ESPAÑA
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Int. Cl.7:A61K 31/405
C07D 209/42
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TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA T3
86
Número de solicitud europea:98909146 .7 86
Fecha de presentación:13.03.1998 87
Número de publicación de la solicitud:1018878 87
Fecha de publicación de la solicitud:19.07.2000
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Título:Nuevos indolcarboxamidas, composiciones farmacéuticas y procedimientos de inhibición de la cal-paína.
30
Prioridad:14.03.1997 US 40589 P
45
Fecha de publicación de la mención BOPI: 01.05.2005
45
Fecha de la publicación del folleto de la patente: 01.05.2005
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Titular/es:SmithKline Beecham Corporation One Franklin Plaza
Philadelphia, Pennsylvania 19103, US CEPHALON, Inc.
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Inventor/es:Daines, Robert, A.; Sham, Kelvin, Kin-Cheong y Mallamo, John, P.
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Agente:Ungría López, Javier
Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art. 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas).
ES
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5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 DESCRIPCIÓN
Nuevos indolcarboxamidas, composiciones farmacéuticas y procedimientos de inhibición de la calpaína. Resumen de la invención
Esta invención se refiere a nuevos compuestos químicos que son indolcarboxamidas. Las composiciones y los métodos farmacéuticos reivindicados utilizan estos compuestos como ingredientes activos para inhibir calpaína, por lo que son útiles en el tratamiento de, por ejemplo, trastornos degenerativos, ataques apopléticos y lesiones cerebrales traumáticas.
Antecedentes de la invención
Las calpaínas son cisteína proteasas dependientes del calcio presentes en diversidad de tejidos y células. Una ac-tivación excesiva de calpaína proporciona una conexión molecular entre isquemia o lesión inducida por incrementos en el calcio intraneuronal y degeneración neuronal patológica. Si se dejan sin controlar los niveles de calcio elevados, la consecuencia puede ser lesión estructural grave para las neuronas. La investigación reciente ha sugerido que la activación de calpaína puede representar un trayecto final común a muchos tipos de lesiones cerebrales. La inhibición selectiva de calpaína sería por tanto un método terapéutico atractivo en el tratamiento de enfermedades neurodegene-rativas. Entre los ejemplos de estas enfermedades estarían isquemia miocárdica, isquemia cerebral, distrofia muscular, ataque aplopético, enfermedad de Alzheimer, o lesión cerebral traumática.
Los compuestos de esta invención pueden ser útiles en el tratamiento de cataratas y agregación de plaquetas. Descripción detallada de la invención
Los compuestos que son ingredientes activos de las composiciones y métodos farmacéuticos de esta invención están representados por la siguiente fórmula:
Fórmula I
en la que:
R1es CH2Ph, CH2CH(CH3)2o CH2CH2CH2CH2NR6, R7;
Z es CHO, COCH2F, COCOOH, COCONH-alquilo, COCOO-alquilo, COCO-(CH2)n-arilo, COCONHCH(R1)
COOH o COCH2O-(3-fenilixisoxazol-5-ilo);
n = 1 - 6;
R2es H, CH3, CH2Ph, CH2-piridina, CH3SO2, CF3SO2o PhSO2;
R3es H, CH3, o alquilo inferior;
R4y R5son, independientemente H, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, o benciloxilo;
R6es COOCH2Ph, COOCH2-piridina, CO-arilo, SO2CH3, SO2CF3, SO2-arilo, H o alquilo inferior; y
R7es H, o alquilo inferior
Siempre que, cuando Z es CHO y R3es distinto a H, entonces R2no es H, o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo.
Los compuestos preferidos son aquellos cuya estereoquímica en el grupo R1 corresponde a la de los aminoácidos
de la naturaleza. También son preferidos los compuestos donde R1es CH2Ph y Z es CHO.
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-5-metoxi-6-(fenilmetoxi)-2-indolcarboxamida; (S)-5-bromo-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(metilsulfonil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-6-metoxi-2-indolcarboxamida; y (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-3-metil-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida.
Los compuestos de Fórmula I se preparan por los métodos ilustrados en los esquemas 1 y 2. Esquema 1
a) (S)-(-)-2-amino-3-fenilpropanol, EDC, HOBT, NMM, CH2Cl2
b) Reactivo de Dess-Martin, CH2Cl2
Los ácidos indol-2-carboxílicos 1 (Esquema 1), ya sean preparados o comerciales, se convierten en amido alco-holes 2 en condiciones de copulación convencionales (por ejemplo, (S)-(-)-2-amino-3-fenilpropanol, hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC), N-metilmorfolina (NMM), cloruro de metileno). La oxidación de 2 (se prefiere el reactivo de Dess-Martin en cloruro de metileno pero no es limitativo) conduce al aldehido 3. Este procedimiento se puede repetir con una amplia variedad de ácidos indol-2-carboxílicos sustituidos y con una amplia variedad de derivados de amino alcohol para obtener compuestos con sustituyentes R1variables.
Los compuestos de Fórmula 1 en los que el ácido indol carboxílico no está comercialmente disponible se preparan por el método descrito en el esquema 2.
Esquema 2
a) NaH, THF, 0 - 25ºC: b) PhCH2Br o MeSO2Cl;
c) NaOH 1N, MeOH, THF; d) HCL al 10%
pro-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
porcionar los deseados ácidos indol-2-carboxílicos 1. Los ácidos 1 se convierten entonces en los deseados compuestos finales según el Esquema 1. Para los casos en que el éster de indol 5 está comercialmente disponible, estos compuestos se convierten directamente en los ácidos 1 como se ha descrito antes.
Aunque estos métodos ilustran la preparación de compuestos para los que Z es CHO, pueden servir de sustituyentes “grupos reactivos a enzima” alternativos como se ha descrito ampliamente en la bibliografía (J. Med. Chem. 1994, 37, 2918-2929; J. Med. Chem. 1993, 36, 3472 - 3480; J. Med. Chem., 1990, 33, 11-13; Biochem. J. 1986, 239, 633-640; J. Med. Chem., 1992, 35 216-220). Además, no han de considerarse que estos métodos limitan el alcance de los grupos R1posibles, que pueden derivarse fácilmente de cualquier amino-alcohol o amino ácido por métodos bien conocidos
en la especialidad.
Se incluye también en el marco de la presente invención las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la Fórmula 1. Entre las sales preferidas se incluyen, sin que quede limitado solo a ellas, hidrocloruro, hidrobro-muro, citrato, tartrato, malato, maleato, lactato, glucosa 1,6-difosfato, fosfato, succinato, sulfato, aspartato, adipato, metanosulfonato, lauril sulfato, fosfato de diguayaquilo, sulfato de diacetilo, glutamato, edetato, etilen diamina, sa-les de sodio, potasio, calcio y etanolamina. Estas sasa-les se preparan según los procedimientos convencionasa-les bien conocidos en la técnica.
La actividad farmacéutica de los compuestos de esta invención se demuestra por inhibición de calpaína in vitro utilizando el procedimiento de ensayo descrito por Sasaki y col. J. Biol. Chem. 1984, 259, 12489-12494. Los ensayos se llevan a cabo utilizando substratos fluorogénicos sintéticos. La inhibición de la actividad enzimática se calculó por el porcentaje de reducción de la proporción de hidrólisis del substrato en la presencia de inhibidor con respecto a la proporción en su ausencia. Se calcularon las concentraciones IC50(nM). La Tabla 1 muestra los resultados de los
compuestos de ensayo representativos de Fórmula I.
TABLA 1
Los resultados anteriores indican claramente que todos los compuestos ensayados presentan una inhibición signi-ficativa de calpaína.
Las composiciones farmacéuticas de esta invención empleadas para inhibir calpaína comprenden un vehículo far-macéutico y como ingrediente activo un compuesto de la Fórmula 1. El ingrediente activo estará presente en las composiciones de esta invención en una cantidad eficaz para inhibir calpaína. Preferiblemente, la composición con-tiene el ingrediente activo de Fórmula 1 en una cantidad de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 250 mg, ventajosamente de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 150 mg por dosis unidad.
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están lactosa, estearato de magnesio, sacarosa, talco, ácido esteárico, gelatina, agar o acacia. Entre los ejemplos de vehículos líquidos están jarabes, aceite de cacahuete, aceite de oliva, propilen glicol, polietilen glicol y agua.
Se puede emplear una amplia variedad de formas farmacéuticas. Según esto, si se emplea un vehículo sólido, a la preparación se le puede dar forma de tabletas o se puede colocar en una cápsula de gelatina dura. Si se emplea un vehículo líquido, la preparación puede estar en la forma de cápsula de gelatina blanda, puede estar introducida en una ampolla, puede formar una suspensión líquida, jarabe o suspensión.
Preferiblemente, se emplean soluciones o suspensiones parenterales. Estas comprenden el compuesto activo en un vehículo acuoso u oleoso estéril como, por ejemplo, aceite de cacahuete, polietilen glicol o polivinilpirrolidona. Preferiblemente, estas soluciones contienen el compuesto activo en el intervalo de 0,1 a 140 mg/kg de peso corporal del paciente al que se le administra. Las soluciones parenterales estériles pueden contener también aditivos tales como, por ejemplo, conservantes como alcohol bencílico y agentes tampón para llevar la preparación inyectable a un pH satisfactorio. Se pueden emplear también agentes estabilizantes tales como ácido ascórbico o bisulfato de sodio. Se pueden emplear disolventes DMSO o alcohólicos para favorecer la solubilidad y penetración del inhibidor de calpaína.
Las soluciones acuosas estériles se pueden liofilizar también y reconstituir antes de su administración.
La solución parenteral se puede administrar subcutáneamente, intravenosamente, intraperitonealmente, intraester-nalmente o por inyección intratecal directamente en el sistema nervioso.
Las composiciones farmacéuticas se preparan por técnicas convencionales que suponen procedimientos tales como mezclado, granulado y compresión para disolver ingredientes según lo apropiado para la preparación deseada.
Preferiblemente, los compuestos de Fórmula 1 se administran en formas de dosificación unidad preparadas por combinación de una dosis apropiada del compuesto con vehículos farmacéuticos convencionales.
Más preferiblemente, los ingredientes activos de Fórmula I se administran en regímenes de dosificación diaria de aproximadamente 2,0 mg a aproximadamente 1,0 g, más preferiblemente de aproximadamente 50 mg a aproximada-mente 400 mg. Es ventajoso que se administren dosis iguales dos a cuatro veces al día. Cuando la administración se lleva a cabo como se ha descrito antes, se produce la inhibición de calpaína.
La vía de la administración de las composiciones farmacéuticas de esta invención, y de acuerdo con los métodos de esta invención, es interna, más específicamente es oral o preferiblemente parenteral, en una cantidad suficiente para producir la deseada actividad biológica.
Los siguientes ejemplos no son limitativos sino solo ilustrativos de los compuestos y composiciones de esta inven-ción y del procedimiento para su preparainven-ción.
Ejemplo 1
Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-metil-2-indolcarboxamida a) (S)-N-(1-hidroximetil-2-feniletil)-1-metil-2-indolcarboxamida
A una solución agitada de ácido 1-metil-2-indolcarboxílico (100 mg, 0,57 mmoles) en cloruro de metileno (1 ml) se añadió N-metilmorfolina (0,063 ml, 0,57 mmoles) seguido de (S)-(-)-2-amino-3-fenil-propanol (86 mg, 0,57 mmoles), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (81 mg, 0,60 mmoles), e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (120 mg, 0,63 mmoles). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. Se diluyó la reacción con cloruro de metileno y se lavó secuencialmente con ácido cítrico al 10%, NaHCO3saturado, agua y salmuera. Se
secó la capa orgánica sobre Na2SO4y se concentró al vacío para dar aceite bruto. La trituración del aceite bruto con
metanol y éter dietílico condujo al compuesto del título (68%, 119,7 mg) como sólido blancuzco, EM (ES) m/e 309,4 (M+H)+.
(b) (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-metil-2-indolarboxamida
A una solución del compuesto del Ejemplo 1(a) (90 mg, 0,29 mmoles) en cloruro de metileno (7 ml) se aña-dió 1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona (peryodinano de Dess-Martin) (129 mg, 0,3 mmoles). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y se apagó con solución de tiosulfato de sodio al 10%. Después de agitar durante 10 minutos, se diluyó la reacción con cloruro de metileno y se lavó con solución de tiosulfato de sodio al 10% (3 veces), NaHCO3 saturado y salmuera. Se secó la capa orgánica sobre Na2SO4 y se
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Ejemplo 2 Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida
Siguiendo los procedimientos del Ejemplo 1(a) y 1(b), excepto en que se sustituyó el ácido 1-metil-2-indolcarbo-xílico por ácido 2-indolcarbo1-metil-2-indolcarbo-xílico, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco. EM (ES) m/e 293,3 (M+H)+.
Ejemplo 3
Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-5-metoxi-6-(fenilmetoxi)-2-indol-carboxamida
Siguiendo los procedimientos del Ejemplo 1(a) y 1(b), excepto en que se sustituyó el ácido 1-metil-2-indolcar-boxílico por ácido 5-metoxi-6-(fenilmetoxi)-2-indolcar1-metil-2-indolcar-boxílico, se preparó el compuesto del título como un sólido amarillo. EM (ES) m/e 229,3 (M+H)+.
Ejemplo 4
Preparación de (S)-5-bromo-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida
Siguiendo los procedimientos del Ejemplo 1(a) y 1(b), excepto en que se sustituyó el ácido 1-metil-2-indolcarbo-xílico por ácido 5-bromo-2-indolcarbo1-metil-2-indolcarbo-xílico, se preparó el compuesto del título como un sólido de color tostado. EM (ES) m/e 371,3 (M+H)+.
Ejemplo 5
Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(metilsulfonil)-2-indolcarboxamida a) 1-(Metilsulfonil)-2-indolcarboxilato de etilo
Se enfrió a 0ºC una solución de 2-indolcarboxilato de etilo (500 mg, 2,64 mmoles) en THF seco (5 ml) bajo atmósfera de argon y se trató con hidruro de sodio (116 mg, 2,90 mmoles). Después de agitar a temperatura ambiente durante 5 minutos, la reacción se enfrió a 0ºC y se trató con cloruro de metanosulfonilo (0,23 ml, 2,90 mmoles). La mezcla resultante se calentó gradualmente a temperatura ambiente y se agitó durante 20 horas. La reacción se apagó con NaHCO3 saturado y se diluyó con acetato de etilo. Se lavó la capa orgánica con agua y salmuera, se secó sobre
Na2SO4 y se concentró al vacío. El aceite amarillo dorado resultante se cromatografió sobre gel de sílice eluyendo
con acetato de etilo al 5%, 10%, 15% en hexano para obtener el compuesto del título (79%, 556,6 mg) como sólido crema.
RMN1H (400 MHz, CDCl
3) δ 8,05 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 744 (t, 1H), 7,31 (m, 2H), 4,42 (q, 2H), 3,71 (s, 3H),
1,42 (t, 3H).
b) Acido 1-metilsulfonil-2-indolcarboxílico
Se trató una solución del compuesto del Ejemplo 5(a) (456,6 mg, 1.71 mmoles) en THF (6 ml) y metanol (3 ml), se trató con NaOH acuoso 1N (3,42 ml, 3,42 mmoles) y se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. Se acidificó la mezcla de reacción con HCl al 10% (a pH 3) y se eliminó el disolvente a presión reducida. La suspensión espesa resultante se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4
y se concentró al vacío para dar un sólido blancuzco. La trituración con éter dietílico condujo al compuesto del título (57%, 234 mg) como sólido blanco. EM (ES) m/e 239,1 [M]+.
c) (S)-N-(1-hidroximetil-2-feniletil)-1-(metilsulfonil)-2-indolcarboxamida
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 1(a), excepto en que se sustituyó el ácido 1-metil-2-indolcarboxílico por el compuesto del Ejemplo 5(b), se preparó el compuesto del título como aceite incoloro viscoso. EM (ES) m/e 373,4 [M+H]+.
d) (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-metilsulfonil)-2-indolcarboxamida
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Ejemplo 6 Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida
Se siguieron los procedimientos de los Ejemplos 5(a)-(d) respectivamente, excepto en que se sustituyó el cloruro de metanosulfonilo por bromuro de bencilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco. EM (ES) m/e 383,5 [M+H]+.
Ejemplo 7
Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-6-metoxi-2-indolcarboxamida
Siguiendo los procedimientos de los Ejemplos 5(b)-(d) respectivamente, excepto en que se sustituyó el 2-indolcar-boxilato de etilo por 6-metoxi-2-indolcar2-indolcar-boxilato de metilo, se preparó el compuesto del título como un sólido beige. EM (ES) m/e 323,3 [M+H]+.
Ejemplo 8
Preparación de (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-3-metil-1-(fenilmetil)-2-indol-carboxamida
Siguiendo los procedimientos de los Ejemplos 5(a)-(d) respectivamente, excepto en que se sustituyó el 2-indolcar-boxilato de etilo por 3-metil-2-indolcar2-indolcar-boxilato de metilo y el cloruro de metanosulfonilo por bromuro de bencilo, se preparó el compuesto del título como un sólido crema. EM (ES) m/e 397,3 [M+H]+.
Ejemplo 9
Ingredientes mg/Cápsula
(S)-N-(1-formil-2-feniletil)-3-metil-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida 250,00
Estearato de magnesio 5,00
Lactosa 100,00
Se mezclan cuidadosamente los ingredientes y se introducen en una cápsula de gelatina dura Ejemplo 10 Ingredientes mg/Cápsula (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-5-metoxi-6-(fenilmetoxi)-2-indolcarboxamida 100,00 Lactosa 250,00 Almidón 13,00 Talco 5,00 Estearato de magnesio 2,50
Se mezclaron la lactosa y la indolcarboxamida y se granularon con gelatina al 10% caliente. Se secaron los gránulos y se hicieron pasar a través de un tamiz de malla #20. Se mezclaron entonces los gránulos con almidón, talco y estearato de magnesio y se comprimieron en tabletas.
Se administra cuatro veces al día una tableta a mamíferos para tratamiento de enfermedades neurodegenerativas. Ejemplo 11 Ingredientes mg/Cápsula (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-3-metil-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida 75,00 DMSO 500,00 Cloruro de sodio 375,00 Bisulfito de sodio 100,00
Agua para inyecciones c.s. 100,0 ml
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Ejemplo 12 (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-5-metoxi-6-fenilmetoxi)-2-indolcarboxamida 150,00 Aceite de cacahuete 300,00
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula en que: R1es CH2Ph, CH2CH(CH3)2ó CH2CH2CH2CH2NR6R7;
Z es CHO, COCH2F, COCOOH, COCONH-alquilo, COCOO-alquilo, COCO-(CH2)n-arilo, COCONHCH(R1)
COOH o COCH2O-(3-fenilixisoxazol-5-ilo);
n = 1 - 6;
R2es H, CH3, CH3Ph, CH2-piridina, CH3SO2, CF3SO2o PhSO2;
R3es H, CH3, o alquilo inferior;
R4y R5son, independientemente H, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, o benciloxilo;
R6es COOCH2Ph, COOCH2-piridina, CO-arilo, SO2CH3, SO2CF3, SO2-arilo, H o alquilo inferior; y
R7es H, o alquilo inferior
siempre que, cuando Z es CHO y R3 es distinto a H, entonces R2no es H, o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo.
2. Un compuesto según la reivindicación 1 en el que la estereoquímica es S.
3. Un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la que R1es CH2Ph y Z es CHO.
4. Un compuesto según la reivindicación 1 que es: (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-metil-2-indolcarboxamida (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-5-metoxi-6-(fenilmetoxi)-2-indolcarboxamida; (S)-5-bromo-N-(1-formil-2-feniletil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(metilsulfonil)-2-indolcarboxamida (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-6-metoxi-2-indolcarboxamida; (S)-N-(1-formil-2-feniletil)-3-metil-1-(fenilmetil)-2-indolcarboxamida o una sal farmacéuticamente aceptable de ellos.
5. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para utilización en terapia.
6. La utilización de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en la manufactura de un medica-mento para uso en el tratamiento de enfermedades en que la es un factor la inhibición de calpaínas.
7. La utilización de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en la manufactura de un medica-mento para uso en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.
