Cuantificación por el método espectrofotométrico de flavonoides totales en extracto hidroalcohólico de hojas de piper aduncum”

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Escuela Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica. RM. INFORME DE INVESTIGACIÓN. FA. TIPO I. IO. BI BL. AUTORES:. TE. CA. DE. “Cuantificación por el método espectrofotométrico de flavonoides totales en extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum”. Miranda Cabanillas, Nelver Erit Mori Zuta, Iván Martín. ASESOR: Q.F. Rengifo Penadillos; Roger Antonio. TRUJILLO-PERÚ 2009. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. Dedicatorias. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Gracias a Nuestro Señor, por toda la ayuda y bendición que nos brinda, por ser la luz que guía. IC A. nuestras vidas, encaminándonos. ser. el. amigo. que. BI. siempre comprende y que nunca. Q. por. O. metas,. UI M. siempre hacia el logro de nuestras. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. falla. Con mucho cariño principalmente a nuestros padres que nos dieron la vida y han estado apoyándonos incondicionalmente en todo momento.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Agradecimientos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. A nuestra Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo por su responsabilidad y alto nivel académico brindado para nuestra formación.. A nuestros profesores y en especial a nuestro asesor de proyecto de investigación, una de las personas que admiramos por su inteligencia y sus conocimientos, el Profesor Roger Antonio Rengifo Penadillos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. Presidente. Mg. Segundo Guillermo Ruiz Reyes. Miembro. IC A. Mg. José Villalobos Torres. Miembro. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. Mg. Roger Antonio Rengifo Penadillos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Página. RESUMEN. i. ABSTRACT. ii. I.-. 01. UI M. IC A. INTRODUCCIÓN. 07. O. Q. II.- MATERIAL Y MÉTODO. 11. IA. Y. BI. III.- RESULTADOS. 14. RM. AC. IV.- DISCUSIÓN. 18. FA. V.- CONCLUSIONES. CA. DE. VI.- RECOMEDACIONES. 20. IO. TE. VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 19. BI BL. VIII.- ANEXOS. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN Los flavonoides presentan una amplia ubicuidad en la naturaleza. Junto con otros compuestos fenólicos son responsables del buen funcionamiento de las plantas; en su relación con el hombre, son utilizados para tratar desordenes cardiovasculares y prevenir algunos tipos cáncer. Para su extracción se utilizó etanol al 50% v/v, el extracto se filtró al vacío y se concentró hasta la mitad del volumen inicial en baño. IC A. María, luego se enfrió durante una hora en una nevera, después se filtró al vacío y el. UI M. residuo se secó por 12 horas a 40 ºC y finalmente el residuo se disolvió en etanol al. O. de la Provincia de San Marcos, Departamento de. BI. de Piper aduncum procedentes. Q. 50%. En este ensayo se obtuvieron los extractos hidroalcohólicos del polvo de las hojas. Y. Cajamarca, se determinó el contenido de flavonoides totales, expresados como. AC. IA. Quercetina, utilizando la técnica espectrofotométrica obteniéndose una concentración de. FA. RM. 0.2815mg/mL para el extracto y 0.8445g% para el polvo de las hojas.. BI BL. IO. TE. CA. DE. Palabras claves: Flavonoides totales, Piper aduncum, espectrofotometría.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. Flavonoids have a wide ubiquity in nature. Along with other phenolic compounds are responsible for the proper functioning of plants; in their relationship with man, are used to treat cardiovascular disorders and prevent some cancer types. For extraction, ethanol 50% v / v, the extract was filtered and concentrated under vacuum to half the original volume in water bath, then cooled for one hour in a refrigerator, then. IC A. filtered under vacuum and the residue dried for 12 hours at 40 º C and finally the. UI M. residue was dissolved in 50% ethanol. This essay hydroalcoholic extracts obtained from. O. Q. powdered leaves of Piper aduncum from the Province of San Marcos, Cajamarca. Y. BI. Department, determined the total flavonoid content expressed as quercetin using the. IA. spectrophotometric technique of obtaining a concentration 0.2815mg/mL and 0.8445g%. RM. AC. for the powdered leaves.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. Keywords: Flavonoid assay, Piper aduncum, spectrophotometry. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.- INTRODUCCIÓN Las plantas medicinales, junto con otros remedios de origen animal y mineral, constituyeron el primer arsenal terapéutico del que disponía el hombre para tratar sus dolencias. Algunos de estos productos aparecían ya descritos en tablillas de arcilla o en papiros egipcios, como el Papiro de Ebers 3,5.. Sin embargo, ya desde épocas ancestrales, estas plantas no eran administradas. IC A. como tal, sino que el hombre elaboraba preparados con el fin de mejorar su aplicación,. Q. UI M. favorecer su conservación u ocultar alguna característica organoléptica desagradable.. BI. O. En algunas ocasiones, algunas drogas se pueden administrar directamente al. IA. Y. paciente, como por ejemplo la aplicación tópica de hojas de col en caso de dolores. AC. reumáticos, la administración de plantas como los berros, diente de león o achicoria en. RM. forma de ensalada o la de las pepas de calabaza como fruto seco. Sin embargo, como. FA. regla general, para elaborar un preparado o un medicamento a base de plantas,. DE. normalmente se tiene que tratar previamente el material vegetal con el fin de conseguir. TE. CA. una materia prima adecuada para la fabricación de medicamentos 9,11,20.. BI BL. IO. Entre la gran diversidad de plantas medicinales que pueden ser administrados al paciente generalmente en forma directa o como un preparado tenemos el Piper aduncum o también llamado popularmente “matico” o “cordoncillo”, es una planta conocida desde hace siglos por las culturas pre incas pero recién son motivo de investigación para la medicina naturista y laboratorios de Estados Unidos, Europa y Asia 4,6,17. En la actualidad, el uso etnomedicinal del “matico” es múltiple y variado siendo empleado para aliviar y curar enfermedades del tracto respiratorio (antiinflamatorio y antitusígeno), en dolencias gastrointestinales (diarreas agudas o crónicas) y tópicamente. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. en infusión de las hojas para hacer gárgaras y como vulnerario (para lavar y curar llagas y heridas externas). Igualmente la tisana de estas hojas juntamente con otras como la malva de olor es muy útil para los baños de asiento y lavados vaginales siendo útil en los descensos fluidos. blanquecinos causados por el parásito Trichomonas. vaginalis 9,17,25. El “matico” es un arbusto perenne de hasta 5 m. de alto, perteneciente a la. IC A. Familia PIPERACEAE. Su tallo es leñoso, nudoso, ramificado, verde o gris pálido;. UI M. hojas alternas, pecioladas, simples, coriáceas, ásperas, con 5 nervaduras. Inflorescencia. O. Q. axilar o terminal en espigas de hasta 15 cm.; flores pequeñas sésiles e imperceptibles a. IA. Y. BI. la vista; olor característico 19,22,30.. AC. En el Perú crece en las tres regiones costa, sierra y selva, hasta los 3000 m.s.n.m.. RM. y se ha reportado esta especie en los departamentos de La Libertad, Amazonas,. FA. Ayacucho, Cajamarca, Cusco, Huánuco, Junín, Lambayeque, Lima, Loreto, Madre de. CA. DE. Dios, Pasco, Piura, San Martín, Ucayali 17,19,22.. tenemos: taninos (5.7%),. TE. Entre los compuestos activos de Piper aduncum. BI BL. fenoles6.. IO. además de alcaloides, cumarinas, flavonoides, esteroides, triterpenos, saponinas y. Investigaciones realizadas en Piper aduncum originarias de Papua-New Guinea han aislado y cuantificado diversos tipos de flavonoides, obteniendo un total de 0.07% en las hojas de esta planta, constituyendo en su mayoría por chalconas y dihidrochalconas25.. En un estudio realizados por Flores Esther y en otro realizado por Mirelles se ha aislado e identificado compuestos responsables de la actividad antifúngica y. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. leishmanicida de las hojas de Piper aduncum como 5,7-dihidroxiflavona; 5,7–dihidroxi4-metoxiflavanona; Acido3-(3´,7´-dimetil-3´,6´-octadienil)-4-metoxibenzoico 5,16.. Los flavonoides comprenden un amplio grupo de compuestos polifenólicos que aparecen de forma espontánea en casi todas las plantas superiores. Poseen un origen biosintético común y, por ese motivo, un mismo elemento estructural básico con diferentes grados de oxidación, que dan lugar a las distintas familias estructurales:. IC A. flavonas, flavonoles, flavanonas, flavanoles, antocianos, isoflavonas, chalconas y. Q. UI M. auronas 9,11,13.. BI. O. Los flavonoides pertenecen a un grupo de compuestos naturales arreglados bajo. IA. Y. un sistema C6-C3-C6, en el cual dos anillos aromáticos llamados A y B están unidos. AC. por una unidad de tres carbonos que pueden o no formar un tercer anillo, que en caso de. RM. existir es llamado anillo C. Los flavonoides pueden encontrarse como aglicona o bajo la. FA. forma de glicósidos con una o tres unidades de azúcar, generalmente en los carbonos 3. DE. y/o 7, siendo los azúcares más comunes la glucosa, galactosa, ramnosa, xilosa y. TE. CA. arabinosa 9,11.. BI BL. IO. Como características generales de estos compuestos debemos señalar su solubilidad en agua y etanol, su carácter fenólico y su intensa absorción en la región ultravioleta (UV) y visible del espectro debido a la presencia de sistemas aromáticos conjugados 9,12.. Está comprobado que los flavonoides son importantes para el desarrollo y buen funcionamiento de las plantas al protegerlas contra agentes agresores externos, como la radiación UV, microorganismos, animales herbívoros y del medio ambiente. Pueden actuar como señalizadores químicos, indicando a los insectos que planta es apropiada. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. para su alimentación, oviposición o simplemente guiándolos y facilitando así la polinización 3,9.. En su relación con el hombre, se utilizan para tratar enfermedades relacionadas con procesos inflamatorios y desordenes cardiovasculares debido a la actividad que ejercen sobre el sistema circulatorio mejorando la circulación periférica, la movilización del colesterol y disminuyendo la fragilidad capilar. Algunos flavonoides pueden. IC A. presentar actividad hepática protectora, antialérgica, antitrombótica, anticancerígena,. UI M. antibacteriana, antifúngica, e incluso pueden ejercer efectos inhibidores sobre algunas. BI. O. Q. enzimas 23,24,32.. IA. Y. La cuantificación de flavonoides en productos naturales, usualmente se hace. AC. mediante cromatografía de capa fina, análisis colorimétrico, cromatografía de gases,. RM. cromatografía de gases acoplada a espectrómetro de masas GC/MS y cromatografía. FA. líquida de alta eficiencia. Los métodos por cromatografía de gases y de alta eficiencia. DE. aportan información definitiva en la caracterización de las muestras, pero presentan. CA. limitaciones importantes debido a los costos del equipamiento y la participación de. IO. TE. personal con formación específica en el área instrumental. En cambio, los métodos. BI BL. espectrofotométricos permiten cuantificar flavonoides con estructuras similares y son convenientes y apropiados en las determinaciones rutinarias 8,9,21.. Es importante también que para realizar un proceso de cuantificación de metabolitos presentes en vegetales es necesaria la aplicación correcta de operaciones unitarias previas como son el secado de la droga vegetal, la molienda, el tamizado, la extracción, filtrado, etc 8,22,24.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El secado favorece la conservación adecuada del material. Consiste en eliminar el agua de constitución hasta niveles que permitan su conservación más prolongada sin deterioro de su calidad; el secado interrumpe los procesos de degradación causados por enzimas o fermentos, impide el desarrollo de microorganismos y de reacciones de oxidación 9.. La molienda del material vegetal se utiliza para homogenizar el tamaño de. IC A. partícula y mejorar la elaboración de distintos preparados. Además favorece la. UI M. liberación de los principios activos desde la droga, al aumentar la superficie de contacto. BI. O. Q. al producir la ruptura de estructuras celulares 9,14.. IA. Y. Tras la molienda del material, podemos obtener partículas de la droga de muy. AC. distinto tamaño. En ocasiones puede ser que sólo interesen aquellas partículas de. RM. unas dimensiones determinadas, por lo que se deben separar de las sobrantes. Para. FA. lograr este objetivo, se suele trabajar. con una serie de tamices en cascada, de luz. DE. de malla decreciente, que van a separar las partículas de la droga en fracciones de. TE. CA. tamaño 14,28.. BI BL. IO. Existen multitud de productos elaborados con extractos de plantas. Un extracto es un preparado de la droga vegetal que contiene sólo aquellos principios activos solubles en el medio extractivo utilizado. Los extractos se preparan de forma general poniendo en contacto la droga con un disolvente. En el disolvente quedarán los principios activos solubles de la droga, hasta que se logre un equilibrio de concentraciones entre el medio líquido y la droga 7,9,14,28.. La extracción de los flavonoides se realiza a partir del material fresco o incluso seco, siempre y cuando no se altere su composición. Se utilizan inicialmente disolventes. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. no polares o ligeramente polares para separar las clorofilas gomas y agliconas de flavonoides altamente metoxiladas. Los flavonoides, que poseen un gran número de grupos hidroxilos insustituidos o azúcares, son considerados polares, por lo que son ligeramente solubles en disolventes polares, como el metanol, etanol, acetona, dimetilsulfóxido o agua. Este proceso es favorable para la extracción de la mayoría de los flavonoides pero no para antocianidinas o flavonoides de baja polaridad los cuales. IC A. aparecen en la superficie de las plantas 11,21.. UI M. El Filtrado es una operación que permite, una vez terminada la extracción,. BI. O. Q. eliminar las partículas que han accedido al disolvente, pero no se han disuelto 5,25.. IA. Y. Por todo lo expuesto anteriormente, el presente trabajo, pretende mediante una. AC. correcta aplicación de las operaciones farmacotécnicas y mediante el método. RM. espectrofotométrico, cuantificar flavonoides totales expresados como Quercetina en el. DE. FA. extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum.. CA. 2.- Problema. TE. ¿Cuál es la cantidad de flavonoides totales expresados como Quercetina que. BI BL. IO. contiene el extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum? 3.- Hipótesis. Implícita. 4.- Objetivo.  Determinar la cantidad de flavonoides totales expresados como Quercetina contenidos en el extracto hidroalcohólico del polvo de Hojas de Piper aduncum.  Determinar la cantidad de flavonoides totales expresados como Quercetina contenidos en el polvo de Hojas de Piper aduncum.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.- MATERIAL Y MÉTODO 1. MATERIALES 1.1 Material de Estudio . Material Botánico: 100g. de polvo de. hojas de Piper aduncum procedente de la. Provincia de San Marcos, Departamento de Cajamarca, recolectadas. IC A. en el otoño del 2008 22.. Y. Equipos de Laboratorio. IA. . BI. El de uso común en el laboratorio.. Q. Material de Vidrio y Otros. O. . UI M. 1.2 Material de Laboratorio:. AC. Balanza Analítica Marca Sartorius BP301S. RM. Baño María Marca DIN12877-K1. FA. Bomba de Vacío Marca General Eletric Modelo: 5KH33DM68. DE. Espectrofotómetro Hewlett Packard 8450. TE. CA. Estufa Marca Memmertt UM – 300. IO. Refrigerador Marca Coldex. BI BL. 1.3 Reactivos Acido Sulfúrico cc. Agua destilada Etanol 96º Gay Lussac Estándar de Quercetina Marca MERCK, lote: MM 2-5027. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2. MÉTODOS: 2.1 Preparación de la Muestra: Se tamizó el polvo de las hojas de Piper aduncum con un tamiz de 200 mallas, el producto obtenido se guardó herméticamente en frascos de vidrio. de boca ancha y aisladas de la luz hasta el momento de la. extracción.. IC A. 2.2 Obtención del extracto:. UI M. Para la extracción de los flavonoides se reflujó 5g del polvo de la hoja de. Q. Piper aduncum durante 2 horas con 200 mL de ácido sulfúrico al 10%. BI. O. v/v y 200 mL de etanol al 50% v/v, luego se enfrió y filtró al vacío. Y. lavándose el residuo con 60 mL de etanol al 50 % v/v; se juntaron ambos. AC. IA. filtrados y se evaporó en baño maría hasta la mitad del volumen inicial,. RM. se enfrió en la nevera durante 60 minutos y luego se filtró al vacío,. FA. lavando el precipitado con 250 mL agua destilada fría (10-15º C) en. DE. porciones de 10 mL. Se eliminó el filtrado y los lavados, y el filtro se. CA. secó en estufa a temperatura de 40º C durante 12 horas, luego se disolvió. IO. TE. el residuo del filtro en 150 mL de etanol al 50%v/v, de esta solución se. BI BL. separó una muestra de 5 mL y se conservó en frascos de color ámbar. El procedimiento se repitió para obtener un total de 6 muestras El etanol al 50% v/v se preparó según la tabla de dilución de alcoholes (ver anexo Nº6) 2.3 Cuantificación de flavonoides: Se midió 1 mL del extracto y se aforó a 25 mL con etanol al 50% v/v, seguidamente se leyó la absorbancia a 258 nm por triplicado. Este procedimiento se repitió para las 6 muestras.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Como estándar se empleó 0.04g de Quercetina, los cuales se disolvieron con etanol de 96º G.L. y se aforó a 50mL; se midió 1mL de esta solución y se aforó a 100 mL con etanol al 50% v/v. Como blanco se utilizó etanol al 50% v/v. Las expresiones matemáticas para los cálculos son: Determinación de flavonoides totales expresados como Quercetina en. Am  C ST  25  PST AR. UI M. X . IC A. el extracto hidroalcohólico. BI. O. Q. Donde:. Y. X: Contenido de flavonoides totales expresados como Quercetina. AC. IA. (mg/mL).. RM. Am: Absorbancia de la solución muestra.. FA. C ST : Concentración del estándar de lectura (mg/mL).. DE. AR : Absorbancia de la solución de referencia.. TE. CA. PST: Potencia del estándar. IO. Determinación de flavonoides totales expresados como Quercetina en. BI BL. la droga. X. Am  CST  FD  PST 100 AR xPM. Donde: X: Contenido de flavonoides totales expresados como Quercetina (%). Am: Absorbancia de la solución muestra.. C ST : Concentración del estándar de lectura (g).. AR : Absorbancia de la solución de referencia.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FD: Factor de Dilución de la muestra. PM : Peso de la muestra en gramos PST: Potencia del estándar. 3. Tratamiento estadístico de los resultados: A los resultados obtenidos se les aplicó las pruebas estadísticas: Q,. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. media y desviación estándar.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.- RESULTADOS:. Cuadro Nº1: Absorbancias del extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum Abs <258nm>. M4. IC A UI M. Q. 0.66188. 0.68529. FA. RM. M5. 0.65431. O. M3. 0.67235. BI. M2. 0.65697. Y. M1. 0.65891 0.65585 0.65614 0.67121 0.67063 0.6752 0.65919 0.65196 0.65179 0.66577 0.66055 0.65933 0.68274 0.68904 0.68408 0.68221 0.68585 0.68291. IA. Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3 -. Promedios de las Absorbancias. AC. Muestra. 0.68366. TE. CA. DE. M6. IO. Cuadro Nº2: Absorbancia de 0.0080 mg/mL de Quercetina Estándar. BI BL. Nombre Std. Lectura 1 Lectura 2 Lectura 3. Abs<258nm> 0.47415 0.47824 0.47224. Promedio 0.47488. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro Nº3: Flavonoides totales expresados como Quercetina en el extracto. Promedio. 0.2815. UI M. M1 M2 M3 M4 M5 M6. Flavonoides totales mg/mL 0.2764 0.2829 0.2753 0.2785 0.2883 0.2876. Q. Muestras. IC A. hidroalcohólico de hojas Piper aduncum. BI. O. Cuadro Nº4: Valores del análisis estadístico para los flavonoides totales. Y. expresados como Quercetina en el extracto hidroalcohólico del polvo de hojas. FA. RM. Desviación Estándar. AC. IA. Piper aduncum. DE. Coeficiente de Variación. 2.0 %. 0.2792 ± 0.0058 mg/mL. TE. CA. Limites de Confianza. 0.0056 mg/mL. BI BL. IO. Cuadro Nº5: Flavonoides totales expresados como Quercetina en el volumen total del extracto hidroalcohólico de hojas Piper aduncum Muestras M1 M2 M3 M4 M5 M6 Promedio. Flavonoides totales (mg) 41.4606 42.4312 41.2927 41.7704 43.2478 43.1450 42.2246. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro Nº6: Porcentaje de flavonoides totales expresados como Quercetina, en el polvo de hojas de Piper aduncum Muestra. Porcentaje de flavonoides totales (g Flav/100 g de droga). M1. 0.8292. M2. 0.8486. IC A. 0.8258. M3. UI M. 0.8354. M4. BI. O. Q. 0.8650. M5. 0.8629. AC. 0.8445 g%. DE. FA. RM. PROMEDIO. IA. Y. M6. CA. Cuadro Nº7: Valores del análisis estadístico para el porcentaje de flavonoides. BI BL. IO. TE. totales expresados como Quercetina, en el polvo de hojas de Piper aduncum. Desviación Estándar. 0.017 g. Coeficiente de Variación. 2.0 %. Limites de Confianza. 0.8445 ± 0.0177 g/%. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.- DISCUSIÓN El uso medicinal de las plantas en relación con los flavonoides es ampliamente estudiado por los investigadores con la finalidad de aplicar estos conocimientos en el ámbito medicinal y tecnológico, es por ello que el presente trabajo tiene como objetivo la cuantificación de flavonoides totales expresados como Quercetina en extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum mediante el método espectrofotométrico.. IC A. La concentración relativa de los flavonoides totales presente en el extracto. UI M. hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum se obtuvo de la medición de la. Q. absorbancia del extracto diluido a 258 nm, esta longitud de onda máxima es designada. BI. O. por la banda II (normalmente se encuentra entre 240-280 nm). La banda está asociada. Y. con el anillo A o sistema benzoil de los flavonoides, la posición de esta banda permite. AC. IA. cuantificar diversos tipos de flavonoides por la similitud estructural que poseen29.. RM. La utilización de la absorbancia para determinar la concentración de un analito. FA. en solución es posible mediante la aplicación de la ley de Beer-Lambert, la cual. DE. establece que la absorbancia de una solución es directamente proporcional a la. CA. concentración de la solución, pero para la correlación ideal de esta ley las lecturas de. IO. TE. estas deben estar dentro del rango de 0.2 – 0.8, puesto que tiende a ser no válida para. BI BL. concentraciones muy elevadas15,28,29. La cantidad de flavonoides totales expresados como Quercetina encontrados en el extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum obtenido en las muestras fue de 0.2815mg/mL, además los valores del análisis estadísticos obtenidos que se muestran en el cuadro Nº 4, nos asegura q la dispersión de los datos es pequeña por lo tanto los valores obtenidos son precisos y por consiguiente se mantuvieron constantes todas aquellas condiciones que, si cambiaran, podrían causar desviaciones sistemáticas de medición15,18,28.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la introducción se mencionó la importancia de los flavonoides por sus acciones antiinflamatorias, en el tratamientos de desordenes cardiovasculares y efectos hepatoprotectores. El contenido de flavonoides totales presentes en el volumen total del extracto hidroalcohólico hojas de Piper aduncum es de 42.2246 mg, este valor corresponde a lo extraído de 5 g de droga, ésta cifra es similar a la que se obtiene al ingerir 1 litro de vino tinto (5 - 42mg) o en 1 litro de té negro (19-47 mg) y superior al. IC A. consumo promedio de compuestos fenólicos en los países europeos (23mg/día)3.. UI M. También se mencionó anteriormente sobre los estudios realizado en Piper. Q. aduncum originarias de Papúa-New Guinea, en cual se aislaron y cuantificaron diversos. BI. O. tipos de flavonoides y obteniéndose 0.07% de flavonoides totales cuantificados en las. AC. Chalconas y Dihidrochalconas sustituidas2.. IA. Y. hojas de esta planta, también constituido mayoritariamente por flavonoides de tipo. RM. El porcentaje de flavonoides totales expresados como Quercetina encontrados en. FA. la droga es de 0.8445 g% este valor es superior a los resultados que se indican en los. DE. estudios hechos de esta planta en Papúa-Nueva Guinea y aunque ambas plantas son de. CA. la misma especie la variación de la concentración de sus metabolitos secundarios y. BI BL. factores2,25.. IO. TE. dentro de estos la producción de flavonoides estaría condicionada por distintos. Existen factores abióticos y bióticos que generan situaciones de estrés en las plantas, como la falta de agua, la exposición a la radiación solar o el ataque de herbívoros. En cada una de estas situaciones ambientales existe un comportamiento metabólico diferente que condiciona la producción y la variabilidad de los metabolitos secundarios. Dentro de estos metabolitos, los compuestos fenólicos juegan un rol preponderante en prácticamente todas las interacciones de la planta con su entorno. Es así que individuos de una misma especie que crecen en diferentes medios tienen. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. variaciones en la síntesis de sus compuestos fenólicos. Por lo tanto, la producción de flavonoides está afectada por los incrementos de temperatura, las radiaciones UVvisible y la falta de agua y generando éstos una respuesta directa sobre la biosíntesis de flavonoides que puede ser positiva o negativa según el tipo de flavonoide, el período durante el que se produce el estrés y la intensidad de éste1,27. La provincia de San Marcos de donde procede nuestra planta se caracteriza por. IC A. ser un valle interandino con altitudes que van desde los 1500 hasta los 4156 msnm, gran. UI M. variedad climática, desde cálido – seco hasta sub – húmedo y frío. Y la humedad. O. concluyen que las plantas que se ubican en un. BI. Algunos estudios realizados. Q. relativa es de 60 – 70%.. Y. valle de altura suelen contener mayor concentración de flavonoides totales, debido a que. AC. IA. la radiación que reciben las plantas en esta zona es mayor y los flavonoides actúan. RM. como filtros solares en la epidermis de las hojas verdes cumpliendo un posible rol de. FA. protección contra el daño fotooxidativo causado por la radiación UV que puede afectar. DE. al DNA produciendo su dimerización y ruptura3,27.. CA. La temperatura también juega un papel importante en la producción de. IO. TE. metabolitos secundarios, influye grandemente en el crecimiento acelerado y en el. BI BL. equilibrio entre el proceso de fotosíntesis y respiratorio y por consiguiente en la producción de los principios activos1. Con relación a las precipitaciones, la misma juega un rol fundamental al modificar los efectos ecológicos de otros factores, por ejemplo, regulador de las temperaturas. Las lluvias, además influyen sobre la distribución geográfica de las plantas y los metabolitos de las plantas son seriamente afectados por su exceso o por ausencia de las mismas1,2.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.- CONCLUSIÓN El extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum procedentes de la Provincia de San Marcos, Departamento de Cajamarca contiene 0.2792mg/mL de flavonoides totales expresados como Quercetina. El polvo de las hojas de Piper aduncum procedentes de la Provincia de San Marcos, Departamento de Cajamarca contiene 0.8445g% de flavonoides totales. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. expresados como Quercetina.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.- RECOMENDACIONES Las hojas de Piper aduncum. procedentes de la Provincia de San Marcos,. Departamento de Cajamarca, posee un considerable contenido de metabolitos activos como son los flavonoides y sería muy importante avanzar en la identificación y. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. cuantificación de estos a fin dar una mejor aplicación terapéutica a la planta.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Acosta L. Principios agroclimáticos básicos para la producción de plantas medicinales. Revista Cubana de Pantas Medicinales 2003;(1): Centro de Investigación y Desarrollo de medicamentos. Soporte en htm [en línea]. Disponible en: http://www.bvs.sld.cu/revistas/pla/vol8_1_03/pla08103.htm Fecha de. acceso. IC A. [16 de agosto del 2009].. UI M. 2. Araujo A. Intraspecific variability of dihydrochalcone, chromenes and benzoic. Q. acid derivatives in leaves of Piper aduncum L. (Piperaceae). African Journal of. BI. O. Biotechnology Vol. 8 (10), 2157-2162, 18 May, 2009.. y flavonoides del. Y. 3. Bedascarrasbure E, Maldonado L. Contenido de fenoles. RM. PDF [en línea]. Disponible en:. AC. IA. propóleos argentino. Acta Farm. Bonaerense. Buenos Aires 2004. Soporte en. FA. http://www.latamjpharm.org/trabajos/23/3/LAJOP_23_3_2_2_5OA9K8V7K9.p. DE. df Fecha de acceso [21 de julio del 2009].. CA. 4. Díaz H, Heinzen H. Variaciones en el perfil de flavonoides y en la cantidad de. IO. TE. Quercetina libre en diferentes extractos de Achyrocline satureoides. Acta Farm.. en:. BI BL. Bonaerense 25 (4); 574-7. Uruguay 2006. Soporte: PDF [en línea]. Disponible. http://www.latamjpharm.org/trabajos/25/4/LAJOP_25_4_2_5_ITM8T7OZE4.pd f Fecha de acceso [15 de marzo del 2009]. 5. Flores E. Estudio Fitoquímico de catorce especies del Género Piper con actividad antifúngica y/o leishmanicida en vitro. Instituto de Investigación Fármaco Bioquímicas. Universidad mayor de San Andrés. Facultad de Ciencias. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Farmacéuticas y Bioquímicas. Bolivia. Diciembre, 2000. Soporte: PDF [en línea]. Disponible en: http://www.ops.org.bo/textocompleto/rnbiofa20000802.pdf Fecha de acceso [14 de Julio del 2009]. 6. Francis J. Piper aduncum L. bamboo piper. International Institute of Tropical Forestry. Puerto Rico 2003. . Soporte: PDF [en línea]. Disponible en:. IC A. http://www.fs.fed.us/global/iitf/pdf/Piper%20aduncum.pdf Fecha de acceso [12. UI M. de Marzo del 2009].. Q. 7. Galagosvky L. Química Orgánica, Fundamentos Teórico Prácticos para el. Y,. Miranda. M,. Varona. N... Validación. de. 2. métodos. Y. 8. Gutiérrez. BI. O. Laboratorio. 5º ed. Buenos Aires. Universitaria de Buenos Aires 2000; 39-51. de taninos. y flavonoides. AC. IA. espectrofotométricos para la cuantificación. RM. (Quercetina) en Psidium guajaba. Rev Cubana Farm/ Instituto de Farmacia y. DE. [en línea]. Disponible en:. FA. Alimentos Universidad de La Habana – Cuba. 2000; 34(1);50-5. Soporte: PDF. Fecha de. acceso [10. IO. TE. Abril del 2009].. CA. http://bvs.sld.cu/revistas/far/vol34_1_00/far07100.pdf. BI BL. 9. Kuklinski C. Farmacognosia. Barcelona. Omega. 2003; 53, 106, 234, 296. 10. Leps J. Piper aduncum.en Global Invasive Database. USA 2005. Soporte: HTML [en línea]. Disponible en: http://www.issg.org/database/species/ecology.asp?si=332&fr=1&sts=sss. Fecha. de acceso [13 de Marzo del 2009]. 11. Lock O. Investigación Fitoquímica. Métodos en el estudio de productos naturales. Lima. Pontificia Universidad Católica. 1988; 91-111, 206.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 12. Martínez S. Los flavonoides: propiedades y acciones antioxidantes. Nutrición Hospitalaria XVII vol. 6. Madrid 2002; 271-278. 13. Martínez J. Modificaciones del contenido en Quercetina en cebollas por acción de microondas. España. 2005. Vol. 21; 93-102. 14. McCabe W.: Operaciones Unitarias en Ingeniería Química. 4ta ed. Madrid. Mc Graw Hill. 1991; 890-920. IC A. 15. McMahon G.: Análisis Instrumental. 7ª ed. Londres. Wiley 2007; 18-55, 98.. UI M. 16. Meirelles M.; Rossi-Bergmann, B.: “Selective Effect of 2´,6´-Dihydroxy-4´-. Q. Methoxychalcone Isolated from Piper aduncum on Leishmania AmazonensisK”. BI. O. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. Brasil – 1999. Vol 43, Nº5; 1234–. Y. 1241.. AC. IA. 17. Mejía A. Matico; cicatrizante y contra males gastrointestinales. Lima. 2007.. RM. Soporte: HTML [en línea]. Disponible en:. FA. http://www.cronicaviva.com.pe/index.php?option=com_content&task=view&id. DE. =14852&Itemid=136 Fecha de acceso [10 de Marzo del 2009].. CA. 18. Miller J. Estadística y Quimiometría Para Química Analítica. 4ta ed. Madrid.. IO. TE. Pearson Educación S.A. 2002; 21-37,. BI BL. 19. Ministerio de Salud. Oficina General de Estadística e Informática. Jardín Botánico: Matico. Soporte: HTML [en línea]. Disponible en: http://www.minsa.gob.pe/portal/Especiales/2007/aniversario/jarbot2.asp. Fecha. de acceso [20 de Abril del 2009]. 20. Miranda M. Evaluación de la actividad antiinflamatoria de Piper elongatum (Matico) administrado por vía oral, comparado con Indometacina en cobayos. Universidad Mayor de San Marcos. Lima. 2001.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 21. Moreno C.; Plazas, C.: Validación de una metodología analítica para la cuantificación por HPLC de Quercetina en una matriz vegetal. Rev. Col. Cient. Quim. Farm. Colombia 2005. Vol. 34(1); 58-68. 22. Mostacero J.: Taxonomía de las Fanerogamas Útiles del Perú. vol. I. Trujillo. Normas Legales S.A.C. 2002; 232-34,744. 23. Pamo O. Farmacopea callaguaya. Boletín de la Sociedad Peruana de Medicina. IC A. Interna - Vol. 9 Nº 2. Lima. Universidad Peruana Cayetano Heredia. 1996.. UI M. 24. Rafaell M, Hereira-Rojas, W. “Potential control of Aedes aegypti (Diptera:. Q. Culicidae) with Piper aduncum L. (Piperaceae) extracts demonstrated by. BI. O. chromosomal biomarkers and toxic effects on interphase nuclei”. September –. Y. 2008. Genetics and Molecular Research 7 (3); 772-781.. Soporte: PDF [en. AC. IA. línea]. Disponible en:. FA. acceso [22 de Abril del 2009].. RM. http://www.funpecrp.com.br/gmr/year2008/vol7-3/pdf/gmr481.pdf Fecha de. DE. 25. Raintree nutricion. tropical plant database, “matico” (Piper aduncum). Brasil. CA. 2006. Soporte: HTML [en línea]. Disponible en:. IO. TE. http://www.rain-tree.com/matico.htm Fecha de acceso [13 de Marzo del 2008].. BI BL. 26. Rengifo R., Determinación de la actividad antibacteriana, in vitro de los extractos de hoja de Piper aduncum sobre Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes. Tesis para optar el grado de Maestro en Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional De Trujillo. Trujillo. 2009. 27. Rugna A, Efectos de la radiación solar sobre la producción de polifenoles en ejemplares femeninos de Similax Campestris Griseb. –Similacaceae-. Latín American Journal of Pharmacy. Lat. Am. J. Pharm. 26(3): 420-3 (2007).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 28. Skoog A.: Fundamentos de Química Analítica. 8ª ed. México. Thompson. 2005; 32-37, 781-784 29. Skoog Holler: Principios de Análisis Instrumental. 5ta ed. Madrid. Mc Graw Hill – Interamericana. 2001; 353-380. 30. Taylor L.: Technical Data Report for “matico” (Piper aduncum, angustifolium). Brasil – 2006. Soporte: PDF [en línea]. Disponible en:. IC A. http://www.rain-tree.com/reports/matico-tech-report.pdf Fecha de acceso [15 de. UI M. Marzo del 2009].. Q. 31. Technical Data Report for “matico” (Piper aduncum, angustifolium). Hartemink,. BI. O. A.: Leaf litter decomposition of Piper aduncum, Gliricidia sepium and Imperata. Y. cylindrica in the humid lowlands of Papua New Guinea. Plant & Soil.. AC. IA. 230(1):115-124, New Guinea, Marzo – 2001. Soporte: HTML [en línea].. RM. Disponible en:. FA. http://ovidsp.tx.ovid.com/spa/ovidweb.cgi Fecha de acceso [26 de Abril del. DE. 2009].. CA. 32. Zavala-Nigoa, J. “Evaluación Del Contenido Fenólico, Capacidad Antioxidante. IO. TE. Y Actividad Citotóxica Sobre Células CACO-2 Del Extracto Acuoso De. BI BL. Orégano (Lippia graveolens KUNTH)” 2° Congreso Nacional de Química Médica. México – 2006. Soporte: PDF [en línea]. Disponible en: http://exa.unne.edu.ar/revisfacena/tomos/21/08-Sgroppo%20et%20al%20%20Modificaciones%20del%20contenido%20en%20quercetina%20en%20cebo llas.pdf . Fecha de acceso [25 de Abril del 2009].. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. VIII.- ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº1 Cálculos para determinar la concentración de flavonoides totales en el extracto hidroalcohólico:. Peso del estándar: 0.0402g Potencia del estándar: 99.4%. 0.0402 1 × = 0.00000804 𝑔⁄𝑚𝐿 100 50. BI. O. Q. 𝐶𝑠𝑡 = 0.00804 𝑚𝑔⁄𝑚𝐿. UI M. 𝐶𝑆𝑇 =. IC A. Concentración del estándar de lectura:. IA AC. RM. Mp ------------------150 1------------------25. Y. Factor de dilución de la muestra: 3125. FA. M1: Absorbancia: 0.65697. Am  C ST  25  PST AR. DE TE. CA. X . BI BL. IO. X . 0.65697  0.00804  25  0.994 0.47488. X  0.2764mg / mL. M2: Absorbancia: 0.67235 X . 0.67235  0.00804  25  0.994 0.47488. X  0.2829mg / mL. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. M3: Absorbancia: 0.65431 X . 0.65431  0.00804  25  0.994 0.47488. X  0.2753mg / mL. 0.66188  0.00804  25  0.994 0.47488. UI M. X . IC A. M4: Absorbancia: 0.66188. IA. Y. BI. O. Q. X  0.2785mg / mL. RM. 0.68529  0.00804  25  0.994 0.47488. FA. X . AC. M5: Absorbancia: 0.68529. TE. CA. DE. X  0.2883mg / mL. BI BL. IO. M6: Absorbancia: 0.68366. X . 0.68366  0.00804  25  0.994 0.47488. X  0.2876mg / mL. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº 2 Tratamiento estadístico de los resultados para el contenido de flavonoides totales en el extracto hidroalcohólico Determinación de la Media “x”: Se utilizó la siguiente fórmula:. ∑𝑛𝑖=1 𝑥𝑖 𝑥̅ = 𝑛 Donde:. IC A. 𝑥̅ = Media. O. Q. 0.2764 + 0.2829 + 0.2753 + 0.2785 + 0.2883 + 0.2876 6. BI. 𝑋̅ =. UI M. 𝑛 = Número de determinaciones. IA. Y. 𝑋̅ = 0.2815mg/mL. AC. Determinación de la Desviación Estándar “S”:. FA. RM. Para hallarla se empleó la fórmula siguiente:. Cuadro Nº 7. Muestra 1 2 3 4 5 6. Xi. BI BL. IO. TE. CA. DE. ∑𝑛𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2 𝑆=√ 𝑛−1. 0.2764 0.2829 0.2753 0.2785 0.2883 0.2876. (X1 – X) -0.0051 0.0014 -0.0062 -0.0030 0.0068 0.0061 suma. (X1-X)2 0.000026 0.000002 0.000039 0.000009 0.000046 0.000038 0.00016. 0.00016 𝑆=√ 5. 𝑆 = 0.0056mg/mL. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Determinación del Coeficiente de Variación (CV): Para calcularlo se utilizó la fórmula descrita a continuación:. 𝐶𝑉 =. 𝑆 × 100 𝑥̅. Donde: S = Desviación Estándar 𝑥̅ = Media. IC A. 0.0056 × 100 0.2815. UI M. 𝐶𝑉 =. O. Q. 𝐶𝑉 = 2.0%. BI. Determinación de los Intervalos de Confianza de la Media:. Y. 𝑆 √𝑛. RM. AC. IA. 𝑥̅ ± 𝑡𝑡𝑎𝑏 ×. DE. 𝑥̅ = Media. FA. Donde:. 𝑡𝑡𝑎𝑏 = Valor de t tablas para un 95% de confianza y n-1 grados de. CA. libertad. TE. 𝑆 = Desviación Estándar. BI BL. IO. 𝑛 = Número de determinaciones. 0.2815 ± 2.57 ×. 0.0056 √6. (0.2815 ± 0.0058)𝑚𝑔/𝑚𝐿. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº 3 Cálculo para el Contenido de flavonoides Totales en la droga: Peso del estándar: 0.0402g Potencia del estándar: 99.4% Concentración del estándar de lectura:. 0.0402 1 × = 0.00000804 𝑔⁄𝑚𝐿 100 50. UI M. IC A. 𝐶𝑆𝑇 =. Q. Factor de dilución de la muestra: 3125. Y. BI. O. Mp ------------------150 1------------------25. RM. DE. 0.65697  0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. CA. X. Am  CST  FD  PST 100 AR xPM. FA. X. AC. IA. M1: Absorbancia: 0.65697. IO. TE. X  0.8292 g %. BI BL. M2: Absorbancia: 0.67235 X. 0.67235  0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. X  0.8486 g %. M3: Absorbancia: 0.65431 X. 0.65431 0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. X  0.8258 g %. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. M4: Absorbancia: 0.66188 X. 0.66188  0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. X  0.8354 g %. M5: Absorbancia: 0.68529. IC A. 0.68529  0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. UI M. X. BI. O. Q. X  0.8650 g %. IA. AC. 0.68366  0.00000804  3125  0.994 100 0.47488 x5. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. X  0.8629 g %. RM. X. Y. M6: Absorbancia: 0.68366. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº 4 Tratamiento estadístico de los resultados para el contenido de flavonoides totales en el extracto hidroalcohólico Determinación de la Media “x”: Se utilizó la siguiente fórmula:. ∑𝑛𝑖=1 𝑥𝑖 𝑥̅ = 𝑛. IC A. Donde:. UI M. 𝑥̅ = Media. O. Q. 𝑛 = Número de determinaciones. BI. 0.8292 + 0.8486 + 0.8258 + 0.8354 + 0.8650 + 0.8629 6. Y. 𝑋̅ =. AC. IA. 𝑋̅ = 0.8445g/100g de droga (g%). RM. Determinación de la Desviación Estándar “S”:. DE. FA. Para hallarla se empleó la fórmula siguiente:. BI BL. IO. TE. CA. ∑𝑛𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2 𝑆=√ 𝑛−1. Muestra 1 2 3 4 5 6. Cuadro Nº 8 Xi 0.8292 0.8486 0.8258 0.8354 0.8649 0.8628 Suma. 𝑆=√. (X1 – X) -0.0153 0.0041 -0.0187 -0.0091 0.0204 0.0183. (X1-X)2 0.0002 0.0000 0.0003 0.0001 0.0004 0.0003 0.0014. 0.0014 5. 𝑆 = 0.0167g. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Determinación del Coeficiente de Variación (CV): Para calcularlo se utilizó la fórmula descrita a continuación:. 𝐶𝑉 =. 𝑆 × 100 𝑥̅. Donde: S = Desviación Estándar 𝑥̅ = Media 0.0167 × 100 0.8445. IC A. 𝐶𝑉 =. UI M. 𝐶𝑉 = 2.0%. O. Q. Determinación de los Intervalos de Confianza de la Media:. BI. 𝑆. √𝑛. AC. IA. Y. 𝑥̅ ± 𝑡𝑡𝑎𝑏 ×. RM. Donde:. FA. 𝑥̅ = Media. DE. 𝑡𝑡𝑎𝑏 = Valor de t tablas para un 95% de confianza y n-1 grados de libertad. CA. 𝑆 = Desviación Estándar. BI BL. IO. TE. 𝑛 = Número de determinaciones 0.8445 ± 2.57 ×. 0.0167 √6. (0.8445 ± 0.0175)𝑔/%. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº 5. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Tabla de valores de la distribución “t”. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Anexo Nº 6. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Tabla de dilución de alcoholes. BI BL. IO. TE. CA. DE. Para preparar el alcohol de la concentración deseada se debe agregar a 100 mL de alcohol que se dispone la cantidad de agua que indica la tabla de dilución. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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