Diagnostico clínico
en vacas
abortadas….
Cátedra de clínica de animales de
interés zootécnico.
Alumna: Daiana Daldosso
DIAGNOSTICO CLINICO EN VACAS
ABORTADAS…
Introducción:
Siendo conscientes de las pérdidas económicas que se producen en las enfermedades reproductivas a causa de los abortos, el objetivo del trabajo es poder entender lo necesario que es la obtención de información epidemiológica, realizar una buena anamnesis, la clínica y la recolección de muestras de buena calidad y su correcto acondicionamiento y envío al laboratorio para arribar a un diagnóstico final. Por lo que se enfocará en la toma y recolección de muestras para el envío al laboratorio; y hacer una breve mención sobre las distintas causas que pueden provocar el aborto; teniendo en cuenta las hembras abortadas, los fetos y sus envolturas.
En nuestro país, los porcentajes de diagnóstico en el aborto bovino, raramente superan el 30-40 % aproximadamente. (laboratorio Santa Rosa)
Las razones pueden ser:
1. Los abortos son el resultado de acontecimientos ocurridos semanas o meses antes, pudiendo no ser detectables en ese momento.
2. El feto es frecuentemente retenido en el útero, horas o días después de su muerte, donde los fenómenos de autolisis o descomposición dificultan el diagnóstico.
3. Es difícil disponer de las membranas fetales o placenta, excelentes muestras para estudio.
4. Los factores no infecciosos responsables de la muerte fetal no son fáciles de detectar.
5. Aun se desconocen muchas causas que producen aborto.
6. Salvo en sistemas intensivos, muestras condiciones de campo tornan difícil la recolección de fetos y sus envolturas en tiempo y forma.
Dentro de las causas que podemos encontrar en el caso de abortos bovinos tenemos:
Infecciosas:
Bacterianas: Brucela Abortus, Campylobacter sp., Leptospira sp., Listeria Monocytogenes, Actinomyces Pyogenes, Enterobacterias en general, Haemophilus somnus, streptococcus sp., staphylococcus sp., Pseudomona sp., Acinetobacter sp., etc.
Virales: Diarrea viral bovina (DVB), Rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR),etc.
Clamidias y micoplasmas: Chlamydia Psittaci, Mycoplasma Bovis, Ureoplasma Diversum.
Protozoos: Trichomonas Foetus, Neospora caninum.
Hongos: Aspergilus sp., Candida sp., etc.
No infecciosas : se conoce poco sobre estas causas, y podrían ser:
Físicas: traumatismos, distocias, etc.
Toxicas: toxinas de hongos (fusarium, claviceps, aspergilus, etc), medicamentos, compuestos químicos (ioduro de sodio, etc), plantas toxicas (astralagus, etc).
Genéticas. Anormalidades cromosómicas, mutaciones.
Nutricionales: déficit vitamínicos y/o minerales (vitamina A, E, manganeso, yodo, etc)
Con la presencia de algunos de los siguientes síntomas nos haría sospechar de la presencia de algunos de los causantes nombrados anteriormente:
Síntomas primarios: ciclos estrales largos e irregulares; repeticiones de celo; infertilidad; muerte embrionaria; abortos; retención de placenta; placentitis supurativa y/o necrótica; metritis y/o piometra; cervicitis; descarga vaginal; vulvovaginitis-pustulas; parto prematuro; natimortos; terneros nacidos vivos, débiles o muertos; fetos momificados; malformaciones congénitas.
Cuadros nerviosos (depresión, ataxia, parálisis, encefalitis). Ejemplo: listeria, IBR, DVB, etc.
Ictericia (ejemplo: leptospira, anaplasma).
Fiebre, anorexia, disnea, anemia (leptospira, anaplasma, IBR, DVB).
Queratoconjuntivitis (ejemplo: IBR, DVB, haemophylus somnus).
Artritis (ejemplo: brucella, chlamydia, haemophylus somnus).
Hemoglobinuria (ejemplo: leptospira).
Cuadros respiratorios y/o oculares (ejemplo: IBR, DVB, haemuphylus somnus).
Diarreas (ejemplo IBR, DVB).
Ulceras (ejemplo: IBR, DVB).
Considerando la complejidad que tiene este tema solo se ataca el problema desde el eslabón más visible que es el aborto, y como expresamos anteriormente, este suele ser el desenlace de una infección ocurrida tiempo atrás.
Con la abundante y variada sintomatología que ofrecen los distintos agentes infecciosos, es importante dar al diagnóstico un enfoque global para poder ordenar una metodología de trabajo.
Existen enfermedades que afectan el resultado del servicio, provocando infertilidad transitoria o permanente, mortalidad embrionaria, bajando considerablemente los porcentajes de preñez; es el caso de las enfermedades venéreas.
Otras expresan su patogenicidad a lo largo de todo el ciclo, con una amplia gama de complicaciones; como ocurre en las enfermedades virales.
Los demás patógenos en general actúan en los dos tercios finales de la gestación y en el periparto.
ANTECEDENTES DEL CASO: Debería incluirse:
Número de animales afectados.
Estado de gestación al momento del aborto.
Abortos previos en el rodeo y en los mismos animales.
Incorporación de animales al rodeo, cambios en la alimentación, u otros aspectos del manejo.
AGENTES ETIOLÓGICOS:
Causas infecciosas de origen bacteriano:
Brucela abortus: enfermedad zoonótica. Produce grandes pérdidas económicas en la producción debido a problemas reproductivos, entre ellos, abortos, neonatos débiles, metritis, subfertilidad o infertilidad. Los animales infectados eliminan brucella al medio, contaminando el ambiente. La eliminación es particularmente importante durante el aborto o los partos infecciosos. La eliminación continúa durante los 45 días posparto. La leche es también una vía de eliminación significativa y fuente de infección para el hombre. Los neonatos pueden adquirir la infección in útero o al nacer. En algunos casos, las hembras pueden contraer una brucelosis latente que, epidemiológicamente, es de especial peligrosidad ya que, siendo indetectable por las pruebas de diagnóstico habituales, los animales pueden terminar abortando en su primera gestación y contaminar así el medio con brucella. Numerosas especies salvajes pueden infectarse con brucella y, en algunos casos, se sospecha que pueden mantener y transmitir la infección a los animales domésticos.
La brucelosis está distribuida a nivel mundial, siendo pocos los países que han declarado estar libres de ella.
El feto entero es la mejor muestra para diagnosticar un aborto por brucelosis. Es conveniente, siempre, acompañar al feto con la placenta y suero de la madre. Puede ser detectado por inmunofluorescencia directa (IFD) y, simultáneamente por cultivo. La ventaja de la IFDes la velocidad, ya que se puede arribar al diagnóstico en el mismo día.
Campylobacter sp: el género campylobacter causa enfermedad en animales de producción que ocasionan importantes pérdidas económicas y varias especies tienen carácter zoonótico. Tienen una distribución mundial. Casi todas las especies se encuentran en el tracto entérico de los mamíferos, aves, reptiles, moluscos e incluso insectos, estos últimos actúan como vectores mecánicos. La transmisión más frecuente es por vía oral, por medio de alimentos o agua contaminados, aunque algunas especies que habitan el tracto genital se transmiten por vía venérea. Cuando la enfermedad se produce por bacterias adaptadas para producir infecciones específicas del tracto genital se produce infertilidad y mortalidad embrionaria, como ocurre en los bovinos. También provoca abortos esporádicos, que no van más allá de la mitad de la gestación.
Son bacilos curvos, espiralados o con forma de “s”, gram-negativos. Generalmente tienen un solo flagelo o en ambos polos, siempre sin vaina de cobertura. La motilidad de la bacteria es característica y en forma de tirabuzón. Son microaerófilos. No oxidan ni fermentan los carbohidratos. En el macho se localiza en las criptas prepuciales y en el glande del pene, mientras que en la hembra coloniza principalmente el área cervico-vaginal. El toro es un portador asintomático que transmite y difunde la enfermedad durante la monta natural o bien indirectamente mediante inseminación artificial.
Las muestras apropiadas son la descarga genital de la hembra y el feto abortado. El método utilizado es la IFD. También puede hacerse el diagnostico por aislamiento de Campilobacter en medios especiales.
Son microorganismos de forma helicoidal; cada célula posee un cilindro protoplasmático con 18 o más giros, que forma una espiral apretada. Son flexibles en uno a ambos extremos presentan una forma típica de gancho y sus movimientos característicos aparecen como una rotación alternada del axis y traslación, sin diferenciación de polos. Una membrana o envoltura externa recubre al microorganismo. No pueden visualizarse con el microscopio de luz transmitida y se tiñen mal con los colorantes de anilina. Para observarlas es necesaria recurrir al microscopio de fondo oscuro.
Las leptospiras son parásitos de animales domésticos y silvestres. Entre los mamíferos, los roedores (ratas, ratones) son sus reservorios más importantes. Por su contacto con el hombre los bovinos, así como también porcinos, equinos y caninos también generan brotes de leptospirosis. La orina de los animales infectados constituye el vehículo primario por el cual se produce la transmisión de leptospiras entre ellos y el hombre. La puerta de entrada puede ser a través de lesiones cutáneas o por las mucosas.
En los cortes histológicos en el feto se puede observar ictericia generalizada y lesiones a nivel renal y hepático. La leptospirosis puede ser diagnosticada por IFD y confirmarlo por cultivo o histopatología. También es recomendable acompañar el feto entero con suero de la madre, para buscar anticuerpos infecciosos a través de la técnica de Martin y Petit.
Listeria monocytogenes: son bacilos gram-positivos no esporulados, no capsulados, no ramificados, pequeños, casi cocoides, aislados o en cadenas cortas. Son microorganismos móviles por medio de 1 a 5 flagelos. La motilidad es de gran importancia diagnóstica. Poseen un metabolismo anaeróbico facultativo; son aerófilas pero se desarrollan bien en microaerofilia. Son productoras de catalasa y la oxidasa en negativa. Utilizan glucosa y otros carbohidratos.
de preñez; puede existir retención de placenta después del aborto. Se considera que la transmisión se realiza por vía digestiva.
Para el diagnostico se siembran en medios de cultivo comunes, enriquecidos o selectivos.se le realizan pruebas bioquímicas, y luego se realiza la observación de la colonia.
Actinomyces pyogenes: se encuentra comúnmente en la mucosa nasofaríngea. Bacterias gram-positivas, que tienden a crecer lentamente y a producir filamentos ramificados, anaerobios o anaerobios facultativos.
Enterobacterias: bacilos gran-negativos, no forman esporas, son catalasas positivos y oxidasas negativos, son móviles por flagelos perítricos o no móviles, crecen en medios con peptona o extracto de carne sin el agregado de cloruro de sodio ni otros suplementos, se desarrollan bien en agar Mac Conkey, crecen en condiciones aeróbicas y anaeróbicas, fermentan la glucosa a menudo con producción de gas, reducen los nitratos. De distribución mundial, habitan el tracto intestinal de los animales y las personas y contaminan la vegetación, el agua y el suelo.
El aislamiento se realiza en medios no enriquecidos. La tipificación puede ser por bioquímica, serotipificación, fagotipificación, antibiograma, genotipificación, etc.
Haemophilus somnus: genero de la familia pasteurellaceae, microorganismos gran-negativos, no esporulados y que fermentan la glucosa sin producir gas. Ahora conocido dentro del genero histophilus, que crece mejor en medios con sangre, aunque no requiere factores de crecimiento. Es el agente causal de la meningoencefalitis tromboembólica de los bovinos y provoca varias enfermedades sistémicas respiratorias y reproductivas.
considerarse como el principal foco de infección, ya que el microorganismo puede ser inhalado, ingerido o bien transmitido por vía venérea.
En la hembra es causa de vaginitis, cervicitis, y endometritis.
Si afecta al tracto reproductivo de vacas preñadas, la infección producir la muerte del feto durante cualquier período de la gestación, con el subsiguiente aborto e infección uterina. Cuando la infección se prolonga en el tiempo, el proceso infeccioso se extiende a la vagina y el síndrome abortigénico puede repetirse. Otra manifestación clínica es la infertilidad y la consecuente repetición de celos, ocasionando muerte embrionaria precoz.
Para el diagnostico en las características del cultivo son muy exigentes porque requieren el agregado del factor X y V, también en algunos casos un incremento del CO2 en la atmosfera del cultivo, también se deben adicionar antibióticos selectivos. Puede hacerse enriquecimiento previo en caldo (infusión de cerebro y corazón complementando con extracto de lavadura, glucosa, suero) para mejorar la eficiencia del aislamiento.
Streptococcus sp: son gram-positivos, inmóviles y no esporulados, pueden presentar o no cápsula, requieren para su crecimiento medios ricos en nutrientes, son quimiorganotrofos y presentan un metabolismo fermentativo sobre los hidratos de carbono con producción de ácido, pero no gas. Son catalasa negativos y muchas especies son hemolíticas.
Para el diagnostico se realiza la siembra en agar nutritivo y agar sangre, luego se realiza coloración y tipificación
Staphylococcus sp: son gram-positivos, cocos esféricos generalmente dispuestos en forma irregular como racimos de uvas. Son catalasa positivo, inmóviles, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos. Fermentan carbohidratos y producen pigmentos que varían desde el color blanco hasta el amarillo o dorado.
Puede hacerse diagnostico bacteriológico (aislamiento y tipificación), serológico (anticuerpos para antígenos de superficie), lisotipia (fagos para staphylococcus aureus).
bacilos no fermentativos, oxidasa positiva. Algunas especies son productoras de pigmentos solubles en agua. Las causas de la infección dependen del estado del paciente y del ambiente que lo rodea.
Par el aislamiento y la identificación se realiza en medios simples durante 24-48hs. a 35°C, en aerobiosis. En general se pueden tipificar por serología, sensibilidad a bacteriófagos, patrones de sensibilidad a antibióticos, y producción de piocinas.
Acinetobacter sp: bacilos cortos, cocoides, gram-negativos, pleomorficos y a veces presentan aspecto bacilar. Son inmóviles, aerobios estrictos y desarrollan exigencias nutricionales en medios comunes. Son oxidasa negativa y catalasa positivos.
Causas de origen viral:
Diarrea viral bovina (DVB): es un virus del genero Pestivirus reclasificado dentro de la familia Flaviviridae. La enfermedad es de patogenia y presentación compleja, ya que produce muerte embrionaria con repetición de celo, abortos, o nacimientos de terneros malformados, también puede llevar a la parición de terneros aparentemente normales pero persistentemente infectados. Las malformaciones acurren en el sistema nervioso central, ojos, miembros y piel (abortos tardíos sin pelo).
El virus tiene un genoma ARN de cadena simple y polaridad positiva, rodeado por una nucleocápside proteica y simetría poliédrica. Las partículas virales son envueltas con pequeñas proyecciones pleomórficas. En esta envoltura se encuentra una glicoproteína responsable de la generación de anticuerpos neutralizantes. Se replican en el citoplasma, madurando en vesículas citoplasmáticas que se liberan por lisis. Producen cuerpos de inclusión intracitoplasmáticos.
Rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR): la enfermedad es producida por el Herpesvirus Bovino tipo 1 y provoca abortos (generalmente en el último trimestre) o muerte embrionaria con repetición de celo.
El virus persiste en estado de latencia, y reaparece en circulación ante situaciones de estrés (nutricional, climático, infección por DVB, leucosis y de manejo) esta liberación del virus depende del estado inmunitario.
Es un virus ADN lineal de doble cadena, con cápside icosaédrica.
El diagnostico se puede realizar con inmunofluorescencia directa y el cultivo viral. Se puede realizar por del cultivo virológico en monocapas celulares, para tratar de lograr el aislamiento viral. El aislamiento del virus se puede realizar a partir de órganos fetales, siendo el riñón y el pulmón las muestras de elección, o también a partir de hisopados vaginales. El estudio serológico implica la demostración de anticuerpos producidos por el virus en los animales que han tenido contacto con él.
Clamidias y micoplasmas:
necróticas en los cotiledones. Los hallazgos principales en el feto consisten en edematización del tejido subcutáneo y órganos, acumulo de liquido amarillo y a veces hemorrágico en las cavidades corporales, hemorragias focales subserosas y en diversos órganos, degeneración del miocardio y riñones, y lesiones hepáticas.
Mycoplasmas y ureoplasmas.son microorganismos que se caracterizan por carecer de pared celular, presentando un marcado pleomorfismo, a veces son cocos y otras filamentos. Son los microorganismos de vida libre más pequeños. Son causas de varías patologías entre las que se mencionan pleuroneumonías, conjuntivitis, artritis, mastitis e infecciones genitales. Los toros pueden transmitir mycoplasmas por medio de semen infectado y también las vacas podrían transmitir a infección en ambientes confinados. En las hembras se observa la presencia de granulaciones en el epitelio vaginal y descargas mucopurulentas. también se pueden presentar fallas en la concepción y muerte del óvulo. La infección trasplacentaria del feto conduce a la muerte y reabsorción fetal, momificación, malformaciones congénitas, muerte perinatal, nacimientos de terneros débiles, y de menos tamaño que lo normal, que muchas veces no maman.
Protozoos:
El aislamiento del agente a partir de fetos abortados representa un bajo porcentaje, ya que la mayoría de los fetos abortados no se encuentran. Una de las formas de diagnosticarlo es a través de la hembra, tomando una muestra de los flujos útero-cérvico-vaginal después del aborto. Mejor sería el feto abortado, ya que a partir de las muestras que se obtienen, como liquido abomasal e hisopado de fauces se puede hacer cultivo y observación al microscopio.
Neosporosis: causada por un parasito llamado Neospora Caninum. En bovinos, la infección del feto puede dar tres posibles resultados: a) el nacimiento de un ternero con enfermedad neurológica, bajo peso al nacimiento, y a veces con malformaciones. 2) aborto. 3) nacimiento de un portador sano. Estas hembras al alcanzar la edad reproductiva pasaran la infección a su descendencia (transmisión vertical). El aborto se produce generalmente en los 5 y 6 meses de la gestación, pero puede ocurrir en cualquier momento a partir de los 2 meses.
La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es una prueba excelente para esta enfermedad; diagnosticar con certeza un aborto por neospora no siempre es posible. A partir del feto: histopatología, inmunohistoquimica, IFD, PCR y aislamiento. A partir del suero de la madre: IFI y ELISA.
Hongos:
En el aborto micótico la placenta se presenta necrosada y en un tercio de los casos aparecen lesiones de piel. Ocasionalmente infecta los pulmones produciendo bronconeumonía. E l contenido intestinal de los fetos abortados presenta la observación previa coloración abundantes hifas de hongos. Los cultivos de material de abomaso y órganos como pulmón. Permiten el aislamiento del hongo del genero aspergillus.
Candida: candida albicans, habitante normal en el tubo digestivo, mucosa vaginal y bucal. Es una levadura, con pared celular con glicoproteínas, realiza dos ciclos de reproducción.
LA HEMBRA ABORTADA:
A todo vientre abortado se le debería hacer un examen clínico e historial de antecedentes, incluyendo diarrea, cuadros respiratorios, mastitis, etc. durante la gestación.
Se debería sangrar e identificar el/los animal/es en el momento del examen, repitiendo el sangrado a las 3 semanas. El suero puede ser separado y congelado, o remitirse directamente al laboratorio.
Realizar tacto rectal previo a la extracción del mucus cervico-vaginal (MCV) para evaluar el estado del aparato reproductor. Considerar la posibilidad de que el aborto se haya producido hace más de 20 días, con lo cual las posibilidades de aislamiento de agentes patógenos se reduce notoriamente. La obtención del MCV puede realizarse con pipeta de cassou, esto constituye un buen material para enviar al laboratorio. La muestra puede fraccionarse en diferentes medios de transporte para varios patógenos de la reproducción.
LA PLACENTA:
Hacer dos improntas tocando con portaobjetos los cotiledones. Seleccionar cotiledones anormales, si los hubiera.
Colocar muestras representativas de cotiledones y placenta intercotiledonaria en formol al 10%.
Colocar muestras de placenta en un recipiente estéril y refrigerar. NO congelar
EL FETO: puede remitirse al laboratorio lo más rápido posible, tal cual fue encontrado y refrigerado o, en su defecto:
Necropsia del feto en forma estéril, abriéndolo con una incisión en la línea media ventral y separando las costillas. También se puede utilizar la técnica de necropsia usual del veterinario, siempre y cuando se tomen los recaudos de no contaminar as muestras para bacteriología y virología.
Extraer muestras de líquido de cavidad abdominal, torácica o pericárdica para serología de enfermedades virales y neospora.
Usar una jeringa estéril para tomar líquido abomasal, remitir al laboratorio para cultivos la jeringa tapada y refrigerada (NO congelar). Hacer dos improntas con porta objetos del contenido abomasal, dejar secar al aire. Esta muestro se utiliza para tratar de identificar patógenos bacterianos (Brucella y Campylobacter) y parasitaria (tricomona).
Continuar la necropsia. De observarse alteraciones macroscópicas, colocar muestras representativas en formol al 10%. Además, se deberían incluir muestras en formol de pulmón, hígado, riñón, corazón y músculos esqueléticos, aunque estos órganos no presenten lesiones. Abrir el cráneo con una sierra, observar la presencia o ausencia de cerebelo e hidrocefalia (DVB); de ser posible extraer el cerebro y colocarlo en formol. Recordar que para una buena penetración del fijador, las muestras no deberían ser de más de 1,5 cm de grosor y que la relación formol/muestra debería ser 10:1.
Realizar improntas de hígado, riñón y/o humor acuoso para inmunofluorescencia directa de leptospira. Secar los órganos previamente, apoyándolos sobre una servilleta de papel para que las improntas resulten lo más limpias y secas posibles.
PROCEDIMIENTO Y ENVÍO DE LAS MUESTRAS:
El laboratorio debe recibir las muestras lo antes posible. Las muestras se embalan en conservadora de telgopor colocando abundante sachets con refrigerantes o hielo. NO congelar las muestras. Avisar al laboratorio al momento de enviar las muestras.
Incluir los antecedentes del caso y la forma de identificación del material remitido, sobre todo si son muestras de más de un aborto.
Incluir el número telefónico, fax y correo electrónico donde pueda ser consultado si el laboratorio tiene dudas acerca de las muestras o si es necesario enviar algún resultado preliminar importante.
Muestreo de vacas vacías/abortadas:
1. Tomar precauciones personales por el riesgo de adquirir una zoonosis (por ejemplo brucelosis). Utilizar guantes descartables.
2. Si el área vulvar se encuentra limpia, muestrear directamente.
3. Si hay en la zona presencia de heces, lavar con una esponja previamente mojada en agua común (sin el agregado de desinfectantes) y escurrirla previamente o en su defecto emplear una toalla de papel.
4. Hacer una sola pasada con la esponja en el área vulvar desde arriba hacia abajo.
5. Emplear en lo posible la pipeta de cassou, con vainas azules estériles y descartables.
6. Tomar la precaución de manipular las vainas y pipetas con cuidado para no tocarlas en su extremo anterior ni contaminarlas.
7. Abrir la vulva con el pulgar e índice y con la otra mano introducir suavemente la pipeta ya montada, ir al fondo de la vagina y extraer la pipeta haciendo vacío en forma lenta. NO SACAR MUESTRAS DE CERVIX NI DE UTERO.
8. Sacar la muestra e ir sembrando en los medios en el orden en que enumeren en la hoja anexa. Con aproximadamente unos 2 ml de mucus alcanza para todos los medios. Al sembrar mucus filante, cortarlo con mismo tapón del tubo ( NUNCA UTILIZAR).
9. No exponer los medios al sol.
Si pese a lo expuesto no se obtiene mucus, se debería: 1. Descartar la pipeta usada en el intento.
2. Emplear una nueva pipeta y cargar 3-4 ml de solución fisiológica estéril (tubos tapa a rosca transparente y largos).
3. Introducir la pipeta primero hasta el fondo de la vagina, luego con la otra mano (previamente calzar un guante de tacto), fijar el cérvix, descargar el volumen de fisiológica en el fondo de vagina y hace una especie de lavaje extrayendo luego la pipeta haciendo vacío. El mucus de vacas en faz progesterónica puede ser semisólida y de difícil extracción.
Medio tipo de aislamiento
Stuart aislamiento bacteriano
PBS IFD de herpesvirus bovino y DVB
Caldo infusión hígado tricomonas
Solución formolada IFD campylobacter Mantenimiento de los medios:
Si los medios no van a ser empleados inmediatamente, lo recomendable es mantenerlos:
a. Caldo infusión de hígado y Hank´s congelados.
b. Amies Cari Blair en heladera a 4° C. los medios sin sembrar pueden mantenerse en condiciones de refrigeración dentro de los 30 días.los congelados se pueden mantener unos 6 meses.
c. Nunca enviar el material sin previamente contactar telefónicamente con el laboratorio.
Serología para brucelosis, neosporosis, leptospirosis y enfermedades virales (IBR-DVB).
a) Se recomienda mandar muestras pareadas (15-21 días después del primer muestreo) para poder determinar seroconversión, sobre todo para leptospira y enfermedades virales.
b) Enviar volumen suficiente (en lo posible 2 tubos por animal) para poder realizar todas las determinaciones necesarias.
c) Se puede extraer el suero (2ml), rotularlo correctamente y mantenerlo refrigerado para el envío inmediato o congelado cuando el envío es diferido.
compatibles con los patógenos de la reproducción. Estas técnicas incluyen: aislamiento viral; inmunohistoquimica; análisis microbiológicos y parasitológicos; inmunofluorescencia, estudios serológicos, anatomía patológica, etc.
Lo importante en todo esto para poder arribar a un correcto resultado o diagnostico es la buena obtención de las muestras o su recepción.
Consideraciones generales y algunas conclusiones:
Para el diagnostico de enfermedades virales, la técnica de aislamiento, es la de elección, pero necesita de material muy fresco y bien conservado para mantener la viabilidad de los virus, ya que los procesos de descomposición o autolisis atentan contra su uso. Se la puede utilizar a partir de los tejidos fetales, placenta (cotiledones), secreciones vaginales y/o uterinas de hembras vacías o abortadas. La desventaja es que en general los porcentajes de recuperación son bajos.
El aislamiento bacteriano depende de una buena muestra. Es importante priorizar los patógenos bacterianos abortigénicos por excelencia: Brucella, Campylobacter, Actinomyces (o Corynebacterium) pyogenes, Listeria, Leptospira, etc. Otros hallazgos como Salmonellas, Cocos gran positivos, enterobacterias, etc, deben ser valorados con más reserva, siendo en general contaminantes post-mortem.
Otros patógenos como chlamydia, haemophylus somnus, hongos en general, mycoplasma y ureuplasma es necesario profundizar en el tema, para buscar su grado de prevalencia.
Las pruebas de detección de antígenos (inmunofluorescencia, inmunohistoquimica), a partir de muestras maternas o fetales, cada vez adquieren mayor dado que no requieren viabilidad del germen.
La histopatología es un recurso excelente a partir de tejidos fetales o placenta, pero para esto es esencial el envío de muestras en formol al 10% para su fijación.
La determinaciones serológicas, tanto del feto como de la hembra, s utilizan para la búsqueda de anticuerpos en Brucella, Leptospira, IBR, DVB, neospora.
En la serología fetal, se debe recordar que pro el tipo de placenta que presentan los bovinos (sindesmocorial), los anticuerpos maternos no atraviesan las mismas, que sumado a la acción inmunodepresiva de la progesterona e inmunodepresión inespecífica de la madre durante la preñez, hacen al embrión y al feto muy susceptible a los agentes infecciosos.
El sistema inmune fetal se encuentra desarrollado entre los 3 y 4 meses de gestación, por lo tanto cualquier agente infeccioso que actúe con posterioridad a esta edad, hará que el feto desarrolle una respuesta serológica. Por otra parte los anticuerpos calostrales están presentes en los primeros meses de vida, por lo tanto es un detalle importante a evaluar en el periparto con los nacidos vivos que alcanzan a tomar calostro, de madres o infectadas naturalmente a determinados agentes. Esto es importante en el diagnóstico de NEOSPORA CANINUM por su condición de infección congénita vertical.
Para la serología materna, es necesario el doble muestreo con un intervalo de 21 a 30 días, donde la 1° se debe tomar al inicio de la enfermedad, a los efectos de observar la cinética de anticuerpos, fundamentalmente para leptospirosis y enfermedades virales.
Una sospecha cierta de estar en presencia del agente en estudio, deberá mostrar una seroconversión significativa, o bien una primera muestra negativa y la segunda positiva, por supuesto sin mediar vacunación de pro medio.
detectables. Si es positiva, pueden ser anticuerpos debidos a una exposición natural, latencia (IBR),en evolución, en estadio de convalecencia o remisión, o bien respuesta vacunal si las hubiera.
Para darle más valor a estas pruebas serológicas (diagnostico indirecto) es importante conocer la fecha de inicio del cuadro en estudio (fecha de aborto por ejemplo).
