Aislamiento de hongos celulolíticos en compost utilizado en plantas ornamentales en la ciudad de Chimbote, Perú

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO Facultad de Ciencias Biológicas. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Escuela Académico Profesional de Microbiología y Parasitología. RM. Aislamiento de hongos celulolíticos en compost utilizado en plantas. DE. IN. FO. ornamentales en la ciudad de Chimbote, Perú. ST. EM AS. Br. Luis Enrique González Obeso. DE. SI. TESIS para obtener el título profesional de. DI. RE. CC. IO. N. BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO. Trujillo - Perú 2012. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. AC IÓ. N. A DIOS por iluminar mi vida y ser mi guía en todos. CO. M. UN IC. los pasos que doy.. Y. A mis padres por el amor. IC. A. incondicional apoyo brindado. DE. IN FO. RM. ÁT. durante todo este tiempo.. Al amor de mi vida mi hijo por. darme. la. AS. Luciano. EM. fuerza de seguir adelante y. CC. IO. N. DE. SI ST. ser cada día mejor.. RE. A mis grandes amigos de la. DI. universidad por todos los gratos momentos que pasamos y por estar conmigo en las buenas y en las malas.. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. Al Ms.C. y amigo Juan Héctor Wilson Krugg, Profesor Auxiliar del. AC IÓ. N. Departamento de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias. Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo. por su asesoramiento,. UN IC. dirección, y apoyo constante en la presente investigación.. M. A mi familia, por el apoyo económico y moral que me brindó para. Y. CO. la culminación de mi vida universitaria.. A. A los profesores de la Escuela de Microbiología y Parasitología por. IC. su amistad, dedicación, y por brindarme sus conocimientos académicos durante. RM. ÁT. mi formación como futuro profesional.. IN FO. A mis grandes amigos de la Universidad Nacional de Trujillo con quienes pase gratos e inolvidables momentos y además me apoyaron en todos mis. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. proyectos, los llevaré eternamente en mí corazón y muy agradecido de su amistad.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AC IÓ. N. QUE OTORGAN EL TÍTULO DE BIÓLOGO MICROBIÓLOGO. UN IC. Dr. Orlando Velásquez Benites. IC. A. Y. CO. M. RECTOR. ÁT. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. DE. IN FO. RM. VICE-RECTOR ACADÉMICO. AS. Dra. Flor Marlene Luna Victoria Mori. Dr. Pedro Lavalle Dios SECRETARIO GENERAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. VICE-RECTOR ADMINISTRATIVO. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. UN IC. AC IÓ. N. QUE OTORGAN EL TITULO DE BIOLOGO MICROBIOLOGO. Dr. Hermes Escalante Añorga. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. DECANO. IN FO. Dr. César Augusto Jara Campos. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. PROFESOR SECRETARIO. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. Señores miembros del jurado:. UN IC. En cumplimiento con las disposiciones reglamentarias para la obtención de grados y títulos vigentes de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. CO. M. Parasitología, Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de. Y. Trujillo, someto a vuestra consideración y criterio la tesis: Aislamiento de. IC. A. hongos celulolíticos en compost utilizado en plantas ornamentales en la. DE. IN FO. RM. obtener el titulo de Biólogo Microbiólogo.. ÁT. ciudad de Chimbote, Perú, con la cual pretendo cumplir con los requisitos para. SI ST. EM. AS. Trujillo, Enero del 2012. DI. RE. CC. IO. N. DE. Br. Luis Enrique González Obeso. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. UN IC. _________________________________ Ms.C. Gerardo Alayo Espinoza. IC. A. Y. CO. M. Presidente. RM. ÁT. __________________________________. IN FO. Ms.C. Juan Hector Wilson Krugg. SI ST. EM. AS. DE. Secretario. Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza Vocal. DI. RE. CC. IO. N. DE. _______________________________. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÒN. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que la. AC IÓ. N. presente tesis, ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo. CO. M. UN IC. aprobado por UNANIMIDAD.. Y. _________________________________. DE. IN FO. RM. ÁT. Presidente. IC. A. Ms. C Gerardo Alayo Espinoza. AS. ______________________________. Secretario. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Ms.C. Juan Hector Wilson Krugg. _______________________________ Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza Vocal. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE DEDICATORIA ...................................................................................................... i AGRADECIMIENTO ............................................................................................ ii. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN. UN IC. EL TITULO DE BIOLOGO MICROBIOLOGO .................................................. iii. M. PRESENTACIÓN ....................................................................................................v. CO. MIEMBROS DEL JURADO ................................................................................. vi. A. Y. APROBACIÓN ..................................................................................................... vii. ÁT. IC. RESUMEN. INTRODUCCIÓN ...........................................................................................1. II.. MATERIAL Y MÉTODOS .............................................................................6. IN FO. RM. I.. 2.1. Material. EM. 2.2. Método. AS. DE. 2.1.1. Material biológico...................................................................6. SI ST. 2.2.1. Toma de muestra...................................................................6 2.2.2. Aislamiento de hongos celulolíticos .....................................6. 2.2.4. Determinación de hongos aislados .......................................7. IO. N. DE. 2.2.3. Obtención de cultivos puros .................................................7. CC. III. RESULTADOS ..............................................................................................8. DI. RE. IV. DISCUSION ..................................................................................................13 V.. CONCLUSION ............................................................................................17. VI. RECOMENDACIONES ...............................................................................18 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...........................................................19 VI. ANEXOS viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 01. Agar celulosa fosfato. Anexo 02. Pilas de compost del vivero municipal del santa.. Anexo 03. Muestras de compost obtenidas de diferentes viveros procedentes. AC IÓ. N. de la ciudad de Chimbote Preparación de Inóculo.. Anexo 05. Desarrollo de hongos celulolíticos en placas conteniendo agar. UN IC. Anexo 04. Obtención de cultivos puros en frascos conteniendo agar celulosa. Y. Anexo 06. CO. M. celulosa fosfato.. IC. A. fosfato.. Característica microscópica de Scopuraliopsis.. Anexo 08. Característica microscópica de Cladosporium.. Anexo 09. Característica microscópica de Penicillium.. Anexo 10. Característica microscópica de Torula.. Anexo 11. Colonia de Fusarium desarrollado sobre agar celulosa fosfato.. Anexo 12. Colonia de Scopulariopsis desarrollado sobre agar celulosa fosfato. Anexo 13. Colonia de Cladosporium desarrollado sobre agar celulosa fosfato. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. Anexo 07. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN En el presente trabajo se aislaron e identificaron hongos celulolíticos recolectados de distintos viveros de la ciudad de Chimbote – Ancash.. AC IÓ. N. Las muestras fueron sembradas en medio agar celulosa fosfato para el aislamiento. UN IC. de hongos de suelo, incubándose a temperatura ambiente durante 5 días.. En las muestras analizadas, Aspergillus, Fusarium y Cladosporium son los. CO. M. géneros con mayor presencia en las muestras.. Y. Así mismo se logro aislar en menor número, los hongos celulolíticos Torula,. IC. A. Mycogone y Penicillium.. ÁT. Se observó las características macro y microscópicas de los hongos que se. RM. aislaron de las muestras de compost obtenidas de los viveros muestreados.. teniendo. en. cuenta. las. características. macroscópicas. y. DE. taxonómicas,. IN FO. Para la identificación de género fue necesaria la utilización de claves. AS. microscópicas.. EM. La población fúngica encontrada pertenece a los siguientes géneros:. SI ST. Scopulariopsis, Cladosporium, Fusarium, Aspergillus, Mycogene, Penicillium,. DE. Torula.. DI. RE. CC. IO. N. Palabras claves: Compost, Aislamiento, Identificación. Celulolíticos.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II INTRODUCCIÓN. N. Los hongos, en razón de su ubicuidad y por su número. AC IÓ. sorprendentemente grande, desempeñan un papel muy importante en las. UN IC. modificaciones lentas pero constantes que tienen lugar a nuestro alrededor (Christenses, 1961; Alexopoulus, 1977). Además los hongos, organismos macro. CO. M. y microscópicos, unicelulares o pluricelulares, y desprovistos de clorofila,. Y. necesitan alimentarse de carbohidratos, lípidos, proteínas y de micronutrientes. IC. A. (fósforo, azufre, potasio, cloro, sodio, magnesio) y algunas vitaminas. RM. ÁT. (Alexopoulus, et al 1996).. IN FO. Los hongos nos afectan directamente pues desempeñan un gran papel. DE. en el marco general de la naturaleza. La mayoría de los hongos son “barrenderos”,. AS. crecen en los restos de plantas y animales y se pudren, convirtiéndolas en ricas. EM. tierras, constituyen un común sustento científico el que sin las plantas verdes la. SI ST. vida no sería posible en la tierra, ya que estas son los únicos seres vivos capaces de servirse de la energía solar para elaborar productos de los que toda la vida. DE. restante depende, y no es menos cierto que sin los hongos la mayoría de las. IO. N. plantas verdes no podrían subsistir, porque dependen de los productos de la. CC. putrefacción del suelo debido a aquellas (Christensen, 1961). Asimismo, los. DI. RE. hongos son los principales agentes de la descomposición de la materia orgánica. Degradan moléculas complejas como la celulosa, la hemicelulosa, las pectinas, el almidón y la lignina (Akhtar et al., 1998; Breen & Singleton, 1999).. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Si se observa a simple vista una hoja seca, su descomposición inicial pone en evidencia que parte entre las nerviaciones, constituida principalmente por celulosa, desaparece primero. Ello es debido a que la velocidad de. AC IÓ. N. descomposición no solo depende de la composición, sino también de la estructura. UN IC. anatómica (Gaucher, 1971) y de la parte de la planta de que se trate. Paralelamente, se va produciendo cambios bioquímicos en los tejidos senescentes,. CO. M. hay síntesis de enzimas, ruptura de la membrana celular, autooxidación y. Y. formación de compuestos de tipo fenólico. La necromasa es fragmentada. IC. A. progresivamente en partículas de tamaño cada vez menor, hasta el punto que su. ÁT. estructura histológica va siendo cada vez más irreconocible. La alteración de la. RM. materia orgánica en el suelo esta inseparablemente ligada a la actividad de los. IN FO. microorganismos. Las sustancias solubles (azúcares, aminoazúcares, fenoles,. DE. aminoácidos, etc.) liberadas durante la descomposición pueden ser lixiviadas. AS. rápidamente de los residuos, ser utilizadas como nutrientes por los organismos. EM. heterótrofos del suelo o pasar a formar parte de la estructura de sustancias. SI ST. húmicas en formación.. DE. Como se ha indicado, en una cierta escala temporal y en condiciones. IO. N. naturales en que el carbono orgánico del suelo se intercambie activamente con el. CC. de la atmósfera, el contenido de materia orgánica no aumentará de forma. DI. RE. indefinida. Ello se debe a que parte de la materia orgánica incorporada y de la que contiene el propio suelo experimentan procesos de mineralización, unos rápidos y otros mucho más lentos. Partiendo de la materia orgánica fresca, se observa una primera etapa muy activa, que corresponde a la liberación de materiales orgánicos. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. lábiles (azúcares, aminoazúcares, aminoácidos y ácidos orgánicos), seguida de una segunda etapa en la que la actividad biológica es decreciente. En ella se mineralizan la celulosa, hemícelulosa, quedando los materiales recalcitrantes. AC IÓ. N. (Hausenbuiller, 1972).. UN IC. La descomposición de la materia orgánica genera una elevada. M. demanda de N, ya que los hongos y bacterias que intervienen en su. CO. transformación tienen relaciones C/N mucho más bajas que la materia orgánica. A. Y. que consumen. Por ello, se puede predecir que la materia orgánica con contenidos. ÁT. IC. altos de N se descompondrá más rápidamente, al favorecer el crecimiento. IN FO. positivo en la descomposición.. RM. microbiano (Cotrufo et al., 2000) y que un aporte de N mineral tendrá un efecto. DE. Las fuentes de origen de los microorganismos degradadores de. EM. AS. celulosa son diversas, considerándose entre otras: suelo (Zaldivar et al. 1987;. SI ST. Ceroni y Gutiérrez-Correa 1988), despojos de vegetales y hojarascas (Magnelli et al. 1987), efluentes de industrias (Mullings & Parish 1984; Prasertsan et al. 1992),. DE. residuos municipales (Stutzenberger et al. 1970), estiércol (Lee & Blackburn. Un sustrato rico en microorganismos degradadores de dichos. DI. RE. CC. IO. N. 1975), compost (Ramírez 1993).. vegetales es el compost, el que en su composición contiene: materia verde fibrosa (paja, maleza, rastrojos de cultivo), guanos ricos en proteínas y humedad de 40 – 60 (Ferruzi, 1987). Trabajos previos realizados en compost, como el de Zuñiga (1987) reporta recuentos de 106 ufc/g es para hongos mesófilos, de las cuales la 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. mayoría son celulolíticos pertenecientes al género Aspergillus, la que tiene su explicación en el hecho de que la materia verde fibrosa componentes del compost, está compuesta principalmente por celulosa, 20% del volumen) que se constituyen. AC IÓ. N. en el principal sustrato de este tipo de hongos (Ferruzi, 1987).. UN IC. Los organismos capaces de degradar celulosa, se encuentran. M. distribuidos entre: los hongos filamentosos, las bacterias y las eubacterias. CO. (Dommerges & Mangenot, 1970; Enari & Markkanen, 1977) y constituyen un. A. Y. grupo funcional diversos e importantes desde el punto de vista ecológico. Estos. ÁT. IC. organismos poseen enzimas hidrolíticas: endo beta -1,4 gluconasa, exo beta -1,4. RM. gluconasa y beta 1,4 glucosidasa que son inducidas por la presencia de celulosa. IN FO. (Cooke & Whipps 1993).. DE. En la actualidad, con el impulso de la biotecnología en el mundo, se. EM. AS. está usando a los hongos celulolíticos para obtener enzimas celulolíticas que. SI ST. permiten la bioconservación de los residuos lignocelulolíticos en azucares, los cuales pueden ser después derivados a etanol, proteínas u otros productos; los que. DE. pueden contribuir a disminuir dos aspectos deficitarios en la actividad humana,. IO. N. como son : alimento y energía; por lo que está siempre a la búsqueda de nuevas. CC. especies de hongos celulolíticos que presentan un alto rendimiento en cuanto a. DI. RE. producción de celulasas se refiere (Sternberg, 1976; Canevasini y Gattlen, 1981; Chabel y col, 1987; Gutierrez- correa, 1987; Royer y Nakas, 1987; Klyosov, 1990).. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Considerando entonces que nuestro país no está exento de la acumulación y pérdida de los desechos celulósicos generados anualmente a causa de las actividades agrícolas, forestales, industriales (maderas, papeleras, etc.) y. AC IÓ. N. municipales, lo que constituye una constante de contaminación ambiental, la. UN IC. hidrólisis enzimática mediante el uso de celulasas o la degradación por microorganismos celulolíticos sería una alternativa para convertir estos residuos. CO. M. de tal forma que podamos obtener provecho de ellos.. A. Y. Ya que la hidrólisis enzimática por microorganismos, especialmente. ÁT. IC. por hongos, es una alternativa factible para el reuso de residuos lignocelulósicos. RM. contaminantes y teniendo en cuenta los puntos expuestos anteriormente, se hace. IN FO. necesario seleccionar nuevas cepas de hongos productores de celulosas que. DE. brinden mejores perspectivas en la degradación de sustratos celulósicos.. que hongos. EM. AS. El presente trabajo tiene como objetivo conocer. SI ST. degradadores de celulosa están presentes en compost utilizado en plantas. DI. RE. CC. IO. N. DE. ornamentales procedentes de diferentes viveros de la ciudad de Chimbote, Perú.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II. MATERIAL Y MÉTODOS 2.1. Material. AC IÓ. N. 2.1.1. Material biológico. procedentes de la ciudad de Chimbote-Perú.. CO. M. 2.2. Método. UN IC.  5 Kilos de compost obtenidos de 5 viveros (1 Kilo por vivero). Y. 2.2.1. Toma de muestra. IC. A. Se recolectó 100 gramos de compost por muestra, los que se colocó en. RM. ÁT. bolsas de papel de primer uso previamente rotulado, para. IN FO. posteriormente ser trasladados al Laboratorio de Fitopatología de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de. DE. Trujillo; para su procesamiento.. EM. AS. 2.2.2. Aislamiento de hongos celulolíticos. SI ST. Se pesó 10g de la muestra de compost previo homogenizado, y se le agregó 90mL de agua destilada estéril (dilución 10-1), posteriormente. DI. RE. CC. IO. N. DE. se tomó 1mL de la dilución mencionada y se mezcló en 9mL de agua destilada estéril (dilución 10-2); y se repitió este procedimiento hasta obtener una dilución de 10-3. Terminado el protocolo anterior se sembró por duplicado 0.1 mL de la última dilución en placas de Petri conteniendo Agar Celulosa Fosfato (Anexo 1) luego se homogenizó con ayuda de una asa de Drigalsky. y finalmente se incubó a. temperatura ambiental (25 ± 2ºC) durante cinco días.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2.3. Obtención de cultivos puros Transcurrido el tiempo de incubación, las colonias fúngicas que se. N. desarrollaron fueron observadas macro y microscópicamente, luego se. AC IÓ. resembró en tubos de ensayo conteniendo ACF, e incubadas a. UN IC. temperatura ambiental (25 ± 2ºC) durante 5 a 7 días a fin de obtener. M. cultivos puros.. CO. 2.2.4. Determinación de hongos celulolíticos. características. macroscópicas. IC. las. o. culturales. y las. ÁT. cuenta. A. Y. Para la determinación de los hongos celulolíticos aislados, se tuvo en. RM. microscópicas observadas en el cultivo puro, para este último se. IN FO. realizó microcultivos en cámara húmeda utilizando la Técnica del Bloque Agar; utilizándose para su determinación las claves. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. taxonómicas (Barnett, H.1960; Gilman, J. 1963).. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III. RESULTADOS. De las 50 muestras de compost recolectadas y procesadas procedentes de. AC IÓ. N. diversos viveros de la ciudad de Chimbote, se aislaron 7 géneros de hongos. UN IC. celulolíticos los cuales fueron sembrados en el medio agar celulosa fosfato. Sin embargo, las diferencias se dieron puntualmente en el número de UFC de hongos. CO. M. celulolíticos presentes en las muestras de los diversos viveros. Y. En la Tabla 1 se muestran los hongos celulolíticos aislados por gramo de. IC. A. compost, procedentes de diversos viveros de la ciudad de Chimbote-Perú, durante. ÁT. junio - agosto del 2011.. RM. En la Tabla 2 se muestran las características macroscópicas y microscópicas de. IN FO. las colonias de hongos aisladas en compost durante el mes de Junio y Agosto del. DE. 2011. Chimbote – Perú.. las observaciones macro y microscópicas de. AS. En las Figura 1 y 2 se presentan. EM. los hongos aislados en compost procedentes de diversos viveros de las ciudad de. SI ST. Chimbote-Perú. En estas se puede observar; los hongos celulolíticos con mayor. DI. RE. CC. IO. N. DE. presencia son Aspergillus y Fusarium. Fig.1: A1, A2; Fig.2: B1, B2;. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 1: Hongos celulolíticos aislados por gramo de compost, procedentes de diversos viveros de la ciudad de Chimbote-Perú, durante junio - agosto del. N. 2011. Género / Especie. N de colonias aisladas. Vivero Municipal del Santa. Scopulariopsis Aspergillus sp 1 Fusarium Torula Aspergillus sp 2. 4615 4925 5485 1600 2035. Vivero Municipal de Chimbote. Scopulariopsis Aspergillus sp 1 Fusarium Aspergillus sp 2 Cladosporium. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. Procedencia. Scopulariopsis Aspergillus sp 2 Fusarium Penicillium Mycogone. 895 700 1390 100 1145. Scopulariopsis Aspergillus sp 1 Fusarium Cladosporium Penicillium Mycogone Aspergillus sp 2. 4410 5950 1250 1730 1610 2005 250. Scopulariopsis Aspergillus sp 2 Aspergillus sp 1 Fusarium Cladosporium. 17987 4500 2560 2720 55. DE. IN FO. Vivero Municipal de Casma. DE. SI ST. EM. AS. Vivero Forestal Chimbote. DI. RE. CC. IO. N. Vivero Del Centro Experimental Proyecto Chinecas. 18700 1525 5680 6375 700. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 2: Características Macroscópicas y Microscópicas de las colonias de hongos aisladas en compost durante el mes de Junio y Agosto del 2011. Chimbote. Genero / Especie. AC IÓ. N. – Perú.. Características Macroscópicas. Fusarium. color Conidias grandes, redondeadas y en cadenas. Conidióforo: Corto y ramificado. Colonias blancas Microconidias abundantes, con moderadamente levantadas, una menor cantidad de colonias anaranjadas macroconidias en forma de media luna.. Aspergillus sp 2. Colonias blancas asentadas. Aspergillus sp 1. Colonias de color negro o Cabezas conidiales biseriadas marrón muy oscuro; reverso y radiales; Vesícula casi incoloro a amarillo. esférica.. Torula. Colonias grises. UN IC. Colonias pulverulentas canela, marrón. Y. CO. M. Scopulariopsis. Características Microscópicas. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Conidióforos variables. Conidióforos cortos, oscuros, simples, ramificados o ausentes. Colonias rugosas que viran de Micelios y conidias en cadenas marrones a negras largas y cortas. EM. AS. DE. Cladosporium. DE. SI ST. Penicillium. Colonias blancas compactas y Hifas ramificadas entretejidas, de colores brillantes. conidióforos cortos.. DI. RE. CC. IO. N. Mycogone. Colonias pulverulentas, de color Hifas largas que terminan en gris en el anverso y marrón en el pequeños racimos de reverso, redondeadas con microconidias. radiaciones, borde regular y superficie lisa.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Colonias. CO. M. Aspergillus. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. A1. DE. A2. Vesícula de. CC. IO. N. Aspergillus. DI. RE. Fig. 1 Observaciones macro y microscópicas de los hongos aislados en compost. procedentes de diversos viveros de las ciudad de Chimbote-Perú A1. Observación macroscópica: Colonias de Aspergillus en agar celulosa fosfato. A2. Observación microscópica: Vesícula de Aspergillus.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. Colonias Fusarium. Macroconidias Fusarium. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. B1. SI ST. EM. B2. DE. Fig. 2 Observaciones macro y microscópicas de los hongos aislados en compost. IO. N. procedentes de diversos viveros de las ciudad de Chimbote-Perú. CC. B1. Observación macroscópica: colonia de Fusarium en agar celulosa fosfato. .. DI. RE. B2. Observación microscópica: macroconidias de Fusarium.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. Del las muestras de compost utilizadas en plantas ornamentales en los. AC IÓ. N. distintos viveros de la ciudad de Chimbote-Perú se logró aislar e identificar los diversos géneros de hongos celulolíticos, esto podría deberse a varios factores;. UN IC. entre otros, a las características climatológicas existentes en la época que se. M. muestreo o a la composición del compost analizado, lo que impidió el normal. CO. desarrollo de especies celulolíticas de hongos (Sarasola, 1995).. Y. Al igual que todos los demás seres vivos, los hongos necesitan. IC. A. alimentarse. Algunos se nutren de una variedad extraordinariamente grande de. RM. ÁT. alimentos y parecen capaces de digerir y están especializados que solo se. IN FO. desarrollan en clases específicas de sustrato (Christenses, 1964; Alexopoulus, 1977). El protoplasma que llena las células de crecientes puntos del micelio,. DE. manufactura diversas clases de enzimas y cierto número de ácidos orgánicos. Esas. AS. enzimas y esos ácidos se difunden a través de la delgada pared, por la materia en. EM. la que el hongo producen químicos digestivos que se difunden por la madera y lo. SI ST. descomponen en azúcares simples, los cuales se destruyen a su vez por el micelio,. DE. convirtiéndose en más hongos (Christenses, 1964).. N. Analizando los resultados obtenidos, se observó que se ha llegado a aislar. CC. IO. géneros de hongos que presentan especies reconocidas como celulolíticas; (Tabla. DI. RE. 1) así tenemos a Penicillium, Aspergillus (Mendels, 1976; Rease, 1976;. Conevascini y Gottlen, 1981; Chahel, 1987; Gutierrez – Correa, 1987; Royer y Nakes, 1987; klyoser, 1990; Person y col, 1991). Los hongos celulolíticos se caracterizan por poseer un complejo enzimático conocido como celulasas que está formado principalmente por tres. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. grupos de enzimas: Celobiohidrolasas, endo-gluconasas y B-glucosidasa; las que al actuar sinérgicamente degradan a la celulosa (que es un polímero completo de glucosa) hasta glucosa. Sin embargo, a pesar de que existen numerosos hongos. AC IÓ. N. celulolíticos, no todos poseen el complejo completo, como es el caso de algunas. UN IC. especies de Aspergillus (Mendels, 1976; Reese, 1976; Sternberg, 1976; Conevescini y Gettlen, 1981; Chehel y col., 1987; Gutierrez- Correa, 1987; Royer. Y. CO. M. y Nakes, 1987, Word y col. 1988; Klyosov, 1990, Persson y col. 1991).. IC. A. Zúñiga (1987), al trabajar con compost que tenía como componentes. ÁT. rastrojos de frijol y estiércol de vacuno, logró aislar hongos celulolíticos de. RM. Aspergillus, obteniendo recuentos de 106 ufc/g , lo que nos indica la riqueza de. IN FO. este tipo de muestras en hongos celulolíticos, debido a que sus características y las. DE. condiciones en que se encuentran son las más apropiadas para el desarrollo de esta. AS. clase de hongos, como es el hecho de presentar una temperatura entre 28 – 30 °C. EM. y un porcentaje de celulosa con respecto a los residuos vegetales que está entre 45. SI ST. – 60% (Mendels, 1976; Word y col, 1988). Debido a la composición del compost y su elevada concentración de componentes celulolíticos (paja, restos vegetales,. DE. estiércoles de herbívoros, etc.) se logró aislar a Aspergillus y Fusarium. IO. N. reconocido por su elevada actividad celulolítica , además se logró aislar otras. CC. especies de hongos en menor cantidad que el anterior esto puede deberse a la. DI. RE. elevada concentración. inicial de Aspergillus, debido a que la actividad. celulolítica de Aspergillus posee niveles bajos en la producción de los componentes endo y exoglucanasas en cultivo simple, pero en cocultivo con otros hongos se obtiene un marcado incremento (Vílchez Paz, Laura.2002). En las. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. primeras fases del compost se produce una caída del pH que favorece el crecimiento de los hongos (generalmente acidófilos) y la ruptura de la celulosa y la lignina. En general los ácidos orgánicos son posteriormente consumidos en. AC IÓ. N. fases posteriores.. UN IC. Además la concentración de nitrógeno en el compost, Alexander (1980), explicó que los microorganismos requieren 1 parte de nitrógeno por cada 35 partes de. CO. M. celulosa oxidada, ya que cada 100 partes de celulosa degradada se utilizan 3. Y. partes de nitrógeno. El estiércol es rico en nitrógeno, lo que justificaría la mayor. IC. A. degradación de celulosa en los tratamientos con mayor porcentaje de estiércol.. ÁT. (Alexander M., 1980. Introducción a la Microbiología del Suelo. AGT Editor. RM. S.A., 491 pp). La aplicación de nitrógeno inorgánico aumenta la descomposición. IN FO. de la celulosa en el suelo y tanto las sales de amonio con las de nitrato son. DE. fuentes de este elemento, por tanto el nivel de nitrógeno en el suelo es un factor. AS. limitante (Barrera Cristina, P. Carlosama, P. Flores .2010.). EM. En consecuencia la obtención de mejores microorganismos celulolíticos y. SI ST. su posterior cultivo “in vitro” nos permitirá contar con una fuente fácilmente disponible de enzimas celulolíticas para ser utilizadas en la hidrólisis de residuos. DE. lignocelulósicos. Además de la producción de la celulasa, los organismos. IO. N. degradadores de celulosa son usados para la producción de biomasa y/o en la. CC. sacarificación de lignocelulósicos a azúcares simples los que pueden luego ser. DI. RE. usados para varios propósitos (Saddler 1982; Gutierrez-Correa 1986; Bastawde 1992; Keskar 1992; Prasertan & oi 1992; Wei et al. 1992). Los preparados. enzimáticos de los microorganismos pueden ser usados para la agricultura pobre: en la producción de forrajes y alimentos para animales, aumentando el contenido. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. proteico de los residuos lignocelulósicos, en el tratamiento de grano forrajero para incrementar su digestibilidad. Considerando que en nuestro país no está exento de la acumulación y perdida. AC IÓ. N. de los desechos celulósicos generados anualmente a causa de las actividades. UN IC. agrícolas, forestales, industriales (maderas, papeleras, etc.) y municipales, lo que constituye una constante de contaminación ambiental, la hidrólisis enzimática. CO. M. mediante el uso de celulasas o la degradación por microorganismos celulolíticos. Y. sería una alternativa para convertir estos residuos de tal forma que podamos. microorganismos, especialmente por. ÁT. Ya que la hidrólisis enzimática por. IC. A. obtener provecho de ellos.. RM. hongos, es una alternativa factible para el reuso de los residuos lignocelulósicos. IN FO. contaminantes y teniendo en cuenta los puntos expuestos anteriormente, se hace. DE. necesario seleccionar nuevas cepas de hongos productores de celulasas que. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. brinden mejores perspectivas en la degradación de sustratos celulósicos.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V. CONCLUSIONES. N.  Se lograron aislar hongos celulolíticos procedentes de las muestras de. AC IÓ. compost.. UN IC.  Los géneros con mayor presencia en las muestras fueron Scopulariopsis,. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. Aspergillus y Fusarium.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI. RECOMENDACIONES. Realizar pruebas complementarias, como la del ensayo del papel filtro.. . Realizar el aislamiento y evaluación de microorganismos con actividad. AC IÓ. N. . aislados. . DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. Evaluar actividad celulolítica cualitativa y cuantitativa.. UN IC. celulolíticas, empleando sustratos de la misma naturaleza de donde fueron. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VII.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. AC IÓ.  Ainsworth, C. 1965. The Fungi. Vol 1. Academic press. New York N.Y.. N.  Agrios, G. 1989. Fitopatología. Edit. Limusa. México..  Alexopoulus, C. 1977. Introducción a la micología. Edit. Universitario de. UN IC. Bs.As. Argentina.. M.  Akhtar, M.; Blanchette, R.; Kent, T. 1998. Fungal Delignification and. CO. Biomechanical Pulping of wood. Advances in Biochemical Engineering. A. Y. Biotechnology (57): 159-195.. ÁT. IC.  Barnett, H. 1960. Ilustrated Genero of Imperfect Fungi. 2da. Ed. Burgos. RM. Publishing. Company. Minneapolis. USA. IN FO.  Barrera Cristina, P. Carlosama, P. Flores .2010. “Aislamiento, selección y. DE. preservación de microorganismos celulolíticos a partir de residuos vegetales. AS. en compost, generados en un cultivo de crisantemo”. Universidad Central Del. EM. Ecuador. Facultad de Ciencias Químicas microbiología Industrial. SI ST.  Breen, A. y Singleton, F. L. 1999. Fungi in Lignocellulose breakdown and biopulping Current Opinion in Biotechnology 10:252-258.. DE.  Canevascini, c. y C. Gettlen. 1981. A. Comparative Investigation Of Various. IO. N. Cellulose Assay Procedures. Biotechnology and Biincengineering. 23: 1573-. CC. 1590 p.. DI. RE.  Ceroni, A. y M. Gutiérrez-Correa. 1988. Producción de celulasas por hongos: estudios cinéticos en hongos silvestres. Boletín de Lima 55: 13-20.  Chahel, D. 1987. Bioconversion of Hemicelluloses into Protein. Journel of industrial Microbiology. 1: 355-361 p.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo.  Royer, J. y J. Nakes. 1987. Production of Mycelial Protein and Hydrolytic Enzymes from Paper Mill Sludges by Cellulosic Fungi. Journal Of Industrial Microbiology. 1:9- 13 p.. AC IÓ. N.  Sternberg, D. 1976. Production of Cellulase By Trichoderma Biotechnology. UN IC. and Bioeng. Symp. 6: 35-53 p.  Stutzenberger, F.J.; Kaufman, A.J. & Lossin, R.D 1970. Cellulolytic activity in. CO. M. municipal solid waste composting. Canadian Journal of Microbiology. 16, 553-. Y. 560.. IC. A.  Vilchez Paz, Laura.2002.¨Determinación de la actividad de exoglucanasas de. ÁT. cepas fúngicas nativas de las provincias de Huaylas y Huaraz”. Universidad. RM. Nacional de San Marcos. Sistema de Bibliotecas.. IN FO.  Zaldivar, M.; Steiner, J.; Musalem, M. y Contreras, I. 1987. Aislamiento de un. DE. mutante de Trichoderma pseudokoningii hiperproductor de celulasas.. AS. Microbiología SEM.3, 33-44.. EM.  Zúñiga, D. 1987. Algunos Aspectos Microbiológicos y físicos Químicos del. SI ST. Proceso de Compostaje – Libro de resúmenes del X Cong. Latinoam. De. DI. RE. CC. IO. N. DE. Microbiología y VII Cong. Per. De Microb. y Parasitol. p.91. Trujillo- Perú.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. ANEXOS. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 01. . Agar………………………..15g. . Agua destilada……………..1L. UN IC. Extracto de levadura……….7g. M. . CO. K2HPO4……………………5g. Y. . A. Celulosa…………………….30g. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. . AC IÓ. N.  Agar celulosa fosfato. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. ANEXO 02 Pilas de compost del vivero Municipal del Santa.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 03 Muestras de compost obtenidos de diferentes viveros procedentes de. DI. RE. CC. IO. N. DE. la ciudad de Chimbote.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) ANEXO 04 Preparación del Inóculo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. celulosa fosfato. DI. RE. CC. IO. N. DE. ANEXO 05 Desarrollo de hongos celulolíticos en placas conteniendo agar. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. fosfato.. DI. RE. CC. IO. N. DE. ANEXO 06 Obtención de cultivos puros en frascos conteniendo agar celulosa. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM. Conidias de. SI ST. Scopuraliopsis. DI. RE. CC. IO. N. DE. ANEXO 07 Característica microscópica de Scopuraliopsis.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. Conidias de. ANEXO 08 Característica microscópica de Cladosporium.. DI. RE. CC. IO. N. Cladosporium. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Microconidias de. ANEXO 09 Característica microscópica de Penicillium.. DI. RE. CC. IO. N. DE. Penicilium. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ANEXO 10 Característica microscópica de Torula.. DI. RE. CC. IO. N. DE. Conidias de Torula. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Colonia de. DE. SI ST. EM. AS. DE. Fusarium. DI. RE. CC. IO. N. ANEXO 11 Colonia de Fusarium desarrollado sobre agar celulosa fosfato.. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SI ST. Colonia de. N. DE. Scopulariopsis. DI. RE. CC. IO. ANEXO 12 Colonia de Scopulariopsis desarrollado sobre agar celulosa fosfato.. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. Colonia de. IO. N. DE. SI ST. EM. Cladosporium. DI. RE. CC. ANEXO 13 Colonia de Cladosporium desarrollado sobre agar celulosa fosfato. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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