CHBSTBB JOHN DBLVALLX PUGCA MARIO ERNESTO VARGCAS WAZALEZ

ülVIVEBSIDAD AUTONOMA MBT'ROPOLITAHA IXTAPALAPA

J

REWRTX! FIIiIALr CUBS0 pbuL(yJ?ICO DE HICROBIOLOGCIA AGRICOLA

J

CHBSTBB JOHN DBLVALLX PUGCA

MARIO ERNESTO VARGCAS WAZALEZ

In. en C. DAVID W R O Z W N Z W Z J

Indiscutiblomente, e l hecho de hawoontribuáda a impartir e1 ~ U T I I O pr6cticm de l a r a t e r i a *licm>bis;Lo&r

Agrfcola", se tradujo

en

un muplio logro de objetlroa;

d g u n o e de 1 0 8 cuales es necesario cuestionar en f o i u i d s detalladm daoido a l a Importancia que rccpmsenhen,

tanto en expezdenola de tipo doeente como en inquietudes dentro de1 campo de l a investigación. A continuacidn se- rán expuestoa.

I

.

E.. importancia de l a comprensibn de l o s conceptocr b b i c a s

en

e l $rea de miarobiologfa &cola.

Con l a experiencia adquirida, u08

fd

posible reafir- m a r e1 entendimiento de conaeptos

_muy

Importantes, t b l e s o m o :

a) Características y propiedades de loa sueloe. (Ph, hum- dad, capacidsdi de retención de agua, porosidad!, deter-

minación de l a textura _{tanto en e l laboratorio} oomo en e l campo3 reconocimiento de iuz p e r f i l de suelo y l a din-

tribucidn de los microorgeaieiaos en e1 mismo, l a capa- cidad do intercambio catiónico, etc.)

c ) Bbconocimiento da l o s microorgrrnignos del suelo.

d ) ütilimaci6n de l o s d t o d o s nicrobiol6gicos pamr dete- minar l a s deficiencias minerales de 108 suelas.

e)

Da

actual inteids, l a fijacidn biol6gica del nitrége-

no atmosf6rico tanto

en

cereales como en 10gciminOeM.

?) Waluacidn de diversas clases de abonos orgbicoe me- diante l a cuantificaci6n de l a evoluei6n de C%,

Cabe seaslar que fui necesario profunacew en l o s te-

mas anteriores, debido a l a motiraci6n que hubo por ZIbs aiumnoa y tambih por parte del profeaor titular de 08- ta materia ( 1.

en

O. David W o e Qsnsales).

11. Aptitudes para l a doconcia.

Beta modalidabc de servicio social nos pezmite definir aptitudea para l a actividad docente, al proporcionanios un marco de referencia d a ; eingIli0 y a s í saber a i se Cuen-

ta con l a capacidad de transmitir e l conocimiento.

111. Brilaaidn maestro

-

aimno.

lbtreclwiaente ligada al punto anterior, está l a bu- comprensibn de esta importante reiscibn maestro-aimno.

%partir clases a l a vez que se continúa siendo al-o, permite un m a f a r nivel de confiansa y por l o tatnto una roiacidn aaiietoaa en l a que existe e l derecho de c i t a r de manera apropiada 106

errores

cometidos por ambaa par- tes y corregirlos satisfactortgaente. ñubo amplia opor- tunidad de discusión, cueetionamiento, consulta, aele,

raciones y conclusiones entre ambas partas. IV. Análisie de gntgoe.

Los

grupos a l o s que se les impartid e1 curso constamn aproximatiamente de 30 alumnos csda uno, teniendo esto e l

inoonveniente de que a l ser grupos algo

numerosos,

no se

cuenta con e l materid. d i c i e n t e ; l o o u a l l o s peajudica a elloe y también a l a slims universidad.

Se impartieron un t o t a l de 9 prdcticas,

una

por semana eon

su

respectivo extben; e1 método pare e v a u a r a l o s

alumnos fue el siguienter Se proporcionaba l a llteratu- ra que m e j o r ilustrara el tema oon una semana de antlcl-

pacidn para que fuera consultada con tiempo suficiente,

kt dbra~idn de l a p r b t i c a era de

3

horas, durante 10 cual se bw8aba e1 moiente adecuado para l a eve;Lwci6n, teniendo esta m a dunrcidn de 35 min. Cada equipo esta-

ba formado por 5 alunnos, por l o que se folaaron 6 equi-

pos.

V.

Pr6cticas reslisadas f evaluación de l a s mimas.

Las p d c t l c a s en sf son bien reprementativam,

lo&-

dose una buena correlacidn teórico-práctica, esto es de- bi48 a que e1 r i t m o adecuado

en que

se impartid l a teorta

pezmiti6 e l acopleaiento deseado; de esta manew e1 alm-

no l l e g a a l laboratorio con l a s bases neaesariaa, propi-

ciando e l buen desarrollo de l a mima. El m6lisim de 1 n práaticea que se desarrollaron es e l siguiente:

m t l c a No. 1

"'ZL

PERFIL

DEL SUBLO

Y RECOLECCIOñ

DB

lUUBSTRAS PARA

EL

BSTUDIO MICROBIOLOOICO ''e

Se llevd a cabo escogiendo un s i t i o de mueatreo adecua- do, escogiendo e l material id0neo para realisarlo, con l o que se cumplen correatamente l o s objetlvss:

a) tener l o s medies para conocer los horisontes de un p e r f i l

b) mceleetsr una muestra adecuada de suelo para su estudio posterior

en

l a s práoticas si&.rPaom.

PrBetica No. 2

IS pH, COi@TEñIDO

DE

AUIEDAO, CAPACIDAD DB RBTEIICIOI

DB HoI&

DAD Y POROSIDAD DEL SUELO, AS1 COMO SA BELACIOR QW GUAR-

D M COR EL DESARROLLO MICEOBIOLOGICO

DBL

BISMO

".

Utilizando parte del suelo recalectado, se l e detemi- no e1 contenido de hmiedad, (dado

en

$); l a pornaidad del

susio (que imaluje aonecer l a densidad rea y aparente),

y l a textura del suelo (en base al triengPlo de l a s tex- turas).

Esta pr6ctioa es muy ilustrativa y sencilla de realism, contdadose con e l material suficiente, a excepcibn de l a s mezcladoras y e l hidrhetro de Bouyeucos, que emtaban dim-

ponibles en forma limitada.

Práctica No. 3

IS DETERMIRACION DE L A MATKRIA OBGAllICA IS

Se u t i l i s a e1 i6tode qufmiaa de Walkley y Blsck, l a

cual se basa en una reaccibn de tips oxidativo.

Tenanos

entendido que se reaiiea en cualquier laboratorio de an&

Prdctica No. 4

*

CAPACIDAD DE INTERCMBIO CATIOHICO TOTCllt ( C.1.C.T.) u

Los

mdtados para l a deteniiaaeidn de l a C.I.C.T.

son

re- lativamente sencillos. Se fundamentan principslPrente

en

l a sa~umioibn de1 suelo, arc ill^ o sistema radicular, con

ai& ostión, se elimina a i exceso de 6ste J se reemplsaa

d e l complejo adaorbente por otro fón de f a c i l ouantiffca-

cibn. Bbta práctica es de gran importancia

en

l a nutri- cidn vegetal.

*&otica

Bo.

5

u BIAHElo CUALITATIVO Y COAñTITATIVO DE LA MICROnOBA

DEL

SUELO

Es l a prgctiaa más laboriosa de todo e l curso dada l a

canticlad) de medios de cultiva que es necesario preparar para poder observar y ouantificar

Bongos,

algae y baete-

rías.

Las dificultades que presenta 8621:

-

Contar con e l equipo neoesario para M . i a s c a j m de

pmtri con diferentes medios de cultivo J diferenten

diluciones.

-

Contar con todos l o s colorantes utilizados para e l exá-

men cualitativo, como e1 a a u i de metilana, ácido lácti-

-

Mantener l a incubacibn con una duración de 00hO dfaa bajo las uondiciones suipridm y luego poder ruaiisar las observaciones correspondientes.

Práetica ño. 6

(I =OD0 MICBOBIOLO(ZICO PARA L A ESTIMACIOñ DE DBFICI#N- CIA3 MIIIRWALES

EN

LOS S ~ M I O S

Se Utili%a e l Ol&OdQ de Rehlich, ya que pemlte dütOmi-

nar l a f e r t i l i d a d de un suelo, deteminando

en

e l d o m o l a presencia de c i e r t o s grupos microbianos que reaiisarr funciones especfficas fundamentales como

són,

entre et-, l o s W r l f i c a n t e s y gionifiaentes; responsables de l a mi- neralieaci6n de l a materia orgánica y e l grupo de l o s ce- lulolfticos, responsables de l a degradaci6a de l a celulo- sa, hemfceiuioss, iignina, etc. Lo8 problemas que aquf me

preientaron fueron l a incapacidad por parte de l o s alum-

nom

para hacer en f e m a correcta una curva de calibr~1ci6n,

Prdctica No. 7

FIJACIOR DE NITROóBñO

Eñ

QBMINBAS

"

Práctica aiteunente ilustrativa, ya que se observa per- fectéirnente e l efecto de l a fijaci6n biológica del nitró-

geno atmosférico mediente l a seociaci6n de A S Q S P ~ ~ ~ ~ ~ U B sp.

con ai& cereal.

Kl

principal problema a l que se enfren-

t a uno aquf, es l a carencia de blotina y aiguPos otros

compuestos necesarios para e l medio nutritivo de Jensen.

ñ l laboratorio no l o s proporttion8 por f a l t a de or8aniea- cidn

en

sus i n v e t a r i o s de reactitoa así como por e l ai- t o costo de algunos como l a biotina, por l o que es d i f i - c i l contar con l o neaesario para r e a l i z a r eatisfaatoria- mente l a pdctica.

Práctica No. 8

irFIJACION DE HITBOGEAO ATMOSFBRICO POR =%Obiria UP.-

LJSGUMINOSAS

se puede considerar como l a p r h t i c a que mayor importan- cia representa, ya que se comiensa a realizar d e d o el principio del curso, obteni4ndose l o s resultadom _{a l} fi-

nal de eiste.

Xi

experimento se l l e v a a cabo en l a s "ja- rras de Leonard", acondicionadas por l o e propios alumnos

Durante e l desarrollo del experimento se maniejan una serie de testigos positivos y negativos, l o a cuales sirven de

referencia para encontrar

si

l a cepa con l a que se inocu- l a resulta efectiva o n6 para f i j a r bioldgiceniente e l ni- trdgeno atmosférico y a mu ve5 preporcio&selo a l a plan-

ta.

Los

testigos positivos ser& aqueiloe

en

loa que se sdicione nitrdgeno a l a planta, siendo

las

negativos l o a

que uaresoan de este elemento.

A i f i n a l i z a r el experimento se intenta recuperar l a bac- t-ia utilizada a partir de los nddulos formados; a s t o no

se consigue siempre debido a c i e r t o s descuidos por parte

del aluisno tanto a l a hora de inecular e m 0 dunaate e l

tratamiento a seguir en e l resto del experimento.

ñ7lotica ña. 9

N' TRANSFORIACION MICROBIOLOGCICA Eil EL SüBLO

Se tiene que evaluar l a transfomaci6n que llevan a ca-

CONCLUSIONES GERgRALES.

La mayorfa de las pr6eticaa cumplen bien con sua obj+ tivos y ae correlacionan adecuadamente con e l material 8x1-

puesto en l a teoría. ai cae1 todas se cuenta con e l materiai adecuado y suficiante; sin embargo, existen probl- ercter-

nos paxa conseguirlo

en

determixWías ocssionss, generalaen- t e cuanda se trata de materlal o reaetiros caros, por 1 0 qw

su

disponibilidad eat4 limitda o es inexiatente.

Tanbián es noteria l a fd.t8 de nsP3to psr parte de

em-

tudiantes y profesores ajenoa a l laboratorio

en

Cuento a que

alteran, aastmyen o contaminan e1 material J las condicio-

nes a l r e a l i z a r incubaoiones proloagadaa O al p.nefmaterial a pea0 constante, si&i colocando advertenciaa ae *U0 TOCAR", *TEIIPERATURA A 37"cn. etcf cerrectaaente settíaiaaa.

m

cuanto a l a e e ~ o l i o del curmo, e1 mátodo pars l a e-

valuacidn consistid en exminar semanaente a l e s alueaea), i o cual pennitib al alumno famkiiariaarse con l a pi'datica que BO tretaria l a siguiente sesibn, así como e1 tema a 0x8-

minar

en

l a pidxima ev&iuacibn, mátodo a u t i l i z a r , material requerido, etc. Todo esto, permite que e l alumno participara

l o cual consideraiaos que e l método es baatante aceptable. A l a vez,

nos

penaite evaluar y estimular al alumno, evitando l o s ineficaces y faatidiosos reportes acostr~ibree dos en otros mitodos, que no garantizan l a partiaipc~idn r e a l del diunno, y se prestan a ser simplemente 'copiadosw.

Hay que hacer

mencibn

que en todos l o s caso6 l a biblio- graffa

fu4

l a aüecuaüb y auiiaiente para poder subsaaar cual- quier duda sobre e l t a a

en

cuestibn.

Queremos hacer notar e l problema tan grave que se pre- senta contínueiente

con

el personal encargado de l o s labara- torioa, quienes faltan Continuamente o llegan tarde o se aa-

sentan durante e l desarrollo de l a práctica, causando esto un grave problema en a l cuniplimiento adecuaüo de Batas, ya que tanto nosstroa como e l profesor de l a teorla y e l coor-

dinador de l o s laboratorios hemos tenido que

propercionar

e1 material que ae va a utilizar.

SUGEREHCIAS.

a) Sustituir o modifícar l a piíotica ñe. 4, l a c u i

no

I

-C ) ~ e v i s a r l a s prácticaa frecuentemeate por l a dificul- tad que presentan para su realieurién algunas de ell-, oomo por ejapio, debido a l a impesibilidad de conseguir 2VmQtiVUSP colarantes especiales, nutPiiente8, o bien, eqdpos especiales

O ae &to costo.

a)

mevar

a cabo pdctieaa que traten e l ciclo del 16s-

f o r o y de ser posible e1 del acufre, debido a que estos s6n

ot roa macrselement os importaut es.

MnaJmente hacemos incapi6 despu6s de haber cum&o no- sotrora otras materias como Ucrobiologfa Industriai

luacibn de bropetos donde ae menciona e l tema de inoculantea para leguminesas, l a importancia de l a Ucrobielogfa Agdcola, ademáa de que gran cantidad de microorganisaos inausti-islnen- t e utiliesdos provienen del suelo; por l o anterior aoncluíaaoa que este curs0 cumple amplicraente con au ewetive dentro de l a carrera de Ingenierfa Bioqdmlca Industrial.

J

Eva-

BH7VE DESCRIPCION DEL PSOYECTO.

Las pr&ctrcas a r e a l i z a r i s h 9, de enumeran p describen a con% intlsc i 6x3.

Pr4ctica No. 1 PEXPIL DEL SUELO

Y

MCOLS'XION DE XüESTRAS PQ.4 E s T ~ D I O MIC~DBIOLOCICO'! Interpretar l a s propiedades y ca- r a c t e r i s t i c a s de los horizontes de un p e r f i l y l a distribución

de los nicrooDgm-ismos a través de e l l o s , asf como l a recozec-

ción da suela para estudio microbioldgico.(refE 1, 2, 3, 4 ) .

Práctica No, 2 -'*pH, CONTENIDO DE HUMEDAD, CAPACIDAD DE ELE2ENCION DE 4CTJ4, PORCENTAJE DE POROS Y 'TEXTURA DEL SUELO." Deteminar algunas propiedades f í s i c a s y fisicoqufmicas d e l suelo y l a re- lacidn que guardan con e l desarrollo microbioldgico d e l mismo,

(ref. 5,6,7, Y 8).

Práctica No. 3 -nDET!ERFAINACION' D a L A MATERIA ORGANICA". Deteminar e i porcentaje de materia orgánica e l c u d ser4 de amplia impor- tancia debido a l a s propiedades f f s i c a s , químicas y biológicas que l e proporciona a i suelo y , por l o tanto, juega un papel muy importante en l a f e r t i l i d a d d e l mismo. (ref. 9, 10, 11 y 12).

Práctica No. 4 -n DETERWINACION DE L A CUACIDAD DE INTERCAMBIO CATIONIC0 Dl3 ON SUELOev. Deteminaci6n de l a C . I . C . T . de un suelo e l cual es un f a c t o r predominante en l a caracterización d e i t i p o de suelo a s í cono de su f e r t i l i d a d relativa. (ref. 13,14 y 15).

L

s

Práctica No. 5 -"EXAMEN CUPJIFIATIVO Y CUANTITATIVO DE LA MICRO- FLORA DEL SUELO (Método de Rossi y C h o l o d n y ) . Observar #*in situn l o s cambias en l a poblacidn microbiana, asf cono l a s relaciones que existen con l a s partfcuias de suelo y con l a s r a f c e s de l a s

m r u

que producen d i v e r s a s substancias al adicionarse al suelo sobre e l

número t o t a i de rnicroorgmismos y e l c u a l s e c u t i f i c a r 4 por e l

medio de d i l u c i ó n de suelo. (ref. 1 6 ,

17,

18 y 19).

Práctica No. 6

-

"MET030 MICROBIOLOGICO PARA LA ESTIMACION DE LAS DEFICIENCIAS MINERALES EN LOS SUELOS"( ?rlEHLICH). U t i l i z a r Un micro- organismo (-4. niger) como indicador b i o i o g i c o para medir e l f ó s f o - r o y potasio a s i m i l a b l e s en e l suelo y de e s t a manera c o n t r i b u i r a l a determinación de l a f e r t i l i d a d d e l mismo.(ref. 20, 2 1 y 22).

Y-.

k

.

-Práctica No. 7 UFIJACION DS NITIiOGENO EX GRNJINYAS? Observar e l e f e c t o de l a f i j a c i ó n de nitrógeno atmosférico mediante l a asocia- c i ó n de Azospirillum con algún c e r e a l a d como s u consecuencia en

l a agricultura. ( r e f . 2 3 , 24, 25 .p 26).

Práctica No. 8 -"FIJACION DZ NI'PROGENO kl?i?OCFERICO POR RHIZO-

BIüK- LEGWINOSAS. Observar l o s b e n e f i c i o s que s e obtienen a tra-

vés de l a inoculación de Leguminosas mediante e l r h i z o b i a corres-

pondiente comparando c o n t r a t e s t i g o s s i n inocular p adicionando

al&n f e r t i l i z a n t e nitrogenado. ( r e f . 27, 28 y 29).

,*

í-

_L

Práctica No. 9 -"TRANSPOIW.~CION ?TICROBIOLOGICA EN EL SUELO" (evo-

l u c i 6 n de C02). Evaluar l a transformación que l l e v a n a cabo l o s rnicroorganismos d e l suelo al adicionar diversos substratos y cuan-

t i f i c h d o el C02 poducido mediante volumetrfa. ( r e f . 30, 31 y 32).

1.: Thompson, l,.M., 1974. "El suelo y su F e r t i l i d i c . ' . Ed. Revertb, S. A.

,

Barcelona, Espa5a. pp. 3-13.

2.- J o b a s o n , L.F. and Curl, F.A., 1972, "Methods f o r Research on t h e Ecology o f Soil-Sorne Plant Pathogene". Suroess Fublishing

CO., MM., U.S.A..pp. 1-5.

3.- Parkinson, D..and Gray, T.R.G. and W i l l i a m , S.T.,1971. "Methods for Stud~ring t h e Ecology o f S o i l iviicroorganims". IBP Handbook

No. 19. I n t e r n a t i o n a l E i o l o g i c a l ?rograme. Blackwell Scien-

t i f i c Publishing Co. Oxford and Edinburgh. pp. 5-17.

4.- O r t i z Villanueva, B., 1975. "Edefologfa". 22. Et. Escuela Ha-

c i o n a l de Agricultura, Chapingo, Wéxico.

5.- Robinson, W.G., 1967. "Los suelos". Edit. Gmegz, S.A., Barcelo-

n a , España. pp. 489-496.

6.- Pramer, D.& Schmidt, E.L., 1965. "Experimental S o i l Microbiolo-

gy". 2nd.Ed. Burguesa Publishing Co., Idinn. U.S.A. pag. 6. 7.- Thompson, L.M. 1974. *Ti Suelo y a u Fertilidad". Ed. Reverté,

S.A., Barcelona, España, pp.30-35.

8.- BOU~OUCOS, G.J., 1936. "Direction f o r M a k i n g Xechanical Ana-

lysis o f S o i l s by t h e Hidrometer Method**. S o i l Science

-

42:

-

i

r

8 22 5-2 30.

9.- Jackson, L.K. 1970. " A n a l i s i s químico de Suelos". 2a. Ed. e d i -

t o r i a l Omega, S.A. Barcelona, España.

10.- A l l i s o n , F.E. 1973. " S o i l Organic Matter and i t s Role i n Crop

Poduction". E l s e v i e r S c i e n t i f i c Fub. Co., New York.

11.- Buclannn, L tc Brady, N.C. 1974. "Tne Nature and Properties of

S o i l s " . Tflc M i l l a n Pub. Co., New 'Tork.

i

. .

. ,

i;

: ' t

f i

1 2 , - i y d k l e y ,

13.- Jackson, W.L. 1970. i*An53is:is ?ufniico del .juelo'*. _22. ed. q. @ ~ l n c k , 1 . 4 . . 1'934. ;;oil Sci"rr.-e,

ai

2':-38.

. E d i t o r i a l Omega, Barcelona, Espafia.

14.- Chapr?.m, H.D. ?t Parker, D.. 1973. "Xétodo-i de An$.liz.is p a r a

Suelos, plantas y Aguss?*. Ed. T r i l l a s , MBxico.

15.- RuuscelP, E.J. 1962. " S o i l Conditions and Flant Growlh". ísd. Longrianc.

16.- Burguess, A. & Raw, G. 1971. "Biologfa del Suelo" Ed. Omeea, .~

S.A., Barcelona, E s p a k .

17.- Garassini,, A.L. 1967. "Microbiologfct .Qr¿?.ria'*. Universidad

Central d e Venezuela.

18.- .Alexander,, M. 1961. '*Introduction t o Soi:.. fi:icrobiology'*. Ed.

J 0 . h \Viley & Sons, Inc. New York.

19.- P r m e r , D . & Schmidt, E.L.., 1965. "Bxperircental Soii Micro- biology". Bur?uess Pub. Co.

20.- Garassini,, A.L. 1962. "EXL Suelo y su

Microflora"'.

Rwista de

la. Facultad de @ m o m i a de l a U. Central C:e Venezuela, pa& 15. 21.- Tissdale, S.L. & Nelson, W.L. 1970. " S o i l F e r t i l i t y and F e r t i i i -

zers". C o l l i e r , Nc M i l l a n , I n t . ed. pp- &i8-498.

22.- Mehlich, .A., Trueg, E.D. & F r e d , E.B. 1933. T h e .4s?ergillus niger Method of Neasuring Available Potassium i n S o i l l l . S o i l

Science. 35: 259-279. {.''

-7-

c

3

23.- Dobereiner, J. & Day, S.M. 1974. *'-Proceedings o f t h e Piret

International Symposium on Nitrogen Fixation". Ed. Pullman,

v o l . 2 , Washington,D.C. pp. 518-538.

24.- Smith, R.L.. =.ai. 1976. S%íence 193, 100%.

25.- Dobereiner, J. Day, J.M. Et.al. 1972. Joilriial o f General

20.- Cursa sobre .4zoa~irillum- Gramineas por la Dra. Johanna Dobe-

r e i n e r . ENCS- IPN. 12-17 de febrero, 1979. :@xico.

27;- Thimann Y.V. 1901. "The Life of Sacteria". Ed. Mc. ?tillan Co.,

New York. p. 315.

28.- B r i l l , W.J. 1979. 9iitrogen Fixation: B m i C t o A?plied".

h e r i c a n S c i e n t i s t , vol. 67, No. 4 .

29.- Vkncent, J.M. 1975. n:4anual Pl%ctico de ñhizobiología". Ed.

Hemisferio Sur, Buenos Aires, Argentina.

30.- Premer, D. & Schmidt, E.L. 1964. "Experimental Soil Microbiolo-

gy". 3d. Burguess Pub. Co., Wnnesota.

f

31.- Alexander, Da. 1961.I1Introduction t o Soil Microbiology", Ed.

J o h a 'liiley tí Sons. inc. New York.

I _/I

I