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Comparación Del Efecto In Vitro Del Extracto Etanólico De Propóleo Contra La Triclosán Sobre El Crecimiento De Streptococcus Mutans

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Academic year: 2020

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(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. FO R. MA TI. CA. ESCUELA DE ESTOMATOLOGÍA. MA S. E. IN. “COMPARACIÓN DEL EFECTO in vitro DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE PROPÓLEO CONTRA EL TRICLOSÁN SOBRE EL CRECIMIENTO DE Streptococcus mutans”.. TE. TESIS. PARA OPTAR EL GRADO DE. DE. SI S. BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA AUTOR. OF. IC. IN. A. ESTHER SOFÍA EGOAVIL-CUEVA GIL.. ASESOR. DR. GUSTAVO GUARDIA MÉNDEZ. CO-ASESOR DRA. ELVA MEJIA DELGADO. TRUJILLO – PERÚ 2011. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DEDICATORIA. A Dios, Padre Celestial, por su inmenso amor, por esta vida llena de. CA. bendiciones y también de dificultades, por permitirme progresar y así ganarme. E. IN. FO R. MA TI. una morada eterna junto a Él.. MA S. A mi familia Mery, César e Isaac, por todo el amor y paciencia que. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. han sabido brindarme, a ellos motor y motivo de mi vida.. A todos mis amigos, familiares y profesores que han ayudado en mi formación profesional y como ser humano.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. AGRADECIMIENTOS. A mis asesores el Dr. Gustavo Guardia Méndez, y la Dra. Elva Mejía. CA. Delgado. MA TI. Por compartir sus conocimientos, consejos, alegrías y por ayudarme en. IN. FO R. la realización de esta investigación.. E. A todas aquellas personas que contribuyeron desinteresada y. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. cordialmente con la elaboración de esta investigación.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESUMEN. investigación de tipo experimental “in vitro”, fue. CA. El propósito de esta. evaluar comparativamente el efecto antibacteriano del extracto etanólico. MA TI. de propóleo y el triclosán a diferentes concentraciones, sobre el. FO R. crecimiento de Streptococcus mutans.. Este estudio se realizo utilizando 3 concentraciones del extracto etanólico. IN. de propóleo (15%, 30 y ,60% ), frente a 3 concentraciones de triclosán. E. (0.03%, 0.12% y 0.48%) las cuales fueron puestas en contacto con el. MA S. microorganismo de estudio y mediante el método de halos de inhibición. TE. se pudo determinar el efecto en el crecimiento de este, a las 24 horas.. SI S. Los resultados indicaron que la actividad antibacteriana de ambos tratamientos sobre S. mutans es similar, entre las concentraciones de. DE. 15% y 30 % de el extracto etanólico de propóleo comparado con 0.12% extracto etanólico de propóleo. A. de triclosán, así como 60% de el. OF. IC. IN. comparado con 0.12% de triclosán.. Palabras Claves: PRÓPOLIS, triclosán, Streptococcus mutans, inhibición bacteriana.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ABSTRACT. The purpose of this experimental study was evaluated by comparing the. CA. inhibitory effect of the ethanol extract of propolis vs. triclosan trying with. MA TI. different concentrations, on the growth of Streptococcus mutans. FO R. This study was conducted using three different concentrations of propolis ethanolic extract (15%, 30 y ,60%) vs. three concentrations of triclosan. IN. (0.03%, 0.12% y 0.48%), which were put in contact with the organism of. MA S. on the growth of this at 24 hours.. E. study using inhibition halos technique so could be determined the effect. TE. The results indicated that antibacterial activity of both treatments on the. SI S. growth of S. mutans was similar using concentrations of 15% y 30 % of ethanol extract of propolis and 0.12% of triclosan, as well as 60 % of. IN. A. DE. ethanol extract of propolis and 0.12% of triclosan.. IC. Keywords:. PROPOLIS, triclosán, Streptococcus mutans, bacterial. OF. inhibition.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ÍNDICE. CA. DEDICATORIA. MA TI. AGRADECIMIENTOS. FO R. RESUMEN. INTRODUCCION. E. I.. IN. ABSTRACT. Pág. 1 11. III. RESULTADOS. 19. SI S. V. CONCLUSIONES. TE. IV. DISCUSIÓN. MA S. II. MATERIAL Y MÉTODOS. 27 31 32. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 33. A. DE. VI. RECOMENDACIONES. OF. IC. IN. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCION. CA. La cavidad oral es una de las regiones del cuerpo humano que posee la. MA TI. flora microbiana más variada y compleja, esto es debido a las condiciones peculiares de nutrientes, pH y humedad, a diferentes ambientes fisioquímicos y nutricionales, como la mucosa del carrillo, la lengua, las. FO R. hendiduras gingivales y la superficie de los dientes, que favorecen la. IN. adherencia y el crecimiento de tipos selectos de microorganismos1,2.. E. El problema que ha concitado mayor interés entre los procesos. MA S. presuntamente originados por los microorganismos presentes en la boca, por su constante frecuencia, es el de la caries dental. La caries dental es. TE. una enfermedad degenerativa que destruye los dientes en forma. aquella. que. afecta. a. toda. la. raza. humana,. niveles. DE. humana,. SI S. progresiva y localizada. Es la enfermedad más prevalente en la raza. socioeconómicos, culturales, religiosos y se presenta en niños, adultos,. IC. IN. A. hombres y mujeres.3. OF. Actualmente se acepta la caries como una enfermedad infecciosa y transmisible, que puede asociarse a serias consecuencias tanto locales como sistémicas. Se inicia por la acción de ácidos orgánicos como el láctico, elaborados por microorganismos de placa bacteriana, los que desmineralizan la superficie del diente. Para que se produzcan estos. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. mecanismos, el primer paso esencial es el de la formación de la “placa dental”, sobre la superficie lisa del esmalte. Se designa con el nombre de “placas” a los depósitos gelatinosos de polisacáridos de estructura de. CA. glucano, a los cuales se adhieren bacterias productoras de ácido. Estos. MA TI. glucanos o polímeros de carbohidratos son producidos sobre todo por estreptococos. De aquí que se hubiera establecido una estrecha relación. FO R. entre la presencia de las caries y la actividad del Streptococcus mutans4.. IN. Como S. mutans es el principal agente etiológico productor de caries en. E. humanos, su elevado número en saliva, constituye un riesgo cariogénico5.. MA S. Como ya se señaló el microorganismo cariogénico más importante es el S. mutans, este microorganismo actúa en gran parte por las enzimas que. TE. elabora, siendo las glucosiltransferasas las más importantes y con las. SI S. cuales pueden sintetizar gran cantidad de polisacáridos extracelulares a. DE. partir de sacarosa, proveniente de la dieta, que actúan como adhesivos. A. extracelulares para unirlos entre sí y el diente.6,7. IN. Se considera que S. mutans es sensible a varios agentes antibacterianos. OF. IC. utilizados en colutorios orales, sobre todo a clorhexidina y triclosán. Su empleo preventivo en el tratamiento de pacientes con alto número de S.. mutans, determina que el nivel de S. mutans y caries decrezca6.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. El triclosán es utilizado en productos de cuidado de la piel, como jabones, desodorantes y cremas. En odontología, se utilizó por primera vez en una. Es. un. derivado. fenólico,. el. 2,4,4,. MA TI. ingrediente activo de muchos productos de higiene oral.8. CA. pasta de dientes Europea en 1985, hoy en día el triclosán es el. tricloro-2-hidroxidifenil. éter,. antimicrobiano de amplio espectro, ofrece excelente estabilidad química. FO R. en fórmulas compatibles. Poco soluble en agua, lo es en ácidos grasos,. IN. atraviesa fácilmente las membranas. El mecanismo de acción del triclosán es por disrupción de la membrana bacteriana a través del bloqueo de la. E. síntesis de lípidos. El triclosán bloquea el sitio activo de una enzima. MA S. llamada proteína reductasa transportadora de enoil-acil, proveniente de los ácidos grasos de la bacteria, necesarios para la construcción de la. triclosán. ha. demostrado. particular. actividad. contra. bacterias. DE. El. SI S. TE. membrana celular y de otras funciones vitales9.. grampositivas, tiene buena actividad contra bacterias gramnegativas y. A. bacterias multirresistentes, Entre sus propiedades, el triclosán tiene. IN. rapidez de acción, excelente persistencia (4 horas) y actividad acumulada. OF. IC. contra microorganismos residentes y transitorios. Su eficacia es inhibida mínimamente por la presencia de materia orgánica, y tiene gran afinidad con la piel.. Las concentraciones de uso son de 0,3% al 2%.. Concentraciones inferiores tienen cuestionada eficacia. Debe estar formulado con detergentes aniónicos y pH ácido a neutro.10,11. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Tiene un espectro de actividad antibacteriana in vitro parecido a la clorhexidina, razón por la cual se están investigando resultados in vivo a. CA. largo plazo, que son de gran interés por su efecto antiplaca, actividad. MA TI. antiinflamatoria específica, fácil formulación de dentríficos, colutorios orales por su naturaleza no iónica27.. FO R. Sin embargo existen estudios que demostraron que el uso continuo del. IN. triclosán puede producir efectos adversos en la salud, entre varios; alteraciones en el funcionamiento de hormonas importantes tales como. MA S. E. las tiroideas.9,12. Debido a esto es que se ha desplegado un gran interés de parte de los. TE. investigadores por estudiar sustancias naturales que posean algunas. SI S. propiedades farmacológicas con efecto antimicrobiano. La medicina. DE. alternativa presenta a la Odontología, entre otros, al propóleo como. A. solución a diversos problemas de salud oral14.. IN. El propoleo (o própolis) es un producto apícola que las abejas recolectan. OF. IC. de las resinas y secreciones de las yemas de álamo, abedul, roble, castaño silvestre y otros árboles. Debido a su contenido en aceites esenciales, el propóleo suele ser aromático y en función de su origen botánico y de la época de recolección, es de color amarillo claro a castaño. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. oscuro, con un sabor amargo, ligeramente picante o insípido y consistencia más o menos sólida15. El término propóleo proviene del griego “pro'` entrada y “polis" ciudad -. CA. entrada de la colmena-. En la antigüedad se usaba como remedio para. MA TI. disminuir el dolor nervioso, sanar las úlceras y en los abscesos difíciles de curar16.. En los siglos XVIII y XIX, fue muy utilizado en Francia para el tratamiento. FO R. de las heridas. A comienzos del siglo XX, en África del Sur era el. IN. tratamiento de elección para las heridas de guerra. El extracto de propóleo fue utilizado entonces a grandes dimensiones por sus. E. propiedades desinfectantes y cicatrizantes con excelentes resultados17.. MA S. Una de las propiedades más importantes del propóleo es su actividad antibacteriana, Dobrowolski y colaboradores mencionan algunos de sus. TE. efectos como: actividad antiinflamatoria, bacteriostática, bactericida,. DE. SI S. cicatrizante, analgésica y anestésica18.. El propóleo es muy bien tolerado y su uso continuado no produce ningún. A. efecto secundario relevante. Es prácticamente insoluble en agua, pero. IN. soluble en alcohol, razón por la cual la mayoría de las aplicaciones se. OF. IC. realizan a través de extractos etanólicos18.. Algunas de sus propiedades son muy conocidas y están bien documentadas19 Entre sus principales efectos cabe destacar:. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. . Efecto bacteriostático y bactericida sobre un importante número de bacterias de los géneros Streptococcus, Staphilococcus, Salmonera, Lactobacillus. Proteus o la Escherichia coli. Por otra parte, el extracto del. CA. propóleo aumenta la eficacia de algunos antibióticos potenciando su. MA TI. efecto. Asimismo, algunos estudios ponen de manifiesto una gran susceptibilidad de ciertos patógenos a la acción del própolis14. Efectos. antifúngico,. antiviral,. antinflamantario,. analgésico,. FO R. . IN. cicatrizante, estimulando y favoreciendo la regeneración tisular14.. Presenta una consistencia variable, según su origen y temperatura. Hasta. MA S. E. los 15°C es duro y se torna más maleable a medida que aumenta la temperatura. Su color también es variable, dependiendo del origen. TE. vegetal, de amarillo claro a marrón oscuro, pasando por una gran cantidad de tonos castaños. Su olor también es muy variable,. SI S. generalmente es agradable, y en algunos casos recuerda a su origen. DE. vegetal, mientras que en otros casos posee olor predominante a cera.20. A. Básicamente se compone de un 50-55% de resinas y bálsamos, 30-40%. IC. IN. de cera de abeja, 5-10% de aceites esenciales o volátiles, 5% de polen y. OF. 5% de materiales diversos (orgánicos y minerales). Se han identificado más de 160 compuestos, de los cuales un 50% son fenólicos, a los cuales se les atribuye acción farmacológica. Los principales son; flavonoides, ácidos aromáticos y sus ésteres, aldehídos aromáticos (vainillina e isovainillina), cumarinas, triglicéridos fenólicos20,21. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Levy sugiere que el mecanismo de la actividad antimicrobiana del propóleo es complejo y puede ser atribuido al sinergismo entre algunos de sus compuestos, tales como flavonoides, ácidos aromáticos, ácidos. MA TI. su composición, principalmente a los flavonoides22. CA. grasos, ésteres, hidroxiácidos y otros compuestos fenólicos presentes en. Los flavonoides son compuestos fenólicos de origen estrictamente. FO R. vegetal. Se encuentran presentes en los todos vegetales en forma de. IN. heteróxidos (glucósidos). 23. Los compuestos fenólicos están formados por un anillo aromático unido. E. por lo menos a un grupo oxhidrilo. Dicha composición les proporciona. MA S. propiedades bactericidas , fungicidas y antivirales24,25 Respecto a su acción bactericida y bacteriostática, el própolis es. TE. notablemente más eficaz sobre bacterias grampositivas que sobre las. SI S. gramnegativas. Varios autores han demostrado la actividad antibacterial. DE. del propóleo contra Enterococcus sp, Escherichia coli y, especialmente, contra Staphylococcus aureus26. A. Otros estudios también evaluaron la acción antibacteriana del extracto. IN. etanólico del propóleo demostrando su eficaz actividad contra S.. OF. IC. mutans.14,17,18,26. Según Hyun Koo y colaboradores, el propóleo inhibe la unión de este microorganismo a la superficie del esmalte, actuando sobre la enzima. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. glucosiltransferasa que ha sido reconocida como un factor de virulencia en la patogenicidad de la caries dental17.. CA. Por otra parte algunos estudios demostraron que el propóleo tiene un. MA TI. mayor efecto inhibitorio que otros antibacterianos como la clorhexidina.14. Debido a los anterior mencionado hay estudios que demuestran que el. FO R. triclosán podría causar tensiones resistentes de bacterias además de. IN. efectos adversos para la salud, el hecho es que aún no se ha encontrado un agente ideal que permita lograr estos objetivos sin causar efectos. E. secundarios tanto a nivel local como sistémico, por eso se. hace. MA S. necesario un tratamiento de fácil implementación y de amplio espectro, es aquí donde el estudio de productos antibacterianos presentes en el. TE. propóleo puede jugar un rol fundamental en el tratamiento preventivo de. SI S. la caries dental, considerando el hecho de que la utilización de un. DE. producto natural sería beneficioso para la salud dental sin producir efectos. A. tóxicos.. IN. Ante la conveniencia de uso de productos de higiene bucal y la variedad. OF. IC. que de éstos son comercializados, se cree necesario comprobar su verdadera eficacia sobre el S.mutans, que es el principal patógeno de la caries dental.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Con el presente estudio se ofrecen datos concretos sobre la eficacia de componentes activos de estos productos como el triclosán y productos de origen natural como el propóleo, datos que se obtuvieron a partir de. CA. pruebas microbiológicas en el laboratorio, en las que se determinó por sobre el. MA TI. comparación qué tanta inhibición o destrucción causó. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. crecimiento de S. mutans.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.1 PROBLEMA. ¿Cuál es el efecto del extracto etanólico de propóleo y triclosán sobre el. MA TI. CA. crecimiento de S. mutans.?. FO R. 1.2 HIPÓTESIS. 1.3 OBJETIVOS. Evaluar comparativamente los resultados del extracto etanólico de. SI S. . TE. 1.3.1 Objetivo General. MA S. E. triclosán frente a S. mutans, in vitro.. IN. El extracto de propóleo presenta un efecto inhibitorio semejante al. A. DE. propóleo y el triclosán sobre el crecimiento de S. mutans.. OF. IC. IN. 1.3.2 Objetivos Específicos. . Determinar el efecto antibacteriano del extracto etanólico de propóleo a diferentes concentraciones.. . Determinar el efecto antibacteriano del triclosán a diferentes concentraciones.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II. MATERIAL Y MÉTODOS. 2.1 TIPO Y ÁREA DE ESTUDIO. CA. El presente trabajo de investigación corresponde al tipo experimental. MA TI. “in vitro”, el cual se desarrolló en el Laboratorio del Departamento de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional. FO R. de Trujillo. 2.2 MUESTRA. IN. El cálculo para el número de ensayos se determinó mediante la. MA S. E. fórmula:. TE. (Zα/2 + Zβ)2 2PQ n=. SI S. ( p1- p2)2. DE. Donde:. IN. A. Zα/2 = 1.96 para un α = 0.05. IC. Zβ = 0.84 para un β = 0.20. OF. PQ = 0.8 (p1-p2) / donde 0.8 es valor asumido x no haber estudios. previos.. Lo cual dio como resultado diez, que es el número mínimo de repeticiones por intervención.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 10 colocándole extracto etanólico de propóleo al 60%.. 10 colocándole extracto etanólico de propóleo 15%.. MA TI. 10 colocándole triclosán al 0.03%.. CA. 10 colocándole extracto etanólico de propóleo 30%.. FO R. 10 colocándole triclosán al 0.12%.. MA S. 2.3 TÉCNICA Y PROCEDIMIENTO. E. IN. 10 colocándole triclosán al 0.48%.. TE. 2.3.1 PREPARACION DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE PROPÓLEO. SI S. Para el presente estudio se utilizó. propóleo procedente de la. región de la región Lambayeque obtenido. por. el. centro de. DE. apicultura “Happy Bee” de la ciudad de Trujillo, con la ayuda de un la recolección de este recurso. A. especialista con experiencia en. IC. IN. natural de dicho Centro de Apicultura.. OF. Se preparó 3 concentraciones del extracto etanólico, al 15% ,30% y 60% por maceración durante 7 días a 37ºC en estufa; luego se filtró varias veces con papel filtro whatman número 40 y se obtuvo la solución etanólica del propóleo.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Luego fue sometido a una estufa a 50ºC para extraer el etanol, luego de este proceso, quedando residuos de etanol dentro del extracto el cual tuvo que ser eliminado totalmente.. CA. Cada una de ellas se almacenó en frascos de color ámbar. MA TI. debidamente rotulados, que inmediatamente fueron esterilizadas en autoclave por 15 minutos 121ºC a 15 libras de presión para su. IN. FO R. posterior experimentación.. E. 2.3.2 PREPARACION DEL TRICLOSÁN. MA S. Se obtuvo triclosán de calidad bucal de la escuela de Ingeniería Química de la Universidad Nacional de Trujillo, y se prepararon las. DE. SI S. alcohol de 70º.. TE. concentraciones al 0.03%,0.12% y 0.48% de triclosán diluido en. IN. A. 2.3.3 OBTENCIÓN DE LA CEPA.. IC. La cepa ATCC 2652263 de Streptococcus mutans fue obtenida. OF. del cepario del Laboratorio del Departamento de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.3.4 PREPARACIÓN DE LA CEPA. Una vez obtenida las cepas, éstas fueron cultivadas en tubos de ensayo con tapa rosca conteniendo el medio Soya tripticasa,. CA. incubándose a 37 °C con el fin de obtener colonias jóvenes. Luego. MA TI. de 24 horas de cultivadas se les agregó solución salina estéril, obteniéndose una turbidez semejante al tubo número 1 de la escala. FO R. de Mac Farland.. IN. Los tubos que contenían la bacteria estudiada, fueron girados entre las manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado,. SI S. 2.3.5 SEMBRADO.. TE. MA S. E. para distribuir los microorganismos adecuadamente.. Con un hisopo estéril, el cual fue embebido en el tubo de la cepa. DE. de cada bacteria y a una distancia de 10 cm de la llama del. A. mechero, se hizo el sembrado en placas petri, conteniendo Agar. IN. Sangre, hisopando uniformemente sobre toda la superficie del agar. IC. y girando cada placa 30 grados por 10 veces aproximadamente.. OF. Las placas recién sembradas fueron colocadas dentro de una estufa a 37 ºC de temperatura durante 10 minutos.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.3.6 DETERMINACION DEL EFECTO ANTIBACTERIANO (PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD). Para la prueba de susceptibilidad, se prepararon 3 diluciones a las. CA. concentraciones de 15%, 30%, y 60% v/v. de extracto etanólico de. MA TI. propóleo., y 3 diluciones de triclosán al 0.03%, 0.12% y 0.48% p/v Para la prueba de susceptibilidad se utilizó el método de Difusión. fueron. sumergidos. dentro. de. cada. una. de. las. IN. cuales. FO R. en Discos. Se prepararon discos de papel de filtro estériles, los. concentraciones tanto del propóleo como del triclosán, luego con. E. una aguja estéril estos fueron colocados sobre los cultivos de. MA S. Streptococcus mutans en placas petri previamente preparadas.. TE. Posteriormente las placas se incubaron a 37°C en microaerobiosis. SI S. utilizando la Jarra Gas-Pack (con el método de la vela, mediante el cual se obtuvo un ambiente aproximado de 5 a 10 % de CO2). Todo. DE. el procedimiento se llevó a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de. A. la llama de un mechero.. IC. IN. La siembra del microorganismo fue para cada una de las seis del. extracto etanólico de propóleo y. OF. concentraciones en total, triclosán.. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas. Se midieron los halos de inhibición (susceptibilidad) de cada una de las concentraciones,. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. incluyendo el área del disco de papel de filtro, con una regla milimetrada.. MA TI. 2.4 INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS. CA. .. Para el presente estudio se elaboró una ficha de recolección de datos.. FO R. (Anexo 1 y 2). E. IN. 2.5 OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES. Indicador. MA S. Variable. Tipo. Ordinal. SI S. TE. Extracto etanólico de Concentraciones Cualitativa propóleo al: 15%, 30%, y. Escala. Concentraciones al 0.03%, 0.12% Cualitativa. Ordinal. y 0.48%. IC. IN. A. Triclosán. DE. 60% v/v.. OF. Inhibición. crecimiento. de. colonias. del. Medición. de. las. halos. de Cuantitativa. de. inhibición.. De razón. Streptococcus mutans. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.6 DEFINICIÓN DE VARIABLES. CA. 2.6.1 Variable Independiente:. MA TI. Extracto etanólico de propóleo. Extracto con olor característico, obtenido a partir de materia prima desecada del propóleo, por maceración en contacto con etanol,. FO R. seguida de la eliminación de dicho solvente por un procedimiento. IN. físico.. E. Triclosán. MA S. Agente antibacteriano que en condiciones normales se trata de un. SI S. TE. sólido incoloro con un ligero olor a fenol.. DE. 2.6.2 Variable Dependiente:. A. Inhibición del crecimiento de las colonias de Streptococcus. IC. IN. mutans.. OF. Efecto de inhibir El crecimiento de S. mutans por la acción del. extracto etanólico de propóleo y triclosán, el cual es medido por medio del método de halos de inhibición.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.7. ANALISIS. ESTADISTICO. Y. INTERPRETACION. DE. LA. INFORMACION. CA. Con la información recolectada se construyó una base de datos que. MA TI. fue procesado de manera automatizada con el soporte del paquete estadístico SPSS - 15.0, para luego presentar los resultados en tablas estadísticas de acuerdo a los objetivos propuestos.. FO R. Para analizar la información se construyeron cuadros de distribución de frecuencias de una entrada con sus valores absolutos y relativos.. IN. Para determinar el efecto del extracto etanólico de propóleo respecto. E. al triclosán para cada una de las concentraciones se empleó la. MA S. prueba de análisis de varianza de un diseño completamente aleatorizado la prueba F y la prueba de Duncan para las. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. comparaciones múltiples con un nivel de significancia de 5%.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III. RESULTADOS. En el presente estudio de tipo experimental “in vitro”, cuyo propósito fue. CA. evaluar comparativamente el efecto antibacteriano del extracto etanólico. crecimiento de Streptococcus mutans.,. MA TI. de propóleo y el triclosán a diferentes concentraciones, sobre el dichas concentraciones fueron. FO R. (15%, 30%, y 60%) de extracto etanólico de propóleo y (0.03%, 0.12%, y. IN. 0.48%) de triclosán, se hallaron los siguientes resultados:. E. Con respecto al promedio de medición del diámetro de inhibición, las. MA S. concentraciones de extracto etanólico de propóleo al 15% con diámetro de 8 mm, al 30% con 8 mm y al 60% presentó el valor de 8.9 mm.. TE. Las concentraciones de triclosán al 0.03% presentó un diámetro de 6.8. SI S. mm, al 0.12% de 8.3 mm y al 0.48% de 10.6 mm, presentando esta última concentración mayor efecto contra S. mutans que las demás.. OF. IC. IN. A. DE. (Anexos 1 y 2). 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 1. Análisis de Varianza para Diámetro del Halo de Inhibición como. CA. indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a. SC. gl. CM. F. P. Concentraciones. 5.400. 2. IN. 13.500. 0.000. Error. 5.400. 27. Total. 10.800. E. 2.700 0.200. MA S. FV. FO R. MA TI. cada concentración de extracto etanólico de propóleo.. TE. 29. DE. SI S. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. Según el análisis de varianzas hay una diferencia altamente significativa. IN. A. del diámetro del halo de inhibición entre las concentraciones de 15% y. OF. IC. 30% con respecto a la de 60% de extracto etanólico de propóleo.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 2. CA. Prueba de Duncan para el Diámetro del Halo de Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a. Concentraciones extracto etanólico de propóleo.. IN. FO R. MA TI. cada concentración de extracto etanólico de propóleo.. Grupos alfa = 0.05. E. ni. 30%. 8.00. 10. 8.00. 10. 8.90. SI S. 60%. 10. TE. 15%. 2. MA S. 1. A. DE. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IC. IN. Según la prueba de Duncan no hay diferencia significativa entre las. OF. concentraciones del 15% y 30%, pero éstas si difieren significativamente con la concentración del 60% como se puede observar en la tabla y gráfico correspondientes. ( VER TABLA 2 Y GRÁFICO 1). 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 3. CA. Análisis de Varianza para Diámetro del Halo de Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a. CM. F. P. Concentraciones 73.267. 2. 33.990. 0.000. Error. 29.100. 27. IN. FO R. gl. Total. 102.367. 36.633 1.078. E. SC. MA S. FV. MA TI. cada concentración de triclosán.. TE. 29. SI S. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. DE. Según el análisis de varianzas hay una diferencia altamente significativa. A. del diámetro del halo de inhibición entre las diferentes concentraciones de. OF. IC. IN. Triclosán.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 4. Prueba de Duncan para el Diámetro del Halo de Inhibición como. CA. indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a. Grupos alfa = 0.05. de Triclosán 1. 0.12%. 10. 0.48%. 10. 6.80. MA S. 10. 2. 3. 8.3 0. 10.60. SI S. TE. 0.03%. IN. Ni. E. Concentración. FO R. MA TI. cada concentración de triclosán.. DE. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IN. A. Según la prueba de Duncan se observa que hay diferencia significativa. IC. entre la concentración del 0.03% con respecto a las de 0.12% y 0.48%, y. OF. de la concentración 0.12% con respecto a la de 0.48%, lo que se observa en el gráfico y tabla correspondiente. (TABLA 4 Y GRÁFICO 2). 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. TABLA 5. MA TI. Análisis de Varianza para Diámetro del Halo de Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans en función. FO R. de tres concentraciones de extracto etanólico de propóleo (15% y 30% y 60 %) y tres concentraciones de Triclosán (0.03%, 0.12% y. SC. gl. MA S. FV. E. IN. 0.48%). CM. F. P. 24.960. 0.000. 73.733. 5. 15.947. Error. 34.500. 54. 0.639. Total. 102.367. 59. DE. SI S. TE. Tratamientos. OF. IC. IN. A. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. Según el análisis de varianzas hay una diferencia significativa entre las diferentes concentraciones de ambos tratamientos.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 6. CA. Prueba de Duncan para Diámetro del Halo de Inhibición como. MA TI. indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans en función de tres concentraciones de extracto etanólico de propóleo (15% y. FO R. 30% y 60 %) y tres concentraciones de Triclosán (0.03%, 0.12% y. 3 0.05. 4. MA S. E. 1 Grupos alfa 2 = 6.80 8.00 8.00 8.30. 8.30 8.90. TE. Ni 10 10 10 10 10 10. 10.60. SI S. Tratamientos 0.03% 15% 30% 0.12% 60% 0.48%. IN. 0.48%). A. DE. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. IN. Según la prueba de Duncan, como se observa en la tabla y gráfico. IC. correspondientes (TABLA 6 Y GRÁFICO 3), no hay diferencia. OF. significativa para las concentraciones de 15%, 30% del extracto etanólico de propóleo y 0.12% de Triclosán. De igual manera entre la concentración del 0.12% de triclosán con respecto a la de 60% del extracto etanólico de propóleo, no hay diferencia significativa (grupos estadísticamente homogéneos).. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Sin embargo si existe diferencia significativa entre el 0.03% de triclosán con respecto a las concentraciones de extracto etanólico de propóleo. CA. (15%, 30% y 60%), así como también hay una diferencia altamente. MA TI. significativa entre el 0.48% de triclosán con respecto a todas las concentraciones de extracto etanólico de propóleo (15%, 30% y 60%).. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. (TABLA 6 Y GRÁFICO 3). 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV. DISCUSIÓN. La presente investigación experimental in vitro evaluó la actividad. CA. antibacteriana de las concentraciones de extracto etanólico de propóleo. MA TI. (15%, 30% y 60%) y de triclosán (0.03%, 0.12% y 0.48%), frente a una. FO R. cepa de S. mutans. Según los resultados obtenidos (Tabla 6 y Gráfico 3), al realizar la. vitro. concentraciones de. una. mayor. actividad. antibacteriana. que. las. E. in. extracto etanólico de propóleo obtenidas en este. MA S. presenta. IN. comparación de una forma global, se obtuvo que el triclosán al 0.48%. estudio, sin embargo al hacer comparaciones más específicas entre las. TE. diferentes concentraciones de extracto etanólico de propóleo y triclosán. SI S. se encuentra que la actividad antibacteriana sobre S. mutans es similar,. DE. en los grupos de 0.12% con 15 % y 30%, y de 0.12% con 60%.. A. La actividad antibacteriana del propóleo frente a S. mutans ha sido por. IN. estudiada. algunos. autores,. IC. antimicrobiana del propóleo. demostrando. que. la. actividad. puede ser atribuido al sinergismo entre. OF. algunos de sus compuestos, tales como flavonoides, y otros compuestos presentes en su composición, pero principalmente a los flavonoides22, y que la presencia de éstos compuestos con estas actividades puede variar de una región a otra ya que su presencia se asocia en parte las resinas que recolectan las abejas de las plantas presentes en su entorno. Debido. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. a esto es que propóleos obtenidos de diferentes regiones y estudiados en el laboratorio arrojan datos superiores con respecto a otros propóleos. sobre bacterias orales si habría diferencia. MA TI. De acuerdo a estudios. CA. provenientes de otras regiones18,. significativa a medida que aumenta la concentración del extracto etanólico de propóleo a partir del 10%, sin embargo frente a S. mutans el extracto. FO R. etanólico de propóleo no tiene diferencia significativa en concentraciones. IN. del 10 al 30 %14, lo que se corrobora con el presente estudio (Tablas 1,2 y Gráfico 1), que al 15% y 30% se obtuvieron datos similares y que a una. MA S. E. concentración superior al 60% el efecto antibacteriano aumenta.. Por otro lado, el triclosán exhibe un amplio espectro bactericida, además. TE. su efecto antibacteriano es debido a la inhibición sobre una proteína. SI S. encargada de la biosíntesis de ácidos grasos necesarios para la. DE. formación de la pared celular y la reproducción bacteriana30.. A. El triclosán está presente en múltiples productos relacionados con la. IN. higiene en un rango de uso en general son de 0,10% al 2%, y en. OF. IC. odontología en un rango superior al 0.05%, ya que concentraciones inferiores tienen cuestionada eficacia30, lo cual se corroboró con los resultados del presente estudio al obtener que el triclosán al 0.03% tuvo poco efecto antibacteriano contra S. mutans, pero que a concentraciones. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. superiores como 0.12 % y 0.48% se observó un mayor efecto antibacteriano. (Tablas 3 y 4, Gráfico 2). CA. Cuando el triclosán es usado solo a una concentración entre 0.1% y 0.2%,. MA TI. es eficaz con un mínimo de efectos secundarios, sin embargo mientras más aumenta la concentración también aumenta el riesgo de efectos secundarios29, entre varios; alteraciones en el funcionamiento de. IN. FO R. hormonas importantes tales como las tiroideas.9,12. En cuanto a la comparación de ambos tratamientos, existen pocos. E. estudios sobre la comparación del extracto etanólico de propóleo contra el. MA S. triclosán sobre S. mutans, entre ellos uno que evaluó la acción antibacteriana de dentríficos con contenido fitoterápico dando como. TE. resultados que las soluciones puras de los dentríficos presentan. SI S. capacidad antimicrobiana equivalente a la del dentífrico que contenía. DE. triclosán28, lo que fue comprobado en la presente investigación ya que las concentraciones de 0.12% de triclosán con 15% y 30 % de extracto. A. etanólico de propóleo, así como 0.12% de triclosán con 60% de extracto. IC. IN. etanólico de propóleo poseen actividad antibacteriana equivalente. OF. (Tablas 5 y 6, Gráfico 3).. Debido a que aún no se ha encontrado un agente ideal que permita lograr. estos objetivos sin causar efectos secundarios, es aquí donde el estudio de productos antibacterianos presentes en el propóleo puede jugar un rol. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. fundamental en el tratamiento preventivo y alternativo de la caries dental, considerando el hecho de que la utilización de un producto natural sería. CA. beneficioso para la salud dental sin producir efectos tóxicos.. MA TI. El extracto etanólico de propóleo empleado en la presente investigación mostró ser equivalente a una concentración promedio de triclosán usado en dentríficos y colutorios30, evidenciando su potencial de uso en. FO R. odontología, sin embargo es preciso realizar estudios de propóleos. acuerdo. a. la. región. de. IN. provenientes de otras regiones, ya que su composición y acción varía de donde. proviene18,30,. y. así. evaluar. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. comparativamente su acción sobre S. mutans y otros patógenos orales.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. V. CONCLUSIONES. 1.. La actividad antibacteriana in vitro del extracto etanólico de propóleo frente. al. triclosán. sobre. S.. mutans. es. similar. entre. las. CA. concentraciones de 15% y 30 % para el extracto etanólico y 0.12% de. MA TI. triclosán, así como 60% de extracto etanólico de propóleo con 0.12%. 2.. FO R. de triclosán.. Todas las concentraciones de extracto etanólico de propóleo. IN. utilizadas en el presente estudio tuvieron efecto inhibitorio sobre S.. 3.. MA S. E. mutans y todas fueron superiores al triclosán al 0.03%.. Todas las concentraciones de triclosán utilizadas en el presente. TE. estudio tuvieron efecto inhibitorio sobre S. mutans, siendo la. SI S. concentración al 0.48% la que mostró el mayor efecto frente a todas. OF. IC. IN. A. DE. las concentraciones de extracto etanólico de propóleo.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI. RECOMENDACIONES. . Realizar estudios comparativos con propóleos provenientes de. CA. diferentes regiones para determinar la efectividad de los diversos. MA TI. extractos, así como, su variación en su actividad y así ampliar el. . FO R. estudio alternativas de prevención de enfermedades bucales.. Se recomienda realizar también estudios sobre otros patógenos de la. IN. cavidad oral, para ampliar el conocimiento sobre el propóleo y su uso. Se recomienda realizar estudios in vivo para valorar la efectividad o. TE. . MA S. E. en odontología.. SI S. toxicidad del propóleo y su dosis terapéutica.. Al presentar, las concentraciones del extracto etanólico de propóleo. DE. . A. empleadas en este estudio un efecto similar que concentraciones de. IN. triclosán en un rango de uso en odontología, se puede utilizar como. OF. IC. tratamiento alternativo para la inhibición de S. mutans.. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Nolte W. Microbiología odontológica,Ed. Interamericana,México D. F. 1985.. CA. 2. Murray P., Tenover F., Yonken R. “Manual de Microbiología Clínica”, 6a. MA TI. eEd. Washington, DC 1995.. 3. Fejerskov O. “Concepts of dental caries and their consequences for. FO R. understanding the disease. Community Dent Oral Epidemiol”. 1997; pp 5-12.. IN. 4. Jawetz, Melnick y Adelberg. Geo F. Brooks. “Microbiología Médica”.. E. Manual Moderno. 18ª Ed.2005. MA S. 5. Donlan R. y Costerton W.. Biofilms: “Survival mechanisms of clinically relevant microorganisms.” Clin Microbiol Rev 2002 pp 167-93. J.”. Operatoria. TE. 6. Barrancos,. dental. Técnica. y. clínica”.Médica. SI S. Panamericana, Buenos Aires. 4ta Edición.2006 pp. 7. Sturdevant C., Roberson .T and H.Heymann. “Operatoria Dental Arte y. DE. Ciencia”. 3ª Ed. 1996 pp 223-28.. A. 8. Jones R, Jampani H. , Newman J., Lee A., Jones, R., Jampani, H.,. IN. Newman, J., López A.. Triclosan: a review of effectiveness and safety in. IC. health care settings. Am. Triclosán: una revisión de la eficacia y la. OF. seguridad en los centros de atención de salud Am.. J. Infect. J. Infect.. Control. , 28 (2), pp 184-196.. 9. McMurray L., Oethinger M. , Levy SB. Triclosan targets lipid synthesis. Nature 1998; pp 394-400. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 10. Vischer W., Regos J. Antimicrobial spectrum of triclosan, a broadspectrum antimicrobial agent for topical application. Zentbl Bakteriol Microbiol Hyg Abt Orig. 1973 pp 376-89. CA. 11. Doebbling B, Pfaler M, Houstom A.Removal of nosocomial pathogens. MA TI. from the contaminated glove.Ann Intern Med 1988;109:394. 12. Veldhoen, N., R. C. Skirrow. The bactericidal agent triclosan modulates thyroid. hormone-associated. gene. expression. and. disrupts. M.. Plant. Products. as. Antimicrobial. Agents.. Clinical. IN. 13. Murphy. FO R. postembryonic anuran development. Aquat Toxicol.2006: 217-27.. Microbiology Reviews. 1999.. E. 14. Eguizábal A, Moromi H. Actividad antibacteriana in vitro del extracto. MA S. etanólico de propóleo peruano sobre Streptococcus mutans y. 15. Galiano. A.. TE. Lactobacillus casei. Odontología Sanmarquina 2007; 10(2): 18-20. “El. Propóleo”,. disponible. en. :. D.. Propolis,. extraits. et. utilisations.. Clemont-Ferrand:. DE. 16. Gardelle. SI S. http://www.iqb.es/monografia/fichas/ficha082.htm. 2007. Publications sur la propolis Apimab Laboratoires. 1983.. in. propolis. on. Streptococcus. mutans. growth. and. on. IC. IN. found. A. 17. Koo H, Rosalen P, Cury J, Park Y, Bowen W. Effects of compounds. OF. glucosyltransferase activity. Antimicrob Agents Chemother. 2002 pp 1302-1309.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 18. Z. Moreno H., P.Martínez A., J.Figueroa. : Efecto antimicrobiano In vitro de propóleos argentinos, colombianos y cubano sobre Streptococcus mutans. Universidad Nacional de Colombia Facultad de Odontología.. CA. 2007. l’extrait. alcoolique. de. própolis.. MA TI. 19. Derevitch A, Popesco Al, Popesco N. Considérations sur les qualités de Disponible. en. URL:. http://biogassendi.ifrance.com/dossierpópolis.htm. IN. própolis. Bull tech Apic 198; 3: 13-24.. FO R. 20. Lavie P. Du côté des chercheurs, les substances antibiotiques de la. Pharmaceutica, 2004 pp 21-43,.. E. 21. Farré R, Frasquet I, Sánchez A. El própolis y la salud. Ars. MA S. 22. Bedascarrasbure E., Maldonado L., Gurini L., Alvarez A., Van der Horst A, Tabera A. Caracterización de propóleos argentinos. Delta del Río. TE. Paraná. Anales del Congreso Internacional de Propóleos, Buenos. SI S. Aires, 1 y 2 de Setiembre de 2000. Apis. DE. 23. Koo H, Rosalen PL, Cury JA, Park YK, Ikegaki M, Sattler A. Effect of mellifera. propolis. from. two. Brazilian. regions. on. caries. A. development in desalivated rats. Caries Res. 1999; 33(5):393-400.. IC. IN. 24. Tabera, A., E. Bedascarrasbure, L. Maldonado, A. Alvarez & A. van der. OF. Horst “Actividad antibacteriana de propóleos argentino enfrentado a Stafilococcus aureus”. Anales del Congreso Internacional de Propóleos, Buenos Aires. 200 pp 97.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 25. Hegazi, A.G., A.A. Farghal & F.A. El Hady. “Antiviral activity and. chemical composition of european and egyptian propolis”.An. Cong. Int. Propóleos, Bs. As., 200 pp. 99. J.. Manrique.. Actividad. antimicrobiana. de. propóleos. CA. 26. Antonio. MA TI. provenientes de dos zonas climáticas del estado Miranda, Venezuela. Efecto de la variación estacional. Zootecnia Tropical. 2006 pp 43-53. 27. Cuenca E. y Baca P. “Odontología preventiva y comunitaria”. 3º Ed.. FO R. 2005 pp 101.. IN. 28. L Barreto, M. Costa, J. de Araújo, K. Chagas, K. Costa: Acción antimicrobiana in vitro de dentífricos conteniendo fitoterápicos.. E. Madrid. Av Odontoestomatol v.21 n.4. 2005. MA S. 29. A. Valle, T. Vilchis, S. Arroniz. Efectividad clínica de un dentífrico con triclosán y citrato de zinc.Revista ADM. Vol 59. 2002. Pp 166-171. TE. 30. M. Canosa. Desarrollo de metodología analítica para determinación de. OF. IC. IN. A. DE. doctoral]. 2008. SI S. triclosán y parabenes. Universidad Santiago de Compostela. [tesis. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. ANEXOS. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 01 Ficha de recolección de la medición del halo de inhibición y sus respectivos promedios para las concentraciones de extracto etanólico de. MA TI. CA. propóleo. Diametro del halo (mm). Halo. Extracto Etanólico de Propóleo. IN. FO R. Bacteria: S. mutans. 8. 2 3. 60%. 8. 9. 8. 9. 9. 9. 7. 9. 8. 8. 9. 8. 8. 8. 6. 8. 7.5. 9. 7. 8. 8. 9. 8. 7. 8.5. 9. 9. 8. 8. 9. 10. 8. 8. 9. Promedio. 8. 8. 8.9. TE. MA S. 1. 30%. E. 15%. OF. IC. IN. A. DE. 5. SI S. 4. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 02. Ficha de recolección de la medición del halo de inhibición y sus. Diametro del halo (mm). Halo. Triclosán. 0.12%. 0.48%. 1. 7. 9. IN. 11.5. 2. 6. 9. 12. 3. 6. 8. 10. 4. 7. 8. 9. 5. 7. TE. 10. 10. 6. 8. SI S. 9. 13.5. 7. 6. 8. 10. 8. 7. 7. 9.5. 9. 7. 7. 9.5. 10. 7. 8. 11. Promedio. 6.8. 8.3. 10.6. MA S. DE. A IC OF. E. 0.03%. IN. FO R. MA TI. Bacteria: S. mutans. CA. respectivos promedios para las concentraciones de triclosán. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 03. GRÁFICO 1. CA. Media de la prueba de Duncan para el Diámetro del Halo de. MA TI. Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a cada concentración de extracto etanólico de. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. propóleo.. OF. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 04. GRÁFICO 2. CA. Media de la prueba de Duncan para el Diámetro del Halo de. MA TI. Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. mutans frente a cada concentración de triclosán.. OF. IC. IN. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 05. GRÁFICO 3. CA. Media de la prueba de Duncan para Diámetro del Halo de Inhibición. MA TI. como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans en función de tres concentraciones de extracto etanólico de propóleo. FO R. (15% y 30% y 60 %) y tres concentraciones de Triclosán (0.03%,. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. 0.12% y 0.48%). OF. IC. IN. Fuente: Datos obtenidos por el grupo investigador. 42 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 06 EVALUACIÓN DE LA TESIS El Jurado deberá:. CA. a. Consignar las observaciones u objeciones pertinentes relacionadas a los siguientes ítems.. MA TI. b. Anotar el calificativo final. c. Firmar los tres miembros del jurado.. FO R. TESIS:………………………………………………............................………… ………………………………………………………………………………………. IN. ……………………………………………………………………………………… 1. DE LAS GENERALIDADES. E. El Título: ……………………………………………………………………….. MA S. …………………………………………………………………………………. Tipo de Investigación: ……………………………………………………….. TE. .………………………………………………………………………………….. SI S. 2. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN Antecedentes: ………………………………………………………………... DE. Justificación: …………………………………………………………………. Problema:……………………………………………………………………... IN. A. ………………………………………………………………………………….. IC. Objetivos: …………………………………………………………………….. OF. Hipótesis: ……………………………………………………………………. Diseño de Contrastación:…………………………………………………… Tamaño Muestral:…………………………………………………………… Análisis Estadístico: …………………………………………………………. 3. RESULTADOS:……………………………………………………………….. 43 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 4. DISCUSIÓN: …………………………………………………………………. 5. CONSLUSIONES: …………………………………………………………… 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ………………………………………. ………………………………………………………………………………….. CA. 7. RESUMEN: ……………………………………………………………………. MA TI. …………………………………………………………………………………. 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN: ………………………………….. FO R. …………………………………………………………………………………. 9. ORIGINALIDAD: …………………………………………………………….... IN. 10. SUSTENTACIÓN:. 10.1Formalidad: ……………………………………………………….... E. 10.2Exposición:………………………………………………………….. TE. CALIFICACIÓN. MA S. 10.3Conocimiento del Tema: ………………………………………….. JURADO. DE. SI S. (Promedio de las 03 notas del jurado). Nombre. Código. Firma. IN. A. Presidente: Dr. ………………………….. ………………… ……………….. IC. Grado Académico: ………………………………………………. OF. Secretario: Dr. ………………………….. ………………… ………………. Grado Académico: ……………………………………………… Miembro: Dr. …………………………… ………………… ………………. Grado Académico: ………………………………………………. 44 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 07 RESPUESTAS DEL TESISTA A OBSERVACIONES DEL JURADO. MA TI. jurado a manuscrito en el espacio correspondiente:. CA. El Tesista deberá responder en forma concreta a las observaciones del. Fundamentando su discrepancia.. b.. Si está de acuerdo con la observación registrada.. c.. Firmar.. FO R. a.. TESIS: …………………………………………………………............................ IN. ………………………………………………………………………………………. E. ………………………………………………………………………………………. MA S. 1. DE LAS GENERALIDADES. El Título: ………………………………………………………………………. TE. …………………………………………………………………………………. SI S. Tipo de Investigación: ……………………………………………………… ………………………………………………………………………………….. DE. 2. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN Antecedentes: ………………………………………………………………... A. Justificación: ………………………………………………………………….. IN. Problema:……………………………………………………………………... IC. ………………………………………………………………………………….. OF. Objetivos: …………………………………………………………………….. Hipótesis: …………………………………………………………………….. Diseño de Contrastación:…………………………………………………… Tamaño Muestral:…………………………………………………………… Análisis Estadístico: …………………………………………………………. 45 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

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