UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
ESTUDIO EPIDEMIOLÓGICO DE CUATRO ENFERMEDADES QUE PODRÍAN AFECTAR LA REPRODUCCIÓN DEL SEMENTAL BOVINO DE LA
ZONA CENTRO DE VERACRUZ
TRABAJO RECEPCIONAL EN LA MODALIDAD DE:
TESIS
COMO REQUISITO PARCIAL PARA OBTENER EL TÍTULO DE
MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
PRESENTA:
OLIVIER LÓPEZ LAGUNES
ASESOR:
DR. JUAN PRISCILIANO ZARATE MARTÍNEZ
VERACRUZ, VER. ENERO 2013
ii
ÍNDICE GENERAL
ÍNDICE DE CUADROS ... iv
ÍNDICE DE FIGURAS ... v
DEDICATORIA ... vi
AGRADECIMIENTOS ... vii
RESUMEN ... viii
1. INTRODUCCIÓN ... 1
2. ANTECEDENTES ... 2
3. JUSTIFICACIÓN ... 5
4. HIPÓTESIS ... 6
5. OBJETIVOS ... 7
5.1 OBJETIVO GENERAL. ... 7
5.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS. ... 7
6. MATERIAL Y METODOS ... 8
6.1 LUGAR DE REALIZACIÓN DEL ESTUDIO. ... 8
6.2 ENCUESTA. ... 11
6.3 IDENTIFICACIÓN DE LOS ANIMALES. ... 11
6.4 CAPTURA DE DATOS. ... 11
6.5 EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD REPRODUCTIVA DE LOS SEMENTALES. ... 12
6.6 EVALUACIÓN DE LOS SEMENTALES. ... 12
6.7 TOMA DE MUESTRAS. ... 13
6.8 GRUPOS EXPERIMENTALES EN LOS SEMENTALES. ... 13
6.9 TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO. ... 13
6.10 IDENTIFICACIÓN GEOGRÁFICA DE LAS ÁREAS DE FRECUENCIA. ... 14
6.11 ANÁLISIS ESTADÍSTICO. ... 15
6.12 VARIABLES DE RESPUESTA. ... 15
7. RESULTADOS ... 17
8. DISCUSIÓN ... 31
9. CONCLUSIONES ... 33
10. LITERATURA CITADA ... 34
11. ANEXOS ... 41
iii ANEXO 1. ENCUESTA APLICADA A PRODUCTORES EN EL PROYECTO: ESTUDIO EPIDEMIOLÓGICO DE CUATRO ENFERMEDADES QUE PODRÍAN AFECTAR LA REPRODUCCIÓN EN SEMENTALES BOVINOS EN LA ZONA CENTRO DE VERACRUZ.
... 41 ANEXO 2 EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD REPRODUCTIVA DE LOS SEMENTALES.
... 47 ANEXO 3. PROTOCOLO DE EVALUACIÓN DE SEMENTALES BOVINOS. ... 49
iv
ÍNDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Examen físico general de los sementales bovinos del Estado de Veracruz. ... 17 Cuadro 2. Examen de órganos reproductivos de los sementales bovinos del estado de Veracruz. ... 18 Cuadro 3. Evaluación de las características del semen de los sementales bovinos del estado de Veracruz. ... 19 Cuadro 4. Evaluación macroscópica y microscópica del semen de los sementales bovinos del estado de Veracruz. ... 20 Cuadro 5. Toros reactores de las enfermedades muestreadas del estado de Veracruz. ... 21 Cuadro 6. Examen físico general de los sementales bovinos del Estado de Tabasco. ... 22 Cuadro 7. Examen de órganos reproductivos de los sementales bovinos del Estado de Tabasco. ... 23 Cuadro 8. Evaluación de las características del semen de los sementales bovinos del Estado de Tabasco. ... 24 Cuadro 9. Evaluación macroscópica y microscópica del semen de los sementales bovinos del Estado de Tabasco. ... 25 Cuadro 10. Toros reactores de las enfermedades muestreadas del estado de Tabasco. ... 26 Cuadro 11. Medias de mínimos cuadrados de las características físicas de los sementales bovinos evaluados en los estados de Veracruz y Tabasco. ... 27 Cuadro 12. Medias de mínimos cuadrados de la evaluación macroscópicas y porcentaje de espermatozoides vivos del semen de sementales bovinos evaluados en los estados de Veracruz y Tabasco... 27 Cuadro 13. Medias de mínimos cuadrados de la valoración microscópica del semen de sementales bovinos evaluados en los estados de Veracruz y Tabasco. ... 28 Cuadro 14. Toros fértiles y subfértiles del estado de Veracruz y porcentaje de las cuatro enfermedades estudiadas. ... 29 Cuadro 15. Toros fértiles y subfértiles del estado de Tabasco y porcentaje de las cuatro enfermedades estudiadas. ... 30
v
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Localización de los municipios muestreados (Gobierno del Estado de Veracruz). .... 9 Figura 2. Localización de los municipios muestreados (Gobierno del Estado de Tabasco). .. 11 Figura 3. Recolección de semen con electroeyaculador. ... 12 Figura 4. Toma de muestra sanguínea de la vena coccígea. ... 13 Figura 5. Georeferenciación de los ranchos bovinos muestreados en el estado de Veracruz.
... 15 Figura 6. Total de toros reactores a las enfermedades virales y parasitarias en cada estado.
... 28 Figura 7. Total de toros reactores a las enfermedades bacterianas en cada estado. ... 29
vi
DEDICATORIA
A DIOS: por estar conmigo en los buenos y malos momentos de la vida, por darme fuerzas para vencer adversidades, por darme sabiduría para tomar decisiones correctas.
A MIS PADRES: Lucio Otilio. López Pérez y Manuela Lagunes Cruz por su apoyo incondicional que me han regalado, por sus consejos que siempre me brindan, por su confianza y por ser mi mayor motivación en la vida. Por ello es que este trabajo es un agradecimiento por su esfuerzo y sacrificio para que yo lograra este sueño.
A MIS HERMANOS: Lucio y Octavio López Lagunes por su apoyo, sus enseñanzas, por su paciencia y dedicación para ayudarme a realizar este trabajo porque sin ustedes nunca lo hubiera logrado.
Muchas gracias por todo.
Los quiero mucho.
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AGRADECIMIENTOS
A la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia por brindarme la enseñanza y la oportunidad de ser Médico Veterinario Zootecnista egresado de la Universidad Veracruzana.
Al Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias (INIFAP) campo experimental “La Posta” Paso del Toro, Veracruz, por darme la oportunidad y su considerable apoyo de realizar esta investigación. Al Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Microbiología Animal (CENID) INIFAP Palo Alto, México por permitir el diagnóstico de las pruebas serológicas realizadas en este estudio.
A mi asesor Dr. Juan P. Zarate Martínez por su tiempo y dedicación para realizar este trabajo. Por darme la oportunidad y la confianza de realizar este estudio.
Al MVZ José Alfredo Villagómez Cortés por su tiempo y amabilidad de ayudarme a resolver mis dudas.
A mis Profesores, por sus enseñanzas, dedicación y amistad brindada en esta importante etapa de mi vida.
A los Señores ganaderos, que me permitieron el acceso a sus unidades de producción para la obtención de muestras y el estudio de esta investigación.
A mis Amigos, que hicieron una placentera y agradable estancia en mis años de estudios, por su apoyo, sus enseñanzas y por los momentos agradables que compartimos.
Yaremit Mora H., Angélica Olivares M., Elizabeth León A., M. Guadalupe Meza R., Alma D.
Huesca S., Lorena González J., J. Alberto León H., Juan C. Montero D., Rodrigo Morales G., Ángel Pérez M., Carlos A. Limón N., Justino I. Felipe A., Rubén Pimentel G. y a todos aquellos que me brindaron su amistad. Gracias a todos y que dios los bendiga.
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RESUMEN
López Lagunes Olivier. 2013. “Estudio epidemiológico de cuatro enfermedades que podrían afectar la reproducción del semental bovino de la zona centro de Veracruz”. Tesis de licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Veracruzana.
Veracruz, Veracruz, México. Asesor: Dr. Juan Prisciliano Zarate Martínez.
El objetivo de este trabajo fue determinar la tasa de afectación de la Rinotraqueítis Infecciosa Bovina (IBR), Diarrea Viral Bovina (DVB), Leptospirosis y Neosporosis, así como la capacidad reproductiva en sementales bovinos e identificar los factores de riesgo para estas enfermedades en la zona centro de Veracruz, en los municipios de Medellín y Cotaxtla. Se aplicó una encuesta para conocer las características de cada rancho, de los animales y las prácticas de manejo, de este modo se identificaron los factores de riesgo. Los toros fueron evaluados en su capacidad reproductiva mediante examen del aparato reproductor y de características del eyaculado. A cada semental se le tomaron tres muestras de sangre con intervalos de dos meses. La IBR, DVB y Neosporosis se diagnosticaron mediante la prueba de ELISA; la Leptospirosis mediante la prueba microaglutinación en placa (MAT). Se realizó un análisis de varianza con rancho como efecto fijo, para las variables de respuesta tanto de la capacidad reproductiva como de las presencia de las enfermedades. Para las frecuencias entre los machos, se hizo el procedimiento de modelos lineales generalizados (PROC FREQ) del paquete SAS, en un diseño completamente aleatorio y un modelo que incluyo el efecto fijo de rancho. La calificación corporal para los sementales (3.5a ± 0.09) fue buena, así como también la optimización en los aplomos de patas. Los órganos reproductivos de las razas de los sementales evaluados presentaron anormalidades en su conformación y salud. Un toro con escroto bífido, un toro con presencia de papilomas en el glande y cinco toros con prepucio indeseable, por presentar prepucio muy prolongado del nivel de los corvejones, además de presentar prolapso de la mucosa. La circunferencia escrotal de los toros evaluados presentó una calificación de buena a excelente de acuerdo a su edad (36.74a ± 3.17 para Veracruz), pero con bajo margen del volumen de semen (4.4a ± 2.24) y un aspecto mayormente acuoso. La motilidad masal y progresiva va de regular para la mayoría de los toros, reflejando una baja concentración de células espermáticas (316.7 x 106 a ±151.19) y un bajo porcentaje de espermatozoides vivos (28.08a ± 10.99), de los cuales presentaron un porcentaje significativo de anormalidades primarias (7.07a ± 0.01). Los resultados de toros reactores a las enfermedades virales y parasitarias por estado mostró que el estado de Tabasco tiene un mayor número de sementales positivos a enfermedades virales y parasitarias. Las enfermedades bacterianas por estado, también mostraron una mayor frecuencia en el estado de Tabasco a los diferentes serotipos de leptospira muestreadas en este trabajo (P<0.05).
Palabras clave: enfermedades emergentes, capacidad reproductiva del toro.
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1. INTRODUCCIÓN
Debido a las reducidas tasas de gestación en vacas, una problemática de la ganadería tropical es la baja producción de becerros por año, la cual el 50% de la producción total de estos becerros se encuentra muy relacionada con la fertilidad de los sementales (Cancino, 2011). Las fallas reproductivas en bovinos son debidas a enfermedades infecciosas en más del 50%. La incidencia de estas enfermedades representa un aspecto limitante de la eficiencia reproductiva de los hatos ganaderos (Campero, 2002).
La compra de toros que se incorporan al servicio sin los exámenes correspondientes, pueden introducir enfermedades venéreas en el hato mediante el ingreso de toros infectados (Campero, 2002).
En la mayoría de las ganaderías del trópico de Veracruz, se ha estudiado la presencia de las enfermedades Rinotraqueítis infecciosa bovina (IBR), Diarrea viral bovina (DVB), Leptospirosis y Neosporosis, pero se desconoce el grado de afectación de estas enfermedades sobre el comportamiento y su capacidad reproductiva de los sementales. Es por esto necesario, estudiar el comportamiento de estas enfermedades, el cómo afecta o causan problemas en el aparato reproductor de los machos, para reconocer su participación en la reducción de la eficiencia reproductiva, para inducir como rutina un protocolo integral de manejo sanitario para la detección y control vacunación que complemente las prácticas actuales de manejo sanitario y lograr una mejor eficiencia reproductiva de los animales.
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2. ANTECEDENTES
La eficiencia reproductiva de un hato ganadero se ha atribuido al comportamiento de las vacas; sin embargo, de igual forma, la eficiencia reproductiva depende también de los sementales del hato que lo conforman (Haugan et al., 2005). Por lo tanto, se ha documentado que la reproducción de los bovinos se ve afectada por agentes infecciosos, como lo son el Virus de la Diarrea Viral Bovina, el Virus de Rinotraqueítis Infecciosa Bovina, la Neospora caninum (Waldner, 2005) y la Leptospira sp. (Luna et al., 2005). Se ha logrado determinar su frecuencia a través de seroprevalencia y seroincidencia de trabajos realizados para la detección de estas enfermedades en hatos ganaderos estabulados principalmente del altiplano del país; además se ha estudiado la relación de estas enfermedades con los problemas reproductivos (Aceves et al., 2004; Álvarez et al., 2004; Escamilla et al., 2004; Reyes et al., 2004)
“La leptospirosis es una enfermedad infecciosa de origen bacteriano. Puede ser causada por cualquiera de las espiroquetas del género Leptospira especie L.
interrogans. Se clasifica basándose en sus diferencias antigénicas en serogrupos y serovariedades de las que se han descrito más de 220” (Luna et al., 2005).
La transmisión venérea es una forma de transmisión directa. Aunque la presencia de leptospiras ha sido observada en el tracto genital del toro y en el semen (Alonso-Andicoberry et al., 2001), la transmisión sexual en el ganado bovino no ha sido plenamente demostrada, si bien se supone que es una de las más importantes para las cepas del serovar hardjo genotipo Hardjoprajitno (Ellis, 1994).
Una de las más importantes enfermedades virales del ganado es causada por el virus de DVB. Sus signos clínicos pueden pasar desapercibidos o pueden presentarse como una enfermedad hemorrágica severa o en ocasiones la fatal enfermedad de las mucosas (Rondón, 2006).
Los sementales bovinos juegan un papel importante en la diseminación del virus. La infección de un toro con DVB puede deberse a una infección aguda o por una infección adquirida durante la preñez (congénita) de la que nace un animal portador de por vida. De igual forma en los dos casos el virus se presenta en el semen: mientras que en la infección aguda es temporaria, en persistentemente
3 infectados el virus siempre se eliminara con el semen. Por tal motivo no debe utilizarse como reproductor un toro con infección persistente de DVB, este debe ser identificado y eliminado del hato. También es importante el contagio de la infección a través del semen cuando se trata de un centro de inseminación artificial o de un rancho ganadero con esta infección(Odeón, 2006).
Los toros persistentemente infectados son en su mayoría infértiles o producen semen de baja calidad. El virus que se elimina en el semen de toros con infección aguda se extiende más allá del periodo de viremia, producto de la replicación local en vesículas seminales y próstata (Rondón, 2006).
El semen de los toros infectados durante la gestación o de toros con infección temporaria contiene virus de DVB, provocando que los espermatozoides tengan una motilidad disminuida y pudiendo presentar anormalidades morfológicas (Grahn et al., 1984).
Toros normales persistentemente infectados al virus de de DVB han ganado acceso a centros de inseminación artificial (IA) por sus deseables características de rendimiento (Howard et al., 1990). Estos toros pueden presentar concentración, motilidad y morfología normal en los espermatozoides (Kirkland et al., 1994). Por lo tanto el semen de toros con infección persistente crea un riesgo de transmisión viral por la vía de inseminación artificial, en la producción de embriones in vivo y en la producción in vitro de embriones (Gard et al., 2007).
“La Rinotraqueítis infecciosa bovina (IBR) es una enfermedad viral causada por el Herpes virus bovino 1 (HVB-1) que produce pérdidas económicas sustanciales a la ganadería en el mundo” (Hage et al., 1998) el virus se puede transmitir por contacto directo con secreciones ocular y genital, por vía respiratoria a si como también con semen fresco (Nuotio et al., 2007).
La infección en los toros se conoce como balanopostitis pustular infecciosa, caracterizada por la aparición de pústulas, inflamación en prepucio y glande (Correa, 1976).
En un estudio realizado en dos estados de Brasil se detecto el Herpesvirus bovino 1 (BoHV-1) y 5 (BoHV-5) en semen de toros muestreados en este estudio, destacando la importancia de examinar el semen del toro para reducir el riesgo de transmisión de estos virus (Oliveira et al., 2011).
La neosporosis fue por vez primera descrita en caninos como un síndrome neuromuscular causado por un protozoario intracelular denominado Neospora
4 caninum (Dubey et al., 1988). Este protozoo fue relacionado no solo con su capacidad de producir abortos en el ganado bovino (Thilsted y Dubey, 1989), sino también con la baja producción de leche y carne (Dubey, 2003).
Aunque la infección es un factor importante en la producción de perdidas reproductivas, productivas y económicas en las ganaderías de todo el mundo, aún no se han descrito tratamiento o inmunógeno que prevenga la infección en los bovinos (Dubey, 2003).
Los toros pueden eliminar el protozoo a través del semen (Moore et al., 2003) y en muestras de semen congelado su ácido desoxirribonucleico (ADN) en ocasiones ha sido detectado (Caetano da Silva et al., 2004).
Aunque los toros se comportan como hospedadores intermediarios (Moore et al., 2003) sería poco probable la ocurrencia de transmisión venérea; sin embargo, esta posibilidad aún no ha sido investigada.
Recientemente se ha investigado la posibilidad de transmisión venérea de neosporosis bovina, ya que el DNA de Neospora caninum se informo en semen fresco y congelado de toros infectados de forma natural (Ortega et al., 2003).
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3. JUSTIFICACIÓN
Los productores reportan fallas reproductivas de los bovinos del trópico de Veracruz. Aunque no cuentan con registros de datos productivos, se desconoce sí la Rinotraqueítis Infecciosa Bovina, la Diarrea Viral Bovina, la Leptospirosis y la Neosporosis son la causa de las fallas reproductivas. Es necesario identificar la frecuencia de IBR, DVB, Leptospirosis y Neosporosis de los sementales bovinos en tres ranchos de la zona centro del estado de Veracruz. Se requiere de un protocolo integral de manejo sanitario para la detección, control y vacunación de estas enfermedades que limitan la reproducción en el trópico. Se identificara las áreas de frecuencia de las enfermedades IBR, DVB, Leptospirosis y Neosporosis, aplicando los sistemas de información geográfica para su vigilancia y control.
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4. HIPÓTESIS
Las enfermedades Rinotraqueítis Infecciosa Bovina (IBR), Diarrea Viral Bovina, (DVB), Leptospirosis y Neosporosis, se encuentran en los sementales bovinos de ranchos muestreados en la zona centro de Veracruz afectando su reproducción.
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5. OBJETIVOS
5.1 OBJETIVO GENERAL.
Determinar mediante diagnóstico serológico la frecuencia de las enfermedades Rinotraqueítis Infecciosa Bovina, Diarrea Viral Bovina, Leptospirosis y Neosporosis, que podrían afectar la reproducción de los sementales bovinos de ranchos ubicados en la zona centro de Veracruz y compararlos con ranchos de la zona norte del estado de Tabasco durante el 2012.
5.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS.
Determinar mediante diagnóstico serológico la frecuencia de Rinotraqueítis infecciosa bovina, Diarrea viral bovina, Leptospirosis y Neosporosis en los sementales bovinos de tres ranchos ubicados en la zona centro de Veracruz y seis ranchos en la zona norte de Tabasco.
Determinar la tasa de afectación de la IBR, DVB, Leptospirosis y Neosporosis sobre la reproducción en los sementales bovinos de la zona centro del estado de Veracruz y la zona norte del estado de Tabasco e identificar los factores de riesgo para las enfermedades.
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6. MATERIAL Y METODOS
6.1 LUGAR DE REALIZACIÓN DEL ESTUDIO.
El trabajo se realizo en tres ranchos ubicados en la zona centro de Veracruz, que se encuentran dentro de los municipios Medellín y Cotaxtla, y seis ranchos de la zona norte de Tabasco ubicados en los municipios de Huimanguillo y Cunduacán.
Medellín. Se encuentra ubicado en la zona centro del Estado, en las llanuras del Sotavento, en las coordenadas 19° 03’ latitud norte y 96° 09’ longitud oeste, a una altura de 52 metros sobre el nivel del mar. Limita al norte con Veracruz, al noreste con Boca del Río, al este con Alvarado, al sur con Tlalixcoyan, al oeste con Jamapa y Manlio Fabio Altamirano. Tiene una superficie de 370.l4 Km2, cifra que representa un 0.51% total del Estado. Su clima es cálido-húmedo-extremoso con una temperatura promedio de 25.3° C; su precipitación pluvial media anual es de 1,417.8 mm (Gobierno del Estado de Veracruz).
Cotaxtla. Se localiza en las llanuras del Sotavento, en la zona centro costera del Estado ubicándose cerca de los límites de la zona sur, en las coordenadas 18°
50’ latitud norte y 96° 24’ longitud oeste, a una altura de 40 metros sobre el nivel del mar. Tiene una superficie de 659.68 Km2, cifra que representa un 0.91% del total del Estado. Su clima es cálido-seco-regular con una temperatura promedio de 26°C; su precipitación pluvial media anual es de 1,900 mm.Limita al norte con el municipio de Soledad de Doblado y con el municipio de Manlio Fabio Altamirano, al noreste con el municipio de Jamapa y con el municipio de Medellín, al sur con el municipio de Tlalixcoyan, al suroeste con el municipio de Tierra Blanca y con el municipio de Cuitláhuac, al oeste con el municipio de Carrillo Puerto y al noroeste con el municipio de Paso del Macho (Gobierno del Estado de Veracruz).
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Figura 1. Localización de los municipios muestreados (Gobierno del Estado de Veracruz).
Huimanguillo. El municipio de Huimanguillo se localiza en la región de la Chontalpa y tiene como cabecera municipal a la ciudad de Huimanguillo, la que se ubica al este del estado, entre los paralelos 17°19’ de latitud norte y 93º23’ de longitud oeste. Colinda al norte con el municipio de Cárdenas, al sur con los estados de Chiapas y Veracruz, al este con el estado de Chiapas y al oeste con el estado de Veracruz. La extensión territorial del municipio es de 3,757.59 km2, los cuales corresponden al 15.35% respecto del total del estado. En el municipio se presentan tres formas características de relieve, la primera corresponde a la zona accidental y abarca aproximadamente el 2% de la superficie; la segunda corresponde a zonas semiplanas y abarca el 11%; y la tercera corresponde a zonas planas con el 87%.
Se aprecian dos tipos de clima: el cálido húmedo con abundantes lluvias en verano con cambios térmicos en los meses de diciembre y enero; su temperatura media anual es de 26.2°C, siendo la máxima media mensual en mayo con 30.6°C; a la vez, la máxima y mínima absoluta alcanzan los 45°C y 14°C, respectivamente; el clima cálido húmedo con lluvias todo el año se da en la parte sur y suroeste, colindando con los estados de Veracruz y Chiapas, éstas lluvias decrecen ligeramente en
10 invierno, período en la cual se registra el 14.4% del total anual. La temperatura media oscila entre los 25.4 °C y 26.9°C. El régimen de precipitación pluvial se caracteriza por un total de caída de agua de 2,290.3 mm anuales en el mes de septiembre y nula en el mes de abril (Gobierno del Estado de Tabasco).
Cunduacán. El municipio de Cunduacán se localiza en la región de la Chontalpa tabasqueña, teniendo como cabecera municipal a la ciudad de Cunduacán, ubicada entre los paralelos 18°03’ de latitud norte y 93º 10’ de longitud oeste. Colinda al norte con los municipios de Comalcalco y Jalpa de Méndez, al sur con el municipio de Centro y el estado de Chiapas, al este con los municipios de Nacajuca y Centro y al oeste con el municipio de Cárdenas. La extensión territorial del municipio es de 623.9 km², los cuales corresponden al 2.54% respecto del total del estado. Tiene una conformación plana, siendo la mayor elevación de 40 msnm.
La altura de la cabecera municipal es de 10msnm. El clima cálido-húmedo con abundantes lluvias en verano, régimen normal de calor con cambios térmicos en los meses de diciembre y enero; se aprecia una temperatura media anual de 26.2°C, siendo la máxima media mensual en mayo con 30.5°C, y la mínima media mensual en diciembre y enero con 22.5°C. El régimen de precipitaciones se caracteriza por un total de caída de agua de 1947 mm anuales con un promedio máximo mensual de 327 mm en el mes de septiembre y una mínima mensual de 6 mm en el mes de abril (Gobierno del Estado de Tabasco).
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Figura 2. Localización de los municipios muestreados (Gobierno del Estado de Tabasco).
6.2 ENCUESTA.
Se aplicó una encuesta para conocer las características de cada rancho, de los animales y las prácticas de manejo, de este modo se identificaron los factores de riesgo y las características de producción. Para conocer el status sanitario y reproductivo del hato, así como el manejo que se le da al mismo (Anexo 1).
6.3 IDENTIFICACIÓN DE LOS ANIMALES.
Todos los sementales, considerados para el proyecto fueron identificados con aretes SINIIGA o bien con los aretes de campaña de brúcela y tuberculosis o en último de los casos con aretes comerciales para dar seguimiento a su capacidad reproductiva y su estado sanitario.
6.4 CAPTURA DE DATOS.
La captura de datos se realizó en libretas de campo y libros electrónicos para registrar la información para su conservación y análisis.
12 6.5 EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD REPRODUCTIVA DE LOS SEMENTALES.
Los toros fueron evaluados en su capacidad reproductiva mediante examen del aparato reproductor y de características del eyaculado. Estas pruebas se hicieron a sementales que se utilizan en monta continua al iniciar el trabajo de muestreo de sangre. Los sementales con capacidad reproductiva deficiente o nula, fueron reevaluados para confirmar su estado reproductivo 15 a 30 días después de la primera evaluación (Anexo 2).
Figura 3. Recolección de semen con electroeyaculador.
6.6 EVALUACIÓN DE LOS SEMENTALES.
Los sementales fueron evaluados mediante el Protocolo de Evaluación de los Sementales (CONARGEN. s.f.), el cual cuenta con los siguientes datos: nombre del propietario, nombre del rancho, su ubicación, identificación del semental, raza, la edad, condición corporal, examen físico general, examen de órganos reproductivos, circunferencia escrotal, evaluación del eyaculado; aspecto, motilidad, concentración, porcentaje de espermatozoides vivos y morfología (Anexo 3).
13 6.7 TOMA DE MUESTRAS.
Se tomaron tres muestras de sangre con intervalos de dos meses por cada semental. En estas muestras se hizo el diagnóstico serológico de IBR, DVB, Leptospirosis y Neosporosis. Las muestras de sangre fueron centrifugadas para separar el suero, identificadas y conservadas en congelación (-20°C) durante una semana hasta su análisis de laboratorio en el CENID Microbiología INIFAP. Los resultados se tomaron como referencia de la frecuencia de estas enfermedades y del estado sanitario de los sementales.
Figura 4. Toma de muestra sanguínea de la vena coccígea.
6.8 GRUPOS EXPERIMENTALES EN LOS SEMENTALES.
Para los sementales se realizó dos grupos: I) sementales con buena fertilidad y II) sementales subfértiles.
6.9 TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO.
La IBR, DVB y Neosporosis se diagnosticaron mediante la prueba de ELISA (siglas en inglés Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay, Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas); la Leptospirosis mediante la prueba microaglutinación en placa (MAT).
Las pruebas se realizaron en el Centro Nacional de Investigación Disciplinaria- Microbiología Animal (CENID).
14 La técnica de ELISA es un inmunoensayo enzimático indirecto diseñado para detectar anticuerpos específicos en muestras de suero, plasma o leche. Los anticuerpos frente a la enfermedad presente en la muestra se unen al antígeno de la placa. El material no ligado se elimina mediante un lavado. El complejo antígeno- anticuerpo se detecta mediante un Conjugado peroxidasa de rábano, el resto del Conjugado se elimina mediante el lavado de la placa y se añade una solución de Substrato/cromógeno. En presencia del enzima, el Substrato se convierte en un producto que reacciona con el cromógeno generando una coloración azul. Al añadir la solución de Frenado, se genera un color amarillo. La absorbancia se mide en el espectofotómetro a una longitud de onda única de 450 nm [A (450)] o a una longitud de onda dual de 450 nm y 650 nm [A (450/650)]. El desarrollo de color indica la presencia de anticuerpos en la muestra (resultado positivo) (Pérez y Pérez, 2009).
La técnica de microaglutinación en placa (MAT) es el método serológico de referencia para el diagnostico de Leptospirosis. Se emplea para identificar anticuerpos en sueros de sospechosos o enfermos, donde el suero del paciente sospechoso o enfermo reacciona con antígenos vivos de Leptospirosis. Para tener una adecuada sensibilidad, se utilizan cepas representativas de todos los serogrupos presentes en el lugar determinado concreto y de la especie objeto de estudio. Las cepas seleccionadas se cultivan en Tween 80 BSA o en un medio comercial adecuado a 29 ± 1ºC y el cultivo debe tener al menos 4 días, pero no más de 8. El número de antígeno que se utilizan es determinado, y se realiza con suero diluido. A cada pocillo se añade un volumen de cada antígeno igual al volumen de suero diluido. Las placas de microtitulación se incuban a 29 ± 1ºC durante 2-4 horas, y se examina por microscopia de campo oscuro (Santos, 2010). Para el caso de Leptospira sp. son positivos a la prueba de aglutinación microscópica títulos mayores a 1:100.
6.10 IDENTIFICACIÓN GEOGRÁFICA DE LAS ÁREAS DE FRECUENCIA.
En cada una de las entidades que se incluyen en el estudio, se obtuvo las coordenadas de las unidades de producción muestreadas de manera directa utilizando un geoposicionador manual o de la base de datos del Instituto Nacional de Estadística, Geografía e Informática (INEGI); o bien utilizando el paquete de Internet Google Earth cuando la localización del hato no se pueda realizar manualmente o no
15 se encuentre en la base de datos del INEGI. Para tal motivo se utilizará la frecuencia en cada hato muestreado por cada una de las enfermedades seleccionadas en el estudio, dividiendo el número de animales seropositivos a la prueba diagnóstica utilizada en cada caso sobre el total de animales muestreados, multiplicado por 100.
Un hato positivo a cada una de las enfermedades en el estudio será aquel con una frecuencia mayor a cero (Román et al., 2009).
Figura 5. Georeferenciación de los ranchos bovinos muestreados en el estado de Veracruz.
6.11 ANÁLISIS ESTADÍSTICO.
Se realizó un análisis de varianza con los efectos fijos de estado y rancho, para las variables de respuesta tanto de la capacidad reproductiva como de las presencia de las enfermedades. Para las frecuencias entre tratamientos de los machos, se hizo un análisis estadístico utilizando el procedimiento de modelos lineales generalizados (PROC FREQ) del paquete SAS, en un diseño completamente aleatorio y un modelo que incluyo los efectos fijos de rancho y estado reproductivo. El estado reproductivo fue el efecto principal por ser el de mayor interés en el estudio.
6.12 VARIABLES DE RESPUESTA.
Las variables de respuesta fueron el porcentaje (%) de frecuencia a IBR, DVB, Leptospirosis y Neosporosis entre machos. Para relacionar estas enfermedades con
16 los problemas reproductivos detectados, se hicieron las comparaciones de las frecuencias (%) de cada una de las enfermedades en estudio, entre los sementales con buena fertilidad e infértiles. Las diferencias se probaron a una probabilidad menor a 0.05 (P<0.05).
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7. RESULTADOS
7.1. EVALUACIÓN REPRODUCTIVA DE LOS SEMENTALES BOVINOS DE VERACRUZ.
Estado reproductivo de sementales utilizados para monta natural en ranchos del estado de Veracruz. Durante las evaluaciones de estos toros se pudo constatar la capacidad reproductiva de los toros del estado mencionado, tomando estos datos como comparación de la Evaluación reproductiva de los sementales del estado de Tabasco. En el estado de Veracruz, se muestrearon tres ranchos de la zona centro y un total de trece toros. Las razas de los mismos fueron: Suizo pardo (cuatro), Sardo negro (dos), Holstein (dos), Brangus (dos), un toro Cebú y un toro de cada uno de los siguientes cruzas, Indobrasil/Holstein y Suizo pardo/ Cebú.
Cuadro 1. Examen físico general de los sementales bovinos del Estado de Veracruz.
Raza Condición corporal Aplomos
SP 4, 3.75, 3, 2.5 O(4)
SN 4, 3.5 O(2)
H 4, 3.75 O(2)
C 3.5 O
IB/H 4 O
BRG 3.5(2) O(2)
SP/C 3.5 O
Promedio 3.5 O(13)
SP= Suizo pardo C= Cebú SP/C= Suizo pardo/Cebú
SN= Sardo negro IB/H= Indobrasil/Holstein O= Óptimos
H= Holstein BRG= Brangus
18 En el cuadro 1 se presenta las razas de los toros evaluados con su respectiva condición corporal, notándose que la calificación para este grupo de animales es buena, así como también la optimización en los aplomos de los mismos para realizar la monta.
El cuadro 2 se refiere al examen de los órganos reproductivos de las razas de los sementales evaluados en el estado de Veracruz. Se evaluaron 13 toros procedentes de tres ranchos. Cuatro animales presentaron anormalidades en su conformación. Un toro con escroto bífido, un toro con presencia de papilomas en el glande y dos toros con prepucio indeseable, por presentar viril muy prolongado del nivel de los corvejones, además de presentar prolapso de la mucosa del prepucio.
Cuadro 2. Examen de órganos reproductivos de los sementales bovinos del estado de Veracruz.
Raza Escroto Testículos Prepucio Glande
SP N(4) N(4) O(3), A N(4)
SN N(2) N(2) I(2) N(2)
H N(2) N(2) O, A N(2)
C AN N O N
IB/H N N A N
BRG N(2) N(2) M(2) N(2)
SP/C N N A AN
Total N(12), AN N(13) O(5), A(4), M(2), I(2)
N(12), AN
SP= Suizo pardo C= Cebú BRG= Brangus
SN= Sardo negro IB/H= Indobrasil/Holstein SP/C= Suizo pardo/Cebú H= Holstein
N= Normal O= Optimo M= Moderado
AN= Anormal A= Aceptable I= Indeseable
En el cuadro 3 se presentan las medidas de la circunferencia escrotal de los toros evaluados, notándose que presentan una calificación de buena a excelente,
19 pero con un bajo margen de volumen de semen y un aspecto mayormente acuoso de este. Estos resultados se reflejan a que estos machos están en monta continua durante todo el año con un gran número de hembras.
Cuadro 3. Evaluación de las características del semen de los sementales bovinos del estado de Veracruz.
Raza Circunferencia escrotal
Volumen Aspecto
SP 34, 30, 33, 42.5 3, 6, 5.5, 1.5 Lechoso (2), Acuoso (2)
SN 37, 34 8, 6 Acuoso (2)
H 37, 42 4, 2.5 Lechoso, Acuoso
C 31.2 2 Opalescente
IB/H 42 3.5 Opalescente
BRG 36, 39 8.5, 5 Acuoso (2)
SP/C 40 2 Opalescente
Promedio 36.7 4.4 Acuoso
SP= Suizo pardo C= Cebú SP/C= Suizo pardo/ cebú
SN= Sardo negro IB/H= Indobrasil/ holstein
H= Holstein BRG= Brangus
En el cuadro 4, se muestra la evaluación del eyaculado obtenido de los toros muestreados, calificando las características de las células espermáticas. La motilidad masal va de mala a regular para la mayoría de los toros, mientras que para la progresiva no hay mucha variación ya que va de pobre a regular, reflejando una baja concentración de células espermáticas y un bajo porcentaje de espermatozoides vivos, de los cuales presentaron un porcentaje significativo de anormalidades primarias.
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Cuadro 4. Evaluación macroscópica y microscópica del semen de los sementales bovinos del estado de Veracruz.
Raza Motilidad masal
Motilidad progresiva
Concentración (x 106)
Vivos Anormalidades primarias
Anormalidades secundarias SP Excelente,
regular, mala
Excelente, regular,
pobre
250, 200, 750, 0
20, 90, 0(2)
80, 0(3) 2(2), 0(2)
SN Mala (2) Pobre, muy pobre
0(2) 0(2) 0(2) 0(2)
H Regular Regular 350, 200 60,
90
2, 0 2(2)
C Regular Pobre 0 0 0 0
IB/H Mala Muy
pobre
0 0 0 0
BRG Regular (2)
Regular 150, 0 20, 0 10, 0 0(2)
SP/C Regular Buena 0 85 0 0
Promedio Regular Regular 146 x 106 28.1 7.1 0.6
SP= Suizo pardo C= Cebú SP/C= Suizo pardo/ cebú
SN= Sardo negro IB/H= Indobrasil/ holstein
H= Holstein BRG= Brangus
En el cuadro 5 se presentan los toros reactores a los anticuerpos de las enfermedades de diagnóstico. Apreciando que las enfermedades con más reactores fueron las virales, seguidas por las bacterianas y sin presentar anticuerpos para la enfermedad parasitaria. Para el caso de Leptospira sp. son positivos a la prueba de aglutinación microscópica títulos mayores a 1:100.
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Cuadro 5. Toros reactores de las enfermedades muestreadas del estado de Veracruz.
Raza IBR DVB Neosporosis Leptospira
Wolffi Hardjo Tarassovi Inifap Palo alto SP +(3),
-
+(4) -(4) +(2), -(2)
+, -(3) -(4) +, - (3)
-(4)
SN +, - +, - -(2) -(2) -(2) -(2) +, - -(2) H +, - +, - -(2) -(2) -(2) -(2) +, - -(2)
C - - - - - - - -
IB/H - - - - - - - +
BRG -(2) -(2) -(2) -(2) -(2) -(2) -(2) -(2)
SP/C - + - + + - + -
Total +(5), -(8)
+(7), -(6)
+(0), -(13)
+(3), -(10)
+(2), -(11)
+(0), -(13)
+(4), -(9)
+(1), -(12)
SP= Suizo pardo C= Cebú BRG= Brangus
SN= Sardo negro IB/H= Indobrasil/ holstein SP/C= Suizo pardo/ cebú H= Holstein
IBR= Rinotraqueítis Infecciosa Bovina
DVB= Diarrea Viral Bovina
Títulos de anticuerpos ˃1:100
Las frecuencias totales por muestreo en Veracruz fueron de 38.46% para IBR;
53.84% para DVB y 23.07% (Wolffi), 15.38% (Hardjo), 30.76% (INIFAP), 7.69%
(Palo Alto) para leptospirosis.
7.2 EVALUACIÓN REPRODUCTIVA DE LOS SEMENTALES BOVINOS DE TABASCO.
Estado reproductivo de sementales utilizados para monta natural en ranchos del estado de Tabasco. Durante las evaluaciones de estos toros se pudo constatar la capacidad reproductiva de los toros del estado mencionado, tomando estos datos como comparación de la evaluación reproductiva de los sementales del estado de
22 Veracruz. En el estado de Tabasco, se muestrearon seis ranchos y un total de 19 toros. Las razas de los mismos fueron: Holstein/Cebú (cuatro), Gyr (tres), Sardo negro (dos), Beefmaster (dos), Brahman (dos), un toro de cada una de las siguientes, Nelore, Piemontese, Simmental, Suizo pardo y uno de las siguientes cruzas Suizo Pardo/Cebú y Gyr/Holstein.
En el cuadro 6 se presentan las razas de los toros evaluados en el estado de Tabasco con su respectiva condición corporal, notándose que la calificación para este grupo de animales es buena, así como también la optimización en los aplomos de los mismos para realizar la monta.
Cuadro 6. Examen físico general de los sementales bovinos del Estado de Tabasco.
Raza Condición corporal Aplomos
G 4.5, 4, 3.25 O(3)
SP/C 3.75 O
N 3 O
PM 3.5 O
SIM 3.5 O
H/C 5, 4.5, 3.5, 3.25 O(4)
SP 3.5 O
SN 4.5, 2.75 O(2)
BFM 3.5, 3.35 O(2)
BRH 3.75, 3.25 O(2)
G/H 3 O
Promedio 3.6 O(19)
G= Gyr SIM= Simmental BFM= Beefmaster
SP/C= Suizo pardo/ Cebú H/C= Holstein/ Cebú BRH= Brahman N= Nelore SP= Suizo pardo G/H= Gyr/ Holstein PM= Piemontese SN= Sardo negro
23 O= Óptimos
El cuadro 7, se refiere al examen de los órganos reproductivos de los sementales evaluados en los municipios del estado de Tabasco, apreciando que tres de ellos presentaron prepucios indeseables, debido a su viril prolongado.
Cuadro 7. Examen de órganos reproductivos de los sementales bovinos del Estado de Tabasco.
Raza Escroto Testículos Prepucio Glande
G N(3) N(3) O, A, I N(3)
SP/C N N M N
N N N A N
PM N N O N
SIM N N M N
H/C N(4) N(4) A(3), M N(4)
SP N N O N
SN N(2) N(2) M, I N(2)
BFM N(2) N(2) A, M N(2)
BRH N(2) N(2) M, I N(2)
G/H N N O N
Total N(19) N(19) O(4), A(6),
M(6), I(3)
N(19)
G= Gyr SIM= Simmental BFM= Beefmaster
SP/C= Suizo pardo/ Cebú H/C= Holstein/ Cebú BRH= Brahman
N= Nelore SP= Suizo pardo G/H= Gyr/ Holstein
PM= Piemontese SN= Sardo negro
O= Optimo M= Moderado N= Normal
A= Aceptable I= Indeseable
24 En el cuadro 8 se presentan las medidas de la circunferencia escrotal, reflejando una buena calificación en las mediciones, se presentan de igual forma el contenido volumétrico de semen que van desde uno hasta los diecisiete mililitros y de igual forma se muestra que este grupo de machos dieron un aspecto lechoso en el semen obtenido.
Cuadro 8. Evaluación de las características del semen de los sementales bovinos del Estado de Tabasco.
Raza Circunferencia escrotal
Volumen Aspecto
G 42(2), 36.5 4, 10, 16 Lechoso(3)
SP/C 46 5 Acuoso
N 39 5 Lechoso
PM 32.5 1.5 Acuoso
SIM 42.5 2 Lechoso
H/C 30, 36, 43, 40 0, 1.8, 10.5, 7 Lechoso, cremoso, acuoso
SP 38.5 5 Opalescente
SN 34, 41 6, 15 Cremoso(2)
BFM 40(2) 1, 17 Lechoso(2)
BRH 37, 30 8, 3.5 Lechoso, opalescente
G/H 35 7.5 Lechoso
Promedio 38.2 6.6 Lechoso
G= Gyr SIM= Simmental BFM= Beefmaster
SP/C= Suizo pardo/ Cebú H/C= Holstein/ Cebú BRH= Brahman N= Nelore SP= Suizo pardo G/H= Gyr/ Holstein PM= Piemontese SN= Sardo negro
En el cuadro 9, durante la evaluación de las células espermáticas se observa que la motilidad, la concentración, el porcentaje de espermas vivos es bueno para la
25 mayoría de los toros y su porcentaje de anormalidades no es significativo (P> 0.05) a diferencia de estas mismas características de los toros de Veracruz.
Cuadro 9. Evaluación macroscópica y microscópica del semen de los sementales bovinos del Estado de Tabasco.
Raza Motilidad masal
Motilidad progresiva
Concentración (x 106)
Vivos Anormalidades primarias
Anormalidades secundarias G Excelente,
buena, regular
Excelente, buena(2)
450, 550, 750 90, 95(2)
1, 0(2) 0(3)
SP/C Mala Muy pobre 0 0 0 0
N Buena Buena 850 95 0 0
PM Regular Regular 250 0 0 0
SIM Buena Buena 750 0 0 0
H/C Excelente, buena
Excelente(2) 850, 750, 0(2) 95(2), 0(2)
0(4) 0(4)
SP Mala Buena 350 80 2 0
SN Excelente, regular
Excelente, buena
900, 450 95, 85
2, 1 0(2)
BFM Regular Buena 450, 0 80, 0 0(2) 0(2)
BRH Buena(2) Buena(2) 700, 400 95(2) 0(2) 0(2)
G/H Buena Buena 800 95 1 0
Promedio Buena Buena 486.8 x 106 62.6 0.4 0
G= Gyr SIM= Simmental BFM= Beefmaster
SP/C= Suizo pardo/ Cebú H/C= Holstein/ Cebú BRH= Brahman N= Nelore SP= Suizo pardo G/H= Gyr/ Holstein PM= Piemontese SN= Sardo negro
En el cuadro 10, se presentan los toros reactores a los anticuerpos de las enfermedades de diagnóstico. Dando como resultado un gran número de reactores para todas estas enfermedades a diferencia de los toros del estado de Veracruz en los que las enfermedades virales fueron las más importantes. Para el caso de Leptospira sp son positivos a la prueba de aglutinación microscópica títulos mayores a 1:100.
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Cuadro 10. Toros reactores de las enfermedades muestreadas del estado de Tabasco.
Raza IBR DVB Neosporosis Leptospira
Wolffi Hardjo Tarassovi Inifap Palo alto G +(2), - +(2), - -(3) +(2), - -(3) +, -(2) +, -(2) +, -
(2)
SP/C - + + - - - - -
N - + + + - - + -
PM - + - - - - + -
SIM + - - + + - + -
H/C +(3), - +, -(3) +(2), -(2) +, -(3) +, -(3) -(4) +, -(3) -(4)
SP + + + - - - + -
SN +(2) +(2) -(2) +, - +, - -(2) +, - -(2)
BFM +(2) +, - +(2) +, - +(2) +, - +(2) +, -
BRH +(2) -(2) +, - -(2) +(2) -(2) +(2) -(2)
G/H + + - + + + + +
Total +(14), –(5)
+(11), –(8)
+(8), -(11)
+(8), -(11)
+(8), - (11)
+(3), - (16)
+(12), -(7)
+(3), -(16)
G= Gyr SIM= Simmental BFM= Beefmaster
SP/C= Suizo pardo/ Cebú H/C= Holstein/ Cebú BRH= Brahman N= Nelore SP= Suizo pardo G/H= Gyr/ Holstein PM= Piemontese SN= Sardo negro
IBR= Rinotraqueítis Infecciosa Bovina
DVB= Diarrea Viral Bovina
Títulos de anticuerpos ˃1:100
Las frecuencias totales por muestreo en Tabasco fueron de 73.68% para IBR;
57.89% para DVB, 42.10% para Neospora sp. y 42.10% para Leptospira (Wolffi), 42.10% (Hardjo), 15.78% (Tarassovi), 63.15% (INIFAP), 15.78% (Palo Alto) para leptospirosis.
27 En el cuadro 11, se muestra la comparación física general de los toros muestreados en los estados de Veracruz y Tabasco, señalando que en sus medias no hubo diferencias estadísticas en la edad, condición corporal y circunferencia escrotal (P> 0.05).
Cuadro 11. Medias de mínimos cuadrados de las características físicas de los sementales bovinos evaluados en los estados de Veracruz y Tabasco.
Estado Edad Condición corporal Circunferencia escrotal Veracruz 57.23 a 3.5 a ± 0.09 36.74 a ± 3.17
Tabasco 59.05 a 3.7 a ± 0.10 38.15 a ± 4.49
a b Distintas literales por columna, muestran diferencias estadísticas.
En el cuadro 12, se presenta la comparación de la valoración macroscópica y porcentaje de espermatozoides vivos de los estados muestreados. Señalando que la media del volumen de semen en los toros de Veracruz, presentan diferencias (P<
0.05) con la media del volumen de semen en los toros de Tabasco y compartiendo una media similar para el aspecto (P> 0.05) y diferencias en los espermatozoides vivos y muertos (P> 0.05).
Cuadro 12. Medias de mínimos cuadrados de la evaluación macroscópicas y porcentaje de espermatozoides vivos del semen de sementales bovinos evaluados en los estados de Veracruz y Tabasco.
Estado Volumen Aspectos Vivos
Veracruz 4.4a ± 2.24 Acuosos a 28.08 a ± 10.99 Tabasco 7.0 b ± 3.17 Acuosos a 62.68 b ± 15.54
a b Distintas literales por columna, muestran diferencias estadísticas.
En el cuadro 13, se comparan las características de las células espermáticas para los toros de cada estado, observándose que la mejor media en la motilidad (P<
0.05) es para Tabasco. De igual forma, la concentración espermática fue mayor (P<
0.05) en los toros de Tabasco y mayor porcentaje de anomalías (P< 0.05) de estas células para los toros de Veracruz.
