Efecto in vitro del zumo de vaccinium corymbosum l sobre escherichia coli

Texto completo

(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA. O. Q. UI. M. IC A. ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA. BI. EFECTO IN VITRO DEL ZUMO DE Vaccinium corymbosum L. SOBRE. AC I. A. Y. Escherichia coli. M. TESIS I. FA R. Autores:. CA. DE. ADRIANZEN RAMIREZ JILWER JOEL. BI. BL. IO TE. CHIROQUE SANCHEZ JAIME ANDREE Asesor:. Dr. Q.F. QUISPE DIAZ IVAN. TRUJILLO- PERU 2017. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACION. Señores Miembros del Jurado: Dando cumplimiento a las disposiciones establecidas en el reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a consideración y elevado criterio científico el. IC A. presente informe de trabajo de investigación:. M. “EFECTO IN VITRO DEL ZUMO DE Vaccinium corymbosum L. SOBRE. UI. Escherichia coli”. O. Q. Es propicia la oportunidad para manifestar mi sincero agradecimiento a los. BI. docentes de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, quienes en su labor de. A. Y. educadores nos han orientado durante mi formación profesional.. AC I. En consecuencia, Señores Miembros del Jurado sometemos el presente. M. trabajo para su respectiva evaluación y veredicto, esperando sea de interés y. CA. DE. FA R. gran utilidad para la facultad y la sociedad.. BI. BL. IO TE. Trujillo, enero de 2017. ____________________________. ______________________________. Adrianzén Ramírez, Jilwer Joel. Chiroque Sanchez, Jaime Andree. I Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO EVALUADOR. Dra. Mantilla Rodríguez Ana Elena. IC A. _________________. Y. BI. O. Q. UI. M. Presidente. FA R. M. AC I. A. Mg. Ybañez Julca Roberto Osmundo. DE. _________________. BI. BL. IO TE. CA. Miembro. Dr. Quispe Díaz Iván Miguel. _________________ Miembro. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. Para mis padres por su apoyo, consejos, comprensión, amor, ayuda en los momentos difíciles, y por ayudarme con los recursos necesarios para estudiar. Me han dado todo lo que soy como persona, mis valores, mis. IC A. principios, mi carácter, mi empeño, mi. UI. M. perseverancia para lograr mis sueños.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. ADRIANZEN RAMIREZ JILWER JOEL. Esta tesis se la dedico a Dios quién supo guiarme por el buen camino, darme fuerzas para seguir adelante y no desmayar en los problemas que se presentaban, enseñándome a encarar las adversidades. sin. perder. nunca. la. dignidad ni desfallecer en el intento. CHIROQUE SANCHEZ JAIME ANDRE. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. Queremos agradecer al Dr.. Iván. Miguel Quispe Díaz, por habernos permitido. trabajar. en. esta. investigación y guiarnos con sus conocimientos en el desarrollo de la. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. presente tesis.. Ibáñez. Julca,. Rodríguez,. por. Dra. los. Elena. Mantilla. conocimientos. impartidos durante la carrera profesional.. BI. BL. IO TE. CA. DE. A los miembros del jurado Dr. Roberto. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. INDICE. Página. i. IC A. RESUMEN. ii. O BI. OBJETIVOS. 1 7. MATERIAL Y METODO. IV.. RESULTADOS. FA R DE. 8 17 19 23. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. BL. VII.. CONCLUSIONES. CA. VI.. DISCUSIÒN. IO TE. V.. M. III.. AC I. A. II.. INTRODUCCIÒN. Y. I.. Q. UI. M. ABSTRAC. 29. BI. ANEXOS. 24. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto del zumo de Vaccinium corymbosum L. sobre el crecimiento in vitro de la cepa de Escherichia coli. La cepa empleada fue reactivada en caldo Müller Hinton y se incubó durante 18 horas a 37°C. Luego se tomó una asada de la bacteria y se ajustó con solución fisiológica al patrón de turbidez de Mac Farland N°0.5 (1.5x10 8 UFC/mL) para la realización del ensayo se procedió a determinar la concentración mínima. IC A. bactericida (CMB) y la concentración mínima inhibitoria (CMI). Los resultados. M. obtenidos muestran un efecto inhibitorio del zumo de Vaccinium corymbosum. UI. L. sobre Escherichia coli, por presentar una menor turbidez del medio que. O. Q. contuvo a Escherichia coli en 50uL al 100%v/v y para la concentración mínima. BI. bactericida (CMB) se pudo evidenciar que el zumo de Vaccinium corymbosum. Y. L. difunde sobre la cepa de Escherichia coli, a la concentración de 100% v/v,. AC I. A. evidenciándose un halo de 4 mm de diámetro.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. Palabras claves: Vaccinium corymbosum L., Escherichia coli.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT This study aimed to evaluate the effect of juice Vaccinium corymbosum L. on the in vitro growth of Escherichia coli strain. The strain used was reactivated in Müller Hinton broth and incubated for 18 hours at 37 ° C. Then a roast of the bacteria was taken and adjusted with saline solution turbidity standard Mac Farland No. 0.5 (1.5x108 CFU / mL) for the conduct of the trial proceeded to determine the minimum bactericidal concentration (MBC) and the concentration. IC A. minimal inhibitory (MIC). The results show an inhibitory effect of juice Vaccinium. M. corymbosum L. on Escherichia coli, have a lower turbidity medium containing. UI. Escherichia coli in 50uL 100% v / v for the minimum bactericidal concentration. O. Q. (MBC) was evident that the juice Vaccinium corymbosum L. spreads on the. BI. strain of Escherichia coli, at the concentration of 100% v / v, showing a halo of. A. Y. 4 mm in diameter.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. Key words: Vaccinium corymbosum L., Escherichia coli.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCION. Las infecciones urinarias (IU) se encuentran entre las enfermedades microbianas más prevalentes1.2. Se estima que globalmente ocurren al menos 150 millones de casos de infecciones al tracto urinario (ITU) por año 3. En los Estados Unidos, las IU son responsables de más de 7 millones de visitas médicas al año4. En torno al 15% de todos los antimicrobianos de prescripción comunitaria en los. IC A. Estados Unidos se dispensa por IU, con un coste anual calculado que supera los. M. 1 000 millones de dólares4. En el Perú se desconocen cifras exactas de su. Q. UI. incidencia.. O. Más de la mitad de todas las mujeres tiene al menos una ITU, durante su vida y. BI. su presentación más común es durante el embarazo. Afecta al 50% de las. A. Y. mujeres, siendo rara en los hombres de 20 a 50 años 2. En el adulto mayor, la. AC I. ITU, es la infección bacteriana más común.1. FA R. M. Las ITU, son clasificadas de diversas formas: alta o baja, aguda o crónica, no complicada o complicada, sintomática o asintomática, nueva o recurrente y 1. DE. comunitaria o nosocomial.. CA. En cuanto a su etiología, más del 95% son monomicrobianas, siendo. IO TE. Escherichia coli el microorganismo implicado con mayor frecuencia (70-80% de los casos). Menos frecuente puede aparecer Enterococcus faecalis, Proteus Staphylococcus. BL. mirabilis,. saprophyticus. (casi. exclusivo. de. mujer. BI. premenopáusica), Streptococcus agalactiae, Klebsiella pneumoniae y otros bacilos Gram negativos.. 2. En los últimos años se ha observado en muchos hospitales y clínicas privadas variaciones significativas en la susceptibilidad microbiana, observándose la aparición progresiva de resistencia a las cefalosporinas de primera, segunda y tercera generación, fluoroquinolonas y otros antimicrobianos comúnmente empleados en el tratamiento empírico de la ITU extra hospitalaria.. 3. 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La resistencia bacteriana en nuestro medio hospitalario peruano actualmente es un problema con una serie de bacterias, principalmente las Gram negativas. En un estudio previo, Escherichia coli tuvo una sensibilidad a ciprofloxacino en el 26% de los casos y a ceftriaxona en el 43%, por lo que los autores no recomiendan su uso como terapia empírica1. Del mismo modo se encontró una resistencia menor al 10% para amikacina.. 4. En pacientes con ITU complicada (malformaciones, cateterización, falla renal crónica, inmunosupresión, trasplante renal, hemodiálisis y diálisis peritoneal) e. IC A. ITU recurrente la resistencia antibacteriana a ampicilina fue 73%, ceftriaxona 11,8%, cefalexina 41,1%, ciprofloxacino 3,8%, gentamicina 43,2%, meropenem. UI. M. 2%, ácido nalidixico 29,3%, nitrofurantoína 13,3%, norfloxacino 11% y. O. Q. trimetoprima-sulfametoxazol 59,5%.5. BI. Las tasas de resistencia antibacteriana han sufrido importantes variaciones con. Y. los años, por lo que el tratamiento empírico de la ITU, requiere la constante. AC I. A. actualización de la sensibilidad antibiótica de las principales bacterias causantes de la zona, país o institución donde se trabajen, en particular de Escherichia. M. 6. FA R. coli, el principal uropatógeno.. DE. Aunque los antibióticos son casi siempre efectivos para eliminar la infección de la vejiga, el tratamiento con antibióticos no necesariamente previene infecciones. CA. recurrentes en la misma persona a menos de que se eliminen las bacterias. IO TE. contaminantes del colon y del tracto vaginal. La terapia profiláctica con. BI. con ITU. 1. BL. antibióticos puede ser utilizada también para prevenir recurrencias en mujeres. Las infecciones en pacientes hospitalizados son causadas mayoritariamente por bacterias multirresistentes a los antibacterianos adquiridos en el ambiente hospitalario. Las infecciones renales son más difíciles de tratar que las infecciones de la vejiga debido a que algunos antibióticos no llegan adecuadas concentraciones al tejido renal.. 7. El antibacteriano de mayor prescripción para la cistitis aguda es la nitrofurantoina por vía oral, o una combinación de sulfonamida-trimetoprim,. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. asimismo, se pueden utilizar amoxicilina, cefalexina o ciprofloxacina. Cada uno de estos regímenes curaba del 90 al 95% de cistitis agudas en mujeres, sin embargo, esto ha cambiado debido a las resistencias desarrolladas por las bacterias ante estos y otros antimicrobianos.. 7. La capacidad de Escherichia coli para adquirir genes de resistencia hace impredecible determinar su sensibilidad a diferentes antimicrobianos, por tal motivo es muy recomendable realizar antibiogramas. 7 Hoy en día la medicina natural tiene un auge sin precedentes en todo el mundo,. IC A. estos conocimientos populares, son fuentes de estudio en busca de nuevos. M. conocimientos y medicamentos más efectivos con menos efectos secundarios.. Q. UI. Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), el 80% de la población mundial 8,9. BI. O. recurre a la medicina natural para atender sus necesidades básicas de salud.. Y. En el Perú existen unas 20 000 especies de plantas a las que se les atribuyen. AC I. A. propiedades medicinales, de las cuales 1 109 son plantas medicinales nativas, 10. M. utilizadas por los grupos indígenas para cubrir sus necesidades de salud.. FA R. En la actualidad, los medicamentos modernos presentan con más frecuencia, una serie de contraindicaciones y efectos indeseables, lo que no sucedía al usar los. DE. remedios en su forma natural 2. Agregado a esto, gran parte de la población no. CA. pueden acceder a la medicina convencional.. En gran parte por sus costos. IO TE. elevados por lo que recurren a la compra de plantas medicinales. 11 Se han utilizado diversas técnicas microbiológicas para demostrar la actividad. BL. antimicrobiana de plantas frente a microorganismos patógenos para el hombre.. BI. Entre ellas la utilización de extractos, por ejemplo: decoctos e infusiones.. 12. Estos antimicrobianos de origen vegetal tienen un potencial terapéutico enorme. Son eficaces en el tratamiento de enfermedades infecciosas y al mismo tiempo pueden mitigar muchos de los efectos secundarios que se asocian a menudo con antimicrobianos sintéticos13. Se han realizado diversos estudios de los extractos de plantas sobre los efectos antimicrobianos de muchas bacterias.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En un reporte sobre la evaluación de la actividad antimicrobiana de extractos etanólicos y/o aceites esenciales de las especies vegetales, Hesperomeles ferruginea “pujin”,. Myrciantes rhopaloides “arrayán negro” y Passiflora. manicata “flor de la pasión” frente a microorganismos patógenos y fitopatógenos; al analizar los resultados de los diferentes ensayos señalaron que el extracto etanólico de Passiflora manicata presentó mayor actividad antimicrobiana. frente. a. Escherichia. Coli,. Candida. albicans. y. bacillus subtilis. 14. IC A. En otro estudio, donde se analiza los principios activos de especies mexicanas de Pimpinella anisum “anís” y evaluación de su actividad biológica sobre. UI. M. microorganismos patógenos, se reportó que la extracción metanólica de. Q. Pimpinella anisum, presenta una inhibición porcentual del 75 % sobre. BI. O. Escherichia coli a una concentración mínima inhibitoria (CMI) de 45.5 mg. 15 actividad antibacteriana in vitro del extracto. Y. En el siguiente estudio sobre la. AC I. A. etanólico de propolis de Apis mellífera en bacterias aisladas, de pacientes del centro referencial de la libertad, se reportó que el extracto posee buena. FA R. M. actividad antibacteriana contra Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomona aeruginosa y Serratia marcescens. En este estudio se. DE. evidenció que para el caso de la Escherichia coli, a una concentración de 23% 16. CA. presentó un efecto bactericida.. IO TE. El arándano o mora azul (Vaccinium corymbosum L.) es un frutal menor nacido nativo de Norteamérica, que pertenece a la familia de las Ericáceas, subfamilia. BI. frutillas. 17. BL. Vacciniaceae, subgénero Cynacoccus y es considerado dentro del grupo de las. Es un arbusto pequeño de 0.2 – 0.4 metros de altura, aunque existen variedades que llegan a medir 2.5 metros. Tanto los tallos como las hojas están cubiertas por un polvo blanquecino llamado pruina cenicienta, las hojas son persistentes, con espinas en el pecíolo y nervio medio, verde oscuro en el haz y blancuzco en el envés. Es un arbusto longevo, de hoja caduca y de madera leñosa. Las flores, miden de 2 – 3 cm de diámetro y son de color blanco o rosado. 17. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El fruto es una baya casi esférica, que dependiendo de la especie y cultivar puede variar en tamaño de 0,7-1,8 cm de diámetro y posee un color azul metálico18. En la base de la planta se encuentra la corona, de donde se forman los tallos, la cual está conformada por una gran cantidad de raíces superficiales. El sistema radicular es profundo, puede llegar a profundizar más de un metro dependiendo del suelo y el subsuelo.. 17. El arándano azul, es la cuarta frutilla de interés económico en el mundo, debido al contenido de antioxidantes y a la resistencia del cultivo a diversas condiciones. IC A. ambientales adversas. Sus propiedades antioxidantes se atribuyen al contenido. M. de flavonoides, antocianinas, polifenoles y ácido ascórbico. 19. UI. El jugo de arándano es una opción para prevenir la infección de vías urinarias,. O. Q. cualidad demostrada en diferentes publicaciones recientes, en las que se. BI. destaca que su mecanismo de acción radica en el efecto que ejercen las. Y. proantocianidinas, especialmente las de tipo A, en el urotelio, que evitan que. AC I. A. Escherichia coli se adhiera a éste; es así como ejerce su acción. M. antibacteriana20.. FA R. Experimentos in vitro han demostrado reducción de la adhesión de Escherichia coli a las células endoteliales cuando las bacterias son preincubadas con 5 a 75. DE. mg de proantocianidinas tipo A. También se ha demostrado in vitro que estas. CA. proantocianidinas modifican la superficie celular de las bacterias al capturar los. IO TE. lipopolisacáridos de la pared celular y modificar los patrones de unión a las. BL. células epiteliales. 20. BI. Las investigaciones recientes sugieren que el consumo de arándano previene la adhesión bacteriana de uropatógenos, especialmente Escherichia coli, que es la causante de 90% de las infecciones de vías urinarias. 20 Existe una creencia generalizada de que el jugo de arándano puede tratar las infecciones del tracto urinario. No hay evidencia concluyente de ya sea in vitro o en estudios in vivo para confirmar esto. Sin embargo, hay una fuerte evidencia in vitro e in vivo que confirma la hipótesis de que las infecciones urinarias se puede prevenir por la disminución de la adherencia bacteriana a las células uroepiteliales. 21. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El mecanismo beneficioso históricamente se creía que se debe a los ácidos de frutas que causan un efecto bacteriostático en la orina. Sin embargo, recientemente, investigadores reportan que los metabolitos que participan en la actividad antiadhesiva bacteriana contra cepas susceptibles y resistentes a los antimicrobianos de Escherichia coli; se debe a las proantocianidinas (PACs) tipo A.22 En el mundo, los principales países productores son Estados Unidos y Canadá. Perú se considera como una región no tradicional en la producción de arándanos. IC A. junto con otras regiones subtropicales como el norte de Argentina, Chile y España; En nuestro país la producción de arándanos se desarrollan en: Mala,. UI. M. Cañete, Arequipa, La Libertad, Caraz, Pisco, Cajamarca, Cusco y Lima. 23. O. Q. Cada día se hace más difícil el tratamiento antimicrobiano por la capacidad de. BI. dichos microorganismos de crear resistencia, tal fenómeno ha sido considerado. Y. emergente en todo el mundo, especialmente en los hospitales mostrando cifras. AC I. A. anuales en aumento del 25% en el manejo de pacientes.. M. Los fármacos disponibles actualmente, tienen una toxicidad importante,. FA R. producen recurrencia o causan resistencia, razón por la cual se está procurando descubrir nuevos agentes antimicrobianos más potentes, pero sobre todo. CA. DE. seguros.. Los consumos de frutas y/o zumo de Vaccinium corymbosum L. es de interés. IO TE. en este contexto porque comprenden alternativas más seguras y eficaces que. BL. los agentes antimicrobianos producidos sintéticamente, lo cual motiva a que. BI. estos compuestos naturales sirvan como base para el desarrollo de nuevos agentes antimicrobianos que sean más eficaces que los sintéticos. En base a los antecedentes se formula el siguiente problema: ¿Cuál es el efecto In Vitro del zumo de Vaccinium corymbosum L. sobre Escherichia coli? Postulándose la siguiente hipótesis. El zumo de Vaccinium corymbosum L. tiene efecto antibacteriano in vitro sobre Escherichia coli; debido a la presencia de antocianinas.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. OBJETIVOS. 2.1. Objetivo general: Evaluar el efecto In Vitro del zumo de Vaccinium corymbosum L. sobre Escherichia coli. IC A. 2.2. Objetivos específicos:. UI. M. Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) del zumo de Vaccinium. BI. O. Q. corymbosum L. sobre Escherichia coli.. A. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. corymbosum L. sobre Escherichia coli.. Y. Determinar la concentración mínima bactericida (CMB) del zumo de Vaccinium. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III.. MATERIAL Y MÉTODO. 3.1. MATERIAL. 3. 1.1. Material de estudio. IC A. 1.5 Kg de frutos de Vaccinium corymbosum L.. 3.1.2. Material de vidrio. M. Placas Petri 100x15mm. Q. UI. Frasco de vidrio ámbar con tapa de plástico de 100ml. A. Y. BI. O. Tubos de ensayo 150x15mm. AC I. 3.1.3. Equipos. M. Balanza triple brazo OHAUS 700/800 series Incubadora Memmert. FA R. Liofilizador LABCONCO 195 (A65412906). DE. Congeladora Coldex 271lt. IO TE. CA. Extractor de fruta Imaco.. BI. BL. 3.1.4. Reactivos. Tricloruro férrico al 3%, Sigma Ácido clorhídrico concentrado 37% de pureza Sigma Magnesio metálico Sigma Anhídrido acético 98% pureza Sigma Ácido Acético glacial 99.8% de pureza Sigma Ácido Sulfúrico 98% de pureza Sigma Acido benzoico 99.5% de pureza Sigma. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tolueno 99.5% de pureza Sigma Diclorometano 98% de pureza Sigma Hidróxido de sodio al 10% Sigma Metanol 99.5% pureza Sigma Etanol de 96°GL Alkofarma Agua destilada. M. IC A. Agua bidestilada Medifarma. Q. UI. 3.1.5. Material Microbiológico. AC I. 3.1.6. Material Farmacológico.. A. Y. BI. O. Escherichia coli ATCC 25992. M. Ciproquin (Ciprofloxacino) 200mg/100ml solución inyectable para. CA. 3.1.7 Medios de cultivo.. DE. FA R. inyección LT 2F51675 Claris Lifesciences Limited.. BI. BL. IO TE. Agar Müller Hinton LT 35124 Britania. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.. MÉTODOS. 3.2.1. Identificación taxonómica. La especie de Vaccinium fue llevada al Herbariun Trujillense. de la. Universidad Nacional de Trujillo, para su identificación taxonómica, esta fue determinada mediante el código 58493,. para su identificación se. registraron los siguientes datos; familia, nombre científico, hábito,. UI. M. IC A. procedencia y altitud.. O. Q. 3.2.2. Método farmacognóstico. BI. 3.2.2.1. Obtención de la muestra. Y. Los frutos maduros y frescos de Vaccinium corymbosum L. de entre 12 y. AC I. A. 15 mm de diámetro fueron obtenidos del valle de Virú (50 msnm), distrito de Virú provincia de Virú, departamento La Libertad, latitud sur 08°24' 34",. FA R. M. longitud oeste 78°45' 05" en el mes de abril, del 2016.. DE. 3.2.2.2. Preparación de la muestra. fueron lavadas con agua. CA. Las muestras Vaccinium corymbosum L.. destilada, se cortó por la mitad retirándose las pepas y se realizó cortes del. IO TE. pericarpio en rajas de 5 cm de largo y 0,5 cm de ancho. Las muestras fueron. BL. depositadas en bandejas de aluminio en finas capas y se congelaron a -. BI. 40°C durante 24 horas antes de su liofilización, a 0,026 bars y a -58°C durante 48 h. El Vaccinium corymbosum L. liofilizado se trituró para la obtención de un producto en polvo. La liofilización se realizó en la Escuela de Ingeniería Industrial, Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional de Trujillo.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.3. IDENTIFICACION DE METABOLITOS 3.2.3.1. MARCHA FITOQUÍMICA24. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Basada en la separación por disolventes de diferente polaridad y la identificación. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.3.1. 1. Extracto acuoso. 3.2.3.1. 1.1. Identificación de Flavonoides: Reacción de Shinoda: Se midió X gotas del zumo de Vaccinium corymbosum L., lo llevamos a sequedad, después se redisolvió en 1 ml de metanol y trasvasamos a un tubo de ensayo agregamos limadura de magnesio metálico más II gotas de HClcc. 3.2.3.1. 1.2. Identificación de Fenoles:. IC A. Reacción con Tricloruro férrico: Se midió X gotas del zumo de. M. Vaccinium corymbosum L., en un tubo de ensayo, luego lo llevamos a. UI. sequedad, después se redisolvió en 1ml de metanol y se añadió II gotas de. A. espuma: Se midió XX gotas del zumo de Vaccinium. AC I. Ensayo de. Y. 3.2.3.1. 1. 3. Identificación de Saponinas:. BI. O. Q. tricloruro férrico al 5% en etanol.. corymbosum L. Agitamos vigorosamente por 30 segundos y, esperamos. FA R. M. 15 en reposo.. DE. 3.2.3.1. 1. 4. Identificación de Antocianinas. CA. Ensayo de Rosenhein: Se midió XX gotas del extracto y lo llevamos a sequedad; se redisolvió el residuo en X gotas de solución de ácido. IO TE. clorhídrico 2N/1-propanolol, transvasamos a un tubo de ensayo y lo. BI. BL. llevamos a ebullición de 15-30 minutos en baño maría. 3.2.3.1. 2. Extracto diclorometánico. 3.2.3.1. 2.1. Identificación de Quinonas: Reacción de Borntranger: Se midió X gotas del zumo de Vaccinium corymbosum en una capsula, luego lo llevamos a sequedad y después se redisolvió en XX gotas de tolueno, transvasamos a un tubo de ensayo y agregamos XX gotas de NaOH 10%. Agitamos mezclando las fases y se dejó en reposo hasta su recuperación.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.4. MÉTODO ANTIBACTERIANO. 25. Se utilizó cultivos de Escherichia Coli, los cuales fueron reactivados inicialmente en agar Müller Hinton e incubadas a 37º C por 24 horas. Estos cultivos fueron proporcionados por el Centro Referencial de Salud-MinsaTrujillo. 3.2.4.1. DISTRIBUCIÒN DE LOS GRUPOS DE ESTUDIO.. IC A. Para determinar la concentración mínima bactericida (CMB), del zumo Vacciniun corymbosun L. se trabajó por triplicado, mediante el método. UI. M. de Agar en placa, a la concentración de 5%v/v, 25%v/v, 50%v/v y 100%v/v,. Q. utilizando agua bidestilada como solvente y blanco y, al. mínima. inhibitoria. BI. concentración. (CMI),. Y. La. O. como control.. al ciprofloxacino. del. zumo. Vacciniun. AC I. A. Corymbosun L. se trabajó por triplicado, mediante el método de dilución en. M. caldo Müller Hinton, a la concentración de 5%v/v, 25%v/v, 50%v/v y. FA R. 100%v/v, utilizando agua bidestilada como solvente y blanco y, al. DE. ciprofloxacino como control.. CA. 3.2.4.2. Preparación de ciprofloxacino.. IO TE. Se utilizó 200ul de ciprofloxacino, a la concentración de 2mg/ml como control positivo para determinar la concentración mínima bactericida y 10ul para la. BI. BL. concentración mínima inhibitoria a la misma concentración.. 3.2.4.3.. DETERMINACION. DE. LA. CONCENTRACION. MINIMA. BACTERICIDA (CMB). La concentración mínima bactericida (CMB). Es la menor concentración capaz de destruir o matar 105 bacterias en 1 ml de medio de cultivo, tras 18-24 horas de incubación.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.4.3.1. Método de difusión de agar en placa 3.2.4.3.1.1. Preparación de la muestra Para la preparación de la muestra se. pesó. 50 g de Vaccinium. corymbosum L. fresco, para posteriormente extraer el zumo (2-3 mL) por medio de un extractor de frutas. 3.2.4.3.1.2. Reactivación del cultivo La bacteria fue reactivada en caldo de Müller Hinton y se incubó durante 24. IC A. horas a 37°C. Luego se tomó una asada de la bacteria y se ajustó con. M. solución fisiológica al patrón turbidez de Mac Farland N°0.5 (1.5x10 8. O. Q. UI. UFC/mL).. Y. BI. 3.2.4.3.1.3. Sembrado. AC I. A. Se colocó en 6 placas petri, 20 mL de Agar Müller Hinton, luego se sembró Escherichia coli mediante siembra en superficie. Se tomó un hisopo y se. FA R. M. distribuyó uniformemente girando cada placa 30 grados por 10 veces aproximadamente. Sobre una de las placas sembradas se realizó 2. DE. perforaciones en las cuales se colocó. 200 µL del zumo Vaccinium. corymbosum L. a las diferentes concentraciones de 5% v/v, 25%v/v, 50%. CA. v/v y 100% v/v y en otra placa se realizó 2 perforaciones en las cuales se. IO TE. colocó como blanco 200µL de agua bidestilada y control al ciprofloxacino 200mg/100 mL en cada perforación. Luego las placas petri se incubaron a. BI. BL. 37°C por 24 horas.. Se determinó los diámetros de halo de inhibición del zumo de Vaccinium corymbosum L. a las concentraciones de 5% v/v, 25% v/v y 50%v/v frente a Escherichia coli. Finalmente, se midió el halo de inhibición utilizando una regla milimetrada.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.2.4.3.2. DETERMINACION DE LA CONCENTRACION MINIMA INHIBITORIA (CMI). La concentración mínima inhibitoria (CMI). Es la menor concentración de antibiótico capaz de inhibir el crecimiento de 105 bacterias en 1 ml de medio de cultivo, tras 18-24 horas de incubación. 3.2.4.3.2. Método de Dilución en caldo Muller Hinton 3.2.4.3.2. 1. Preparación de la muestra. IC A. A partir del zumo de Vaccinium corymbosum L. se prepararon diluciones a concentraciones de 10µL, 20 µL, 30 µL, 40 µL y 50 µL disueltos en agua. UI. M. bidestilada.. BI. O. Q. 3.2.4.3.2. 2. Reactivaciones de las cepas. Y. Las cepas de Escherichia coli fueron reactivadas en caldo Müller Hinton y. A. se incubó durante 18 horas a 37°C. Luego se tomó una asada de la bacteria. AC I. y se ajustó con solución fisiológica al patrón de turbidez de Mac Farland. FA R. M. N°0.5 (1.5x108 UFC/mL).. DE. 3.2.4.3.2. 3. Enfrentamiento con el microorganismo. CA. Se utilizaron tubos de ensayo, en los cuales se colocó 1mL de agar de Müller. IO TE. Hinton (AMH) y cuando el medio aún estuvo líquido se añadió 10 µL de cada una de las concentraciones de las diluciones del zumo. preparadas. BL. anteriormente, luego en cada tubo de ensayo se colocó 2 µL de la. BI. suspensión de la bacteria y se incubó a 37°C por 24 horas. Se empleó como control al ciprofloxacino 50µl a una concentración de 2mg/mL y se trabajó bajo las condiciones anteriormente descritas. Después de 24 horas de incubadas a 37°C, los tubos de ensayo se examinaron visualmente. Se consideró la concentración mínima inhibitoria a la menor concentración de la dilución del zumo a la cual el microorganismo ensayo no presentó desarrollo visible.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3.3.. LECTURA E INTERPRETACIÒN DE RESULTADOS. La lectura de los resultados del CMB se realizó en aquellas placas donde el antimicrobiano fue capaz de eliminar completamente el desarrollo bacteriano o que eliminó al 99,9% de bacterias, comparándolo con el control positivo. Para la lectura del CMI, se utilizó como criterio la turbidez, para esto se colocó cruces de acuerdo a la intensidad de turbidez en los diferentes tubos de ensayo, máximo de cruces fueron 3, este es que presenta mayor turbidez. IC A. y cero (0), al que presenta la CMI.. UI. M. La CMI fue interpretada como la concentración de antimicrobiano, contenida. Q. en el tubo de la serie que inhibió el crecimiento visible de la bacteria, para lo. BI. O. cual fue necesario comparar cada uno de los tubos con los controles positivo. EVALUACIÓN ESTADÍSTICA 26. M. 3.4.. AC I. A. Y. y negativo.. FA R. Se realizó la prueba estadística de ANOVA para hallar la diferencia significativa de la concentración de mínima bactericida a diferentes. BI. BL. IO TE. CA. DE. concentraciones del zumo de Vaccinium corymbosum L.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. RESULTADOS. Tabla 1. ANOVA de la concentración mínima bactericida del zumo de Vaccinium corymbosum L. frente a Escherichia coli.. Valor crítico para F 3,105875239. 17. Q. 70,11277778. AC I. A. Y. BI. O. Total. UI. M. IC A. Origen de Suma de Grados Promedio F Probabilidad las cuadrados de de los variaciones libertad cuadrados Entre 20,16944444 5 4,033888889 0,969231796 0,474148863 grupos Dentro de 49,94333333 12 4,161944444 los grupos. M DE. 40. 0. IO TE. 10. CA. 30 20. 45. FA R. 50. 2. 0. 4. 0. A. 1 B. C. D. Ciprofloxacino 2mg/ml. BI. BL. Diametro de Halos (mm). Concentraciòn Vs diámetro de los halos. A=5% de zumo de Vaccinium corymbosum L., B=25% de zumo de Vaccinium corymbosum L., C=50% de zumo de Vaccinium corymbosum L., D=100% de zumo de Vaccinium corymbosum L. Fuente: Investigadores Gràfico 1. Diámetro promedios de los halos de inhibición de crecimiento bacteriano de Escherichia coli por acción del zumo de Vaccinium corymbosum L. y Ciprofloxacino.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 2. Evaluación de la concentración mínima inhibitoria de Vaccinium corymbosum L., ciprofloxacino y agua bidestilada frente a Escherichia coli por dilución en agar. Número de muestra. Turbidez. Tubo 1. +++. Tubo 2. +++. Tubo 3. +++. Tubo 4. +++. 10 µl. 20 µl. IC A. Concentración. Tubo 5. M. Muestra. UI. Tubo 6. Tubo 8. BI. 30 µl. O. Vaccinium. Q. Tubo 7. Zumo de. corymbosum L.. A. Y. Tubo 9. +++ +++. Tubo 12. +++. Tubo 13. +. 50 µl. Tubo 14. +. Tubo 15. +. Tubo 16. 0. Tubo 17. 0. Tubo 18. 0. Tubo 19. +++. Tubo 20. +++. Tubo 21. +++. FA R DE. IO TE BL. 50µl. Agua bidestilada. +++. +++. BI. Ciprofloxacino 2mg/ml. +++. Tubo 11. M. 40 µl. +++. CA. AC I. Tubo 10. +++. 50µl. Fuente: Investigadores. Leyenda: 0: Sin turbidez. ++: Mediana turbidez. +: Menor turbidez. +++: Mayor turbidez. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. DISCUSION. En la Tabla 1, el análisis estadístico de ANOVA de los promedios de los halos de inhibición del zumo de Vaccinium corymbosum L. sobre Escherichia coli se determinó que el valor crítico es 3.1 se acepta la hipótesis nula (Ho: µ= µo con α = 0.05) con un nivel de confianza de 0.95 y se concluye que existe diferencia significativa entre las concentraciones evaluadas, y que la concentración al 100% es más eficiente en relación a las concentraciones de. IC A. 50%, 25% y 5%.. M. En la Gráfico 1, se observa que el zumo de Vaccinium corymbosum L. a la. UI. concentración de 100%v/v, presentó efecto mínima bactericida (4mm) sobre las proantocianidinas. presentes. en. BI. concentración. O. Q. cepas de Escherichia coli. Su efecto mínima bactericida se debe a una menor el. zumo. Vaccinium. Y. corymbosum L., estos metabolitos se encuentran en mayor proporción en su. AC I. Las. A. piel.24. proantocianidinas, son compuestos fenólicos. FA R. M. expresión de las fimbrias P de Escherichia coli. estables que bloquean la . Estudios realizados en la. 22. Universidad estatal de New Jersey, USA; determinaron. que la actividad. DE. antibacteriana de proantocianidinas incluye, la posible inhibición de las enzimas. CA. bacterianas extracelulares, la privación de los sustratos necesarios para el. IO TE. crecimiento bacteriano o la acción directa sobre su metabolismo mediante la. BL. inhibición de la fosforilación oxidativa. el. misma Gráfico 1, se observa que el zumo de Vaccinium. BI. Asimismo en. 25. corymbosum L. a la concentración de 25%v/v, no presentó efecto bactericida sobre las cepas de Escherichia coli concentración de proantocinidinas. A este porcentaje no hay suficiente. que alcancen el sitio de activo o bien, la. estructura de las porinas impida el paso del principio activo al interior de la célula bacteriana. 25 En una revisión sistemática de ensayos clínicos aleatorizados de la base de Cochrane, que incluyó a 24 estudios con un total de 4473, reportó en 14 estudios que el zumo de Vaccinium corymbosum L.,. es poco eficaz. frente a. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Escherichia coli aunque en algunos de los estudios demostraron un pequeño beneficio para las mujeres con infecciones urinarias recurrentes, pero no hubo diferencias estadísticamente significativas cuando se incluyeron los resultados de un estudio mucho más grande.. 26. Según el estudio realizado en la Universidad de Cartagena, Colombia; demuestra que el criprofloxacino presenta actividad bactericida en un 63,9% sobre las cepas de Escherichia coli. . En otro estudio realizado en la. 28. Universidad Privada Cayetano Heredia, Perú; demuestra que estas bacterias . Por. 29. IC A. Gram negativas, presentaban sensibilidad a ciprofloxacino en un 44,5%. otro lado, en el estudio realizado en la Universidad de Salamanca, España;. UI. M. determinaron que las cepas Escherichia coli eran susceptibles a ciprofloxacino. O. Q. en 77,2%. 30. BI. En el Gráfico 1, se observa que el zumo de Vaccinium corymbosum L. a la. Y. concentración de 5%v/v y 50%v/v, en la primera observamos que las cepas de. AC I. A. Escherichia coli, no presentaron sensibilidad. En la segunda concentración. M. dichas cepas presentaron efecto mínima bactericida (2mm).. FA R. La explicación de esto, responde a que las cepas de Echerichia coli, bacteria Gram negativa, presenta dos membranas lipídicas una interna y otra externa,. DE. entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglucano. La membrana. CA. externa protege a las bacterias de varios antibióticos, colorantes y detergentes. IO TE. que normalmente dañarían la membrana interna o la pared celular de peptidoglucano, por esto. se necesita una mayor concentración de. BI. cepa. 30. BL. proantocianidinas en el zumo de Vaccinium corymbosum L. para inhibir dicha. En la Tabla 2, se observa que en el tubo de ensayo que contenía 50uL de zumo de Vaccinium corymbosum L. al 100%v/v, se evidenció un mayor efecto inhibitorio (CMI) por presentar una menor turbidez del medio que contenía la cepa de Escherichia coli. En la Tabla 2, se observa que en el tubo de ensayo que contenía 40 uL de zumo de Vaccinium corymbosun al 100%v/v, se pudo evidenciar un menor efecto. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. inhibitorio (CMI) por presentar una mayor turbidez del medio que contenía la cepa de Escherichia coli. En la Tabla 2, se observa que en los tubos de ensayo que contenía 30 uL y 20uL respectivamente del zumo de Vaccinium corymbosun L. al 100%v/v, se pudo evidenciar que no presentó efecto inhibitorio (CMI) alguno, por presentar una mayor turbidez del medio que contenía a la cepa Escherichia coli. Estudios revelaron que de 240-300 mL de zumo de Vaccinium corymbosun L. podría prevenir la recurrencia de ITU, lo que sugiere que una dosis de <240 mL/. IC A. día no proporcionó protección suficiente. La ingesta de zumo Vaccinium. M. corymbosun L. inhibe la adherencia de cepas independientemente de si. UI. producen P-fimbrias y fimbrias tipo 1, así como tanto resistente a los antibióticos. BI. O. Q. y las cepas susceptibles31.. Y. Durante el paso inicial en el desarrollo de una infección urinaria, Escherichia. A. Coli produce fimbrias-pelo así sobresalen de la superficie bacteriana. Estas. AC I. fimbrias llevan adhesinas que se unen a receptores en las células. FA R. M. uroepiteliales31.. El zumo de Vaccinium corymbosun L. contiene las proantocianidinas, que Escherichia coli. DE. inhiben las cepas de. adhesinas y muestran una fuerte. CA. actividad inhibidora frente a fimbrias-P. El índice de adherencia (es decir, el número de bacterias adheridas a cada celda) representa la actividad de una. IO TE. fracción oligomérica de las proantocianidinas pertenezcan al tipo A, lo que. BL. sugiere que el zumo de Vaccinium corymbosun L. afecta a varios fimbrias, pero. BI. particularmente P-fimbrias. Los presentes resultados confirman la existencia de un efecto dependiente de la dosis sobre la adherencia in-vitro de Escherichia Coli a las células epiteliales de la vejiga.31 Al ser dosis dependiente, cuando se aumentó el volumen, se evidencio un mayor efecto inhibitorio, esto nos hace inferir que si aumentáramos el volumen el efecto podría ser mejor, también se debe tener en cuenta que el tiempo de tratamiento es importante para producir el efecto antibacteriano y como profilaxis para tratar problemas de ITU recurrentes.. 31. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Según el estudio del Grupo Cochrane de Riñón Registro Especializado, sugiere que zumo de Vaccinium corymbosun L. es menos eficaz para la prevención de ITU recurrente, Aunque algunos estudios pequeños han demostrado un beneficio menor para las mujeres con IU recurrentes, hubo diferencias estadísticamente significativas en los resultados,. el zumo. 26. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. corymbosun L. no se recomienda para la prevención de la ITU.. de Vaccinium. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. CONCLUSIONES. Se determinó que la concentración de 50uL al 100%v/v del zumo de Vaccinium corymbosum L. sobre Escherichia coli, fue el que presentó mayor efecto inhibitorio. Se determinó que el zumo de Vaccinium corymbosum L. tiene efecto mínima. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. bactericida sobre Escherichia coli, a la concentración 100%v/v.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Echevarría J.; Sarmiento E.; Osores F. Infección del tracto urinario y manejo antibiótico. Acta Med Per. 23(1) 2006. 2. INFAC. Información Farmacoterapéutica de la Comarca. Infección Urinaria. en. el. adulto:. Actualización.. 19. LIBURUKIA.. 9. Zk.. 2011.VOLUMEN 19 .Nº 9. 2011. España: INFAC, 2011 [Citado 27 enero de. 2015].. Disponible. en:. http://www.osakidetza.euskadi.eus/contenidos/informacion/cevime_infac/. IC A. eu_miez/adjuntos/Infac_v19_n9.pdf. M. 3. Polanco F.; Loza R.; Resistencia antibiótica en infecciones urinarias en. UI. niños atendidos en una institución privada, periodo 2007 – 2011. Rev Med. O. Q. Hered. 2013; 24:210-216.. BI. 4. Gonzales C.; Jaulis J.; Tapia E.; Sensibilidad antibiótica de bacterias. Y. causantes de infecciones del tracto urinario en un hospital general: Enero-. AC I. A. junio 2008. Rev Med Hered. 2009; 20 (1) 11-15. 5. Younis N.; Al-Momani T.; Al-Awaished F. Antibiotic resistance in children 2009; 48 (173): 14-9.. FA R. M. with recurrent or complicated urinary tract infection. J Nepal Med Assoc.. DE. 6. Ignacio J. Epidemiología y etiología de la infección urinaria comunitaria en. CA. adultos. sensibilidad antimicrobiana de los principales uropatógenos y. IO TE. significado clínico de la resistencia. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2005;23(Supl.4): 3-8 [Citado. 29. marzo. de. 2015].. Disponible. en:. BI. Coli.. BL. 7. Molina J.; Manjarrez A. UNAM: Infecciones de vías Urinarias- Escherichia http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/enferme dades-vias-urinarias.html 8. Vásquez L. Potencial agroindustrial de 50 plantas medicinales nativas del norte peruano. 2010. [Citado 29 marzo de 2015].. Disponible en:. http://www.elcientifico.com/inicio/_C3VTDDatmVHPhVuTbS8mfIWvMdV y8C3gBzaCX9iFkgA.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 9. Stapelfeld A. Plantas Medicinales. 2011. [Citado 29 marzo de 2015]. Disponible. en:. http://www.yinyangperu.com/la_biblia_de_las_plantas_medicinales.htm. 10. MINSA: Ministerio de Salud. Uso y consumo de algunas plantas medicinales puede provocar daños a la salud. 2011. [Citado 26 marzo de 2015]. Disponible en: http://isagsunasul.org/site/2011/09/espanolperuminsa-advierte-que-uso-y-consumo-dealgunas-plantas-medicinalespuedeprovocar-danos-a-la-salud/?lang=es. 11. Calderón J.; Torres E. Efecto del extracto acuoso de la Ocimum. IC A. basilicnum l. (albahaca) en el crecimiento bacteriano de Escherichia coli. Volumen 10, número 2. Perú. 2014.. M. Revista ECIPerú. Narendra C. Antibacterial. UI. 12. Roopashree T.; Raman D.; Shobha R.;. O. Q. activity of antipsoriatic herbs: Cassia tora, Momordica charantia and. BI. Calendula officinalis. International Journal of Applied Research in Natural. Y. Products Vol. 1(3). India. 2008. pp.: 20-28. Medicinal. Plants: Ocimum. AC I. A. 13. Bishnu J.; Lekhak S.; Anuja S. Antibacterial Property of Different sanctum,. Cinnamomum. zeylanicum,. FA R. M. Xanthoxylum armatum and Origanum majorana. Kathmandu University Journal of Science, Engineering and Technology Vol. 5 (I). Nepal.. DE. 2009. pp.: 143- 150.. CA. 14. Lizcano A.; Vergara J. Evaluación de la actividad antimicrobiana de los. IO TE. extractos etanólicos y/o aceites esenciales de las especies vegetales Valeriana, Hesperomeles ferruginea, Myrciantes rhopaloides y Passiflora. BL. manicata frente a microorganismos patógenos y fitopatógenos. Pontificia. BI. Universidad Javariana. Facultad de ciencias. Microbiología Industrial. Colombia. 2008. [Tesis] 15. Quiñones Y. Análisis de los principios activos de especies mexicanas de anís. y evaluación de su actividad biológica sobre microorganismos. patógenos, Universidad Autónoma de Nuevo León Facultad de Ciencias Biológicas. México. 2012.[Tesis] 16. Roncal R., Torres C.; Carlos Ar; et al. Actividad antibacteriana in vitro del extracto etanólico de propolis de apis mellífera en bacterias aisladas, de pacientes del centro referencial de la libertad, julio –. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. agosto 2013. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Universidad Nacional de Trujillo. Perú 2013. [Tesis] 17. Victoriano H. Organogénesis in vitro de arándano Vaccinium Corymbosum L.". centro interdisciplinario de investigación para el desarrollo integral regional CIIDIR- Michoacán. Instituto Politécnico Nacional. 2010 [tesis]. 18. Contreras M. Efecto de la aplicacion de cppu sobre calidad de fruta en arándano alto (Vaccinium corymbosum L.) cultivar elliott. universidad de la frontera facultad de ciencias agropecuarias y forestales, Chile. 2010. [Tesis] 19. Gallardo A. Uso de luz UV-C en la calidad del arándano azul (Vaccinium. IC A. ashei Reade). Institución de Enseñanza e Investigación en Ciencias. M. Agrícolas. Colegios de Postgraduados. Montecillo, Texcoco, Estado de. UI. México. 2013. [Tesis]. O. Q. 20. Neri E.; Celis C.; León S.; et al. El jugo de arándano y su papel en las. BI. infecciones de las vías urinarias. Ginecol Obstet Mex 2009; 77(11):512-. Y. 517.. AC I. A. 21. Vincent S.; Lowe F. Cranberry juice for the prevention and treatment of urinary tract infections. Drugs of Today 2007;43(1):47-54.. FA R. M. 22. Howell A. Bioactive compounds in cranberries and their role in prevention of urinary tract infections. Mol Nutr Food 2007;51:625-31.. DE. 23. Asociación Regional de Exportadores de Lambayeque. Sierra exportadora:. CA. Perfil Comercial: arándano deshidratado. Perú. 2013. [ Citado 15 de enero 2015].. Disponible. en:. IO TE. del. http://www.sierraexportadora.gob.pe/perfil_comercial/PERFIL%20COMER. BL. CIAL%20ARANDANOS.pdf. BI. 24. Burdulis D.; Jasutien I.; Stackevinciene E. Et Al. Comparative study of anthocyanin composition, antimicrobial and antioxidant activity in bilberry (vaccinium myrtillus l.) and blueberry (vaccinium corymbosum l.) fruits. Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug Research, Vol. 66 No. 4 pp. 399-408, 2009. 25. Howell A.;. Reedb J.; Kruegerb C, et al.. A-type cranberry. proanthocyanidins and uropathogenic bacterial anti-adhesion activity. Phytochemistry Volume 66, Issue 18, September 2005, Pages 2281–2291 Tannins and Related Polyphenols (Part 2). Fecha de acceso [07 oct. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2015].. Disponible. en:http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0031942205002499 26. Jepson R.; Williams G.; Craig J. Arándanos para prevenir las infecciones del tracto urinario. Base de Datos Cochrane Syst Rev. 2012 17 de octubre; 10:. CD001321.. Fecha. de. acceso. [07. oct. 2015].. Disponible. enhttp://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/14651858.CD001321.pub5/f ull [Metaánalisis] 27. Medscape. Ciprofloxacino. Fecha de acceso [15 oct 2015]. Disponible en http://reference.medscape.com/drug/cipro-xr-ciprofloxacin-342530#10 J.. susceptibilidad. de. escherichia. coli. a. IC A. 28. Coronado. trimetropin. M. sulfametoxazol y ciprofloxacino en pacientes con infección de vías. UI. urinarias en cartagena de indias 2005-2007. Asociación Colombiana de. O. Q. Nefrología e Hipertensión. Vol.1 Núm. 4. 2009. Fecha de acceso [10 oct. BI. 2015]. Disponible en. Y. http://www.revistanefrologia.org/index.php/rcn/article/viewFile/3/3. AC I. A. 29. Gonzales D.; Solórzano J.; Tapia E, et all. . Sensibilidad antibiótica de bacterias causantes de infecciones del tracto urinario en un hospital acceso. FA R. M. general. Enero – junio 2008. Rev Med Hered 20 (1), 2012. Fecha de [07. oct. 2015].. Disponible. en:. DE. http://alicia.concytec.gob.pe/vufind/Record/UPCH_3e095241976010a20. CA. 39c358f4976f9b3/Details. IO TE. 30. Andreua A.; Ignacio J.; Gobernadoc M, et all. Etiología y sensibilidad a los antimicrobianos de los uropatógenos causantes de la infección urinaria. BL. baja adquirida en la comunidad. Estudio nacional multicéntrico.. BI. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Vol 23, Issue 1, January 2005, pp: 4–9. Fecha de acceso [08 oct 2015]. Disponible en http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0213005X05748928 31. Lavigne J.; Bourg G.; et all. In-vitro e in-vivo evidencia de disminución dependiente de la dosis de uropathogenic Escherichia coli virulencia después del consumo de comercial Vaccinium macrocarpon (arándano) cápsulas. Vol 14, No 4 pp: 350-355, 2008. Fecha de acceso [16 oct 2015]. Disponible. en:. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. http://www.clinicalmicrobiologyandinfection.com/article/S1198743X(14)62807-X/fulltext 32. Boncún B.; Zari G.; Ruiz S.; Soto M.; et al. Guía dePracticas de. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Farmacognosia II. Multicopias. 2014.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXOS. TABLA 1. Identificación cualitativa de los fitoconstituyentes del extracto acuoso del fruto liofilizado de Vacciniun corymbosum L.. PRUEBA. COLORACION PRECIPITADO. Espuma. -. -. Flavonoides. Shinoda. Rojo. -. Antocianinas. Rosenhein. Marrón. Positivo (+++). -. Positivo (+++). BI. O. Verde oscuro. férrico. Positivo (+++). -. UI Q. Tricloruro. Fenoles. RESUTADO Negativo (-). M. Saponinas. IC A. REACCION/. METABOLITO. FA R. M. AC I. A. Y. Fuente: Investigadores.. TABLA 2. Identificación cualitativa de los fitoconstituyentes del extracto acuoso. CA. DE. del fruto liofilizado de Vacciniun corymbosum L.. IO TE. REACCION/ PRUEBA. BL. METABOLITO. Bortranger. -. -. Negativo (-). BI. Quinonas. COLORACION PRECIPITADO RESUTADO. Fuente: Investigadores.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN MÍNIMA BACTERICIDA (CMB). FIGURA1: Determinación de la concentración mínima bactericida de cepas de Echerichia coli. frente al Ciprofloxacino como patrón y agua como. CA. BL. IO TE. FIGURA 1. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. blanco.. BI. Se observa que el ciprofloxacino a la concentración de 2mg/ml (200ul), presentó efecto bactericida (50mm) sobre las cepas de Escherichia coli y no se observó efecto alguno con el blanco (agua). 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FIGURA 2: Determinación de la concentración mínima bactericida (CMB) de Cepas de Echerichia coli frente al zumo de Vaccinium corymbosum L. a la. BL. IO TE. CA. FIGURA 2. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. concentración de 100%v/v y al 25% v/v.. BI. Se puede evidenciar que el zumo de Vaccinium corymbosum L. difunde sobre las cepas de Escherichia coli, a la concentración de 25% v/v no se evidencio efecto bactericida pero a la concentración de 100% v/v se pudo evidenciar un halo de 4 mm de diámetro.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FIGURA 3: Determinación de la concentración mínima bactericida de cepas de Echerichia coli. frente al zumo de Vaccinium corymbosum L. a la. CA. BL. IO TE. FIGURA 3. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. concentración de 50%v/v y al 5% v/v. BI. Se puede evidenciar que el zumo de Vaccinium corymbosum L. difunde sobre las cepas de Escherichia coli, a la concentración de 5% v/v no se evidencio efecto bactericida pero a la concentración de 50% v/v se pudo evidenciar un halo de 2 mm de diámetro.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA (CMI) FIGURA 4: Determinación de la concentración mínima inhibitoria de. caldo. Müller Hinton con cepas de Echerichia coli frente a 50uL de zumo de. FIGURA 4. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Vaccinium corymbosum L. a la concentración de 100%v/v. Mayor efecto inhibitorio (CMI) del zumo de Vaccinium corymbosum L. por presentar una menor turbidez del medio que contenía la cepa de Escherichia coli.. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FIGURA 5: Determinación de la concentración mínima inhibitoria de Müller Hinton con cepas de Echerichia coli. frente a 40uL de. caldo. zumo de. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Vaccinium corymbosum L. a la concentración de 100%v/v. BI. BL. IO TE. FIGURA 5. Menor efecto inhibitorio (CMI) del zumo de Vaccinium corymbosum por presentar una mayor turbidez del medio que contenía la cepa de Escherichia coli.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FIGURA 6: Determinación de la concentración mínima inhibitoria de Müller Hinton con cepas de Echerichia coli. frente a 30uL de. caldo. zumo de. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Vaccinium corymbosum L. a la concentración de 100%v/v. IO TE. CA. FIGURA 6. BL. Efecto inhibitorio mínimo (CMI) del zumo de Vaccinium corymbosum por coli.. BI. presentar una mayor turbidez del medio que contenía la cepa de Escherichia. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. FIGURA 7: Determinación de la concentración mínima inhibitoria de Müller Hinton. Caldo. con cepas de Echerichia coli frente a 20uL de zumo de. IO TE. CA. FIGURA 7. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Vaccinium corymbosum L. a la concentración de 100%v/v. BL. No se presencia efecto inhibitorio (CMI) del zumo de Vaccinium corymbosum. BI. L. sobre la cepa de Escherichia coli por presentar un alto grado de turbidez del medio que contiene la cepa de Escherichia coli.. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. MARCHA FITOQUÍMICA DE VACCINIUM CORYMBOSUM L. Flavonoides: Shinoda. Q. UI. M. IC A. Ensayo: (+) Color: rojo. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Saponinas: Ensayo de la espuma. IO TE. CA. Ensayo: (-) No se formó espuma.. BI. BL. Quinonas: Borntrager: Extracción diclorometánico.. Ensayo: (-) No se evidencio el color rojo. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Fenoles: Tricloruro Férrico. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Ensayo: (+++) Color: Verde oscuro. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Antocianinas: Rosenhein. BI. BL. IO TE. Ensayo: (+++) Color: Rojo. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Comparación de antocianidinas presentes en el fruto sin piel, y en la piel de Vaccinium corymbosum L. “Arándano azul”. IC A. Bilberry (Vaccinium Corymbosum). BI. O. Q. UI. M. Figura 1. Total antocyanins content in bilberry and blueberry cultivarse, Berry and Berry skins. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. Tabla 1. Antocyanins content in bilberry and blueberry cultivars berry skins. BI. BL. Tabla 2. Antocyanins content in bilberry and blueberry cultivars berry. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Obtención del zumo de Vaccinium Corymbosum L.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Muestras de Vaccinium corymbosum L. aptas para realizar el trabajo de investigación. Extracción del zumo de Vaccinium corymbosum. Zumo de Vaccinium corymbosum al 25%v/v 50%v/v y 100%v/v. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Patrón: Ciproquin (Ciprofloxacino). BI. O. Q. UI. M. IC A. Materiales y equipos microbiológicos. Placas petri. Mechero de alcohol. M. AC I. A. Y. Asa bacteriológica. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. Estandarización de la cepa aislada de Eschericia coli Escala de Mc Farland 0.5. Ajuste con solución fisiológica al patrón turbidez de Mac Farland N°0.5 (1.5x108 UFC/mL). 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Prueba de la Acción antibacteriana del zumo de Vaccinium corymbosum L. “arándano azul”. O. Q. UI. M. IC A. Sembrado.. AC I. A. Y. BI. Asada de Echerichia coli. Concentración mínima bactericida (CMB). IO TE. Enfrentamiento.. CA. DE. FA R. M. Concentración mínima inhibitoria (CMI). BI. BL. Enfrentamiento del zumo de Vaccinium corymbosum L. frente a Echerichia coli, para determinar la CMI. Enfrentamiento del zumo de Vaccinium corymbosum L. frente a Echerichia coli, para determinar la CMB. Extracción de ul de zumo de Vaccinium corymbosum L.. 42 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Incubación.. AC I. A. Incubación de las placas petri (CMB) y tubos de ensayo (CMI) se incubaron a 37°C por 24 horas.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. Lectura de las medidas de los halos de inhibición y de la turbidez de las cepas. Lectura de la capacidad antibacteriana (CMB) de Zumo de Vaccinium corymbosum L. Halos de inhibición. Lectura de la capacidad antibacteriana (CMI) de Zumo de Vaccinium corymbosum L. Turbidez. 43 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. Lectura de la capacidad antibacteriana (CMB y CMI) de Zumo de Vaccinium Corymbosum L.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. Liofilización de Vaccinium corymbosum L. “Arándano azul”. Liofilizando el Vaccnium corymbosum L.. 44 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(53) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. O. Q. UI. M. IC A. Conservación de Vaccinium corymbosum L. liofilizado.. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. Conservando el liofilizado de Vaccnium corymbosum L. en bolsas de polietlieno.. 45 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(54) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL. IO TE. CA. DE. FA R. M. AC I. A. Y. BI. O. Q. UI. M. IC A. Identificación taxonómica de la planta de Vacciniun corymbosum L. en el herbario truxillenses de la universidad nacional de Trujillo.. 46 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(55)