RESULTADOS Y DISCUSIONES 1 Análisis microbiológico

Los análisis microbiológicos de las muestras de suelo rizosférico se realizaron en el Laboratorio de Microbiología de la Universidad Francisco de Paula Santander sede Colsag Se observó una adecuada presencia de microorganismos en las muestras de suelo rizosférico estudiadas, estando estas dentro del rango de 106 bacterias por gramo, 105 actinomicetos por gramo y 104 hongos por gramo, reportados como las densidades normales de estos microorganismos en suelos usados en la agricultura (Rojo & Urbano,1992) [7] Se observaron diferencias en los valores de pH entre las fincas estudiadas; siendo más evidente con respecto a la finca El Porvenir y la finca Florilandia.(ver tabla 1).

Tabla 1. Resultado promedio de los análisis microbiológicos de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua

Finca El Porvenir Florilandia Villa Antigua/ lote 8ª pH 6.48 5.32 5.42 Bacterias (ufc/g) 4 x 106 3 x 108 4 x 106 Actinomicetos (ufc/g) 3 x 105 23 x 105 8 x 105 Hongos y levaduras (ufc/g) 4 x 104 6 x 104 8 x 104 3.2 Análisis fisicoquímicos

El contenido de materia orgánica presente en los suelos estudiados fue escaso, estando entre 0.81 y 2.59 %, teniendo en cuenta lo reportado por Rojo & Urbano en 1992, dónde expresan valores de 3 a 5% como porcentaje normal de materia orgánica en los horizontes superficiales de los suelos sometidos a laboreo. Se presentaron concentraciones bajas de elementos importantes como Potasio y Fosforo, lo cual puede afectar procesos

metabólicos en las plantas, incidiendo de forma morfológica o celular el desarrollo del cultivo [7]. Así mismo las concentraciones de Calcio y Magnesio fueron bajas, estando entre 637 ppm– 1870 ppm y 83ppm – 243 ppm respectivamente. La deficiencia de Calcio puede generar necrosis en los bordes o puntas de las hojas jóvenes, impedir el crecimiento de las plantas y generar una clorosis general, interviniendo así en los procesos fotosintéticos de las plantas. (Matilla- Paredes et al., 2009) [8]. Con respecto al contenido de micronutrientes, estos se encontraron en un nivel variado de concentración (Tabla 2).

Tabla 2. Resultado promedio de los análisis fisicoquímicos de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua.

El Porvenir FlorilandiaVilla Antigua/ lote 8ª pH 6.48 5.32 5.42 Arcilla 8 % 17% 22 % Limo 53 % 61% 16 % M. Org 2.59 % 1.13 % 0.81 % Fosforo 6 ppm 4 ppm 5 ppm Potasio 137 ppm 53 ppm 52 ppm Calcio 1870 ppm 588 ppm 637 ppm Magnesio 243 ppm 91 ppm 83 ppm Manganeso 61 ppm 16 ppm 31 ppm Zinc 6 ppm 4 ppm 3 ppm Hierro 50 ppm 176 ppm 65 ppm Cobre 0.53 ppm 3 ppm 1 ppm

3.3 NMP (método del Numero Más Probable)

En la Tabla 3 se evidencia la escasa presencia de microorganismos en las muestras de la finca El Porvenir, obteniendo el número más bajo de posibles

aislados en todos los medios semisólidos usados (Nfb, JNfb, JMV y LGI). En la Tabla 1, se puede observar las variaciones de pH entre las tres (3) fincas muestreadas, observándose que la finca El Porvenir posee un pH prácticamente neutro mientras que las fincas Florilandia y Villa Antigua poseen un pH acido, pudiendo ser este un factor determinante en el número de bacterias del

genero Herbaspirillum sp.

Gluconacetobacter sp. y Burkholderia sp. debido a que estos tienen unos requerimientos de pH ácidos o ligeramente ácidos; de entre 5.5 – 6.2 para poder crecer. Por el contrario, se observó un mayor crecimiento del genero Azospirillum sp. con respecto a los otros géneros aislados en los medios semisólidos. Esto puede deberse a que Azospirillum sp. puede establecerse a valores de pH entre 6.8 – 7.0, teniendo la finca El Porvenir un pH de 6.48 ideal para el crecimiento de este género bacteriano, aun cuando la finca Florilandia obtuvo una población mucho mayor de este género en sus muestras analizadas con un pH de 5.9. Con respecto a las propiedades fisicoquímicas, se evidencio que la presencia de M.O probablemente no determinó el número de bacterias diazótrofas presente en las muestras analizadas; observándose en la Tabla 2 el mayor porcentaje de M.O en la finca El Porvenir. Así mismo, se observó una prevalente carencia de elementos en el suelo (Tabla 2), siendo en su mayoría elementos en concentraciones bajas como Fosforo, Magnesio y Potasio.

Tabla 3. Promedio de la población de células en las fincas El Porvenir (1), Florilandia (2) y Villa Antigua/ lote 8ª (3).

FINCA Medio de cultivo Población de células Log_Pob_cel 1 Nfb 68167 4,83 2 Nfb 55833333 7,75 3 Nfb 2616667 6,42 1 JNfb 2543 3,41 FINCA Medio de cultivo Población de células Log_Pob_cel 2 JNfb 192533 5,28 3 JNfb 47000 4,67 1 JMV 73667 4,87 2 JMV 7643333 6,88 3 JMV 856667 5,93 1 LGI 933 2,97 2 LGI 17163333 7,23 3 LGI 196667 5,29 3.4 Análisis estadístico En la Tabla 4, 6 y 7 se observan diferencias significativas entre los resultados en el medio Nfb, JMV y LGI obtenidos a partir de las muestras provenientes de la finca El Porvenir en comparación con los resultados obtenidos de las muestras provenientes de las fincas Florilandia y Villa Antigua, las cuales no tuvieron diferencias significativas entre sí. En contraste no se presentaron diferencias significativas en los resultados del medio JNfb entre las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua (Tabla 5).

Tabla 4. Comparaciones múltiples entre los resultados en el medio Nfb de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua. Log_pob_cel

DHS de Tukey

Basadas en las medias observadas.

El término de error es la media cuadrática (Error) = ,273.

*. La diferencia de medias es significativa al nivel 0,05.

Tabla 5. Comparaciones múltiples entre los resultados en el medio JNfb de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua (lote 8ª).

Log_pob_cel DHS de Tukey

Basadas en las medias observadas.

El término de error es la media

cuadrática(Error) = ,683.

Tabla 6. Comparaciones múltiples entre los resultados en el medio JMV de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua .

Log_pob_cel DHS de Tukey

Basadas en las medias observadas. El término de error es la media cuadrática(Error) = ,156.*. La diferencia de medias es significativa al nivel 0,05.

Tabla 7. Comparaciones múltiples entre los resultados en el medio LGI de las fincas El Porvenir, Florilandia y Villa Antigua (lote 8ª).

Log_pob_cel DHS de Tukey

Basadas en las medias observadas. El término de error es la media cuadrática(Error) = ,523. *. La diferencia de medias es significativa al nivel 0,05.

CONCLUSIONES

Los análisis microbiológicos realizados, muestran una apropiada presencia de bacterias, hongos y actinomicetos en los cultivos muestreados, estando todos ellos en el promedio de 106 bacterias, 105 actinomicetos y 104 hongos por gramo en un suelo de laboreo. Esto se relaciona con los parámetros fisicoquímicos reportados, que permiten condiciones adecuadas para el crecimiento y desarrollo microbiano. Los análisis fisicoquímicos realizados, mostraron suelos con características similares, presentando carencias en la concentración de elementos importantes como Potasio, Fosforo y Magnesio, siendo enriquecido mediante fertilizantes químicos como el DAP, KCl y la Urea. Por el contrario se obtuvieron altas concentraciones de micro elementos tales como Manganeso, Zinc, Hierro y Cobre. Se observó una deficiencia en el % de M.O en las muestras de suelo rizosférico analizadas, siendo este esencial para la fertilidad y la buena producción agrícola. El bajo porcentaje de M.O presente en estos cultivos puede deberse a la constante limpieza de hojarasca y malezas.

En la prueba de NMP se observó una mayor cantidad de bacterias diazótrofas en los medios semisólidos Nfb y JMV en relación con los medios LGI y JNfb. Esto demuestra una mayor presencia de los géneros Azospirillum sp. y Burkholderia sp. los cuales son fácilmente aislados en gran cantidad de suelos rizosféricos de cultivos como arroz, maíz y café, a diferencia de los géneros Herbaspirillum sp. y Gluconacetobacter sp. que por su carácter endófito suelen ser menos predominantes en este tipo de muestras.

REFERENCIAS

1 Pinzón J., Rojas J., Rojas F., Ramírez O. 2009. Guía técnica para el cultivo de cacao.4 ed.

Federación Nacional de Cacaoteros FEDECACAO, Bogotá, Colombia. 186p.

2 Fedecacao. (2011). Cultivo de cacao. Consultado 15 abril 2011. Disponible:

http://www.fedecacao.com.co/cw/in dex.php?secinfo=25&criterio=0 3 Compant S., Clément C., Sessitsch

A. 2010. Plant growth-promoting bacteria in the rhizo- and endosphere of plants: Their role, colonization, mechanisms involved and prospects for

utilization. (en línea) Soil Biology & Biochemistry. 42(5):669-678. Consulta 2 nov. 2010. Disponible en

http://www.sciencedirect.com/scien ce

4 Hernández A., Heydrich M., Velázquez M., Hernández A.N. 2006. Perspectivas del empleo de rizobacterias como agentes de control biológico en cultivos de importancia económica. (en línea) Revista Mexicana de Fitopatología. 24 (1):42-49 Consulta 14 Oct.2010.

Disponible en:

http://redalyc.uaemex.mx/redalyc/s rc/inicio/ArtPdfRed.jsp?

iCve=61224107

5 Bonilla C. Carmen, Castilla Luis A. y Vallejo Margarita M. (2008). Evaluación de la asociación bacterias fijadoras de nitrógeno - líneas interespecíficas de arroz- nitrógeno, en Typic haplustalf. Ibagué, Colombia. Acta Agron. vol.57 no.1 Palmira Jan./Mar. 2008.

6 Mays-Figueroa (2004). Fijación biológica de nitrógeno, revista UDO agrícola: 4 (1): 1 – 20. Universidad de Oriente, Núcleo de Monagas, Laboratorio de Rizobiología.

7 Rojo, C., Urbano, P. 1992. Condiciones del suelo y desarrollo de las plantas según Russel. Ediciones Mundi-Prensa, Madrid.

8 Mantilla-Paredes, Andrea J et al. Distribución de bacterias potencialmente fijadoras de nitrógeno y su relación con parámetros fisicoquímicos en suelos con tres coberturas vegetales en el sur de la Amazonia colombiana. Rev. biol. trop [online]. 2009, vol.57, n.4 [citado 2012-03-22], pp. 915-927 . Disponible en: <http://www.scielo.sa.cr/scielo.php ?script=sci_arttext&pid=S0034774 42009000400002&lng=es&nrm=iso >. ISSN 00347744.

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