Efecto de las concentraciones del insecticida clorpirifos como fuente de carbono sobre el crecimiento de Trichoderma viride
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(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE. AC IÓ. N. OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. UN IC. Dr. Orlando González Nieves. CO. M. RECTOR. Y. Dr. Rubén Vera Véliz. ÁT. IC. A. VICE-RECTOR ACADÉMICO. RM. Dr. Steban Ilich Zerpa. DE. IN FO. PROFESOR SECRETARIO GENERAL. AS. Dr. José Mostacero León. SI ST. EM. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dr. William Zelada Straver. CC. IO. N. DE. PROFESOR SECRETARIO DE FACULTAD. Dra. Bertha Soriano Bernilla. DI. RE. DIRECTORA DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. AC IÓ. N. El que suscribe: Ms.C. Miguel Angel Muñoz Ríos, asesor de la presente tesis. UN IC. titulada: “Efecto de las concentraciones del insecticida clorpirifos como fuente de. Y. CO. M. carbono sobre el crecimiento de Trichoderma viride”. ÁT. IC. A. CERTIFICA:. RM. Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su. IN FO. correspondiente proyecto y con las orientaciones pertinentes brindadas al. DE. .. AS. Que el presente informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, y acoge las. EM. sugerencias y observaciones pertinentes. Por ello, autorizo al Bachiller Eder Jhonnatan. CC. IO. N. DE. SI ST. Méndez Varas para continuar con los procedimientos según sus fines.. DI. RE. Ms.C. Miguel Angel Muñoz Ríos ASESOR. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. UN IC. AC IÓ. N. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de Grados. CO. M. y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, ponemos a vuestra consideración y. Y. criterio el trabajo de investigación titulado: “Efecto de las concentraciones del. A. insecticida clorpirifos como fuente de carbono sobre el crecimiento de Trichoderma. ÁT. IC. viride”, con el propósito de obtener el Título Profesional de Biólogo – Microbiólogo.. RM. Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por errores u omisiones. AS. DE. IN FO. cometidos en la elaboración del presente informe, me someto a vuestro dictamen.. Br. Eder Jhonnatan Méndez Varas. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. Trujillo, Abril del 2015. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. ---------------------------------------------Ms.C. Juan Wilson Krugg PRESIDENTE. UN IC. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. ---------------------------------------------Ms.C. Miguel Muñoz Ríos VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. ---------------------------------------------Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza SECRETARIO. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN DEL INFORME DE TESIS Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que el presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales,. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. siendo aprobado por UNANIMIDAD por los miembros del jurado.. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. ---------------------------------------------Ms.C. Juan Wilson Krugg PRESIDENTE. ---------------------------------------------Ms.C. Miguel Muñoz Ríos VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. ---------------------------------------------Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza SECRETARIO. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIAS. AC IÓ. N. A DIOS, fuente de vida y sabiduría, quien no permite que hoja alguna de árbol se. UN IC. mueva sin su voluntad. Quien siempre me protege y acompaña en todo momento, por. CO. M. guiar mi camino y brindarme la fuerza necesaria para seguir adelante.. Y. A mis padres LEONCIO MÉNDEZ y MERCEDES VARAS por el amor, la confianza. IC. A. y el apoyo incondicional que me ayuda a crecer como persona y como profesional,. RM. ÁT. dándome la fortaleza y el valor para lograr mis objetivos.. IN FO. A mi esposa ARACELI SANCHEZ y mi pequeño hijo RODRIGO MÉNDEZ, quienes. DE. son motor y motivo en mi vida, cada meta trazada es pensando en ustedes que son mi. EM. AS. razón de ser.. SI ST. A mis hermanos CARLOS y CLAUDIA MÉNDEZ, que este logro sirva para motivar. DE. sus metas y aspiraciones profesionales, que estoy seguro no tardan en llegar.. DI. RE. CC. IO. N. A toda mi familia VARAS y MÉNDEZ, que depositaron su confianza en mí.. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. AC IÓ. N. Mi más sincero y profundo agradecimiento a mi amigo y asesor Ms. C. Miguel Muñoz. UN IC. Ríos, por brindarme su asesoramiento, buena amistad, apoyo incondicional y sus. CO. M. consejos para la realización del presente proyecto.. Y. A mis mamás JANETH y TITA VARAS, quienes de manera muy particular cada una. ÁT. IC. A. han influenciado y contribuido para que pueda lograr este objetivo.. RM. A mi papá MAYO VARAS LUJÁN, quien estando al frente de la familia como figura. IN FO. paterna supo corregirme e inculcarme incontables valores, sobresaliendo la humildad,. DE. el respeto por lo demás y el hábito por el estudio, privilegio que me durará para toda la. EM. AS. vida, gracias por tus consejos.. SI ST. A mi papá ALMERI para quien la distancia no es impedimento para saber cómo estoy. logro mío es también de él donde está.. IO. N. DE. en el camino a la superación con el logro de mis objetivos y en mi vida personal, cada. los debo a ellos, Dios los bendiga siempre.. DI. RE. CC. A mis abuelos ADRIANO, CELINA y CORINA, parte de mi formación profesional se. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. AC IÓ. N. Se determinó el efecto de las concentraciones del insecticida clorpirifos como. UN IC. fuente de carbono sobre el crecimiento de Trichoderma viride. Se trabajó con 4 concentraciones distintas (480, 960, 1440 y 2400 ppm.) de clorpirifos, además del. CO. M. control (glucosa). Para evaluar el efecto del clorpirifos como fuente de carbono sobre el. Y. crecimiento de T. viride, se sembró por puntura en el centro de cada placa a partir de un. Los resultados fueron expresados como. ÁT. cada concentración incluyendo el control.. IC. A. cultivo puro de T. viride, se incubó a 25ºC durante 4 días. Se realizó cinco ensayos por. RM. crecimiento radial promedio encontrándose que a medida que aumenta la concentración. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. de clorpirifos disminuye el crecimiento de Trichoderma viride.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE Página Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo ..................................................... ii. AC IÓ. N. Certificación del asesor…………………………………………………………...…….iii. UN IC. Presentación .................................................................................................................... iv Miembros del Jurado ......................................................................................................... v. CO. M. Aprobación .......................................................................................................................vi. Y. Dedicatorias ................................................................................................................... vii. IC. A. Agradecimientos ............................................................................................................ viii. ÁT. Resumen ...........................................................................................................................ix. RM. Índice ................................................................................................................................. x. IN FO. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................. 1. DE. MATERIAL Y MÉTODOS .............................................................................................. 5. AS. RESULTADOS ................................................................................................................. 7. EM. DISCUSIÓN ................................................................................................................... 11. SI ST. CONCLUSIÓN ............................................................................................................... 15 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................ 16. DI. RE. CC. IO. N. DE. ANEXOS ........................................................................................................................ 19. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. El continuo avance en el crecimiento de la población humana, sumado a. AC IÓ. N. los nuevos alcances y descubrimientos de la tecnología de los últimos tiempos, propicia la búsqueda de nuevas alternativas para incrementar la producción y Una forma de lograr este objetivo es. UN IC. mejorar la calidad de los alimentos.. M. mediante la reducción de las pérdidas en cultivos agrícolas, problema que origina. CO. considerables pérdidas, tanto a nivel de producción como económicas, provocadas. Y. por organismos causantes de plagas y enfermedades (insectos, nematodos y. IC. A. hongos patógenos de vegetales).1 Organismos a tener en cuenta considerando que. RM. ÁT. constantemente van adquiriendo mecanismos de defensa así como resistencia al. IN FO. tratamiento químico.. DE. Entre las principales causas de pérdidas en la agricultura se encuentra el. AS. ataque a los cultivos por insectos, para los cuales se utiliza diversos tipos de. EM. control, entre ellos el control químico. Entre los plaguicidas comúnmente usados. SI ST. por los agricultores se encuentran los organofosfatos, prohibidos desde el año. DE. 1991 para uso agrícola, que se caracterizan por su alta persistencia ambiental y. N. graves efectos a la salud2, uno de los organofosfatos más usados es el clorpirifos,. CC. IO. que actúa por contacto, ingestión e inhalación, siendo eficaz contra insectos. RE. chupadores y masticadores, el cual se utiliza tanto en la agricultura, para el control. DI. de plagas agrícolas, en forma de rocío para el control de plagas de cosechas (cochinillas, moscas blancas, trips de la platanera, numerosas orugas defoliadoras y minadoras, Gusano Cogolleros, Pulgón de la alfalfa, Gusanos Cortadores, Pulgón del Maíz, Gusano blanco, Gusano alambre. algunos escarabajos, y otros. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. insectos),. El clorpirifos, está disponible en diferentes marcas como Dursban, Lorsban, Agromil, Dhanwan, Dorsan, Omexan.. Está disponible en una variedad de formulaciones, tales como gránulos, polvos humectables, polvos secos y. UN IC. AC IÓ. N. concentrado emulsionable3.. En el ambiente agroindustrial, son muchos los efectos perjudiciales. CO. M. presentes en las prácticas agrícolas, las cuales no sólo tienen que ver con la. Y. contaminación del suelo, aire y agua, sino del mismo ser humano, ya que una. IC. A. importante proporción de las moléculas químicas vertidas a los suelos son rara o. ÁT. lentamente catabolizadas por la naturaleza, acumulándose y persistiendo en el. RM. ecosistema. La presencia de residuos y metabolitos de plaguicidas en el alimento,. IN FO. agua y suelo representa actualmente uno de los temas más importantes para la. DE. química ambiental. Existe una gran variedad de métodos físicos y químicos para. AS. tratar los suelos y mantos acuíferos contaminados, pero muchos de estos. EM. tratamientos no destruyen los compuestos peligrosos sino que los transfieren de. SI ST. una fase a otra, por lo que el tratamiento biológico en el que se transforman estos compuestos complejos peligrosos en compuestos más simples y menos tóxicos,. IO. N. DE. sigue siendo un desafío importante en la actualidad4.. CC. Como una alternativa de desintoxicación o degradación de químicos. DI. RE. contaminantes de suelos, se está utilizando microorganismos como los hongos, los cuales son esenciales para el ciclo biogeoquímico y son responsables de la mayor parte de la degradación de xenobióticos ambientales en la biosfera3. Los hongos. poseen la capacidad bioquímica y ecológica para degradar productos químicos. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. orgánicos ambientales, ya sea por modificación química o por influir en la biodisponibilidad químico.. AC IÓ. pesticidas organofosfatos como nutrientes, de igual manera, Jones and Hastings6. N. Hasan5 encontró que Aspergillus flavus y Aspergillus sydowii pueden utilizar a. UN IC. reportaron que Trichoderma harzianum, Penicillium vermiculatum, y Mucor sp. pueden utilizar como nutriente clorpirifos, Maya y col. aislaron Aspergillus,. Y. CO. M. Penicillium, Eurotium y Emericella con capacidad de degradar clorpirifos.. IC. A. Otro de los hongos es Trichoderma, que pertenece a los Deuteromicetes u. ÁT. hongos imperfectos, orden Moniliales y se caracteriza por presentar conidióforos. RM. hialinos, muchas veces blanquecinos, no verticilados, fiálides simples o en grupos,. IN FO. conidias hialinas, unicelulares ovoides que yacen en pequeños racimos terminales,. DE. se les reconoce fácilmente por su rápido crecimiento y el color verde de las. AS. conidias. En su estado vegetativo presentan un micelio o septos simples. Son. EM. haploides y su pared está compuesta por quitina y glucanos. Son anaerobios. SI ST. facultativos y se reproducen asexualmente por conidios7, 8, 9, 10.. DE. Las especies de Trichoderma se caracterizan por predominar en los. IO. N. ecosistemas terrestres (suelos agrícolas, pastizales, bosques y desiertos) y. CC. acuáticos11. Algunas especies son de vida libre en el suelo, simbiontes de plantas,. DI. RE. y otras son micoparásitas. Además, pueden colonizar distintos ambientes, debido a su alta capacidad reproductiva12, 13y no son exigentes en cuanto a sus requerimientos nutricionales, pueden utilizar una gran diversidad de sustratos, su crecimiento es favorecido por la materia orgánica y la humedad; su temperatura. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. óptima de crecimiento se encuentra en un rango de 25 a 30 °C. 14. Sin embargo, se. pueden adaptar y sobrevivir en condiciones extremas de temperatura, pH y salinidad, de igual forma puede sobrevivir en ambientes contaminados con. UN IC. AC IÓ. N. pesticidas y otros químicos15, 16.. En los últimos años, con el desarrollo agroindustrial de la región La. CO. M. Libertad han aparecido distintas plagas de los vegetales, lo cual ha hecho. Y. necesario el uso de distintos métodos de control, entre ellos el uso de plaguicidas,. IC. A. los cuales, tienen el principal problema, de su residualidad en el medio ambiente,. ÁT. por lo que se busca métodos de eliminarlos del ambiente, dentro de estos métodos. RM. está el uso de microorganismos, los cuales pueden utilizar al compuesto químico. IN FO. como fuente de carbono, nitrógeno, azufre y de energía para su crecimiento; por lo. DE. que el presente trabajo estuvo orientado a determinar el efecto de las. AS. concentraciones del insecticida clorpirifos como fuente de carbono sobre el. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. crecimiento de Trichoderma viride.. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODO. 2.1. Material de estudio. Fitopatología del Departamento de Microbiología y Parasitología.. UN IC. Universidad Nacional de Trujillo.. AC IÓ. N. 2.1.1. Cultivo puro de Trichoderma viride proporcionado por la cátedra de. CO. M. 2.1.2. Insecticida Dorsan, cuyo principio activo es clorpirifos. Y. 2.2. Procedimiento. IC. A. 2.2.1 Evaluación del crecimiento de T. viride frente a las concentraciones de. RM. ÁT. clorpirifos. IN FO. 2.2.1.1 Preparación del medio de cultivo. Se preparó Agar Czapeck en cinco matraces conteniendo 100 mL. DE. de medio cada uno, a cuatro de los medios de cultivo no se le añadió. AS. glucosa. Los medios de cultivo fueron esterilizados en autoclave y se. EM. dejaron enfriar hasta una temperatura aproximada de 50 °C. Estando. SI ST. aún fundido los medios, a los que no se les añadió glucosa, se les. DE. adicionó clorpirifos, respectivamente en cantidad suficiente para. DI. RE. CC. IO. N. obtener una concentración final de 480, 960, 1440 y 2400ppm., respectivamente. Al medio contenido en el matraz restante no se le agregó ningún insecticida, a fin de utilizarlo como control. Luego, los medios de cultivo de cada uno de los cuatro matraces fueron servidos en placas de Petri estériles (5 placas por cada concentración, incluyendo el control).. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2.1.2 Reactivación del cultivo de Trichoderma viride A partir del cultivo puro de T. viride, se procedió a resembrar en tubos de ensayo con Agar Sabouraud inclinado y luego fue incubado. UN IC. AC IÓ. N. a 25°C durante 7 días.. 2.2.1.3 Siembra e incubación.. CO. M. A partir del cultivo puro, se sembró 5 placas por concentración de. Y. insecticida, además del grupo control, luego se incubó a 25°C por 7. ÁT. IC. A. días.. RM. 2.2.1.4. Lectura de resultados. IN FO. A partir del primer día de siembra, y hasta el cuarto día, se midió. DE. el radio de crecimiento (mm.) de la colonia en diferentes direcciones,. AS. obteniéndose un radio promedio de crecimiento por día por cada. EM. concentración de fungicida y el grupo control.. SI ST. Los resultados de crecimiento de T. viride se expresaron en. DE. centímetros (cm). DI. RE. CC. IO. N. 2.2.2. Análisis de datos El análisis estadístico se llevó a cabo en base a la prueba de Análisis de Varianza Unidireccional (ANOVA) y Test Tukey B, para la comparación entre los resultados obtenidos con cada concentración de insecticida para el crecimiento de Trichoderma viride.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. AC IÓ. obtuvo en presencia de glucosa y en la concentración de 480 ppm de clorpirifos.. N. En la Figura 1 y 2 se observa que el mayor crecimiento de Trichoderma viride se. UN IC. En la Figura 3 se observa que la mayor velocidad de crecimiento de Trichoderma viride se obtuvo en presencia de glucosa y en la concentración de 480 ppm de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. clorpirifos.. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(18) N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. Fig. 1. Porcentaje promedio de crecimiento de Trichoderma viride en presencia de glucosa y de diferentes concentraciones de clorpirifos a los 4 días. 8. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Glucosa. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. 480. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. 1440. 960. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. 2400. Fig. 2. Crecimiento radial promedio de Trichoderma viride en presencia de glucosa y de diferentes concentraciones de clorpirifos durante 4 días. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(20) SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. Fig. 3. Velocidad de Crecimiento de Trichoderma viride en presencia de glucosa y de diferentes concentraciones de clorpirifos durante 4 días. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. AC IÓ. N. La estimulación o inhibición del crecimiento y metabolismo de los hongos dependen de la disponibilidad de nutrientes y de condiciones ambientales. UN IC. adecuadas. Los hongos al ser heterótrofos, para poder crecer, necesitan. M. obligatoriamente de la presencia de una fuente de carbono orgánica en el medio. CO. donde desarrollan, a partir de la cual sintetizarán su biomoléculas y obtendrán la. Y. energía necesaria para su desarrollo17. En la figuras 1 y 2 se observa que. IC. A. Trichoderma viride presenta crecimiento en el medio de cultivo con glucosa, así. RM. ÁT. como en los medios de cultivo que tienen al clorpirifos como única fuente de. DE. clorpirifos como fuente de carbono.. IN FO. carbono, esto significaría que este hongo es capaz de utilizar al insecticida. que. Pseudomonas. EM. encontraron. AS. Estos resultados coinciden con lo encontrado por Mendoza y col.18, quienes putida,. Pseudomonas. mendocina,. SI ST. Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia son capaces de degradar a la. DE. permetrina y la cipermetrina, así mismo Jilani19 encontró que Pseudomonas (IES-. N. Ps-1) puede degradar pesticidas Organofosfatos (Malation, Methamidofos),. CC. IO. carbamate (Cartap) y piretroides (Cipermetrina), Hasan5 encontró que Aspergillus. RE. flavus y Aspergillus sydowii pueden utilizar a pesticidas organofosfatos como. DI. nutrientes, de igual manera, Jones and Hastings6 reportaron que Trichoderma harzianum, Penicillium vermiculatum, y Mucor sp. pueden utilizar como nutriente clorpirifos.. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Explicando el fenómeno ocurrido, químicamente en la hidrólisis del clorpirifos,. AC IÓ. plaguicida tiene tres enlaces éster susceptibles al rompimiento: dos enlaces. N. es importante tener en cuenta lo planteado por Liu et20, quien explica, que este. UN IC. terciarios alquil éster y un enlace éster fosfato (piridil). Para la ruptura de estos. enlaces se ha encontrado que participan las enzimas parathion hidrolasa, y la. CO. M. organofósforo ester-hidrolasa. Obteniéndose como producto de degradación de este plaguicida es el 3, 5, 6 tricloro-2-pirinidol (TPC), el cual genera el 3, 5, 6-. ÁT. IC. A. Y. tricloro-2-metoxipiridina (TMP) y por último dióxido de carbono21.. RM. Al observar cómo evoluciona el crecimiento de Trichoderma viride en las. IN FO. concentraciones de clorpirifos evaluadas durante 4 días, se observa que existen. DE. diferencias entre los crecimientos obtenidos para cada uno de las concentraciones. AS. (Fig. 1), lo cual se debe a que, como es conocido, la estimulación o inhibición del. EM. crecimiento y metabolismo de los microorganismos dependen de la disponibilidad. SI ST. y concentración de nutrientes (carbono y nitrógeno principalmente) y de las condiciones ambientales adecuadas; sin embargo, con frecuencia la concentración. IO. N. DE. de la fuente de carbono actúa en forma limitante 22.. CC. En la Fig. 1 y 2, se observa que hubo un mayor crecimiento de T. viride en. DI. RE. presencia de glucosa y en la concentraciones de 480 y 960 ppm de clorpirifos, esto se puede deber a que en presencia de glucosa y en dichas concentraciones la proporción carbono: nitrógeno (C: N) del Agar Czapeck haya sido la más adecuada, puesto que este es un factor decisivo en la tasa de aprovechamiento del. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. sustrato, siendo según Deacon23 un medio de crecimiento óptimo aquel que tenga. AC IÓ. Se sabe que los microorganismos crecen de manera directamente. N. una proporción C: N aproximadamente 4: 1.. UN IC. proporcional a la concentración de sustrato22. Sin embargo en la presente. investigación se encontró que a medida que aumenta la concentración de La explicación de este. CO. M. clorpirifos disminuye el crecimiento de T. viride.. Y. fenómeno pudiera deberse a que la acumulación del sustrato disminuye su. IC. A. disponibilidad en forma adecuada, y de igual forma las altas concentraciones de. ÁT. algunos productos pueden inhibir la acción enzimática clave de las rutas. RM. metabólicas centrales o de los procesos de transporte, y en consecuencia hacen. DE. IN FO. disminuir el crecimiento de la población microbiana24.. AS. Otra probable explicación al menor crecimiento de T. viride en presencia de. EM. clorpirifos, puede deberse a que este compuesto es un organofosforado. SI ST. (organofosfato) que posee en su molécula un anillo clorado, lo que le confiere mayor recalcitrancia a la degradación. Sin embargo, las especies de Trichoderma. DE. poseen enzimas con actividad deshalogenasa, lo que les permite. remover el. CC. IO. N. radical cloro y degradar compuestos de esta naturaleza25.. DI. RE. Así mismo, la mayor velocidad de crecimiento de T. viride a la concentración. de 480 ppm de clorpirifos (Fig. 3), se puede atribuir, a la rapidez con que son transportados los nutrientes, lo cual se debe a la afinidad por el sistema transportador47 ; así la rapidez en el transporte contribuiría con la rapidez con que. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. le son suministrados los nutrientes a T. viride pudiendo lograr un incremento en su crecimiento, además es conocido que todo aquello que afecte el crecimiento de un microorganismo se ve reflejado en sus parámetros cinéticos, tales como la. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. velocidad de crecimiento22. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. AC IÓ. N. Trichoderma viride utiliza como fuente de carbono al insecticida clorpirifos. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. A medida que aumenta la concentración de clorpirifos disminuye el crecimiento de Trichoderma viride.. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. http://impworld.umn.edu/cancelado/spchapter/Wareherb%20sp.htm 2.. N. Ware, G.2000. Introducción a los herbicidas. ArizonaURL:. AC IÓ. 1.. Montoro Y, Moreno R, Gomero L, Reyes M. Características de uso de. UN IC. plaguicidas y químicos y riesgo en la salud d agricultores de la sierra central del Perú. Rev Peru Med Exp Saalud Pública, 2009; 26(4): 466-472.. Bhagobaty RK, Joshi SR, Malik A (2007). Microbial degradation of. CO. M. 3.. organophosphorous pesticide: Chlorpyrifos. The Internet Journal of. Mostafa Gamal, A.E. (2010); Electrochemical Biosensorsforthe Detection. IC. A. 4.. Y. Microbiology. 4 :1.. ÁT. of Pesticides. The Open Electrochemistry Journal: 2, 22-42. Hasan, H. A. H., 1999: Fungalutilization of organophosphate pesticides. RM. 5.. Microbiologica. 44(1): 77-84. Jones, A.S., Hastings, F.L. 1981 Soilmicrob estudies. In: Hastings F.L., Coster. J.E.. (eds). DE. 6.. IN FO. and their degradation by Aspergillus flavus and A sydowii in soil. Folia. Field. AS. insecticidesforsouthernpinebeetle. and. laboratory. control.. USDA.. evaluations Southern. of. Forest. EM. Experiment Station, Forest Service, SE 21, pp 13-14,35. Alexopoulos, C., Mims, C. and Blackwell, M. 1996. Introductory. SI ST. 7.. Mycology. 4th Edition. John Wiley & Sons. New York. 869 pp. 8.. DE. Atlas, R.M. and Bartha, R. 1992. Microbial Ecology, Fundamentals and. N. applications. Thirdedition. Ed. Benjamín/Cummings. Redwood City, USA. p. 69-. Harman, G., Howell, C., Viterbo, A., Chet, I. and Lorito, M. 2004. Trichoderma. CC. 9.. IO. 73, 77-83, 463-466.. RE. species – Opportunistic, avirulent plant symbionts. Nature Reviwes. Vol. 2. p. 43. DI. – 56.. 10.. Rodriguez, L. y Veronica, J. 2002. Efecto antagónico y biocontrolador de algunos microorganismos saprofíticos contra Rhizoctonia solani patógeno causante del “damping off” en plantas de tomate. Trabajo de Grado. Microbiología. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Lima, Perú.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
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(29) ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ANEXOS. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(30) DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. Anexo 1. Cultivo de Trichoderma viride. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(31) DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. Anexo 2. Insecticida Dorsan (clorpirifos).. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(32) AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 3. Crecimiento radial (mm) de Trichoderma viride en el grupo control. CO. Radio de la colonia (mm) 48 h 72 h. 24h. Y. Ensayo. M. UN IC. durante 96 horas de evaluación. 96 h. 2.225. 3.700. 4.280. 4.500. 2. 1.980. 3.600. 3. 2.180. 3.500. 4. 2.300. 5. 0.950. IC. A. 1. 4.500. 4.080. 4.500. 3.580. 4.150. 4.500. 1.100. 1.730. 4.500. DE. IN FO. RM. ÁT. 4.250. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. h: horas. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(33) AC IÓ. Anexo 4. Crecimiento radial (mm) de Trichoderma viride en 480 ppm de. 72 h. 1. 0.525. 0.950. 1.400. 2. 0.530. 1.000. 3. 0.525. 1.075. 4. 0.600. 5. 0.535. IN FO. A. RM. ÁT. IC. 1.400. 1.000. 1.475 1.435. 96 h. 1.750 1.800 1.850 1.825 1.795. AS. DE. 0.995. 1.475. M. 48 h. Y. 24h. CO. Radio de la colonia (mm). UN IC. clorpirifos durante 96 horas de evaluación. Ensayo. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. h: horas. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 5. Crecimiento radial (mm) de Trichoderma viride en 960 ppm de. Radio de la colonia (mm) 72 h. 96 h. 1. 0. 0.450. 0.775. 2. 0. 0.480. 3. 0. 0.400. 4. 0. 0.425. 5. 0. M. 48 h. 0.975. CO. 24h. IN FO. Ensayo. UN IC. AC IÓ. N. clorpirifos durante 96 horas de evaluación. 1.030. IC. A. Y. 0.800. RM. ÁT. 0.650. 0.650. 0.925 0.825. DE. 0.400. 0.675. 0.900. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. h: horas. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 6. Crecimiento radial (mm) de Trichoderma viride en 1440 ppm de. Radio de la colonia (mm) 72 h. 96 h. 1. 0. 0. 0.325. 2. 0. 0. 3. 0. 0. 4. 0. 0. 5. 0. M. 48 h. 0.475. CO. 24h. IN FO. Ensayo. UN IC. AC IÓ. N. clorpirifos durante 96 horas de evaluación. 0.500. RM. ÁT. 0.325 0.350 0.350. 0.500 0.450 0.500. DE. 0. IC. A. Y. 0.330. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. h: horas. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 7. Crecimiento radial (mm) de Trichoderma viride en 2400 ppm de. 0. 0. 0. 2. 0. 0. 0. 3. 0. 0. 4. 0. 0. 5. 0. 0 0. A. 1. 96 h. M. 24h. CO. Radio de la colonia (mm) 48 h 72 h. Y. Ensayo. UN IC. AC IÓ. N. clorpirifos durante 96 horas de evaluación. IC 0. 0. ÁT RM. IN FO 0. 0. 0. 0. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. h: horas. 0. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 8: Análisis de varianza y Test Tukey B del crecimiento de Trichoderma. N. viride a diferentes concentraciones de clorpirifos.. AC IÓ. ANOVA de un factor Porcentaje de crecimiento gl. Media cuadrática. 31341,196. 4. 7835,299. Intra-grupos. 16,797. 20. ,840. 31357,993. 24. 9329,336. ,000. IN FO. AS. DE. Subconjuntos homogéneos. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. Inter-grupos Total. Sig.. M. cuadrados. F. UN IC. Suma de. Tukey B. DE. 2400,00. CC. ,00. IO. 480,00. N. 1440,00 960,00. N. SI ST. Concentración. EM. Porcentaje de crecimiento. 5 5. 1. Subconjunto para alfa = 0.05 2. 3. 4. 5. ,0000 10,6660. 5. 20,6900. 5. 39,9100. 5. 100,0000. RE. Se muestran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.. DI. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 5.000.. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 9: Composición del Medio Czapeck. AC IÓ. N. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA:. UN IC. Agar 15.0. M. Sacarosa 30.0. CO. Cloruro de potasio 0.5. A. Y. Sulfato ferroso 0.01. ÁT. IC. Fosfato dipotásico 1.0. RM. Nitrato de sodio 2.0. IN FO. Sulfato de magnesio 0.5. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. pH 7.3 ± 0.2. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..
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