeruginosa. para. cada. una. de. las. IC. A. crecimiento. Y. En la Fig. 02 se presenta los promedios de los halos de inhibición del. ÁT. concentraciones del extracto Averrhoa carambola ensayado, observándose. RM. que el efecto inhibitorio de las concentraciones al 100%, 75% y 50%. IN FO. presentaron un halo de inhibición de 15, 13 y 11 mm, respectivamente; estos. DE. resultados concuerdan con el trabajo de investigación de Trujillo33, donde. AS. sus concentraciones de 20% y 100% formaron halos de inhibición de 9 y 15. EM. mm, respectivamente. Pero en ambos casos, el efecto inhibitorio es reducido. DE. mm.. SI ST. respecto a la acción del antibiótico Control Ciprofloxacina que fue de 33. IO. N. Tobo34, al evaluar la actividad antimicrobiana de las proteínas disueltas en. DI. RE. CC. los extractos acuosos obtenidos a partir de hojas de Pentacalia ledifolia y Pentacalia vaccinioides, contra Pseudomonas y otras bacterias, utilizando el método de difusión en agar con medio Tripticasa de Soya, obtuvo un promedio de halo de inhibición de 2,2 mm. Este hallazgo es muy diferente al resultado obtenido en el presente trabajo, que tuvo como mínimo 11mm de. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. halo de inhibición, esto puede deberse según Cabrera35, a que los péptidos presentes en estos, impidieron la síntesis de pectidoglicano de membrana de. AC IÓ. N. estas bacterias, produciendo así su muerte por lisis celular.. UN IC. En la Fig 03 se presenta el estudio comparativo del efecto del extracto de Averrhoa carambola a las concentraciones de 100%, 75% y 50% sobre. CO. M. Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa, observándose un mayor. Y. efecto inhibitorio sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus en. IC. A. comparación con P. aeruginosa. En este sentido, Friedman y col36, demostró. ÁT. en su investigación que las bacterias Gram negativas son menos sensibles. RM. debido a la estructura de la membrana externa y a la constitución de su. IN FO. pared; porque la membrana externa de las bacterias Gram-negativas,. DE. contienen lipopolisacaridos y no fosfolípidos. Así mismo, según Becerra y. AS. col37, la resistencia bacteriana generalmente aparece por mutaciones y. EM. posterior selección en presencia de antibióticos o mediante la adquisición de. SI ST. elementos móviles, tales como plásmidos, transposones, integrones, etc.. DE. El extracto de Averrhoa carambola empleado en la investigación, mostró. IO. N. efecto inhibitorio sobre S. aureus y P. aeruginosa; este hallazgo se relaciona. DI. RE. CC. parcialmente con el estudio de Abadie y col38, donde comprobó que el extracto de la fruta inhibía el crecimiento de S. aureus pero no de P. aeruginosa, quizás esto se debió principalmente a la manera de obtener el extracto, porque trabajó con metanol y usó la difusión en disco impregnados con los extractos. En cambio, Corzo39, al evaluar la actividad antimicrobiana. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de los extractos etanólicos de los diferentes órganos (frutos y tallos) de Cestrum buxifolium Kunt, frente a E. coli, P. aeruginosa y S. aureus, por la. N. técnica de difusión en disco; comprobó que inhibían el crecimiento de P.. AC IÓ. aeruginosa en una concentración de 30 mg/ml; en tanto que, ninguno de los. UN IC. extractos evaluados presentó inhibición frente S. aureus.. M. Del mismo modo, Cruz y col40, trabajando con extractos etanólicos de las hojas de L.. de difusión en disco y de difusión en pozo. Por el. Y. S. aureus, por el método. CO. camara, S. marianum, B. pilosa y S. molle demostraron que existía efecto inhibitorio contra. IC. A. contrario, no tuvieron efecto inhibitorio sobre E. coli y P. aeruginosa; concluyendo que los. ÁT. extractos etanólicos de las plantas, no tienen actividad sobre bacterias Gram negativas,. RM. posiblemente, porque estas presentan compuestos anfipáticos que operan como bombas de. IN FO. expulsión de diversas sustancias, por lo cual, el antibacteriano es expulsado de manera. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. inmediata, sin alcanzar a cumplir el efecto.. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El extracto del fruto de Averrhoa carambola tuvo efecto inhibitorio sobre el. AC IÓ. -. N. ENUNCIADO RESUMEN. UN IC. crecimiento de S. aureus y P. aeruginosa a las concentraciones de 100%, 75% y. Las concentraciones de 100%, 75% y 50% del extracto del fruto de Averrhoa. Y. -. CO. M. 50%.. IC. A. carambola tienen un mayor efecto significativo de inhibición del crecimiento de. ÁT. S. aureus en comparación con la inhibición del crecimiento de P. aeruginosa, en. IN FO. El extracto del fruto de Averrhoa carambola a las concentraciones de 100%,. DE. -. RM. las condiciones de ensayo.. AS. 75% y 50% tuvo un efecto inhibitorio del crecimiento de S. aureus y P.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. aeruginosa menos eficaz que el antibiótico Control para cada caso.. 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECOMENDACIONES. Determinar la CMI y la CMB del extracto obtenido sobre bacterias patógenas.. -. Determinar la actividad citotoxica del fruto de Averrhoa carambola.. -. Investigar la composición del extracto del fruto de Averrhoa carambola.. -. Ensayar otros métodos de extracción de los principios activos del fruto de. AC IÓ. UN IC. CO. M. Averrhoa carambola.. Determinar el efecto bacteriostático o bactericida del extracto Averrhoa. Y. -. N. -. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. carambola sobre las bacterias patógenas.. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGAFICAS. N. 1. Pérez C, Isaza M, Acosta S. Actividad antimicrobiana de Phenax rugosus y. AC IÓ. Tabeburia chrysantha. BIOSALUD 2007; 6: 59 – 68.. UN IC. 2. Pardo M. Efecto in vitro del extracto de Solanum sessiliflorum “Cocona” sobre el crecimiento de Helicobacter pylori. Facultad de Farmacia y Bioquímica. CO. M. UNMSM. Ciencia e Investigación 2010; 13(1): 30-33.. Y. 3. Tejerina S. Estudio de diferentes fracciones y extractos de Allium sativum sobre. IC. A. la reacción vascular, niveles de colesterol y cultivos celulares. [Tesis doctoral].. ÁT. Madrid: Universidad Complutense de Madrid. 2001.. RM. 4. Hall R, Rocha P, Rodríguez E. Plantas Medicinales. CIMED 2002; 2: 1 – 110.. IN FO. 5. Risco E, Miuélez C, Sánchez E, Rouseaud A. Efecto del arándano americano,. DE. sobre la adherencia de Escherichia coli a células epiteliales de vejiga. Estudio in. AS. vitro y ex vivo. Universidad de Málaga. España. 2010; 63(6): 422-430.. EM. 6. Ardila M, Vargas A, Pérez J, Mejía L. Ensayo preliminar de la actividad. SI ST. antimicrobiana de Allium sativum, Coriandrum sativum, Eugenia caryophyllata,. DE. Origanum vulgare, Rosmarinus officinalis y Thymus vulgaris frente a. N. Clostridium perfringes. BIOSALUD. 2009; 8: 47 – 45.. CC. IO. 7. García R, Herrera A. Evaluación de la inhibición de cinco cepas bacterianas por. preliminar in vitro. BISTUA. 2007; 5(2): 68 – 79.. DI. RE. extractos acuosos de Allium sativum. Allium fistulosum y Allium cepa: Estudio. 8. Arilmí G, Inchaustegui R, Quispe F. Actividad Antimicrobiana de Allium sativum L y Bixa orellana L. REDALYC. 2003; 10(2): 61 – 71.. 31. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 9. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research. Antimicrobial and Antioxidant Activities of Green and Ripe Fruits of Averrhoa carambola Linn. And Zizyphus mauritiana. Department of Botany. Asian J Pharm Clin Res.. AC IÓ. N. 2012; 5(3): 102 – 105.. UN IC. 10. Patil A, Koli S, Patil D, phatak A. A Comprehensive review of An Important medicinal plant – Averrhoa carambola L. A Comprehensive Review of An. CO. M. Important Medicinal Plant. India. 2012; 2(2): 13 – 17.. Y. 11. Ruiz L. Tesis Pseudomona auriginosa: Aportación al conocimiento de su. IC. A. estructura y al de los mecanismos que contribuyen a su resistencia a los. ÁT. antimicrobianos. Universidad de Barcelona. Barcelona. 2007.. RM. 12. Bartram J, Cotruvo J, Exner M, Fricker C, Glasmacher A. Heterotrophic plate. IN FO. counts and drinking-water safety: the significance of HPCs for water quality and. DE. human health. Serie de la OMS Emerging Issues in Water and Infectious. AS. Disease. Londres (Reino Unido), IWA Publishing. 2003.. EM. 13. De Victorica J, Galván M. Pseudomonas aeruginosa as an indicator of health. 43:49–52.. SI ST. risk in water for human consumption. Water Science and Technology. 2001;. DE. 14. Hardalo C, Edberg S. Pseudomonas aeruginosa: Assessment of risk from. IO. N. drinking-water. Critical Reviews in Microbiology. 1997; 23:47–75.. Adelberg. México. Editorial Manual moderno. 2005; 219.. DI. RE. CC. 15. Brooks G, Butel J, Morse S. Microbiología medica de Jwetz, Melnick y. 16. Gil M. Staphylococus aureus: Microbiologia y aspectos moleculares de la resistencia a la meticilina. Rev Chil Infect. 2000; 17(2): 145-152.. 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 17. Seija V. Temas de bacteriología. y virología médica. McGraw-Hill. Interamericana; 2002: 257-271.. N. 18. Girón W. Antimicrobianos. Universidad Nacional Autónoma de Honduras. Rev.. AC IÓ. Fac. Cienc. Méd. 2008: 70-77.. UN IC. 19. García J, Cantón R, García E, Gómez M, Martínez L, Rodríguez-Avial C, Vila J. Métodos básicos para el estudio de la sensibilidad a los antimicrobianos.. CO. M. Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad. Y. Española de Enfermedades. Infecciosas y Microbiología Clínica. 2000.. IC. A. 20. Prat S. Prueba de susceptibilidad antimicrobiana por difusión en agar. Ministerio. ÁT. de Salud. Instituto de Salud Pública. Sección Bacteriología. Gobierno de Chile.. RM. 2012.. Disponible. en. IN FO. http://www.ispch.cl/lab_sal/doc/manual_susceptibilidad.pdf. Citado 10/07/13.. DE. 21. NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS. AS. (NCCLS). Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria. EM. that grow aerobically. Approved Standard M7-A5. NCCLS, Wayne, PA. 2000.. SI ST. 22. Cárdenas C, Paredes R, Velarde Q. Efecto del extracto hidroalcohólico de tallo e inflorescencia de Brassica oleracea var. Itálica sobre el crecimiento “in vitro” de. DE. Staphylococus aureus coagulasa positivo. Universidad Nacional de Trujillo.. IO. N. Escuela de Microbiología y Parasitología. 2009.. DI. RE. CC. 23. Escobar L, Chávez M. Efecto in vitro de diferentes concentraciones de extracto alcohólico de Caelespinia spinosa (Molina) Kuntze, sobre la viabilidad de Corynebacterium diphtheriae. 2008.. 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 24. Cárdenas D, Asencios D. Tesis: Evaluación de un método de ensayo microbiológico para determinar la potencia antibiótica de tirosina. Universidad. N. Nacional Mayor de San Marcos. Perú. 2008.. AC IÓ. 25. Pineda C. Efecto antimicrobiano de Psisium guajava L. contra Salmonella. UN IC. typhymurium en Cavia porcellus L. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Perú. 2013.. CO. M. 26. Boqué R, Marote A. El análisis de varianza. UOC. 2011; 14:1-23.. Y. 27. Wakte, S, Patil, D. Antimicrobial and Antioxidant Activity of Averrhoa. IC. A. carambola L. Fruit at Various Stages of Ripening. 2011.. ÁT. 28. Kannan, S.; Parimala Devi, B.; &y Jayakar, B. In-vitro antibacterial activity of. RM. variuos extracts on the leaves of Passiflora mollisima. J. Chem. Pharmac. Res.. IN FO. 2010. 5(2):225-228.. DE. 29. Biswa Nath Das and Muniruddin Ahmed. Antibacterial and Cytotoxic Activities. AS. of the Fruit Extract of Averrhoa carambola. International Research Journal of. EM. Pharmaceuticals. 2012. 2(3):58-61.. SI ST. 30. Calderón J. Caracterización fitoquímica, actividad antibacteriana y antioxidante de extractos de plantas medicinales utilizadas en Pereira y Santa Rosa de Cabal.. DE. Universidad Tecnológica de Pereira. 2011. IO. N. 31. Lizcano A, Vergara J. Tesis: Evaluación de la actividad antimicrobiana de los. DI. RE. CC. extractos etanólicos y/o aceites esenciales de las especies vegetales Valeriana pilosa, Hesperomeles ferruginea, Myrcianthes rhopaloides y Passiflora manicata frente a microorganismos patógenos y fitopatógenos. Pontificia Universidad Javeriana. Colombia. 2008.. 34. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..