PO61 - Acúmulo de ácidos grasos trans de la dieta en el tejido adiposo materno durante la primera mitad de la gestación en la rata
Encarnación Amusquivar Arias, Giulia Cammarata, Emilio Herrera
Facultad de Farmacia. Universidad San Pablo CEU
Durante la primera mitad de la gestación el tejido adiposo de la madre constituye un depósito de ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) derivados de la dieta, que se movilizan al final de la gestación para su aporte al feto. Hay estudios que demuestran que los ácidos grasos trans (AGt) alteran el perfil de PUFAs con efectos negativos en el desarrollo fetal. Para determinar si dichos AGt también se acumulan en el tejido adiposo de la madre y afectan al perfil de PUFA en la madre, desde el inicio de la gestación alimentamos a ratas con dietas semisintéticas conteniendo un 10% de aceite de oliva, borraja o pescado, o un 8% de aceite de cacahuete rico en AGt más 2% de aceite de oliva, borraja o pescado. A día 12 de gestación la concentración de triglicéridos plasmáticos aumentó por efecto del aceite de cacahuete excepto en los animales alimentados con aceite de pescado. En los grupos de dieta conteniendo aceite de cacahuete frente a los mismos grupos sin este suplemento se observó una alta proporción de AGt en tejido adiposo junto con una menor proporción de ácido araquidónico. Los cambios observados en el perfil de ácidos grasos en plasma e hígado eran similares, excepto en los grupos de aceite de pescado. Así pues, la ingesta de AGt durante la primera mitad de la gestación facilita su depósito en tejido adiposo y disminuye la proporción de otros PUFAs, en especial del araquidónico, lo que podría producir un inadecuado aporte de PUFA al feto.
Ministerio Ciencia e Innovación SAF-2008-04518
PO63 - Inmunoexpresion de MAL-1 y MAL-2, dos elementos de la maquinaria del transporte directo de proteínas mediado por balsas lipídicas (“lipid raft”), en la glándula mamaria durante la gestación y la lactancia
Julio Sevillano Fernández, María del Rosario Rodríguez Ramos, Izabela Zofia Prokop, Alejandro Lafuente Camacho, José Manuel Pozuelo Gonzalez, Miguel Ángel Alonso Lebrero, María del Pilar Ramos Álvarez
Universidad San Pablo / CEU, Madrid
MAL-1 y MAL-2 son miembros de la familia de proteínas MAL implicadas en el transporte y señalización a través de lipid rafts en diferentes tipos celulares. Durante la gestación la glándula mamaria (GM) presenta disminución en el número de adipocitos y diferenciación estructural y funcional de las células epiteliales de los acinos, que permite secretar proteínas/lípidos a la leche durante la lactancia. Para explorar si MAL-1 y MAL-2 participan en este proceso estudiamos por inmunohistoquímica la expresión y localización de estos transportadores en GM de ratas vírgenes, gestantes (días-7, 14, 18 y 20), gestantes tratadas con progesterona, lactantes y lactantes a las que se habían retirado las crías. MAL-1 y MAL-2 se expresaron en las células epiteliales de todos los grupos experimentales. La inmunolocalización de MAL-2 fue más pronunciada en la zona apical mientras que la de MAL-1 fue intracitoplasmática con algún refuerzo apical, indicando un patrón diferente de localización de estos transportadores en GM. A lo largo de la gestación, se observó un aumento de inmunorreactividad para ambas proteínas, siendo mayor en las gestantes a término que en las no-gestantes. El tratamiento de gestantes con progesterona disminuyó la inmunoexpresión tanto de MAL-1 como MAL-2. Durante la lactancia se observó un refuerzo apical de ambos transportadores, que disminuyó al bloquear la lactancia por la retirada de crías de la madre. Estos resultados sugieren un posible papel de MAL-1 y MAL-2 en la maquinaria de transporte transcelular de componentes de la
PO64 - Efecto del parto sobre distintos parámetros metabólicos analizados en el plasma del cordón umbilical Henar Ortega-Senovilla, Ute Schaefer-Graf, Katrin Meitzener, Kristof Graf, Klaus Vetter, Emilio Herrera
Departamento de Biologia. Facultad de Farmácia y Medicina.
Universidad San Pablo Ceu
En los últimos años el número de niños nacidos por cesárea programada (CS) ha aumentado significativamente. Aunque la CS induce cambios hormonales tanto en la madre como el feto, diferentes a los del parto vaginal (VG), no hay trabajos que analicen sus consecuencias metabólicas. En el presente trabajo se compara el perfil metabólico del plasma del cordón umbilical de 80 recién nacidos por CS frente a 98 recién nacidos por parto vaginal (VG); se descartaron a los de gestantes con diabetes gestacional, evidencias de alteraciones en el feto, embarazos múltiples o gestaciones inferiores a 34 semanas. La duración de la gestación, el peso y la cantidad de grasa de los neonatos fueron menores en el grupo CS que en el VG. La concentración plasmática de cortisol, glucosa, insulina, triacilglicéridos, glicerol y ácidos grasos libres fue superior en los neonatos del grupo VG respecto a la de CS, sin diferencias en la concentración de colesterol entre ambos grupos. Estos resultados se mantuvieron incluso cuando se ajustaron por el índice de masa corporal pre- gestacional, la edad gestacional al nacimiento y la cantidad de grasa corporal de los neonatos. No hubo diferencias en la concentración de leptina y RBP4 entre ambos grupos, pero la concentración de adiponectina fue superior en el plasma de los neonatos del grupo VG. Estos resultados indican una menor actividad lipolítica del tejido adiposo en los neonatos nacidos por cesárea, relacionada con su hiperinsulemia y menor concentración de cortisol, en relación a los nacidos por vía vaginal.
UNIVERSIDAD SAN PABLO-CEU (USP BSCH 50/08 y PC12-09);
MINISTERIO DE CIENCIA E INNOVACION (SAF2008-04518) PO62 - Papel de cambios en la composición de ácidos grasos de la dieta durante la primera mitad de la gestación en la rata
Flavia Spreafico Fernandes, Maria das Graças Tavares do Carmo, Emilio Herrera
Universidad San Pablo / CEU, Madrid
Para estudiar el efecto de cambios en ácidos grasos (AG) de la dieta durante la primera mitad de la gestación, desde el día 0 al 12 de preñez, 5 grupos de ratas recibieron dieta semisintética conteniendo diferentes aceites como único componente graso no-vitamínico: I)9 %soja; II)9%oliva; III)8%pescado+1%girasol;
IV)8%linaza+1%girasol; V)8% palma+1% soja. Del día 12 al 20 de gestación todos los animales se alimentaron con pellets.
Animales de cada grupo se sacrificaron los días 0, 12 ó 20 de gestación. También se estudiaron ratas vírgenes sometidas a iguales tratamientos. Los AG más abundantes de la dieta I fueron 18:1n-9 y 18:2n-6; de II 18:1n-9; de III FAn-3 y 18:1n-9; de IV 18:2n-6 y 18:3n-3 y de V 16:0 y 18:1n-9. En plasma, la glucosa disminuyó progresivamente en todas las preñadas menos en V, en la que no cambió al día 12, aunque sí al 20. Los triglicéridos aumentaron en todas las preñadas al día 20, y este efecto fue superior en III. Glicerol y AG libres también aumentaron en preñadas al día 20, pero más en I, IIyIII. Colesterol y fosfolípidos disminuyeron en todas las preñadas al día 12 pero no al 20.
Al día 20, el aumento del peso materno libre de concepus fue V>IV>III>II>I; el número de fetos fue menor en V y el peso fetal menor en IV. Conclusión: cambios moderados en la composición de AG de la dieta en la primera mitad de la gestación modifica las adaptaciones metabólicas de la madre y afecta al desarrollo fetal.
Ministerio de Ciencia e Innovación Proyecto SAF 2008-04518
Pósteres
Póster-Grupo Bioquímica Perinatal
PO61 - Acúmulo de ácidos grasos trans de la dieta en el tejido adiposo materno durante la primera mitad de la gestación en la rata
Encarnación Amusquivar Arias, Giulia Cammarata, Emilio Herrera
Facultad de Farmacia. Universidad San Pablo CEU
Durante la primera mitad de la gestación el tejido adiposo de la madre constituye un depósito de ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) derivados de la dieta, que se movilizan al final de la gestación para su aporte al feto. Hay estudios que demuestran que los ácidos grasos trans (AGt) alteran el perfil de PUFAs con efectos negativos en el desarrollo fetal. Para determinar si dichos AGt también se acumulan en el tejido adiposo de la madre y afectan al perfil de PUFA en la madre, desde el inicio de la gestación alimentamos a ratas con dietas semisintéticas conteniendo un 10% de aceite de oliva, borraja o pescado, o un 8% de aceite de cacahuete rico en AGt más 2% de aceite de oliva, borraja o pescado. A día 12 de gestación la concentración de triglicéridos plasmáticos aumentó por efecto del aceite de cacahuete excepto en los animales alimentados con aceite de pescado. En los grupos de dieta conteniendo aceite de cacahuete frente a los mismos grupos sin este suplemento se observó una alta proporción de AGt en tejido adiposo junto con una menor proporción de ácido araquidónico. Los cambios observados en el perfil de ácidos grasos en plasma e hígado eran similares, excepto en los grupos de aceite de pescado. Así pues, la ingesta de AGt durante la primera mitad de la gestación facilita su depósito en tejido adiposo y disminuye la proporción de otros PUFAs, en especial del araquidónico, lo que podría producir un inadecuado aporte de PUFA al feto.
Ministerio Ciencia e Innovación SAF-2008-04518
PO63 - Inmunoexpresion de MAL-1 y MAL-2, dos elementos de la maquinaria del transporte directo de proteínas mediado por balsas lipídicas (“lipid raft”), en la glándula mamaria durante la gestación y la lactancia
Julio Sevillano Fernández, María del Rosario Rodríguez Ramos, Izabela Zofia Prokop, Alejandro Lafuente Camacho, José Manuel Pozuelo Gonzalez, Miguel Ángel Alonso Lebrero, María del Pilar Ramos Álvarez
Universidad San Pablo / CEU, Madrid
MAL-1 y MAL-2 son miembros de la familia de proteínas MAL implicadas en el transporte y señalización a través de lipid rafts en diferentes tipos celulares. Durante la gestación la glándula mamaria (GM) presenta disminución en el número de adipocitos y diferenciación estructural y funcional de las células epiteliales de los acinos, que permite secretar proteínas/lípidos a la leche durante la lactancia. Para explorar si MAL-1 y MAL-2 participan en este proceso estudiamos por inmunohistoquímica la expresión y localización de estos transportadores en GM de ratas vírgenes, gestantes (días-7, 14, 18 y 20), gestantes tratadas con progesterona, lactantes y lactantes a las que se habían retirado las crías. MAL-1 y MAL-2 se expresaron en las células epiteliales de todos los grupos experimentales. La inmunolocalización de MAL-2 fue más pronunciada en la zona apical mientras que la de MAL-1 fue intracitoplasmática con algún refuerzo apical, indicando un patrón diferente de localización de estos transportadores en GM. A lo largo de la gestación, se observó un aumento de inmunorreactividad para ambas proteínas, siendo mayor en las gestantes a término que en las no-gestantes. El tratamiento de gestantes con progesterona disminuyó la inmunoexpresión tanto de MAL-1 como MAL-2. Durante la lactancia se observó un refuerzo apical de ambos transportadores, que disminuyó al bloquear la lactancia por la retirada de crías de la madre. Estos resultados sugieren un posible papel de MAL-1 y MAL-2 en la maquinaria de transporte transcelular de componentes de la
PO64 - Efecto del parto sobre distintos parámetros metabólicos analizados en el plasma del cordón umbilical Henar Ortega-Senovilla, Ute Schaefer-Graf, Katrin Meitzener, Kristof Graf, Klaus Vetter, Emilio Herrera
Departamento de Biologia. Facultad de Farmácia y Medicina.
Universidad San Pablo Ceu
En los últimos años el número de niños nacidos por cesárea programada (CS) ha aumentado significativamente. Aunque la CS induce cambios hormonales tanto en la madre como el feto, diferentes a los del parto vaginal (VG), no hay trabajos que analicen sus consecuencias metabólicas. En el presente trabajo se compara el perfil metabólico del plasma del cordón umbilical de 80 recién nacidos por CS frente a 98 recién nacidos por parto vaginal (VG); se descartaron a los de gestantes con diabetes gestacional, evidencias de alteraciones en el feto, embarazos múltiples o gestaciones inferiores a 34 semanas. La duración de la gestación, el peso y la cantidad de grasa de los neonatos fueron menores en el grupo CS que en el VG. La concentración plasmática de cortisol, glucosa, insulina, triacilglicéridos, glicerol y ácidos grasos libres fue superior en los neonatos del grupo VG respecto a la de CS, sin diferencias en la concentración de colesterol entre ambos grupos. Estos resultados se mantuvieron incluso cuando se ajustaron por el índice de masa corporal pre- gestacional, la edad gestacional al nacimiento y la cantidad de grasa corporal de los neonatos. No hubo diferencias en la concentración de leptina y RBP4 entre ambos grupos, pero la concentración de adiponectina fue superior en el plasma de los neonatos del grupo VG. Estos resultados indican una menor actividad lipolítica del tejido adiposo en los neonatos nacidos por cesárea, relacionada con su hiperinsulemia y menor concentración de cortisol, en relación a los nacidos por vía vaginal.
UNIVERSIDAD SAN PABLO-CEU (USP BSCH 50/08 y PC12-09);
MINISTERIO DE CIENCIA E INNOVACION (SAF2008-04518) PO62 - Papel de cambios en la composición de ácidos grasos de la dieta durante la primera mitad de la gestación en la rata
Flavia Spreafico Fernandes, Maria das Graças Tavares do Carmo, Emilio Herrera
Universidad San Pablo / CEU, Madrid
Para estudiar el efecto de cambios en ácidos grasos (AG) de la dieta durante la primera mitad de la gestación, desde el día 0 al 12 de preñez, 5 grupos de ratas recibieron dieta semisintética conteniendo diferentes aceites como único componente graso no-vitamínico: I)9 %soja; II)9%oliva; III)8%pescado+1%girasol;
IV)8%linaza+1%girasol; V)8% palma+1% soja. Del día 12 al 20 de gestación todos los animales se alimentaron con pellets.
Animales de cada grupo se sacrificaron los días 0, 12 ó 20 de gestación. También se estudiaron ratas vírgenes sometidas a iguales tratamientos. Los AG más abundantes de la dieta I fueron 18:1n-9 y 18:2n-6; de II 18:1n-9; de III FAn-3 y 18:1n-9; de IV 18:2n-6 y 18:3n-3 y de V 16:0 y 18:1n-9. En plasma, la glucosa disminuyó progresivamente en todas las preñadas menos en V, en la que no cambió al día 12, aunque sí al 20. Los triglicéridos aumentaron en todas las preñadas al día 20, y este efecto fue superior en III. Glicerol y AG libres también aumentaron en preñadas al día 20, pero más en I, IIyIII. Colesterol y fosfolípidos disminuyeron en todas las preñadas al día 12 pero no al 20.
Al día 20, el aumento del peso materno libre de concepus fue V>IV>III>II>I; el número de fetos fue menor en V y el peso fetal menor en IV. Conclusión: cambios moderados en la composición de AG de la dieta en la primera mitad de la gestación modifica las adaptaciones metabólicas de la madre y afecta al desarrollo fetal.
Ministerio de Ciencia e Innovación Proyecto SAF 2008-04518
PO68 - La subnutrición materna en la primera mitad de la gestación, favorece un estado diabetogénico en la madre Mª del Pilar Ramos Alvarez, Julio Sevillano Fernández, María Limones Cornejo, Angelica Acevedo, Justyna Marciniak, Emilio Herrera Castillón
Universidad San Pablo-CEU, Madrid
Recientemente hemos observado que la subnutrición materna en la primera parte de gestación compromete el normal desarrollo fetal con consecuencias en la edad adulta. Objetivo: Determinar si una alteración del metabolismo del hígado (H) y tejido adiposo (TA) maternos durante la primera parte de la gestación tiene consecuencias en la segunda fase, cuando el crecimiento fetal es máximo. Diseño experimental: Del día 0 (d.0) al 12 (d.12) de gestación un grupo de ratas se alimentó ad libitum (C) y a otro se le permitió ingerir el 60% (S) de lo ingerido por las C. Desde el d.12 al d.20 todas se alimentaron ad libitum. Resultados: A d.12 el peso del TA, del H y el contenido de lípidos hepáticos fue menor en S que en C. Los cuerpos cetónicos y la resistencia insulínica fueron más altos a d.12 en S, y esté efecto fue más acusado a d.20. En este día los FFA y el glicerol se encontraban más elevados en S que en C. El mRNA de SREBP1 y c/EBPalpha estaba más bajo en S que en C, tanto a d.12 como d.20. A d.12 la expresión de acetil-CoA-carboxilasa fue menor en S que en C, mientras que la de carnitina-palmitoil-acil-transferasa y las enzimas gluconeogénicas fue mayor en S que en sus C. Conclusión:
La subnutrición materna durante la primera mitad de gestación altera las adaptaciones metabólicas maternas, favoreciendo una situación diabetogénica que podría estar implicada en los efectos adversos que se observan en su descendencia.
Financiado por Ministerio de Ciencia e Innovación Tecnológica (SAF2007-68441 & SAF2008-04518).
PO69 - Effects of the supplementation of maternal diet with different sources of fat during pregnancy and lactation on the offspring hypothalamic development and function
Juana Sánchez, Maria Magdalena Cladera, Marina Llopis, Teresa Priego, Ana Paula García, Mariona Paulou, Andreu Palou, Catalina Picó
Laboratory of Molecular Biology, Nutrition and Biotechnology (Nutrigenomics), University of Balearic Islands and CIBER Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CIBEROBN), Palma de Mallorca, Spain
Aim: To characterize the effects of maternal supplementation with different fat sources during pregnancy and lactation on body weight and factors involved in hypothalamic control of energy balance of their offspring. Methods: Twenty-one-day-old Wistar rats from dams fed with standard diet (control) or from dams supplemented with 30% of the normal caloric intake in form of different fat sources (olive-oil, butter, or margarine) during late pregnancy and lactation were studied. Body weight was followed;
morphometric studies on arcuate nucleus (ARC) were performed;
and circulating parameters and mRNA levels of hypothalamic Agouti-related protein (AgRP), proopiomelanocortin (POMC), long-form leptin receptor (ObRb), and insulin receptor (InsR) were determined. Results: Compared to controls: a) the offspring of olive-oil and margarine-fed dams showed lower body weight;
b) the offspring of olive-oil fed dams displayed lower circulating leptin levels (only males) and lower ObRb and InsR mRNA levels but higher AgRP mRNA levels; c) the offspring of margarine-fed dams showed higher circulating leptin and ObRb mRNA levels (both only in males), and higher AgRP and POMC mRNA levels (both only in females); d) the male offspring of butter-fed dams and females of margarine-fed dams exhibited higher NPY- neurons in ARC. Conclusions: The intake of different sources of fat during the late pregnancy and lactation seems to affect the offspring hypothalamic structure and alter gene expression pattern of factors involved in the control of energy balance; this may affect leptin function and have later consequences on body weight regulation, depending on the source of fat.
Pósteres
PoR61 - Papel de los ácidos grasos poliinsaturados de la dieta de la rata preñada en la expresión génica y el metabolismo de las crías durante la etapa perinatal
Maria Jose Jimenez Muñoz
Departamento de Bioqeuímica y Biologia Molecular .Facultad de Farmácia. Universidad San Pablo Ceu
Un exceso dietético de ácidos grasos poliinsaturados
w
-3 de cadena larga (LCPUFAw
3) en gestantes produce retraso en el desarrollo postnatal. Para conocer la base de este efecto, alimentamos ratas durante la gestación y lactancia con dieta conteniendo 10% aceite de pescado, rico en LCPUFAw
3 (DP) y otro grupo con igual dieta pero conteniendo aceite de oliva (DO). Otros animales recibieron dieta estándar (DS). Se estudiaron crías de -2, 0, 1, 10, 20 y 30 días de edad. En hígado, la expresión(mRNA) de lipoproteína lipasa fue baja en todos los grupos al día -2, aumentando al nacer, pero mientras que en las crías de DO y DS se mantenía constante durante la lactancia, en las DP aumentó más los días 1 y 10, disminuyendo por igual en todas tras el destete. El mRNA de CPT-I y ACO fue indetectable al día –2, aumentando al nacer , pero los valores en DP los días 1 y 10 fueron muy superiores. La expresión del PPARa
también aumentó al nacer, alcanzando valores al día 10 superiores en DP que en los otros. El mRNA de HMG-CoA sintasa aumentó al nacer, y más en DP. Los triacilgliceroles hepáticos y ácidos grasos libres y 3-hidroxibutirato plasmáticos aumentaron al nacer, aunque menos en DP que en los otros. Proponemos que la acción estimuladora de LCPUFAa
3 sobre determinados factores de transcripción (especialmente el PPARa
) es responsable de una diferente adaptación a la vida extrauterina en las crías de DP, que podría tener consecuencias en la salud del adulto.PoR62 - Papel de FABP3 en el efecto neurotrófico del ácido oleico sobre la diferenciación neuronal
Ángel Alberto Arroyo Martín, Aránzazu Tabernero Urbieta, José María Medina Jiménez
Universidad de Salamanca
Resultados previos de nuestro grupo de investigación han mostrado que la albúmina, presente en el cerebro durante el período neonatal temprano, promueve la axonogénesis postnatal a través del ácido oleico, cuya síntesis induce en astrocitos y que actúa como factor neurotrófico. En este sentido, los niveles de los marcadores de diferenciación dendrítica y axonal, MAP2 y GAP43, aumentan tanto en modelos de cultivo primario de neuronas, como cultivos organotípicos, en presencia del complejo albúmina-ácido oleico. En este trabajo se presentan los resultados de la participación en nuestros modelos de diferenciación neuronal, de una de las formas presentes en el SNC de las FABPs, proteínas de unión y transporte de ácidos grasos a nivel intracelular: FABP3. Se ha analizado su expresión por western-blot durante diferentes tiempos de cultivo y su posible modificación en presencia o ausencia del complejo albúmina-ácido oleico. También se han realizado experimentos de silenciamiento, con siRNAs específicos analizando su impacto en la morfología celular y los marcadores de diferenciación. Por último se ha estudiado la expresión y localización tisular en rodajas de cultivo organotípico. Los resultados obtenidos, nos permiten indicar que:
(i) FABP3 aumenta en presencia del complejo albúmina-ácido oleico, (ii) el silenciamiento de FABP3 impide la diferenciación normal de las neuronas en cultivo primario, (iii) FABP3 se localiza en células con fenotipo neuronal del estriado en cultivos organotípicos. Todos los resultados en conjunto nos confirman la participación del ácido oleico en el desarrollo cerebral neonatal y la participación de la FABP3 en su vía de acción.
Ministerio de Educación y Ciencia