Efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride nativos sobre la germinación y crecimiento de Paecilomyces lilacinus en condiciones de laboratorio

Texto completo

(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. Efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y. DE. Trichoderma viride nativos sobre la germinación y crecimiento de. ST. EM. AS. Paecilomyces lilacinus en condiciones de laboratorio.. MICROBIÓLOGO. DI. RE CC IO. N. DE. SI. TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE BIOLÓGO-. Br. FLOR DEL CARMEN SORIANO LÓPEZ. TRUJILLO – PERÚ 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. Y. Dr. Orlando Velásquez Benítez. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AS. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. TRUJILLO. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. VICE – RECTOR ACADÉMICO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. Dr. Santiago Uceda Duclos. DI. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. N. TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE. A. Dr. José Mostacero León. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. DE. IN FO. RM ÁT. IC. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. AS. Dr. William Zelada Estraver. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dra. Bertha Soriano Bernilla. DI. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEL ASESOR. AC IÓ. N. El que suscribe, profesor asesor de la presente tesis titulada: “Efecto de. IC. Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride nativos. M UN. sobre la germinación y crecimiento de Paecilomyces lilacinus en condiciones de. Y. CO. laboratorio”.. IC. A. Declara que ésta investigación ha sido ejecutada de conformidad con su. RM ÁT. correspondiente proyecto y con las debidas orientaciones brindadas al tesista.. IN FO. Respecto al informe, éste ha sido revisado y acoge las observaciones y. DE. sugerencias pertinentes, por lo que autorizo a la Bachiller FLOR DEL CARMEN. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. SORIANO LÓPEZ, continuar con los procedimientos según sus fines.. DI. _______________________________ MsC. Mlgo. Juan Héctor Wilson Krugg. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ IC. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:. N. PRESENTACIÓN. M UN. En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el Reglamento de. CO. Grados y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra. Y. consideración y criterio, el informe de tesis titulado: “Efecto de Trichoderma. IC. A. atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride nativos sobre la. RM ÁT. germinación y crecimiento de Paecilomyces lilacinus en condiciones de laboratorio”, con el propósito de obtener el Título Profesional de Biólogo –. EM. AS. DE. IN FO. Microbiólogo.. RE CC IO. N. DE. SI. ST. Trujillo, Julio del 2014. DI. Br. Flor del Carmen Soriano López. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. RM ÁT. IC. A. Y. CO. PRESIDENTE. M UN. ____________________________ Dr. Eduardo José Muñoz Ganoza. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. IN FO. ____________________________ M s. C. Juan Héctor Wilson Krugg. ______________________________ Dra. Manuela Luján Velásquez VOCAL. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. SECRETARIO. ´ vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que el presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. formales y fundamentales, siendo aprobado por unanimidad.. Y. --------------------------------------------. DE. IN FO. RM ÁT. PRESIDENTE. IC. A. Ms. C Eduardo Muñoz Ganoza. AS. --------------------------------------------. SECRETARIO. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg. -----------------------------------------------Dra. Manuela Lujan Velásquez VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA A DIOS, por ser manantial de sabiduría y darme lo necesario para seguir adelante. AC IÓ. N. y día a día lograr mis objetivos, además de su infinita bondad y amor.. A mis padres,. IC. JAIME Y LUISA,. M UN. Por haberme brindado su apoyo en todo momento, por sus consejos y valores, por. CO. la motivación constante que me ha permitido ser una persona de bien, pero más. IC. A. Y. que nada, por su amor.. RM ÁT. A mis hermanas: Yesenia, Fiorella y Jaime; por el cariño y los consejos de. IN FO. superación y el anhelo de triunfo en la vida.. DE. Y a Manuel Flores, por ser gran amigo y compañero; por el amor y comprensión. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. durante estos últimos años.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. AC IÓ. N. Mi más sincero agradecimiento a mi asesor Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg por. CO. M UN. la aplicación y sustentación de este proyecto.. IC. su orientación, guía, y sus recomendaciones en base a su amplia experiencia para. Y. Agradezco a Ms. C. Eduardo Ganoza docente de la Universidad Nacional de. RM ÁT. IC. A. Trujillo, por sus consejos y apoyo durante el desarrollo de esta tesis.. A la Dra. Manuela Lujan Velásquez docente de la Universidad Nacional de. IN FO. Trujillo, gracias por brindarme su apoyo e indicaciones para la realización de esta. AS. DE. tesis.. EM. Finalmente, a mis amigos Kathy Chacón, Yuseff Rojas y Karen Avalos, que me. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. brindaron información y su apoyo para poder cumplir con esta meta.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. Se determinó el efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y. AC IÓ. N. Trichoderma viride nativos sobre la germinación y el crecimiento de Paecilomyces lilacinus en condiciones de laboratorio. El porcentaje de. M UN. IC. germinación de P. lilacinus frente a Trichoderma spp se determinó empleándose frascos de vidrio donde se colocó un mL del inóculo de cada especie nativa de. CO. Trichoderma y un mL del inóculo de P. lilacinus; asimismo, se utilizó como. A. Y. control al inóculo de P. lilacinus. Se empleó la técnica de cultivo dual, que. RM ÁT. IC. consistió en enfrentar a Trichoderma spp nativos con P. lilacinus en Agar Papa Sacarosa; y se evaluó microscópicamente el micoparasitismo de Trichoderma spp. IN FO. nativos sobre P. lilacinus. Se concluye que T. viride nativo disminuye la germinación en un 12.35% y tiene un efecto antagónico de tipo uno sobre el. DE. crecimiento de P. lilacinus y T. atroviride y T. harzianum nativos, disminuyen la. AS. germinación en un 30.86% y 19.75% respectivamente y tienen un efecto. ST. EM. antagónico tipo dos sobre el crecimiento de P. lilacinus; además se evidenció. SI. presencia de micoparasitismo: deformación de la hifa, clamidosporas, adherencia,. DI. RE CC IO. N. DE. vacuolización y enrollamiento. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONTENIDO. Pág. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO… …. ii. AC IÓ. N. QUE OTORGAN EL TÌTULO. IC. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS……… iii. M UN. QUE OTORGAN EL TÍTULO. CO. DEL ASESOR…………………………………………………….………….…. iv. IC. A. Y. PRESENTACIÓN………………………………………..……………………… v. RM ÁT. MIEMBROS DEL JURADO…………………………………………………… vi. vii. DEDICATORIA...……………………………………………………………. viii. AS. DE. IN FO. APROBACIÓN……………………………………………………………….. EM. AGRADECIMIENTO……………………………………………………….. .. x. SI. ST. RESUMEN…….………………………………………………………….…... ix. N. DE. CONTENIDO…………………………………………………………………. xi. RE CC IO. I. INTRODUCCCIÓN…………………………………………………………. 1. DI. II. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………… 6. 1. Material Biológico 2. Procedimiento. xi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.1. Obtención de cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T. viride nativos y P. lilacinus. 2.1.2 Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride. N. nativos sobre el crecimiento de P. lilacinus.. AC IÓ. a. Evaluación a nivel macroscópico. b. Evaluación a nivel microscópico.. Evaluación del efecto de los cultivos nativos de T.. IC. 2.1.3.. M UN. atroviride, T. harzianum y T. viride sobre la germinación de. 2.1.3.1. CO. P. lilacinus.. Propagación de T. atroviride, T. harzianum, T. viride y P.. Estandarización de los inóculos de T. atroviride, T.. IC. A. 2.1.3.2. Y. lilacinus.. RM ÁT. harzianum, T. viride y P. lilacinus. 2.1.3.3.. Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T.. IN FO. viride sobre la germinación de P. lilacinus.. Análisis de datos. AS. DE. 2.1.4.. 11. ST. EM. III. RESULTADOS…………………………………………………….. 17. DE. SI. IV. DISCUSIÓN……………………………………………………….. RE CC IO. N. V. CONCLUSIONES………………………………………………….... 23. DI. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………. 24. ANEXOS………………………………………………………………… 31. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.- INTRODUCCIÓN. Uno de los principales problemas que enfrenta la agricultura es la presencia de. plagas,. y. enfermedades. vegetales. provocadas. por. diversos. AC IÓ. N. microorganismos; tales como bacterias, algas, virus, nematodos, hongos, etc 1; muchas de estas enfermedades vegetales son producidas por hongos. IC. fitopatógenos constituyendo la mayor causa de pérdidas en la agricultura, y la. M UN. manera tradicional de combatir tales pérdidas se basa en el empleo de compuestos químicos, los cuales se caracterizan por una elevada eficacia y. CO. una gran rapidez en el control, pero también por ser tóxicos e inespecíficos. Y. que eliminan, junto con los organismos fitopatógenos, a organismos. A. beneficiosos; ocasionando efectos perjudiciales sobre los cultivos de. IC. importancia económica2, es por ello, el empleo de microorganismos. RM ÁT. controladores biológicos para la protección de cultivos de patógenos fúngicos. IN FO. que habitan y atacan a órganos vegetales en el suelo3.. El control biológico se presenta como una alternativa de manejo de. DE. bajo costo de las enfermedades ocasionadas por fitopatógenos con mínima. AS. interferencia en el medio ambiente4, y consiste en el uso de organismos. EM. vivos como parásitos, depredadores, patógenos y poblaciones de plagas con el fin primordial de mantenerlos por debajo de los niveles económicamente. ST. perjudiciales, describiéndose a diversas bacterias, nematodos y hongos como. SI. controladores biológicos de un amplio número de plagas y de organismos. DE. patógenos de vegetales5,6. La ventaja de usar productos biológicos es que no. N. hay residualidad química en el tejido vegetal, adaptándose a un sistema de. RE CC IO. producción orgánica, aperturando una ventana de exportación muy especial y. DI. lucrativa que va en ascenso continuo 7.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Los controladores biológicos contribuyen a la atenuación de los daños que causan las enfermedades, en aquellos agroecosistemas donde existan condiciones para su desarrollo y conservación. Para lograr este objetivo los. N. microorganismos beneficiosos presentan diferentes modos de acción que les. AC IÓ. permitan ejercer su efecto biorregulador. Estos atributos, en conjunto con la capacidad de multiplicarse abundantemente, se encuentran entre los de mayor. M UN. IC. importancia para su selección como agentes de control biológico 8.. CO. Para seleccionar a los microorganismos como controladores biológicos se deben considerar las siguientes características generales: capacidad para. Y. colonizar rápidamente, mayor habilidad que el patógeno para adquirir los. IC. A. nutrientes y capacidad de sobrevivencia bajo diferentes condiciones. RM ÁT. ambientales9.. IN FO. El sistema radicular de las plantas son afectadas por diversos organismos patógenos que pueden ser hongos como Fusarium spp., Sclerotium rolfsii,. DE. Botrytis cinerea, Pythium sp., Rhizoctonia sp., Alternaria sp., y Phytophthora sp3. o fitonematodos como Meloidogyne incognita, Heterodera spp y. AS. Globodera spp47, y para su control se conocen aproximadamente 100 géneros. EM. y 700 especies de hongos controladores biológicos. Entre los más importantes. ST. están: Metarhizium, Beauveria, Archersonia, Entomophthora, Zoophthora,. SI. Erynia, Eryniopsis, Akanthomyces, Fusarium, Hirsutella, Hymenostilbe,. DE. Pochonia chlamidosporia, Paecilomyces y Verticillium, siendo Trichoderma más. estudiados. como agente. que. N. spp. uno de los microorganismos. RE CC IO. presenta un alto contenido de materia orgánica9, además de su ubicuidad, facilidad para ser aislado y cultivado, a su crecimiento rápido en un gran. DI. número de sustratos ya que no atacan a plantas superiores, control eficaz, capacidad reproductiva y efecto estimulante sobre los cultivos10,11.. - 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Existen especies de Trichoderma, como T. viride, T. harzianum, T. aureoviride, T. virens, T. atroviride, T. hamatum, T. koningii; de las cuales la primera es la más estudiada entre numerosos agentes de control biológico, por. AC IÓ. N. sus características de antagonismo en condiciones naturales12, 13, 14. Las especies de Trichoderma se han reportado como hiperparásitos de un. IC. gran número de hongos fitopatógenos como Sclerotium rolfsii, Rhizoctonia. Phymatotrichum. 15,16. M UN. solani, Pythium sp, Phytophthora, Fusarium, Macrophomina, Verticillum y al atacar directamente y producir lisis de micelios y. Y. CO. también de esclerocios de hongos15.. A. Presentan como principales mecanismos de acción al micoparasitismo, el. RM ÁT. IC. cual consiste en un enrollamiento alrededor de las hifas del patógeno, y están implicadas enzimas extracelulares tales como quitinasas, celulasas, y que se corresponden con la composición y estructura de las paredes celulares de los. IN FO. hongos parasitados además de la penetración, y la posterior disolución del citoplasma del huésped; y en segundo lugar a la antibiosis en donde se. DE. producen metabolitos secundarios volátiles y no volátiles, algunos de los. AS. cuales inhiben el desarrollo de otros microorganismos con los que no hacen. EM. contacto físico, ocasionando cambios estructurales a nivel celular, tales como. ST. vacuolización, granulación, coagulación, desintegración y lisis celular 10,17.. SI. El control de fitonemátodos es una ardua labor, la cual ha dependido. DE. principalmente de nematicidas químicos durante décadas lográndose una. RE CC IO. N. notable reducción de poblaciones de nematodos parásitos, sin embargo su aplicación se ha limitado a determinados cultivos debido a su toxicidad; en ese sentido se ha incrementado el interés en el control biológico de. DI. nematodos parásitos, a fin de lograr un método ambientalmente seguro y sostenible18.. - 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Entre los agentes microbianos para el control de fitonemátodos se encuentra el género Paecilomyces, que es un hongo saprofítico, se encuentra frecuentemente en. zonas. tropicales y subtropicales, presenta una alta. N. estabilidad genética pues su capacidad infectiva no cambia de una generación. AC IÓ. a otra y tampoco se ve afectado significativamente al ser sometido a procesos. de conservación in vitro, tiene una alta capacidad de adaptación24, tolerando. CO. M UN. entre 15-30 °C y un máximo crecimiento entre 24-30 °C19,24.. IC. una amplia gama de pH de suelos, capaz de obtener un buen crecimiento. Asimismo comprende varias especies nematófagas como Paecilomyces. Y. lilacinus, el cual presenta un gran potencial para el control biológico, ya que. IC. A. es un parásito facultativo de huevos de fitonemátodos y en ocasiones es capaz. RM ÁT. de infectar estadíos móviles o sedentarios. Se cultiva fácilmente in vitro, es un buen competidor de la rizósfera, y ataca huevos de diferentes especies de. IN FO. fitonemátodos; sin embargo, sus limitaciones son el requerimiento de altas. DE. temperaturas del suelo y un alto número de propágulos20, 21,22.. El mecanismo de acción de P. lilacinus, es mediante la secreción de enzimas. AS. extracelulares tales como las proteasas de serina o quitinasas para el éxito en. ST. SI. apresorio.. EM. el parasitismo de huevos de fitonemátodos después de la formación del. DE. P. lilacinus se ha utilizado para controlar a Meloidogyne spp, y otras especies. N. de fitonemátodos. La cepa 251 de P. lilacinus, es el principio activo de varios. RE CC IO. bionematicidas comerciales que se utilizan en varios países como Estados. DI. Unidos de Norteamérica23.. - 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En un suelo agrícola existen diversos organismos fitopatógenos, como hongos y nematodos, provocando grandes pérdidas económicas, para lo cual se considera óptimo el control biológico. Se han empleado diversas especies nativas de Trichoderma sp., para controlar hongos fitopatógenos, y para el. N. control de fitonemátodos se emplean a hongos como es el caso de la especie. AC IÓ. de. mecanismo de acción al. M UN. al suelo, Trichoderma sp. tiene como. IC. Paecilomyces lilacinus. Sin embargo, debido a que dichos hongos se aplican. CO. micoparasitismo y antibiosis, es necesario determinar si Trichoderma sp. se comporta como micoparásito de P. lilacinus, entonces la acción de uno,. Y. afectaría la actividad del otro; y si fueran compatibles, contribuiría a que P.. IC. A. lilacinus sea efectivo, por tal razón, el presente trabajo tiene como objetivo. RM ÁT. determinar el efecto de Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride nativos sobre la germinación y el crecimiento de P.. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. lilacinus en condiciones de laboratorio.. - 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.- MATERIAL Y MÉTODO. 1. MATERIAL BIOLÓGICO . nativos. de. Trichoderma. atroviride,. Trichoderma. AC IÓ. N. Cultivos. harzianum, Trichoderma viride y Paecilomyces lilacinus proporcionados. IC. por el Laboratorio de Fitopatología del Departamento Académico de. CO. Y. Universidad Nacional de Trujillo. (Anexo 3 y 4). M UN. Microbiología y Parasitología, Facultad de Ciencias Biológicas de la. IC. A. 2. PROCEDIMIENTO. IN FO. viride nativos y P. lilacinus. RM ÁT. 2.1.1 Obtención de cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T.. A partir de los cultivos puros de T. atroviride, T. harzianum, T. viride. DE. nativos y P. lilacinus se sembró en frascos de vidrio conteniendo Agar. AS. Papa Sacarosa (APS), y se incubó a temperatura de 25 ºC durante siete. EM. días, obteniéndose así un cultivo joven de T. atroviride, T. harzianum, T.. ST. viride nativos y P. lilacinus. (Anexo 1). SI. 2.1.2 Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum, T. viride. N. DE. nativos sobre el crecimiento de P. lilacinus. DI. RE CC IO. a. Evaluación macroscópica: Cultivo dual En placas de Petri conteniendo APS se sembraron por puntura a 2 cm del borde de la placa en posiciones opuestas y equidistantes, micelio en crecimiento de cultivo puro y joven a T. atroviride, T. harzianum, T. viride nativas y P. lilacinus, procurando que entre ambos hongos la. - 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. distancia sea de 4 a 5 cm las que se incubaron a temperatura ambiental (25 ± 2ºC) durante siete días, realizándose lecturas cada 24 horas.. Al término de ese tiempo se determinó el tipo de antagonismo entre las. N. diversas especies de Trichoderma evaluadas y P. lilacinus para lo cual se. AC IÓ. empleó la escala de Bell et al25, donde:. IC. Antagonismo tipo 1: Trichoderma spp, crece completamente. CO. M UN. sobre la colonia del patógeno y cubre la superficie del medio de cultivo.. Antagonismo tipo 2: Trichoderma spp. crece al menos sobre las. IC. A. Y. dos terceras partes de la superficie del medio de cultivo,. RM ÁT. Antagonismo tipo 3: Trichoderma spp. y el patógeno cubren. IN FO. aproximadamente la mitad de la superficie del medio.. Antagonismo tipo 4: El patógeno crece al menos en las dos. AS. Trichoderma spp.. DE. terceras partes del medio de cultivo limitando el crecimiento de. EM. Antagonismo tipo 5: El patógeno crece sobre la colonia de. SI. ST. Trichoderma spp. ocupando toda la superficie del medio de cultivo.. DE. Los aislamientos de Trichoderma spp. que presentaron el antagonismo. realizó por cuadruplicado.. DI. RE CC IO. N. 1 ó 2 se consideraron como altamente antagonistas, cada ensayo se. - 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. Evaluación a nivel microscópico Se empleó la técnica del microcultivo de Ridell descrita por Paul26, que consistió en colocar dentro de una placa de Petri soportes de vidrio y sobre ellos, un portaobjeto estéril sobre el cual se dispuso de dos. AC IÓ. N. bloques de APS.. IC. Para el establecimiento de los hongos involucrados con ayuda de un asa. M UN. se sembró por puntura micelio de cada hongo respectivamente en dos bloques de APS; dispuestos en dos puntos cardinales (norte:. Y. CO. nematófago y sur: antagonista). (Anexo 2). A. Después de la siembra de micelio, se colocó encima de los bloques un. RM ÁT. IC. cubre objeto estéril; y con la finalidad de mantener la humedad en la placa de Petri, se adicionó agua destilada estéril (ADE). Cuando el bloque de agar fue cubierto con el crecimiento de ambos organismos, el. IN FO. portaobjetos se retiró de la placa de Petri, y se prepararon los frotis, el cubreobjetos se colocó en un portaobjetos limpio y provisto. DE. previamente de una gota de azul de Lactofenol. En relación al. AS. cubreobjetos se retiró el bloque de agar del mismo, se agregó una gota. ST. limpio.. EM. de azul de Lactofenol y se colocó encima un cubreobjetos nuevo y. DE. SI. Una vez eliminado el excedente de colorante, las preparaciones fueron selladas y evaluadas microscópicamente. La evaluación consistió en. deformación, enrollamiento, estrangulamiento o la fragmentación del micelio del hongo nematófago causado por las cepas antagónicas.. DI. RE CC IO. N. localizar agrupamientos y deformaciones de conidias, así como la. - 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.3 Evaluación del efecto de los cultivos nativos de T. atroviride, T. harzianum y T. viride sobre la germinación de P. lilacinus. 2.1.3.1 Propagación de T. atroviride, T. harzianum, T. viride. N. nativos y P. lilacinus. AC IÓ. A partir del cultivo puro de T. atroviride nativo se sembró en frascos. planos de vidrio conteniendo APS, y se incubó a temperatura de 25ºC. M UN. CO. nativos de T. harzianum y T. viride; y P. lilacinus.. IC. durante siete días. Se procedió igualmente con los otros cultivos. 2.1.3.2 Estandarización de los inóculos de T. atroviride, T.. A. Y. harzianum, T. viride nativos y P. lilacinus. RM ÁT. IC. Transcurrido los siete días de incubación, se agregó a los frascos planos de vidrio agua destilada estéril (ADE) y se obtuvo una suspensión determinándose la concentración de conidias/ mL mediante. IN FO. recuento en cámara de Neubauer, posteriormente se hicieron las diluciones necesarias, y se estandarizó a una concentración de 105. DE. conidias/mL. Se realizó el mismo procedimiento para el cultivo a. EM. AS. evaluar, preparándose 50 mL de cada suspensión.. ST. 2.1.3.3 Evaluación del efecto de T. atroviride, T. harzianum y T. viride nativos sobre la germinación de P. lilacinus.. DE. SI. Se prepararon tres frascos de vidrio, a los cuales se agregó un mL del inóculo de T. atroviride, T. harzianum y T. viride nativos. DI. RE CC IO. N. respectivamente. Posteriormente se adicionó un mL del inóculo de P.. lilacinus a cada frasco de vidrio, obteniendo finalmente cada frasco un mL de cada una de las especies de Trichoderma más un mL de P. lilacinus, finalmente en un cuarto frasco de vidrio se colocó un mL de P. lilacinus, al que fue considerado como control. Los cuatro frascos de vidrio con las suspensiones problema y el testigo se incubaron por 24 horas a temperatura ambiente, realizándose 3 repeticiones por cada ensayo.. - 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.4 Análisis de datos Se determinó el porcentaje de germinación en las suspensiones problema en relación al porcentaje de germinación en el testigo, el cual se consideró como el 100 %. Asimismo los datos fueron organizados y. AC IÓ. N. presentados en tablas y figuras. A los datos obtenidos en la evaluación. del porcentaje de germinación de P. lilacinus se les realizó Análisis de 2,48. y t de Student-Newman-Keuls mediante el paquete. IC. Varianza. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. estadístico SPSS v. 15.. - 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III. RESULTADOS. . En la figura 1, a nivel macroscópico se observan los cultivos duales P.. AC IÓ. N. correspondientes a las especies nativas de Trichoderma frente a. lilacinus, evidenciándose que T. atroviride y T. harzianum nativos. IC. presentan antagonismo de tipo 2 y T. viride nativo presenta antagonismo. En la figura 2, a nivel microscópico se evidencia el micoparasitismo. CO. . M UN. de tipo 1 sobre P. lilacinus respectivamente. A. Y. mediante la localización de diferentes interacciones de T. atroviride nativo. IC. vs P. lilacinus: a. Penetración, b. Clamidosporas, c. Adherencia, d.. En la figura 3, a nivel microscópico se evidencia el micoparasitismo. IN FO. . RM ÁT. Deformación de la hifa, e. Vacuolización y enrollamiento. mediante la localización de diferentes interacciones de T. harzianum nativo. En la figura 4, a nivel microscópico se evidencia el micoparasitismo. AS. . DE. vs P. lilacinus: a. Adherencia, b. Clamidosporas, c. Vacuolización.. ST. EM. mediante la localización de diferentes interacciones T. viride nativo vs P.. SI. lilacinus: a. Adherencia, b. Vacuolización, c. Clamidosporas, d.. En la figura 5, se evidencia la antibiosis mediante la evaluación del efecto. RE CC IO. N. . DE. Deformación de la hifa.. de la germinación de P. lilacinus frente a, T. harzianum y T. viride. DI. nativos.. - 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) PL. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. AC IÓ. TA. A. Y. CO. M UN. a. IC. PL. RM ÁT. TH. PL. TV. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. b. c. DI. Fig. 1. a) Cultivo dual de Trichoderma spp nativas frente a P. lilacinus: a. T. atroviride nativa vs P. lilacinus, observándose antagonismo de tipo 2 b) T.. harzianum nativa vs P. lilacinus, observándose antagonismo de tipo 2, c) T. viride nativa vs P. lilacinus, observándose antagonismo de tipo 1.. - 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. a. AS. DE. c. e. ST. EM. d. SI. Fig. 2. Observación microscópica del micoparasitismo de T. atroviride nativa. DE. sobre las hifas P. lilacinus donde se observan: a Penetración, b.. RE CC IO. N. Adherencia, c. Formación de clamidosporas, d. Deformación de la hifa, e.. DI. Vacuolización y enrollamiento de la hifa.. - 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. a. SI. ST. EM. c. DE. Fig. 3. Observación microscópica de T. harzianum nativa sobre las hifas de P.. N. lilacinus donde se observa: a. Adherencia de la hifa, b. Formación de clamidosporas,. DI. RE CC IO. c. Vacuolización.. - 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. b. a. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. d. DE. SI. ST. EM. c. N. Fig. 4. Observación microscópica del micoparasitismo de T. viride nativa sobre. RE CC IO. las hifas de P. lilacinus, donde se observa: a. Adherencia, b.Vacuolización, c.. DI. Formación de clamidosporas y d. Deformación de la hifa.. - 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. 120%. % de germinación de P. lilacinus. 100%. M UN. IC. 100%. CO. 80%. a. 30.86%. IC. 40%. A. Y. 60%. RM ÁT. 19.75%. 20%. a. IN FO. 0%. b. Control. vs. T. H. vs.T.aharzianum. vs.T. atroviride. b vs. T. V. vs.T. viride. EM. AS. DE. Control (P. lilacinus). vs. T. A. 12.35%. DE. SI. ST. Fig. 5. Porcentaje de germinación de P. lilacinus expuesto a T. harzianum, T. atroviride y T. viride nativas. N. a: p < 0.05; no existe diferencia significativa en la germinación de P. lilacinus. RE CC IO. expuesto a T. harzianum. b: p>0.05; existe diferencia significativa en la germinación de P. lilacinus. DI. expuesto a T. atroviride y T. viride respectivamente.. - 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.- DISCUSIÓN. En relación al efecto antagónico obtenido por los cultivos nativos de Trichoderma. AC IÓ. N. atroviride, Trichoderma harzianum y Trichoderma viride nativas frente a Paecilomyces lilacinus, en la figura 1 se evidencia, antagonismo tipo 1 de T.. IC. viride nativa y antagonismo tipo 2 de T. harzianum y T. atroviride nativas frente a. M UN. P. lilacinus respectivamente, según la escala de Bell et al25, lo cual confirma que. CO. Trichoderma no sólo parasita a hongos fitopatógenos; sino además a hongos. Y. controladores biológicos como es el caso de P. lilacinus y su efectividad depende. IC. A. de diferentes modos o mecanismos de acción en el control de microorganismos. RM ÁT. patógenos. Entre estos mecanismos se encuentran: competencia por el espacio y. IN FO. los nutrientes, antibiosis, inactivación de enzimas del patógeno y la resistencia. DE. inducida 27,28.. AS. El antagonismo tipo 1 observado en T. viride nativa, ha demostrado in vitro su. EM. antagonismo, al reducir la colonización y esporulación de P. lilacinus, esto. SI. ST. permite predecir que ha iniciado su actividad antagónica oportunamente; Arzate et. DE. al33 describen luego de evaluar aislamientos nativos de Trichoderma que los. N. cultivos con clases de antagonismo 1 y 2 presentan perspectivas para ser. RE CC IO. utilizados en campo; en este sentido Infante et al10 sostienen que el género Trichoderma es un agente de control biológico muy eficiente puesto que presenta. DI. una alta velocidad de crecimiento, abundante esporulación y una amplia gama de sustratos donde puede crecer debido a la riqueza de enzimas que posee34,35.. - 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Según Infante et al10 las especies de Trichoderma presentan además otra forma de antagonismo conocida como micoparasitismo, en el cuál las hifas de este hongo crecen quimiotrópicamente hacia el hospedante, adheriéndose a las hifas del. N. mismo, enrollándose en ellas, e incluso penetrándolas en ocasiones, como se. AC IÓ. observan en las figuras 29,30,31,32. Los resultados indican que el micoparasitismo es. IC. un proceso complejo que consta de cuatro etapas, el desarrollo de cada una de. M UN. ellas depende de los hongos involucrados, de la acción biotrófica o necrotrófica. CO. del antagonista y de las condiciones ambientales37,38. Chet y Benhamou39,. Y. explican detalladamente cada una de las etapas, que son: reconocimiento del. IC. A. hospedero, ataque al hospedero, penetración de pared celular y muerte del. RM ÁT. hospedero. Rivero et al.40, evaluaron el efecto de antibiosis de dos aislados de. IN FO. Trichoderma en cultivo dual con A. padwickii, B. oryzae, C. lunata y Phoma sp.,. micoparasitismo. observado. AS. El. DE. obteniendo inhibición significativa del crecimiento radial de estos patógenos.. macroscópicamente. (fig.1). como. EM. microscópicamente (fig.2,3 y 4), se debe a las enzimas hidrolíticas que producen. SI. ST. las especies de Trichoderma, se reportan las quitinasas, las gluconasas, proteasas y. DE. celulasas. La enzimas quitinasa y ß-1,3-gluconasa intervienen en uno de los. N. procesos que incluye el crecimiento del antagonista hacia el patógeno, y el. RE CC IO. consecuente desarrollo alrededor de éste o la formación de estructuras similares a ganchos o apresorios en la superficie del hospedero, que le permitirían, penetrar al. DI. interior del patógeno para degradar su pared celular39.. - 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Stefanova et al.7, informaron la presencia de metabolitos no volátiles con actividad antifúngica en cuatro aislamientos de Trichoderma y concluyeron que los mismos reducen el crecimiento micelial de Phytophthora nicotianae y R.. AC IÓ. N. solani en medios de cultivo envenenado con filtrados líquidos donde se habían cultivado las cepas antagónicas. Plantean además, que al parecer estos causan a. IC. nivel celular: vacuolización (como se observa en la fig. 2e, fig.3c y fig. 4b) así. CO. M UN. como, granulación, coagulación, desintegración y lisis.. Y. Los cambios morfológicos apreciados en las estructuras de P. lilacinus (figs. 2d y. IC. A. 4d) han sido observados en especies de hongos fitopatógenos. Quiroz et al46. RM ÁT. reportaron este tipo de micoparasitismo entre cepas nativas de Trichoderma y. IN FO. cepas de Botrytis cinerea presentándose los daños más drásticos principalmente en las conidios y micelio de las cepas de B. cinerea en los que presentaron. AS. DE. procesos de deformación, enrollamiento, ruptura, fragmentación y lisis.. EM. Al inicio se consideró que la actividad inhibidora de aislamientos de Trichoderma. SI. ST. sobre otros hongos se debía solo a compuestos no volátiles; sin embargo Dennis y. DE. Webster42, que fueron los pioneros en esta materia, con la realización de los. N. trabajos más completos acerca de la función de los antibióticos producidos por. RE CC IO. hongos del género Trichoderma sobre patógenos de las plantas, lograron relacionar su actividad antibiótica con compuestos no volátiles, entre los que se. DI. encontraban uno identificado como trichodermina, así como otros metabolitos peptídicos.. - 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En investigaciones posteriores Webster y Lomas (1964) citados por Díaz 43, determinaron que las especies de Trichoderma producen dos antibióticos más, gliotoxina y viridina, mientras que Oliver y Germain citado por Martínez 44 numeroso. antibióticos. como. son:. suzukacilina,. alameticina,. N. mencionan. AC IÓ. dermadina, trichotecenos y trichorzianina. Posteriormente, Dennis y Webster44,. IC. detectaron que la actividad antibiótica de algunos aislamientos se debía también a. M UN. la producción de compuestos volátiles. Los antibióticos volátiles tienen un efecto. CO. esencialmente fungistático, debilitando al patógeno y lo hacen más sensible a los. Y. antibióticos no volátiles, lo que se conoce como un “hiperparasitismo” de origen. RM ÁT. IC. A. enzimático45.. IN FO. En relación a la germinación de P. lilacinus al encontrarse frente a las conidias de T. atroviride y T. harzianum y T. viride nativas respectivamente, en la figura 5 se. DE. observa que P. lilacinus disminuye la germinación en presencia de T. viride y T.. AS. atroviride nativas; hasta en un 12.35% y 19.75 % respectivamente en. EM. comparación al control, existiendo diferencia significativa, lo que indica que T.. SI. ST. viride y T. atroviride nativas disminuyen la germinación de P. lilacinus;. DE. asimismo, se observa que disminuye la germinación en presencia de T. harzianum. N. nativa en un 30.86% en comparación del control; no existiendo diferencia. RE CC IO. significativa.. DI. Diversas cepas de Trichoderma secretan sustancias antifúngicas como enzimas y metabolitos secundarios volátiles y no volátiles, para competir eficientemente por espacio y nutrientes; algunos de los cuales inhiben el desarrollo de otros organismos con los que no hacen contacto físico, siendo consideradas tales. - 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. sustancias inhibidoras como “antibióticos”36, lo que explicaría la disminución de la germinación de las conidias de P. lilacinus frente a las conidias de T. viride y T.. AC IÓ. N. atroviride nativas.. Algunas de las enzimas no solo intervienen en el proceso de penetración y lisis,. IC. sino que actúan también como antibióticos, tal es el caso de la enzima. M UN. endoquitinasa (Ech42) que causa hidrólisis en las paredes de B. cinerea, y además. CO. inhibe la germinación de conidios (fig. 5) y el crecimiento de tubos germinativos. IC. A. Y. de varios hongos41.. RM ÁT. Según Gonzáles-Cárdenas37, Trichoderma spp. a concentraciones de 106. IN FO. conidias/mL, resultó efectivo contra Fusarium oxysporum, en nuestro caso T. atroviride y T. viride a concentraciones de 105 conidias/mL disminuyó la. DE. germinación de P. lilacinus al enfrentarlos respectivamente. García y Zambrano 38. AS. evaluaron el tipo de antagonismo de tres aislamientos de Trichoderma ante. EM. Macrophomina phaseolina y concluyeron que la antibiosis parece ser el. SI. ST. mecanismo de acción en esta relación, pero que hace falta continuar investigando. N. DE. sobre los posibles antibióticos producidos.. RE CC IO. De este trabajo se deriva que el cultivo nativo de T. viride ha presentado. DI. incompatibilidad con P. lilacinus, por lo que ambos controladores biológicos no. - 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. deberían incluirse en combinaciones para el control biológico. Los cultivos nativos de T. atroviride y T. harzianum han presentado incompatibilidad parcial con. P. lilacinus. Asimismo se recomienda realizar estudios previos de. AC IÓ. N. compatibilidad entre las diferentes especies de Trichoderma y demás controladores biológicos; tomándose en cuenta factores ambientales tales como. IC. temperatura y humedad antes de ser empleados en campo, y en combinación para. M UN. el control de enfermedades vegetales; excluyendo aquellos que presenten. CO. incompatibilidades y así lograr un mejor control integrado que sea beneficioso. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. para los cultivos.. - 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V.- CONCLUSIONES. Trichoderma viride nativo presenta un efecto antagónico de tipo 1 sobre. AC IÓ. N. el crecimiento de P. lilacinus en condiciones de laboratorio.. IC. Trichoderma harzianum y Trichoderma atroviride nativos presentan. M UN. antagonismo tipo dos sobre el crecimiento de P. lilacinus en condiciones de. Y. CO. laboratorio.. IC. A. T. atroviride y T. viride nativos disminuyen notoriamente la germinación. RM ÁT. de P. lilacinus en un 19.75% y 12.35% respectivamente, mientras que, T.. IN FO. harzianum nativo disminuye en un 30.86% la germinación de P. lilacinus en. DE. condiciones de laboratorio.. AS. T. atroviride, T. harzianum y T. viride nativos presentan micoparasitismo,. EM. evidenciándose con la localización de deformaciones de la hifa, presencia de. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. clamidosporas, adherencia, vacuolización y enrollamientos.. - 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.. Agrios G. Fitopatología. 2ª ed. México: Ed. Uteha; 1995.. 2.. Rey M, Delgado-Jarana J, Rincón AM, Limón MC, Benítez T. Mejora de. AC IÓ. N. cepas de Trichoderma para su empleo como biofungicidas. Rev Iberoam Micol.. Michel-Aceves AC, Otero-Sánchez MA, Ariza-Flores R, Barrios-Amyala. M UN. 3.. IC. 2000; 17: S31-S36.. CO. A, Alarcón-Cruz N. Eficiencia biológica de cepas nativas de Trichoderma spp., en el control de Sclerotium rolfsii Sacc., en cacahuate. Avances en Investigación. Cupull Santana R, Andreu Rodríguez CM, Pérez Navarro C, Delgado. RM ÁT. 4.. IC. A. Y. Agropecuaria. 2013; 17(3): 89-107.. Pérez Y, Cupull Santana MC. Efecto de Trichoderma viride como estimulante de. Alomar O, Albajes R. Control biológico de plagas: Biodiversidad. AS. 5.. DE. solani Kuhn. 2003; 30(1): 21-25.. IN FO. la germinación, en el desarrollo de posturas de cafetos y el control de Rhizoctonia. Fernández L, Vega O, López J. Control biológico de enfermedades de. SI. 6.. ST. EM. funcional y gestión del agroecosistema.biojournal.net. (Barc) 2005; (1): 1-10.. DE. plantas. En: Carballo M. (dir). Control biológico de plagas agrícolas. 2a México:. RE CC IO. N. Edit. Catie. 2004; 162-184.. 7.. Stefanova M. Aplicación de Trichoderma y otros antagonistas. Resumen. de ponencia en: Taller Latinoamericano: Biocontrol de Fitopatógenos con. DI. Trichoderma y otros antagonistas. Fitosanidad Cuba 2006; 10 (2): pp 151-162.. 8.. Fernández LO. Microorganismos antagonistas para el control fitosanitario.. Manejo Integrado de Plagas. 2001; 62: 96 -100.. - 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 9.. Hernández-Lauzardo AN, Bautista-Baños S, Velásquez-del Valle MG.. Hernández Rodríguez A. Uso de microorganismos antagonistas en el control de enfermedades postcosecha en frutos. Rev. Mexicana de Fitopatología, 2007;. Infante D, Martínez B, Gonzáles N, Reyes Y. Mecanismos de acción de. AC IÓ. 10.. N. 25(1): 66-74.. Trichoderma frente a hongos fitopatógenos. Rev. Protección Veg. 2009; 24: 14-. M UN. Ezziyyani M, Pérez Sánchez C, Sid Ahmed A, Requena M, Candela ME.. CO. 11.. IC. 21.. Y. Trichoderma harzianum como biofungicida para el biocontrol de Phytophthora. IC. A. capsici en plantas de pimiento (Capsicum anuum L.). Anales de Biología. 2004;. 12.. RM ÁT. 26: 35-45.. Claro, O. Métodos artesanales de producción de bioplaguicidas a partir de. IN FO. hongos entomopatógenos y antagonistas. Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal (INISAV) Ciudad de La Habana -Cuba. 2006. Disponible en:. 13.. EM. AS. DE. http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis98.pdf. Guigón C. y González P. Selección de Cepas Nativas de Trichoderma spp. ST. con actividad antagónica sobre Phytophthora capsici. Leonian y Promotoras de. SI. crecimiento en el cultivo de Chile (Capsicum annuum L). Rev. Mexicana de. Baker KF, Cook RJ. Biological Control of plant pathogens. The American. RE CC IO. 14.. N. DE. Fitopatología. México. 2004; 22: 117-124.. DI. Phytopathological Society. USA1982. pp. 28-43.. 15.. Correa S, Mello M, Ávila ZR, Minaré Braúna L, Pádua RR, Gomes D.. Cepas de Trichoderma spp. Para el control biológico de Sclerotium rolfsii Sacc. Fitosanidad 2007; 11(1): 3-9.. - 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 16.. Cervantes-Martínez R, Hernández-Hernández V, Gonzáles Cervantes G,. Favela-Chávez E, Álvarez-Reyna VP. Antagonismo de cepas nativas de Trichoderma sp. Aisladas en la comarca lagunera contra Phymatotrichum. 17.. AC IÓ. N. omnivorum (Shear) Duggar. Rev. Agraria Nueva Época 2010; 7(1): 34-40.. Howell C. Mechanisms employed by Trichoderma species in the. IC. biological control of plant diseases: The history and evolution of current concepts.. Ahmad Ganaie M, Ahmad Khan T. Biological potential of Paecilomyces. CO. 18.. M UN. Plant Disease 2003; 87 (1): 4-10.25. Y. lilacinus on pathogenesis of Meloidogyne javanica infecting tomato plant.. 19.. RM ÁT. IC. A. European J. Appl 2010; 2(2): 80-84.. Pau CG, Leong CTS, Wong SK, Eng L, Jiwan M, Kundat FR et al.. IN FO. Isolation of indigenous strains of Paecilomyces lilacinus with antagonistic activity. Kerry BR, Crump DH. “The dynamics of the decline if the cereal Cysr. AS. 20.. DE. against Meloidogyne incognita. Int. J. Agric Biol 2012; 14:197-203.. EM. nematode Heterodera avenae, in four soils under intensive cereal production”.. Kiewnick S, Neumann S, Sikora RA, Frey JE. Effect of Meloidogyne. DE. 21.. SI. ST. Fundamental and applied Nematology 1998; 21(5): 617-625. N. incognita Inoculum density and application Rate of Paecilomyces lilacinus Strain. RE CC IO. 251 on biocontrol efficacy and colonization of egg masses analyzed by Real-Time Quantitative PCR. The America Phytopathological Society 2011; 101(1): 105-. DI. 112.. 22.. Robl D, Sung LB, Navakovich JH, Marangoni PR, Zawadneak MA,. Dalzoto PR et al. Spore production in Paecilomyces lilacinus (Thom.) samson strains on agro-industrial residues. Braz J Microbiol 2009; 40(2): 296-300.. - 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 23. Strain. Crow WT. Effects of a Commercial Formulation of Paecilomyces lilacinus 251. on. Overseeded. Bermudagrass. Infested. with. Belonolaimus. longicaudatus. J Nematol 2013; 45(3): 223-227.. conidios de Paecilomyces sp. Pc013 mediante fermentación.. N. Murphy Ávila R. Diseño de un medio de cultivo para la producción de Bogotá: Pontificia. AC IÓ. 24.. 25.. M UN. IC. Universidad Javeriana; 2007.. Bell D. Well H. Markham C. In vitro antagonism of Trichoderma species. A. González Salgado CH, Puertas Arias A, Fonseca Flores M, Suárez Soto E,. IC. 26.. Y. CO. against six plant pathogens. Rev. American Phytopathology 1982; 72: 279- 382.. RM ÁT. Blaya Gómez R. Actividad antagónica de Trichoderma sp. aislada de un suelo de la provincia Granma, Cuba frentre a Alternaria solani Sor. Rev. Fac. Agron.. Gonzáles I y Col. Caracterización bioquímica de aislamientos de. DE. 27.. IN FO. 1999; 16: 167-173.. AS. Trichoderma spp. promisorios como agentes de control biológico. I. expresión de. Harman GE. Overview of mechanisms and uses of Trichoderma spp.. ST. 28.. EM. actividad quitinasa. Rev. Protección Veg. 2010; 25(1): 58-63.. Droby S, Chalutz E, Wilson CI, Wisniewki ME. Biological control of. RE CC IO. 29.. N. DE. SI. Phytopathology. 2006; 96: 190-194.. postharvest diseases: a promising alternative to the use of synthetic fungicides.. DI. Phytoparasitica 1992; 20: 49-153. 30.. Elad. Y,. Boyle. P,. Henis. Y.. Parasitism. of. Trichodermaspp.onRhizoctoniasolani and Sclerotium rolfsii scanning electron microscopy and fluorescence microscopy. Phytopathology. 1983; 73: 85-8.. - 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 31.. Fraire-Cordero M, Yánez M, Nieto D, Vázquez G. Hongos patógenos en. fruto de fresa (Fragaria x ananassaDuch) en postcosecha. RevMexFitopatol. 2003; 2: 285-91.. Guizzardi M, Elad Y, Ari M. Treatments against postharvest fruit diseases. N. 32.. 33.. M UN. IC. Trichoderma / GliocladiumWorkshop (Belsville, MD, USA). 1995: 39.. AC IÓ. using trichodex (Trichodermaharzianum).Proceedings of the V International. Arzate J, Aceves A, Domínguez V, Santos O. Antagonismo de. CO. Trichoderma spp. sobre Mycosphaerella fijiensis Morelet, agente causal de la. Y. sigatoga negra del plátano (Musa sp) in vitro e invernadero. Revista mexicana de. 34.. RM ÁT. IC. A. fitopatología. 2006; 24(2): 98-104.. Harman GE, Howell CR, Viterbo A, Chet I, Lorito M. Trichoderma. Sandoval I, López MO. Antagonismo de Trichoderma harzianum A34. DE. 35.. IN FO. species-opportunistic, avirulent plant symbionts. Nature reviews. 2004; 2: 43-46.. AS. hacia Macrophomina phaseolina y otros patógenos fúngicos del frijol.. ST. Hjeljord L, Tronsmo A. Trichoderma and Gliocladium in biological. SI. 36.. EM. Fitosanidad. 2000; 4(3-4): 69-72.. DE. control: an overview. In: Trichoderma & Gliocladium: Enzymes, biological. N. control and commercial applications. Harman GE, Kubice CP. (Eds). 1998; 2:. DI. RE CC IO. 131-151. Taylor & Francis.. 37.. González-Cárdenas. JC,. Maruri-García. JM,. González-Acosta. A.. Evaluación de diferentes concentraciones de Trichoderma spp. contra Fusarium oxysporum agente causal de la pudrición de plántulas en papaya (Carica papaya L.) en Tuxpan, Veracruz, México. Revista UDO Agrícola. 2005; 5(1): 45-47. - 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 38.. Haram S, Schickler H, Oppenheim A, Chet I. Differential expression of. Trichoderma harzianum chitinases during mycoparasitism. Phytopathol. 1996;. 39.. AC IÓ. N. 86:980-985.. Centro de Educación y tecnología. Manual de producción y utilización de. Rivero Deyanira. Identificación y control in vitro con quitosana y. Y. 40.. CO. M UN. IC. Trichoderma sp. Gobierno de Chile. Fundación para la innovación agraria.. Brunner K et al. The Nag1 N-acetylglucosaminidase of Trichoderma. IN FO. 41.. RM ÁT. sativa L.). Rev Protección Veg. 2008;23(1): 67.. IC. A. Trichoderma spp. de hongos que causan el manchado del grano en arroz (Oryza. DE. atroviridae is essential for chitinase induction by chitin and of major relevance to. ST. Dennis L, Webster J. Antagonistic properties of species groups of. SI. 42.. EM. AS. biocontrol. Curr. Genet. 2003; 43: 289-295. Díaz J. Algunos aspectos biológicos de Trichoderma y su posible uso. RE CC IO. 43.. N. DE. Trichoderma. III Hyphal interaction. Trans Br Mycol Soc. 1971; 57: 363-369.. como biocontrol. Trabajo de Diploma en opción al título de Ingeniero Agrónomo.. DI. Universidad Agraria de La Habana. 1994. - 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 44.. Martínez JT. Uso de Trichoderma para el control biológico de organismos. patógenos de plantas. En memorias del Simposium sobre agricultura orgánica y de. AC IÓ. N. baja residualidad. México. 1998; 25-27.. 45.. Sarmiento V. ferrera R. Alarcón A. Lara M. Antagonismo in vitro de cepas. Y. CO. M UN. del ajo. Revista Mexicana de Micología. México. 2008; 26: 27-34.. IC. de Aspergillus y Trichoderma hacia hongos filamentosos que afectan al cultivo. Chet I, Hadar I. Fungal antagonist and mycoparasites. In the Mycota IV:. IC. A. 46.. RM ÁT. Environmental and Microbial Relationships (Wicklow DT and Soderstrom B, eds) New York: Springer Verlag. (Revista de internet) 1997 (Acceso 06 de Noviembre. DE. Morton CO, Hirsch PR, Kerry BR. Infection of plant-parasitic nematodes. AS. 47.. IN FO. 2011).. EM. by nematophagous fungi- a review of the application of molecular biology to. ST. understand infection processes and to improve biological control. Nematology.. Puertas A y col. Interacción de Pochonia chlamydosporia var. catenulata. N. 48.. DE. SI. 2004; 6(2): 161-170.. RE CC IO. con Rhizobium sp., Trichoderma harzianum y Glomus clarum en el control de. DI. Meloidogyne incognita. Rev. Protección Veg.2006; 21(2): 80-89.. - 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. Anexos. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. c. d. DE. SI. ST. EM. a. N. Anexo 1. Cultivos jóvenes de a) Paecilomyces lilacinus, b) Trichoderma. DI. RE CC IO. atroviride, c) Trichoderma harzianum y d) Trichoderma viride.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) DE. SI. ST. EM. AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE CC IO. N. Anexo 2. Técnica de microcultivo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) A. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM. AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. B. ST. C. SI. Anexo 3. Cultivos puros de tres especies nativas de Trichoderma.. DI. RE CC IO. N. DE. A: T. atroviride B: T. harzianum C: T. viride. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) AS. DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DI. RE CC IO. N. DE. SI. ST. EM. Anexo 4. Cultivo puro de Paecilomyces lilacinus.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. Anexo 5. Análisis de varianza (ANOVA) del porcentaje de germinación de Paecilomyces lilacinus frente a T. atroviride, T. harzianum y T. viride nativas.. Porcentaje de germinación de P. lilacinus Suma de gl cuadrados. M UN. IC. ANOVA de un factor. F. CO. Media cuadrática. 1062,000. 3. 354,000. Intra-grupos. 10,000. 8. 1,250. 1072,000. 11. ,000. A IC. IN FO. RM ÁT. Total. 283,200. Y. Inter-grupos. Sig.. AS. Student-Newman-Keuls Tratamiento. DE. Germinación de P. lilacinus Subconjunto para alfa = 0.05 1 3 3 3 3. 2. 3. 3,3333 5,3333 8,3333 ,060. 1,000. 27,0000 1,000. DE. SI. ST. EM. P. lilacinus + T. viride P. lilacinus + T. atroviride P. lilacinus + T. harzianum P. lilacinus Sig.. N. DI. RE CC IO. N. Se muestran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos. a. Usa el tamaño muestral de la media armónica = 3,000.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(49)