Efecto del extracto hidroalcoholico de las hojas de piper aduncum, sobre lesiones de piel inducidas en oryctolagus cuniculus”

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BI O. Q UI. M IC A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. “EFECTO DEL EXTRACTO HIDROALCOHOLICO DE LAS HOJAS. Y. DE Piper aduncum, SOBRE LESIONES DE PIEL INDUCIDAS EN. AC. IA. Oryctolagus cuniculus” PROYECTO DE TESIS II. FA R. M. TESIS II. PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE. CA. DE. BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BL IO. TE. AUTORES:. Vega Ybañez Luz Del Rosario Mg. Roger Rengifo Penadillos. BI. ASESOR:. Salazar Alvarez Lorenzo Daniel. TRUJILLO – PERÚ 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA. A Dios. Porque nos ha brindado la fortaleza necesaria y la voluntad de seguir en el. M IC A. buen camino, por darnos coraje para seguir adelante y mantenernos unidos en el amor, confianza y sabiduría para enseñar con el ejemplo dentro de. Q UI. nuestra pequeña familia de tres.. BI O. A nuestros Padres.. Y. Porque pese a toda dificultad siempre nos han brindado su. IA. incondicional apoyo, consejos, amor y comprensión; y porque han. AC. inculcado en nosotros los más preciados valores que son el respeto a. FA R. M. la vida, el amor y la perseverancia, para así conseguir nuestros más. CA. DE. grandes objetivos.. A nuestros hermanos. TE. Mariella y Víctor, por estar siempre presentes en el desarrollo de. BL IO. nuestras vidas, por ser las personas con quienes hemos compartido la mayor cantidad de risas, lágrimas y anécdotas que. BI. quedan guardadas en nuestras memorias hasta la eternidad.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. M IC A. A nuestro adorado hijo Fabián Esteban. Porque verte crecer cada día, es motivo de inspiración en nuestras vidas.. Q UI. Porque con una simple sonrisa, transformas nuestro mundo y lo llenas de. BI O. inmensa alegría.. Y. Y porque representas el amor, la voluntad y ganas que tienen papá y mamá. Luz y Daniel. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. para salir adelante.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTOS. A nuestros maestros.. M IC A. A quienes se esfuerzan por leer en los rostros de los estudiantes las distintas inteligencias, dones y sensibilidades que hacen de cada ser ese misterio que se llama. Q UI. vida. A quienes reconocen que su experiencia y sabiduría es producto de muchos ensayos, pero también de muchos errores asumidos. A quienes están dispuestos a. BI O. enseñar que la razón sea sensible y el sentimiento razonable, comenzando por hallar la. Y. dificultad de esa síntesis en su propia existencia. Gracias por su tiempo dedicado, por. IA. su apoyo así como por la sabiduría que nos transmitieron en el desarrollo de Tesis I, en. AC. especial a nuestro asesor Roger Antonio Rengifo Penadillos, quien con sus. M. conocimientos, experiencia, y motivación diaria nos ha guiado en el desarrollo de este. FA R. trabajo, permitiéndonos de esta manera llegar a la culminación del mismo. Muchas. DE. gracias por su amistad, por su apoyo permanente e incondicional a lo largo de nuestra formación universitaria, por el tiempo compartido y por impulsar el desarrollo de. BI. BL IO. TE. CA. nuestra formación profesional en el área de la investigación científica.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN. Señores Miembros del Jurado:. M IC A. En cumplimiento con las disposiciones vigentes emanadas del reglamento de Grados y Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad. Q UI. Nacional de Trujillo, sometemos a vuestro elevado criterio, el presente Informe de Tesis I intitulado:. BI O. “Efecto del extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum, sobre. para manifestarles el más profundo. IA. Sea propicia esta oportunidad. Y. lesiones de piel inducidas en Oryctolagus cuniculus”,. AC. agradecimiento a nuestra Alma Mater y toda su plana docente, por su meritoria. FA R. través de sus enseñanzas.. M. labor de educadores y por la formación profesional que nos han brindado a. DE. De manera muy especial agradecemos la valiosa colaboración de los señores miembros del jurado.. CA. Dejamos a vuestra consideración Señores Miembros del Jurado, la respectiva. Trujillo, Agosto del 2014. BI. BL IO. TE. calificación del presente informe.. __________________________ Vega Ybañez, Luz del Rosario. _____________________________ Salazar Alvarez, Lorenzo Daniel. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. .……………….. PRESIDENTE. Dr. Edmundo Venegas Casanova. ………………… MIEMBRO. Mg. Roger Antonio Rengifo Penadillos. …………………. MIEMBRO. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Dr. Roberto Ybañez Julca. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE RESUMEN……………………………………………………………….i. M IC A. ABSTRACT………………………………………………………………ii INTRODUCCIÓN……………………………………………………….1. Q UI. MATERIAL Y MÉTODO………………………………………………6. RESULTADOS …………………………………………………………12. BI O. DISCUSIÓN……………………………………………………………..18. Y. CONCLUSIONES………………………………………………………22. IA. RECOMENDACIONES……………………………………………….23. AC. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………..…………24. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. ANEXOS………………………………………………………………...28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. M IC A. El extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum, fue evaluado en un modelo in vivo para determinar su efecto cicatrizante.. Q UI. Se emplearon 4 grupos de trabajo: Blanco, Control, Problema I y Problema II. El efecto. BI O. cicatrizante del extracto de las hojas de Piper aduncum fue evaluado en Oryctolagus cuniculus, realizando una herida por incisión en la oreja, y administrando por vía tópica II. Y. y IV gotas de extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum a una. AC. IA. concentración de 132,8 mg/mL, durante 10 días. La evolución de la cicatrización fue. M. controlada mediante la medición del tamaño de la herida en milímetros versus el tiempo. FA R. de tratamiento, así como con ensayos cualitativos de histología, realizados sobre las biopsias del tejido cicatrizal, donde se observaron: el ambiente del tejido cicatrizal, la. DE. abundancia de cuerpos celulares, la presencia de edema y la formación de fibras de. CA. colágeno.. TE. El tamaño de herida presentó una diferencia significativa (p<0.005) entre los grupos. BL IO. problema versus el grupo control. En conclusión el extracto hidroalcohólico de las hojas. BI. de Piper aduncum presenta efecto cicatrizante en el Oryctolagus cuniculus.. Palabras clave: Piper aduncum, Oryctolagus cuniculus, hidroalcohólico.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. M IC A. The hydroalcoholic extract of the leaves of Piper aduncum was evaluated in an in vivo model for determine its healing effect.. Q UI. Were used four working groups: White, Control, Problem I and Problem II. The healing. BI O. effect of the extract from the leaves of Piper aduncum was evaluated in Oryctolagus cuniculus, making an incised wound on the ear, and administering topically II and IV. Y. drops of hydroalcoholic extract of the leaves of Piper aduncum at a concentration of 132,. AC. IA. 8 mg / mL, for 10 days. The evolution of the healing was monitored by measuring the. M. size of the wound in millimeters versus time of treatment as well as qualitative assays. FA R. histology performed on biopsies of scar tissue, which were observed: the environment of scar tissue, abundance of cell bodies, presence of edema and the formation of collagen. DE. fibers.. CA. The wound size had a significant difference (p <0.005) among the problem groups versus. TE. the control group. In conclusion, the hydroalcoholic extract of the leaves of Piper. BI. BL IO. aduncum has healing effect on the Oryctolagus cuniculus.. Keywords: Piper aduncum, Oryctolagus cuniculus, hydroalcoholic.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. INTRODUCCIÓN Cada año, 100 millones de pacientes adquieren cicatrices, ya sea por quemaduras, intervenciones quirúrgicas o ruptura de tejidos, por accidentes de diferente índole, que requieren de tratamiento efectivo y rápido, lo que hace a la cicatrización de heridas un. M IC A. desafío terapéutico. Muchos investigadores y comunidades médicas buscan mejorar el cuidado de una herida con miras a promover la cicatrización pero el estudio de sustancias. Q UI. orgánicas e inorgánicas completamente efectivas es aún un misterio científico,. BI O. principalmente porque la cicatrización es un proceso complejo que incluye un número de. IA. Y. eventos que resultan de la interrelación de diferentes estructuras celulares.. AC. En el Perú son frecuentes las heridas de tratamiento hospitalario, específicamente heridas. M. quirúrgicas, heridas en pacientes diabéticos, úlceras gástricas, úlceras varicosas, heridas. FA R. por laparotomías y heridas causadas por accidentes de tránsito o por violencia. Este tipo de heridas son una entidad frecuente y aunque en el Perú no se conoce su epidemiología,. DE. se sabe que representan un número considerable. Un estudio mostró que de 185 405. CA. egresos hospitalarios, durante el año de 1995, el 50.9% presentaba heridas quirúrgicas:. TE. 0.17% úlceras gástricas, 0.14% heridas por pie diabético, 0.08% úlceras varicosas y. BL IO. 0.25% de laparotomías. De los pacientes con heridas quirúrgicas, presentaron infección global el 6 – 12%; es también común encontrar otro tipo de heridas, originadas por. BI. quemaduras, accidentes con animales, o por picaduras de insectos vectores, de enfermedades como es el caso de la úlcera leishmaniosis reportadas en zonas tropicales principalmente todo. Estos casos asociados ubican a la cicatrización de heridas abiertas como un problema de alto impacto.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La cicatrización de heridas se divide clásicamente en tres etapas: Inflamatoria, proliferativa, y de remodelación. 1,2;3.. En la fase inflamatoria, se fagocitan y eliminan las bacterias la suciedad, y se liberan. M IC A. factores que producen la migración y división de las células que toman parte en la fase. Q UI. proliferativa 4.. BI O. La fase proliferativa se caracteriza por la angiogénesis, el aumento de colágeno, la. Y. formación de tejido granular, la epitelialización, y la contracción de la herida. En la. IA. angiogénesis, crecen nuevos vasos sanguíneos a partir de células endoteliales. En. extracelular provisoria. (ECM). mediante. la. secreción. M. matriz. AC. la fibroplasia y formación de tejido granular, los fibroblastos crecen y forman una nueva. FA R. de colágeno y fibronectina. En la epitelialización, las células epiteliales se desplazan. DE. sobre la herida cubriéndola. En la contracción, los miofibroblastos ayudan a reducir el tamaño la herida; ellos se adhieren de los bordes de la herida y se contraen utilizando un. CA. mecanismo similar al que tienen las células de los músculos lisos. Cuando las células han. BL IO. TE. cumplido con su cometido, las células no utilizadas sufren una apoptosis 5;6;7.. BI. En la fase de maduración y remodelado, el colágeno es remodelado y realineado a lo largo de las líneas de tensión y las células que ya no se precisan son eliminadas mediante una apoptosis. Sin embargo, este proceso no solo es complejo sino que es frágil y es susceptible de ser interrumpido o fallar, lo que conduce a la formación de heridas crónicas con problemas de cicatrización. Algunos factores que pueden contribuir a este. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. problema son la diabetes, enfermedades de las venas o arterias, edad avanzada, e infecciones.8. Las plantas medicinales, junto con otros remedios de origen animal y mineral,. M IC A. constituyeron el primer arsenal terapéutico del que disponía el hombre para tratar sus dolencias. Existen una gran variedad de plantas con propiedades terapéuticas. Q UI. reconocidas, que han sido estudiadas en profundidad, siendo determinados los principios. BI O. activos que en ellas se encuentran 4; 5.. Y. Desde 1975, la Organización Mundial de la Salud (OMS) ha reconocido la importancia. IA. de la medicina tradicional en el control de la salud y ha generado un programa orientado. FA R. M. AC. a la promoción de la medicina tradicional en los países de desarrollo5.. El Perú está considerado entre los 12 países de mayor diversidad biológica de la Tierra,. DE. conocidos como países mega-diversos, tanto por el número de especies y de recursos. CA. genéticos como por la variedad de ecosistemas, por lo que ha efectuado importantes. TE. aportes de especies y variedades para el mundo; cuenta con 84 zonas de vida de las 103. BL IO. conocidas donde habría 50 mil especies vegetales (20% de las existentes en la tierra) de la. BI. que 2 000 han sido utilizadas con fines curativos 6.. Actualmente, esta riqueza de promisorios agentes terapéuticos vegetales aunada al conocimiento ancestral del uso etnofarmacológico, constituyen un valioso recurso por explotar adecuadamente mediante el desarrollo sostenible en beneficio de la humanidad y especialmente, de las comunidades nativas que han preservado estos recursos hasta nuestros días 4;. 5; 6. . 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La especie Piper aduncum es especial en el Perú; es una planta dicotiledónea perteneciente a la familia de las piperaceae; de características semi-arbustiva arbórea que presenta un tallo cilíndrico, ramificado leñoso que a su vez presenta nudos prominentes y. M IC A. abultados, también presenta hojas simples sésiles, estipuladas enteras alternas, de apariencia muy rugosa por el haz y con las nervaduras sobresalientes en forma de malla. Q UI. por el lado del envés 7; 8.. BI O. La especie Piper aduncum, posee diferentes actividades terapéuticas comprobados; en el. AC. IA. antibacteriana sobre S. aureus y S. pyogenes.. Y. proyecto de investigación de Roger, R. (2009), sobre la determinación de la actividad. FA R. M. Así también el estudio de Rojas M. y Rumay A. (2009) describe la actividad antioxidante. DE. sobre los radicales libres.. Por otro lado, para el tratamiento de esta patología existe un mercado de productos. CA. farmacéuticos cicatrizantes que en su formulación se integran, principalmente por. TE. compuestos antimicrobianos y antiinflamatorios. En medicina tradicional las plantas. BL IO. constituyen una fuente económica y altamente disponible para el tratamiento de heridas. BI. agudas y crónicas, razón por la cual es de interés estudiar estas especies vegetales y confirmar su actividad biológica y de esta manera disponer de una opción terapéutica segura y económica11;12.. Resumiendo lo anterior, el objetivo del presente trabajo experimental, es contribuir a la generación de información fitoquímica y farmacológica de la especie vegetal Piper. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. aduncum, para lo cual se procederá a evaluar el efecto del extracto hidroalcohólico de las hojas Piper aduncum sobre la lesiones inducidas en Oryctolagus cuniculus, y con ellos en estudios posteriores poder brindar a la medicina tradicional un soporte científico sobre el uso de Piper aduncum en el tratamiento de enfermedades relacionadas a lesiones. PROBLEMA:. Q UI. 1.. M IC A. en la piel.. BI O. ¿Cuál es el efecto del extracto hidroalcohólicoo de las hojas de Piper aduncum,. HIPÓTESIS:. Los taninos contenidos en las hojas de Piper aduncum, tienen efecto. M. 2.1.. AC. IA. 2.. Y. sobre lesiones de piel inducidas en Oryctolagus cuniculus?. OBJETIVOS:. CA. 3.. DE. FA R. cicatrizante sobre lesiones de piel inducidas en Oryctolagus cuniculus. TE. OBJETIVO GENERAL. BL IO. 1. Evaluar el efecto del extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper. BI. aduncum, sobre lesiones en la piel inducida en Oryctolagus cuniculus.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIAL Y MÉTODO:. 1. MATERIAL: 1.1.. Material biológico:. M IC A.  1 Kg de hojas de Piper aduncum, procedentes del Caserío El Pollo de la provincia de Otuzco, Departamento La Libertad; las cuales fueron. especímenes. del. género. Oryctolagus. BI O.  20. Q UI. identificadas en el Herbarium Truxillense de la UNT.. cuniculus. machos,. Y. aparentemente sanos, de 3 meses de edad y con pesos fluctuantes de. M. Material de laboratorio:. FA R. 1.2.. AC. IA. 1 200 a 1 500g. Procedentes del Instituto Nacional de Salud.. DE.  Material de vidrio de uso común en el laboratorio.. TE. CA. 2. MÉTODO:. BL IO. 2.1. Recolección de la muestra Se recolectó las hojas de Piper aduncum, del caserío de Pollo, distrito de. BI. Otuzco, Provincia de Otuzco, Departamento La Libertad, a una altitud de 2 641 m.s.n.m; en el mes de Mayo del 2014, antes de la fecha de floración. de la planta, las cuales fueron identificadas en el Herbarium Truxillense de la UNT 13.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 5.2.1. Secado de la muestra Se lavaron las hojas con agua corriente y se secaron a temperatura de ambiente sin exposición a rayos solares por 48 horas, y se llevaron a estufa. M IC A. a 40°C durante 24 horas. Luego se realizó la molienda de las hojas utilizando un mortero y se. Q UI. guardó el polvo en frascos de vidrio herméticamente cerrados hasta la. BI O. extracción.. IA. Y. 5.2.2. Obtención del extracto hidroalcoholico:. AC. Se agitó 10 g de muestra con 500 ml de etanol al 50% v/v durante 6. M. horas. Luego se dejó en reposo por 8 h, posteriormente nuevamente se. FA R. agitó por 30 minutos y se filtró al vacío. Se procedió en pesar en una balanza analítica previamente tarada una placa Petri en la que se colocó. DE. el extracto hidroalcohólico y se llevó a estufa a una temperatura no. CA. mayor de 50°C, para completa evaporación del solvente. Por diferencia. BL IO. TE. de pesos se obtuvo el peso final del extracto seco.. BI. 5.2.3. Estudio Farmacodinámico in vivo: 5.2.3.1. Incisión en oreja de Oryctolagus cuniculus 5.2.3.1.1. Fundamento: Mediante un corte con bisturí, se realizó, la apertura de la piel y se produjo un pequeño sangrado con el objeto de obtener una herida simple, manteniendo abierta la herida se evaluó la actividad de las sustancias cicatrizantes 14. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 5.2.3.1.2. Modus Operandi: Se utilizaron 20 conejos de ambos sexos, los cuales fueron divididos en cuatro grupos: o Grupo Blanco: 5 conejos completamente ilesos, y sin tratamiento. o Grupo. Control:. 5. conejos. lesionados,. Grupo Problema I: 5 conejos lesionados, con tratamiento de II gota. Q UI. o. tratamiento. M IC A. farmacológico.. sin. BI O. de extracto hidroalcohólico de Piper aduncum.. o Grupo Problema II: 5 conejos lesionados, con tratamiento de IV. IA. Y. gota de extracto hidroalcohólico de Piper aduncum.. AC. o Se limpió la oreja del conejo, luego se realizó una incisión, con una. M. cuchilla quirúrgica de acero inoxidable, de 1 cm de largo, en el lóbulo. FA R. interno de la oreja del conejo, alrededor de la vena marginal, a los. DE. grupos control, problema I y II.. CA. Manteniéndose la herida abierta se procedió en aplicar el extracto. TE. hidroalcohólico obtenido a una concentración de 132,8mg/mL, de la siguiente manera:. BI. BL IO. o Al grupo problema I, se le administró vía tópica, II gota del extracto de Piper aduncum. cada 12 horas, entre el horario de 10:00 am a 10:00 pm por un periodo de 10 días de tratamiento. o Al grupo problema II, se le administró vía tópica, IV gotas del extracto de Piper aduncum, cada 12 horas, entre el horario de 10:00 am a 10:00 pm por un periodo de 10 días de tratamiento.. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Se evaluó la velocidad de cierre de la herida con un medidor de vernier, en los días 1, 5, 7, 11 post-incisión. La evolución de la cicatrización se realizó observando las diferencias entre las áreas de las heridas control vs tratamiento y comparando estas. 5.2.3.2.. Determinación. del. Efecto. Q UI. la comparaciones estadísticas utilizando la Anova.. M IC A. variables, entre el día uno y los días 5, 7 y 11 post incisión, realizando. cicatrizante, mediante el. estudio. BI O. histiológico, sobre lesiones de piel en Oryctolagus uniculus 15. Y. Para determinar el efecto del extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper. IA. aduncum se tomaron biopsias de las heridas de los grupos experimentales. AC. y control al día 11 post-incisión, las que fueron sometidas a un tratamiento. tenían in vivo.. FA R. M. histiológico con la finalidad preparar células y conservar la estructura que. DE. De manera general, para alcanzar este objetivo se realizó los siguientes pasos:. CA. o Con la finalidad de mantener la morfología del tejido lo más. BI. BL IO. TE. parecida posible a lo que éste tenía antes de hacer la extracción, se. almacenó la muestra de tejido en formaldehido al 37%, para luego someterse a un proceso de deshidratación, en alcohol etílico, de manera que se elimine toda el agua de la muestra y luego se agregue xilol, para eliminar todo el alcohol etílico de la muestra y producir el aclaramiento de la muestra.. o Luego se realiza el proceso de infiltración con parafina, esto con la finalidad de infiltrar la muestra histiológica, para lograr la. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. inhibición del tejido. Una vez realizado este procedimiento, se procede a la obtención de un bloque sólido de tejido, mediante el enfriamiento lento a temperatura de 10 a 15°C, a este bloque se le llama TACO; el cuál fue sometido en un microtomo, para realizar. M IC A. el corte histilógico, sumamente delgado, cuyo grosor fue entre 5 a 10 micrómetros, para ser observado en el microscopio.. Q UI. o Posteriormente se colocaron los cortes histiológicos, sobre las láminas portaobjetos, cubiertos con una capa de albúmina, donde. BI O. se agregó nuevamente xilol, para eliminar la parafina y alcohol en. Y. concentraciones decrecientes 100°, 95° y 70°, para rehidratar. IA. nuevamente la muestra.. AC. o Una vez realizado todo este procedimiento, se procedió a realizar. M. las respectivas coloraciones.. FA R. 5.2.3.2.1. Coloración de Hematoxicilina – Eosina:. DE. o Se sumergió la muestra en hematoxilina por 10 minutos, luego se lavó en agua para eliminar excesos y se pasó rápidamente por. CA. alcohol ácido.. TE. o Se lavó nuevamente, y se sumergió 30 segundos en eosina.. BI. BL IO. o Se pasó por otra serie de alcoholes, esta vez en orden creciente (70°, 95° y 100°) para deshidratar la muestra y poder observar al microscopio con un pegamento no soluble en agua. o Finalmente se dejó remojar 10 minutos en xilol, antes de observar al microscipio. o Se evaluó el ambiente del tejido cicatrizal, abundancia de cuerpos celulares. (polimorfonucleares,. histiocitos,. linfocitos),. la. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. reepitelización, neovascularización, la formación de vasos y la. M IC A. formación de edema utilizando este tipo de coloración.. 5.2.3.2.2. Coloración de Tricrómico de Masson:. Q UI. o Se procedió a realizar un mordentaje previo con líquido de Bouin durante una noche a temperatura ambiente.. BI O. o Se enfrió y lavó en agua destilada hasta que desaparecio el color. Y. amarillo.. IA. o Se tiñó con hematoxilina férrica durante 10 minutos. AC. o Se lavó en agua corriente durante 10 minutos, y luego con agua. FA R. M. destilada.. o Posteriormente se tiñó con la solución de escarlata-fucsina ácida. DE. durante 2-5 minutos y se lavó en agua destilada. o Se tiño con la solución de ácido fosfomolíbdico-fosfotúngstico. CA. durante 10-15 minutos y luego se tiñó nuevamente con solución de. TE. azul de anilina 15 minutos.. BI. BL IO. o Se lavó en agua destilada y se sumergió en solución de ácido acético al 1% durante 5 minutos.. o Se deshidrató, aclaró y se procedió en observar al microscopio las cantidades de colágeno y sus fibras 15,16.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) RESULTADOS. LI. O. TE. CA. DE. FA. RM AC. IA. Y. BI O. Q UI. III.. M IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI B. FIGURA 01: Reducción del Tamaño de la herida según grupo blanco, control, problema I y problema II. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Etapas. Q UI. M IC A. CUADRO 01: Comparación histopatológica de los tejidos de inscisión, tratados con extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum. Fase Inicial. BI O. Muestra. Fase Media. Formación de tejido de granulación. -. Linfocitos. -. Reepitelización. Depósitos de. RM AC. Blanco. Histiocitos. -. -. Edema. colágena -. FA. PMN. IA. Y. Inflamación. vasos. -. 5. 7. BI B. LI. O. TE. Problema II. ión. 10. CA. Problema I. Formación de. 3. DE. Control. -. Neovascularizac. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grupo Control. Grupo Control. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Grupo Blanco. Grupo Problema II. BL IO. TE. Grupo Problema I. BI. FIGURA 02: Apreciación del proceso de cicatrización de la herida en los diferentes grupos de trabajo, al día 11 post-incisión. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grupo Control. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Grupo Blanco. Grupo Problema II. DE. Grupo Problema I. CA. FIGURA 03: Comparación de fibras de colágeno. Tejidos cicatrizales teñidos con. TE. el reactivo tricrómico de Masson, observados a 10X en el microscopio.. BI. BL IO. Leyenda: Las fibras de colágeno se distinguen de color azul. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grupo Control. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Grupo Blanco. Grupo Problema II. DE. Grupo Problema I. TE. CA. FIGURA 04: Comparación de Neovascularización de tejidos cicatrizales, teñidos con Hematoxicilina y Eosina.. BL IO. Leyenda: Los vasos se distinguen por la tinción de los eritrocitos que circulan dentro de ellos, y se observan como puntos/zonas de color rojo (ver flecha). Las fotografías fueron. BI. tomadas con un aumento de 10X en el microscopio.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Grupo Problema I. Q UI. M IC A. Grupo Control. FIGURA 05: Comparación de reepitelización de tejidos, teñidos con el reactivo. BI O. Hemtoxicilina y Eosina, en un aumento de 10X.. Leyenda: La reepitelización se distingue por la capa de células epiteliales,. IA. Y. queratinizadas, formando la epidermis, y la capa córnea formada de color rosa-. M. AC. morado,que se observa en el borde la herida y se resalta con un ovalo negro en la figura.. Grupo Control. Grupo Problema II. BL IO. TE. CA. DE. FA R. Grupo Problema I. BI. FIGURA 06: Comparación de la presencia de edema en los tejidos cicatrizales, teñidos con el reactivo Hematoxicilina – Eosina, vistos a 10X en el microscopio.. Leyenda: El edema se distingue como zonas de apariencia líquida, de color rosado claro.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. Con el propósito de evaluar el efecto cicatrizante, se utilizó el extracto hidroalcohólico de las hojas de Piper aduncum, el cual fue administrada a 2 grupos de trabajo Problema I y Problema II, a dosis diferentes.. M IC A. El efecto cicatrizante fue evaluado mediante la medición de la reducción del tamaño de la herida. La FIGURA 01, muestra que el efecto cicatrizante se ve favorecido en. Q UI. los grupos problema I y II, en donde se compararon individualmente las heridas del. BI O. grupo control y los grupos problema, en los días 5; 7 y 11 post –incisión.. Y. Estos valores obtenidos, fueron ajustados a los diseños estadísticos ANOVA,. IA. llegando a la conclusión que existe diferencia significativa (p< 0,05) entre los grupos. AC. control, problema I y problema II; es decir uno de los grupos problema presentar. FA R. M. mayor cicatrización que el grupo control.. En la investigación realizada por Dres. J. (1999), se puede corroborar, que el efecto. DE. cicatrizante de los extractos acuoso y alcohólico de las hojas de Piper. CA. angustifolium R & P. es dado por los principios activos responsables de esta. TE. actividad farmacológica, entre ellos: flavonoides y taninos.. BL IO. Por lo tanto, con el respaldo del estudio de Salazar, L. y Vega, L. (2014), en donde se determina que las hojas de Piper aduncum, contiene una elevada concentración de. BI. taninos (27,7814%); puede concluirse que esta especie vegetal, posee el efecto cicatrizante, debido a la presencia de elevadas concentraciones de este metabolito. Asimismo los resultados de este estudio confirmaron lo observado por Arroyo (2000), en el estudio de cicatrización de úlcera péptica dosis (cápsulas) de 300 mg de micronizado de hojas de Piper angustifolium, donde concluyeron que esta planta es. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. capaz de promover la regeneración interna y externa de heridas empleando por contener flavonoides de tipo flavonas o isoflavonas y taninos. Aragón (2000) atribuye también, la acción cicatrizante de Oenothera multicaules a dosis de 40 y 70 % (100mg/g) en el extracto hidroalcohólico por la presencia de estos. M IC A. metabolitos secundarios, mostrando un marcado porcentaje de actividad. Los datos presentados en este estudio, pueden soportar que el Piper aduncum, es una. Q UI. planta con propiedades cicatrizantes, ya que el extracto de hojas de esta especie. BI O. vegetal, promueve la reparación tisular en conejos, en el modelo presentado de. Y. incicisión en la oreja. (FIGURA 02). IA. El estudio histopatológico tomados de los tejidos cicatrízales, de los grupos problema. AC. y el grupo control al día 11 del ensayo, se evidencia en el CUADRO 01, donde se. FA R. M. evidencias los principales parámetros que se utilizaron como marcadores de comparación. Los grupos problema, mostraron diferencia frente al grupo control 18.. DE. Asimismo, los resultados exponen que además de apoyar la actividad cicatrizante, el. TE. edema.. CA. extracto de Piper aduncum, favorece una actividad antiinflamatoria al reducir el. BL IO. Teniendo en cuenta que a respuesta inflamatoria es una fase del proceso de cicatrización que auspicia la presencia y producción de mediadores y células. BI. inflamatorias, el limitado autocontrol del proceso hace que la respuesta sea exagerada y persistente pudiendo conducir a situaciones patológicas crónicas. Un efecto antiinflamatorio podría beneficiar un proceso cicatrizante en una etapa avanzada de la fase de inflamación. El estudio de Giraldo, L. (2003), se evidencia que la actividad antiinflamatoria y cicatrizante de. Uncaria tomentosa, se presenta por terpenos,. esteroides, flavonoides y taninos. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Por otra parte, el proceso de cicatrización también se ve favorecido por el depósito de colágeno, que es el componente básico del tejido conectivo. Esto puede evidenciarse claramente en la FIGURA 03, donde se puede comparar la deposición de colágeno, teñido de color azul, por el reactivo Tricómico de Masson, entre las heridas del grupo. M IC A. control y los grupos problema I y II; observándose evidentemente favorecimiento de la formación de esta fibra en los grupos problema I y II, al día 11 post-incisión 22.. Q UI. Adicionalmente el extracto de Piper aduncum demostró que estimula la. BI O. neovascularización, hecho clave en la cicatrización por permitir el transporte de células y mediadores, además que es una evidencia de que el proceso se encuentra en. Y. fase de formación de tejido granular y que promueve la migración o mitosis de. AC. IA. células endoteliales. Este resultado se obtiene de comparar las fracciones por. M. histológica en la FIGURA 04, donde se evidencia que los tejidos tratados con el. FA R. extracto de Piper aduncum (Grupos Problema I y II), tienen mayor contenido de vasos sanguíneos, por campo, teñidos de color rojo (puntos o zonas) por el reactivo de. DE. Hematoxilina y Eosina 23.. CA. Por otra parte el extracto de Piper aduncum estimula fundamentalmente la. TE. reepitelización, situación que se ve relacionada con la migración de queratinocitos. BL IO. epidermales y la restauración de la membrana basal que conecta la epidermis con la dermis. En la FIGURA 05, se comparan los tejidos de heridas tratadas con el extracto. BI. de Piper aduncum, lo que se relaciona con la deposición de colágeno y la contracción de la herida. Al día 11 post-incisión las heridas aún no han completado su proceso de cicatrización pero realizando la comparación de las heridas tratadas con el extracto de Piper aduncum, y que posee diferencia significativa respecto al grupo control en los ensayos de actividad cicatrizante in vivo se puede pensar que los tratamientos poseen. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. potencial farmacológico que favorece este proceso de reparación tisular en el modelo de herida abierta generada por escisión en la oreja de Orytolagus cunniculus 24. Todos los resultados obtenidos, inducen a pensar que el efecto del extracto hidroalcohólico de Piper aduncum en el modelo de escisión en oreja de Oryctolagus. M IC A. cunniculus in vivo, de inflación y cicatrización, no se relacionan directamente con la actividad antimicrobiana, posiblemente porque su acción puede caer en la etapa de. Q UI. restauración de la fase inflamatoria aguda, pero se sugiere que se confirmen estas con. BI O. otros modelos farmacológicos. El efecto cicatrizante no solo se soporta en su efecto antiinflamatorio que posee el extracto, sino que además según la evidencia. Y. histiológica se relaciona con el favorecimiento de etapas posteriores a la respuesta. AC. IA. inflamatoria dentro del proceso de cicatrización como son la reepitelización, la. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. formación de tejido de granulación y la neovascularización (FIGURA 06) 25.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V. CONCLUSIONES. 1.. En el estudio de investigación intitulado: Efecto del extracto hidroalcoholico de las hojas de Piper aduncum, sobre lesiones de piel inducidas en Oryctolagus cuniculus, se concluye que el extracto de las hojas de Piper aduncum, posee un. M IC A. efecto cicatrizante sobre las lesiones de piel, al favorecer la reducción del tamaño de herida, el edema, y aumentar la deposición de colágeno, reepitelización y. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. neovascularización.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI. 1.. RECOMENDACIONES. Se requieren estudios más profundos para confirmar los hallazgos aquí reportados, e indagar posibles mecanismos de acción que contribuyen al efecto. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. cicatrizante de esta planta.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Huguet H. Recio, A. Manez, S. Giner, R. Effect of triterpenoids on the inflammation induced by protein Kinase C Activators neuronally acting irritans. M IC A. and other agents. European Journal of Pharmacology 2000. 410: 69 -81. 2. Wanda, A. Dorsette,M. Rat models of skin wound healing. A review. Wound. Q UI. Repair and Regeneration, 2004.12: 591 – 599.. BI O. 3. Otero, R. Nuñez, V. Barona, J. Fonnegra, R. Jiménes, S. Osorio, R. Saldarriaga, M. Diaz, A. Snakebites and ethnobotanicin the northwest region of Colombia Part. Y. III Neutralization the haemorhagic effect of Bothrops atrox. Journal of. AC. IA. Ethnopharmacology. 2000c. 73: 233 – 241.. M. 4. Mori I. Cuantificación por el método espectrofotométrico de flavonoides totales. FA R. en el extracto hidroalcoholico de hojas de Piper aduncum. Tesis I para obtener el. de Trujillo. 2009.. DE. grado de bachiller en la carrera de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional. CA. 5. Rojas M. Determinación de la actividad antioxidante in vitro del extracto. TE. hidroalcoholico de hojas de Piper aduncum, procedentes de la Provincia de San. BL IO. Marcos – Departamento de Cajamarca. Tesis I para obtener el grado de bachiller en la carrera de Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 2009.. BI. 6. Liu B. Lengua V. Huapaya Y. Evaluación de la actividad antibacteriana in vitro de los extractos de Caesalpinia spinosa “tara” y Eucalyptus sp. “eucalipto”. Lima. Universidad de San Martín de Porres. [Fecha de acceso: 23 de Marzo del 2014] Disponible en: http://www.medicina.usmp.edu.pe/horizonte/2002/Art7_Vol2_N12.pdf. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 7. Calixto M. Plantas medicinales utilizadas en odontología. Lima. 2006. Universidad de San Martín de Porres. [Fecha de acceso: 23 de Marzo del 2014] Disponible en: http://www.usmp.edu.pe/odonto/servicio/2006rv2/Kiru7.pdf 8. Flores E. Estudio Fitoquímico de 14 especies del género Piper con actividad. Marzo. del. 2014]. M IC A. antifúngica y/o leishmanicida in vitro. Bolivia. 2000. [Fecha de acceso: 23 de Disponible. Q UI. http://www.ops.org.bo/textocompleto/rnbiofa20000802.pdf. en:. 9. Rengifo R. Determinación de la actividad antibacteriana in vitro de los extractos. BI O. de hojas de Piper aduncum, sobre Staphylococcus aureus y Streptococcus. Y. pyogenes.Tesis para optar por el grado de maestro en Farmacia y Bioquímica.. IA. Mención Productos Naturales Terapéuticos. Sección de Farmacia y Bioquímica.. AC. Escuela Post-grado. Universidad Nacional de Trujillo. 2009.. M. 10. Rojas, M. Rumay, A. Determinación de la actividad antioxidante in vitro del. FA R. extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum procedentes de la Provincia de San Marcos – Departamento de Cajamarca. Facultad de Farmacia y. DE. Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 2009. 11. Diéguez J. Los Taninos y su Tratamiento. Boletín de Información Técnica Nº 188.. CA. AITIM. España. 1977. [Fecha de acceso: 24 de Marzo del 2014] Disponible en:. TE. http://www.infomadera.net/uploads/articulos/archivo_3024_10249.pdf?PHPSESS. BL IO. ID=0eec7304f43c3a495a54a573512322c4. BI. 12. López, Y. Determinación de los fitoconstituyentes de las hojas de Piper angustifolium L. “matico”, ensayo de la acción antihemorrágica de sus extractos en Orictolagus cuniculus. Tesis para optar el grado de Bachiller en Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 1989. 13. Miranda N. Validación de 2 métodos espectrofotométricos para la cuantificación de taninos y flavonoides (quercetina) en Psidium guajaba L. Revista Cubana. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Farmacéutica. Cuba. Instituto de Farmacia y Alimentos de Universidad de La Habana. 2000; 34 (1): 50 -5. [Fecha de acceso: 26 de Marzo del 2014] Disponible en: http://www.bvs.sld.cu/revistas/far/vol34_1_00/far07100.htm 14. Mariños, M. Efecto Cicatrizante del Latex del fruto de la Musa sapientum L.. M IC A. (plátano de seda) in vivo. Tesis para optar el grado de Bachiller en Farmacia y Bioquímica. Universidad Nacional de Trujillo. 1992.. Q UI. 15. Jiménez, M. Introducción al estudio de la Histiología y Morfología Celular. Escuela de Ciencias Biomédicas y Tecnológicas. Depatamento de Ciencias. BI O. Morfológicas y Forenses. Facultad de Ciencias de Salud. Universidad de. Y. Carabobo. Venzuela. 2009.. AC. de Mexico. Agosto 2010.. IA. 16. Montalvo, C. Técnica Histiológica. Facultad de Medicina. Universidad Autónoma. inducidas. en. FA R. M. 17. Dres, J. Efecto cicatrizante del Piper angustifolium R. & P. sobre lesiones de piel animales. de. Experimentación.. DE. Folia Dermatológica Peruana.Vol. 10/Nº. Marzo 1999.[Fecha de acceso: 22 de Agosto. de. 2014]. Disponible. en:. CA. http://sisbib.unmsm.edu.pe/bVrevistas/folia/vol10_n1/dermofarmacia.htm#. TE. 18. Salazar, L., Vega, L. Cuantificación espectrofotométrica de taninos en hojas de. BL IO. Piper aduncum, procedentes de la Provincia de Otuzco, Departamento La. BI. Libertad. Tesis I. 2014.. 19. Arroyo, J. Quinto, M. Ronceros, S. Oyanguren, P. Herrera, N. Flores, C. Reporte preliminar tratamiento de la úlcera péptica con el micronizado de hojas de Piper angustifolium. Primer Congreso de Plantas Medicinales y Fitoterapia. 2000. pp:175- 176.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 20. Aragón, P. Sánchez, G. Evaluación de la Actividad cicatrizante de Yahuar chonka (Oenothera multicaulis) Primer Congreso de Plantas Medicinales y Fitoterapia. 2000. pp: 158. 21. Giraldo, L. Actividad Antinitrosativa y Antiinflamatoria de los flavonoides de las. M IC A. hojas de Uncaria tomentosa Willd. D.C. Uña de Gato. Revista de la Sociedad Química del Perú. Vol. 69. N°04. 2004. pp: 229 -242.. 2007.. [Fecha. de. acceso:. 25. de. Marzo. del. Q UI. 22. Álvarez J. Tanino. La Revolución Enológica mito o realidad. Rev. Enol. 14(2). 2014]. Disponible. en:. BI O. http://www.acenologia.com/aeb/pdf/info_taninos_jmalvarez.pdf. Y. 23. Wayne, K. Stadelmann, A. Gordon, R. Gordon, T. Impediments to wound healing.. IA. The American Journal of Surgery. 1998. 176: 39s-47s.. FA R. M. Medicine. Review. 1999. 738-746.. AC. 24. Singer, A. Clark, R. Cutaneus wound healing. The New England Journal of. 25. Li, J. Chen, J. Kirsner, R. Pathophysiology of acute wound healing. Clinics in. BI. BL IO. TE. CA. DE. Dermatology. 2007. 25: 9 – 18.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N°01. BI. BL IO. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. Q UI. M IC A. Identrificación de la especie vegetal en el Herbarium Truxillense de Trujillo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N°02. 1. Prueba de ANOVA de un factor: ANOVA de un factor Herida Media. cuadrados. F. cuadrática. Inter-grupos. 22.533. 2. 11.267. Intra-grupos. 3.200. 12. .267. 25.733. 14. 42.250. .000. BI O. Total. Sig.. M IC A. gl. Q UI. Suma de. P < 0.05. Existe diferencia significativa (p < 0.05) referente a la. Y. cicatrización entre los grupos de investigación, es decir; por lo menos un grupo es. M. AC. IA. mejor en la cicatrización.. FA R. 2. Prueba T: Control - Problema 1:. DE. Estadígrafos. BI. BL IO. TE. CA. Número de datos Promedio Desviación Estándar Prueba T Nivel de significancia P Decisión. Problema 1 5 5 7.20 4.60 0.45 0.55 8.22 0.000 Existe diferencia. Control. El nivel de significancia p = 0.000 es menor al 5% de significancia estándar; la cual quiere decir que existe diferencia significancia en la cicatrización del grupo control y el problema 1, donde el grupo control presenta menos cicatrización que el grupo problema 1.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 3. Prueba T: Control - Problema 2:. Estadígrafos. Problema 2 5 5 7.20 4.60 0.45 0.55 8.22 0.000 Existe diferencia. Control. Q UI. M IC A. Número de datos Promedio Desviación Estándar Prueba T Nivel de significancia P Decisión. BI O. El nivel de significancia p = 0.000 es menor al 5% de significancia estándar; la cual quiere decir que existe diferencia significativa en la cicatrización, del grupo. Y. control y el problema 2, donde el grupo control presenta menos cicatrización que. AC. IA. el grupo problema 2.. FA R. M. 4. Prueba T: Problema 1 - Problema 2:. DE. Estadígrafos. BL IO. TE. CA. Número de datos Promedio Desviación Estándar Prueba T Nivel de significancia P Decisión. Problema Problema 1 2 5 5 4.60 4.60 0.55 0.55 0.00 1.000 No existe diferencia. BI. El nivel de significancia p = 1.000 es mayor al 5% de significancia estándar; la cual quiere decir que no existe diferencia significancia en la cicatrización del problema 1 y el problema 2.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N°03. 2.- Molienda y pesado de la muestra. 3.- Agitación de la muestra. FA R. M. AC. IA. Y. BI O. 1.- Recolección y Secado de la Muestra. Q UI. M IC A. 1. Proceso de elaboración del extracto:. 4.- Evaporación del solvente. BI. BL IO. TE. CA. DE. 4.- Filtrado de la muestra. 5.- Obtención del extracto. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. BI O. Q UI. M IC A. 2. Proceso del estudio Farmacodinámico:. 2.- Aplicación del extracto hidroalcohólico de Piper aduncum. TE. CA. DE. FA R. M. AC. IA. Y. 1.- Incisión de herida en la oreja de Oryctolagus cuniculus. 4.- Realización de las biopsias.. BI. BL IO. 3.- Evaluación de las heridas Días: 5, 7 y 10.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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