UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGÍA
CARRERA DE ALIMENTOS
LABORATORIO DE ANÁLISIS DE LOS ALIMENTOS APE N° 8
Nivel: Cuarto Paralelo “B”
Docente: Ing. Rubén Vilcacundo Ch. PhD
Ciclo académico Octubre 2021-Febrero 2022
Integrantes
Jonathan Bombón
Andrés Bonilla
Jéssica Cando
Roberto Casalombo
María Condo
Fecha de presentación: 2022-01-04
“SEPARACIÓN DE LÍPIDOS POR CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA”
1. OBJETIVOS
a. Objetivo general
Conocer la técnica de cromatografía de capa fina para la separación de líquidos con distinta polaridad.
b. Objetivos específicos
Determinar el porcentaje de esteroles que están presentes en la mantequilla con respecto a la materia insaponificable y la muestra original.
Calcular los valores Rf de los líquidos presentes en la materia insaponificable de la mantequilla.
2. CÁLCULOS Y RESULTADOS
Tabla 1. Determinación de Rf de los lípidos presentes en la materia insaponificable.
Distancia recorrida componente (cm)
Distancia recorrida fase
móvil (cm)
Rf
a 1
7
0,1428
b 2,5 0,3571
c 4,8 0,6857
d 5,6 0,8
- Cálculo demostrativo
Rf=distanciarecorrida del componente distaaciarecorrida en fase móvil
Para a
Rf=distabciarecorrida de a 7
Rf=1 7
Entonces Rf de a=0,1428
Tabla 2. Contenido de esteroles en base seca de la mantequilla.
Peso vaso de precipitación
. (g)
Vaso vacío + extracto (esteroles) seca (g)
Peso en g de la muestra
% Esteroles masa original
% Esteroles Base seca
% Esteroles Base húmeda
22,5123 22,54391 5,0167 0,63% 62,22% 54,40%
- Cálculo de esteroles masa original:
%esteroles=P2−P0
P1 x100 % P0= Peso en g vaso seco P1= Peso en g de la muestra
P2= Peso en g del vaso + extracto seco (secados en la estufa)
%esteroles=22,54391−22,5123
5,0167 x100 %
%esteroles=0,63 %
- Cálculo de esteroles base seca:
P3= materia insaponificable en base seca (0,508g)
%esteroles Bs=P2−P0
P1 x100 %
%esteroles Bs=22,54391−22,5123
0,0508 x100 %
%esteroles Bs=62.22 %
- Cálculo de esteroles base húmeda:
%esteroles Bh=%Esteroles Bs x100−%H 100
%esteroles Bh=62.22%x100−10, 9598 100
%esteroles Bs=55,40 % 3. DISCUSIÓN
De acuerdo con Badui (2012), los esteroles (colesterol) tanto como las grasas, aceites, ceras, hidrocarburos, vitaminas y pigmentos son lípidos no polares, es decir, que permanecen asociados y no se direccionan hacia la interface acuosa, por lo que son completamente insolubles en agua. Ante ello, Wei et al. (2017) destacan que a diferencia de la margarina, la mantequilla presenta un mayor contenido de esterol, ácido butírico, 1-penteno y ácido linoleico conjugado, mientras que el contenido de ácido graso insaturado total y ácido linoleico es menor. Por tanto, a partir de cromatografía de capa fina (TLC) es posible la separación de diferentes clases de lípidos de los tejidos animales y vegetales basados en la polaridad de los componentes individuales.
La tabla 1 indica que la relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen de la placa, Rf, es directamente proporcional a la distancia recorrida del componente e inversamente proporcional a la distancia recorrida en fase móvil. Para Garbarino (2021), a medida que el disolvente asciende por la placa, arrastrará diferentes componentes de la mezcla, ya que cuanto más solubles sean los componentes en el disolvente, más fácil será la migración hacia la placa. Por otro lado, mientras exista una disminución de la polaridad de un componente, aumentará su capacidad de moverse hacia arriba en la placa, ya que, dependiendo de la polaridad del componente de la placa empleada, este interactuará fuertemente con los componentes polares de la mezcla, generando que estos se adhieran a la placa y asciendan con menos eficiencia que los componentes que son débilmente polares o apolares. Por tanto, según Castaños (2015), el factor de retardo Rf varía desde 1 para los solutos que no se retrasan, hasta valores que se aproximan a 0, resultando que el compuesto
“a” es más polar que los demás compuestos, ya que como lo indica Torossi (2007), los compuestos más polares tendrán un Rf menor que menos polares.
El contenido de esteroles en base seca y humeda obtenidos fue de 62.22% y 55.40% respectivamente, reportados en la Tabla 2 , esto indica que la mantequilla utilizada tiene un gran contenido de este compuesto natural que ayuda al organismo al reducir el colesterol, que según bibliografía que alimentos como en este caso de la mantequilla son alimentos de tipo funcionales que con el tiempo se han transformado para que logren proporcionar un grato beneficio más allá de su conocido valor nutritivo ya que en la actualidad las industrias de alimentos tienen como meta sacar nuevos alimentos para fines un tanto terapéuticos, ciertos trabajos han demostrado que se debe consumir hasta 3 gramos al día de esteres o entre un máximo de 20%, esto sin excederse par que no exista alteraciones en los niveles de colesterol o triglicéridos (Casagrande y Campoverde, 2014).
4. CONCLUSIONES
La Cromatografía de capa fina es gran uso ya que es una técnica analítica muy sencilla para la separación de mezclas de dos o varios compuestos, gracias a esto se logró la separación de los distintos tipos de líquidos
presentes en una muestra de mantequilla con la diferente polaridad que cada uno tiene para diferenciar esteroles, fosfolípidos, triglicéridos.
Se determinó el contenido de esteroles la cual se logra obtener a partir de la cromatografía de capa fina indica un bajo índice de este tipo lípidos ( 0,63 %¿ de materia insaponificable en la mantequilla el contenido graso de origen animal es alto.
Se calculó la distancia recorrida de los lípidos en la fase móvil los cuales están presentes en la materia insaponificable de una muestra de mantequilla en la que se manifestó la retención de los centros activos polares de la fase estacionaria que se diferencian entre 0.14 a 0.8 dependiendo del componente es por ello que esta técnica es muy utilizada tanto por la fase móvil y la fase estacionaria.
5. RECOMENDACIONES
Hacer uso de las diferentes metodologías de fase móvil y fase estacionaria para poder diferenciar los valores de factor de retención de una misma muestra.
Conservar los esteroles de colesterol para luego usarlo como un patrón en la cuantificación de colesterol en diferentes grasas.
Comparar los valores obtenidos en cromatografía de capa fina con respecto a otros métodos cromatográficos.
6. BIBLIOGRAFÍA
Badui, S. (2012). Química de los alimentos (5.a ed.). Pearson.
Casagrande Campoverde, E. J. (2014). Universidad católica de santiago de guayaquil. 1–125.
Castaños, E. (2015). Cromatografía en capa fina. Cienciadelux.
https://cienciadelux.com/2015/08/17/cromatografia-en-capa-fina/
Garbarino, J. (2021). Thin Layer Chromatography (TLC) for the Separation of
Lipids. The Rockefeller University.
https://rockedu.rockefeller.edu/component/tlc-hs/
Torossi, F. D. B. (2007). Una experiencia sencilla con fundamentos complejos:
la separación de pigmentos fotosintéticos mediante cromatografía sobre papel. Anales de la Real Sociedad Española de Química, 103(4), 45-51.
Wei, L., Jingyi, J., Long, L., & Ruize, Z. (2017). Nuclear magnetic resonance metabonomics technology to distinguish natural cream and margarine.
Food science, 38(12), 278-285.
