Nombre: hrena Villarreal Rodas
Matrícula: 85242795
Licenciatura: Hidrobiología, Unidad Iztapalapa
Divisi6n Ciencias Biológicas y de la Salud. TelCfono: 8-40-75-2 1 6 6- 12-02-42
Horas a la semana: 20
Título: Producción de tilapia Oreochromis .niloticus variedad roja, con 17 alfa metiltestosterona y epitestosterona.
Asesor: Dr. José Luis Arredondo Figueroa.
Lugar:
Planta
Experimental de Producción .Acuícola Fecha de inicio: 26 de Agosto 1996.Fecha de término: 26 de Febrero 1997.
A S E S O R A L U M N O
UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA
DIVISION
DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Y DE LA SALUD
DCBS.078/97DIRECTOR DE LA DIVISION DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD
P r e s e n t e .
Por este conducto nos permitimos r n a n l : nuestra aprobación al Servicio Social que se cita a
continuación, y constatamos el aprovec :nto, dedicación e interés mostrado por el egresado para concluir satisfactoriamente este con:; k . I ~ m o institucional.
TITULO: "Producciónn de tilapia Oreochromis niloticus variedad roja
revertida, con 17 alfa melitestosterona y epitestosterona". ALUMNO: LORENA VILLARREAL RODAS
MATRICULA: 85242795
LICENCIATURA: HIDROBIOLOGIA.
PERIODO: Del 26 de agosto de 1996 al 26 de febrero de 1997.
Se extiende la presente para los fines q' ateresado convengan, en la ciudad de México, D.F., a
los diecinueve días del mes de marzo d i .ovecientos noventa y ocho.
A i t a m e n t e , A;.AOR INTERNO
Rofesor T' ar "C" de T.C.
Unidad lztapala a
Introducción. Antecedentes. Objetivo general.
Metodología.
Lugar de realizacih. Actividades realizadas.
Objetivos y metas alcanzados.
Resultados.
Conclusiones.
1
2
4
4
4
5
6 6
6
7 Recomendaciones.
Literatura citada.
Resurneo.
8
8
AGRADECIMIENTOS
Agradezco el apoyo brindado por el M. en C. Armando Femeira NUao, para la identificación gonádica de los
Produccibn de tilapia Oreochromis nilotiws variedad roja revertida, am 17 rlfa rnetiltestostma y cpitestostemaa
INTRODUCCION.
Los miembros del género Oreochromis (familia Cichlidae) han sido una
importante fuente de alimento para el hombre, al menos desde que éste
empez6 a escribir su historia. Desde el
pwfto
de
vista de la nutrición humana,la tilapia ya estaba firmemente
establecida como los peces más
importantes del mundo desde
prindpios del siglo X X . Pero en este
siglo,
debido al dnfasis cada vez mayor en el cultivo piscicola, y a las ventajas del transporte moderno, la tilapia se havuelto aún más valiosa para el hombre (Bardach , et a/. , 1990).
De acuerdo con su dieta entre los
peces
existen especies típicamente herbívoras, otras son zooplanctófagas y otras más, omnívoras. Lasdiferencias en sus hábitos alimenticios permiten la existencia simultánea de varias especies en un mismo ambiente sin que compitan entre si (Torres,
1991).
Oesde su introducaón a México en 1964, la tilapia ha representado una fuente de alimentos y empleos
constituyendo una actividad económica importante. Esto se refleja en las estadisticas pesqueras, al registrarse
una producción aproximada de 70,000
.
toneladas anuales, ocupando el primer lugar en las pesquerías de aguasdukes (Arredondo et al., 1994).
Las
especies introducidas en MBxico pertenecen alos
géneros Tilapia y oreochromis. Han sido dispersadas profusamente y con gran éxito en casi todoslos
lugares de la República Mexicana donde las condiciones dim&cas son adecuadas. En algunaspresas del pais, tales como Infiernillo, en Michoacdn y Guerrero y en
Temascal, Oaxaca existen importantes pesquerías de tilapia, que reportan
excelentes rendimientos (Torres, 1991).
El numero de unidades de producción que manejan esta especie se ha incrementado significativamente en
los
últimois años, teniendo reportes de 322 unidades distribuidas en todo elPais
(Olmos y Tepda, 1990). Esto ha venido ocurriendo gracias a lademanda que hay en algunas zonas, donde! existe un hábito arraigado de amsumo de tilapia, generalmente en estado fresco (Arredondo et al., 1994).
Las ítilapias son peces de rápido crecimiento, sumamente fértiles,
adaptables a condiciones ambientales muy diversas, y de gran resistencia al
manejo. Aunque pueden rebasar los
30 cm de longitud, alcanzan la madurez sexual a
los
1 1 ó 12c m ;
esta precocidad, en condiciones de cultivo, puede acarrear fenómenos tales como el enanismo (Torres, 1991).Dado que
las
tilapias tienen un alto indice reproductivo, se han utilizado diversas técnicas para el control de reproducción, entre ellas se puede destacar la hibridación, cuyos primeros intentos de producir tilapias de unsólo
sexo, fueron los realizados por Hidding (1960); continuando con esta linea de investigación Hulata et al.,
(1993),
quienes han reportado especies que al cruzarse producen 100% de machos (Herniindez, 1988). Sin embargo, el problema fundamental de esta técnica radica en la obtención de líneas puras que aseguren la producción masiva de poblacSones 100% machos.El cultivo de poblaciones 100% machos es la tBcnica más utilizada en
el
ámbito mundial.Los
intentos deProducci6n de tilapia Oreochromis nilotias variedad roja revertida, m 17 alfa metiltestosterona y epitestosterona
producir poblaciones 100% machos de tilapia, se ha intensificado debido a
que, a diferencia de las hembras, ellos continúan creciendo durante los períodos de reproducción. Sin
embargo, los machos tienen una
desventaja: ya sea que haya o no hembras presentes, ellos construyen sus nidos. El sitio favorito para la
construcción de estos nidos es la base del borde del estanque, y esta
adividad que es innata de estos
organismos pueden, a largo plazo socavar el borde de
la
base (Barda&,et
a/. , 1990).Uno de
los
problemas más frecuentes de los cultivos de tilapia en México, es la sobrepoblación delos
estanques debido a la reproducción precoz,inherente de este tipo de cíclidos, lo que ocasiona verdaderos problemas
que afectan la rentabilidad de los
cultivos
comerciales. Delos
métodos más usados para ejercer control de la reproducción, ha sido la inversión sexual por medio del uso deesteroides, que también ha servido
para producir crías con un elevado porcentaje de machos.
Para solucionar el problema de reproducción precoz que se presenta en la tilapia se han hecho numerosos trabajos experimentales, muchos de
ellos apoyados por la FAO, derivándose de ellos diversos métodos tales como; selección manual, uso de depredadores, hibridacih, eliminacih de capacidad reproductora o
esterilización e inversión sexual
mediante el uso de esteroides (Hemdndez, 1988).
Siendo la tilapia un organismo de fácil reproduccih, se considera de importancia el realizar trabajos de
reversidn sexual ya que para fines de
producción, la inversión sexual a
machos es conveniente, debido a que tienen un crecimiento más acelerado que las hembras, además de que es una buena manera de controlar
la
sobrepoblación en los cultivos. Tomando en cuenta que el costo del tratamiento es bajo, fácil de aplicar ylos
resultados se obtienenen
un tiempo relativamente corto. Es importante también considerar que a pesar de que la inversión sexual entilapia ha sido muy estudiada,
no
se han obtenido resultado del loo%por ,lo
que se cree conveniente que la investigación continúe, para seguirgenerando información que
perfeccione los conocimientos acumulados a la fecha, con la finalidad de obtener mejores resultados. El presente trabajo forma parte de un proyecto para mantener un genoma de tilapia en la Planta Experimental de Producción Acuícola.
ANTECEDENTES.
Los primeros intentos de inversión
sexual en peces tuvieron lugar en los años treinta, (Hernández, 1988). La inversi6n sexual ha sido lograda,
gracias al conocimiento preciso de
los
esteroides sexuales tanto andrógenos, como estrógenos, asi comode
los
mecanismos de determinación sexual (gonocorismo y hermafroditismo) de las especies que han servido corno objeto de experimentación. Lostrabajos realizados con tilapia han sido hechos con los generos Tilapia y
Oreochromis, siendo los objetivos fundamentales lograr una producción elevada de algunas especies en las
que se ha logrado la inversión, para compararlas con el desarrollo gonádico normal, y conocer
los
tiempos mds adecuados de aplicación del esteroide, lo cual se ha logrado por medio deProducción de tilapia Oreochromis niloticur vari'ebd roja revertida, coa 17 dfa wtiltestosterona y e p i t e s t o s t e r o n a
estudios histológicos (Nakamum y Takahashi, 1973). Trabajos sobre producción
de
individuos invertidos, son reportados principalmente por (Sheltonet
al., , 1981), Guerrero (1975) y Buddle (1984) (citados por HemAndez, 1988).Cabe sefklar que las mayores aportaciones hechas sobre inversión sexual en tilapia han sido
las
de Shelton et al., (1 981) y Guerrero (1975), que han generado t h i c a s especiales de preparación de g M a s de tilapias muy jóvenes para tener resultados de inversión entres
ocuatro
meses.
Así mismo, Nakamura (1973) han descrito el desarrollo gonádico de hembras y machos no tratados y tratados, como deorganismos intersexuales, que son aqubllos en
los
que no seda
la inversión sexual completamente, que presentan caracteres sexuales secundarios mal definidos yen
cuya gónada presentan tejido ovárico y testicular. Estos estudios se han realizado en especies como Oreochmmis mossambicus, O. niloticus yl.
zillii (Hernández, 1988).Un procedimiento común para obtener tilapias machos es la separación manual de los sexos por medio del examen visual
de
la
papila urogenital-
delos
peces juveniles. El aprendizaje del metodo es una tbcnica simple parala mayoria de los productores, pero requiere de
mano
de obra en forma intensiva y resulta en la subutilización de la mitad de los peces examinados (las hembras). Sin embargo hademostrado ser una técnica económicamente rentable en muchos paises o circunstancias.donde la mano
de obra es barata.
El
metodo de reversi6n sexual, es mdscomplicado que el anterior pero resulta más eficiente, dado que todos
los
peces pueden ser sembrados sinnecesidad de realizar inspecciones individuales (Popma, sin aiio). La
administraaón oral de andrógenos
(etiniltestosterona y metiltestosterm) para la producción de crías machos en Oreochomis aureus, a travhs
de
rever&
sexual
es efectiva paragrandes escalas de aplicacih. Esto considerando las siguientes ventajas:
1) la reproducción en estanques es minimizada o eliminada, 2)
las
hembras
no
se pierden como en el método de monocultivo de machos, 3) se obtiene una alta produccidn de peces, debido al rápido crecimiento de machos; 4) altas densidades de stocks de peces tratados pueden ser utilizados y 5) el método no eslaborioso ni costoso (Guerrero; 1975).
La etiniltestosterona Y
metiitestosterona son ampliamente
usadas en la medicina humana. Con su amplio uso terapéutico, no se han detectado efectos cancerígenos.
Guerrero, 1975, cree que
los
metabolitos de dichos andrógenos no son dañinos para el hombre. Conlos
bajos niveles de dosis utilizados, y el relativamente largo intentalo entre el tratamiento y el tiempo de la cosecha los peces tratados con andrógenossint6ticos presumiblemente son
seguros para el consumo humano, sin embargo, el uso de algunas drogas en alimento para peces puede requerir de la aprabacih de agencias Estatales o Federales.
que la hormona se distribuye
ampliamente en el cuerpo entre las primeras 8 a 12
horas
de consumo.
Posteriormente se concentra en el tejido visceral y se elimina totalmente despubsde 100 horas de terminar la
aplicación.Aunque
se tiene conocimiento de queel
efecto de la hormona termina alfinalizar el tratamiento, y que,
no
hay residuos mas quelos
niveles normales que el propio pezproduce.
Para cuando se realiza la comerdaliraci6n, ochomeses
despues nohay
residuos m& que la hormonanormal
de lospeces. Actualmente se está tmbajando
en la legalización de la hormona para su uso en la reversión
de
peces a escala comercial para m s u m o humano y se está haciendo un gran esfuerzo multidisciplinario ye c o n h i c o
con la participaaón de la iniciativa privada, la American Tilapia
Association, la FDA (Food and Drug Administration) y la Universidad de
Auburn en Alabama, USA. Es
importante lograr esta
meta,
ya que tiene una gran importancia a escala industrial dado quelos
beneficios de la reversión son considerables. Se tienen datos de que en granjas del Sur de California donde se utiliza este mbtodo, se producen alrededor de 6,080,000 libras de tilapia al añoa (Delgadillo, 1996).
OBxTNOs GENERALES Y
EsPEd~.
Lograr~lrrapmdudóneleMdadeaiay
E * & W t X e p O b k U b ~ e l ~ & l a
METODOLOGIA
Se utilizaron ejemplares disponibles de la fínea Oreochmmis nibticus variedad
roja en la Planta Experimental de
Producción Acuicola de la UAM Iztapalapa. Se tomaron datos
merísticos y se seleccionaron a
los
repraductores (dos hembras por cada macho),los
cuales se colocaron de manera separada; en un estanque a las hembras y alos
machos en jaulas para que se adimataran. Una vez que se estimo que la aclimatación estaba terminada, se juntaron las parejas de la especie a estudiar en proporci6n de2
hembras por cada macho,a
una temperatura de 27 O C , alimenthndolos dos vecesal
día (al 1% de su pesototal).
Diez dias después se revisaron las
hembras para observar la presencia de huevos y éxtraelos (manipulando a las hembras
con
mucho cuidado, paraevitar que se estresaran y expulsaran
los
huevedlos, complicando la colecta de los mismos). Cuando se obtuvieronlos
huevos se colocaron en incubadoras a 28 O C y 5 m@ de oxígeno disuelto, durante3
días, y después se trasladaron a las jaulas nodrizas.Se inici6
el
suministro del alimento previamente preparadocon
la
hormona (40 mg de
ametiltestmteronakg de alimento). El tratamiento se aplicó durante 30 dias.
El suministro del alimento con hormona se hizo cada tres horas a partir de las nueve de la mañana hasta las siete
de la noche, alimentando
alos peces a saciedad, dej6ndolos comer duran cinco minutos
aproximadamente, retirando
el
excedente de alimento, ya que el efecto, dela
hormona dura poco en el agua, y ya no causa el efecto que se requiere y también, para evitar lamicroorganismos que pudieran causar d a b a
los
organismos.Posterior al tratamiento, se tomó una muestra representativa al azar y se realizaron las pruebas
de
tinción g d d i c a necesarias para establecer el porcentaje de crias revertidas.A
lo
largo del experimento se registraron algunos parámetros talescomo
el
oxígeno
disuelto,la
temperatura y el pH, así como el peso (9) y la talla (rnm), al inicio y al final del experimento.La preparación del alimento se llevó a cabo de la siguiente manera:
l.- Se elaborb una solución stock,
conteniendo
250
m1 de alcohol puro de caña y750
mi de agua, en el que se diluyeron 40 miligramos de 17%- metiltestosterona.2.-
La solucibn anterior (stock) seagreg6
al
alimento balanceado para M aen forma de harina con el 45% de proteína, mezclándolo y batiéndolo durante 20 minutos aproximadamente.Se dej6 evaporar el alcohol al aire libre taphdolo de
la
l u z directa del sol hasta que quedó completamente seco. Una vez seco se paso por un tamiz del No. 20 o 850 mimas.3. Para la alimentaa6n se utilizaron jaulas nodrizas de malla mosquitero.
4.
La
metodología seguida paraidentificaubn
de
sexo fue por medio de la compresi6n de las gónadas con el tinte de carmín y &cid0 acético (acetato carmín).5. Se aplic6 el tinte para las g6nadas
en
peces
am tallasde
45 milimetrosen adelante. Los
peces
tomados
alazar se abrieron ventralmente y se colocaron en frascos con formalina al 5% por espacio de cuatro horas.
6. Después del tiempo establecido se extrajeron las gónadas de cada
pez,
se colocan en un portaobjeto aplicando I 1o 2 gatas de acetato carmín y se comprimieron con otro portaobjeto para poder observar bien los espermatocitos en el
caso
de los machos, olos
ovocitosen
las hembras.7. Una vez teñidas las gónadas se observaron bajo el microscopio a
aumentos de 1 SX, 40X y lOOX, dependiendo de la complejidad de la observalci6n, identificando para las
hembras
los
ovocitos en forma deaglomeraciones circulares Y espenatocitos en forma de una vaina alargada, sobre la base de estas
observaciones se sacó el porcentaje de machos y hembras, lo cual nos
llevó a considerar el porcentaje de la reversión obtenida en
el
experimento.LUGAR DE REALIZACION.
El trabajo se realizó en la Planta
Experimental de Producción Acuicola, ubicada dentro de las instalaciones de Universidad Aut6noma Metropolitana, unidad lztapalapa utilizando
los
estanques circulares E-5 y E-6 (de 4.3 metros cúbicos de capacidad máxima) para los reproductores, manteniendo la temperatura del agua a un promedio de28
OC, y con una concentración de oxígeno disuelto 5 mg/l.Para el resto del experimento se
utilizaron tres peceras de 100 litros cada una, a las cuales se les acondicionó un termostato para
Produocih de tilapia Ore&& niloricus variedad mja revatida, coo 17 rltr metiltestostaooa y epitestostawa
en el agua.
ACTIVIDADES REALRADAS.
El tiempo de d u r a a h del trabajo fue 8 meses aproximadamente y se llevó a
cabo
en las siguientes etapas:a)
Registro de datos merísticosde
los organismos de la especie a
estudiar.
b) Seleccibn de
los
ejemplares para la reproduccihc) Aclimatación de
los
organismos. d) Colocación por familia(2
hembras:l macho).e) Revisión de hembras.
9
Extracción de huevecillos y colocación de los mismos en incubadoras.g) Suministro de alimento durante
30
díash) Conteo d d porcentaje de machos obtenidos a trav6.s
de
compresión gonadica y la aplicaci6n del colorante de aceto carmín.OBJETIVOS
Y
METASALCANZADAS.
Principalmente se
logró
la reproducci6n de la tilapia Omochmmis nilotkus, O. mossarnbicus y Rocky mountain, así como mantener alos
organismos en condiciones adecuadas parano
alterar su comportamiento, seprocuró
la
conservación del 100% dehuevos obtenidos, y la cantidad perdida fue baja, la alimentación de los alevines fue aceptada sin problema por los alevines y el crecimiento observado fue
el
esperado, así como el número de organismos revertidos. Esimportante adarar que cuando se
registr6 el proyecto de Servicio Social, se consider6 trabajar con
la
especie Oreocshmmis rnossambicus, pero debido a problemas de caráctert h i c o se utili6 la tilapia O. niloticus variedad roja.
RESULTADOS.
Los resultados de crecimiento y supervivencia obtenidos con
los
dos tratamientos y la comparación con un testigo, se observan en la tabla 1, indicando en cadacaso la ganancia
total en peso y talla, así comoel
porcentaje de machos y su supervivencia. Los mejores resultados se presentaron con
el
tratamiento con17-alfa-metiltestosterona.
La tabla
3
muestran quelos
parámetros físicos y químicos manejados durante el experimento, no afectan
los
porcentajes de organismos revertidos, ya que para ambostratamientos se presentaron
T~tamiento 17 alfa metiltestosterana Epitestosterona Testigo
0.0 0.01 12 1 0.0 14
".
_.
135 135 10.1
86.0
150
90 90
10
90 " .. -.- . ". . . 7 2 7.1 10.1
620
1 5 0
80
75
25
75
62 6.1
102 45.0
137
22 45 55
45
supervivencia
(?A)
60 56 2717-alh"etiltestosterona Epitestosterona
Testigo
T-(T) 28 275 272
0
oxrsew(mg/T) 5 2 4 9 4 5
pH 7.8 75 75
CONCLUSION.
De acuerdo a los resultados obtenidos
se puede decir que el andr6geno 17- alfa-metiltestosterona causd el efecto esperado y adernas se cornprob6 la utilidad del alimento para trucha (presentaah harina) con 45% de
contmklo proteico, ya que los
organismos lo aceptan sin ningún problema, logrando un buen crecimiento.
DISCUSION.
La evaluaci6n de los efectos de hormona 17-alfa-rnetiltestosterona se
muestra en la tabla No. 1, donde podemos observar que se registró una diferenda importante en el número de
m a c h o s , lo cual indica que se pueden utirizar otros andr&enos, pero la
para la reversión sexual, y además favorece al crecimiento, supervivencia y la ganancia en peso de los organismos.
De alcuerdo a los datos de la tabla
No.
2,
se puede ver que las diferencias en los parámetros fisicoquímicos varían mínimamente, por lo que podemos decir que estos elementos no afectan los resultados obtenidos en los organismos revertidos.Los porcentajes de supervivencia obtenido fueron del 60 %, 56% y 27.2%, para 17-alfa-rnetiltestosterona,
epitestosterona Y testigo
respectivamente, esto debido
seguramente a que las condiciones
no
fueron las bptimas, lo que nos permite considerar estos puntos para trabajos futuros.
efectividad de la 17-alfa"T es mayor
PIoduccibn de tilapia Oremhronai rrilodcvs variedad roja revertida, COIL 17 alfa metiltwtosterona y epitestosterona
x11 RECOMENDACIONES.
Hacer más -pruebas con diferentes dosis de
hormona
y diferentes contenidos proteicos, para de esta manera tener m4s opciones para realizar trabajos de reversión sexual.Probar con otros tipos de andrógenos
y observar
el
desarrollo
hasta etapa adulta para verificar si los organismos revertidos se reproducen ono.
Es de importancia también el considerar que el lugar donde se lleve a cabo el experimento sea un sitio seguro donde las condidones no sean
muy variables.
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P.
NOMBRE: LORENA VILLARREAL KODAS
MATRICZRA:
85242795REGISTRO
No.
H.0 1 1 .%FEcHADEE€aREGA: MARZODE 1998.
