Efecto del aceite esencial de Ocimum basilicum L sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa in vitro

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS. AS. ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA. BI. O. LO. G. IC. Y PARASITOLOGÍA. AS. Efecto del aceite esencial de Ocimum basilicum L. sobre el crecimiento de. CI EN. CI. Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa in vitro. TESIS. PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:. CA. DE. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. Br. ELIZABETH CELIA ARTEAGA QUIJADA. IO. TE. AUTORA:. Dr. MARCO LEONCIO SALAZAR CASTILLO. BI. BL. ASESOR:. TRUJILLO – PERU 2018. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. BI. O. LO. Rector de la Universidad Nacional de Trujillo.. G. Dr. ORLANDO MOISÉS GONZALES NIEVES. IC. AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. CI. Dr. RUBÉN CÉSAR VERA VELIZ. DE. CI EN. Vice – rector Académico de la Universidad Nacional de Trujillo.. CA. Dr. WEYDER PORTOCARRERO CÁRDENAS. BI. BL. IO. TE. Vice – rector de Investigación de la Universidad Nacional de Trujillo.. Dr. STEBAN ILICH ZERPA. Secretario General de la Universidad Nacional de Trujillo.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DE LA. IC. AS. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. BI. O. LO. Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas.. G. Dr. FREDDY MEJIA COICO. AS. Dr. WILLIAN ZELADA ESTRAVER. CI EN. CI. Secretario de la Facultad de Ciencias Biológicas.. DE. Dr. JAIME ASUNCION AGREDA CALLIRGOS Parasitología.. Ms. C. IVÁN ANGULO CASTRO. BI. BL. IO. TE. CA. Director de la Escuela Académico Profesional de Microbiología y. Rector de Departamento Académico Profesional de Microbiología y Parasitología.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:. AS. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de. IC. Grados y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, presento a vuestra. de. Ocimum. basilicum. L.. sobre. el. crecimiento. de. LO. esencial. G. consideración y claro discernimiento la tesis titulada: “Efecto del aceite. O. Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa in. AS. BI. vitro”. CI EN. CI. Esperando que vuestro criterio sea de comprensión por errores u omisiones cometidos en la elaboración del informe de tesis, nos sometemos a vuestro. Trujillo, Diciembre del 2018.. Br. ELIZABETH CELIA ARTEAGA QUIJADA. BI. BL. IO. TE. CA. DE. dictamen.. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EL ASESOR El que suscribe Dr. Marco Salazar Castillo, asesor de la tesis titulada:. AS. “Efecto del aceite esencial de Ocimum basilicum L. sobre el crecimiento de. LO. G. IC. Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa in vitro”. O. CERTIFICA. BI. Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su. AS. correspondiente proyecto y las orientaciones pertinentes.. CI. En cuanto al informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo. CI EN. las observaciones y sugerencias alcanzadas.. DE. Por lo que autorizo a la bachiller: Elizabeth Celia Arteaga Quijada continúe. BI. BL. IO. TE. CA. con los trámites del reglamento correspondiente.. Dr. Marco Salazar Castillo ASESOR. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. O. DE. CI EN. CI. AS. PRESIDENTE. BI. Ms C. Juan Wilson Krugg. LO. G. IC. AS. MIEMBROS DEL JURADO. Ms C. Eduardo Muñoz Ganoza. BI. BL. IO. TE. CA. SECRETARIO. Dr. Marco Salazar Castillo VOCAL. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran. IC. que la presente tesis ha cumplido con los requisitos formales y. AS. BI. O. LO. G. fundamentales, siendo aprobada por UNANIMIDAD.. CI. Ms C. Juan Wilson Krugg. Ms C. Eduardo Muñoz Ganoza SECRETARIO. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. PRESIDENTE. Dr. Marco Salazar Castillo VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. AGRADECIMIENTO. IC. A mi asesor Dr. Marco Salazar Castillo por el apoyo brindado, la dedicación. BI. O. LO. brindados para ser una mejor persona.. G. en la realización de esta tesis, por la confianza depositada y los consejos. Al Dr. Edmundo Venegas Casanova por el apoyo en la extracción del aceite. CI EN. CI. AS. esencial.. A la Dra. Icela Rodríguez Haro por la ayuda prestada, al permitirme el uso de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. los equipos del laboratorio de bacteriología.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. AS. A DIOS por ser mi guía e iluminar mi camino, por cuidarme y brindarme la. LO. G. IC. fuerza necesaria para tomar las mejores decisiones a lo largo de mi vida.. A mis queridos padres, Pedro y Victorina por su amor incondicional,. BI. O. confianza, comprensión, apoyo en todo momento y ser mi fuerza para. CI. AS. continuar siempre.. CI EN. A mis abuelitos Moisés y Celia, por su amor, comprensión y compañía en. DE. cada paso de mi vida.. A mis hermanas Cecilia, Paola y Fabiola por escucharme, ser mis amigas. rendirme.. IO. TE. CA. incondicionales, brindarme su apoyo y los ánimos necesarios para no. amor cada día.. BI. BL. A mi pequeña sobrina Lía Alexandra por ser alegría de la casa y llenarme de. Elizabeth Celia Arteaga Quijada. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN El propósito de la siguiente tesis fue determinar el efecto del aceite esencial de Ocimum basilicum L., sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus. AS. ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa in Vitro. Para ello se obtuvo el. IC. aceite esencial por el método de destilación por arrastre con vapor de agua.. G. Se evaluó el efecto del aceite esencial por el método de difusión de Kirby –. LO. Bauer modificado utilizando concentraciones de 10, 20, 40 y 60µL/mL,. O. Vancomicina y Ciprofloxacina como control positivo para Staphylococcus. BI. aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa respectivamente, se. AS. sembró un inóculo estandarizado con el patrón de turbiedad de 0.5 del. CI. Nefelómetro de Mc Farland por la técnica de siembra en superficie. Las. CI EN. lecturas se realizaron midiendo los halos de inhibición en (mm), se encontró que la concentración de 10 µL/mL del aceite esencial inhibe el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923 en un 50% y a medida que se. DE. aumenta dicha concentración también aumenta el porcentaje del efecto. CA. relativo a 77% a una concentración de 60µL/mL. Respecto a Pseudomonas. TE. aeruginosa el aceite esencian no presento ningún efecto inhibitorio. Se concluye que las concentraciones del aceite esencial de O. basilicum L.. IO. afecta el crecimiento de S. aureus de manera proporcional a la. BL. concentración. Este aceite no tiene ningún efecto sobre el crecimiento de P.. BI. aeruginosa Palabra clave: Aceite esencial, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, actividad antimicrobiana.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. The purpose of the thesis following thesis was to determine the effect of the. AS. essential oil of Ocimum basilicum L. on the growth of Staphylococcus aureus. IC. ATCC 25923 and Pseudomonas aeruginosa in Vitro. The essential oil was. G. obtained by the method of steam distillation. The effect of the essential oil. LO. was evaluated by the modified Kirby - Bauer diffusion method using. O. concentrations of 10, 20, 40 and 60μL / mL and Vancomycin and. BI. Ciprofloxacin as positive control for Staphylococcus aureus ATCC 25923 and. AS. Pseudomonas aeruginosa respectively, a standardized inoculum with the. CI. turbidity pattern of 0.5 of the Mcfarland Nephelometer was planted by the. CI EN. technique of surface sowing. The readings were performed, the inhibition halos in (mm) were found in the concentration of 10 μL / ml of essential oil that inhibits the growth of Staphylococcus aureus ATCC 25923 by 50% as. DE. the concentration increases, the percentage of the Relative effect also. CA. increases 77% at a concentration of 60 μL/mL. Regarding Pseudomonas aeruginosa, the essence oil did not present any inhibitory effect. It is. TE. concluded that the concentrations of the essential oil of O. basilicum L.. IO. affects the growth of S. aureus proportionally to the concentration. This oil. BI. BL. has no effect on the growth of P. aeruginosa. Keyword: Essential oil, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, antimicrobial activity.. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. AS. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO………... ii. IC. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS………… iii. LO. G. PRESENTACIÓN……..............................................…………………………. iv. O. MIEMBROS DEL JURADO………………………………………………………. v. BI. APROBACIÓN…………………………………………………………………… ..vi. AS. DEL ASESOR…………………………………………………………………..… vii. CI. AGRADECIMIENTO………………………………………..............…...……... viii. CI EN. DEDICATORIA……………………………………………………………………. ix RESUMEN…………………………………………………………………….…… x. DE. ABSTRAC……………………………………………………………...………….. xi. CA. ÍNDICE………………………………………………………………………..…… xii. TE. INTRODUCCIÓN………………………………………………………………….. 1. IO. OBJETIVOS…………..………………………………………………………….. 9. BL. MATERIALES Y MÉTODOS……………………………………………...……. 10 MATERIAL ……………………………………………………………………10. BI 1.. 1.1. MATERIAL BIOLÓGICO…………………………………………...…....10 2.. MÉTODOS ……………………………………………………………..…….10 2.1. Obtención del plantas de O. basilicum L……………………………. .10. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2. Extracción del aceite esencial de O. basilicum L………………….... 11 2.3. Preparación de las concentraciones aceite esencial de O. basilicum L.…………………………………………………………… 12. AS. 2.4. Reactivación del inóculo bacteriano…………………………………. 12. IC. 2.5. Estandarización del inóculo bacteriano………………………………12. G. 2.6. Evaluación del efecto de las diferentes concentraciones. LO. de O. basilicum L………………………………………………………. .13. O. 2.7. Lectura………………………………………………………………….... 14. BI. 2.8. Análisis estadístico ……………………………………………………. .14. AS. RESULTADOS ……………………………………………………………….…15. CI EN. CI. DISCUSIÓN……………………………………………………………………... 19 CONCLUSIONES………………………………………………………………. 22. DE. RECOMENDACIONES………………………………………………………... 23 REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA……………………………………………... 24. BI. BL. IO. TE. CA. ANEXOS……………………………………………………………………….... 32. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCION El potencial antimicrobiano y antioxidante de los aceites esenciales de plantas aromáticas y medicinales, con el fin de utilizarlos en el control de patógenos. AS. causantes de enfermedades en humanos, animales y vegetales, se ha. IC. convertido en la razón de ser de muchas investigaciones1. La Organización. G. Mundial de la Salud (OMS) reconoce la importancia que tiene la medicina. LO. tradicional a partir de plantas, así como el uso y aplicación de tecnologías para. O. la búsqueda de productos naturales que contribuyan a la lucha contra. BI. enfermedades infecciosas y en este aspecto, los estudios fitoquímicos pueden. AS. revelar especies de plantas con potencial actividad antimicrobiana2.. CI EN. CI. En los últimos años el interés del uso de plantas medicinales es cada día mayor, el 80 % de la población mundial ha recurrido a las plantas medicinales para tratar diversas enfermedades o afecciones, porque son más accesibles y. ofrecen. DE. baratos que los productos farmacéuticos3, también los productos naturales una. valiosa. e. interesante. fuente. de. nuevos. medicamentos. CA. contribuyendo así con 60% y 75% contra enfermedades infecciosas; por otro. TE. lado la resistencia que presentan los microorganismos a los antibióticos. IO. comunes, hacen indispensable la búsqueda de nuevas sustancias que. BI. BL. permitan contrarrestar los mecanismos de resistencia4.. El Perú presenta una rica variedad de especies vegetales, debido a las condiciones geográficas favorables que posee, el mayor porcentaje de plantas medicinales se encuentran en la Cordillera de los Andes, siendo utilizadas en forma empírica por sus bondades terapéuticas en el cuidado de la salud, dentro 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de este contexto, los aceites esenciales son productos naturales de gran valor e importancia económica5. La actividad de los aceites esenciales se investiga a partir de los efectos farmacológicos que se producen por las mezclas complejas. componentes. químicos. como. mono. y. AS. de fitoconstituyentes los cuales están conformados principalmente por sesquiterpenos. incluyendo. a. IC. carbohidratos, alcoholes, éter, aldehídos y cetonas. Son líquidos de. LO. G. consistencia aceitosa, aromáticos, que son obtenidos de flores, brotes,. BI. O. semillas, hojas, corteza, frutas y raíces6.. El género Ocimum está representado por más de 150 especies7, de las cuales. AS. comprende más de 50 especies que se han caracterizado por contener aceites. CI. esenciales biológicamente activos, que presentan propiedades alelopáticas,. CI EN. antibacterianas, antioxidantes, nematicidas, antistáticas y antifúngicas8. Siendo la especie Ocimum basilicum L. la que produce mayor cantidad de aceite. sentido. DE. esenciales, los cuales están localizadas principalmente en las flores, en este el efecto medicinal de esta planta se debe a los contenidos de. CA. alcaloides, taninos, flavonoides y compuestos fenólicos que se encuentran en. TE. ella; específicamente, los compuestos fenólicos son un grupo de antioxidantes. IO. naturales, producto del metabolismo secundario de las plantas que se. BL. encuentran particularmente en hierbas aromáticas, frutas, vegetales y cereales,. BI. por lo que su consumo provoca efectos benéficos para la salud9.. La albahaca (Ocimum basilicum L.) pertenece a la familia de las Lamiaceae, es. originaria de la India, África y el sur de Asia y actualmente cultivada en todo el mundo, es una planta herbácea de (30 a 50 cm de altura), se encuentra en las. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. regiones de climas subtropicales o templadas, calientes y húmedas, pudiendo ser cultivadas todo el año. La planta también tolera bajas temperaturas pero su desarrollo es más lento10, es una planta aromática que tradicionalmente se ha. compuestos. y mal funcionamiento renal11, y por los diferentes. químicos. que. posee,. predominando. como. constituyentes. IC. diarrea, verrugas,. AS. utilizado como planta medicinal en el tratamiento de dolores de cabeza, tos,. LO. G. mayoritarios el linalool, metilchavicol (estragol), metil cinamato, metil eugenol,. BI. O. eugenol12.. AS. Staphylococcus aureus es un microorganismo Gram Positivo, aerobia o. CI. anaerobia facultativa, oportunista y patógeno adaptable por tener la capacidad. CI EN. de infectar, invadir, persistir y replicarse en cualquier clase de tejido humano, es la causante de diversas afecciones que comprende desde infecciones cutáneas, tracto respiratorio superior, síndrome del choque tóxico y la. DE. intoxicación alimentaria por la ingesta de productos contaminados, hasta enfermedades sistémicas mortales13, 14. Este microorganismo se caracteriza por. CA. ser el principal causante de las infecciones nosocomiales. Esta especie habita. TE. tanto en las mucosas como en la piel de los seres humanos, a través de las. IO. heridas pueda penetrar en el torrente sanguíneo del paciente por medio del. BL. contacto directo o indirecto con el personal sanitario, con un objeto. BI. contaminado, o incluso, con otro paciente. Las cepas habituales de S. aureus son resistentes a la penicilina, siendo los antibióticos más eficaces para combatirlos los aminoglucósidos, las cefalosporinas, la oxacilina o la nafcilina, además puede ser conveniente la eliminación de puertas de entradas como. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. catéteres venosos permanentes o drenajes quirúrgicos. El principal grupo de riesgo son pacientes hospitalizados o inmunocomprometidos15. En investigaciones realizadas S. aureus es resistente a la meticilina (MRSA) y. AS. a otros antibióticos que antes eran eficaces contra el tratamiento de las infecciones. Desde el punto de vista genómico, la resistencia se produce por. IC. selección natural a través de mutaciones producidas al azar; sin embargo,. LO. G. también se pueden inducir artificialmente mediante la aplicación de una presión selectiva a una población, como sería el abuso a la utilización de. BI. O. antibióticos16.En los últimos años las infecciones comunitarias y adquiridas en los hospitales con Staphylococcus aureus han aumentado y aumentan los. AS. aislamientos resistentes a los antibióticos, las cepas de S. aureus presentaron. CI EN. ciprofloxacina y la clindamicina17.. CI. resistencia múltiple a la meticilina, especialmente a la gentamicina, la. DE. Pseudomonas aeruginosa es una bacteria Gram Negativa, aeróbica, es un patógeno oportunista, responsable de una amplia gama de infecciones,. CA. principalmente nosocomiales y del 10% de todas las infecciones adquiridas en. TE. los hospitales en todo el mundo. Particularmente los pacientes con. IO. inmunosupresión, así como aquellos que han sufrido quemaduras severas,. BL. neutropenia inducida por quimioterapia o presentan enfermedades pulmonares subyacentes están propensos a desarrollar las infecciones18.También plantea. BI. un desafío terapéutico debido a la alta tasa de morbilidad y mortalidad, es intrínsecamente resistente a diversas clases de antibióticos que no guardan relación estructural entre sí, debido a la disminución de la permeabilidad de su membrana externa, a la expresión constitutiva de varias bombas de expulsión y. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a la producción de enzimas que inactivan a los antibióticos. Además, posee la capacidad de adquirir nuevos mecanismos de resistencia vía mutaciones19. Estudios realizados evaluaron la resistencia a los antibióticos en aislados. AS. clínicos de P. aeruginosa y encontraron mayor resistencia a ceftazidima, aztreonam, ciprofloxacina, gentamicina y meropenem20. Las infecciones. IC. nosocomiales causadas por este organismo a menudo son difíciles de tratar. LO. G. debido a la resistencia intrínseca de la especie y su notable capacidad para adquirir más mecanismos de resistencia a múltiples grupos de agentes los. b-lactámicos,. aminoglucósidos. O. incluidos. y. BI. antimicrobianos,. AS. fluoroquinolonas21.. CI. En investigaciones realizadas se demostró mediante un estudio in vitro, el. CI EN. efecto antimicrobiano del aceite esencial, extracto de albahaca (Ocimum basilicum) y el hipoclorito de sodio al 2.5% sobre cepas de Enterococcus. DE. faecalis a concentraciones de 2%, 2.5% y 10%, se evaluó por el método de difusión de disco en agar concluyendo, que tanto el extracto como el aceite a. CA. un porcentaje del 10% tuvo un efecto igual que el hipoclorito de sodio al 2.5% 22.. IO. TE. frente al E. faecalis con un halo de formación de 22 mm. BL. Con el fin de comprobar la composición química y la actividad antibacteriana de. BI. hojas del Aceite esencial de Ocimum basilicum L. en cepas de Bacillus subtilis, Escherichia. coli,. Pseudomonas. aeruginosa,. Salmonella. enteritidis. y. Staphylococcus aureus. La acción antibacteriana se cuantificó midiendo el diámetro del halo de inhibición del crecimiento bacteriano alrededor de discos. Se encontró que el aceite esencial mostró actividad bacteriostática leve contra. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. todos los microorganismos ensayados. Dando como resultado para Bacillus subtilis (12mm) Escherichia coli (9mm), Pseudomonas aeruginosa (9mm), Salmonella enteritidis (8mm) y Staphylococcus aureus (11mm) de diámetro el. AS. halo de inhibición. Las bacterias gran positivas (B. subtilis y S. aureus),. IC. resultaron más susceptibles al Aceite esencial23.. G. En otras investigaciones se evaluó el extracto etanólico de Ocimum basilicum. LO. L. de hojas frescas y secas a concentraciones de 5 y 10%. Los resultados. O. presentan acción antimicrobiana sobre Staphylococcus aureus, notándose que. 10%,. afectando. el. crecimiento. de. la. bacteria,. con. diferencias. AS. del. BI. los extractos más efectivos fueron los que se encontraban a concentraciones. CI EN. CI. estadísticamente significativas (p < 0,05) con respecto al grupo control24.. Se evaluó los aceites esenciales de Ocimum basilicum L. (albaca blanca) y Ocimum basilicum var. genovese L. (albaca genovesa), como candidatos para. DE. el desarrollo de nuevos antibacterianos. Se realizó la evaluación biológica frente a Clavibacter michiganensis subsp michiganensis (Smith) Davis et al,. CA. Xanthomonas albilineans (Ashby) Dowson, Streptococcus suis (Elliot,) Kilpper-. TE. Bälz & Schleifer y Klebsiella pneumoniae (Schroeter) Trevisan. Los aceites. IO. esenciales de albahaca blanca y genovesa evidenciaron una actividad. BL. antibacteriana marcada frente a todas las bacterias evaluadas. Las bacterias. BI. fitopatógenas (C. michiganensis subsp michiganensis (Smith) Davis et al, X. albilineans (Ashby) Dowson) fueron más susceptibles a la acción de ambos aceites que las bacterias patógenas de animales12.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En esta investigación se caracterizaron químicamente los aceites esenciales de cuatro especies del género Ocimum: O. basilicum L. var basilicum, O. basilicum L. var purpurenscens, O. gratissimum L., O. tenuiflorum L. se les determinó,. AS. mediante la técnica de difusión en agar perforado, la actividad antimicrobiana contra 25 cepas de Staphylococcus aureus y 18 cepas de Klebsiella. IC. pneumoniae multirresistentes de origen nosocomial. Los aceites esenciales se. LO. G. extrajeron por hidrodestilación y se evaluaron las concentraciones de 50 y 75% de aceite esencial dando como resultados, los aceites esenciales provenientes. BI. O. de O. basilicum L. var basilicum y de O. gratissimum L., mostraron una potente actividad inhibitoria contra las cepas de S. aureus con la formación de halos de. AS. 8 a 13 mm para la mitad de todas las cepas y K. pneumoniae el halo de. CI. inhibición fue de 8 a 13mm para más de 70% de las cepas estudiadas. El. CI EN. aceite de O. tenuiflorum L. presentó una difusión deficiente en el medio de cultivo; sin embargo, el mismo tuvo actividad inhibitoria sólo sobre los. DE. organismos Gram negativos. Al aceite esencial de O. basilicum L. var purpurenscens no se le detectó ninguna actividad inhibitoria sobre los. TE. CA. microorganismos estudiados 25.. IO. La albahaca puede ser un buen candidato como planta con actividad. BL. antibacteriana. El aceite esencial se extrajo de las hojas de la planta y se destilo utilizando un equipo tipo Clevenger. Las propiedades antibacterianas del. BI. aceite esencial de Ocimum basilicum L. se estudió en bacterias Gram negativas como Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Gram positivas que incluyen Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Los resultados de las pruebas de difusión en discos de agar mostraron las siguientes zonas de. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. inhibición: S. aureus 29.20 - 30.56mm, B. cereus 10.66 - 16.11mm, E. coli 17.48 - 23.58mm y para P. aeruginosa se observaron las zonas de máxima. AS. inhibición26.. Por lo expuesto, la presente tesis estuvo orientada a la evaluación del efecto. IC. del aceite esencial de Ocimum basilicum L. “Albahaca” a diferentes. LO. G. concentraciones sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa, cuyos resultados contribuirán como una alternativa. BI. O. frente a los problemas asociados a la aparición de resistencia bacteriana a los antibióticos de uso común, así mismo para el desarrollo de nuevos productos. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. que se encuentren al alcance de la población.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. OBJETIVOS. AS. Objetivo general. Evaluar el efecto de las diferentes concentraciones del aceite esencial de. IC. Ocimum basilicum L. sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC. O. LO. G. 25923 y Pseudomonas aeruginosa in Vitro.. Evaluar cuál de las diferentes concentraciones de aceite esencial de. CI. . AS. BI. Objetivos específicos. CI EN. Ocimum basilicum L. presenta mayor efectividad sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa in vitro.. Determinar el porcentaje del efecto inhibitorio del aceite esencial de. DE. . CA. Ocimum basilicum L. sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus y. BI. BL. IO. TE. Pseudomonas aeruginosa in Vitro.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODOS 1. MATERIAL. . MATERIAL BIOLÓGICO. AS. 1.1.. Cultivo de Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas. IC. aeruginosa proporcionadas por el laboratorio de Bacteriología del. LO. G. Departamento de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias Biológicas - Universidad Nacional de Trujillo.. O. Plantas de Ocimum basilicum L. en estado de floración procedentes del. BI. . AS. Centro Poblado de Pedregal, Distrito de Simbal Provincia de Trujillo –. CI. La Libertad.. Obtención de plantas de Ocimum basilicum L.. DE. 2.1.. CI EN. 2. MÉTODOS. 2.1.1. Obtención de Ocimum basilicum L.. CA. Se recolectó 30 kg de plantas albahaca obtenidas del Centro. TE. Poblado de Pedregal que se localiza a 8°00’30.4” latitud Sur y a. IO. 78°49’39.0” Oeste, Distrito de Simbal Provincia de Trujillo – La. BL. Libertad las cuales se colocaron en cajas de cartón para su traslado. BI. al laboratorio de Farmacognosia, Departamento Académico de Farmacotecnia – Facultad de Farmacia y Bioquímica – Universidad Nacional de Trujillo. (Anexo 1). 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.2. Identificación Las muestras biológicas de O. basilicum L. se llevaron al Herbarium Truxillense de la Universidad Nacional de Trujillo para su. AS. identificación taxonómica y se registró con el código N° 59594.. Extracción del aceite esencial de Ocimum basilicum L.. LO. 2.2.. G. IC. (Anexo 2). A. Selección, lavado hojas. de. albahaca. sin. O. seleccionaron. presencia. de. BI. Se. magulladuras, cortes o demás lesiones, posteriormente se realizó. AS. el lavado con agua corriente, con el propósito de eliminar restos. CI. de partículas extrañas, suciedad, restos de tierra que pudieran. CI EN. estar adheridas a las hojas y se secó a temperatura ambiente.. agua. DE. B. Extracción del aceite por método de arrastre con vapor de. CA. Se preparó un equipo de destilación que está conformado por un. TE. hidrodestilador – generador de acero inoxidable,. en el mismo. IO. recipiente se almacena en material vegetal y el agua destilada el. BI. BL. cual está separada por una rejilla, se cerró herméticamente la tapa de tipo cuello de cisne en la cual se encuentra el refrigerante y en la parte distal es donde se colecto el aceite esencial, el vapor generado calienta la planta aromática y arrastra el aceite vaporizado hacia el refrigerante. con alimentación constante a. contracorriente de agua fría. El aceite esencial es obtenido en una 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. pera de decantación el cual permitió la separación del aceite obtenido27, finalmente se recolecto 6mL de aceite esencial en un periodo de 15 minutos y se colocó en un frasco ámbar estéril al. AS. cual se le añadió Sulfato de sodio anhídrido, se rotuló y posteriormente se conservó en refrigeración a 4°C hasta ser. Preparación de las concentraciones Aceite esencial de Ocimum. O. 2.3.. LO. G. IC. utilizado28. (Anexo 3). BI. basilicum L.. AS. A partir de la obtención del aceite esencial de O. basilicum L. se. CI. realizaron diluciones para obtener las concentraciones 10µL/mL,. al 0.1% (V/V). CI EN. 20µL/mL, 40µL/mL y 60µL/mL Utilizando como el solvente tween 80 29.. Cada concentración fue colocada en viales de. vidrio. Posteriormente fueron colocados a refrigeración a 4°C hasta. 2.4.. CA. DE. su utilización. (Anexo 4). Reactivación del inóculo bacteriano. TE. Cada cultivo bacteriano fue reactivado en caldo cerebro corazón. IO. (BHI) por 18 horas a 37°C. Luego fueron sembrados en agar nutritivo. BI. BL. e incubados durante 24 horas a 37°C30.. 2.5.. Estandarización del inóculo bacteriano A partir de cada cultivo de S. aureus ATCC 25923 y P. aeruginosa sembradas en agar nutritivo se seleccionó colonias, las cuales fueron suspendidas en solución salina fisiológica (SSF) y se estandarizó a 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 1.5𝑥108 UFC/mL el cual equivaldrá a un patrón de 0.5 en la escala de Mac Farland31. (Anexo 5). Evaluación del efecto de las diferentes concentraciones de. AS. 2.6.. Ocimum basilicum L.. IC. A. Método de difusión en agar (Método de Kirby – Bauer. LO. G. modificado )32. Se sirvieron las placas Petri con 25mL de agar Mueller–Hinton31,. O. Luego para evitar el exceso de humedad se colocó en la estufa. BI. 33.. por varios minutos. Se procedió a suspender los cultivos. AS. bacterianos hasta ajustar la turbidez del inóculo; se agregó sobre. CI. el agar 0.1mL la suspensión bacteriana y con la ayuda del asa de. dejó. CI EN. Drigalski se sembró uniformemente en la superficie del agar y se secar por 15 minutos. Se hicieron pocillos de 6mm de. DE. diámetro con un sacabocado estéril los cuales estuvieron espaciados a distancias adecuadas, se le agregó 50 µL de cada. CA. concentración del aceite esencial en estudio a los pocillos. IO. TE. respectivamente34, 35,36. (Anexo 6). BI. BL. También se evaluaron placas control, utilizando discos de Vancomicina (30 µg/ disco) y Ciprofloxacina (5 µg/ disco) como control positivo para S. aureus ATCC 25923 y P. aeruginosa respectivamente37, 38. Y como control negativo se utilizó el Tween 80 al 0.1 %, el cual nos permitió verificar que este compuesto. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. como solvente no afecta en el crecimiento de las bacterias en estudio. Luego se incubó a 37°C por 24 horas3.. Lectura. AS. 2.7.. Finalmente se realizó las lecturas terminado el tiempo de incubación,. IC. observándose la presencia de halos de inhibición de crecimiento. LO. G. bacteriano y se calculó el porcentaje del efecto inhibitorio relativo. 𝐷 ℎ𝑎𝑙𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑖𝑡𝑒−𝐷 ℎ𝑎𝑙𝑜 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 𝐷 ℎ𝑎𝑙𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑜−𝐷 ℎ𝑎𝑙𝑜 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜. 𝑋 100. CI. AS. % 𝑒𝑓𝑒𝑐𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛 =. BI. O. respecto al control positivo35.. 2.8.. DE. CI EN. Las pruebas se realizaron 3 repeticiones y por triplicado.. Análisis estadístico. CA. Los resultados obtenidos fueron analizados en el programa. TE. estadístico SPSS 22.0 donde las pruebas estadísticas usadas fueron análisis de varianza (ANOVA) para observar si existen diferencias. IO. significativas entre las diferentes concentraciones y se utilizó la. BI. BL. prueba de Tukey para identificar que concentración de aceite fue la más efectiva con un nivel de confianza de 95%39 .(Anexo 11 y12). 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS Figura1. Se observa que la acción del aceite esencial de O. basilicum L. a diferentes concentraciones (10, 20, 40 y 60 µL/mL) tiene efecto inhibitorio sobre aureus ATCC 25923 y que el promedio de diámetros de los halos de. AS. S.. IC. inhibición de crecimiento (mm) va en aumento conforme se incrementó las. G. concentraciones del aceite esencial de O basilicum L., también se observa la. LO. existencia de diferencia significativa entre las concentraciones estudiadas. BI. O. (p<0.05). (Anexo 7 y 9). AS. Figura 2. Se presentan los resultados del porcentaje del efecto de inhibición relativo a concentraciones 10, 20, 40 y 60µL/mL para el aceite esencial de O.. CI EN. CI. basilicum L. sobre el crecimiento de S. aureus ATCC 25923, observándose un porcentaje de efecto inhibitorio relativo de 50%, 64%, 68% y 77% para cada. DE. concentración respectivamente.. Figura 3 se presentó los resultados del efecto del aceite esencial de Ocimum. CA. basilicum L. sobre el crecimiento de P. aeruginosa no se observó formación del. TE. halo crecimiento inhibitorio para ninguna de las concentraciones estudiadas 10,. IO. 20, 40 y 60µL/mL por lo tanto el aceite esencial de O. basilicum L. no presenta. BI. BL. efecto inhibitorio para P. aeruginosa. (Anexo 8 y 10). 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. a. 22. 20 17 15. 14. 15. a. AS. 11. a. 10. IC. a a. G. 5 0 10. 20. 0. LO. a 40. 60. Vancomicina Tween 80%. O. Halo de inhibición del crecimiento (mm) de Staphlylococcus aureus ATCC 25923. 25. [AE = µl/mL]. AS. BI. Concentracion del aceite esencial de Ocimum basilicum L.. CI EN. CI. a: p<0.05: existe diferencia significativa. Figura 1. Promedio del halo de inhibición del crecimiento (mm) de S. aureus. DE. ATCC 25923 a diferentes concentraciones (10, 20, 40 y 60µL/mL) del aceite. BI. BL. IO. TE. CA. esencial de O. basilicum L. y de los grupos control “Vancomicina y tween 80”.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 120% 100% 77%. 80%. 68%. 64% 60%. AS. 50%. IC. 40%. LO. G. 20% 0% 20. 40. 60. control (+) Concentraciones del aceite esencial de Ocimum basilicum L. [AE = µl/mL]. O. 10. AS. BI. % del efecto inhibitorio relaivo sobre Staphilococcus aureus ATCC 25923. 100%. CI. Figura 2. Porcentaje del efecto inhibitorio relativo de las diferentes. CI EN. concentraciones del aceite esencial de O. basilicum L. sobre el crecimiento de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. S. aureus ATCC 25923 in vitro.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 44. 45 40 35. AS. 30 25. IC. 20. G. 15. LO. 10 5 0. 0. 0. 0. 10. 20. 40. 60. Ciprofloxacina. BI. 0. O. Halo de inhibición del crecimiento (mm) de Pseudomona aeruginosa. 50. Tween 80%. [AE = µl/mL]. CI. AS. Concentracion del aceite esencial de Ocimum basilicum L.. 0. CI EN. Figura 3. Promedio del halo de inhibición del crecimiento (mm) de P. aeruginosa a diferentes concentraciones (10, 20, 40 y 60µL/mL) del aceite. BI. BL. IO. TE. CA. DE. esencial de O. basilicum L y de los grupos control “Ciprofloxacina y tween 80”. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN En esta investigación se evaluó el efecto del aceite esencial de Ocimum basilicum L. sobre el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923 y las. diferentes. AS. Pseudomonas aeruginosa in vitro observándose que. LO. G. sobre el crecimiento de S. aureus y no sobre P. aeruginosa.. IC. concentraciones (10, 20, 40 y 60µL/mL) presentan actividad antimicrobiana. O. Figura 1. Se observa que a medida que aumenta las concentraciones del aceite. BI. esencial de O. basilicum L., aumenta el diámetro del halo de inhibición del. AS. crecimiento de S. aureus ATCC 25923, a concentraciones de 10, 20, 40 y 60. CI. µL/mL presentando halos de 11, 14,15 y 17mm respectivamente. CI EN. respaldado estadísticamente presenta diferencia. lo cual. significativa (p<0.05) entre. las diferentes concentraciones del aceite esencial de O. basilicum L. y el halo. DE. de inhibición de crecimiento de S. aureus ATCC 25923. Es decir el grado de. CA. sensibilidad depende de la concentración del aceite esencial.. TE. Figura 2. Se observa. el porcentaje del efecto inhibitorio relativo para las. IO. concentraciones 10, 20, 40 y 60µL/mL del aceite esencial de O. basilicum L. las. BL. cuales fueron. 50, 64,68 y 77% respectivamente,. es decir a mayor. BI. concentración del aceite esencial, presenta mayor porcentaje del efecto inhibitorio relativo para S. aureus ATCC 25923, lo cual concuerda con lo. referido por Ramírez y Díaz,2007. 42. evaluaron el porcentaje inhibitorio relativo. sobre S. aureus ATCC 25923 mostrando un máximo de actividad inhibitoria de 68%. e indica que una acción antibacteriana se considera alta cuando su 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. porcentaje de inhibición relativo es >70 %, intermedia entre 50%- 70% y baja cuando es <50%.. AS. Respecto a P. aeruginosa se encontró que no mostro sensibilidad frente al. IC. aceite esencial de O. basilicum L., Este resultado está de acuerdo con el. G. trabajo de Bozin et al, 200643, donde los aceites esenciales de O. basilicum,. LO. Origanum vulgare y Thymus vulgaris fueron probados, de los cuales verificaron. O. que el aceite esencial de Ocimum basilicum no presenta actividad. AS. BI. antimicrobiana para esta bacteria.. El resultado de comparar los halos de inhibición entre S. aureus y P.. CI EN. CI. aeruginosa es similar al obtenido por otras investigaciones, en los que atribuyen un mayor efecto de los aceites esenciales a las bacterias Gram positivas que a las Gram negativas, ya que estos microorganismos difieren en. DE. varios aspectos distintos respecto a la estructura de la pared celular44. La inhibición del crecimiento de las bacterias Gram positivas por el aceite esencial. CA. de O basilicum L. podría atribuirse a un efecto sinérgico entre sus compuestos. TE. que actúan principalmente inhibiendo la síntesis del péptidoglucano que es una 45.. Por otro lado las bacterias Gram. IO. barrera de permeabilidad efectiva. BL. negativas, son menos sensibles y muestran una resistencia intrínseca a una. BI. gran variedad de aceites esenciales debido a la membrana externa que rodea a la pared celular que restringe la difusión de compuestos hidrófobos a través del lipopolisacáridos estructurales y las porinas que constituyen una barrera. selectiva a los solutos hidrofilicos. Sin embargo, las macromoléculas hidrofóbicas como la de los componentes de los aceites esenciales, son 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. incapaces. de. penetrar. la. barrera46.. Además,. algunas. especies. de. Pseudomonas sp., Pueden desarrollar algunas adaptaciones que les permiten. AS. crecer normalmente, incluso en presencia de compuestos tóxico 47.. basilicum L. como componentes derivados de monoterpenos (alcanfor,. G. O.. IC. La gran variedad de compuestos químicos presentes en el aceite esencial de. LO. limoneno, 1,8-cineol, linalool, geraniol) y derivados fenilpropanoides (eugenol,. O. metileugenol, chavicol, metilchavicol (estragol), metil-cinamato), siendo los. linalool, metilchavicol (estragol), metil. AS. predominantes del aceite esencial,. BI. compuestos químicos mayoritarios reconocidos en base a los constituyentes. cinamato, metil eugenol, eugenol48,49, el mecanismo de acción de la actividad. CI EN. CI. antimicrobiana no está dada por un mecanismo específico, sino por la acción combinada de varios de ellos, aún no ha sido claramente caracterizado y actualmente se propone como posible sitio de acción la pared celular, daño de. DE. la membrana citoplasmática, daño a las. proteínas de la membrana,. 50.. que el mecanismo de acción de los aceites esenciales que. TE. Se especula. CA. coagulación del citoplasma y agotamiento de la fuerza motriz de los protones. IO. poseen compuestos terpeniodes como O. basilicum L. participan de la. BL. disrupción de la membrana celular por los compuestos lipofílicos51,52, asimismo,. BI. se ha demostrado que a pesar que no todos los componentes químicos de los aceites esenciales de albahaca tiene propiedades antimicrobianas, dichos compuestos sirven como soporte o para aumentar el poder antimicrobiano, todo ello desencadena una serie de procesos, lo que provoca y un alto grado de lisis celular 50,53. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. El aceite esencial de Ocimum basilicum L. presenta actividad bacteriana sobre. G. IC. AS. el crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923. LO. El aceite esencial de Ocimum basilicum L. no presento actividad bacteriana. O. presenta efecto inhibitorio sobre el crecimiento de no para Pseudomonas. AS. BI. aeruginosa in Vitro.. CI. El porcentaje de efecto inhibitorio relativo está en relación directa a la. CI EN. concentración del aceite esencial de Ocimum basilicum L. siendo la concentración de 60 µL/mL la que presenta un mayor porcentaje del efecto. BI. BL. IO. TE. CA. DE. inhibitorio relativo para S. aureus ATCC 25923.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RECOMENDACIONES. AS. Se recomienda determinar el efecto antimicrobiano del aceite esencial de. IC. Ocimum basilicum L. frente a otros microorganismos patógenos de importancia. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. productos que se encuentren al alcance de la población.. G. clínica ya que podría usarse como alternativa para el desarrollo de nuevos. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Fernández K; Viña A, Murillo E y Méndez J. Actividad antioxidante y. AS. antimicrobial de los volátiles de cuatro variedades de albahacas cultivadas Rev. Scientia Et Technica. XIII.. IC. en el departamento del Tolima.. G. 2007;(33):339-341.. LO. 2. Rodríguez J. Evaluación de la actividad antimicrobiana de cuatro extractos. O. etanólicos de briofitos y de jugos de diez frutas comerciales en Colombia. BI. contra bacterias patógenas. Tesis para optar el título de bióloga. Pontifica. AS. Universidad Javeriana: Bogotá D.C. – Colombia; 2011.. 3. Huamantupa I, Cuba M, Urrunaga R, Paz E, Ananya N, Callalli M, Pallqui N. CI EN. CI. y Coasaca H. Riqueza, uso y Origen de las plantas medicinales expendidas en los mercados de Cusco. Rev. Perú. Biol.2011; 18(3): 283 – 291. 4. Ramírez L, Marín D. Evaluación de la actividad antimicrobiana de aceites. DE. esenciales y extractos etanólicos utilizando métodos de difusión en agar y dilución en pozo. Rev. Scientia et Technica.2012; 50(17): 152- 157.. CA. 5. Cano C, Bonilla P, Roque M, Ruiz J. Actividad Antimicótica in vitro y. TE. metabolitos del aceite de las hojas de Minthostachys mollis (MUÑA). Rev.. IO. Perú Med. Exp. Publica. 2008; 25(3): 298 – 301.. BL. 6. García C, Martínez A, Ortega J, Castro F. Componente químicos y su. BI. relación con las actividades biológicas de algunos extractos vegetales. Rev. Química viva. 2010; 9(2): 86-96.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 7. Sánchez E, Leal I, Fuentes L y Rodríguez C. Estudio Farmacológico de Ocimum basilicum L.. (Albahaca Blanca). Rev. Cubana Farm.2000;. 34(3):95-187.. AS. 8. Beltrán M, Cantillo M, Vivas A. Actividad antimicrobiana de los aceites obtenidos de Ocimum basilicum L. var. Cinammom, Ocimum álbum, Thyrsiflorum,. para. uso. potencial. en. fitocosmética.. IC. Ocimum. 9. Moncayo M, Álvarez V, Gonzales G, Salas L y. LO. G. Investigación Andina.2013; 27(15):15-134.. Rev.. Chávez J. Producción. BI. O. orgánica de Albahaca en invernadero en la Comarca Lagunera. Terra Americana.2015; 33(1): 69-77.. AS. 10. Favorito P, Echer M, Offemenn L, Schlindwein M, Colombare L, Schineider. CI. R, Hachmainn T. Características produtivas do manjericão (Ocimum. CI EN. basilicum L.) em função do espaçamento entre plantas e entre linhas. Rev. Brass. PI. 2011; 13 (1): 582-586.. DE. 11. Orona I, Fortis M, Trejo H, Osuna P, Preciado A y Salazar E. Agricultura Orgánica: séptima parte. Primera edición. México 2014.. CA. 12. Rojas M, Sánchez Y, Abreu Y, Espinoza I, Correa T, Pino O.. TE. Caracterización química y actividad antibacteriana de aceites esenciales de. IO. Ocimum Basilicum L. y Ocimum basilicum var. genovese L. Rev. Protección. BL. veg. 2012; 27(2): 130-134. 13. Quiroz C. Evaluación de la actividad antibacteriana de extractos etanólicos. BI. de tres especies del género Annona frente a Staphylococcus aureus. Tesis para optar el título de bióloga. Universidad la Salle: Bogotá; 2017.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 14. Rodríguez Y, Espinoza S, Vergara M. Efecto inhibitorio in vitro del extracto etanólico de Rosmarium officinalis L. “Romero” sobre el crecimiento Streptococcus. pyogenes,. Staphylococcus. aureus. y. Pseudomonas. AS. aeruginosa. Rev. Salud y vida Sipanense. 2014; 2(1): 63-74. 15. Zaraza Milena. Actividad antibacteriana del aceite esencial de la Conobea. IC. scopariodes frente a cinco cepas bacterianas de interés clínico en. LO. G. Colombia. Tesis para optar el título de Especialista en Epidemiologia. Universidad del Rosario: Bogotá; 2012.. BI. O. 16. Zendejas G, Avalos H, Soto M. Microbiología general de Staphylococcus aureus: Generalidades, patogenicidad y métodos de identificación. Rev.. AS. Biomed.2014; 25(1): 129 – 143.. CI. 17. Pérez N, Pavas N, Rodríguez E. Resistencia de Staphylococcus aureus a. 14(3): 167 – 173.. CI EN. los antibióticos en un hospital de la Orinoquia colombiana. Infectio. 2010;. DE. 18. Ossa A, Echevarri L, Santos Z, García M, Aguedo Y, Ramírez F y Ospina S. Factores de riesgo para infección por Pseudomonas aeruginosa multi-. CA. resistente en un hospital de alta complejidad. Rev. Chilena Infectol. 2014;. TE. 31(4): 393 – 399.. IO. 19. Lujan D. Pseudomonas aeruginosa: un adversario peligroso. Acta Bioquim. BL. Clin Latinoam. 2014; 48 (4): 465 - 474. 20. Lujan D, Ibarra J, Mamani E. Resistencia a los antibióticos en aislados. BI. clínicos de Pseudomonas aeruginosa en un hospital universitario en Lima, Perú.Rev. Biomed. 2008; 19(1): 156 -160.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 21. Strateva T, Yodanov D. Pseudomonas aeruginosa – a phenomenon of bacterial resistance. Journal of Medical Microbiology. 2009; 58(1): 1133 – 1148.. AS. 22. Tigasi J. Efecto antimicrobiano del aceite esencial, extracto de albahaca (Ocimum basilicum) y el Hipoclorito de sodio al 2.5% sobre cepas de. IC. Enterococcus faecalis “Estudio comparativo in Vitro”. Tesis para optar el. LO. G. título de Odontólogo. Universidad Central de Ecuador: Quito; 2017.. 23. Rivas K, Rivas C, Gamboa L. Composición química y actividad. BI. O. antimicrobiana del aceite esencial de albahaca (Ocimum basilicum L.). Rev. Multiciencias.2015; 15(3):281- 289.. AS. 24. Colivet J, Marcano G, Belloso G, Brito D, Gómez E. Efecto antimicrobiano. CI. de extracto etanólicos de albahaca (Ocimum basilicum L.) sobre el. CI EN. crecimiento de Staphylococcus aureus. Rev. Venezolana de Ciencia Y tecnología de Alimentos.2011; 2(2): 313- 320.. DE. 25. Acosta M, Gózales M, Araque M, Velazco E, Khouri N, Rojas L, Usubillaga A. Composición química de los aceites esenciales de Ocimum basilicum L.. CA. var basilicum, O. basilicum L. var purpurenscens, O. gratissimum L., y O.. TE. tenuiflorum L., y su efecto antimicrobiano sobre bacterias multirresistentes. IO. de origen nosocomial. Rev. de la Facultad de Farmacia. 2003; 45 (1): 19 –. BL. 24.. 26. Daneshian A, Shayegh J, Mikaili P and Dolghari J. Antimicrobial activity of. BI. essential oil extracto d Ocimum basilicum L. leaves on a variety of pathogenic bacteria. Journal of Medicinal Plants Research. 2011; 15(5):. 3453 – 3456.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 27. Celis M, Rodríguez R. Efecto antibacteriano in vitro del aceite esencial de las hojas de Ocimum basilicum L. “albahaca” en cepas de Escherichia coli aisladas de pacientes con infecciones del tracto urinario atendidos en. AS. consultorio externo de Urología del Hospital Regional de Cajamarca – 2016. Tesis para optar el título profesional de Químico Farmacéutico.. IC. Universidad Privada Antonio Guillermo Urrelo: Cajamarca; 2016.. LO. G. 28. Moreno J, López G, Siche R. Modelación y optimización del proceso de extracción de aceite esencial de eucalipto (Eucalyptus globulus). Rev.. BI. O. Scientia Agropecuaria. 2010; 1(1): 147- 154.. 29. Méndez N, Angulo A y Contreras O. Actividad antibacteriana in vitro de. AS. Curcuma longa (Zingiberaceae) frente a bacterias nosocomiales en. CI. Montería, Colombia. Rev. de Biología Tropical. 2016; 64(3): 1201-1208.. CI EN. 30. CULTIMED. Manual Básico de Microbiología. 4a edición. Panreac Química S.A. 2003.. DE. 31. Cavalieri S. Manual de Pruebas de Susceptibilidad Antimicrobiana. American Society for Microbiology. 2005. CA. 32. Ramírez L, Marín D. Metodologías para evaluar in Vitro la actividad. TE. antibacteriana de compuestos de origen vegetal. Rev. Scientia et. IO. Technica.2009; 42 (15): 263-268.. BL. 33. Corzo D. Evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto etanólico. Rev. Mex Cienc Farm. 2012; 43(3): 81 -86.. BI. 34. Rojas J, García A, López A. Evaluación de dos métodos para determinar la actividad antimicrobiana de plantas medicinales. 2005; 4(2): 28-32.. 35. Cruz Anastasia, Rodríguez N, Rodríguez C. Evaluación in Vitro del efecto antibacteriano de los extractos de Bidens pilosa, Lantana camara, Schinus. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. molle y Silybum marianum. Rev. U.D.CA Act. e Div. Cient. 2010; 13(2): 117- 124. 36. Organización mundial de la Salud. Manual de Laboratorio para la. AS. identificación y prueba de susceptibilidad a los Antimicrobianos de Patógenos Bacterianos de Importancia para la Salud Publica en el Mundo. IC. en desarrollo. Centro para el control de enfermedades infecciosas 2004.. LO. G. 37. Ministerio de Salud. Manual de procedimientos para prueba de sensibilidad antimicrobiana por el método de difusión. Perú. Instituto Nacional de Salud.. BI. O. 2002.. 38. Argote F, Suarez Z, Tobar M, Pérez J, Hurtado A, Delgado J. Evaluación de. AS. la capacidad inhibitoria de aceites esenciales en Staphylococcus aureus y. CI EN. 2017; (2): 52- 60.. CI. Escherichia coli. Biotecnología en el sector agropecuario y Agroindustrial.. 39. Castañeda M, Cabrera A, Navarro Y, Vries W. Procesamiento de datos y. DE. análisis estadístico utilizando SPSS. Porto Alegre: EDIPUCRS.2010. 40. Chávez M, Salazar M, Cabrera C, Gómez R, Pallares C. Bacterias. CA. resistentes a los antibióticos en infecciones nosocomiales de un hospital en. TE. Colombia. Enf. Inf. Microbial. 2012; 33(1): 19 – 25.. IO. 41. Sam Ofelia Barroso M. Caracterización anatómica de las hojas de la. BL. albahaca blanca (Ocimum basilicum L.). Rev. Cultivos tropicales. 2012; 23(2): 39 – 42.. BI. 42. Ramírez L, Díaz H. Actividad antimicrobiana de extractos y fracciones del Ruibarbo (Rumex conglomeratus). Scientia et Technica. 2007; 33(1): 397 – 400.. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 43. Bozin B, Dukic MN, Simin N, Anackov G. Characterization of volatile composition of essential oils of some lamiaceae spices and the antimicrobial and antioxidant activities of the entire oils. J Agric Food Chem.. AS. 2006; 54 (5) :1822–1828 44. Mazzuti M, Mossi A, Cansian R, Corazza M, Dariva C y Olivera V. Chemical. IC. Profile and antimicrobial activity of Boldo (Peumus boldus Molina) Extracts. LO. G. obtained by compressed carbón dioxide extraction. Brazilian Journal of Chemical Engieering. 2008; 25(2): 427 – 434.. BI. O. 45. Mora F, Velasco J, Díaz T, Rojas L, Díaz L, Ríos N y Carmona J. Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial de. CI. biología. 2016; 23(3): 301 – 304.. AS. Peperomia acuminata de los Andes venezolanos. Rev. Peruana de. CI EN. 46. Rincón A, Castaño J, Ríos E. Actividad Biológica de los aceites esenciales de Acmella ciliata (Kunth) Cass. Rev. Cubana de plantas medicinales.. DE. 2012; 17(2): 160 – 171.. 47. Demo M, Oliva M, López M, Zunino M and Zygadlo J. Antimocrobial Activity Essential. Oils. CA. of. Obtained. from. Aromatic. Plants. of. Argentina.. TE. Pharmaceutical Biology. 2008; 43 (2): 129 – 134.. IO. 48. Beatovic D, Milosevie D, Trifunovie S, Siljegovie J, Glamoclija J, ristic M. BL. and Jelacie S. Chemical Composition, Antioxidant and Antimicrobial Activities of the Essential Oils of Twelve Ocimum basilicum L. Cultivars. BI. Grown in Serbia. Rec. Nat. Prod. 2015; 9(1): 62 – 75.. 49. Kumar A, Singh P, Nath N. Chemistry and bioactivities of essential oils of some Ocimum species: an overview. Asian Pacific Jorney of Tropical Biomedicine .2014; 9(4): 682 – 694.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 50. Rattanachaikunsopon P y Phumkhachorn P. Antimicrobial Activity of basil (Ocimum basilicum) oil against Salmonella enteritidis in Vitro and in food.. AS. Biosci. Biotechnol. Biochem.2010; 74(6): 1200 – 1204. 51. Maguna F, Romero A, Garro O, Okulik N. Actividad Antimicrobiana de un. IC. grupo de Terpenoides. Rev. Comunicaciones Científicas y Tecnológicas.. LO. G. 2006; 2 (1): 57 – 62.. 52. Pino O, Sánchez Y, Rojas M, Abreu Y, Correa T. Composición química y. Protección Veg. 2012; 27(3): 181 – 187.. BI. O. actividad antibacteriana del aceite esencial de Pimpinella anisum L. Rev.. AS. 53. Cardoso G, Sosa M. Propiedades del aceite esencial de albahaca. CI. (Ocimum basilicum L.) y sus aplicaciones en alimentos. Temas selectos de. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. Ing. De alimentos. 2012; 6(1): 54 – 65.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. ANEXOS. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) BL. IO. TE. CA. DE. CI EN. CI. AS. BI. O. LO. G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. ANEXO 1. Cultivos de O.. basilicum L. obtenidas del Centro Poblado de. Pedregal, Distrito de Simbal Provincia de Trujillo – La Libertad. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..