“Acción antagónica in vitro de Clonostachys rosea F sobre el crecimiento de Stemphylium vesicarium Wallr, Fusarium oxysporum F y Botrytis cinerea Pers procedentes de Asparagus officinalis L ”

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. CIENCIAS BIOLÓGICAS. TESIS. EM. AS. DE. IN FO. RM. “Acción antagónica in vitro de Clonostachys rosea F. sobre el crecimiento de Stemphylium vesicarium Wallr, Fusarium oxysporum F y Botrytis cinerea Pers procedentes de Asparagus officinalis L.”. BIÓLOGO “. IO. N. DE. SI ST. PARA OPTAR POR EL TÍTULO DE:. DI. RE. CC. AUTOR: Br. MARTHA MILAGRITOS VÁSQUEZ SANGAY ASESOR: Dr. JULIO CHICO RUIZ TRUJILLO-PERÚ. 2013. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios;. CO. M. además de tu infinita bondad y amor.. UN IC. gozar de salud para llegar a mis objetivos,. AC IÓ. cada maravilloso día y haberme permitido llegar a este punto,. N. Por ser mi guía, gracias por regalarme. A. Y. A mis padres Manuel y María, porque creyeron en mí. RM. ÁT. IC. y porque me sacaron adelante, dándome ejemplos dignos de superación, perseverancia y entrega,. IN FO. Porque en gran parte a ustedes, hoy puedo verme alcanzando mi meta, ya que siempre estuvieron impulsándome. DE. en los momentos más difíciles de mi carrera,. AS. y porque el orgullo que sienten por mí,. SI ST. EM. fue lo que me hizo salir adelante.. DE. A mis profesores, los cuales siempre me inculcaron conocimientos. de estudios e investigación.. DI. RE. CC. IO. N. Y me ayudaron a lograr los mejores resultados en mi vida. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A mi grupo de amigas “Las Chicas del Can”, Melisa, Evelyn, Emma y Linda con quienes siempre compartí los. N. momentos más importantes. AC IÓ. mientras estudiamos en la Universidad,. UN IC. siempre me apoyaron y me ayudaron. A mi grupo de amigos de Biología,. CO. M. a crecer personal y profesionalmente.. A. Y. son incontables los momentos que compartimos juntos. IN FO. RM. ÁT. IC. fuimos un grupo unido y siempre lo seremos.. Mazzei, Erick, Karen, Jorge, Ester; ustedes siempre me enseñaron. AS. DE. valores y me dieron fuerzas para seguir adelante.. EM. En memoria de las amigas que ya no están,. SI ST. pero dejaron una huella en nuestras vidas. siempre estarán en nuestros corazones.. DI. RE. CC. IO. N. DE. Diana Ruiz Reyes Y Gaby Moreno Regalado.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. AGRADECIMIENTOS. AC IÓ. Al asesor de mi tesis, Dr Julio Chico Ruiz;. UN IC. Por su valioso apoyo y orientación brindado. CO. gracias por su paciencia, por compartir sus. IC. A. Y. conocimientos, experiencias y toda la ayuda brindada. M. en la realización del presente estudio.. IN FO. RM. ÁT. de una manera desinteresada.. Al Profesor, Manuel Rodriguez Lacherre;. DE. Por la ayuda brindada en la determinación. AS. de los hongos necesarios, gracias por la ayuda. A mis padres que siempre me apoyaron y. Se sacrificaron para darme la mejor educación.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. brindada hacia mi persona.. Y A DIOS todopoderoso por nuca abandonarme En los momentos difíciles de mi carrera.. GRACIAS TOTALES. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ÁT. IC. A. Y. CO. M. Dr. ORLANDO VELÁSQUEZ BENITES. UN IC. RECTOR. RM. VICERRECTOR ACADÉMICO. EM. AS. DE. IN FO. Dra. VILMA JULIA MÉNDEZ GIL. SI ST. VICERRECTOR ADMINISTRATIVO. DI. RE. CC. IO. N. DE. Dra. FLOR DE MARÍA LUNA VICTORIA MORI. SECRETARIO GENERAL DR. SANTIAGO UCEDA DUCLÓS. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. M. DECANO DE LA FACULTAD. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. Dr. HERMES MARIO ESCALANTE AÑORGA. AS. SECRETARIO DE LA FACULTAD. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Dr. CÉSAR AUGUSTO JARA CAMPOS. DIRECTOR DE LA ESCUELA Dr SEGUNDO ELOY LÓPEZ MEDINA ´. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CERTIFICACIÓN DEL ASESOR. El que suscribe, en calidad de profesor asesor de la tesis Acción antagónica in vitro de Clonostachys rosea F. sobre el crecimiento de Stemphylium vesicarium. AC IÓ. N. Wallr, Fusarium oxysporum F y Botrytis cinerea Pers procedentes de Asparagus officinalis L, certifica que la presente tesis ha sido ejecutada. UN IC. conforme a los objetivos propuestos y con las orientaciones pertinentes al tesista.. alcanzadas,. MILAGRITOS. por. VÁSQUEZ. lo. que. SANGAY. autorizo. para. continuar. bachiller con. los. MARTHA trámites. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. correspondientes.. al. Y. sugerencias. CO. M. En cuanto al informe, éste ha sido revisado y acogido a las observaciones y. N. Dr. JULIO CHICO RUIZ. DI. RE. CC. IO. ASESOR. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores miembros del jurado:. UN IC. En cumplimiento con las disposiciones de reglamentos de grados y títulos de la. CO. M. Escuela Académico Profesional de Ciencias biológicas de la Universidad Nacional. Y. de Trujillo, someto a vuestra consideración y elevado criterio, el presente trabajo. RM. ÁT. IC. A. de investigación titulado.. IN FO. Acción antagónica in vitro de Clonostachys rosea F. sobre el crecimiento de. DE. Stemphylium vesicarium Wallr, Fusarium oxysporum F y Botrytis cinerea. EM. AS. Pers procedentes de Asparagus officinalis L.. SI ST. Con el cual cumplo uno de los requisitos indispensables para obtener el título de. IO. N. DE. Biólogo.. DI. RE. CC. Trujillo, 20 de Noviembre del 2013. Br. MARTHA MILAGRITOS VÁSQUEZ SANGAY. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M. Dra. MARLENE RODRIGUEZ ESPEJO. UN IC. AC IÓ. N. JURADO DICTAMINADOR. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. PRESIDENTE. AS. Dr. ROGER VENEROS TERRONES. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. SECRETARIO. Dr. JULIO CHICO RUIZ VOCAL. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado dictaminador, declaramos que. AC IÓ. N. el presente informe de la tesis ha cumplido con los requisitos fundamentales. A. Y. CO. M. UN IC. exigidos; siendo aprobado por unanimidad.. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. PRESIDENTE. IC. Dra. MARLENE RODRIGUEZ ESPEJO. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Dr. ROGER VENEROS TERRONES. Dr. JULIO CHICO RUIZ VOCAL. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ii. AGRADECIMIENTO. iv. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. UN IC. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. M. CERTIFICACIÓN DEL ASESOR. CO. PRESENTACIÓN. A. Y. JURADO DICTAMINADOR. ÁT. IC. APROBACIÓN. RM. ÍNDICE. IN FO. RESUMEN ABSTRACT. vii viii ix x xi xii xiii 1. 20. SI ST. DISCUSIÓN. vi. 11. EM. RESULTADOS. v. 5. AS. MATERIAL Y MÉTODOS. DE. INTRODUCCIÓN. AC IÓ. DEDICATORIA. N. ÍNDICE. 23. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 24. ANEXOS. 27. DI. RE. CC. IO. N. DE. CONCLUSIONES. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. El espárrago es uno de los productos de mayor exportación en el Perú y está. N. sujeta a estándares de calidad que supone la ausencia de plagas y. AC IÓ. enfermedades, por lo cual es necesario incentivar el control biológico más que. el control químico. En este trabajo se plantea evaluar la acción antagónica in de Clonostachys rosea F. sobre el crecimiento de Stemphylium. UN IC. vitro. vesicarium, Botrytis cinerea Pers. y Fusarium oxysporum F procedentes de. CO. M. cultivos de Asparagus officinalis L. Los hongos: S. vesicarium (Fam: Dematiaceae), B. cinerea Pers,(Fam: Moniliaceae) y F. oxysporum F. son. A. Y. capaces de infectar las raíces o las hojas destruyendo los haces vasculares lo. IC. que conlleva a la muerte de la planta. Una posible alternativa para el control de. ÁT. esta enfermedad es C. rosea, un hongo de acción antagónica contra una. RM. amplia variedad de hongos fitopatógenos, las cuales actúan degradando hifas.. IN FO. En el marco de esta investigación se realizaron siete tratamientos y tres repeticiones de monocultivos ( T1: C. rosea, T2: S.vesicarium, T3: F. oxysporum. DE. y T4: B.cinerea); y cultivos duales( T5: S.vesicarium Vs C.rosea T6: F.oxysporum Vs C.rosea, T7: B.cinerea Vs C.rosea), sembrándose los hongos. AS. en placas Petri con agar Sabouraud al 4% y se evaluó a los 3, 7, 10, 13 y 15. EM. días de sembrado. Los datos fueron evaluados mediante la escala de Bell et al. SI ST. (1892) y la fórmula de Ezziyani. La acción antagónica in vitro de C.rosea sobre el crecimiento de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum fue positiva,. DE. determinándose como grado de antagonismo la clase 2 para F. oxysporum y. N. B.cinerea, mientras que para S.vesicarium corresponde la clase 3. Además el. IO. porcentaje de inhibición para F oxysporum, B.cinerea y S.vesicarium, fue de. DI. RE. CC. 81,36%, 67,44% y 62,87% respectivamente.. PALABRAS CLAVE: Inhibición, antagonismo, pobredumbre gris, fusariosis del espárrago.. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. Asparagus is one of the major export products in Peru and are subject to quality standards that assumes the absence of pests and diseases, by which is. AC IÓ. N. necessary to encourage biological control over chemical control. This paper. proposes to evaluate the in vitro antagonistic action of Clonostachys rosea F on. UN IC. the growth of Stemphylium vesicarium , Botrytis cinerea and Fusarium oxysporum F from cultures Asparagus officinalis L. in the company. M. Agroindustrial Barraza . Fungi S. vesicarium (Fam : Dematiaceae), B. cinerea. CO. Pers, (Fam : Moniliaceae) and F. oxysporum F are able to infect the roots. Y. through or destroy the vascular sheets which leads to the death of the plant.. A. One possible alternative for the control of this disease is C. rosea, a fungus. ÁT. IC. antagonistic action against a broad range of phytopathogenic fungi , which act. RM. to degrade hyphae. As part of this research is conducted with seven treatments and three replicates (T1 : C. rosea , T2 : S.vesicarium , T3 : F. oxysporum , T4 :. IN FO. B. cinerea , T5 : S.vesicarium Vs C. rosea T6 : F.oxysporum Vs C.rosea , T7 : C.rosea Vs B. cinerea ) . Fungi being sown in Petri dishes with agar Sabouraud. DE. 4% and was evaluated at 3, 7, 10 , 13 and 15 days of sowing. Data were. AS. evaluated using the scale of Bell et al (1892) and the formula Ezziyani. The in. EM. vitro antagonistic action on the growth C.rosea S.vesicarium, B. cinerea and F.. SI ST. oxysporum was positive, determined as the degree of antagonism to F.oxysporum was Class 2, whereas Class 3 corresponds S.vesicarium and B.. DE. cinerea. In addition, the percentage inhibition for F oxysporum, B. cinerea and. DI. RE. CC. IO. N. S.vesicarium was 81.36%, 67.44% and 62.87% respectively.. KEYWORDS: inhibition , antagonism, pobredumbre gray, fusariosis of asparagus .. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN El “espárrago” (Asparagus officinalis) pertenece a la familia Asparagaceae, es una planta herbácea, perenne, cuyo cultivo puede permanecer en el suelo de 8 a 10 años desde el punto de vista de vida económica rentable. La planta de. AC IÓ. N. espárrago está formada por tallos aéreos ramificados y una parte subterránea. constituida por raíces y yemas, que es lo que se denomina comúnmente. UN IC. “garra”. De los brotes jóvenes se obtienen las verduras conocidas como “espárragos”. 1. CO. M. La producción de espárragos a nivel mundial se ha constituido durante los últimos años en una actividad con un creciente auge especialmente en las. Y. exportaciones, por ser un producto con un nivel preferencial en el mercado. IC. A. internacional que le permite obtener elevados beneficios2. En la actualidad el. ÁT. Perú es el primer país exportador de espárragos del mundo, con U$ 232. RM. millones, habiendo logrado desplazar a importantes países productores como. IN FO. China y Estados Unidos, debido a que las condiciones climáticas le permiten producir durante todo el año.3. DE. Dentro de los principales problemas que afectan el cultivo de espárrago son las. AS. plagas y enfermedades que limitan su producción generando gastos por el uso. EM. de plaguicidas. Las plagas más comunes que afectan al cultivo del espárrago. SI ST. son: Prodiplosis longifila, Heliothis virescens, Copitarsia decolora, Spodoptera eridania, Elasmopalpus lignosellus, etc. Dentro de las enfermedades tenemos a. DE. Puccinia asparagi, Stemphyllium vesicarium, Fusarium oxysporum y Botrytis. N. cinerea.4. CC. IO. Una de las principales enfermedades es el moho gris causado por Stemphylium vesicarium wallr (Fam: Dematiaceae), ocasiona síntomas que. RE. comienzan con pequeñas punteaduras negras en las escamas secas que se. DI. encuentran en la base de los tallos principales de la. planta, estos puntos. evolucionan a manchas circulares u ovaladas, con diámetros entre 2-6 mm y cuyo centro adopta una coloración marrón grisácea, que a su vez queda circunvalada por un halo de color violáceo. Por tanto, la planta se ve afectada a través de diferentes fases, tornándose clorótica al principio, degenerando a 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. continuación en coloraciones tostadas, finalizando el proceso con la pérdida de cladodios en los plumeros, dejando la parte aérea de la planta totalmente expuesta.5 Otra enfermedad muy común es causada por el hongo Fusarium oxysporum F. AC IÓ. N. (Fam: Tuberculariaceae), el cual se introduce en la planta a través de las heridas, cuyo origen puede ser desde el laboreo del suelo, tratamientos. UN IC. mecanizados, causados por accidentes naturales, ataques de plagas, etc. Los síntomas suelen manifestarse en verano, con la aparición de plumeros. M. cloróticos, a continuación toman una apariencia plateada, pero sin sufrir caída. CO. de cladodios; si seccionamos transversalmente se observa la presencia de. Y. oxidaciones en los haces vasculares, además de necrosis en la zona cortical. A. A. nivel del sistema radicular, las raíces principales muestran un vaciado total de. ÁT. IC. las sustancias de reserva, dejando la epidermis hueca.6. RM. Botrytis cinerea Pers (Fam: Moniliaceae), es otro patógeno que ataca. IN FO. especialmente al turión, dando lugar a una podredumbre blanda que luego se cubre con un micelio grisáceo para finalmente tornarse blanco y bajo cuya. DE. superficie se encontrarán unos corpúsculos negros y de consistencia dura, que. AS. corresponden a los esclerocios.7. EM. Como métodos de control para estas enfermedades tenemos el control. SI ST. mecánico y cultural como prevención además del control biológico y químico que es muy utilizado4. El control químico de estas enfermedades en los. DE. terrenos de cultivo es mediante aspersiones químicas con Azoxystrobin, Benomil, Azufre, Cimoxanil, que aún no han tenido el éxito deseado,. CC. IO. N. especialmente en los climas húmedos y fríos.8. RE. El control biológico consiste en la utilización de enemigos naturales. DI. (predatores, parasitoides, entomopatógenos y antagonistas) para controlar a la población de una plaga o enfermedad, que produce daño a las plantas, describiéndose a diversas bacterias, nemátodos y hongos como organismos controladores biológicos de un amplio número de plagas y de organismos patógenos de vegetales.4. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dentro del control biológico se han descrito el uso de diversos hongos antagonistas, tales como: Trichoderma sp, Ulocladium oudemansii, Mucor sp, Penicilium sp y Clonostachys rosea; además de nemátodos y bacterias.9 Para el presente trabajo se ha elegido a Clonostachys rosea, un hongo con. AC IÓ. N. bastante potencial antagónico y utilizado en varios experimentos como controlador biológico a nivel mundial pero que no es muy utilizado en el. UN IC. Perú.10,11, 12 y 13. En Costa rica C. rosea también ha reportado como un importante micoparásito. CO. M. contra B.cinerea en “fresa” la cual es una importante enfermedad en este cultivo, logrando reducir pérdidas de la fruta cuando se utiliza como. IC. A. Y. biocontrolador.10. ÁT. En Chile, un estudio realizado en el uso de diversos biocontroladores contra. RM. B.cinerea en viveros forestales en plantas de Eucaliptus y Pinus, determinó que la aplicación de cepas de C.rosea tiene un efecto positivo en el control de B.. IN FO. cinerea.11. DE. En 2007 se obtuvieron 45 aislamientos de F. oxysporum f. sp. dianthi y 45 de hongos antagonistas (T01- T45): Trichoderma spp. (35) y Gliocladium spp. (10),. AS. de plantaciones comerciales de clavel. Las cepas nativas son una alternativa. EM. para controlar la “dormilona” del clavel por F. oxysporum f. sp. dianthi, fomentar. SI ST. el biocontrol de patógenos.12. DE. En 2008 se realizó un estudio de Trichoderma harzianum sobre Fusarium. N. solani en cultivos de maracuyá obteniendo valores de antagonismo de 70,56,. CC. IO. 68,52 y 65,32% respectivamente.13. RE. Estos agentes de control no se aplican de forma comercial o intensiva en este. DI. cultivo, sin embargo cabe resaltar los estudios realizados en C. rosea un hongo Hyphomycete ampliamente distribuido que a menudo actúa como un parásito de otros hongos del suelo y el cual también ha sido reportado como un parásito potencial contra nemátodos e insectos. C. rosea es un saprófito común en todo el mundo, con efectos destructivos en diversos hongos fitopatógenos, es decir, presenta acción antagónica contra una amplia variedad de agentes fúngicos, 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. dicha actividad está relacionada con a la secresión de celulasas, β-1,3glucanasas, proteasas e incluidas las quitinasas, las cuales actúan degradando las hifas de otros hongos.14 Por lo expuesto, el objetivo del presente trabajo fue determinar la acción. AC IÓ. N. antagónica in vitro de Clonostachys rosea F sobre Stemphylium vesicarium, Botrytis cinerea Pers y Fusarium oxysporum F. procedentes de Asparagus. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. officinalis L.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODOS I.. MATERIAL DE ESTUDIO:  La cepa de Clonostachys rosea se obtuvo de la subdirección del Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SCB_SENASA), consistente. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. en papeles de 2 cm2 colonizados por el hongo. (Figura 1). Figura 1: Cepa de Clonostachys rosea obtenida del Servicio Nacional de. DE. Sanidad Agraria (SENASA).. 30 plantas de Asparagus officinalis “espárrago” con signos. AS. . EM. característicos de Stemphylium vesicarium, Botrytis cinerea y. SI ST. Fusarium oxysporum, recolectados de la Empresa Agroindustrial. PROCEDIMIENTO: a) Recolección de la muestra: Se recolectaron plantas de Asparagus officinalis “espárrago” que. DI. RE. CC. IO. N. II.. DE. Barraza Provincia de Trujillo.. presentaban signos y síntomas de Stemphylium vesicarium como: anillos marrones a nivel de los tallos, signos de Botrytis cinerea tales como: micelio gris en las raíces. y signos de Fusarium. oxysporum como puntos plateados en los turiones. (Figura 2). 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a. c. IC. A. Y. CO. M. UN IC. b. IN FO. RM. ÁT. Figura 2: Plantas de Asparagus officinalis “espárrago” con síntomas y signos de los hongos patógenos: S.vesicarium(a), F.oxysporum (b) y B.cinerea (c).. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. b) Aislamiento y obtención de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum: De cada muestra recolectada se tomó una porción de micelio y se sembró por puntura en una placa Petri, la cual contenía Agar Sabouraud Dextrosa (DSA). Las colonias cuya determinación correspondían a los hongos de interés fueron sembrados en frascos de penicilina (Técnica de agar inclinado) e incubadas durante cinco días a temperatura ambiente para obtener el cultivo puro.. DI. RE. CC. IO. c) Determinación de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum: Se realizaron microcultivos de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum para aislar las colonias de hongos y se determinó mediante claves taxonómicas especializadas.15 (Figura 3). 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. a. c. EM. AS. DE. Figura 3: Microcultivos de los hongos patógenos: S.vesicarium(a), F.oxysporum (b) y B.cinerea (c).. d) Obtención del cultivo puro de C.rosea:. SI ST. Se realizó siguiendo el procedimiento establecido por el Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA).. DE. La cepa del hongo estaba formada por papeles de 2 cm 2 en un. DI. RE. CC. IO. N. frasco aislado. Se procedió a extraer un papelito con la ayuda de una pinza de punta fina para luego sembrarlo en una placa Petri con Agar Sabouraud Dextrosa. A continuación se le agregó dos gotas de agua destilada, se esperó dos minutos para finalmente arrastrar por toda la superficie de la placa Petri. La placa Petri fue incubada a temperatura ambiente por un periodo de cinco días, a fin de obtener el cultivo puro de C.rosea.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. e) Obtención de los discos de micelio: En placas Petri con Agar Sabouraud Dextrosa se colocaron discos de micelio completamente esterilizados. Las cepas puras de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum. AC IÓ. incubados a temperatura ambiente por cinco días.. N. fueron sembrados en discos de micelio para posteriormente ser. UN IC. f) Control biológico in vitro(Prueba de antagonismo o cultivo dual):. M. La prueba de antagonismo se realizó empleando la técnica de. CO. cultivo dual en placas Petri, para lo cual se tuvo en cuenta lo. Y. siguiente:. IC. A. Se utilizaron 21 placas Petri de 9 cm de diámetro cada una. ÁT. conteniendo 10 ml de Agar Sabouraud. Dextrosa. (DSA). Primero. se. sembró. los. monocultivos. de. IN FO. repeticiones.. RM. previamente esterilizados, distribuidos en 7 tratamientos y 3 S.vesicarium, B.cinerea, F.oxysporum y C.rosea en tres placas cada uno, En 9 placas Petri se depositaron discos de micelio de. DE. cada hongo patógeno en un extremo y el disco de micelio de. AS. hongo antagonista en el otro extremo. Finalmente. los. EM. tratamientos fueron incubados a una temperatura de 38°C por 15. SI ST. días. Se realizó mediciones a los 3, 7,10,13 y 15 días del. DI. RE. CC. IO. N. DE. diámetro de la colonia del hongo. (Figura 4). Figura 4: Siembra de discos de micelio en los extremos de la placa Petri.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El antagonismo de C.rosea se comprobó estudiando las variables: radio del crecimiento antagonista(RCA), radio de crecimiento patógeno(RCP) y porcentaje de inhibición de crecimiento. AC IÓ. N. radial(PICR), empleando la fórmula de Ezziyyani.16. (R1 – R2). M. R1= Radio del patógeno testigo.. CO. Donde :. UN IC. PICR= (R1 X100). indicar. el. micoparasitismo(MICMO). ÁT. Para. IC. A. Y. R2= Radio del patógeno en el enfrentamiento.. como. posible. RM. mecanismo de acción de C.rosea, se realizaron observaciones. IN FO. macroscópicas del cultivo dual, tomándose como índice de micoparasitismo, la invasión del antagonista sobre la superficie del micelio del hongo fitopatógeno, teniéndose en cuenta la. EM. AS. DE. escala de Bell17. con la siguiente calificación.. C. rosea crece completamente sobre la. SI ST. CLASE 1. colonia del patógeno.. DI. RE. CC. IO. N. DE. CLASE 2. CLASE 3. C. rosea crece al menos sobre las dos terceras partes del medio de cultivo C. rosea cubre aprox. La mitad de la superficie del medio de cultivo. CLASE 4. El patógeno crece al menos sobre las dos terceras partes del medio de cultivo. CLASE 5. El patógeno crece sobre la colonia de C. rosea.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Luego de que C.rosea invadió el micelio de los hongos patógenos, se tomó una porción del micelio en la línea de contacto entre los dos hongos y con la ayuda del microscopio compuesto a 400X, se analizaron las interacciones de las hifas colocándolas en un portaobjetos y se observó el mecanismo de acción. AC IÓ. N. antagónica del biocontrolador. g) Diseño experimental:. C. rosea (testigo). Monocultivos. T1 T2 T3. B. cinerea (testigo). T4. Cultivos. C. rosea vs S.vesicarium. T1 X T2 =T5. duales. C. rosea vs F.oxysporum. T1 X T3 =T6. IN FO. RM. ÁT. A. F. oxysporum(testigo). IC. Y. S.vesicarium(testigo). CO. M. UN IC. Se realizó un diseño al azar conformado por 7 tratamientos y 3 repeticiones por tratamiento.. T1 XT4 = T7. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. C. rosea vs B. cinerea. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN IC AC IÓ. RESULTADOS. Tabla 1: Características morfológicas del crecimiento micelial en los monocultivos y cultivos duales de. T2. S. vesicarium (testigo). Regular. T3. F. oxysporum(testigo). Regular. T4. B. cinerea (testigo). Regular. T5. C. rosea vs *S.vesicarium. Irregular. T6. C. rosea vs *F.oxysporum. T7. C. rosea vs *B. cinerea. IC. Regular. DE. IN FO. C. rosea (testigo). A. A. T1. SI. ST. EM. Irregular. DE. Cultivos duales. COLOR DE LA COLONIA FINAL INICIAL Blanca Blanca. Y. CRECIMIENTO. AS. Mono cultivos. HONGOS. B. Irregular. ASPECTO Algodonoso. C. Gris. Marrón-oscuro. Algodonoso. Crema. Rosado. Algodonoso. Blanca. Gris. Algodonoso. Gris. Marrón-oscuro. Algodonoso. Crema. Rosado claro. Licuado. Blanca. Gris claro. Licuado. RM ÁT. TRATAM. CO. oxysporum, S. vesicarium y B. cinerea a los 15 días de evaluación.. C. rosea, F.. A. D. B. N. *F.oxysporum, *S.vesicarium, *B. cinerea: Hongos evaluados, regular : Crecimiento circular que determina el crecimiento normal de un hongo, ,irregular : C. D. CC I. O. Crecimiento anormal del hongo con un crecimiento semicircular, algodonoso : Crecimiento normal de la colonia que presenta micelio con textura de algodón.. DI. RE. licuada : La colonia del hongo se presenta laxo e inconsistente.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. De las características morfológicas evaluadas, el crecimiento de los monocultivos es regular. Cuando están enfrentados con el antagonista, presentan deformaciones a lo largo de su superficie (Irregular), C. rosea presenta un color blanco, mientras que F. oxysporum presenta un color crema que luego se va tornando rosado, S. vesicarium presenta un color marrón oscuro y B. cinerea presenta un color inicial blanco para. N. finalmente tornarse un color gris. En los cultivos duales, F. oxysporum y B.cinerea, van. AC IÓ. perdiendo la intensidad de su color, a excepción de S.vesicarium el cual no presenta variación en el tono e intensidad de su color. Por otro lado, los monocultivos presentan. UN IC. un aspecto algodonoso y en los cultivos duales, F. oxysporum y B.cinerea, presentan una aspecto licuado, a diferencia de S.vesicarium el cual no presenta variación en el. CO. M. aspecto de su colonia.. B. cinerea a los 15 días de evaluación,. A. F. oxysporum, S. vesicarium y. Y. Tabla 2: Grado de antagonismo en cultivos duales de C. rosea frente a. IN FO. RM. ÁT. IC. utilizando la escala de Bell.. HONGOS PATÓGENOS. GRADO DE ANTAGONISMO. Stemphylium vesicarium. Clase 3. T2. Fusarium oxysporum. Clase 2. Botrytis cinerea. Clase 3. AS. T1. DE. TRATAMIENTOS. SI ST. EM. T3. Se determinó que. el grado de antagonismo para. F. oxysporum es de clase 2,. DE. caracterizado por la invasión del antagonista en por lo menos las 3/4 partes del medio de cultivo frente al patógeno. Para S.vesicarium y B.cinerea se determinó que. N. pertenece a la clase 3, caracterizado por la invasión de las 2/4 partes del antagonista. DI. RE. CC. IO. en el medio de cultivo.(Figura 9).. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) 8.93. 9. M UN IC AC IÓ. 8.5. 8.43. 8. 8.27. 8.13. 7.53. 7.5 7. 7.33. CO. 6.6. 5.83. 6. 4.16 3.97. 4.2. 3.5. IN FO. 4. S.vesicarium T3. RM ÁT. 5 4.5. F.oxysporum T2. IC. 5.5. C.Rosea T1. B.cinerea T4. A. 5.73. Y. 6.5. 3.37. DE. 3. AS. 2.5 2.13. 2. 7. 10. 13. 15. ST. 3. EM. CRECIMIENTO PROMEDIO DEL DIÁMETRO DE LOS MONOCULTIVOS (Cm). 9 8.7. 8.5. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. SI. DIAS DE EVALUACIÓN. N. Figura 5: Crecimiento promedio de los monocultivos, C. rosea, S. vesicarium y B. cinerea a los 3, 7, 10, 13 y 15 días de. CC I. O. evaluación.El crecimiento de los monocultivos, F. oxysporum, S vesicarium y B. cinerea a los 15 días con su máximo diámetro micelial, de 8,97; 8,7. RE. y 9 Cm respectivamente; a diferencia de C.rosea con un crecimiento lineal lento y prolongado que alcanzo a los 15 días de evaluación 7,53 cm de. DI. diámetro micelial a una temperatura de 28 °C.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN IC AC IÓ. 5 4.3 4.33. 3.73. IC. 3.76. RM ÁT. 3.5. 3.83 3.63 3.4. Y. 4. CO. 4.17. IN FO. 3 2.5. *S.vesicarium T6. *B.cinerea T7. 3.23 2.93. 2.5. DE. 2. *F.oxysporum T5. A. 4.5. AS. 1.67. 1.5. 7. 10. 13. 15. ST. 3. EM. CRECIMIENTO PROMEDIO DEL DIÁMETRO DE LOS CULTIVOS DUALES (Cm). 5.5. SI. DIAS DE EVALUACIÓN. DE. *F.oxysporum, *S.vesicarium, *B. cinerea: Hongos enfrentados con C.rosea. O. N. Figura 6: Crecimiento promedio de los cultivos duales de C.rosea, frente a F.oxysporum, S. vesicarium y B. cinerea a los 3,. CC I. 7, 10, 13 y 15 días de evaluación.Al inicio de la evaluación los hongos patógenos presentaron un crecimiento lineal ascendente, que a medida. RE. que transcurrió el tiempo de evaluación los hongos patógenos decrecieron presentando hasta un diámetro máximo de 1,67 cm como es el caso de F.. DI. oxysporum y; un valor de 2,93 y 3,23 cm de diámetro micelial para B. cinerea, y S. vesicarium respectivamente.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 90. 69.25. 70. CO. 67.44. 60. 57.89 55.75. F.oxysporum. S.vesicarium. 44.93. 34.85. IN FO. 30. B.cinerea. RM ÁT. 40. IC. A. 50. 62.87. Y. 53.68. 20 10. 10.59. 0. 4.08. DE. 14.35. 7. EM. 3. AS. 10.29. SI. ST. PORCENTAJE DE INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO RADIAL (%). 81.36. 80. 10. 13. DIAS DE EVALUACIÓN. DE. Figura 7: Porcentaje de inhibición de F. oxysporum, S. vesicarium. y B. cinerea. enfrentados a C.rosea a los 3, 7, 10, 13 y 15. CC I. O. N. días de evaluación.. 15. DI. RE. Al tercer día de evaluación S. vesicarium, F. oxysporum y B. cinerea enfrentados con C. rosea, presentaron un porcentaje de inhibición de 4,08 %; 10,59% y 14,35% respectivamente y a los 15 días de evaluación presentaron un porcentaje de inhibición de 62,87 %; 81,36% y 67,44% respectivamente.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3: Análisis de varianza (ANOVA) del crecimiento promedio de F. oxysporum, S. vesicarium y B. cinerea enfrentados a C. rosea a los 15 días de evaluación. ANÁLISIS DE VARIANZA. Entre grupos. 192.04. 6. Promedio de cuadrados 32.01. Dentro de los grupos Total. 0.42. 14. 0.03. 192.46. 20. F 1066.88. Valor crítico para F 2.85. N. GL. AC IÓ. Suma de cuadrados. CO. M. UN IC. Origen de las variaciones. A los 15 días de evaluación el crecimiento promedio de F. oxysporum, S. vesicarium y B.. A. IC. por lo cual las medias entre los tratamientos son diferentes .. Y. cinerea enfrentados con C. rosea presentaron diferencias estadísticas significativas p<0,05. sobre F. oxysporum, S.vesicarium. RM. de C. rosea. ÁT. Tabla 4: Comparación de las mediciones (Promedio) de los halos de inhibición utilizando. IN FO. TUKEY a los 15 días de evaluación.. y B. cinerea. HSD DE TUKEY Especie de hongo. T1 T2 T3 T4 T5 T7. Clonostachys rosea Stemphylium vesicarium Fusarium oxysporum Botrytis cinerea. SI ST. EM. AS. DE. TRA. *Stemphylium vesicarium. DE. *Botrytis cinerea *Fusarium oxysporum. T6. N 7 7 7 7 7 7 7. Subconjunto para alfa = 0.05 1 2 3 4 1,33 0,03 0,14 6,07 6,04 1,56. IO. N. *F.oxysporum, *S.vesicarium, *B. cinerea: Hongos enfrentados con C.rosea. 0,17. CC. Al comparar el crecimiento de los cultivos duales de F. oxysporum, S.vesicarium y Botrytis. RE. cinerea enfrentados con C. rosea se obtuvieron 4 subgrupos de homogeneidad para un α =0,05. Para los monocultivos no se presentaron diferencias entre F.oxysporum, B.cinerea y. DI. S.vesicarium, mientras que sí se presenta diferencias estadísticas significativas entre *F.oxysporum y *B. cinerea; y *F.oxysporum y *S.vesicarium a excepción de *B. cinerea y *S. vesicarium que no presentan diferencias significativas.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) c. d. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. Figura 8: Crecimiento de los monocultivos de C. rosea (a), F. oxysporum (b), S vesicarium (c) y B cinerea (d) a los 15 días de evaluación.. N. El crecimiento de los cultivos de F. oxysporum, S vesicarium y B cinerea llegan a. IO. ocupar la totalidad de la placa Petri, mientras que el crecimiento de C.rosea no llega a. CC. ocupar la totalidad de la placa Petri, es decir, el crecimiento de los patógenos es. DI. RE. mayor que el crecimiento del controlador.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A. a. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. b. CC. IO. N. c. = Línea media de la placa Petri. = Línea de avance del controlador. = 1 cm. DI. RE. Figura 9: Crecimiento de los cultivos duales de F. oxysporum (a), S. vesicarium (b) y B. cinerea (c) enfrentados C. rosea los 15 días de evaluación.. El crecimiento del cultivo de C.rosea es superior al crecimiento de los cultivos de F.oxysporum, S.vesicarium y B.cinerea. a los 15 días de evaluación.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. a. DE. c. CC. IO. N. Figura 10: Estado morfológico de las esporas e hifas de F. oxysporum (a), S. vesicarium(b) y B. cinerea(c) enfrentados a C. rosea los 15 días de evaluación.. RE. Las esporas de F.oxysporum presentan ruptura en los tabiques, las esporas están. DI. incompletas y pequeñas. S.vesicarium presentan deformaciones a nivel de las esporas, además están pequeñas y deformes. En la figura c se presenta una hifa de C.rosea estrangulando a la hifa de B.cinerea.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN Los resultados obtenidos en esta investigación detallan que C. rosea inhibe el crecimiento miceliar de los hongos fitopatógenos. F.. N. oxysporum, B. cinerea y S. vesicarium. Esto confirma lo encontrado por. AC IÓ. otros autores en sus investigaciones, quienes determinaron que el. combate de B. cinerea con G. roseum (=C.rosea) en fresa (tanto en. UN IC. hojas como en frutos) siempre fue igual o superior al logrado con fungicidas.18, 7. CO. M. Dentro de las características morfológicas, el crecimiento. de los. monocultivos es regular, sin embargo cuando están enfrentados los. A. Y. hongos presentan deformaciones a lo largo de su superficie. Algunos. IC. autores explican que es debido a que las hifas de B.cinerea son más. ÁT. gruesas que las hifas de F.oxysporum, por lo cual la resistencia de. RM. B.cinerea es mayor19. En condiciones apropiadas las colonias de los. IN FO. hongos se presentan de forma normal y colores característicos. Sin embargo al ser enfrentados los hongos se tornan más claros y de un. DE. aspecto licuado. A diferencia de S. vesicarium que se mantiene de la misma forma, color y aspecto al ser enfrentado a C.rosea, en una. AS. investigación S.vesicarium fue muy resistente al antagonismo de tres. EM. cepas nativas de Trichoderma spp, por. lo cual sus características. SI ST. morfológicas no cambiaron, mientras que F.oxysporum cambio su color. DE. rosado a rosado claro20. F.oxysporum presenta clase 2 mediante la escala de Bell, debido a que. N. antagonista invade las. IO. el. ¾ partes del medio de cultivo frente al. CC. patógeno, mientras que S.vesicarium y B.cinerea presentan clase 3 por. RE. la invasión de las 2/4 partes del antagonista en el medio de cultivo.. DI. Asimismo el porcentaje de inhibición para F. oxysporum se obtuvo un. 81%, B. cinerea presentó un 67% y S.vesicarium presentó un 62%, según investigaciones en 2007,. tanto B. cinerea y S.vesicarium. presentan enzimas antioxidantes (CAT y SOD), que además de producir cutinasa y poligalacturonasa que son más resistente al ataque a C. rosea21. Entre las enzimas líticas que produce C.rosea se reportan las 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. quitinasas,. glucanasas,. proteasa. y. celulasas,. algunas. están. relacionadas con el fenómeno de la antibiosis y micoparasitismo al degradar la pared celular y micoparasitar al hospedero.22,23 La cantidad de metabolitos producida por el controlador depende de los. N. nutrimentos y no siempre está relacionada con la habilidad para. AC IÓ. controlar la enfermedad24.Sin embargo, otro autor indicó una correlación positiva entre la cantidad de enzimas y el porcentaje de micoparasitismo. UN IC. y reducción de la enfermedad.25. M. Las condiciones que pueden afectar el desempeño de G. roseum como. CO. biocontrolador están: la concentración del inóculo del antagonista y del patógeno; y las condiciones ambientales. mencionan que C.rosea. A. Y. incrementa su actividad supresiva según se incrementa la temperatura. IC. de 10 a 25 o C y que a partir de los 15 o C la germinación de los. ÁT. conidios del biocontrolador es mayor al 80%, incrementándose también. RM. con el aumento de temperatura.26, 9 Debido a ello, la cepa de C. rosea. IN FO. creció menos que las cepas de los hongos patógenos, pero esto no influyó en la inhibición debido a que C. rosea sólo actúa efectivamente. DE. cuando es aplicado al mismo tiempo o antes de que ocurra la infección. AS. por parte de B. cinerea o cualquier otro patógeno. 27. EM. El estado morfológico de las esporas e. hifas de F. oxysporum. SI ST. presentaron ruptura en los tabiques, mientras que S.vesicarium presentó deformaciones en sus esporas asimismo B.cinerea presentó hifas. DE. delgadas y débiles además del enrollamiento de C.rosea en sus hifas,. N. según algunos autores,, C.rosea presenta varios mecanismos de acción. IO. como la competencia por los nutrientes presentes en el suelo, el. CC. enrollamiento alrededor de las hifas del hospedante y la producción de. DI. RE. enzimas. hidrolíticas. como. ß-1,3-glucanasas,. ß-1,6-glucanasas,. quitinasas, y proteasas, para penetrar al hospedante y usar su contenido celular como fuente de nutrientes.28,29. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El estudio del controlador C. rosea es muy limitado y poco conocido sobre todo en el Perú. Hasta el momento los resultados indican la capacidad inhibitoria de C. rosea sobre F. oxysporum, S.vesicarium y B. cinerea por lo cual este trabajo es un modelo a seguir para. seguir. N. investigando en busca de un biocontroladores para muchos y diferentes. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. hongos que causan daño económico en cultivos de espárrago en el Perú. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. UN IC. AC IÓ. N.  La acción antagónica in vitro de C.rosea sobre el crecimiento de S.vesicarium, B.cinerea y F.oxysporum fue positiva, determinándose como grado de antagonismo la clase 2 para F. oxysporum y B.cinerea, mientras que para S.vesicarium corresponde la clase 3. Además el porcentaje de inhibición para F oxysporum, B.cinerea y S.vesicarium, fue de 81,36%, 67,44% y 62,87% respectivamente.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M.  Los monocultivos crecieron de manera homogénea y normal en condiciones apropiadas, sin embargo cuando fueron enfrentados en los cultivos duales, los patógenos presentaron deformaciones en la colonia, perdida de la intensidad del color además de licuación de las colonias con la excepción de S.vesicarium.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Stevens R.2008. «You should know, you're a medic: Why does urine smell odd after eating asparagus?». 2. Agreda V y Granda A. 1999. Análisis social de los potenciales usuarios. AC IÓ. N. del INCAGRO en el Valle de Chincha. Proyecto INCAGRO. Lima (Perú).. 3. Comisión para la Promoción de Exportaciones. (CPE). 2013. Perfil del. UN IC. Esparrago Peruano para el Mercado Alemán, Lima PROMPEX. Perú.pp. 53. M. 4. Cisneros F. 1995. Principios de Control de Plagas Agrícolas. 2da. ed.. CO. Edit. Gráfica Pacific Press S.A. Lima, Perú.. Y. 5. Butin H, H Peredo. 1986. Hongos parásitos en coníferas de América del. A. Sur con especial referencia a Chile. Biblioteca Mycológica.. Berlin-. IC. Stuttgart, Alemania. 100 pp.. ÁT. 6. Guédez C, Cañizalez L, Castillo C Y Olivar R. 2009. Efecto antagónico Trichoderma. harzianum. sobre. RM. de. algunos. hongos. patógenos. IN FO. postcosecha de la fresa(Fragaria spp). Rev RSVM 29:34-38. 7. Ellis M. 1971. Dematiaceous hyphomycetes. Commonwealth Mycological. DE. Institute. Kew, Surrey. Inglaterra. 167 pp.. AS. 8. Corra L. 2009. Herramientas de capacitación para el manejo responsable. EM. de plaguicidas y sus envases: efectos sobre la salud y prevención de la exposición. 2da ed., Buenos Aires: Organización Panamericana de la. SI ST. Salud (OPS). 300 p.. 9. Chaves N, Wang A. 2004. Combate del moho gris (Botrytis cinerea) de la. DE. fresa mediante Gliocladium roseum. Agronomía Costarricense. Julio-. IO. N. Diciembre. Vol 28, N°002. Universidad de Costa Rica. San José Costa. CC. Rica pp 73-85. 10. Molina M, Zaldua F, Gonzalez V. 2006. Selección de hongos. DI. RE. antagonistas para el control biológico de Botrytis cinerea en viveros forestales en Chile. Bosque (Valdivia) 27(2): 126-134.. 11. Aquino M, Vázquez G, Reyes R. 2007. Biocontrol in vitro e in vivo de Fusarium oxysporum Schlecht. f. sp. dianthi (Prill. y Delacr.) Snyder y Hans. con Hongos Antagonistas Nativos de la Zona Florícola de Villa Guerrero, Estado de México. Rev. mex. fitopatol vol.26 no.2. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 12. Suarez M. 2008. Antagonismo in vitro de Trichoderma harzianum Rifai sobre Fusarium solani ( Mart) asociado a la marchitez en la maracuyá. Revista Colombiana de Biotecnología. Vol X, Num. pp 35-43. Universidad Nacional de Colombia. Bogota, Colombia.. N. 13. Sutton J. 1994. Biological control of strawberry diseases Advances in. AC IÓ. Strawberry Research 13: 1-12.. 14. Papavizas G. 1985. Trichoderma and Gliocladium: biology, ecology, and. UN IC. potential for biocontrol. Annual Review of Phytopathology 23:23-54.. 15. Smith G.1996. Smith´s Introduction to Industrial Mycology. 7 ed. Edward. M. Arnold(Publisher)Ltd. London. 123-154 pp. CO. 16. Ezziyyani M, Perez S, Requena M, Rubio L y Candela M. 2004.. Y. Biocontrol por Streptomyces rochei –Ziyani–, de la podredumbre del. IC. A. pimiento (Capsicum annuum L.) causadapor Phytophthora capsici.. ÁT. Anales de Biologia 26: 69-78.. RM. 17. Bell, D, Wells C, Markham. 1982. «In Vitro Antagonism of Trichoderma. IN FO. Species Against Six Fungal Plant Pathogens», Phytopathology, 72:379382.. 18. Peng G, Sutton J, Kevan P. 1992. Efectiveness of honey bees for. DE. applying the biocontrol agent Gliocladium roseum to strawberry flowers to. AS. supress Botrytis cinerea. Canadian Journal of Plant Pathology 14(2):117-. EM. 129.. SI ST. 19. Nirenberg H. 1998. New Fusarium species and combinations within the Gibberella fujikuroi species complex. Mycologia 90: 434-458.. DE. 20. Acuña A J. 2006. spp.. como. controlador. biológico. de. aislados. de. N. Trichoderma. Evaluación in vitro de tres cepas nativas de. IO. Stemphylium vesicarium obtenidos de espárrago. Universidad de Talca.. CC. Facultad de Ciencias Agrarias. Chile. pp01-43.. DI. RE. 21. Rivera F .2007. Evaluación Y Caracterización De La Actividad Antifúngica De La Especie Quillaja Saponaria Mol. Cultivada In Vitro En Botrytis Cinerea Pers. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Temuco, Chile. 22. Bruce A, Srinivasan U, Staines H, Highley T.1995. Chitinase and laminarinase production in liquid culture by Trichoderma spp. and their 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. role in biocontrol of wood decay fungi. Intern. Biodet. & Biodeg. 23: 337353. 23. Schickler H. y Chet. 1997. Herologous chitinase gene expresion to. improve plant defense against phytopathogenia fungi. Journal of. N. Industrial Microbiology & Biotecnology 19: 196-201.. AC IÓ. 24. Worasatit N, Sivasithamparam K, Ghisalberti E, Rowland C. 1994. Variation in pyrone production, lytic enzymes and control of rhizoctonia. UN IC. root rot of wheat among single-spore isolates of Trichoderma koningii. Mycol. Res. 98: 1357-1363. L, Katan T, Katan. J, Henis Y. 1997. Biological control of. M. 25. Madi. CO. Sclerotium rolfsii and Verticillium dahliae by Talaromyces flavus is. Y. mediated by different mechanisms. Phytopathology 87: 1054-1060. IC. A. 26. Papavizas G. 1985. Trichoderma and Gliocladium: biology, ecology, and. ÁT. potential for biocontrol. Annual Review of Phytopathology 23:23-54.. RM. 27. Hannusch D, Boland G. 1996. Influence of air temperature and relative. IN FO. humidity on biological control of white mold of bean (Sclerotinia sclerotiorum). Phytopathology 86:156-162. 28. Yu H y Sutton J. 1997. Gliocladium roseum: a cosmopolitan antagonist. DE. of Botrytis cinerea and other pathogens in crops. p.22-24. In Congreso. EM. Rica. 40 p.. AS. Annual APS, División Caribe. Noviembre 10-12, 1997. San José, Costa. SI ST. 29. Kullnig C, Lorito C. Kubicek: «Enzyme Diffusion from Trichoderma atroviride (= T. harzianum P1) to Rhizoctonia solani Is a Prerequisite for. DE. Triggering of Trichoderma Ech 42 Gene Expression Before Mycoparasitic. N. Contact», Appl. Environ. Microbiol. 66:2232- 2234, EE.UU., 2000.. IO. 30. Aparicio V, Rodríguez M, Gómez V, Sáez E, Belda J, Casado E, Lastres. CC. J. 1995. Plagas y enfermedades de los principales cultivos hortícolas de. DI. RE. la provincia de Almería: control racional. Consejería de Agricultura y Pesca. Junta de Andalucía. Sevilla: 260 pp.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. ANEXOS. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. Figura 11: Recolección de las plantas de Asparagus officinalis L “espárrago” procedentes de la empresa agroindustrial Barraza.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) 1. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. M. 2 1. Planta con signos característicos de S.vesicarium. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 2. Siembra por puntura de S.vesicarium. DE. 3. IO. N. 4. CC. 4. Determinación de S.vesicarium mediante microcultivos.. DI. RE. 3. Aislamiento de S.vesicarium. Figura 12: Aislamiento de S.vesicarium de plantas de Asparagus officinalis.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) 2. CO. M. 1. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. Siembra por puntura de F.oxysporum. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 1. Planta con signos característicos de F.oxysporum. DE. 4. IO. N. 3 CC. 4. Determinación de F.oxysporum mediante microcultivos.. DI. RE. 3. Aislamiento de F.oxysporum. Figura 13: Aislamiento de F.oxysporum de plantas de Asparagus officinalis.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. CO. M. 1. 2. Siembra por puntura de B.cinerea. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 1. Planta con signos característicos de B.cinerea. 4. CC. IO. N. DE. 3. 4. Determinación de B.cinerea mediante microcultivos.. DI. RE. 3. Aislamiento de B.cinerea. Figura 14: Aislamiento de B.cinerea de plantas de Asparagus officinalis.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2. CO. M. 1. 2. Siembra de C.rosea. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 1. Frasco conteniendo la cepa de C.rosea.. 4. CC. IO. N. DE. 3. 4. Determinación de C.rosea mediante microcultivos.. DI. RE. 3. Obtención del cultivo puro de C.rosea. Figura 15: Obtención de C.rosea procedente del SENASA.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) 1. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. M. 2. 2. Siembra del cultivo en la placa Petri.. RM. ÁT. IC. A. Y. 1. Preparación de agar sabouraud.. S.vesicarium. S.vesicarium. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. C.rosea. 4. N. DE. 3. 3. Observación del monocultivo de S.vesicarium. RE. CC. IO. 3. Observación del cultivo dual, C.rosea y S.vesicarium.. DI. Figura 16: Técnica del monocultivo y cultivo dual, a nivel macroscópico de C.rosea sobre S.vesicarium.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) 1. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 2. 4. DE. SI ST. 3. DI. RE. CC. IO. N. Figura 17: Crecimiento de los monocultivos de C. rosea(a), S vesicarium(b), F.oxysporum (c) y B cinerea(d) a los 3 días de evaluación.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) 3. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. 2. IC. 1. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. Figura 18: Crecimiento de los cultivos duales de F. oxysporum (a), S. vesicarium (b) y B. cinerea (c) enfrentados C. rosea los 3 días de evaluación.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(49) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 5: Crecimiento del diámetro de la colonia de los monocultivos y cultivos duales de S.vesicarium, F.oxysporum, B.cinerea y C.rosea. a los 3 días de. CULTIVO DUAL. AC IÓ. MONOCULTIVO T2. T3. T4. T5. T6. C.rosea. S.vesicar. F.oxys. B. cine. S.ves vs C.ros. F.oxy Vs C.ros. 1. 2,2. 4.5. 4,0. 3,9. 4,5. 2,7. 2. 2,1. 4,0. 4,1. 4,0. 4,5. 2,8. 3. 2,1. 4,0. 4,1. 4,0. 4,0. 2,7. 2,7. 3,0. 1,9. 2,6. 3,8. 2,0. 2,6. 3,4. 1,9. CO. M. 3,7. A. Y. 3,6 3,6. B.cin vs C.ros. IN FO. RM. ÁT. IC. REP. T7. UN IC. T1. TRAT. N. evaluación.. Tabla 6: Crecimiento del diámetro la colonia de los monocultivos y cultivos duales de S.vesicarium, F.oxysporum, B.cinerea y C.rosea. EM. AS. DE. evaluación.. a los 7 días de. T2. T3. T4. T5. T6. T7. C.rosea. S.vesicar. F.oxys. B. cine. S.ves vs C.ros. F.oxy Vs C.ros. B.cin vs C.ros. 5,5. 6,6. 8,3. 5,5. 3,6. 4,3. 4,3. 3,9. 3,5. 6,0. 6,6. 8,3. 5,2. 3,7. 4,3. 4,4. 3,8. 3,3. 3,4. 6,0. 6,6. 8,2. 5,0. 3,7. 4,3. 4,3. 3,8. 3,4. 2. 3,3. DI. 3. N. 3,4. RE. 1. DE. T1. IO. REP. CULTIVO DUAL. CC. TRAT. SI ST. MONOCULTIVO. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(50) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 7: Crecimiento del diámetro la colonia de los monocultivos y cultivos duales de S.vesicarium, F.oxysporum, B.cinerea y C.rosea. a los 10 días de. CULTIVO DUAL. AC IÓ. MONOCULTIVO T2. T3. T4. T5. T6. C.rosea. S.vesicar. F.oxys. B. cine. S.ves vs C.ros. F.oxy Vs C.ros. 1. 4,3. 8,5. 7,4. 8,5. 4.1. 4,0. 2. 4,1. 8,5. 7,4. 8,5. 4,0. 4,0. 3. 4,2. 8,3. 7,2. 8,5. 4,2. 4,1. 4,4. 3,7. 3,1. 4,8. 3,7. 3,0. 4,5. 3,6. 3,2. CO. M. 4,5. Y. 4,0 4,0. B.cin vs C.ros. RM. ÁT. IC. A. REP. T7. UN IC. T1. TRAT. N. evaluación.. IN FO. Tabla 8: Crecimiento del diámetro de la colonia de los monocultivos y cultivos duales de S.vesicarium, F.oxysporum, B.cinerea y C.rosea. AS. DE. evaluación.. C.rosea. S.vesicar. 1. 5,7. 2. 5,8. 3. 5,7. T4. T5. T6. T7. F.oxys. B. cine. S.ves vs C.ros. F.oxy Vs C.ros. B.cin vs C.ros. 9,0. 8,3. 9,1. 3,5. 4,5. 2,5. 5,0. 3,7. 4,8. 8,5. 8,0. 8,7. 4,0. 4,5. 2,5. 5,0. 4,0. 4,7. 8,6. 8,1. 9,0. 3,7. 4,6. 2,5. 5,0. 3,6. 4,8. N IO. DI. RE. CC. REP. T3. SI ST. T2. CULTIVO DUAL. DE. T1. EM. MONOCULTIVO TRAT. a los 13 días de. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(51) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 9: Crecimiento del diámetro de la colonia de los monocultivos y cultivos duales de S.vesicarium, F.oxysporum, B.cinerea y C.rosea. a los 15 días de. CULTIVO DUAL. AC IÓ. MONOCULTIVO T2. T3. T4. T5. T6. C.rosea. S.vesicar. F.oxys. B. cine. S.ves vs C.ros. F.oxy Vs C.ros. 1. 7,8. 9,0. 9,0. 9,0. 3,0. 5,5. 2. 7,3. 8,8. 9,0. 9,0. 3,2. 5,2. 3. 7,5. 8,7. 8,9. 9,0. 3,5. 5,2. 5,8. 2,7. 6,0. 6,2. 3,1. 5,5. 6,0. 3,0. 5,5. CO. M. 1,8. A. Y. 1,6 1,6. B.cin vs C.ros. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. REP. T7. UN IC. T1. TRAT. N. evaluación.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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