Efecto antibacteriano in vitro de miel de abejas (apis mellifera) en cepas de streptococcus mutans

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UI M. IC A. ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BI. O. Q. TRABAJO DE INVESTIGACIÓN I. DE. FA. RM. AC. IA. Y. EFECTO ANTIBACTERIANO In Vitro DE MIEL DE ABEJAS (Apis mellifera) EN CEPAS DE Streptococcus mutans.. :. PASCO OLGUÍN, GARY ALEXÁNDER SÁNCHEZ FERNÁNDEZ, FLOR ROXANA. BI BL. IO. TE. CA. AUTORES. ASESORA. : Dra. CARMEN AYALA JARA. TRUJILLO – PERÚ 2010. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AGRADECIMIENTOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Dios;. felicidad. en. UI M O. paz. y. BI. brindarnos. Q. día,. Y. a. IC A. vida. IA. día. la. cada. DE. FA. momento de nuestra. AC. prestarnos. por. RM. A. IO. TE. CA. existencia.. BI BL. GARY y FLOR.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A nuestros padres; por su amor y su apoyo. UI M. IC A. incondicional, su. ayuda. no. O. Q. sin. porque. podido. Y. BI. hubiésemos. nuestra. carrera profesional.. GARY y FLOR.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. culminar. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A nuestros hermanos; compañía. vividos. momentos. y. por. ser. mejores. Y. BI. nuestros. IC A. los. UI M. todos. en. Q. su. O. por. AC. IA. amigos.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. GARY y FLOR.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A nuestra hijita; por ser. el. motivo. de. IC A. nuestra vida, la fuerza. UI M. para seguir adelante y. BI. O. Q. la alegría de nuestros. GARY y FLOR.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. días.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A nuestra asesora; por brindarnos su apoyo y. se. UI M. proyecto. este. Q. que. O. logrando. IC A. por creer en nosotros,. IA. Y. BI. haga. RM. AC. realidad.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. GARY y FLOR.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Queremos. expresar. nuestra. especial. gratitud a una gran. UI M. IC A. persona, la Dra. Elva quien. Q. Mejía Delgado. BI. O. colaboró. IA. Y. incansablemente en el de. esta. investigación y a la cual guardaremos. un. gran cariño y respeto por siempre.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. desarrollo. GARY y FLOR.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores miembros del Jurado:. Dando cumplimiento con las disposiciones establecidas para la presentación de trabajos de investigación en la Facultad de Farmacia Y Bioquímica de la Universidad. IC A. Nacional de Trujillo, sometemos a vuestro criterio profesional el presente informe. O. Q. UI M. titulado:. Y. BI. “EFECTO ANTIBACTERIANO In Vitro DE MIEL DE ABEJAS (Apis mellifera). RM. AC. IA. EN CEPAS DE Streptococcus mutans”. FA. Es propicia esta oportunidad para expresarles nuestro más sincero. DE. reconocimiento a vuestra alma máter, que con su capacidad profesional, científica y. TE. CA. sobre todo humana contribuyen al cumplimiento de nuestra formación profesional.. IO. Dejamos a su consideración, señores miembros del jurado, la calificación del. BI BL. presente informe.. Trujillo, agosto del 2010.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. INDICE Página INDICE…………………………………………………………………... v RESUMEN…………………………………………………………….… vi. IC A. ABSTRACT…………………………………………………………..…. vii. Q. UI M. I. INTRODUCCIÓN…………………………………………………….…. 1. Y. BI. O. II. MATERIAL Y METODO..……………………………………………. 10. RM. AC. IA. III. RESULTADOS…………………………………..……………………… 15. DE. FA. IV. DISCUSIÓN …………………………………………………..………… 17. CA. V. CONCLUSIONES………………………………………………………. 22. BI BL. IO. TE. VI. PROPUESTA……………………………………………………………. 24. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. …………………………….. 26. VIII. ANEXOS………………………………………………………………… 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El estudio tuvo como objetivos Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB) de la miel de abejas en cepas estandarizadas de. IC A. Streptococcus mutans (ATCC35668).. UI M. Para realizar dicha investigación, enfrentamos las cepas de Streptococcus mutans con la miel de abejas a diferentes concentraciones (desde 1% hasta el 7 %), mediante el método de. BI. O. Q. turbidimetría en tubo con caldo tioglicolato, para la concentración mínima inhibitoria y por. AC. IA. Y. crecimiento en placa en agar tripticasa soya para la concentración mínima bactericida.. RM. Se concluye en lo siguiente: La concentración mínima inhibitoria (CMI) de la miel de abejas. FA. en cepas de Streptococcus mutans es de 5.5 % y La concentración mínima bactericida (CMB). CA. DE. de la miel de abejas en cepas de Streptococcus mutans es de 7 %.. TE. Palabras clave: concentración mínima inhibitoria (CMI), concentración mínima bactericida. BI BL. IO. (CMB), miel de abejas, Streptococcus mutans.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. The study had as objectives it decides the minimum inhibitory concentration (CMI) and the minimum bactericide concentration (CMB) of the honey of bees in stumps to standardize of Streptococcus mutans (ATCC35668).. To carry out investigation happiness, it face the stumps of Streptococcus mutans with the honey of bees to different concentrations (from 1 % to 7%), by means of the method of. IC A. turbidimeter in tube with tioglicolato broth, for the minimum concentration inhibitory and for. UI M. growth in plate in soya tripticasa agar for the minimum bactericide concentration .. O. Q. It concludes in the following: The minimum inhibitory concentration (CMI) of the honey of. BI. bees in stumps of Streptococcus mutans is of 5.5 % and the minimum bactericide. AC. IA. Y. concentration (CMB) of the honey of bees in stumps of Streptococcus mutans is of 7 %.. Code words: minimum inhibitory concentration (CMI), minimum concentration bactericide. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. (CMB), bees of honey, Streptococcus mutans.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. INTRODUCCION. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La caries dental es una de las enfermedades de etiología bacteriana más comunes entre los seres humanos, y todavía es considerada como un problema de salud pública en muchas partes del mundo, debido a que afecta la calidad de vida y personalidad de los individuos afectados; además, requiere de una inversión personal y gubernamental importante. En los países industrializados, la frecuencia de esta patología ha disminuido notablemente gracias a la aplicación de medidas de salud pública destinadas a prevenirla. En los países. IC A. subdesarrollados, y entre ellos el Perú, la prevalencia de esta enfermedad no sólo no ha. UI M. disminuido, sino que parece estar aumentando. El fenómeno obedece a que estos países no. Q. cuentan aún con los recursos humanos, tecnológicos y económicos necesarios para. BI. O. solucionar dicho problema. Si a esto se agrega que en el Perú no existe un programa (1, 2). .. AC. IA. Y. adecuado de salud pública bucal, el panorama se ensombrece aún más. RM. La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que unos 5.000 millones de personas. FA. en el planeta han sufrido caries dental. El Perú es uno de los países en vías de desarrollo. DE. de Latinoamérica que tiene la más alta incidencia de caries, una enfermedad dental que. CA. afecta al 95% de la población, es decir a nueve de cada diez personas, principalmente. IO. TE. niños entre 5 y 12 años de edad. Se ha repetido, en numerosas oportunidades, que la. BI BL. población peruana afectada por esta enfermedad es tan grande y que el problema aumenta a tal velocidad, que los odontólogos no podrán solucionarlo jamás con los tratamientos restauradores convencionales. En consecuencia, el único camino que se avizora para resolver la problemática de salud bucal de nuestra población es la aplicación de medidas específicas de prevención (1, 3).. Durante los últimos 20 años los principales factores biológicos que han sido utilizados como indicadores de actividad de caries dental, según estudios microbiológicos, han. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. establecido que los microorganismos que forman parte importante de la población bacteriana de la placa y que son considerados los principales agentes cariogénicos son las variedades Streptococcus mutans, sobrinus, cricetus, salivarius y sanguis con algunas especies de lactobacilos; estás tienen a su cargo en forma muy marcada la producción de ácidos (4, 5, 6).. IC A. Streptococcus mutans ha sido el más aislado en lesiones por caries, es el primero en. UI M. colonizar la superficie del diente después de la erupción. Su nombre lo recibe de su. (6). O. . Es un microorganismo acidogénico porque produce ácido láctico, el cual. BI. como bacilo. Q. tendencia a cambiar de forma, y se puede encontrar como coco o de forma más alargada,. Y. interviene en la desmineralización del diente; puede sobrevivir y desarrollarse en un pH. AC. IA. bajo; y también es acidúrico porque es capaz de seguir generando ácido con un pH bajo (6). RM. .. FA. Los Streptococcus mutans, presentes en la biopelícula de placa bacteriana supragingival,. DE. mediante sus factores de virulencia son capaces de provocar la pérdida de minerales y. CA. posterior formación de una cavidad, debido al desequilibrio iónico en el proceso de. IO. TE. mineralización y desmineralización de los tejidos duros del diente resultante del (2, 7). . La producción de. BI BL. metabolismo de carbohidratos por parte de estas bacterias. polisacáridos es fundamental para la colonización y mantenimiento de este microorganismo en el diente. Por otra parte, Streptococcus mutans puede sintetizar polisacáridos intracelulares y ello le permite obtener energía y conservar la producción de ácido láctico durante largos periodos. También produce dextranasas y fructanasas. Estas enzimas metabolizan los polisacáridos extracelulares, lo cual favorece la producción de ácido (2, 6, 7).. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Numerosos estudios se han destinado a investigar sobre la prevención de enfermedades bucales, en especial caries dental, poniendo especial énfasis en las medidas que controlen la formación de placa bacteriana dental y así reducir la presencia del agente patógeno. Es así como, paralelo al desarrollo tecnológico de la industria farmacéutica, existe un gran interés por parte de los investigadores en estudiar sustancias naturales que posean propiedades farmacológicas antibacterianas (2).. IC A. Entre ellas, encontramos a la miel de abejas la cual ha sido utilizada en medicina por años,. UI M. y actualmente, parece haber sido redescubierta por la profesión médica para el tratamiento. Q. de quemaduras, heridas infectadas, crecimiento de nueva piel y afecciones. Y. BI. O. gastrointestinales (2).. AC. IA. Las diversas clases de miel de abejas difieren mucho en color, sabor y densidad, esta miel. RM. varía según el origen floral desde los tonos blancos hasta los pardos oscuros, existiendo. FA. mieles rojizas, amarillentas o verdosas, aunque predominan los tonos castaños - claro o. DE. ambarinos; y, en cuanto al sabor, esto depende de la naturaleza de las plantas, terreno,. CA. clima y estación del año. El color oscuro no significa que sea de inferior calidad. Por el. IO. TE. contrario, se sabe que cuanto más oscura es la miel, más rica es en fosfato de calcio y en. BI BL. hierro y por lo tanto, más adecuada para satisfacer las necesidades de cuerpos en crecimiento, de los individuos anémicos y de los intelectuales sometidos a esfuerzos mentales. Las mieles de color claro son más rica en vitamina A y las oscuras en vitaminas B y C (8). El color de la miel de abejas se debe, pura y exclusivamente, a materias colorantes del néctar de la fuente floral de donde ha sido libado por la abeja. Estas materias colorantes son pigmentos de las plantas, de la misma naturaleza que de las flores y de otras partes coloreadas del vegetal (8).. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Investigaciones desarrolladas en Nueva Zelanda demostraron que la miel de abejas natural produce una. disminución de bacterias a una concentración del 3%. Inhibiendo el. crecimiento bacteriano entre ellas de las bacterias cariogénicas Streptococcus mutans (9).. La miel de abejas es nutritiva, antiséptica, diurética y demulcente. Se utiliza en las afecciones urinarias, en la preparación de lociones e irrigaciones, y también se elaboran. IC A. excelentes preparados para la tos y los episodios febriles. Posee un notable efecto. UI M. antiséptico, mucho más allá del simple elemento conservador del azúcar. La miel no se. Q. contamina porque, en principio, su contenido en azúcares actúa de conservante del mismo. BI. O. alimento. Sin embargo, el efecto antiséptico observado en el tratamiento de ulceraciones y. Y. llagas parece indicar la existencia de alguna otra sustancia que sería secretada por la abeja,. AC. IA. posiblemente enzimas como las diastasas, invertasas, catalasas, peroxidasas y lipasas.. RM. Estas tienen una acción antibiótica y antiséptica propia que se transmite a la miel. La. FA. mayoría de expertos atribuyen a estas enzimas o fermentos muchas de las propiedades. DE. medicinales de la miel. En ciertos estudios se pusieron en contacto microbios. CA. particularmente virulentos con muestras de miel pura. En menos de 24 horas, los. IO. TE. gérmenes patógenos sucumbieron a los efectos de la miel. A partir de estas. 11). .. (10,. BI BL. investigaciones se llegó a la conclusión de que tenía un efecto similar a la penicilina. Con esta miel se preparan excelentes cataplasmas, diluida en agua, se emplea en gargarismos y para ablandar la garganta en caso de irritación bucal, laríngea o faríngea, o en ulceraciones de la boca. En general, se considera a la miel como depurativa y restauradora del tono vital (10, 11).. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La miel de abejas ha demostrado su beneficiosa influencia sobre el corazón. Los monosacáridos realizan una acción energética general, pero particularmente sobre el funcionamiento del músculo cardíaco. La miel también favorece la producción hepática de fosfatos orgánicos, que combaten los trastornos del ritmo cardíaco: regulan los latidos y facilitan el riego coronario (10). Se han discutido bastante sus efectos antirreumáticos, relacionados en principio con su. IC A. contenido en ácido fórmico. Como es un alimento rico en minerales y oligoelementos,. UI M. puede solucionar carencias o deficiencias ligadas al mecanismo inflamatorio de los. Q. trastornos reumáticos. Actúa como reconstituyente debido a la gran energía que aporta,. BI. O. con la gran ventaja de no someter al organismo a un proceso digestivo laborioso. Por su. Y. estimulación del metabolismo hepático, la miel ejerce una acción desintoxicante, tanto en. AC. IA. el caso de intoxicaciones causadas por venenos endógenos como exógenos (10).. RM. La miel además de ser un dulce acompañante en las comidas, de aliviar la garganta y de. FA. tener beneficios a nivel cosmético, entre otras muchas propiedades, la miel de abejas. CA. DE. puede ser una útil y sabrosa forma de mantener los dientes sanos (12).. IO. TE. La miel de abejas es alta en azúcares, monosacáridos mayormente, y baja en proteínas.. BI BL. Estos factores se combinan para hacer de la miel, una sustancia libre de contaminantes y ayudarla a matar a los contaminantes que entran en contacto con ella (13). Diversos estudios han encontrado que la principal actividad antimicrobiana de la miel de abejas se debe a la presencia de peróxido de hidrógeno producido por la enzima glucosaoxidasa y otros factores diferentes al conocido H2O2, como el contenido de polifenoles, vitaminas, la actividad antioxidante, el poder osmótico, etc., los cuales varían según el origen botánico y caracterizados por inhibir un amplio rango de bacterias Gram positivas y Gram negativas. Por otro lado, aún cuando la presencia de lisozima en la miel no está. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. bien esclarecida, en algunos reportes se menciona ésta como uno de los antimicrobianos presentes en ella. (13,14).. En la composición de la miel de abejas participan más de setenta sustancias distintas, dependiendo de la variedad de ésta; muchos de estos elementos todavía no se han estudiado en profundidad. 20% de agua, si la miel sobrepasa esta cantidad, no es. IC A. recomendable porque el deterioro vitamínico y enzimático se acelera; 0,7% de materias. UI M. nitrogenadas, entre ellas destacan las proteínas y aminoácidos. Se cree que los péptidos. Q. presentes podrían ser los responsables de algunas de sus propiedades medicinales; 60-. BI. O. 80% de monosacáridos, estos azúcares simples, asimilables directamente por el. Y. organismo, evitan procesos fermentativos en el tubo digestivo. Los principales son la. AC. IA. fructosa y la glucosa o dextrosa. Se ha demostrado que la fructosa estimula el. RM. metabolismo del hígado y favorece los procesos de desintoxicación; 1,7% de sacarosa;. FA. 4,8% de dextrina y 0,2% de gomas, ambas sustancias impiden que la miel granule o. DE. retrase su cristalización; 3% de ácidos orgánicos, son los responsables de la acidez de la. CA. miel, pues su pH se sitúa entre 3,6 y 4,2. La mayor parte de ácidos se forman por la acción. IO. TE. de las secreciones salivares de la abeja. En la miel se hallan los ácidos fosfórico, fórmico,. BI BL. málico, cítrico, láctico y oxálico; 0,5% de minerales, entre ellos destaca el potasio, sobre todo en la oscura miel de bosque, y el fósforo, que facilitan la metabolización de los hidratos de carbono en el organismo. También se han identificado diversos oligoelementos: silicio, aluminio, boro, radio, níquel, litio, cromo, estaño, titanio, plomo, cinc y cadmio; vitaminas, su presencia es mínima, pero son importantes en determinados procesos vitales. Entre ellas se encuentra la vitamina C, vitaminas hidrosolubles del grupo B y ácido pantoténico; enzimas, la miel, por su doble origen vegetal y animal, contiene enzimas propios de la planta y del insecto. Los principales son las diastasas y las. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. invertasas, enzimas de las glándulas faríngeas de la abeja, gracias a los cuales se asimilan los azúcares propios de la miel y no se producen trastornos digestivos; inhibinas, estas sustancias ejercen una acción antibiótica y se hallan, aunque en mínimas cantidades, en la miel. Junto con los monosacáridos y la acetilcolina, facilitan la acción curativa de la miel sobre las heridas, ya que favorecen el riego sanguíneo. Las inhibinas se destruyen por la. IC A. acción del calor (400C) y de la luz y 0,7% de polen y cera (10, 15).. UI M. La miel de abeja ha sido utilizada como medicina desde tiempos antiguos, especialmente. Q. para el tratamiento de procesos infecciosos, tanto en forma tópica como para uso interno.. BI. O. Los estudios llevados a cabo sobre la miel han comprobado su actividad antimicrobiana,. Y. habiéndose demostrado sus efectos inhbidores sobre el crecimiento de patógenos humanos. AC. IA. como Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa,. FA. RM. Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Listeria monocytogenes (13, 16).. DE. La miel de abejas debe ser conservada de una manera adecuada ya que las sustancias. CA. antibacterianas de ésta disminuyen apreciablemente su actividad con el aumento de la. TE. temperatura, pero no la pierden totalmente, por lo anterior, es indeseable la pasturización. BI BL. IO. a 70-75 grados centígrados si va a ser usada como antiséptico ( 11).. La actividad antibacteriana puede evaluarse con dos métodos básicos: La Difusión del disco y la Concentración inhibitoria mínima (CIM). El método por difusión del disco es cualitativo y permite observar el diámetro del halo de inhibición de crecimiento de las bacterias en estudio sembradas en el agar con diluciones seriadas. Las bacterias no crecen en la zona de inhibición del agar, donde difunde el antibiótico o la miel impregnada en el disco de papel. Los antibióticos naturales de la miel podrían explicar su actividad antibacteriana. Con el segundo método, se puede evaluar el rango de concentración para. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. inhibir el crecimiento microbiano que consiste en establecer la menor concentración de un antibiótico capaz de inhibir visiblemente el crecimiento de un microorganismo, esto se puede realizar mediante varias técnicas, una de ellas es la técnica de dilución en agar (2, 16).. La presente investigación tiene como objetivo general:. IC A. Evaluar el efecto antibacteriano in vitro de la miel de abejas sobre las cepas. Q. UI M. de Streptococcus mutans.. Y. BI. O. Planteándonos como objetivos específicos:. AC. IA. 1. Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de la miel de abejas. FA. RM. en cepas de Streptococcus mutans.. DE. 2. Determinar la concentración mínima bactericida (CMB) de la miel de abejas. BI BL. IO. TE. CA. en cepas de Streptococcus mutans.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. II. MATERIAL Y MÉTODO. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.1.. MATERIAL:. 2.1.1. Material biológico: Cepas estandarizadas de Streptococcus mutans (ATCC35668). Miel de abejas (Apis mellifera), recolectada en el mes de abril del 2010 en el caserío “Montoya” de la provincia de. Ichocán,. UI M. IC A. departamento de Cajamarca – Perú.. BI. O. Tubos de ensayo 13 x 100 mm. Q. 2.1.2. Material de laboratorio y medios de cultivo:. AC. Asa bacteriológica. FA. RM. Gradilla Mechero. IA. Y. Jeringas de 1 y 5 ml. DE. Agar tripticasa soya. CA. Caldo tioglicolato. Alcohol. BI BL. IO. TE. Placas Petri. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.. MÉTODO (17, 18):. 2.2.1. Determinación del CMI (Concentración Mínima Inhibitoria) por turbidimetría:. Se preparó un set de 14 tubos con 5 ml de caldo tioglicolato. Luego se esterilizaron en autoclave.. IC A. Una vez esterilizados, se añadió a cada uno de los tubos miel de. UI M. abejas pura, en cantidades necesarias para obtener en 5 ml de. O. Q. caldo tioglicolato las concentraciones de 0, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5,. Y. BI. 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5 y 7 % respectivamente.. IA. se les añadió posteriormente 20 µL de. AC. A todos los tubos. RM. suspensión bacteriana (S. mutans) semejante al tubo del. FA. nefelómetro de Mac Farland.. CA. DE. Luego se llevó a incubar a 37 0C por 24 a 48 horas en la jarra de. BI BL. IO. TE. anaerobiosis.. Se observó los resultados y se consideró como CMI. a la. concentración menor de la miel de abejas en el cual comienza a inhibirse el desarrollo por completo, es decir, donde ya no se presenta turbidez. (ANEXO Nº1). 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2. 2. Determinación del CMB (concentración mínima bactericida) en placa:. Se sembró en placas con agar tripticasa soya una muestra de los tubos donde no hubo crecimiento. Se consideró la CMB en el tubo de menor concentración donde no hubo crecimiento. UI M. IC A. bacteriano.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. Los ensayos se realizaron por triplicado.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI B. LI O. TE CA. DE. FA RM. AC IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. GRAFICO DEL DISEÑO EXPERIMENTAL. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. III. RESULTADOS. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA. Nº. 01:. EVALUACION. DE. LA. CONCENTRACION. MINIMA. INHIBITORIA (CMI) POR TURBIDIMETRIA. CC (% de. Control. miel abejas). 0. Lectura. +++. 1. 1.5. 2. 2.5. 3. 4.5. 5. 5.5. 6. 6.5. 7. ++. ++. +. +. 0. 0. 0. 0. 0: Sin Turbidez. UI M. LEYENDA:. 4. IC A. +++ +++ +++ +++ +++. 3.5. Q. +: Menor Turbidez. BI. O. ++: Mediana Turbidez. Y. +++: Mayor Turbidez. Nº. 02:. EVALUACION. FA. TABLA. RM. AC. IA. Concentración mínima inhibitoria (CMI) = 5.5 %. DE. LA. CONCENTRACION. MINIMA. CA. DE. BACTERICIDA (CMB) POR CRECIMIENTO EN PLACA PETRI. TE. CC (% de miel abejas). BI BL. IO. Lectura. LEYENDA:. 5.5. 6. 6.5. 7. +++. ++. +. 0. 0: Sin crecimiento +: Menor crecimiento. ++: Mediano crecimiento +++: Mayor crecimiento Concentración mínima bactericida (CMB) = 7 %. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. IV. DISCUSION. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La utilización de la medicina Complementaria en países de América Latina ha entrado en una nueva etapa. Prueba de ello es el notable crecimiento de algunos de sus recursos en países industrializados, el mismo que ha venido acompañado por cambios en la composición de la oferta de servicios terapéuticos, formas distintas de entender la salud y la enfermedad, así como la utilización combinada de muchas de estas formas. IC A. terapéuticas (19).. UI M. Actualmente la Medicina Complementaria representa una opción importante de. Q. respuesta ante las necesidades de la atención a la salud en diferentes países de América. BI. O. Latina y Caribe a pesar de su presencia subordinada en los sistemas oficiales de salud y. Y. de la situación de ilegalidad que comúnmente guardan. Esta participación ha sido. AC. IA. reconocida por organizaciones internacionales de salud como la Organización Mundial. FA. RM. de la Salud (OMS) y la Organización Panamericana de Salud (OPS) (19).. DE. Entre todas las terapias complementarias utilizadas, la Apiterapia ha demostrado buenos. CA. resultados en su uso, gracias al trabajo de las abejas; ya que utiliza componentes propios. IO. TE. de la colmena tales como: miel que producen a partir del néctar, el propóleo que amasan. BI BL. con las resinas vegetales, polen que recogen del estambre de las flores, cera con la que contruyen sus panales, la jalea real secretada por la glándulas hipofaríngeas y la apitoxina secretada por las glándulas de veneno (15, 16, 18).. La miel es un alimento natural dulce, elaborado por las abejas obreras (Apis mellífera) a partir del néctar de las flores o secreciones procedentes de otras partes vivas de las plantas, que recogen, transforman y combinan con sustancias específicas (enzimas) y. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. almacenan después en los panales de su colmena, donde tienen lugar la maduración de ésta por la transformación de los azúcares y una pérdida considerable de agua (8, 11). El color varía desde los tonos blancos hasta los pardos oscuros; existiendo mieles rojizas, amarillentas o verdosas, aunque predominan los tonos ámbar claro, dependiendo del lugar de origen (20). Respecto a información nutricional: La miel al componerse esencialmente de diferentes. IC A. azúcares, principalmente fructosa y glucosa, es energética. Además contiene vitaminas. UI M. (C, B1, B2, B6, PP, ácido pantoténico), aminoácidos, enzimas, ácidos orgánicos,. Q. sustancias minerales, pólen y otras sustancias, y pueden contener sacarosa (en mínima. BI. O. cantidad), maltosa, malecitosa y otros oligosacáridos (incluidas las dextrinas); de. Y. acuerdo a las condiciones climatológicas ambientales de la zona de donde proviene,. RM. AC. IA. estos componentes pueden encontrarse en menor o mayor cantidad (8, 20).. FA. En esta investigación se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la. CA. DE. concentración mínima bactericida (CMB) In Vitro sobre Streptococcus mutans.. IO. TE. Trabajos de investigación demuestran que el Streptococcus mutans ha sido implicado. BI BL. como el principal agente etiológico de la caries dental, la cual es considerada una de las enfermedades infecciosas más comunes en los seres humanos. Por esto, numerosas investigaciones se han destinado al estudio de sustancias, tanto químicas como de origen natural, que impidan que el agente patógeno prolifere en el medio bucal o controlen su crecimiento (2, 21).. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La sensibilidad. in vitro de las bacterias a los antimicrobianos se puede ensayar. mediante varios métodos disponibles en el laboratorio, uno de ellos es la técnica por turbidimetría, la cual permite determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) del antimicrobiano frente al microorganismo ensayado. El valor de CMI obtenido por este método, orienta al clínico sobre qué concentración de biocida necesita alcanzar en el. IC A. sitio de la infección para inhibir al microorganismo infectante (2, 18).. UI M. Los ensayos para determinar la CMI de miel de abeja, mostraron que el crecimiento. Q. bacteriano disminuye a medida que aumenta la concentración del biocida, llegando a la. BI. O. concentración a la cual “in vitro” tal inhibición es total y así se determinó la CMI de. Y. esta sustancia frente al crecimiento de Streptococcus mutans. . Posteriormente se realizó. AC. IA. mediante la técnica en placa la determinación de la concentración mínima bactericida. FA. RM. (CMB) de todos aquellos tubos de ensayo donde ya no hubo crecimiento (18).. DE. Los resultados obtenidos en este estudio no coinciden con lo reportado por. CA. investigaciones desarrolladas en Nueva Zelanda, en la que demostraron que la miel. se comienza a apreciar una leve reducción del crecimiento de esta. BI BL. investigación. IO. TE. natural produce una disminución de bacterias a una concentración del 3%. En esta. bacteria al utilizar concentraciones de 3.5% de miel de abeja, la que se hizo más evidente a una concentración del 5.5% de este biocida. (Tabla Nº 01). Considerando como CMI a la concentración de 5.5%, que representa la acción bacteriostática ya que se inhibe el crecimiento bacteriano; y luego se procedió a encontrar la CMB cuyo resultado fue del 7% de miel de abeja, indicando muerte bacteriana. (Tabla Nº 02). (ANEXO Nº3).. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La diferencia puede deberse, como se ha reportado en literatura para muchos productos naturales, tales como el propóleo, el extracto de semillas de uva, entre otros; a que las propiedades medicinales de la miel estarían influenciadas de acuerdo al área geográfica de origen, tipo de flores o plantas a partir del cual es elaborada (8, 9). Nuestra miel procede del departamento de Cajamarca, provincia de Ichocán, caserío Montoya; cuya flora apícola predominante son: leguminoseáe (alfalfa, tara, chocho),. IC A. Rutaceáe (lima, limón), Myrtaceáe (eucalipto). Su color es ámbar claro y de. UI M. consistencia semisólida, la zona es de clima templado con mucha agua y con bosques. BI. O. Q. primarios cercanos, como se mencionan anteriormente. (ANEXO Nº2). Y. Los ensayos realizados con bajas concentraciones de miel de abeja, evidenciaron la. AC. IA. poderosa acción antibacteriana de este biocida orgánico natural, ya que con el uso de. RM. estas concentraciones se logró inhibir completamente el crecimiento de todas las cepas. FA. de Streptococcus mutans en estudio, permitiendo determinar la CMI y CMB de este. DE. antimicrobiano frente al microorganismo causante de la caries dental. Siendo una. CA. alternativa de solución a este problema que afecta a la salud de muchas personas a nivel. BI BL. .. IO. TE. mundial y de esta manera mejorar la calidad de vida.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. V. CONCLUSIONES. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Con este trabajo de investigación se llego a las siguientes conclusiones:. La miel de abejas en estudio, si tiene efecto antibacteriano In vitro sobre. IC A. 1.. O. Q. UI M. Streptococcus mutans.. Y. BI. 2. La concentración mínima inhibitoria (CMI) de la miel de abejas en cepas de. La concentración mínima bactericida (CMB) de la miel de abejas en cepas de. FA. 3.. RM. AC. IA. Streptococcus mutans es de 5.5 %, indicando la acción bacteriostática.. BI BL. IO. TE. CA. DE. Streptococcus mutans. es de 7 %, que representa muerte bacteriana.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. VI. RECOMENDACIONES. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Con esta investigación se deja a criterio de los interesados seguir trabajando en el área de la Medicina complementaria, ya que es muy importante saber que en nuestro país tenemos una amplia variedad de productos de origen natural , como la miel de abejas, que producen. UI M. IC A. beneficios para nuestra salud.. O. Q. Con este estudio se abre la oportunidad a otros trabajos en futuro para investigar los. AC. IA. Y. BI. productos naturales de nuestro medio.. RM. Este estudio, nos proporciona la base para la elaboración de un producto farmacéutico. FA. cuyo fin es aplicarlo en la higiene bucal y de este modo disminuir el riesgo de caries. BI BL. IO. TE. CA. DE. dental.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1.. HEREDIA AZERRAT, C.: Odontología Preventiva en el Niño y en el Adolescente.. Manual. Universidad. Peruana. de. Procedimientos. Cayetano. Clínicos.. Heredia-facultad. de. Estomatología. LIMA – PERU. Formato PDF. (fecha de acceso 28 de agosto de 2008). Soporte URL. Disponible en: www.upch.edu.pe/faest/clasvirtual/cip/odontologiapreventivae. CASTRO ARQUEROS, V.: Inhibición del crecimiento in vitro de streptococcus. O. Q. 2.. UI M. IC A. nelninoyeneladolescente.pdf. BI. mutans por papaina y Sanitrend. Trabajo de investigación.. IA. Y. Facultad de Odontología. Universidad de Chile. 2005.. AC. Formato PDF. (fecha de acceso 28 de agosto de 2008).. FA. RM. Soporte URL. Disponible en:. DE. http://www.cybertesis.cl/tesis/uchile/2005/castro_v/sources. TE. CA. /castro_v.pdf. BI BL. IO. 3. CADENA PERUANA DE NOTICIAS. Sábado 9 de Febrero de 2008. Artículo. Formato HTML. (fecha de acceso 30 de agosto de 2008).. Soporte. URL.. Disponible. en:. http://www.cpnradio.com.pe/html/2007/04/29/11/41. htm. 4. MOROMI NAKATA H. Y COL.: Efecto antimicrobiano in vitro de la Camellia sinensis sobre bacterias orales. Artículo. Facultad de odontología. UNMSM. 2007. Formato PDF. (fecha 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. de acceso 31. de agosto de 2008). Soporte URL.. Disponible. en:. http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVrevistas/odontologia/2 007_n1/pdf/a06.pdf. 5. HIDALGO R.: Las metaloproteinasas y el progreso de la lesión cariosa en dentina.. IC A. Revista Estomatológica Herediana. Artículo de revisión. Facultad de. UI M. Estomatología. Universidad Inca Garcilaso de la Vega. 2006.. Q. Formato PDF. (Fecha de acceso 30 de agosto de 2008). Soporte URL.. BI. O. Disponible en: http://www.upch.edu.pe/FAEST/publica/2006/vol16-. PÉREZ QUIÑONES J y COL.: Asociación del Estreptococos mutans y. RM. 6.. AC. IA. Y. n1/vol16_n1_06_art11.pdf. FA. lactobacilos con la caries dental en niños. Revista Cubana. DE. Estomatológica. 2007. Formato HTML. (fecha de acceso. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S00 34-75072007000400002&lng=es&nrm=iso.. BI BL. IO. TE. CA. 30 de agosto de 2008). Soporte URL. Disponible en:. 7.. FRIEDENTHAL M.: Diccionario Odontológico. Ed. Médica Panamericana S. A. Buenos Aires. Argentina. 1981. Pp.: 188.. 8. MONTENEGRO S. Y COL.: Variación del color en miel de abejas. Facultad de agroindustrias. Resumen.. Universidad. nacional. del. nordeste.. Argentina. 2005. Formato PDF. (Fecha de. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. acceso 01 de septiembre de 2008). Soporte URL. Disponible en: http://www.unne.edu.ar/Web/cyt/com2005/7-Tecnologia/T070.pdf. 9.. SALAZAR L.: Crearán pasta dental antibacteriana con miel. Artículo.. IC A. Universidad de la Frontera. Chile. Formato HTML. (fecha de acceso. UI M. 03 de septiembre de 2008). Soporte URL. Disponible en:. Q. http://diario.elmercurio.com/2006/10/21/vida_y_salud/mas/noticias/0. Y. BI. O. D70F5993DC2. AC. IA. 10. CISQUELLA J.: Guía de los Nuevos Alimentos. Ediciones Tikal. 2007. Formato. en:. FA. Disponible. RM. HTML. (fecha de acceso 06 de septiembre de 2008). Soporte URL.. CA. DE. http://www.sanmarcossierras.com/la_miel.htm. BI BL. IO. TE. 11. LASTRA MENINDEZ J.: Apicultura práctica y medicinal. Dpto. de biologma de organismos y sistemas. Universidad de Oviedo. España. 1996. Formato HTML. (fecha de acceso 14 de septiembre de 2009). Soporte. URL. Disponible. en:. http://www.ecoaldea.com/apicultura/articulos_miel.htm. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 12. SALAZAR A. Y COL.: Actividad Antimicrobiana In Vitro de la Miel de Abejas sobre bacterias asociadas al desarrollo de Caries. Facultad de Medicina, Universidad de La Frontera, Temuco, IX Región, Chile. Revista Cubana de Farmacia. Formato HTML. (fecha de acceso 03 de septiembre de 2009). Soporte URL en:. IC A. Disponible. UI M. www.med.ufro.cl/noticias/2008/julio/apicultura/Resumen-. O.F.H. BADAWY y Col.: Actividad antibacteriana y utilidad terapéutica de la. Y. 13.. BI. O. Q. Luis-Salazar-2.doc. AC. IA. miel de abeja contra las infecciones por Escherichia coli y. RM. Salmonella typhimurium. Rev. Sci. tech. Off. int. Epiz.,. FA. 2004. Formato PDF. (Fecha de acceso 15 de septiembre de. DE. 2009). Soporte URL. Disponible en:. badawy1011-1022.pdf. 14.. BI BL. IO. TE. CA. http://www.oie.int/eng/publicat/RT/2303/pdf/29-. ESTRADA H. Y COL.: Evaluación de la actividad antimicrobiana de la miel de abeja contra Staphylococcus. aureus,. Staphylococcus. epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Salmonella. enteritidis,. Listeria. monocytogenes. y. Aspergillus niger. Trabajo de Investigación. Facultad de Microbiología, Universidad de Costa Rica. 2005. Formato HTML. (fecha de acceso 18 de septiembre de 2009).. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Soporte URL Disponible en: http://www.alanrevista.org/ediciones/20052/evaluacion_actividad_antimicrobiana_miel_abeja.asp. 15.. GUTIÉRREZ M.: Miel de abejas: Una fuente de antioxidantes. Facultad de farmacia y bioanálisis. Universidad de los andes. Venezuela.. UI M. 2010). Soporte URL. Disponible en:. IC A. Artículo. 2008. Formato PDF. (Fecha de acceso 12 de junio de. O. Y. BI. patricia/ff2008_gutierrez.pdf. Q. Http://saber.ula.ve/db/ssaber/edocs/papers/farmacia/vit-. AC. IA. 16. AGUILERA G Y COL.: Apiterapia y Bioactividad. 1ra. ed. Ed. Venezolana, C.A.. RM. Departamento de Microbiología y Parasitología. Facultad de. FA. Farmacia y Bioanálisis. Universidad de Los Andes. Venezuela.. DE. 2006. Formato PDF. (fecha de acceso 17 mayo de 2010).. CA. Soporte URL. Disponible en:. licaciones/monografias/apiterapia/apiterapia.pdf. BI BL. IO. TE. http://www.saber.ula.ve/db/ssaber/Edocs/laboratorios/apiba/pub. 17. MERCADO MARTÍNEZ, P. Y COL.: Fisiología Genética Bacteriana. Guía de Prácticas. 5ª ed. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Nacional de Trujillo. Perú. 2006. Pp.: 35 – 36. 18. VIT PATRICIA.: Iniciación a la Apiterapia. Universidad de los Andes. Facultad de Farmacia y Bioanálisis. Departamento Ciencia de los Alimentos.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Venezuela. 2006. Formato PDF. (Fecha de acceso 23 de abril de 2010).. Soporte. URL.. Disponible. en:. http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/vit/articulos%20pdf/Mieles% 20toxicas.pdf. 19. VILLAR LÓPEZ, M. y COL.: Vida y Salud integral. Boletín electrónico de complementaria.. Gerencia. IC A. medicina. general. de. UI M. prestaciones de salud. Oficina de apoyo prestacional a la. O. Q. medicina complementaria. ESsalud. 2008. Formato pdf.. BI. (Fecha de acceso junio de 2010). Soporte URL Disponible. IA. Y. en:. FA. RM. AC. http://www.essaludgob.pe/fesp/medcomp1.htm.. DE. 20. ESTÁNDARES DE CALIDAD DE MIEL. Natural Derivatives. Derinat. artículo.. CA. Junta Interregional Del Norte Y Oriente. Perú. 2007. Formato. TE. HTML. (fecha de acceso 18 de julio de 2010). Soporte URL. BI BL. IO. Disponible en: http://www.derinat.com/beehoney.htm. 21. NAVARRO, CAROLINA.: Bacterias Guardianes. Boletín Informativo. Ciencia Y Tecnología en la Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá – Colombia. 2008. Formato HTML. (Fecha de acceso 28 de mayo de 2010). Soporte URL. Disponible en: http://educon.javeriana.edu.co/ofi/boletin/contenidoPE SQUISA.asp?Pub=1&p =BACT_ODON.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO Nº 01: CÁLCULOS DE LA CANTIDAD DE MIEL DE ABEJAS A AGREGAR A CADA TUBO DE ENSAYO, PARA OBTENER LAS DIFERENTES CONCENTRACIONES. . Miel da abejas: 100% pura. . Para el 1 %: Cantidad de miel a agregar:. X. 5 ml. IC A. 100 ml. UI M. X = 0.05 g de miel de abejas. Para el 1. 5 %:. Q. . 1g. 100 ml. X. 5 ml. Y. 1.5 g. BI. O. Cantidad de miel a agregar:. Para el 2 %:. RM. . AC. IA. X = 0.075 g de miel de abejas. 100 ml. X. 5 ml. DE. 2g. CA. Para el 2.5 %:. X = 0.1 g de miel de abejas. TE. . FA. Cantidad de miel a agregar:. X . BI BL. 2.5 g. IO. Cantidad de miel a agregar: 100 ml 5 ml. X = 0.125 g de miel de abejas. Para el 3 %: Cantidad de miel a agregar: 3g. 100 ml. X. 5 ml. X = 0.15 g de miel de abejas. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Para el 3.5 %: Cantidad de miel a agregar:. . 3.5 g. 100 ml. X. 5 ml. X = 0.175 g de miel de abejas. Para el 4 %: Cantidad de miel a agregar: 4 g. 100 ml X = 0.2 g de miel de abejas. Para el 4.5 %:. UI M. . 5 ml. IC A. X. X. 5 ml. O. 100 ml. BI. 4.5 g. Q. Cantidad de miel a agregar:. AC. Para el 5 %: Cantidad de miel a agregar:. X. 5 ml. FA. 100 ml. DE. X = 0.25 g de miel de abejas. Para el 5.5 %:. CA. . 5g. RM. . IA. Y. X = 0.225 g de miel de abejas. . IO. X. BI BL. 5.5 g. TE. Cantidad de miel a agregar:. 100 ml 5 ml. X = 0.275 g de miel de abejas. Para el 6 %: Cantidad de miel a agregar: 6g. 100 ml. X. 5 ml. X = 0.3 g de miel de abejas. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Para el 6.5 %: Cantidad de miel a agregar:. . 6.5 g. 100 ml. X. 5 ml. X = 0.325 g de miel de abejas. Para el 7 %: Cantidad de miel a agregar: 7g. 100 ml. X. 5 ml. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. X = 0.35 g de miel de abejas. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. O. Q. UI M. IC A. ANEXO Nº 02: RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA (MIEL DE ABEJA). Sacando las celdas. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. Lugar de crianza de las abejas. Celdas donde se encuentra la miel de abejas. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Corte de las celdas para obtener la miel de abejas. Obtención de la muestra. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO Nº 03: PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR EL EFECTO ANTIBACTERIANO DE LA MIEL DE ABEJA SOBRE Streptococcus mutans. BI. O. Q. UI M. IC A. A) Procedimiento para determinar CMI. Pesando la miel de abejas. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. Personal investigador. Inóculo bacteriano. BI BL. Agregando el caldo de tioglicolato. Sembrando inóculo bacteriano. Tubos sembrados listo para incubación 39. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tubos en estufa por 48 h. Tubos donde no se evidenció crecimiento. BI BL. IO. TE. CA. DE. Resultados del CMI. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Tubos en jarra de Anaerobiosis. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(53) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC A. B) Procedimiento para determinar CMB. Placas en jarra de Anaerobiosis. Resultados del CMB. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. Sembrando en placa. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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