Efecto de Bacillus subtilis sobre juveniles 2 de Meloidogyne incognita en condiciones de invernadero en el Fundo Marverde de la Empresa Agroindustrial Camposol

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS. N. ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. BIOLOGICAS. RM. Efecto de Bacillus subtilis sobre juveniles 2 de Meloidogyne. IN FO. incognita en condiciones de invernadero en el Fundo Marverde. AS. DE. de la Empresa Agroindustrial Camposol. TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE. IO. N. DE. SI ST. EM. Br. ALBERTO SANTIAGO PALACIOS MIÑANO. DI. RE. CC. BIÓLOGO. TRUJILLO – PERÚ 2013. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. UN IC. Dr. Orlando Velásquez Benites. Y. CO. M. Rector. IC. A. Dr. Vilma Julia Méndez Gil. IN FO. RM. ÁT. Vicerrector Académico. DE. Dr. Flor Marlene Luna Victoria Mori. Dr. Santiago Uceda Duclos Secretario General. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Vicerrector Administrativo. Ms. C. Roberto Rodríguez Rodríguez Jefe de la Oficina de Registro Técnico. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Hermes Mario Escalante Añorga. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas. IN FO. Dr. César Augusto Jara Campos. Dr. Segundo Eloy López Medina. Director de la Escuela Académico Profesional de Ciencias Biológicas. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. Secretario de la Facultad De Ciencias Biológicas. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. UN IC. AC IÓ. N. Señores Miembros del Jurado:. CO. M. En cumplimiento con las disposiciones vigentes para Grados y Títulos de la. Y. Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a. IC. A. vuestra consideración la presente tesis titulada: Efecto de Bacillus subtilis sobre. ÁT. larvas de Meloidogyne incognita en condiciones de invernadero en el Fundo. DE. IN FO. RM. Marverde de la Empresa Agroindustrial Camposol.. SI ST. EM. AS. Esperando que el presente sea de vuestra aprobación. DI. RE. CC. IO. N. DE. Trujillo, 4 de Marzo del 2013. _____________________________________ Br. Alberto Santiago Palacios Miñano. iv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. __________________________________. CO. M. Ms. C Juan Wilson Krugg. UN IC. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. PRESIDENTE. DE. __________________________________. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Ms. C. Miguel Muñoz Ríos. __________________________________ Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza VOCAL. v. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. AC IÓ. N. El que suscribe, profesor asesor de la tesis: Efecto de Bacillus subtilis sobre. UN IC. larvas de Meloidogyne incognita en condiciones de invernadero en el Fundo Marverde de la Empresa Agroindustrial Camposol; deja constancia que la presente ha sido. CO. M. desarrollada de conformidad con los criterios y disposiciones propuestos por la. Y. Universidad Nacional de Trujillo, tomando en cuenta las orientaciones brindadas al. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. investigador y acogiendo las sugerencias pertinentes.. SI ST. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg. DI. RE. CC. IO. N. DE. ASESOR. vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, Miembros del Jurado Dictaminador, declaran que. AC IÓ. N. la tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo aprobada por. Y. CO. M. UN IC. UNAMINIDAD.. IC. A. __________________________________. ÁT. Ms. C. Juan Hector Wilson Krugg. AS. DE. IN FO. RM. PRESIDENTE. EM. __________________________________. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Ms. C. Miguel Muñoz Ríos. __________________________________ Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza VOCAL. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios todo poderoso por. N. darme fuerzas en todo momento. AC IÓ. a fin de poder cumplir con mis. UN IC. objetivos trazados.. A mis padres Julio e Isabel,. CO. M. por su inmenso amor de siempre y a mis hermanos Jeka y Julio quienes, con. sean primaverales.. ÁT. IC. A. Y. su alegría hacen que mis días. IN FO. y responsabilidad me señalaron el camino. RM. A mis nonos, Santi y Beto, cuya fuerza, tenacidad. DE. para lograr mis sueños.. y comprensión me enseñaron a valorar cada momento y oportunidad.. SI ST. EM. AS. A mis nonitas, Petita y Carmelita, quienes con su gran cariño. A mi estimado mentor, amigo y profesor Juan,. DE. quien con sus enseñanzas y exigencias me. N. enseñó la forma para encontrar. DI. RE. CC. IO. el verdadero conocimiento.. A Sujely quien me da la felicidad y ganas de seguir adelante cada vez que siento que no hay camino por donde andar; y a sus padres, cuyo apoyo y comprensión me permitieron seguir luchando.. viii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. orientación para la elaboración y culminación de la presente tesis.. AC IÓ.  Al Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg, por su invalorable apoyo y. N. AGRADECIMIENTO. CO. M.  Al Ms. C. Miguel Muñoz Ríos, por su apoyo en la orientación y. IC. A. Y. consideración en la elaboración de la presente tesis.. ÁT.  A la investigadora Ing. Lizet Graterol Caldera y a los miembros del Área. RM. de Investigación y Desarrollo de la empresa Agroindustrial Camposol. IN FO. S.A, por su apoyo en la implementación del bioensayo y capacitaciones. AS. DE. constantes que facilitaron el logro de la tesis.. EM.  Al Ing. Franco López Aponte, por su apoyo y consejos en la ejecución. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. del proyecto de tesis.. ix. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. iii. AC IÓ. Autoridades de la Facultad de Ciencias Biológicas………………………….. ii. N. Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo…………………………. UN IC. Presentación…………………………………………………………….......... iv v. Del asesor…………………………………………………………………….. vi. CO. M. Miembros del Jurado………………………………………………………….. Y. Aprobación…………………………………………………………………... IC. A. Dedicatoria…………………………………………………………................ RM. ÁT. Agradecimiento……………………………………………………………….. IN FO. Índice…………………………………………………………………………. vii viii ix x xi. Resumen…………………………………………………………………........ xii. DE. Índice de tablas y figuras……………………………………………………... EM. AS. Abstract……………………………………………………………….……… xiii. SI ST. INTRODUCCIÓN……………………………………………………………. 1 7. RESULTADOS………………………………………………………………. 11. DISCUSIÓN……………………………………………………………..…... 16. IO. N. DE. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………….. 20. RECOMENDACIÓN………………………………………………………. 21. DI. RE. CC. CONCLUSIÓN………………………………………………………………. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………... 22. ANEXOS……………………………………………………………………... 27. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE DE TABLAS Y FIGURAS N° Pág.. Contenido. 1. UN IC. AC IÓ. Tres dosis de Bacillus subtilis sobre juveniles 2 de Meloidogyne incognita en suelo, en condiciones de invernadero.……………………………………………. N. Tabla N°. N° Pág.. CO. M. Figura Contenido N°. 10. Y. Fluctuación poblacional de Meloidogyne incognita en el suelo frente a tres dosis de Bacillus subtilis durante cuatro meses de evaluación en condiciones de invernadero ………………………….……………………………………. 11. RM. ÁT. IC. A. 1. 12. Población de juveniles 2 de Meloidogyne incognita en el suelo inoculado con tres dosis de Bacillus subtilis luego de 4 meses de evaluación en condiciones de invernadero ……………………..…………………………...…..……….. 13. IN FO. Fluctuación poblacional de Meloidogyne incognita en el sistema radicular frente a tres dosis de Bacillus subtilis durante tres meses de evaluación en condiciones de invernadero ………………….……………………………..…………. AS. DE. 2. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. 3. xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN La aplicación de suspensiones de bacterias del genero de Bacillus es una alternativa para el control de nemátodos en un campo de cultivo, en especial B. subtilis que es un. AC IÓ. N. microorganismo autóctono del suelo que prospera en la naturaleza, donde se encuentra. UN IC. ampliamente distribuido en muy diversos habitas y los cuales ha colonizado eficientemente debido a sus propiedades y características innatas; por lo consiguiente. CO. M. este trabajo está orientado a determinar el efecto de Bacillus subtilis (Rizos) a. Y. diferentes dosis sobre larvas de Meloidogyne incognita en condiciones de invernadero,. IC. A. para lo cual se utilizó plantines de Gomphocarpus fruticosus (planta globo) que es. ÁT. susceptible al ataque de nemátodos, se utilizó suelo infestado de nemátodos del fundo. RM. Sincromax de la empresa Agroindustrial Camposol, para las evaluaciones se tomó en. IN FO. cuenta el Incremento de la población de nemátodos en el suelo, la población de. DE. nemátodos en el suelo; de huevos y J2 de Meloidogyne incognita y la eficiencia de los. AS. tratamientos (tres dosis empleadas 1, 2 y 3Lt/Ha); por lo que se observó que de las tres. EM. dosis empleadas, en el presente trabajo, tienen el mismo efecto, es decir, disminuyen. SI ST. la cantidad poblacional de Meloidogyne incognita tanto en suelo como en el sistema radical, en tal sentido se observa que no existen diferencias significativas entre los tres. DE. tratamientos evaluados, este ensayo demuestra que el producto Rizos tiene la. IO. N. capacidad de disminuir la cantidad poblacional de Meloidogyne incognita con la dosis. CC. recomendada por la ficha técnica del producto, dado que uno de los componentes de. DI. RE. este producto es Bacillus subtilis.. Palabras claves: Rizos, nemátodos, Meloidogyne incognita, Bacillus subtilis. xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT Application of suspensions of bacteria of the genus Bacillus is an alternative for the control of nematodes in a field, especially B. subtilis which is an indigenous. AC IÓ. N. microorganism of the soil that thrives in the wild, where widely distributed in diverse. UN IC. habitats and which has colonized efficiently due to their properties and innate characteristics; Therefore this job is aimed to determine the effect of Bacillus subtilis. CO. M. (Rizos) at different doses on larvae of Meloidogyne incognita in greenhouse. Y. conditions, for which use seedlings Gomphocarpus fruticosus (floor globe) that it is. IC. A. susceptible to attack by nematodes, soil infested with nematodes of the Sincromax. ÁT. farm of the Agro industrial Camposol company was used, for assessments took into. RM. account the increase in the population of nematodes in the soil, the population of. IN FO. nematodes in the soil; eggs and Larval States J2 of Meloidogyne incognita and the. DE. efficiency of treatments (three doses 1, 2 and 3Lt / has); by what was observed that. AS. three doses used in this study, they have the same effect, i.e., they decrease population. EM. Meloidogyne incognita in soil as in the root system, in such sense is observed that. SI ST. there are no significant differences between the three treatments evaluated, this trial shows that the curls product has the ability to decrease the population quantity of. DE. Meloidogyne incognita even at one lower dose given that one of the components of. CC. IO. N. this product is Bacillus subtilis. DI. RE. Key words: RIZOS, nematode, Meloidogyne incognita, Bacillus subtilis. xiii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCION. El crecimiento y el rendimiento de las plantas dependen de la disponibilidad del. AC IÓ. N. agua, de los nutrientes del suelo donde se desarrollen y de ciertos factores ambientales. UN IC. como temperatura, luz y humedad, así como de la protección que tengan contra el ataque de los patógenos, teniéndose así que todo lo que afecta la salud de las plantas. CO. M. va a influir en el crecimiento y en la productividad de las mismas y por lo tanto en su. IC. A. Y. utilidad para la naturaleza y la humanidad (Manners, 1986; Dickinson y Lucas, 1987). ÁT. Durante el siglo pasado, después de aceptarse la teoría de que los microorganismos. RM. podían actuar como causantes de enfermedades, se hicieron grandes esfuerzos por. IN FO. aislar e identificar a aquellos microorganismos que eran causantes de diversas. DE. enfermedades que aquejaban a la humanidad. El conocimiento de estos patógenos, de. AS. sus ciclos de vida, de los mecanismos por los cuales se propagan en los cultivos o. EM. sobreviven en condiciones ambientales adversas y de cómo se relacionan con su. SI ST. hospedante se constituyó en requisito indispensable para poder desarrollar métodos. DE. adecuados de control (Deacon, 1990). IO. N. Dentro de estos patógenos se encuentra Meloidogyne incognita, que es uno de los. CC. principales agentes causantes de daños en cultivos, con pérdidas millonarias en la. DI. RE. agricultura a escala mundial, reportándose solamente en las regiones tropicales con estimados que oscilan entre 11 y 25% de las cosechas (Sasser, 1979) Los síntomas aéreos se manifiestan por presencia de manchones en el campo con zonas de clorosis, aún con fertilización adecuada; otros síntomas son: marchitez de las. 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. hojas; reducción del crecimiento y del rendimiento de la planta. Los síntomas en las raíces se manifiestan por la adhesión de partículas de suelo en los lugares donde se encuentra alojada la hembra adulta (Suárez et al., 1995), necrosis externa e interna de. AC IÓ. N. las raíces, formación de agallas por multiplicación y aumento del tamaño de las células y proliferación del número de raíces por acumulación de sustancias de crecimiento. UN IC. (Avelar et al., 2001). Se ha pretendido regular las poblaciones de nematodos mediante. Y. CO. M. el empleo de hongos. (Avelar et al., 2005). IC. A. Existen diferentes estrategias de control, entre las cuales podemos mencionar la. ÁT. introducción de variedades resistentes, la rotación de cultivos y el uso de nematicidas. RM. químicos entre otros. Los nematicidas químicos han sido los más efectivos, pero se. AS. DE. daño ambiental. (Atkinson, 1993). IN FO. han limitado cada día más por su elevada toxicidad, que repercute en un profundo. EM. El control de Meloidogyne sp. esta basado principalmente en la aplicación de. SI ST. nematicidas y el bromuro de metilo es la materia activa que se utiliza con mayor frecuencia (Verdejo-Lucas et al., 1997). Sin embargo, el impacto medioambiental. DE. negativo del bromuro de metilo y las restricciones legislativas sobre su utilización, han. IO. N. contribuido a promover el desarrollo de otras estrategias de control. Las plantas. CC. resistentes pueden jugar un papel importante en el control de Meloidogyne ya que por. DI. RE. una parte inhiben considerablemente la reproducción del nematodo, y por otra, son tolerantes al mismo lo que les permite desarrollarse en campos infestados sin que haya una reducción significativa de la producción (Roberts, May, 1986; Verdejo-Lucas et al., 1994).. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Aunque es sabido que ciertas medidas agronómicas, en especial la rotación de cultivos, el empleo de variedades resistentes y el mejoramiento de los suelos por incorporación de materia orgánica. Son capaces de restringir la población de. AC IÓ. N. nemátodes y hasta de reducir sus daños económicos, dichas medidas no son siempre. UN IC. aplicables por falta de recursos tiempo y mercado para los productos de rotación, por lo que el control directo con nematicidas, no sin ciertas reservas, merece ser tenido en. CO. M. cuenta para ciertos casos extremos y en cultivos de alta densidad económica. (Martin. IC. A. Y. et al., 1959). ÁT. Esto ha motivado un incremento del control biológico dentro de programas de. RM. manejo integrado de fitonemátodos. El empleo de microorganismos entomopatógenos. IN FO. ha sido objeto de estudio en los últimos años, al grado que ya se tienen formulaciones. DE. comerciales de algunos de ellos, y son aplicados en los países desarrollados. Entre los. AS. microorganismo que se reportan para el control de fitonemátodos se encuentra el. EM. hongo Paecilomyces lilacinus, Pasteuria penetrans, Bacillus licheniformis y algunos. SI ST. cepas de Bacillus thuringiensis (Bone, L. W., 1989). DE. Dada la diversidad genética en el género Bacillus, tanto en el suelo como en la. IO. N. rizósfera, se considera a estos microorganismos como colonizadores eficaces. Las. CC. potencialidades del género Bacillus sobre P. fluorescens han sido señaladas por Kin et. DI. RE. al. (1997), quien encontró mayor emergencia y control de patógenos del trigo cuando utilizaron este género Estas bacterias se han evaluado para el control de enfermedades fungosas, determinandose que las aplicaciones de Bacillus subtilis en pre y. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. postcosecha en aguacate tienen un efecto similar al de los fungicidas comerciales (Korsten et al. 1997) Debido a sus características, Bacillus subtilis, microorganismo cuyo hábitat natural. AC IÓ. N. es el suelo, se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza. Entre sus. UN IC. principales características se encuentra su capacidad para formar esporas en diversas condiciones de estrés, crecer en un intervalo amplio de temperaturas (desde 15 hasta. CO. M. 55 ºC), presentar motilidad, aerotaxis y velocidades de crecimiento altas, sobrevivir en. Y. concentraciones salinas (hasta el 7% de NaCl), producir una amplia variedad de. ÁT. IC. A. antibióticos y enzimas hidrolíticas extracelulares (Nakamura et al., 1999). RM. Los mejores resultados fueron logrados con un tratamiento integrado que incluía. IN FO. aplicaciones de benomil y oxicloruro de cobre y control biológico, siendo este el. DE. primer informe de control biológico precosecha en aguacate. Recientemente, se. comparando diferentes sustratos y se determinó que en. EM. frijol, la cual se evaluó. AS. desarrolló una formulación de B. subtilis para controlar la pudrición radicular del. SI ST. condiciones de laboratorio el tratamiento con turba fue el más eficaz. No obstante, en condiciones de campo la formulación a base de pectina fue la que logró mejor control. IO. N. DE. (Lazarete et al. 1994).. CC. Del mismo modo, en plantas de cebolla se evaluó B. subtilis para el control de. DI. RE. Alternaria porri, alternando aplicaciones del producto biológico con las de los fungicidas zineb y oxicloruro de cobre, determinándose que los tratamientos que consistían en la combinación de fungicidas sintéticos y biológicos mostraron mejor control que el resto de los tratamientos. Uno de los usos de B. subtilis como agente de. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. control biológico es mediante el tratamiento de semillas; su efecto benéfico cuando se aplica junto a las semillas o en forma individual no se debe exclusivamente al antagonismo con los patógenos sino que influye positivamente en la germinación,. AC IÓ. N. desarrollo y rendimiento del cultivo debido a la producción de sustancias promotoras. UN IC. del crecimiento y al mejoramiento de la nutrición de las plantas. (Castellanos et al.. CO. M. 1995). Y. En la agricultura moderna, se ha soslayado la sostenibilidad de la productividad. IC. A. agrícola. El uso de nematicidas químicos ha ido mermando a consecuencia de la. ÁT. preocupación de los agricultores y la sociedad, por los riesgos que éstos han. RM. ocasionado al ambiente y a la salud. Atendiendo estas preocupaciones han surgido. IN FO. estudios y nuevas estrategias para el manejo de organismos patógenos del suelo.. DE. Muchas de estas prácticas de manejo envuelven el uso de rotación de cultivo, cultivo. AS. intercalado, labranza mínima o cero labranzas, uso de variedades resistentes, selección. EM. de semillas, organismos antagonistas, enmiendas orgánicas y otras prácticas de. SI ST. conservación de suelos. Estas prácticas han sido utilizadas por los agricultores y actualmente se incluyen en todo programa de manejo integrado y agricultura. DE. sustentable. En la pasada década, el término agricultura sustentable se definió. IO. N. utilizando los conceptos de producción, manteniendo la preservación de la calidad del. CC. ambiente, conservando los recursos naturales y la diversidad biológica. Para que la. DI. RE. productividad de un agroecosistema se sostenga indefinidamente deben considerarse varias medidas. En muchos casos, el elemento más limitante es determinar la futura sustentabilidad del sistema; además, establecer el contexto en el cual se deben tomar decisiones sobre el manejo de nemátodos.. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La controversia surgida por el uso indiscriminado de nematicidas y la creciente concientización por el uso de las prácticas de agricultura sustentable, ha ocasionado un aumento en la reflexión de la sociedad lanzando un reto a los investigadores a buscar. AC IÓ. N. una solución a este problema. El control biológico es una alternativa de manejo de. UN IC. poblaciones de nemátodos a través de mecanismos tales como parasitismo, depredación, competencia y antibiosis. En el suelo pueden encontrarse muchos. CO. M. organismos antagonistas a nemátodos, de los que se mencionan hongos, bacterias,. Y. nemátodos depredadores, protozoarios, parásitos, viroides y virus; el control biológico. IC. A. de los nemátodos fitoparasíticos, resulta un aporte importante al manejo de. RM. ÁT. poblaciones ya que estos abundan en predios agrícolas y su erradicación es imposible.. IN FO. La aplicación de suspensiones de bacterias del genero de Bacillus es una alternativa. DE. para el control de nemátodos en un campo de cultivo, en especial B. subtilis que es un. AS. microorganismo autóctono del suelo que prospera en la naturaleza, donde se encuentra. EM. ampliamente distribuido en muy diversos habitas y los cuales ha colonizado. SI ST. eficientemente debido a sus propiedades y características innatas; razón por la cual el presente trabajo se planteo como objetivo conocer el efecto de Bacillus subtilis (Rizos). DE. a diferentes dosis sobre larvas de Meloidogyne incognita en condiciones de. DI. RE. CC. IO. N. invernadero.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y PROCEDIMIENTO. 192 Plantines de Gomphocarpus fruticosus (planta globo), donados por el. AC IÓ. . N. 1. Material Biológico:. UN IC. Vivero del Fundo Marverde de la Empresa Agroindustrial Camposol S. A., Virú – La Libertad. M. Producto Rizos (Bacillus subtilis), la Empresa Agroindustrial Camposol. CO. . Suelo infestado con Meloidogyne incognita de un cultivo de esparrago en. IC. A. . Y. S. A., Virú – La Libertad. RM. ÁT. el Fundo Sincromax de la Empresa Agroindustrial Camposol S. A.. IN FO. 2. Procedimiento:. DE. 2.1. Preparación de Sustrato:. AS. Se recolectó 160Kg de suelo infestado de nemátodes de una parcela de. EM. cultivo de espárrago del fundo Sincromax de la empresa agroindustrial. SI ST. Camposol S.A., después de ser homogenizada se colecto una muestra para realizar el conteo de nemátodes por cada 100cc de suelo,. luego fue. IO. N. DE. distribuida en 80 macetas y en cada una se colocó 2Kg de suelo.. DI. RE. CC. 2.2. Dosificación del Producto: La ficha técnica del producto biológico Rizos, indicaba solo una dosis de aplicación: 1Lt/Ha; sin embargo en busca de una mejor eficiencia para el control de nematodos; se prepararon además dosis que fueron: 1Lt/Ha, 2Lt/Ha y 3Lt/Ha.. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.3. Ensayo Se evaluaron cuatro tratamientos: testigo, y tres dosis de Rizos 1Lt/Ha, 2Lt/Ha y 3Lt/Ha. En cada tratamiento hubieron cuatro repeticiones, cada. AC IÓ. N. una de ellas con 5 unidades experimentales, cada unidad experimental. UN IC. consistió en una maceta con 3 Plantines de Gomphocarpusfruticosus (planta globo). CO. M. a) Trasplante de Gomphocarpus fruticosus (planta globo). Y. Se sembró semillas de Gomphocarpus fruticosus (planta globo) en. IC. A. bandejas de germinación por un periodo de 2 meses, tiempo en el cual la. ÁT. planta globo llegó a tener una altura aproximada de 7 a 10cm, luego se. RM. procedió a trasplantarlas en las macetas que contenían suelo infestado de. IN FO. nemátodos.. DE. b) Aplicación del Producto Rizos. AS. El producto Rizos se aplicó en drench a cada maceta dependiendo del. EM. tratamiento o dosis, para el caso del testigo no se le aplicó el producto,. SI ST. solo agua. La primera aplicación fue realizada un momento antes del trasplante; y la segunda fue realizada a los dos meses.. DE. 2.4. Evaluación de las Variables Estudiadas. DI. RE. CC. IO. N. a) Incremento de la Población del Nematode en el Suelo Para medir esta variable se cuantificó la población de nematodos en el suelo, al inicio y al final del experimento, y se relacionaron mediante la fórmula desarrollada por Seinhorst (1970): I = Pf / Pi. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. donde: I: Incremento Pf: Población Final. AC IÓ. N. Pi: Población inicial. UN IC. Con este propósito, la población de M. incognita en el suelo, al inicio (Pi) y al final del experimento (Pf), se determinó de la forma siguiente: en. CO. M. cada unidad experimental se tomaron muestras de suelo conformadas por. Y. punciones (submuestras), tomadas hasta 20 cm de profundidad mediante. IC. A. un Auger (Anexo 3), se colocaron en bolsas plásticas, correctamente. ÁT. etiquetadas, y se llevaron al laboratorio, previa homogenización, se. RM. procesaron 100 cc de suelo mediante la técnica de Whitehead.. IN FO. Posteriormente y mediante un estéreo microscopio, se determinó la. AS. DE. cantidad de nematodos presentes.. EM. b) Población de Nemátodos en el Suelo; de Huevos y Juveniles 2 en el. SI ST. sistema radical. Se realizaron muestreos de suelo y de raíces cada mes durante cuatro. DE. meses. El procedimiento de muestreo y el método de extracción de. DI. RE. CC. IO. N. nematodos del suelo, fue el mencionado anteriormente y la población se expresó en nematodos por 100 cc de suelo. La extracción de larvas y huevos de las raíces, se realizó por el método de Hussey y Barker (1973), para lo cual se procesó una muestra de1g del sistema radical. Con los datos de población inicial, población obtenida cada mes y de población final, se elaboraron gráficas para observar la fluctuación de la. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. población del nematodo en el suelo y en el sistema radical, en cada tratamiento. AC IÓ. N. c) Eficiencia de los Tratamientos. UN IC. La eficiencia de los tratamientos se determinó mediante la fórmula. CO. M. propuesta por Henderson-Tilton (1981):. Y. (1- Pfa / Pia x Pib / Pfb) x 100. IC. A. donde:. ÁT. Pia = población inicial del tratamiento. RM. Pfa = población final del tratamiento. IN FO. Pib = población inicial del testigo. AS. DE. Pfb = población final del testigo. EM. Es decir, los datos de población inicial y final del nematodo en el suelo. SI ST. de cada tratamiento, se relacionaron con los datos de población inicial y. DE. final del nematode en el suelo registrados en el testigo, sin control.. DI. RE. CC. IO. N. 2.5. Análisis Estadístico: Para determinar diferencias estadísticasen la variable incremento de la población, se realizó el análisis de varianza. La comparación de medias para esta variable se realizó mediante la prueba postanava de SNK con una α de 0.05%.. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III.. RESULTADOS. En la Tabla 1, se observa que no existe diferencias significativas en la eficiencia de las. UN IC. AC IÓ. N. tres dosis de Bacillus subtilis aplicadas sobre juveniles 2 de Meloidogyne incognita. Se observa en la figura 1 que las dosis de 1 y 2 Lt/Ha, redujeron la misma cantidad de. CO. M. nematodos, a diferencia de la tercera dosis (3Lt/Ha) que redujo mayor cantidad de. Y. nematodos en el suelo; esto indica que el producto Rizos tiende a disminuir la cantidad. IC. A. de nemátodos, dado que la fluctuación poblacional que tuvieron los juveniles 2 de. ÁT. Meloidogyne incognita en el suelo durante los tres meses de evaluación presentan una. RM. tendencia de reducción; del mismo modo la fluctuación poblacional de nematodos en. IN FO. el sistema radical que se observa en la figura 2, se aprecia una tendencia a reducir el. DE. número de huevos y larvas, hasta la segunda evaluación, luego se aprecia una marcada. AS. diferencia en la tercera evaluación, donde en el control se encuentra una cantidad. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. mucho mayor de la que se encuentra en los tratamientos o dosis.. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 1. Tres dosis de Bacillus subtilis sobre juveniles 2 de Meloidogyne incognita en suelo, en condiciones de invernadero. FINAL DE M.. incognita. incognita. INCREMENTO. CO. INICIAL DE M.. EFICIENCIA. Y. POBLACIÓN. 1 Lt/Ha. 116.5. 86. 2 Lt/Ha. 114.25. 85. 3 Lt/Ha. 116. RM ÁT. 239.5. IN FO. 116.5. 2.06. 0.00%. 0.74. 64.09%*. 0.75. 63.81%*. 0.53. 74.32%*. EM. AS. DE. Testigo. IC. A. DOSIS. POBLACIÓN. RE. CC I. O. N. DE. SI. ST. 61.25. DI. * p > 0.05. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. 250. Y A IC RM ÁT. 150. Control. IN FO. 1Lt/Ha. 100. 2Lt/Ha 3Lt/Ha. DE. Nematodes por 100cc de suelo. 200. EM. AS. 50. ST. 0. E2. E3. E4. SI. E1. N. DE. Numero de Evaluaciones. DI. RE. en condiciones de invernadero. CC I. O. Fig. 1. Fluctuación poblacional de Meloidogyne incognita en el suelo frente a tres dosis de Bacillus subtilis durante cuatro meses de evaluación. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 50. CO. 40. IC. A. Y. 35. RM ÁT. 30. Control 1Lt/Ha. IN FO. 25 20. 3Lt/Ha. AS. DE. 15. 2Lt/Ha. 10. EM. Huevos y Larvas de Nematodes / g de raiz. 45. SI. ST. 5 0. E2. E3. Numero de Evaluaciones. CC I. O. N. DE. E1. RE. Fig. 2. Fluctuación poblacional de Meloidogyne incognita en el sistema radicular frente a tres dosis de Bacillus subtilis durante tres meses de. DI. evaluación en condiciones de invernadero. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 160. CO. 140. TESTIGO. Y. 120. 1DOSIS Lt/Ha I. IC. A. 100. RM ÁT. 80 60. a. b. IN FO. 40 20. b. 2 Lt/HaII DOSIS. DOSIS 3 Lt/HaIII. b. DE. Población de juveniles 2 de Meloidogyne incognita. 180. AS. 0. ST. EM. Fig. 3. Población de 2 de Meloidogyne incognita en el suelo inoculado con tres dosis de Bacillus subtilis luego de 4 meses de evaluación. a: p < 0.05 b: p > 0.05. DI. RE. CC I. O. N. DE. SI. en condiciones de invernadero.. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. El control de los nematodos del suelo se puede realizar por diferentes métodos,. AC IÓ. N. resaltando el control biológico y químico, que pueden actuar como nematicidas o. UN IC. puede alterar la reproducción del parásito y su orientación hacia las raíces de la planta huésped en el suelo (Araujo et al. 2002). Sin embargo, el control biológico ha sido. CO. M. presentado como una alternativa más viable para la gestión de los nematodos, al. Y. minimizar el daño al medio ambiente y ser económicamente más ventajoso en. IC. A. comparación con los métodos químicos convencionales (Coimbra & Campos, 2005);. ÁT. esto se ve reflejado en la tabla 1, donde se aprecia el porcentaje de eficiencia que tuvo. RM. el producto biológico Rizos que contiene a Bacillus subtilis, del cual se observó que. DE. IN FO. las tres dosis empleadas en el ensayo tuvieron el mismo efecto supresor.. AS. Las bacterias más patogénicas se introducen a los hospederos cuando estos comen. EM. alimento contaminado. Estas bacterias se multiplican en el aparato digestivo de los. SI ST. insectos, produciendo algunas enzimas (como la lecitinasa y las proteinasas) y toxinas, las cuales dañan las células del intestino medio y facilitan la invasión del hemocele del. DE. nematodo (Anexo 6). Los pasos que siguen a la infección varía según el tipo de. IO. N. bacterias. Habitualmente, una vez que invaden el hemocele, se multiplican y matan al. CC. hospedero por septicemia, por la acción de toxinas o por ambos. En numerosos casos,. DI. RE. antes de morir, el nemátodo huésped pierde el apetito y deja de alimentarse (Van Driesche et al 2007); lo cual refleja la acción que tuvo Bacillus subtilis frente a los. juveniles 2 de Meloidogyne incognita, en la tabla 1 se aprecia la población de M. incognita, antes y después de ser enfrentado B. subtilis.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Según Gonzales y Fragozo 2002, señalan que la bacteria Bacillus subtilis no es potencialmente patógena, no produce endotoxinas y secreta proteínas al medio, algunas de ellas con propiedades antifúngicas, como la subtilinas y otros antibióticos. AC IÓ. N. de la familia iturinas. La subtilina secretada por Bacillus subtilis actúa sobre la pared. UN IC. celular de los hongos. Se ha demostrado que induce resistencia sistemática natural de la planta contra el patógeno bacteriano y fungoso propiedad llamada resistencia. CO. M. sistemática Adquirida (SAR). Investigaciones recientes muestran que Bacillus subtilis,. Y. no solamente inhibe al patógeno, sino que además, promueve el crecimiento de la raíz. IC. A. y la planta, e incrementan el contenido de lípidos, triglicéridos y esterol en las hojas. ÁT. del tomate (Madigan et al., 1998). Del mismo modo se ha utilizado en el tratamiento. RM. de semillas de cereales, algodón y maíz. En general Bacillus subtilis es utilizado como. IN FO. un organismo antagonista en aplicaciones agronómicas; por tal motivo el análisis de. DE. variancia realizado para la variable incremento de la población en el suelo (Anexo 8),. AS. muestra diferencias significativas entre tratamientos y el control, diferencias que son. EM. corroboradas por la prueba de SNK que muestra dos rangos (Anexo 9); en el primer. SI ST. rango (1) se ubican los tratamientos (tratamiento 2, 3 y 4) con incrementos de 0.74, 0.75 y 0.53 la población inicial respectivamente. En el segundo rango (2) se ubica el. DE. testigo con un incremento de 2.06 la población inicial; el que alcanza el menor. IO. N. incremento (numéricamente) fue la dosis más alta (tratamiento 4: 3Lt/Ha) con 0,53. CC. veces de incremento de la población inicial del nematodo en el suelo.. DI. RE. Los incrementos de la población del nemátode en el suelo registrados en las diferentes dosis (Tabla 1); dos de ellas propuestas por la ficha técnica del producto Rizos (Bacillus subtilis); en un rango de 0,53 a 0,74; indican que ejercieron un moderado control del nematodo y esto es confirmado por Vergara (2005), quién, al evaluar la eficiencia de ocho productos de origen biológico o botánico, en el control de. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Meloidogyne sp., en tomate de árbol crecido en macetas bajo invernadero durante tres meses, determinó que el producto que mejor control mostró fue Bioway (Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosas, P. stutzeri, Proteus sp.,. UN IC. AC IÓ. N. Actinomicetes), con índices de incremento de la población de 0.8veces.. Gualdron (1997) afirma que B. subtilis es una bacteria Gram positiva, produce. CO. M. endospora las que son termorresistentes y también resiste factores físicos perjudiciales. Y. como la desecación, la radiación, los ácidos y los desinfectantes químicos, produce. IC. A. enzimas hidrofílicas extracelulares que descomponen polisacáridos, ácidos nucleicos;. ÁT. promueve el desarrollo de las plantas y previene las enfermedades del suelo causadas. RM. por el nematodo nodulador de raíces (Meloidogyne spp), del mismo modo Sharma y. IN FO. Gomes (1996) reportaron cepas seleccionadas de Bacillus subtilis como antagonistas. DE. de nemátodos que forman agallas, dado que B. subtilis en el suelo puede interferir con. AS. el ciclo reproductivo de los nemátodos, especialmente sobre la ovoposición y eclosión. EM. de los juveniles; por tal razón es que la cantidad de huevos y larvas de M. incognita. SI ST. encontradas en el sistema radical de la planta globo fueron reduciéndose, por el. DE. contrario en el Testigo fueron incrementándose (Fig. 2).. IO. N. Según Maciel y Ferraz (1996), el método biológico para controlar los nematodos. CC. puede ocurrir al detener el ciclo biológico o al menos la reducción en la capacidad de. DI. RE. reproducción del nemátodo. Además, la transformación de la raíz en exudados por la acción de microorganismos puede causar que el nemátodo no reconozca el estímulo quimiotrópico y continúe moviéndose en el suelo hasta la muerte (Freitas, 2001). El mismo autor también menciona que los metabolitos que producen las rizobacterias pueden desencadenar reacciones de hipersensibilidad, evitando que los nematodos. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. femeninos sean capaces de tener energía suficiente para producir huevos. También se ha informado de que los antagonistas en el suelo pueden degradar la masa gelatinosa que rodea los huevos, reduciendo así su protección. (Orion y Kritzman, 1991); por tal. AC IÓ. N. razón en la figura 1 podemos observar que en las lecturas 2, 3, y 4, todos los. UN IC. tratamientos presentan la tendencia a reducir la población inicial de nematodos en el suelo determinada en la primera lectura, con excepción del tratamiento T1 (testigo), en. CO. M. el cual la población se incrementa de forma constante en todas las lecturas a partir de. Y. la segunda lectura.. IC. A. Por otro lado en el sistema radical de Gomphocarpus fruticosus (planta globo) se. ÁT. observa que en la segunda lectura de juveniles 2 y huevos (figura 2), todos los. RM. tratamientos tienden a reducir la población determinada en la primera lectura, pero. IN FO. luego el tratamiento T1 (testigo) aumenta considerablemente en la tercera lectura; el. DE. resto de tratamientos muestran una tendencia a disminuir la población, especialmente. AS. el tratamiento T4 (Dosis 3Lt/Ha).. EM. Según Rojas M. T. et al. (1999), afirman que, la eficacia de Bacillus subtilis depende. SI ST. en gran medida de la cantidad de esporas existentes en el suelo y de la posibilidad de que éstas se puedan adherir a la cutícula de los Nematodos para poder parasitar. DE. generaciones futuras; las esporas se pueden almacenar en el suelo y raíz seca por. IO. N. periodos largos sin mostrar pérdida aparente de viabilidad; Esto confirma lo que se. CC. observa en la Figura 3, donde no existe diferencias significativas entre las dosis, dado. DI. RE. que la cantidad de producto aplicado no tiene gran importancia, porque B. subtilis es viable sin importar el tiempo y las condiciones.. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V.. Bacillus subtilis disminuye la población de juveniles 2 de Meloidogyne. N. . CONCLUSIÓN. AC IÓ. incognita, no existiendo diferencias estadísticas significativas entre las tres. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. dosis aplicadas.. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El producto Rizos (Bacillus subtilis) es recomendado para ser. AC IÓ. . RECOMENDACIONES. N. VI.. UN IC. aplicado en cultivos con problemas de Nematodos con una población de 100 a 150 nematodos por cada 100cc de suelo,. Se recomienda seguir con la investigación, para determinar cual es. IC. A. . Y. CO. M. aplicando las dosis recomendadas por la ficha técnica del producto.. RM. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. Meloidogyne incognita. ÁT. la acción de Bacillus subtilis sobre la cutícula de los juveniles 2 de. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Araujo, FF et al. 2002. Influencia de Bacillus subtilis en el brote, la orientación y la. UN IC. AC IÓ. N. infección de Heterodera glycines en soja. Ciencia Rural, v.32, n.2, p.197-203.. Atkinson, H. J. 1993; Oportunities for Plant Molecular Biology in Crop Production,. Y. CO. M. Monograph 55, pp. 257-256. A. Avelar, M., J.J., Téliz O.D., y Zavaleta M.E. 2001. Patógenos asociados con el. RM. ÁT. IC. declinamiento del guayabo. Revista Mexicana de Fitopatología. 19: 223 –229.. IN FO. Bone, L. W. 1986; Activity of Commercial Bacillus thuringiensis Preparation. DE. Against Trichostrongylus colubiformis and Npostrangilus brasiliensis; J.. EM. AS. Invert. Pathology 48: 146-151.. SI ST. Castellanos, JJ;Oliva,P;Izquierdo, E;Morales,N. 1995.Evaluaci .n de Bacillus subtilis como biocontrol del patógeno Alternaria porri (Ell). Cif en cebolla. In. IO. N. DE. Bioplag 95. (1995, Ciudad Habana, Cuba).INIFAT. p. 21.. DI. RE. CC. Coimbra, JL; Campos VP; 2005. Efecto de los exudados de las colonias y filtrados de cultivo de actinomicetos presentes en el foco, la movilidad y la mortalidad de los menores de la segunda etapa de M. javanica. brasileño Plant Pathology , vol. 30, p.232-238. Deacon, J. 1990. Introducción a la micología moderna. 2da ed. Ed. Limusa. México. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dickinson, C. y J. Lucas. 1987. Patología vegetal y patógenos de plantas. Edit. Limusa. México. UN IC. AC IÓ. N. Freitas, L.G. 2001. Rizobactérias versus nematóides.. Gualdron, C. Suarez, A, Valencia, H.1997. Microorganismos aislados del Suelo del. Y. CO. M. Paramo de Chisacá Colombia.Caldasia 19 (1-2):233-245.. IC. A. Guillén Cruz R., F. D. Hernández Castillo, G. Gallegos Morales, R. Rodríguez. ÁT. Herrera, C. N. Aguilar Gonzáles, E. Padrón Corral y M. H. Reyes Valdéz.. RM. 2006. Bacillus spp. Como biocontrol en el suelo infestado con Fusarium spp.,. IN FO. Rhizoctonia solani Kühn y Phytophthora capsici Leonian y su efecto en el. DE. desarrollo y rendimiento del cultivo de Chile (Capsicum annuum L.).. AS. Universidad Autónoma del Estado de México. Red de Revistas Científicas de. SI ST. EM. América Latina y el Caribe, España y Portugal. México. 11p. Hussey, R. & Barker, K. 1973. Comparation of methods of collecting inocula for. IO. N. DE. Meloidogyne spp. including new techniques. Dist. Rep. 57: 1025 – 1028.. Sacha InchiK. Lima - Perú: Ediciones Shanantina SAC.. DI. RE. CC. Incagro. 2009. Manual de Buenas Prácticas Agrícolas en el Manejo Agrícola de. Kim,DS; Cook,RJ;.Weller, DM. 1997. Bacillus sp. L324-92 for biological control of three root disease of wheat grown with reduced tillage. Phytopathology 87:551-558. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Korsten, L; De Villiers, EE;Wehner, RC; Kotzet, JM. 1997. Field spray of Bacillus subtilis and fungicids for control of preharvet fruit disease of avocado in South. AC IÓ. N. Africa. Plant Disease 81:455-459. UN IC. Lazzarete, E;Menten,JOM; Bettiol,W.1994. Bacillus subtilis como antagonista de los principales patógenos asociados a semillas de frijol y trigo. Fitopatología. Y. CO. M. Venezolana 7:42-46.. IC. A. Maciel, SL; Ferraz, 1996. Reproducción BCCL de Meloidogyne incognita . raza 2 y. ÁT. M. javanica en ocho especies de plantas medicinales Scientia Agricola , V.53,. IN FO. RM. p.956-960.. DE. Madigan, M.T. Martinko, J.M.Parker, J.1998. Brock Biology of Microorganisms.. EM. AS. Pretince Hall .Iberia .Madrid.. SI ST. Manners, J. 1986. Introducción a la fitopatología. Edit. Limusa. México. DE. Martin K., Alberto 1959. Los Nematodes parásitos de las plantas en el Perú y su. CC. IO. N. importancia para la Agricultura. Rev. Per. de Ent. Agr'c , Vol. 2, N° 1,Perú. DI. RE. Nakamura LK, MS Roberts, FM Cohan 1999. Relationship of Bacillus subtilis clades associated with strains 168 and W23: a proposal for Bacillus subtilis subsp. subtilis subsp. Nov. and Bacillus subtilis subsp. spizizenii subsp. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 49: 1211-1215.. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Orion, D.; Kritzman, G. 1991. Antimicrobial activity of Meloidogyne javanica gelatinous matrix. Revue Nematologie, v.14, p.481-483.. AC IÓ. N. Roberts P. A., May D., 1986. Meloidogyne incognita resistance characteristics in. UN IC. tomato genotypes developed for processing. J. Nematol., 18: 353-359.. CO. M. Rojas M. T. y N. M. Mendoza. 1999. Pasteuria penetrans: Adherencia y parasitismo. Y. en Meloidogyne incognita y Meloidogyne arabicida. Universidad Autónoma. ÁT. IC. A. Chapingo. México.. IN FO. RM. Sasser, J. N. 1979. Root Knot Nematodes. Ac. Press. Londres. Inglaterra. DE. Seinhorst, J. 1970. Dynamic of population of plant parasitic nematodos. Anual. EM. AS. review.. SI ST. Sharma, RD; Gomes, CA; 1996. Efecto de Bacillus spp. Toxinas en la ovoposición y eclosión juvenil de Heterodera glycines. Brasileño Nematología, v.20, p.53-. IO. N. DE. 62.. DI. RE. CC. Suárez, H.Z., Rosales, L., González, C., Rondón, A., Tellechea, V., Navas, R. y Solórzano, R. 1995. Asociación de hongos con el nematodo agallador del guayabo Psidium guajava L. III Congreso Latinoamericano de Fitopatología. Resúmenes. Revista Forestal Venezolana 1:85.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.. 25.

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Van Driesche, R. G., Hoddle, M. S., Center, T. D. 2007. Uso de patógenos de artrópodos como plaguicidas. En: Control de plagas y malezas por enemigos. AC IÓ. N. Naturales. Sección IX. Capitulo 24. 443-466.. UN IC. Verdejo-Lucas S., Ornat C., Sorribas F. J., 1997. Management of root-knot nematodes in protected crops of northeast Spain. Bulletin OILB /SROP 20, 94-. Y. CO. M. 98.. IC. A. Verdejo-Lucas S., Sorribas F. J., Puigdomenech P., 1994. Perdidas de producción. ÁT. en lechuga y tomate causadas por Meloidogyne javanica en invernadero.. IN FO. RM. Invest. Agr. Prod. Prot. veg. Suppl. vol. 2: 395-400.. DE. Vergara, D. 2005. Evaluación de productos ecológicos en el control de. AS. Meloidogyne sp. en tomate de árbol (Solanum betaceum CAV.) bajo. EM. invernadero, Tumbaco, Pichincha. Tesis Ing. Agr. Quito, Universidad Central. SI ST. del Ecuador, Facultad de Ciencias Agrícolas. 110pp.. DE. Weller, 1988. Control biológico de patógenos DM plantas del suelo en la rizósfera. DI. RE. CC. IO. N. de las bacterias. Fitopatología revisión anual v.26, p.379-407.. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. ANEXOS. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. Anexo 1. Plantines de Gomphocarpus fruticosus (planta globo). Anexo 2. Instalación del ensayo en el Invernadero del Fundo Marverde de la empresa agroindustrial Camposol S. A.. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RM. Anexo 3. Auger utilizado para realizar las punciones y extraer suelo para análisis de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. nemátodos. Anexo 4. Bandejas de Whitehead conteniendo suelo y agua para realizar el traslado de los nematodos del suelo al agua.. 29. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÁT. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. (planta globo) a 1000X (Coloración Gram). IC. A. Anexo 5. Observación de esporas de B. subtilis en raíz de Gomphocarpus fruticosus. DI. Anexo 6. Observación de esporas de B. subtilis en la cutícula de Meloidogyne incognita a 400X. 30. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. Anexo 7. Método Hussey y Barker (1973). Tamizar con dos tamices de: 180µm y 35 µm. Se realizan 3 alícuotas de 5mL, para conteo de huevos. Recoger el tamizado y aforar a 100ml. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. Se observa y cuenta huevos de nematodos en el microscopio. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. Sumergir en hipoclorito de sodio al 0.2% por 4 minutos. 1g. de raíces cortadas en trozos bien pequeños. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 8. Incremento de la población de Meloidogyne incognita en suelo TRATAMIENTOS. LECTURAS (Pi) 1. 2. 3. (Pf) 4. T-1. Testigo. 116.5. 138. 174. 239.5. 2.06. T-2. 1 Lt/Ha. 116.5. 99.75. 95. 86. 0.74. T-3. 2 Lt/Ha. 114.25. 99.25. 94.25. 85. T-4. 3 Lt/Ha. 116. 80.25. 64. 61.25. N. Descripción. AC IÓ. N°. UN IC. INCREMENTO. 0.53. Y. CO. M. 0.75. IC. A. Anexo 9. Análisis estadístico para la variable incremento de la población de. ÁT. Meloidogyne incognita, registrada en los tratamientos para determinar la eficiencia de. RM. las dosis del producto Rizos (Bacillus subtilis), en el control del nematodo en plantas. Suma. de. DE. IN FO. Gomphocarpus fruticosus(globo). Camposol, Virú, 2012. Media gl. EM. 17497.828. 3. 5832.609. 11539.531. 12. 961.628. 29037.359. 15. SI ST. Intergrupos. DE. Intra-. Sig.. 6.065. .009. IO. N. grupos. F Cuadrática. AS. Cuadrados. DI. RE. CC. Total. 32. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 10. Prueba SNK (5%) para la variable incremento de la población de Meloidogyne incognita, registrada en los tratamientos para determinar la eficiencia de las dosis del producto Rizos (Bacillus subtilis), en el control del nematodo en plantas. UN IC. M. 4 4 4 4. CO. N. Subconjunto para alf a = .05 1 2 80.3750 98.1875 99.3125 167.0000 .672 1.000. Y. L de Rizos ( Bacillus subt ilis) / Ha 3 L de Rizos / Ha 2 L de Rizos / Ha 1 L de Rizos / Ha 0 L de Rizos / Ha Sig.. AC IÓ. a. A. St udent-Newman-Keuls. N. de Juveniles 2 de Virú, Meloidogyne sp GomphocarpusPoblacion fruticosus (globo). Camposol, 2012. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. Se muest ran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 4.000.. 33. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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