NORMA TÉCNICA
NTC
COLOMBIANA
6120
2015-05-20
CALIDAD DEL AGUA.
DETECCIÓN Y RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS.
PARTE 2: RECUENTO DE COLÍFAGOS SOMÁTICOS
E: WATER QUALITY. DETECTION AND ENUMERATION OF BACTERIOPHAGES. PART 2: ENUMERATION OF SOMATIC COLIPHAGES
CORRESPONDENCIA: esta norma es una adopción idéntica (IDT) respecto a su documento de referencia la norma ISO 10705-2:2000.
DESCRIPTORES: calidad de agua; bacteriófagos.
I.C.S.: 07.100.20
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC) Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435
PRÓLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo.
La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último caracterizado por la participación del público en general.
La NTC 6120 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2015-05-20.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a través de su participación en el Comité Técnico 25 Microbiología.
ALIMENTOS CÁRNICOS S.A.S. ALPINA S.A.
ALQUERÍA S.A. ASINAL LTDA.
BECTON DICKINSON DE COLOMBIA S.A. BOLSA MERCANTIL DE COLOMBIA COOPERATIVA COLANTA
GRUPO ÉXITO LTDA.
INDUSTRIAS ALIMENTICIAS ZENU S.A. IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. LABORATORIOS SFC LTDA.
NULAB LTDA.
PAF LABORATORIOS LTDA.
Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las siguientes empresas:
ALGARRA S.A.
BARRANQUILLA LTDA. BAVARIA S.A.
BIOCONTROL LTDA.
COMPAÑÍA NACIONAL DE CHOCOLATES EMPRESA DE ACUEDUCTO Y ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ S.A. ESP. FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A. FRUGAL S.A.
FUNDACIÓN LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA VEGETAL S.A.
GASEOSAS POSADA TOBON S.A. INGENIO PROVIDENCIA S.A.
KOYOMAD S.A. LA CAMPIÑA S.A.S.
LABORATORIO MICROBIOLÓGICO LABORATORIOS CALIFORNIA S.A. LARKIN LTDA.
MEALS DE COLOMBIA S.A.S.
MINISTERIO DE LA PROTECCIÓN SOCIAL PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA PRODUCTORA DE JUGOS S.A.S.
PRODUCTOS LÁCTEOS EL RECREO S.A. SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE -SENA-
VILASECA S.A.S.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 6120
RESUMEN
CONTENIDO
Página
1. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN ... 1
2. REFERENCIAS NORMATIVAS ... 1
3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES ... 2
4. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD ... 2
5. FUNDAMENTO ... 2
6. DILUYENTE, MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS ... 2
6.1 MATERIALES BÁSICOS ... 2
6.2 DILUYENTE ... 3
7. APARATOS Y MATERIAL DE VIDRIO ... 3
8. CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS DE REFERENCIA ... 4
9. MUESTREO ... 5
10. PREPARACIÓN DE LOS MATERIALES DE ENSAYO ... 5
10.1 CULTIVO Y MANTENIMIENTO DE LAS CEPAS HUÉSPED ... 5
10.2 CALIBRADO DE LAS MEDIDAS DE ABSORBANCIA PARA EL RECUENTO DE MICROORGANISMOS VIABLES... 6
11. PROCEDIMIENTO ... 7
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 6120
RESUMEN
Página
11.2 PROCEDIMIENTO NORMALIZADO ... 7
11.3 MÉTODOS PARA MUESTRAS QUE PRESENTEN UNA ABUNDANTE FLORA BACTERIANA ... 8
11.4 MUESTRAS CON BAJO RECUENTO DE FAGOS ... 8
11.5 ENSAYO DE PRESENCIA/AUSENCIA ... 9
11.6 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ... 10
12. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS ... 10
12.1 PROCEDIMIENTOS DE RECUENTO DE PLACAS DE CRECIMIENTO ... 10
12.2 ENSAYO DE PRESENCIA/AUSENCIA ... 11 13. INFORME DE ENSAYO ... 11 BIBLIOGRAFÍA ... 17 DOCUMENTO DE REFERENCIA ... 18 ANEXOS ANEXO A (Normativo) MEDIOS DE CULTIVO, REACTIVOS Y DILUYENTE ... 12
ANEXO B (Informativo) DESCRIPCIÓN GENERAL DE LOS BACTERIÓFAGOS ARN F ESPECÍFICOS ... 15
ANEXO C (Informativo) CULTIVO DEL BACTERIÓFAGO X174 ... 16
FIGURAS Figura 1. Matraz cónico nefelométrico para el cultivo de las cepas huésped ... 4
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 6120
RESUMEN
1 de 18
CALIDAD DEL AGUA.
DETECCIÓN Y RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS. PARTE 2: RECUENTO DE COLÍFAGOS SOMÁTICOS
1. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN
Esta norma especifica un método para la detección y recuento de colifagos somáticos por incubación de la muestra sobre una célula huésped de una cepa adecuada. El método puede aplicarse a todos los tipos de agua, sedimentos y extractos de lodos, tras dilución si es necesario. El método puede aplicarse también a extractos de moluscos.
En caso de baja población de fagos, puede ser precisa una etapa de preconcentración, para la cual se desarrollará una norma distinta.
NOTA Es deseable que las normas se adopten lo más ampliamente posible. Esta Norma incluye referencias a procedimientos alternativos que evitan la necesidad de usar materiales o equipos muy costosos de los que puede no disponerse en países en desarrollo. El uso de estos procedimientos alternativos no afecta al funcionamiento de este método.
2. REFERENCIAS NORMATIVAS
Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicación de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica únicamente la edición citada. Para referencias no fechadas, se aplica la última edición del documento normativo referenciado (incluida cualquier corrección).
NTC-ISO 5667-1:2010, Calidad del agua. Muestreo. Parte 1: Guía para el diseño de los programas de muestreo.
NTC-ISO 5667-3:2004, Calidad del agua. Muestreo. Parte 3: Guía para la conservación y manipulación de las muestras.
NTC-ISO 80000-1:2009, Cantidades y unidades. Parte 1: Generalidades.
ISO 3696:1987, Agua para uso en análisis de laboratorio. Especificación y métodos de ensayo. ISO 5667-2:2006, Calidad del agua. Muestreo. Parte 2: Guía para las técnicas de muestreo. ISO 6887:1999, Microbiología. Guía general para la preparación de diluciones para examen microbiológico.
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 6120
RESUMEN
2
ISO 8199:2005, Calidad del agua. Guía general para el recuento de microorganismos sobre medio de cultivo.
ISO/IEC Guía 2, Normalización y actividades relacionadas. Vocabulario general.
3
.
TÉRMINOS Y DEFINICIONESPara los propósitos de este documento normativo se aplican los términos y definiciones incluidos en la Norma ISO/IEC Guía 2 y además los siguientes:
3.1 Colifago somático. Virus bacteriano capaz de infectar cepas seleccionadas de Escherichia
coli (y otras cepas relacionadas), fijándose sobre la pared bacteriana al comienzo del proceso de infección.
NOTA Los colifagos somáticos provocan la aparición de placas de crecimiento visibles (zonas de lisis) sobre un crecimiento de fondo de bacterias confluentes desarrolladas en condiciones apropiadas.
…
BIBLIOGRAFÍA
[1] HAVELAAR A.H. y HOGEBOOM W.M., Antonie van Leeuwenhoek, 49, 1983, pp. 387-397.
[2] GRABOW W.O.K. y COUBOROUGH P., Appl. Environ. Microbiol., 52, 1986, pp. 430-433.
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA
NTC 6120
RESUMEN
3
