Determinacion de la capacidad antioxidante in vitro del decocto de la coronta de zea mays l (variedad morado)”

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA. FA. TRABAJO DE INVESTIGACION I. DE. “DETERMINACION DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE IN VITRO DEL. BARTOLO ARGOMEDO ROXANA NOEMI. IO. AUTORES:. TE. CA. DECOCTO DE LA CORONTA DE Zea mays L. (variedad morado)”. BI BL. CHAVEZ CANCINO CARLA ELIZABETH. ASESOR:. Q.F. RENGIFO PENADILLOS ROGER ANTONIO. TRUJILLO – PERÚ 2010. -1Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC A. DEDICATORIA. BI. O. Q. UI M. A Dios Nuestro Señor:. IA. Y. Por bendecir nuestros caminos RM. AC. y guiar nuestras vidas, por darme FA. la fortaleza para superar todos nuestras metas.. IO. TE. CA. DE. los obstáculos y así poder alcanzar. BI BL. Gracias por tu inmenso amor y por bendecir siempre a nosotras y a toda nuestra familia. CARLA y ROXANA. -2Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A Carlos y Bertha, mis padres, que con su comprensión y apoyo lograron inculcar la responsabilidad y la perseverancia para lograr mis objetivos; y a Carlos Antonio, mi hermano, por ser mi compañía y saber. IC A. entenderme como un verdadero amigo. Son mi. BI. O. Q. UI M. fuerza para seguir adelante.. Y. A Nimia, Fiorella y Erika, mi familia. AC. IA. por darme su alegría y estar siempre. RM. conmigo, y son mi fuerza para seguir. TE. CA. DE. FA. adelante.. IO. A César, por su amor, cariño y darme. BI BL. siempre la tranquilidad necesaria para hacer las cosas correctas. Carla. -3Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mi padre : Santiago Francisco Por tu apoyo y confianza que siempre me brindaste. Por ser uno de los motivos para seguir adelante, gracias por tu amor y por inculcarme el respeto, la responsabilidad, la humildad, el estudio y la superación.. UI M. IC A. Te quiero con todo el corazón.. Soriana Teresa. BI. O. Q. A mi madre:. Y. Porque sé que desde el cielo siempre me. AC. IA. bendices y me das la fuerza para superar. RM. todos mis obstáculos, gracias a ti siempre veo. FA. la luz al final del túnel. Te quiero mucho.. DE. A mis madres:. CA. Idelsa y Jesus. TE. Gracias por lo que soy, por estar ahí cuando más las. IO. necesito orientándome y dándome la fuerza que a. BI BL. veces me hacía falta para seguir adelante, por confiar en mi en todo momento, por ser mi apoyo incondicional darme su amor sincero e inculcarme siempre la confianza en mí. Ustedes son dos grandes pilares en mi vida. Las quiero mucho. Roxana Noemi A mis hermanos: -4Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Juan, Evert, Dennis, Heysen, Thalia y Bledis Por confiar siempre en mi, por su amor y respeto, por su apoyo y orientación constante.. IC A. A mis sobrinos:. Q. UI M. Maria Teresa, Fabricio y Azul.. BI. O. Por ser la alegría en mi vida, porque son. RM. AC. IA. Y. una inspiración para lograr mis metas.. DE. FA. A mis amigas:. TE. CA. Karol, Claudia, Carla y Yuliana.. IO. Por su apoyo y su amistad incondicional,. BI BL. y porque con ustedes conocí el verdadero sentimiento de la amistad. Las quiero mucho chicas. Roxana Noemí. -5Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IC A. AGRADECIMIENTO UI M. Al profesor Roger Rengifo Penadillos,. BI. O. Q. por su gran paciencia,. IA. Y. comprensión, enseñanza y ayuda para. FA. RM. AC. que este proyecto se pueda realizar. CA. DE. A mis Docentes, por compartir los. TE. conocimientos adquiridos en su vida. BI BL. IO. profesional, para hacer de nosotras profesionales competitivas. Las Autoras. -6Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. ___________________________ Jesús Gallardo Meléndez. BI. O. Q. UI M. IC A. PRESIDENTE. IA. Y. ___________________________. AC. José Gavidia Valencia. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. MIEMBRO. _________________________ Roger Rengifo Penadillos MIEMBRO. -7Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACION. Señores Miembros del Jurado:. Dando cumplimiento a las disposiciones establecidas en el Reglamento de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a su consideración y elevado criterio científico el presente trabajo de Investigación. IC A. titulada:. UI M. “Determinación de la capacidad antioxidante in vitro del decocto de la coronta de. Q. Zea mays L. (variedad morado)”. BI. O. Es propicia la oportunidad para manifestar nuestro eterno y sincero agradecimiento a. Y. los excelentes profesores de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, quienes en su. IA. meritoria labor de educadores nos han orientado incondicionalmente durante la. RM. AC. formación profesional.. Agradecemos la colaboración desinteresada de quienes en algún momento nos han. DE. FA. brindado el apoyo necesario para la culminación de este Trabajo de Investigación. Por tanto, señores miembros del Jurado sometemos el presente trabajo para su. CA. respectiva evaluación y veredicto, esperando sea de interés y de gran utilidad para la. BI BL. IO. TE. Facultad y comunidad.. Bartolo Argomedo Roxana Noemí. Trujillo, Junio del 2010. Chávez Cancino Carla Elizabeth. -8Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. INDICE PÁGINAS PRELIMINARES. i. Agradecimiento. v. UI M. IC A. Dedicatoria. vi. O. Q. Jurado Dictaminador. vii. IA. Y. BI. Presentación. viii. RM. AC. Índice. ix. FA. Resumen. CA. TE. 01. MATERIAL Y MÉTODO. 05. IO. II.. INTRODUCCIÓN. BI BL. I.. x. DE. Abstract. III.. RESULTADOS. 09. IV.. DISCUSIÓN. 13. CONCLUSIONES. 16. RECOMENDACIONES. 17. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 18. ANEXOS. 20. V. VI. VII. VIII.. -9Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. Se ha descrito que algunos compuestos fenolicos de origen vegetal presentan dentro de la célula actividad antioxidante, reduciendo la concentración de radicales libres. El presente. IC A. trabajo tiene como objetivo determinar la capacidad antioxidante del decocto de la coronta. UI M. de Zea mays L. (variedad morado), para lo cual se utilizó el metodo de Brand – Willians.. Q. Las corontas de Zea mays L. (variedad morado), se recolectaron en el Distrito de. BI. O. Cajabamba, Departamento de Cajamarca. Primero se seleccionó la muestra, se secó en. IA. Y. estufa y luego se molió hasta obtener un polvo, a partir del cual se preparó el decocto y se. AC. filtró. Del filtrado se prepararon cuatro concentraciones diferentes (7,5; 15, 30, 60 % v/v).. RM. De cada uno de ellos se realizó las lecturas de absorbancia en el espectrofotómetro. FA. Jenway, a 515 nm; con estos datos se calculó el porcentaje de inhibición a 0 y 30 minutos.. DE. La capacidad antioxidante del decocto de Zea mays L. variedad morado aumenta a medida. BI BL. IO. TE. CA. que aumenta la concentración del extracto.. Palabras claves: Polifenoles, maíz morado, radicales libres.. - 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. It has been reported that some compounds of plant origin fenolite present inside the cell antioxidant activity, reducing the concentration of free radicals. This study aims to determine the antioxidant capacity of the decoction of the cobs of Zea mays L. (Purple. IC A. variety), for which we used the method of Brand - Williams. The cobs of Zea mays L.. UI M. (Purple variety), were collected in the District of Cajabamba, Department of Cajamarca.. O. Q. First the sample was selected, dried in an oven and then milled to a powder, from which. Y. BI. was prepared and filtered decoct. The filtrate was prepared four different concentrations. IA. (7.5, 15, 30, 60% v/v). From each of them made the absorbance readings in the. RM. AC. spectrophotometer Jenway, to 515 nm, with these data we calculated the percentage of. FA. inhibition at 0 and 30 minutes. The antioxidant capacity of Zea mays L. decoct purple. TE. CA. DE. increases with increasing concentration of the extract.. BI BL. IO. Keywords: Polyphenols, purple corn, free radicals.. - 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. Las enfermedades crónico-degenerativas son las principales causas de muerte en el mundo. Estos son padecimientos que se asocian regularmente con la edad, el envejecimiento y con la alimentación entre otros factores. Dentro de este grupo de enfermedades cabe resaltar las que son un problema de salud pública como la diabetes mellitus, hipertensión arterial, enfermedades cardiovasculares y. IC A. distintos tipos de cáncer. Muchas de estas enfermedades están asociadas a procesos oxidativos, que pueden llevar a la muerte celular, por lo que una buena alimentación, basada en el consumo de. UI M. alimentos nutraceúticos que contengan antioxidantes y muchos otros compuestos con actividad. Y. BI. O. Q. benéfica a la salud, ayuda en gran medida a prevenirlas 1.. IA. Estudios epidemiológicos efectuados en varios países evidencian que el consumo de frutos y. AC. vegetales reducen enfermedades coronarias además de minimizar los riesgos de cáncer. Se ha. RM. descrito que algunos compuestos fenólicos de origen vegetal presentan actividad antioxidante,. CA. DE. quelación con iones metálicos 2.. FA. reduciendo la concentración de radicales libres, y en algunos casos logran establecer grupos de. TE. Un antioxidante es una sustancia capaz de neutralizar la acción oxidante de los radicales libres. IO. mediante la liberación de electrones en nuestra sangre, los que son captados por aquellos. El. BI BL. problema para la salud se produce cuando nuestro organismo tiene que soportar un exceso de radicales libres durante años, producidos mayormente por contaminantes externos, que provienen principalmente de la contaminación atmosférica y el humo de cigarrillos, los que producen distintos tipos de radicales libres en nuestro organismo. El consumo de aceites vegetales hidrogenados tales como la margarina y el consumo de ácidos grasos trans como los de las grasas de la carne y de la leche también contribuyen al aumento de los radicales libres 3,4.. Los agentes antioxidantes presentes en alimentos pueden reducir trombosis, activar macrófagos e inhibir la tendencia a la peroxidación. Entre los compuestos que han merecido dichos estudios se. - 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. encuentran las antocianinas, debido a la presencia de sustituyentes -OH, los cuales son moléculas con alto poder antioxidante 2.. El interés por los pigmentos antociáninicos y las investigaciones científicas se han incrementado en los últimos años, debido no solamente al color que confieren a los productos que las contienen sino a su probable papel en la reducción de las enfermedades coronarias, cáncer, diabetes; a sus efectos. IC A. antiinflamatorios y mejoramiento de la agudeza visual y comportamiento cognitivo. Por lo tanto, además de su papel funcional como colorantes, las antocianinas son agentes potenciales en la. BI. O. Q. UI M. obtención de productos con valor agregado para el consumo humano. 5,6.. Y. El color de las antocianinas depende del número y orientación de los grupos hidroxilo y metoxilo de. IA. la molécula. Incrementos en la hidroxilación producen desplazamientos hacia tonalidades azules. FA. RM. AC. mientras que incrementos en las metoxilaciones producen coloraciones rojas 6.. En la naturaleza, las antocianinas siempre presentan sustituciones glicosídicas en las posiciones 3 y/o. DE. 5 con mono, di o trisacáridos que incrementan su solubilidad. Otra posible variación en la estructura. CA. es la acilación de los residuos de azúcares de la molécula con ácidos orgánicos. Stintzing et al., 2002,. TE. demostraron que el tipo de sustitución glicosídica y de acilación producen efectos en el tono de las. IO. antocianinas; es así como sustituciones glicosídicas en la posición 5 al igual que acilaciones. BI BL. aromáticas, producen un desplazamiento hacia las tonalidades púrpura 6.. La presencia de antocianinas en las variedades pigmentadas del maíz, lo hace un producto potencial para el suministro de colorantes y antioxidantes naturales. Por ello el estudio de los pigmentos del Zea mays L variedad morado ha despertado un interés sin precedentes. Según Goodman y Brown (1988), en América hay 260 especies de las que 132 se encuentran en la región andina, entre ellos tenemos al maíz morado (Zea mays L.) el cual se cultiva en América Latina, principalmente en Perú, en donde la utilización ha sido y es como material de alimentación 2,5.. - 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. División. : Angiospermae. Clase. : Monocotyledoneae. Orden. : Graminales o Poales. Familia. : Graminea o Poaceae. Tribu. : Maydeae. Género. : Zea. Especie. : Zea mays L. 7. UI M. : Plantae. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. Reino. IC A. La descripción botánica de esta planta es la que se detalla a continuación:. Zea mays es una planta monoica; sus inflorescencias masculinas y femeninas se encuentran en. FA. la misma planta. Si bien la planta es anual, su rápido crecimiento le permite alcanzar hasta los. DE. 2,5 m de altura, con un tallo erguido, rígido y sólido; algunas variedades silvestres alcanzan. CA. los 7 m de altura 7.. TE. El tallo está compuesto a su vez por tres capas: una epidermis exterior, impermeable y. IO. transparente, una pared por donde circulan las sustancias alimenticias y una médula de tejido. BI BL. esponjoso y blanco donde almacena reservas alimenticias, en especial azúcares 7. Las hojas toman una forma alargada íntimamente arrollada al tallo, del cual nacen las espigas o mazorcas. Cada mazorca consiste en un tronco que está cubierta por filas de granos, la parte comestible de la planta, cuyo número puede variar entre ocho y treinta 7. Su. suelo variable, prefiere suelos profundos de textura franca a franco-arcilloso, con buena. capacidad para retener humedad, no deben presentar problemas de drenaje; excesos de humedad son adversos a la acumulación de pigmentos en la mazorca. ph: 5-8. Su clima es de larga estación y cálido adaptable a diversos climas de costa y sierra (según las distintas variedades). Su altura de. - 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. siembra es de 1,200-4,000 m.s.n.m. Su época de siembra de agosto a octubre en la sierra y de abril a septiembre en la costa8.. El maíz morado es un maíz único y solo se produce en el Perú. Hoy se esta haciendo conocido en el mundo entero, ya que se exporta a Estados Unidos y Europa, principalmente para su uso como colorante natural de los alimentos 9.. IC A. Por todos estos considerandos, esta investigación tiene el propósito de demostrar la capacidad antioxidante in vitro del decocto de la coronta de Zea mays L variedad morado, con lo cual se. UI M. pretende verificar las propiedades terapéuticas que la medicina popular atribuye a dicha especie. Q. vegetal y canalizar la posibilidad de su utilización en la prevención de enfermedades producidas por. BI. O. radicales libres, contribuyendo de esta manera a fomentar estudios científicos que demuestran su. AC. IA. Y. actividad antioxidante in vivo.. RM. Por tal motivo nos planteamos el siguiente problema:. BI BL. IO. Objetivo general:. TE. CA. DE. FA. ¿Tiene capacidad antioxidante el decocto de la coronta del Zea mays L. (variedad morado)?. 1. Determinar la capacidad antioxidante in vitro del decocto de la coronta de Zea mays L. (variedad morado).. Objetivos específicos:. - 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 1. Determinar la capacidad antioxidante in vitro del decocto de la coronta de Zea mays L. (variedad morado) frente al DPPH* a con diferentes concentraciones.. 2. Determinar la cinética de reacción del decocto de la coronta de Zea mays L. (variedad. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. morado) con el DPPH*.. - 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIAL Y METODO. 1) Materiales a) Material Botánico:. IC A. 500 g coronta de Zea mays L. (variedad morado) procedente del Distrito de. O. Q. UI M. Cajabamba, Provincia de Cajabamba, Departamento de Cajamarca.. IA. Y. BI. b) Material de Laboratorio. RM. AC.  Material de Vidrio y Otros. DE. FA. El de uso común en el laboratorio. Espectrofotómetro Jenway. BI BL. -. IO. TE. CA.  Equipos de Laboratorio. -. Balanzas analíticas Sartorius. -. Estufa Fanem modelo 315 S.E. -. Molino de discos Corona. c) Material Químico.  2,2 – difenil – 1 – picrylhidrazilo (DPPH*)  Agua destilada. - 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2) Método: Se utilizo el método de BRAND WILLIAMS 10. 2.1 Recolección de la muestra. IC A. Las corontas de Zea mays L. (variedad morado) se recolectaron en el Distrito de. RM. AC. IA. Y. 2.2 Secado y molienda de la muestra. BI. O. Q. Condebamba, durante el mes de marzo.. UI M. Cajabamba, 200 g de 5 parcelas diferentes escogidas aleatoriamente del valle de. Después de recolectar las corontas y seleccionarlas, se secaron en estufa a 45. FA. ºC, por 24 horas. Mediante la utilización de un molino a discos se procedió a. CA. DE. reducir el tamaño de las partículas de la muestra seca hasta polvo grosero.. BI BL. IO. TE. 2.3 Preparación del decocto. Del polvo grosero de coronta de Zea mays L. (variedad morado), se pesó 50 mg, mezclándose. con 15 ml de etanol. de 96º G.L en un balón de 250 mL,. llevándose a ebullición durante 10 minutos, dejándose enfriar y filtrándose la solución obtenida, y aforándose esta a 25 ml.. - 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.4. Preparación del reactivo. Se pesó 0,6 mg de 2,2 – difenil – 1 – picrylhidrazilo (DPPH*) y disolviéndose en etanol 96º G.L. y aforándose a 50 ml, obteniéndose una concentración de 0.012 mg/mL con una molaridad de 3,043 x 10-5.. IC A. 2.5. Determinación de la capacidad antioxidante . UI M. A partir de la solución del decocto se midieron 0,75; 1,5; 3,0 y 6,0 mL. Q. por separado y se diluyó con etanol de 96º G.L. a 10 mL, obteniéndose. O. concentraciones de 7,5; 15; 30; 60 % v/v respectivamente. . BI. Se midió 0,25 ml de cada una de la soluciones diluidas del decocto de. Y. Zea mays L. (variedad morado) por separado y se le adicionó 2,5 ml de la. AC. IA. disolución de 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo (DPPH). . RM. Luego se procedió a realizar las lecturas de absorbancia a una longitud. CA. DE. FA. de onda de 515 nm.. TE. 2.6.Cálculo del porcentaje de inhibición. BI BL. IO. El porcentaje de inhibición del 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo (DPPH). por el decocto de coronta de Zea mays L. (variedad morado), se calculó mediante la siguiente formula:. % 𝐼𝑁𝐻𝐼𝐵𝐼𝐶𝐼𝑂𝑁 = % I =. A − A1 x 100 A. A = Absorbancia del blanco. A1 = Absorbancia de la muestra. - 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.7. Determinación de la orden de reacción. . A partir de la solución del decocto se midió 6,0 mL a una fiola de 10 mL. aforándose con etanol de 96º G.L., esta solución equivale a una concentración de 60% v/v.. . Se midió 0,25 ml de la solución de decocto de Zea mays L. (variedad morado) al 60% v/v y se le adicionó 2,5 ml de la disolución de 2,2 difenil – 1 – picrilhiracilo (DPPH*).. . IC A. Luego se procedió a realizar las lecturas de absorbancia a 515 nm, desde 0 hasta 3600 segundos.. UI M. . Se procedió a determinar la cinética de reacción del decocto de Zea. Q. mays L. (variedad morado), mediante la gráfica de la concentración vs. C = At - A∞. AC. Donde:. IA. Y. BI. O. tiempo.. CA. DE. FA. RM. Co = Ao - A∞. IO. TE. 2.8. Análisis estadístico de los datos. BI BL. A los datos obtenidos se le aplicó la función estadística de promedio.. - 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III. RESULTADOS. Cuadro 1: Porcentaje de inhibición y promedio de los porcentajes de inhibición del 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo (DPPH*). Muestra 2. 0. 38. 21.47. 30. 55.72. 41.62. 0. 45. 30. 63.18. 0 30. Q. Muestra 1. % v/v. 26.79. 25.26. 40.97. 40.31. 30.87. 38.73. 72.97. 40.13. 58.76. 56.36. 43.98. 38.26. 46.20. 81.62. 71.84. 80.34. 0. 69.10. 59.69. 50.80. 59.86. 88.06. 87.57. 85.44. 87.02. O. BI Y. BI BL. IO. TE. CA. 30. IA. AC. DE. 60. 87.56. FA. 30. Muestra 3 20.90. 7,5. 15. PROMEDIO. UI M. TIEMPO. RM. CONCENTRACION. IC A. % INHIBICION. - 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) BI B. LI O. TE CA. DE. FA RM. AC IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grafico 1: Concentración del decocto de Zea mays L. vs porcentaje de inhibición del 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo. BI B. LI O. TE CA. DE. FA RM. AC IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. (DPPH*). - 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Cuadro 2: Absorbancia de la reacción del decocto de Zea mays L. 60 % v/v,. UI M. IC A. con 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo (DPPH*) a diferentes tiempos. TIEMPO ( segundos). BI. O. Q. ABSORBANCIA. Y. 0.197. AC. IA. 0.155. 0.131. FA. 0.120. RM. 0.140. 600 1200 1800 3000 3600. BI BL. IO. TE. CA. DE. 0.113. 0. - 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) BI B. LI O. TE CA. DE. FA RM. AC IA. Y. BI. O. Q. UI. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grafico 2: Cinética de reacción del decocto de Zea mays L. 60 % v/v, con 2,2 – difenil – 1 – picrilhidracilo (DPPH*). - 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. Existe muchos métodos para medir la capacidad antioxidante de una especie o sustancia, un método muy usado se basa en la estabilidad del radical 1,1-difenil-2picrilhidrazil (DPPH*) la cual se atribuye a la deslocalización del electrón desapareado, esta deslocalización también le otorga una coloración violeta caracterizada por una. UI M. IC A. banda de absorción, en solución etanólica, centrada alrededor de 515 nm 6,11.. Los antioxidantes son moléculas que interrumpen un flujo de electrones desapareados. O. Q. reaccionando con especies inestables, convirtiéndose a su vez en radicales menos reactivos.. BI. Para ello buscan los enlaces intramoleculares más próximos como fuente de electrones y así. Y. formar pares de electrones más estables. La disponibilidad de electrones desapareados es. IA. menor cuando existe la resonancia debido a que impide fijar el electrón en una posición y así. FA. RM. AC. reaccionar con otra molécula biológica 9.. DE. La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las. CA. radiaciones electromagnéticas y a su vez la cantidad de luz absorbida depende de la forma. TE. lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro,. IO. en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir. BI BL. la cantidad de luz absorbida por la misma12.. Con respecto al cuadro 1 se puede observar que en las tres muestras a mayor concentración del decocto de Zea mays L. el porcentaje de inhibición del DPPH* se incrementa, debido a que la absorbancia del DPPH* disminuye con el incremento de la concentración del decocto de Zea mays L., por la presencia de compuestos antioxidantes en altas cantidades los cuales se corrobora (anexo 2) con el cambio de color del azul al amarillo a medida que van reaccionando las sustancias.. - 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Los promedios de las tres muestras tanto a tiempo cero como a la media hora, nos permiten observar que el porcentaje de inhibición aumenta a medida que transcurre el tiempo; esto se puede notar con las diferentes concentraciones usadas, lo cual nos da un indicio de que está ocurriendo una cinética de reacción entre el decocto de Zea mays L. y el DPPH*.. En el grafico 1 puede observarse que el decocto de la coronta de Zea mays L. variedad morado. IC A. posee capacidad antioxidante frente al DPPH* y a diferentes tiempos.. UI M. La relación que existe entre la concentración y el tiempo nos lleva a pensar que existe una cinética de reacción, debido a que se observo un cambio en la absorbancia del reactivo con. Y. BI. O. Q. relación al tiempo.. AC. IA. Para una cinética de primer orden, la concentración de A disminuye exponencialmente en el tiempo. Después de medir la concentración como una función del tiempo, podemos probar si. RM. la reacción es de primer orden en A, graficando ln (C / Co) en función de t. La gráfica debe ser. FA. una línea recta si la reacción es de primer orden en A. Encontrándose los puntos. DE. experimentales sobre una línea recta, entonces se concluye que la reacción es de primer orden. BI BL. IO. TE. CA. en A. La pendiente de esta recta es igual a -k 13:. Ln C = - kt Co. Donde:. C = At - A∞ Co = Ao - A∞. - 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La vida media de la reacción es el tiempo necesario para que la concentración de una muestra alcance la mitad de su valor inicial, solo en una reacción de primer orden es independiente la concentración inicial. 13. .. En el cuadro 2 se observa la concentración al 60 % v/v del decocto de Zea mays L. a medida que transcurre el tiempo la absorbancia del DPPH* disminuye, al aplicar las leyes de la cinética química, se demostró que la reacción entre ambas sustancias sigue una cinética de primer orden, tal como se aprecia en la gráfica 2 cuando se relaciona ln C/Co vs. tiempo esta tiende a. UI M. IC A. una línea recta.. O. Q. A partir de la ecuación de la recta se determinó que la constante de velocidad de reacción es. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. de 4,179 x 10-4 s-1 y el tiempo de vida media es de 1 658,29 segundos.. - 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.


(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. . CONCLUSIÓN. El decocto de la coronta de Zea Mays L. variedad morado tiene capacidad antioxidante in vitro frente al DPPH*.. . La capacidad antioxidante está directamente relacionada con la concentración del. IC A. decocto de Zea mays L. variedad morado, en las concentraciones utilizadas en el. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. presente trabajo.. - 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. . RECOMENDACIONES. Como continuación del presente trabajo se sugiere hacer estudios que permitan cuantificar el metabolito responsable de la acción antioxidante, así como monitorizar la cinética de reacción del decocto frente al DPPH*, para establecer el intervalo de dosificación, y realizar estudios in vivo con la. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. finalidad de mejorar la terapéutica de este producto natural.. - 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Yacio M., Valdez M., Paredes O. Análisis del potencial antioxidante de huitlacoche cosechado en diferentes etapas de desarrollo. México. Universidad Autónoma de Zacatecas. 2008 [Fecha de acceso 20 de julio de 2009]. Disponible en: http://www.coecytcoah.gob.mx/206%5C1%5C350%5C2009%5C2%5C24%5CUAZ%20V. UI M. IC A. acio%20Adame.pdf. Q. 2. Avello M., Suwalsky M. Radicales libres, antioxidantes naturales y mecanismos. BI. O. de protección. Universidad de Concepción, Chile: Proyectos de investigación. Y. FONDECYT; 2006 [Fecha de acceso 01 de julio del 2009].Disponible en:. IA. http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0718-. RM. AC. 04622006000200010&script=sci_arttext.. FA. 3. Moreno M., Viloria A., López E, Douglas B. Estabilidad de antocianinas en jugos. DE. pasteurizados de mora (Rubus glaucus Benth). Venezuela. Universidad Simón. CA. Rodríguez. 2002. [Fecha de acceso 20 de julio de 2009]. Disponible en:. BI BL. IO. xt. TE. http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S000406222002000200010&script=sci_artte. 4. Cuevas M., Winterhalter P. Análisis y caracterización de antocianinas en diferentes variedades de maíz (zea mays). boliviano. Bolivia. Universidad Mayor San Simón Cochabamba. 2008. [Fecha de acceso 19 de julio de 2009]. Disponible en: http://educon.javeriana.edu.co/lagrotech/images/elyana_cuevas.pdf.. 5. Gutiérrez D., Ortiz A., Mendoza A. Medición de fenoles y actividad antioxidante en malezas usadas para alimentación animal. México. Universidad Autónoma de Querétaro. 2008. [Fecha de acceso 19 de julio del 2009]. Disponible en: http://www.cenam.mx/simposio2008/sm_2008/memorias/M2/SM2008M2201108.pdf. - 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 6. Astrid. G. Las antocianinas como colorantes naturales y compuestos bioactivos:. revisión. Colombia. Universidad Nacional de Colombia. 2008. [Fecha de acceso 18 de julio del 2009]. Disponible en: http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0120548X2008000300002&script=sci_arttext. 7. Ruiz, J. Agrupación de poblaciones locales de maíz (Zea mays L.) mediante caracteres morfológicos y parámetros ambientales.2004. [Fecha de acceso 25 de mayo del 2010].. UI M. IC A. Disponible en: http://biblioteca.universia.net/html_bura/ficha/params/id/20830.html.. Q. 8. Abanto A., Marquez A. Investigación para conocer la adaptación de 5. BI. O. variedades de maíz morado. PYMAGROS. [Fecha de acceso 18 de julio del Disponible. en:. Y. 2009].. RM. AC. IA. www.cosude.org.pe/es/Pagina_principal/.../resource_es_97927.pdf.. 9. Castañeda, B., Ibañez, L. Evaluación de la capacidad antioxidante de plantas. FA. medicinales peruanas nativas e introducidas. Perú. Universidad Nacional Mayor de San. DE. Marcos. 2008. [Fecha de acceso 24 de agosto del 2009]. Disponible en:. TE. CA. http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/rev_academia/2008_n1/pdf/a11v15n1.pdf.. IO. 10. Muñoz M., Gutiérrez D. Determinación de actividad antioxidante de diversas partes del. BI BL. árbol Nicotiana Glauca. México. Universidad Autónoma de Querétaro. 2008. [Fecha de acceso. 19. de. julio. del. 2009].. Disponible. en:. http://www.cenam.mx/simposio2008/sm_2008/memorias/M2/SM2008M2201108.pdf. 11. Abril, N. Espectrofotometría: Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de biomoléculas. España. Universidad de Rabanales. 2008. [Fecha de acceso 5 mayo del 2010]. Disponible en: www.uib.es/depart/dqu/dquiweb/POSTERS.pdf. - 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 12. Kuskoski, M. Actividad antioxidante de pigmentos antociánicos. España. Universidad de Sevilla. 2004.. [Fecha de acceso 5 mayo del 2010]. Disponible en:. http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0101-20612004000400036&script=sci_arttext. 13. Castellan W. Gilbert. Fisicoquímica. 2º. ed. México. Pearson Addison Wesley. 1998. pp:. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. 840-885.. - 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. ANEXOS. - 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. LECTURAS DE ABSORVANCIAS. ANEXO 1. ABSORVANCIA Muestra 1. Muestra 2. 0 segundos. 0.220. 0.191. Muestra 3. BI. O. Q. ( Tiempo). UI M. REACTIVO. IC A. ABSORVANCIA 515 nm DEL REACTIVO SOLO. FA. RM. AC. IA. Y. 0.311. TE. CA. DE. ABSORVANCIA 515 nm DE LAS MUESTRAS + EL REACTIVO. BI BL. IO. ABSORVANCIA. CONCENTRACION %v/v. Muestra 1. Muestra 2. Muestra 3. Tiempo. Tiempo. Tiempo. Tiempo. Tiempo. Tiempo. 0. 30 min. 0. 30 min. 0. 30 min. 7.5. 0.147. 0.089. 0.150. 0.108. 0.246. 0.230. 15. 0.148. 0.074. 0.114. 0.050. 0.215. 0.185. 30. 0.096. 0.025. 0.107. 0.034. 0.192. 0.087. 60. 0.068. 0.024. 0.077. 0.023. 0.153. 0.045. - 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESULTADOS. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. ANEXO 2. REACTIVO 2 HORAS. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. REACTIVO O HORAS. CONCENTRACION. CONCENTRACION. % v/v a 30 Y 60 %. % v/v 7.5 %. - 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.


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