INVESTIGACION
Obstrucción de conductos
deferentes con
polimetilmetacriñato
(PMMA) en perros
01/5/03 - Vargas, T, E. / Reynoso, P, A . / Cruz, G, M.0
Escuela de Medicina Veterinaria y Zootecnia (EMVZ) - Benemerita Universidad A utonoma de
Puebla (BUA P) - México.
RESUMEN
El proporcionar una alternativa para la esterilización, mediante la aplicación de polimetilmetacrilato en los c onduc tos
deferentes del perro, es el principal propósito de éste estudio. Se utilizaron 10 perros, machos, con peso promedio de 15 Kg., Y una edad aproximada a los 2 años o superior, todos ellos c on capacidad reproductiva determinada por la presencia de libido y espermatozoides suficientes en el eyaculado. Se realizó la obliteración de los conductos de cada ejemplar por medio de la técnic a de escroto abierto y a partir de las 48 horas postobstrucción, se procedió a la obtención de muestras, corriendo espermatobioscopias en el laboratorio, llegando a un tiempo de 26 días a partir de la inoculación del polímero, siendo nec esarias hasta 5
espermatobioscopias; se presentó azospermia en 2 perros a los 20 días de aplicado el producto; 1 perro a los 28 días y 3 a los 36 días; 4 de los ejemplares no reunieron las carac terísticas necesarias debido a escasez
Enlaces relacionados:
Más articulos en IICVV
Más articulos en
de volumen y baja cantidad de
espermatozoides del eyac ulado. El examen histológico de los conductos deferentes en donde se aplicó el polímero mostró presencia del material en el lumen con infiltración de macrófagos y linfocitos, sin alteración
aparente; por lo tanto, se puede concluir que la utilización del PMMA para la esterilizac ión de los perros, representa un método
alternativo.
INTRODUCCIÓN
En otros trabajos, se han utilizado para obstruir y provocar esterilizac ión, la
aplicación de metilc ianocrilato en la cola del epidídimo, el cual produce necrosis tisular, epitelial de túbulos seminíferos, epididimitos granulomatosa y otras lesiones; infiltración de ác ido láctic o epididimaria, que produc e nec rosis en el sitio de aplicación; vasec tomía y otros que en todos los casos las lesiones que se promueven o produc e el método o los materiales empleados, además de hacer el proceso irreversible, constituye una agresión para los tejidos (8, 14).
En el año de 1998 se publicaron los
resultados de un trabajo experimental, en la tesis de Licenciatura “Obstrucción de conductos Deferentes con
Polimetilmetacrilato en Conejos” por Ángeles, Hernández, Reynoso, y Ávila (8),
constituyéndose el presente como
continuación del mismo, empleando como material biológico de experimentación al perro macho, debido a su ac erc amiento histológic o, anatómico y funcional con el humano; se estableció como material idóneo el
metilo y empleando como catalizador el peróxido de metiletilcetona; dicha reacción, no provoca emisión de vapores y es
isotérmica (9), debido a ello su inoc uidad. Los resultados obtenidos al inocular conductos deferentes de 10 conejos arrojaron por observación histológica, que el material plastific ado adopta la forma de la luz del conducto, manteniendo el conducto su revestimiento de tejido epitelial cúbico simple, aunque modifica las características hac ia el estratificado con denudación y presencia de revestimiento aplanado, produciendo la obstruc ción c ompleta del conducto, manteniendo el animal inalterado su lívido y comportamiento reproductivo (8).
En Méxic o y de manera espec ifica en la Ciudad de Puebla, dado el alto índice de casos positivos de rabia canídea y humana y dada la posibilidad de la reversibilidad en el proceso se han intensificado las campañas de vac unación antirrábica y de c ontrol
reproduc tivo con escasos resultados, debido básicamente, a que un animal vacunado no implica necesariamente que haya quedado inmunizado, principalmente por el manejo inadecuado que algunos voluntarios
aplicadores del biológico le dan al mismo, y a la idiosinc rasia social de no permitir la
castración de los machos, por otro lado el ciclo estral y otras c ondiciones hacen que los propietarios prefieran la esterilización de hembras, hace indispensable el diseño e investigación de métodos alternativos para control reproductivo en cualquier espec ie incluido el humano.
MATERIAL Y METODOS
instalac iones previamente acondicionadas para el efecto, inmueble loc alizado en la Ciudad de Tecamac halc o Puebla a 18° 53’ latitud norte 97° 44’ longitud oeste de meridiano de Grenwich, a una altura de 2013 metros sobre el nivel del mar, una
temperatura media anual de 12 a 18° C y precipitación pluvial media anual de 590.6 mm3.
Se utilizaron 10 perros machos donados por el c entro antirrábico de la SSA en Acatzingo Puebla, con un peso promedio de 15 Kg. Y una edad aproximada de 2 años, todos ellos con c apacidad reproductiva determinada por la presencia de libido y espermatozoides en cantidad suficiente en el eyaculado. Se les alimentó con dieta en base a alimento comercial. Fueron alojados en 4 jaulas de herrería y malla ciclónica con techo de lámina acanalada; se colocaran dos jaulas con dos perros cada una y dos con tres perros.
Polímero comercial Polimetilmetacrilato (PMMA).
Jeringas desec hables de 3 ml con aguja color verde (No.22).
Guantes desechables estériles de látex (cirujano).
Ac epromazina Petrolato
Pentobarbital sódico
Frasco de vidrio estéril para c olección de muestras
Microsc opio óptico con objetivo 40x y cámara de Neubauer
Se determino la presencia de espermatozoides mediante
espermatobioscopía de muestras obtenidas mediante masturbación.
hasta la marc a 0.5, diluyendo con formol al 3% hasta la marca 101, se agita durante un minuto descartando las 2 o 3 primeras gotas, se procede a llenar la cámara de NewBauer en ambas cuadrículas dejando reposar la dilución durante 15 minutos, transcurridos los cuales se observa con el objetivo sec o fuerte (40x), se realiza el conteo espermático en cinco cuadros de cada cuadric ula, se obtiene el promedio y se agregan 6 ceros, llegando de este modo al número aproximado de espermatozoides por c/c de semen; empleando esta téc nic a por ser la más moderna y que reporta mejores resultados. (18).
Una vez certific ada la presencia de
espermatozoides, se realizo la obstrucción de conductos deferentes por inoc ulac ión de 0.2 ml de PMMA en la luz de cada c onduc to, utilizando para ello jeringa desechable estéril con aguja del número 22 (verde); habiendo sedado e insensibilizado previamente a cada ejemplar.
A partir de las 48 horas post-obstrucción, se realizaron espermatobiosc opía semanales hasta obtener un conteo cero logrando con ello la ausenc ia de espermatozoides en el eyaculado (infertilidad). Posteriormente y bajo anestesia se realizo la resección quirúrgica de los segmentos obstruidos de cada conducto para su envío a histopatología y se sacrifico el material biológico con
sobredosis anestésic a.
Una vez obtenidos los reportes del laboratorio de histopatología, se proceso la información para elaborar los resultados, conclusiones, discusión y recomendaciones procedentes. Así como, la impresión del documento final.
No se evaluaron las carac terístic as del
la obtención de eyaculado libre de espermatozoides.
RESULTADOS
Se obtuvieron perros mac hos adultos, mediante donación del centro antirrábic o de Ac atzingo, Puebla; mismos que fueron trasladados a la Escuela de Medic ina Veterinaria y Zootecnia de la BUAP en Tecamachalco, previa sedación con
acepromacina a una dosis de 0.1 mg / kg., se les instaló en las jaulas proporcionándoles agua y alimento dejándolos aislados hasta su total rec uperación.
Al día siguiente, se comenzó el proceso de sociabilisación, introduc iéndose una sola persona a la jaula c orrespondiente para su limpieza, cambio de agua y alimento, permitiendo a los animales que se
acostumbrasen al manejo. Tres días después, los animales empezaron a establecer entre ellos su jerarquización y territorialidad, por lo que para evitar agresiones entre ellos, se reubicaron conforme se determinó el temperamento de cada uno.
A partir de los 12 días de su arribo, se tuvo nec esidad de aislar el lugar de ubicación de las jaulas, pues los animales manifestaban demasiada inquietud con el paso de
personas, por lo que se estableció una malla de alambre como puerta de acc eso, misma que se recubrió con plástico color amarillo que evitara la visibilidad hacia el exterior y con ello eliminar el estrés de los ejemplares.
sufic iente en el eyaculado y baja cantidad de espermatozoides, por lo que se procedió a su sacrificio y se c ontinuó trabajando con los 6 restantes (tabla 1).
TABLA 1. ESPER MAT O BIO SCO PÍAS PR EVIAS A LA O BSTR UCCIÓ N.
Se realizó la obliteración de los conductos a cada ejemplar, teniendo que realizar el procedimiento por la técnica a escroto abierto, ya que la adhesividad de la túnica vaginal del paquete vascular - nervioso no permitió la exposición subescrotal del conducto para hacer la inoculación del polímero de manera cerrada.
Una vez recuperados de la intervenc ión, se corrieron las espermatobioscopias pertinentes a cada ejemplar por semana, hasta la 5a semana donde se obtuvo la azospermia deseada. (Tabla 2).
Determinada la ausenc ia de espermatozoides en el eyaculado, se sac rificó a los animales por sobredosis anestésica y se extirparon los segmentos obstruidos c on el polímero para su envío al laboratorio de histopatología,
conservados en formol al 10%.
El laboratorio de histopatología reportó:
Epitelio Pseudoestratificado cilíndrico.
Presencia de material en el lumen en tres muestras.
Ausencia de hiperplasia en todas las muestras.
Ausencia de necrosis en todas las muestras.
Presencia de quistes moderada en todas las muestras.
Muscular del órgano.
Infiltrac ión de linfocitos moderada en todas las muestras.
Infiltrac ión de mac rófagos moderada en dos muestras con presencia de material y en una sin éste.
Extensión reac ción tisular moderada en todas las muestras.
El reporte del laboratorio nos hace constatar que fue correc ta la inoculación de la resina sin tener lesión a considerar grave dentro del epitelio pseudoestratificado. La infiltración de linfocitos y mac rófagos se da por la presencia de PMMA en el c onduc to, por reacc ión de cuerpo extraño en el organismo.
CONCLUSIONES.
Por los resultados obtenidos se conc luye que:
paso de los espermatozoides.
La inoculación de PMMA no afecta en la libido de los perros, y no los hace modificar su conducta, como en el c aso de la c astración.
Las modificaciones histopatológicas, son ligeras a consecuencia de la irritac ión que sufre el conducto a la exposición de la resina y no varían signific ativamente con respecto a los c onduc tos que se analizaron con ausencia de material.
Los cambios histopatológic os solo se
enc uentran en el lugar donde se deposito la resina, los cuales no son significativos. Por lo tanto se puede concluir que la utilización del PMMA para esterilizac ión de los perros representa un método alternativo y efic az.
TABLA 4. DIAS NECESAR IO S PAR A O BTENER ESTER ILIDAD
BIBLIOGRA FIA .
1. Junque ira L, .C . Ca rne iro J. Histología Bá sica , Ed. Sa lva t, Mé x ico 1997, pp. 463.
2. Ba nk s, W . J. Histología Ve te rina ria Aplica d a , Ed. Ma nua l Mode rno, Mé x ico 1996, pp. 609. 3. Fra ndson & Spurge on, Ana tom ía y Fisiolog ía de
lo s a nim a le s Dom é sticos, Ed. Inte ra m e rica na , 5ª ED., Mé x ico 1995, pp. 389.
4. Le e son. Le e son. & Pa pa ro, Histología , Ed. Inte ra m e rica na , 5ª ED., Mé x ico 1987, pp529. 5. Te stut, L. Ja cob O ., Tra ta do de Ana tom ía
topográ fica , Ed . Sa lva t, 8ª ED., Tom o II, Ba rce lona Espa ña 1979, pp436-438. 6. McDona ld, R e p roducción y Endo crinología
1978, pp . 279.
7. Eva ns & de La hunta , Dise cción de l Pe rro, Ed. in te ra m e rica na , 1ª ED., Mé x ico 1972, pp. 146-148.
8. He rná nde z, M. E. Ánge le s, H. R . R e ynoso, P. A. Ávila , B. R . Te sis Profe siona l “O bstrucción de Conductos De fe re nte s con
Polim e tilm e ta crila to e n Cone jos, EMVZ - BUAP , 1998
9. Hirt & O lm e r. Enciclope dia te cnológica Q uím ica , ED. Hispa noa m e rica na , Mé x ico. 1992.
10. Gra u H. W a lte r P., Histolog ía y Ana tom ía Microscópica Com pa ra da de los Anim a le s Dom é sticos, Ed. La bor S.A., Ba rce lona Espa ña 1975, pp . 127-138.
11. Ha fe s E.S.E., R e producción e In se m ina ción Artificia l e n Anim a le s, Ed. Inte ra m e rica na - Mc Gra w Hill, 5ª ED., Mé x ico 1990
12. . Ha m A. W . Tra ta do de Histología , Ed. Inte ra m e rica na , 7ª ED., Mé x ico 1975., pp. 840 13. Tórtora & Ana gn osta k os, Principios de
Ana tom ía y Fisiología , Ed. Ka rla , 6ª ED., Mé x ico 1981, pp 1109-1122.
14. Pá ra m o, Esquive l, Va le ncia , Ga lvá n . Este riliza ción e n e l pe rro por inye cción de m e tilcia n ocrila to e n la cola de l e pidídim o e n R e vista Ve te rina ria Mé x ico 25(3). 1994. 15. Pa yró D. Jo sé Luis. El pe rro y su m undo. ED.
Loe ra . Mé x .1982.
16. R e ynoso P Ale ja ndro. Protocolo de in ve stiga ción “De fe re ntob lite ra ción con
Polim e tilm e ta crila to; una opción pa ra e l control re productivo” BUAP. Mé x .1997.
17. Sa lva t Editore s. Dicciona rio de te rm inológico de cie ncia s m é dica s. Mé x .1979.
18. Ve la sco V. Miria m , Ma nua l de a ná lisis se m ina l, Ase sore s e spe cia liza dos e n la bora torios, Pue bla , Pue .
19. W a ng, Y. Da i, K. R . De pa rta m e nt o f
orthope d ics, ninth pe ople s hospita l, Sha nga i Se a chond Me dica l Unive rsity. Engla nd. 1993.
