4. RESULTADOS
4.2. Estudio de alimentos cárnicos funcionales con antocianinas para la
4.2.5. Efecto de las salchichas funcionales sobre el número de tumores y el área
Tras el sacrificio se analizó la mucosa colónica para determinar el número de pólipos presente en cada animal a los que se les indujo CCR (8 animales de cada cohorte). En este ensayo se contabilizaron los pólipos macroscópicos que variaron en un tamaño entre 1 y 11 mm de diámetro.
El número de medio de pólipos disminuyó un 46,4% en la cohorte de salchichas funcionales (31,8 ± 3,3) respecto a la cohorte de pienso (58,5 ± 9,5), siendo una diferencia estadísticamente significativa (p-valor de 0,0241). Sin embargo, no se observó una diferencia estadísticamente significativa cuando se comparó la cohorte de salchicha funcional con la de salchicha control (44,5 ± 6,2) [Figura 26A].
Figura 26: A, Valor medio de los pólipos del intestino grueso en las 8 ratas que se les indujeron CCR en cada cohorte de alimentación. Las ratas utilizadas como control absoluto (ratas 9 y 10 de cada cohorte) no mostraron ningún tipo de lesión en la mucosa colónica; B, Valor medio del área del intestino grueso afectada por tumores. Para cada animal se calculó el área individual de cada pólipo sumándose todos y generando la media de cada cohorte. P: cohorte de pienso, SC: cohorte de salchichas control, SF: cohorte de salchichas funcionales.
Por otro lado, se midió cada pólipo calculando el área que ocupaba del intestino grueso de cada animal. Al final se calculó la media de cada cohorte de alimentación, mostrando en la cohorte de salchichas funcionales (313,1 ± 85,3 mm2) una reducción del 35,4% del área afectado respecto a la cohorte de pienso (484,8 ± 76,6 mm2) y del 42,2% respecto a la cohorte
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de salchicha control (541,8 ± 174,1 mm2). Sin embargo, estas reducciones no fueron estadísticamente significativas [Figura 26B].
4.2.6. Efecto de las salchichas funcionales sobre la composición de la microbiota intestinal
La secuenciación metagenómica de la microbiota intestinal mostró diferencias a nivel de la composición de los filos cuando se compara la cohorte de pienso con las de salchicha control y salchicha funcional [Tabla 5].
La principal diferencia entre estas cohortes es la casi ausencia del filo Proteobacteria en la cohorte de pienso (0,3%), mientras que este filo es el segundo más común en la cohorte de salchicha control (15,8%) y el tercero más común en la cohorte de salchicha funcional (10,4%) [Tabla 5].
Tabla 5: Media del porcentaje de la composición de la microbiota intestinal a nivel de Filo en las 3 cohortes de alimentación estudiadas.
Además, se encontró una mayor biodiversidad en las dos cohortes de salchichas, como lo demuestra el número de filos (aunque en bajas proporciones) presente en su composición [Tabla 5].
Al analizar las proporciones de los filos en las 20 ratas de las cohortes de salchichas (control y funcional), se encuentra una distribución homogénea entre todas las ratas de cada cohorte [Figura 27], siendo Firmicutes el filo predominante (82,9 % en la cohorte de pienso) con un 69,6 % en la cohorte de salchicha control y un 75,1 % en la cohorte de salchicha funcional [Tabla 5].
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Figura 27: Composición de la microbiota intestinal, a nivel de filo, en las ratas pertenecientes a la cohorte de salchichas control (SC1 a SC10), y en las ratas pertenecientes a la cohorte de salchichas funcionales (SF1 a SF10). SC: cohorte de salchicha control, SF: cohorte de salchicha funcional.
En el caso de las ratas pertenecientes a la cohorte de salchicha control, el segundo filo más abundante es Proteobacteria, pero en el caso de la cohorte de salchicha funcional, el segundo filo más abundante es Bacteroidetes (12,1 %, mientras que en la cohorte de salchichas control es un 12,4%) [Figura 27].
A nivel de familias, las dos cohortes alimentadas con productos cárnicos mostraron composiciones similares [Figuras 28 y 29], pero con claros incrementos de distintas familias con respecto a la cohorte de pienso. Por ejemplo, Lactobacillaceae es más abundante en las cohortes de salchichas control y funcional (32,80 % y 33,23 % respectivamente, frente al 7,72 % en la cohorte de pienso), así como Desulfovibrionaceae (11,09 % y 7,96 % en las cohortes de salchichas, frente al 0,26 % en la cohorte de pienso), Bacteroidaceae (4,44 % y 3,51 % respectivamente, frente al 1,93 % en la cohorte de pienso), Enterobacteriaceae (4,65% y 2,38% respectivamente, frente al 0% en la cohorte de pienso), y Coriobacteriaceae (1.04% en ambos, frente al 0% en la cohorte de pienso) [Figura 28].
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Figura 28: Diferencias en la composición media de la microbiota intestinal a nivel de familias para las ratas pertenecientes a ambas cohortes de salchichas. SC: cohorte de salchicha control, SF: cohorte de salchicha funcional.
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Figura 29: Composición de la microbiota intestinal a nivel de familias en las ratas pertenecientes a la cohorte de salchicha control (SC1 a SC10) y en las ratas pertenecientes a la cohorte de salchicha funcional (SF1 a SF10). SC: cohorte de salchicha control, SF: cohorte de salchicha funcional.
En ambas cohortes de salchichas, las principales diferencias a nivel de familias se observan con respecto a tres [Figura 28 y 29]. Clostridiaceae es una familia más abundante en la cohorte de salchicha funcional (10,56 %) frente a la cohorte de salchicha control (8,28 %).
Desulfovibrionaceae y Enterobacteriaceae están menos presentes en la cohorte de salchicha funcional (7,96 % y 2,38 % respectivamente) con respecto a la cohorte de salchicha control (11,09 % y 4,65 % respectivamente).
A nivel de género y especie, la única diferencia significativa se encontró en la familia Desulfovibrionaceae en particular en la especie Bilophila wadsworthia, que representa el 7,90 % en la cohorte de salchicha control, frente a solo un 4,94 % en las ratas de la cohorte
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de salchicha funcional. Estas diferencias fueron estadísticamente significativas con un p- valor de 0,1 [Figura 30].
Figura 30: Diferencias en la composición de Bilophila wadsworthia para las ratas pertenecientes a la cohorte de salchicha control y la cohorte de salchicha funcional. SC: cohorte de salchicha control, SF: cohorte de salchicha funcional.