Efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride sobre huevos y juveniles 2 de Meloidogyne sp en condiciones de laboratorio AUTOR:

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Ó. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. AC I. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. N. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. DE. IN. Efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum. EM AS. y Trichoderma viride sobre huevos y juveniles 2 de. TESIS. PARA OBTENER EL TÍTULO DE:. BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. IO. N. DE. SI. ST. Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio. DI. RE. CC. AUTOR: Br. MENDOZA SALDAÑA GICELLY ANGELITA TOMAZA. TRUJILLO – PERÚ 2012. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. Dr. Orlando Velásquez Benites. RM. ÁT. IC. A. Y. RECTOR. FO. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. EM AS. DE. IN. VICERRECTORA ACADÉMICA. ST. Dra. Flor Marlene Luna Victoria Mori. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. VICERRECTORA ADMINISTRATIVA. Dr. Regné Cortéz Lara SECRETARIO GENERAL. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. Y. Dr. Hermes Mario Escalante Añorga. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. EM AS. Dr. César Augusto Jara Campos. CC. IO. N. DE. SI. ST. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Ms. C. Pedro Arnaldo Alvarado Salinas. DI. RE. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. N. DEL ASESOR. AC I. El que suscribe: Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg, asesor de la presente tesis. IC. titulada: “Efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma. CO. M UN. viride sobre huevos y juveniles 2 de Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio”.. IC. A. Y. CERTIFICA:. ÁT. Que la investigación ha sido ejecutada de acuerdo al reglamento establecido por. FO. RM. la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, estando en. IN. conformidad con su correspondiente proyecto, y que el informe ha sido redactado. EM AS. DE. acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas.. Por tanto, autorizo al Bachiller GICELLY ANGELITA TOMAZA MENDOZA. DE. SI. ST. SALDAÑA, continuar con los procedimientos según sus fines.. DI. RE. CC. IO. N. Trujillo, Septiembre del 2 012. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg ASESOR. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. PRESENTACIÓN. IC. AC I. Ó. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:. M UN. Cumpliendo con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados y. CO. Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra consideración y. Y. elevado criterio la presente Tesis titulada: “Efecto de Trichoderma atroviride,. IC. A. Trichoderma harzianum y Trichoderma viride sobre huevos y juveniles 2 de. RM. FO. Profesional de Biólogo - Microbiólogo.. ÁT. Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio”, con el objetivo de obtener de Título. ST. EM AS. DE. IN. Espero que este trabajo sea de su aprobación.. RE. CC. IO. N. DE. SI. Trujillo, Septiembre del 2 012. DI. Br. Gicelly Angelita Tomaza Mendoza Saldaña. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. MIEMBROS DEL JURADO. Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. PRESIDENTE. SECRETARIO. MS.C. Juan Héctor Wilson Krugg VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. Ms. C. Eduardo Muñóz Ganoza. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. N. APROBACIÓN. AC I. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador, declaran que. M UN. IC. el presente Informe de Tesis ha cumplido con los requisitos formales y. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. fundamentales, siendo APROBADO por UNANIMIDAD.. Ms. C. Gerardo Alayo Espinoza. Ms. C. Eduardo Muñóz Ganoza SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. PRESIDENTE. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. DEDICATORIA. AC I. Ó. A Dios,. por su amor incondicional, por guiar mis pasos durante toda mi vida y. M UN. IC. por permitirme ser la persona que soy.. CO. A mi padre WILMER,. Y. que es mi ejemplo de superación a seguir, que siempre celebra mis logros por más. ÁT. IC. A. pequeños que sean, que siempre apoya mis decisiones y que cree en mí.. RM. A mi madre NORMA,. FO. por desvelarse cuando yo lo hacía, por preocuparse por mí, porque cada consejo que. DE. IN. me dio no fue en vano y que siempre me brinda su amor incondicionalmente.. EM AS. A mis hermanas, CAROL y NORMITA,. por tenerme paciencia y soportar mi carácter, porque aún cuando las hacía renegar. DE. SI. ST. me apoyaban cuando era necesario.. A mis ABUELOS,. que yo sea una profesional.. DI. RE. CC. IO. N. por haberles dado la vida a mis padres, y hacer de ellos las personal que lograron. A JUAN CARLOS,. por todo su amor incondicional y comprensión, por hacer que los días no sean tan difíciles como parecen, por acompañarme y estar presente en todo momento.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. AGRADECIMIENTOS. AC I. Ó. Mi profundo agradecimiento a mi asesor Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg,. IC. Profesor Auxiliar del Departamento de Microbiología y Parasitología de la. M UN. Universidad Nacional de Trujillo, por brindarme su confianza, apoyo desinteresado,. CO. amistad incondicional, asesoramiento y sobre todo por contribuir enormemente con. A. Y. sus conocimientos y enseñanzas en la realización de la presente Tesis.. ÁT. IC. A Blgo. Roxana Luyo por ayudarme y tomar un poquito de su ajetreado. RM. tiempo para dedicármelo a mí y compartir conmigo sus experiencias e interrogantes. IN. FO. para la ejecución de esta tesis.. DE. A Juan Carlos Colina Venegas por que sin él no hubiera podido terminar con. EM AS. éxito mi tesis, gracias por las palabras de aliento que me dabas para seguir adelante y. ST. por su ayuda desinteresada.. DE. SI. A mis mejores amigos Ingrid, Richar, Daniela y Nilda; porque desde que la. IO. N. vida nos junto, aprendimos a valorar que con esfuerzo y dedicación todo es posible.. CC. A Ms. C. Miguel Muñoz Ríos por ser un amigo incondicional y que siempre. DI. RE. estaba presto a apoyarme sin condiciones.. A Dr. César Jara Campos por apoyarme con el espacio que requería para ejecutar parte de mi tesis. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. Ó. N. Se determinó el efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride sobre juveniles 2 de. AC I. Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio. Para lo cual se trabajó con siete. IC. tratamientos, 4 controles, que consistieron en T1 (L. esculentum sin Meloidogyne sp.),. M UN. T2 (L. esculentum con Meloidogyne sp.), T3 (L. esculentum con Meloidogyne sp. y Oxamyl) y T4 (L. esculentum con Meloidogyne sp. y P chlamydosporia); y 4. CO. experimentales, así tenemos a T5 (L. esculentum con Meloidogyne sp. y T.. Y. atroviride), T6 (L. esculentum con Meloidogyne sp. y T. harzianum) y T7 (L.. A. esculentum con Meloidogyne sp. y T. viride). Para evaluar el porcentaje de peso. ÁT. IC. radicular de L. esculentum, de nódulos producidos por Meloidogyne sp. presentes en. RM. raíces de L. esculentum y el porcentaje de J2 de Meloidogyne sp. Se sembró L. esculentum en 35 bolsas de almácigo que contenía sustrato en una proporción (2:1),. FO. distribuidas en 5 bolsas por tratamiento. Luego se inoculó 30000 huevos de. IN. Meloidogyne sp. por bolsa a excepción del tratamiento control negativo (T1).. DE. Posteriormente, a los 5 días de siembra se inoculó una suspensión de 106 conidias/mL. EM AS. de T. atroviride, T. harzianum, T. viride y P. chlamydosporia respectivamente, con 5 inoculaciones más de cada hongo con un intervalo de 10 días entre cada inoculación;. ST. mientras que al T3 se le inoculó por única vez 900 ppm de Oxamyl y al tratamiento. SI. control negativo solo se le agregó agua, dejándose incubar a temperatura ambiente. DE. durante 2 meses. Para determinar el efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride. N. sobre huevos de Meloidogyne sp. se inoculó una suspensión de 106 conidias/mL de 2. IO. mL de cada hongo y oxamyl, en pocillos que contenían 1 mL de agua destilada estéril. CC. con aprox. 100 huevos de Meloidogyne sp. incubándose por 72 horas, con cuatro. DI. RE. repeticiones por tratamiento. Se concluye que T. atroviride, T. harzianum y T. viride disminuyen significativamente la población de Meloidogyne sp en condiciones de laboratorio, y que T. harzianum es el que ejerce el mayor efecto inhibitorio sobre Meloidogyne sp.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. N. ÍNDICE. AC I. Pág.. IC. AUTORIZACIÓN DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO…….. ii iv. PRESENTACIÓN……………………………………………………………....... v. CO. M UN. ASESOR……………………………………………………………………….…. Y. MIEMBRO DEL JURADO………………………………….………………….... IC. A. APROBACIÓN………………………………………….…………..………….... vi vii viii. AGRADECIMIENTOS…………………………………………..…………......... ix. FO. RM. ÁT. DEDICATORIA………………………………………………….......................... x. INTRODUCCIÓN.………………………………………………….…......... 1. DE. I.. IN. RESUMEN………………………………………………………………….......... EM AS. II. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………..... 8 8. 2. Procedimiento……………………………………………..……………..... 9. ST. 1. Material de estudio ……………………………………………………..... DE. SI. 2.1 Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride. DI. RE. CC. IO. N. sobre juveniles 2 de Meloidogyne sp………………………………... 10. 2.1.1 Obtención de cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T. viride y P. chlamydosporia….………………...……….... 10. 2.1.2 Propagación de cultivo de.T. atroviride, T. harzianum y T. viride…………………………..……………………………...……. 10. 2.1.3 Recolección, esterilización y preparación del sustrato……….. 11. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. esculuntum var. Río Grande “Tomate”……….…….…..…... 11. 2.1.5 Obtención de huevos de Meloidogyne sp….…….……….….. N. 2.1.4 Tratamiento superficial y siembra de semillas de L.. AC I. Ó. 12 12. IC. 2.1.6 Inoculación de Meloidogyne sp……………………….……. M UN. 2.1.7 Estandarización del inoculo de conidias de T. atroviride, 13. CO. T. harzianum, T. viride y P. chlamydosporia………………. Y. 2.1.8 Inoculación de T. atroviride, T. harzianum, T. viride 13. IC. A. y P. chlamydosporia………………………………………... ÁT. 2.1.9 Preparación e inoculación de Oxamyl……………..………... RM. 2.1.10 Lectura de los resultados………………..…………………... 13 14. FO. 2.2 Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride. DE. IN. sobre huevos de Meloidogyne sp…………………………………... 15 15. 2.2.2 Lectura de los resultados…………………………………….... 15. 2.3 Análisis de datos…..……………………………………………….... 15. ST. EM AS. 2.2.1 Preparación de las suspensiones de los tratamientos………….... 17. SI. III. RESULTADOS …………………………………………………………….. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp., después de 2 meses de tratamiento con T. atroviride, T. harzianum y T. viride…...….…. 18. DI. RE. CC. IO. N. DE. Fig. 1. Porcentaje de peso radicular de las plantas de L. esculentum var.. Fig. 2. Porcentaje de nódulos presentes en raíces de las plantas de L. esculentum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp., después de 2 meses de tratamiento con T. atroviride, T. harzianum. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. y T. viride…………………….…………………………………….…….. 19. AC I. Ó. final de juveniles 2 de Meloidogyne sp. en suelo después de 2. N. Fig. 3. Porcentaje inicial de Meloidogyne sp. en suelo, frente al porcentaje. IC. meses de tratamiento con T. atroviride, T. harzianum y T.. 20. M UN. viride………………………………………………………………………. CO. Fig. 4. Observación microscópica (40x) de la diferencia de huevos de. Y. Meloidogyne sp. no parasitados y parasitados con cada hongo, 21. IC. A. a las 72 horas de inoculación…………………………….……….. ÁT. Fig. 5. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción. RM. que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. atroviride,. FO. a las 24, 48 y 72 horas de incubación…………………….………. 22. DE. IN. Fig. 6. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. harzianum,. EM AS. a las 24, 48 y 72 horas de incubación………………………….…. 23. ST. Fig. 7. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción. SI. que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. viride, a las. DE. 24, 48 y 72 horas de incubación……………………………..……. IO. N. IV. DISCUSIÓN…………………………………………...……………………. CC. V. CONCLUSIONES………………………………………………….….……. 25 30. VI. RECOMENDACIONES……………………………………………………. 31. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………. 32. ANEXOS.………………………………………………………………….……... 41. RE DI. 24. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 1.. Cultivos puros de T. atroviride, T. harzianum, T. viride y P.. con presencia de. Ó. Raíces de Plukenetia volubilis “Sacha inchi”. AC I. Anexo 2.. N. chlamydosporia.. IC. nódulos causados por Meloidogyne sp. Propagación en arroz. Anexo 4.. Bolsas de almácigo con sustrato (2:1). Anexo 5.. Germinación de semillas de Lycopersicum esculentum var. Río. Y. CO. M UN. Anexo 3.. Muestras de sustrato procesadas según la Técnica de Baerman. ÁT. Anexo 6.. IC. A. Grande. RM. modificado en copa. Larva del segundo estadio de Meloidogyne sp. Anexo 8.. Placa con pocillos. Anexo 9.. Porcentaje promedio de peso radicular de L. esculentum frente a. DE. IN. FO. Anexo 7.. EM AS. los diferentes tratamientos.. ST. Anexo 10. Porcentaje promedio de nódulos producidos por Meloidogyne sp.. SI. presentes en raíces de L. esculentum frente a los diferentes. DE. tratamientos.. frente a los diferentes tratamientos.. CC. IO. N. Anexo 11. Porcentaje promedio de juveniles 2 de Meloidogyne sp. en suelo. DI. RE. Anexo 12. Análisis de varianza (ANAVA) y postanava de los porcentaje de peso radicular de L. esculentum frente a los diferentes tratamientos evaluados.. xiv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 13. Análisis de varianza (ANAVA) y postanava de los porcentajes de. N. nódulos producidos por Meloidogyne sp. presentes en raíces de L.. AC I. Ó. esculentum frente a los diferentes tratamientos evaluados.. IC. Anexo 14. Análisis de varianza (ANAVA) y postanava de los porcentajes. M UN. finales de juveniles 2 de Meloidogyne sp. en suelo frente a los. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. diferentes tratamientos evaluados.. xv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. I. INTRODUCCIÓN. AC I. Ó. Las enfermedades de las plantas que son ocasionadas fundamentalmente. IC. por hongos, bacterias, virus y nematodos1, constituyen uno de los elementos. que. reducen. significativamente. la. producción. agrícola. se. CO. fitoparásitos. M UN. limitantes para la producción de cualquier cultivo agrícola2. Entre los nematodos. Y. encuentran los formadores de nódulos o agallas del género Meloidogyne sp.3.. IC. A. Así mismo, se considera que este género causa pérdidas del 14 % de la producción. ÁT. agrícola mundial, las cuales equivalen aproximadamente a 100 billones de dólares. RM. anuales, lo cual representa un tercio de las pérdidas atribuidas a plagas y. FO. enfermedades. Por tal motivo, se considera como el nematodo más común y. EM AS. DE. IN. destructivo de plantas 4.. El género Meloidogyne sp. integra varias especies importantes para la. ST. agricultura. Algunas de sus especies son cosmopolitas y por sus hábitos. SI. polífagos son considerados como los más peligrosos para las plantas por tener. DE. un amplio rango de hospederos 5, 6, parasitando prácticamente cualquier tipo. IO. N. de cultivo, entre los que se encuentran gramíneas, hortalizas, ornamentales,. CC. frutales y forestales5. Están distribuidas desde los 5 a 30 cm debajo de la. DI. RE. superficie del suelo7. Entre las especies relacionadas con importantes pérdidas económicas se encuentran Meloidogyne incognita, M. javanica, M. hapla y M. arenaria 8, 9, 10.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las especies del género Meloidogyne sp. poseen tres etapas en su ciclo de vida:. N. huevo, tres estadios larvales y adulto 7. Los huevos depositados sobre la superficie de. AC I. Ó. la raíz y contenidos en una matriz proteica gelatinosa secretada por las glándulas. IC. rectales de la hembra sobreviven en el suelo y son inoculo efectivo para iniciar la. M UN. infección de la planta. En condiciones favorables, los juveniles sufren una primera. CO. muda dentro del huevo, pasando de primer estadio larval (J1) a segundo estadio larval (J2), y cuando las condiciones de humedad y temperatura son favorables las larvas. A. Y. del segundo estadio eclosionan del huevo 11. Las raíces de las plantas son parasitadas. ÁT. IC. por el segundo estadio larval o juvenil infectivo de Meloidogyne sp.12. Tras la. RM. eclosión, los juveniles J2 migran a través del suelo atraídos por los exudados radicales. FO. a la zona de elongación de la planta; penetrando la raíz por la parte cercana y. DE. IN. posterior al ápice radical, donde las células del meristemo apical se preparan para la diferenciación celular, estableciendo sus sitios de alimentación en la región vascular,. ST. EM AS. tornándose sedentarios 13, 14.. SI. Durante su crecimiento, los juveniles 2 (J2) van engrosando y sufren tres mudas. DE. hasta convertirse en hembras o machos adultos15. Posteriormente, los machos. IO. N. abandonan el sistema radicular y las hembras permanecen en el interior de las raíces,. CC. como endoparásitos, hasta el final de su ciclo de vida13. Las hembras producen. DI. RE. aproximadamente 3000 huevo, que son depositados en el exterior de la raíz; completando su ciclo vital en 1 – 2 meses, dependiendo de factores ambientales como. la temperatura, por lo tanto pueden tener varias generaciones durante un cultivo 14, 15.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las plantas atacadas por Meloidogyne sp. muestran una serie de cambios en los. N. tejidos radicales, tales como el aumento en el tamaño de las células (hipertrofia). AC I. Ó. alrededor de los sitios de alimentación del nematodo y la sobre multiplicación celular. IC. (hiperplasia), que dan origen a las agallas o nódulos radiculares 3. Las agallas pueden. M UN. medir desde 1 a 2 mm de diámetro en las raíces pequeñas y hasta 1 cm o más en las. CO. raíces grandes. Las raíces altamente infestadas son mucho más cortas que las sanas,. Y. tienen menos raíces laterales y pelos radicales16. La formación de nódulos, provoca la. A. interrupción y la desorganización del sistema vascular, en consecuencia, se produce. ÁT. IC. una disminución en la absorción y transporte de agua y nutrientes por las raíces 17, a. RM. pesar de haber humedad adecuada en el suelo, lo que implica que en la parte aérea de. FO. la planta haya aparición de síntomas como marchites, clorosis, falta de crecimiento. IN. (enanismo); menos desarrollo de la planta; provocando disminución en la producción. EM AS. DE. agrícola18.. ST. El control de nematodos se realiza usualmente por la combinación de varias. SI. estrategias de manejo. El control cultural, utiliza tratamientos como barbechos,. DE. inundaciones, aplicaciones de abonos orgánicos, plantas trampa y de cobertura,. IO. N. rotación de cultivos, etc.2. El control físico, utiliza tratamientos como solarización,. CC. vapor de agua, encharcamiento, etc. Estos métodos, reducen bastante las poblaciones. DI. RE. de nematodos fitoparásitos como Meloidogyne sp.; y pueden ser usados de manera individual o combinada, pero son poco usados por los agricultores, ya que demandan de inversión y su aplicación requiere de periodos largos, reduciendo el tiempo de producción agrícola19. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Actualmente, el control químico es una de las medidas que más se utilizan para. N. minimizar los daños causados por Meloidogyne sp., pues es indudable el efecto eficaz. AC I. Ó. que estos productos tienen sobre las diferentes especies de este nematodo20. Sin. IC. embargo, una de las principales limitaciones del uso de los nematicidas, es que su. M UN. aplicación frecuente modifica la microflora y microfauna del suelo, alterando las. CO. cadenas tróficas, eliminando los microorganismos antagonistas de los nematodos. Y. fitoparásitos21. Además, contaminan el manto freático, y si no se aplican de manera. IC. A. adecuada pueden ocasionar fitotoxicidad en las plantas y seleccionan poblaciones de. ÁT. nematodos resistentes. Estos agroquímicos sintéticos tienen como base compuestos. RM. organofosforados o carbamatos, y algunos actúan de forma sistémica y dan lugar a. FO. mayor residualidad en los cultivos y el ecosistema, lo cual puede afectar a la salud. DE. IN. humana5.. EM AS. Por lo tanto, es necesario disponer de otras alternativas más compatibles con el. ST. ambiente, tales como el control biológico, donde a partir de bacterias del género. SI. Baccillus, Pasteurela penetrans (Thome) y hongos como Paecilomyces lilacinus y. DE. Pochonia chlamydosporia, se han obtenidos biopreparados de gran eficiencia en el 20, 22. . Siendo, estas dos últimas especies las más utilizadas. IO. N. control de fitonematodos. DI. RE. CC. en el control de Meloidogyne sp.. P. lilacinus es un hongo que estimula el desarrollo radicular, adaptándose a. diferentes sustratos y es efectivo contra huevos y larvas juveniles de nematodos especialmente del género Meloidogyne sp.23. Mientras que, P. chamydosporia, es un 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. hongo parásito facultativo de huevos de nematodos, mediante la formación de redes. N. de hifas con órganos especializados que penetran la capa vitelina mediante lisis. AC I. Ó. enzimática, el cual ha mostrado ser un agente potencial de control biológico de. M UN. IC. nematodos formadores de nódulos (Meloidogyne sp.) 24, 25.. CO. Recientemente, se han reportado trabajos sobre el uso potencial de Trichoderma. Y. sp. en el control de Meloidogyne sp. Sin embargo, las especies del género. IC. A. Trichoderma sp. son más conocidas por estar entre los antagonistas más utilizados. ÁT. para el control de un grupo importante de patógenos del suelo, principalmente de los. RM. géneros Phytophthora sp., Rhizoctonia sp., Sclerotium sp., Pythium sp. y Fusarium. FO. sp., entre otros26. Los mecanismos de acción por las que las especies de Trichoderma. IN. sp. desplazan al fitopatógeno son fundamentalmente tres, así tenemos, la competencia. DE. directa por el espacio o por nutrientes27,. 28. , la producción de metabolitos. EM AS. antibióticos29, 30 y el parasitismo directo de determinadas especies de Trichoderma sp.. ST. sobre las especies fitopatógenos31. Las raíces colonizadas por Trichoderma sp.,. SI. frecuentemente presentan mejor crecimiento y peso radicular que las plantas no. DE. tratas, incrementando la productividad del cultivo y su resistencia a factores bióticos. DI. RE. CC. IO. N. y abióticos adversos 32, 33, 34.. Existe poca información sobre los mecanismos utilizados por las especies de. Trichoderma sp. en el control de nematodos. Sin embargo, se hablan de dos mecanismos, el primero es el parasitismo directo de huevos o larvas mediante el aumento de la actividad de quitinasas o proteasas, siendo este un indicativo de 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. infectar huevos de nematodos; y el segundo es la inducción de los mecanismos de. AC I. Ó. N. defensa de la planta 35.. IC. Sharon et. al.36, observó que las enzimas extracelulares tales como. M UN. quitinasas y proteasas con actividad antifúngica participan en la relación. CO. de interacción de M. javanica y Trichoderma sp. Ferreira et. al.37, reportó que de. Y. todos los aislamientos que realizó, el asilamiento T-1 de Trichoderma sp.. A. fue el más eficaz en el control de M. exigua, logrando parasitar al. ÁT. IC. 53,33% de los huevos de este nematodo. Así mismo, Madail R.19 reportó. RM. que todos los tratamientos “in vitro” que realizó con aislamientos de. FO. Trichoderma sp. parasitaron a los huevos de M. javanica envolviéndolos con. DE. IN. sus hifas.. EM AS. Teniendo en cuenta que las especies de Trichoderma sp. son muy usadas. ST. en el control biológico de hongos fitopatógenos, especialmente de aquellos que. SI. atacan a partes subterráneas de los vegetales; ejerciendo un efecto positivo. DE. sobre el crecimiento de las plantas, haciéndolas más vigorosas, con mejor desarrollo. IO. N. del sistema radicular, aumentando los mecanismos de defensa de las plantas; y. CC. que además se ha demostrado que Trichoderma sp. también puede controlar. DI. RE. nematodos, permitiendo que los agricultores empleen Trichoderma sp. no solo como hongo antagonista, sino también como hongo nematófago, haciendo de esta manera que los costos del tratamiento de sus cosechas disminuyan ya que solo necesitarían aplicar un solo tipo de controlador biológico. Por tal motivo, se hace necesaria 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. la búsqueda de hongos que tengan la capacidad de controlar nematodos, por. N. lo cual la presente investigación tiene como objetivo evaluar el efecto de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. y juveniles 2 de Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio.. AC I. Ó. Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride sobre huevos. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. Material de estudio. IC. AC I. 1.. N. II. MATERIAL Y MÉTODO. Cultivo puro de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum,. M UN. 1.1. CO. Trichoderma viride y Pochonia chlamydosporia proporcionado por el. Y. Laboratorio de Fitopatología del Departamento Académico de Microbiología. IC. A. y Parasitología de la Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional. RM. ÁT. de Trujillo.. Cultivo puro de Pochonia chlamydosporia proveniente de SENASA. FO. 1.2. DE. IN. proporcionado por el Laboratorio de Fitopatología del Departamento. EM AS. Académico de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias. ST. Biológicas, Universidad Nacional de Trujillo.. Huevos de Meloidogyne sp. extraídos de raíces de Plukenetia volubilis “Sacha. SI. 1.3. IO. N. DE. Inchi”.. Treinta y cinco plantas de Lycopersicon esculuntum var. Río Grande “Tomate”.. DI. RE. CC. 1.4. 1.5. Nematicida Nemate® 240 SL, cuyo principio activo es Oxamyl.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Procedimiento. N. 2.. 3 controles positivos. y 3 experimentales, todos ellos con 5. IC. control negativo,. AC I. Ó. Se utilizó un diseño experimental que incluyó 7 tratamientos, de los cuales, 1 fue. CO. M UN. repeticiones. Cada tratamiento consistió en lo siguiente:. Tratamiento Control Negativo (T1): Plantas de L. esculuntum. var. Río. Y. -. IC. A. Grande.. Tratamiento Control Positivo (T2): Plantas de L. esculuntum var. Río Grande. FO. infectadas con Meloidogyne sp.. RM. ÁT. -. Tratamiento Control Positivo (T3): Nematicida Nemate® inoculado. IN. -. en. EM AS. DE. plantas de L. esculuntum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. -. Tratamiento Control Positivo (T4): P. chlamydosporia inoculada en plantas. SI. ST. de L. esculuntum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. Tratamiento Experimental (T5): T. atroviride inoculado en plantas de L.. DE. -. IO. N. esculuntum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp.. DI. RE. CC. -. -. Tratamiento Experimental (T6): T. harzianum inoculado en plantas de L. esculuntum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. Tratamiento Experimental (T7): T. viride inoculado en plantas de L. esculuntum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1. Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride sobre. AC I. Ó. N. juveniles 2 de Meloidogyne sp.. IC. 2.1.1 Obtención de cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T.. M UN. viride y P. chlamydosporia.. CO. A partir de cada cultivo puro de T. atroviride, T. harzianum, T.. Y. viride, y P. chlamydosporia se procedió a resembrar por puntura. IC. A. respectivamente, en tubos de ensayo conteniendo Agar Papa Dextrosa. ÁT. (PDA), los cuales fueron incubados a 25°C durante 7 días,. RM. obteniéndose así un cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T.. DE. IN. FO. viride y P. chlamydosporia (Anexo 1).. EM AS. 2.1.2 Propagación de cultivo de. T. atroviride, T. harzianum y T. viride. A partir de los cultivos jóvenes de T. atroviride, T. harzianum y. SI. ST. T. viride se realizó una siembra por suspensión en frascos planos. DI. RE. CC. IO. N. DE. de vidrio conteniendo Agar Papa Dextrosa (PDA), los cuales fueron incubados a 25 °C durante 7 días. Posteriormente se obtuvo una suspensión de conidias a partir de estos cultivos, lo que se inoculó en bolsas de polipropileno conteniendo arroz, las cuales fueron incubadas a temperatura ambiente por dos semanas (Anexo 2).. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.3 Recolección, esterilización y preparación del sustrato.. N. El sustrato estuvo conformado por dos partes de suelo y una parte de. AC I. Ó. humus de lombriz de tierra (2:1). Se recolectó aproximadamente 90. IC. Kg de suelo agrícola del campus de la Universidad Nacional de. M UN. Trujillo que fue trasladado al laboratorio de Fitopatología, donde fue. CO. tamizado y lavado con agua de caño, y posteriormente esterilizado. Y. en autoclave a 121°C durante 15 minutos. El humus no se sometió a. IC. A. esterilización ya que hubiera perdido sus propiedades como abono.. ÁT. La preparación del sustrato consistió en agregar 2 Kg de suelo y 1. RM. Kg de humus en cada bolsa de almácigo, llenándose 35 bolsas, que. DE. IN. FO. fueron distribuidas en 5 bolsas por tratamiento (Anexo 3).. EM AS. 2.1.4 Tratamiento superficial y siembra de semillas de L. esculuntum var. Río Grande “Tomate.. SI. ST. Las semillas se lavaron con agua destilada estéril para eliminar los. DI. RE. CC. IO. N. DE. productos químicos de la certificación de las semillas, luego se desinfectaron sumergiéndolas en alcohol al 70% durante tres minutos y se lavaron 10 veces consecutivas con agua destilada estéril; por último, se las dejó secar en condiciones de esterilidad. Se determinó el % de germinación de las semillas (Anexo 4) para posteriormente sembrar por maceta, una semilla de L. esculentum var, Rio Grande, a una profundidad de 1 cm.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.5. Obtención de huevos de Meloidogyne sp.. N. Las masas de huevos fueron extraídas de raíces de P. volubilis. AC I. Ó. “Sacha Inchi” que se encontraban infectadas con Meloidogyne sp.. IC. (Anexo 5). Las raíces fueron lavadas con agua de caño y los. M UN. nódulos presentes fueron cortados y llevados al esteroscopio para. CO. la extracción de masas de huevos. Las masas de huevos fueron. Y. colocadas en frascos de penicilina que contenían una solución. IC. A. de hipoclorito de sodio al 3 % para su lavado, sometiéndolos a. ÁT. agitación por 5 minutos aproximadamente. Luego se enjuagaron 5. RM. veces consecutivas con agua destilada estéril para eliminar trazas. para. determinar el número de huevos por masa de. DE. conteo. IN. FO. residuales de hipoclorito de sodio 7,19. En seguida se procedió al. EM AS. Meloidogyne sp., estandarizándose hasta obtener una concentración. ST. de 10,000 huevos de nematodos por kilogramo de sustrato 38.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. 2.1.6 Inoculación de Meloidogyne sp. Inmediatamente sembradas las semillas de L. esculentum, se procedió a la inoculación de la concentración de la dosis estandarizada de huevos de Meloidogyne sp., Esto se realizó para todos los tratamientos a excepción del grupo control negativo, que no se inoculo con Meloidogyne sp.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.7 Estandarización del inoculo de conidias. de T. atroviride, T.. N. harzianum, T. viride y P. chlamydosporia.. AC I. Ó. Se agregó 10 mL de agua destilada estéril y 1 gr del arroz. IC. colonizado con el hongo respectivo a un matraz estéril, agitándose. M UN. moderadamente a fin de liberar las conidias del hongo,. CO. determinándose la concentración de la suspensión resultante,. Y. mediante la Cámara de Neubauer, para posteriormente estandarizar. IC. A. dicha suspensión a la concentración de 106 conidias/mL Este. ÁT. procedimiento se empleo para cada uno de los hongos a. IN. FO. RM. evaluar.. DE. 2.1.8 Inoculación de T. atroviride, T. harzianum, T. viride y P.. EM AS. chlamydosporia.. A los 5 días de sembrada la semilla de L. esculuntum se inoculó una. SI. ST. suspensión de 106 conidias/ml a cada tratamiento a evaluar. Para. respectivo, con un intervalo de 10 días entre cada inoculación. Las macetas se incubaron a temperatura ambiente y en fotoperiodo.. 2.1.9 Preparación e inoculación de Oxamyl.. DI. RE. CC. IO. N. DE. cada tratamiento se realizó 5 inoculaciones más del hongo. Se agregó 2 mL del Nematicida a un matraz conteniendo 98 mL de agua destilada, cantidad necesaria para lograr una concentración de. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 900 ppm. A los 5 días de la inoculación de Meloidogyne sp. y. N. siembra de L. esculentum se realizó la primera y única inoculación. IC. AC I. Ó. del Nematicida.. M UN. 2.1.10 Lectura. CO. Se realizó a los dos meses de inoculada la suspensión de 10,000. Y. huevos de nematodos por kilogramo de sustrato. Para esto se. IC. A. procedió a tomar una muestra de 100 gr de sustrato de cada. ÁT. tratamiento y se evaluó el nivel de infestación de juveniles 2 de. RM. Meloidogyne sp. en el sustrato inoculado. Cada sustrato se pasó por. IN. FO. tamices de 240, 145 y 45 µm, de mayor a menor tamaño. DE. respectivamente, y luego se utilizó la Técnica de Baermann. EM AS. modificado en copa39 (Anexo 6). También se procedió a extraer las plantas pertenecientes a cada tratamiento y se realizó el conteo de. ST. nodulaciones y peso de las radicular de L. esculentum, estos se. expresaron. como. porcentaje. promedio. respectivamente. Cada tratamiento constó de 5 repeticiones; y tanto los tratamientos inoculados y no inoculados con Meloidogyne sp. fueron sometidos a la misma evaluación,. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. resultados. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2. Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride sobre. AC I. Ó. N. huevos de Meloidogyne sp.. IC. 2.2.1 Preparación de las suspensiones de los tratamientos.. M UN. A partir del cultivo puro de cada hongo se preparó una suspensión. CO. de 106 conidios/mL y una suspensión de oxamyl, se colocó. Y. 2mL de cada suspensión en pocillos que contenían 1mL se. IC. A. suspensión de agua destilada estéril con aproximadamente 100. RM. ÁT. huevos.. IN. FO. 2.2.2 Lectura. DE. La evaluación se realizó a las 24, 48 y 72 horas después de la. EM AS. inoculación, realizándose observaciones al microscopio a 40X respectivamente.. SI. ST. Cada tratamiento constó de 4 repeticiones, y también fueron. N. DE. evaluados los tratamientos control.. DI. RE. CC. IO. 2.3. Análisis de datos La determinación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride. sobre juveniles 2 de Meloidogyne sp., se realizó analizando el porcentaje de peso radicular, porcentaje de nodulación en plantas de L. esculentum y el porcentaje de juveniles 2 de Meloidogyne sp. presentes. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. en el sustrato, procesados mediante la prueba de Análisis de Varianza. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Unidireccional (ANOVA), utilizando el paquete estadístico SPSS v.15 40.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. III. RESULTADOS. AC I. Ó. En la figura 1 se observa que el porcentaje del peso radicular de las plantas de L.. IC. esculentum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. es mayor en las plantas. CO. M UN. inoculadas con P. chlamydosporia y T. harzianum.. Y. En la figura 2 se observa que el porcentaje de nodulos presentes en raíces de las. IC. A. plantas de L. esculentum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. es mayor. ÁT. en las plantas inoculadas solo con Meloidogyne sp., mientras que el menor porcentaje. FO. RM. se halló en las plantas inoculadas con T. harzianum.. DE. IN. En la figura 3 se observa que las tres especies de Trichoderma evaluadas disminuyen. EM AS. significativamente la cantidad de juveniles 2 de Meloidogyne sp. luego de 2 meses de. ST. evaluación.. SI. En la figura 4 se observa que tanto T, atroviride, T. harzianum y T. viride como los. IO. N. DE. tratamientos positivos destruyen los huevos de Meloidogyne sp.. CC. En las figuras 5, 6 y 7 se presenta la secuencia en cual T, atroviride, T. harzianum y. DI. RE. T. viride parasitan a los huevos de Meloidogyne sp., observándose que a las 72 horas ocurre una desintegración de los huevos de Meloidogyne sp.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 320. UN IC AC I. 280. 264.1. CO. M. 240. 100. IN. FO. 94.9. 87.2. 161.5. RM. 160 120. 176.9. ÁT IC A. Y. 200. a. a. Sin M.. Con M.. DE. 80. a. b. c. b. c. M. vs P.ch.. M. vs T.a.. M. vs T.h.. M. vs T.v.. AS. 40. EM. Porcentaje (%) de peso radicular de L. esculentum. Ó. 302.6. DE. SI ST. 0. M. vs Ox.. Tratamientos. O. N. Fig. 1. Porcentaje de peso radicular de las plantas de L. esculentum var. Río Grande infectadas con Meloidogyne sp. en 7. DI RE. a: p > 0.05. CC I. tratamientos, después de 2 meses de evaluación con T. atroviride, T. harzianum y T. viride. b: p > 0.05. c: p > 0.05. M: Meloidogyne sp., Ox: Oxamyl, P. ch: P. chlamydosporia, T. a: T. atroviride, T. h: T. harzianum, T. v: T. viride 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC AC I. Ó. 100. 100. M. 80. Y. CO. 70. ÁT IC A. 60 50. 30. AS. 0. b. Sin M.. Con M.. SI ST. EM. a 0. 25.0 16.7. DE. 20 10. 25.0. IN. 25.0. FO. RM. 40. 8.3. a. a. a. a. a. M. vs Ox.. M. vs P.ch.. M. vs T.a.. M. vs T.h.. M. vs T.v.. Tratamientos. DE. Porcentaje (%) de noduloss producidos por Meloidogyne sp. presentes en raíces de L. esculentum. 90. N. Fig. 2. Porcentaje de nódulos presentes en raíces de las plantas de L. esculentum var. Río Grande infectadas con. CC I. O. Meloidogyne sp. en 7 tratamientos, después de 2 meses de evaluación con T. atroviride, T. harzianum y T. viride. b: p < 0.05. DI RE. a: p > 0.05. M: Meloidogyne sp., Ox: Oxamyl, P. ch: P. chlamydosporia, T. a: T. atroviride, T. h: T. harzianum, T. v: T. viride. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) 100. 100. 100. 100. UN IC AC I. 100. CO. M. 80. Y. 60. ÁT IC A. 51.0. 32.8. IN. FO. RM. 40. 20. 19.2. 15.6 11.0. DE. % de larvas de Meloidogyne sp.. 100. Ó. 100. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 0. a. 0. b Con M.. SI ST. Sin M.. c. d. e. e. e. M. vs Ox.. M. vs P.ch.. M. vs T.a.. M. vs T.h.. M. vs T.v.. EM. 0. AS. 6.9. DE. % inicial de Meloidogyne sp.. % final de Meloidogyne sp.. Tratamientos. O. N. Fig. 3. Porcentaje inicial de Meloidogyne sp. en suelo, frente al porcentaje final de juveniles 2 de Meloidogyne sp. en suelo,. DI RE. CC I. en 7 tratamientos, después de 2 meses de evaluación con T. atroviride, T. harzianum y T. viride. a, b, c, d: p < 0.05. e: p > 0.05. M: Meloidogyne sp., Ox: Oxamyl, P. ch: P. chlamydosporia, T. a: T. atroviride, T. h: T. harzianum, T. v: T. viride 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) C. UN IC AC I. a. Ó. B. b. D. E c. F b. DE. IN. FO. RM. x. ÁT IC A. Y. CO. M. A. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM. AS. b. SI ST. Fig. 4. Observación microscópica (40x) de la diferencia de huevos de Meloidogyne sp. no parasitados y parasitados con. ruptura de pared.. DE. cada hongo, a las 72 horas de inoculación: a. Ruptura de pared, b. Penetración de hifas, c. Adherencia de hifas y. D. Huevo de Meloidogyne sp. con T. atroviride. O. N. A. Huevo de Meloidogyne solo. E. Huevo de Meloidogyne sp. con T. harzianum. CC I. B. Huevo de Meloidogyne con oxamyl. DI RE. C. Huevo de Meloidogyne sp. con P. chlamydosporia.. F. Huevos de Meloidogyne sp. con T. viride. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN. IC. B. CO. A. D. E. F. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. C. DI. RE. CC. IO. Fig. 5. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. atroviride, a las 24, 48 y 72 horas de incubación: A. Adherencia de hifa, B. Penetración de hifa, C. Colonización de hifas, D. Deformación de embrión, E. Desintegración de pared y F. Ruptura de huevo.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. AC I. Ó. N. B. CO. M UN. A. A. Y. D. RM. ÁT. IC. C. DE. IN. FO. C. E. F. F. N. DE. SI. ST. EM AS. E. DI. RE. CC. IO. Fig. 6. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. harzianum, a las 24, 48 y 72 horas de incubación: A. Adherencia de hifa, B. Penetración de hifa, C. Colonización de hifas, D. Deformación de embrión, E. Desintegración de pared y F. Ruptura de huevo.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. B. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. A. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. C. DE. IN. D. E. N. DE. SI. ST. EM AS. F. DI. RE. CC. IO. Fig. 7. Observación microscópica (40 x) de la secuencia de destrucción que sufren los huevos de Meloidogyne sp. frente a T. viride, a las 24, 48 y 72 horas de incubación: : A. Adherencia de hifa, B. Penetración de hifa, C. Colonización de hifas, D. Deformación de embrión, E. Desintegración de pared y F. Ruptura de huevo.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. IV. DISCUSIÓN. AC I. Ó. Al evaluar el efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y. IC. Trichoderma viride sobre Meloidogyne sp., se observó que el porcentaje de peso. M UN. radicular de Lycopersicon esculentum (Fig. 1) disminuye cuando Meloidogyne sp.. CO. está sólo o con Oxamyl; esto quizás se deba a que las raíces altamente infectadas con. A. si bien la mayoría de los nematicidas como el oxamyl. IC. radicales16. Asimismo,. Y. nematodos son mucho más cortas que las sanas, tienen menos raíces laterales y pelos. ÁT. controlan muy bien los nematodos, tiene cierto efecto negativo sobre la planta, ya que. RM. paralizan su desarrollo radicular, esto unido a la destrucción de mucha flora. DE. IN. FO. microbiana natural, ocasiona un cierto estrés en la planta; respectivamente41.. EM AS. Por otro lado, el porcentaje de peso radicular de L. esculentum aumentó significativamente en los tratamientos utilizados respecto a las plantas no inoculadas. ST. (T1), lo que probablemente se deba a la capacidad bioestimulante de Trichoderma. SI. spp., a la producción de metabolitos estimuladores del crecimiento vegetativo por. IO. N. DE. parte del hongo, o la acción simultánea de ambos factores 20,42.. CC. Pocasangre et al.43, sugieren que hongos endofíticos como P. chlamydosporia y. DI. RE. Trichoderma pueden alterar la fisiología de las plantas llevándolas a aumentar su crecimiento, estimulando la producción de exudados de la raíz e incremento en la cantidad de raíces adicionalmente al biocontrol de nematodos. Sin embargo, T.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. harzianum se asocia a las raíces de la planta proporcionándole un mayor vigor y. AC I. Ó. N. crecimiento44, es por ello que tuvo el mayor porcentaje de peso radicular.. IC. Zum45 encontró que vitroplantas inoculadas con hongos del género Fusarium y. M UN. Trichoderma, habían tenido un incremento en peso de raíces y del sistema foliar, de. 47. , quienes demostraron que. Y. obtuvieron Windman et.al.46 y Andreu et.al.. CO. 35 y 19% comparado a plantas que no fueron inoculadas. Resultados similares. IC. A. Trichoderma spp, incrementa el peso de la raíz y el tallo del tomate y el tabaco hasta. ÁT. un 46 y 43% respectivamente, al compararlo con el control sin tratar. En plántulas. RM. crecidas en vermiculita a partir de semillas tratadas con T. harzianum, el porcentaje. FO. de germinación, el peso seco, y la longitud de las plántulas fue superior al de las no. DE. IN. tratadas, debido probablemente a la mayor absorción de nutrientes48.. EM AS. Con respecto al porcentaje de nódulos producidos por Meloidogyne sp. en raíces. ST. de L. esculentum (Fig.2), según el análisis estadístico solo existe diferencia. SI. significativa con el tratamiento 2 (control positivo) donde solamente se inoculó. DE. Meloidogyne sp. respecto a los demás tratamientos, esto quiere decir que las especies. IO. N. de Trichoderma inoculadas si afectaron al nematodo impidiendo que se forme mayor. CC. cantidad de nódulos a diferencia del tratamiento 2 donde el porcentaje de nódulos. DI. RE. formados en raíces fue mayor que todos. En relación a los nódulos debemos añadir que J2 presente en el suelo son atraídas a la zona de elongación radicular y penetran la raíz para luego migran intercelularmente, separando las células por la lámina media en el tejido cortical49 e induciendo un proceso de rediferenciación que conlleva a la 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. formación de células de alimentación multinucleadas, llamadas células gigantes o. AC I. Ó. N. nódulos49,50,51.. IC. El nematicida oxamyl (control positivo) disminuyó a un 75% la cantidad de. M UN. nódulos formados respecto al total, mientras que en los tratamientos donde se. CO. aplicaron las 3 especies de Trichoderma, se presentó una disminución del porcentaje. Y. de nódulos (Fig. 2), esto puede deberse a que Trichoderma al ser aplicado a las raíces,. IC. A. forma una capa protectora, haciendo una simbiosis. El hongo se alimenta de los. ÁT. exudados de las raíces y las raíces son protegidas por el hongo y al mismo tiempo. RM. reduce o elimina las fuentes de alimento para las J2 de Meloidogyne, impidiendo. FO. además el ingreso del nematodo a la raíz, variando este tipo de protección según la. DE. IN. especie de Trichoderma52.. EM AS. El porcentaje inicial de huevos de Meloidogyne sp. en suelo frente al porcentaje. ST. final de J2 de éste nematodo (Fig. 3), disminuyó significativamente respecto al. SI. control el cual tenía solo Meloidogyne sp., sin embargo, al realizar el recuento final. DE. de este mismo control se observó que hubo una disminución de un 50% de. IO. N. nematodos, esto probablemente se deba a que la matriz gelatinosa que cubre y. CC. protege la masa de los huevos haya sido parcialmente destruida por el lavado que. DI. RE. fueron sometidos antes de ser inoculados en el sustrato exponiendo a los huevos afectando su viabilidad53.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Al realizar el análisis estadístico se observó que la tres especies de Trichoderma. N. disminuyen la población de juveniles 2 de Meloidogyne sp., siendo T. harzianum el. AC I. Ó. que presentó mayor efecto, esto probablemente se deba a que Trichoderma es capaz. IC. de producir diferentes antibióticos volátiles y no volátiles; y que se ha demostrado. M UN. que puede parasitar, controlar y destruir los fitonematodos20. Es así que, Pérez et. al.54. CO. afirman que Trichoderma spp. es un biorregulador efectivo contra nematodos del. Y. género Meloidogyne por medio de sus toxinas e hifas. Méndez y Polanco 55 informan. IC. A. resultados similares, obteniendo un notable decrecimiento de las poblaciones de. ÁT. nematodos formadores de agallas con una dosis de 8kg/ha de T. harzianum en. RM. diferentes etapas del cultivo del tomate al reducir las poblaciones de grado tres y. DE. IN. FO. cuatro, de una escala de cinco grados, a grado uno.. La destrucción que sufren los huevos de Meloidogyne sp. por T. atroviride, T.. EM AS. harzianum y T. viride (Fig. 4, 5, 6 y 7), quizás se deba a que este género parasita al. ST. fitopatógeno mediante enrollamiento, ganchos y cuerpo de tipo apresorio, que. SI. penetran la pared celular por acción hidrolítica de las enzimas quitinasas y. DE. gluconasas56. Estas enzimas pueden degradar la cutícula de los insectos, cuya. IO. N. estructura está compuesta por quitina57,58,59. La quitina está presente en la cutícula de. CC. los huevos de nematodos, afectándose grandemente con el tratamiento de las especies. DI. RE. de Trichoderma 60,61.. Las cepas de Trichoderma se diferencian entre sí por los niveles de expresión de las enzimas hidrolíticas, lo cual determina sus características antagónicas61, esto 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. explicaría porque el porcentaje de J2 de Meloidogyne sp difiere en las tres especies. N. de Trichoderma tratadas, además éste género produce metabolitos que actúan como. AC I. Ó. nematicidas, tales como Trichodermin, Suzukacilina, Alameticina, Dermadina,. IC. Penicilina, Trichotecenosa y Tricorzinianos que se han reportado como sintetizados. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. por Trichoderma harzianum; o Gliotoxina producido por Trichoderma viride 62.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. V. CONCLUSIONES. AC I. Ó. Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride tienen un. IC. efecto negativo sobre los huevos y juveniles 2 de Meloidogyne sp. en condiciones de. CO. M UN. laboratorio.. Y. T. harzianum es el que ejerce el mayor efecto inhibitorio sobre juveniles 2 de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Meloidogyne sp.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. VI. RECOMENDACIONES. AC I. Ó. Realizar estudios en campo utilizando Trichoderma nativos para evaluar si el que se obtuvieron a nivel de. IC. comportamiento de dichas cepas son las mismas. M UN. laboratorio, teniendo en cuenta que las condiciones ambientales podría influir en los. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. resultados.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Ó. Godoy T, Yañez M. El nematodo agallador. En: Memorias del curso de. AC I. 1.. N. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. IC. fitopatógenos del suelo en hortalizas. Universidad Autónoma de Sinaloa,. Sandoval B, Claudio R. Manejo integrado de enfermedades en cultivos. CO. 2.. M UN. México; 1999; p. 19 – 22.. Y. hidropónicos. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la. Carrillo – Fasio J, García - Estrada R, Allende – Molar R, Márquez – Zequera I,. ÁT. 3.. IC. A. Alimentación. Universidad de Talca. 2004; p. 1 – 53.. RM. Cruz – Ortega J. Identificación y Distribución de Especies del Nematodos. FO. Nodulador (Meloidogyne spp.) en Hortalizas, en Sinaloa, México. Rev. Mexicana. Guzmán O, Castaño J. Identificación de Nematodos Fitoparásitos en Guayabo. EM AS. 4.. DE. IN. de Fitopatología. 2000; 18(2): 115 – 119.. (Psidium guajava L.), en el Municipio de Manizales (Caldas), Colombia. Rev.. Cristóbal J, Herrera – Parra E, Reyes V, Ruiz E, Tun J, Celis T. Glomus. SI. 5.. ST. Acad. Colomb. Cienc. 2010; 34 (130): 117 – 125.. DE. intraradices para el control de Meloidogyne incognita (Kofoid & White). Leyva A, Castellanos L, Pérez A. Alternativas de lucha contra nematodos. DI. RE. CC. 6.. IO. N. Chitwood en condiciones protegidas. Rev. Fitosanidad. 2010; 14: 25 – 29.. noduladores en el cultivo del pepino en condiciones de organopónicos. Rev. Centro Agrícola. 2009; 36(2): 5 – 10.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..