Concentración Mínima Inhibitoria Del Efecto Antibacteriano Del Extracto Etanólico Del Propóleo Sobre Enterococcus Faecalis

Texto completo

(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. IN. FO R. MA TI. CA. ESCUELA DE ESTOMATOLOGÍA. E. “CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA DEL EFECTO. MA S. ANTIBACTERIANO DEL EXTRACTO ETANÓLICO DEL PROPÓLEO SOBRE Enterococcus faecalis.”. TE. TESIS. SI S. PARA OPTAR EL GRADO DE. OF. IC. IN. A. DE. BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA AUTOR. REYES ALFARO DIEGO MICHEL ASESOR DR. CÉSAR JIMÉNEZ PRADO CO-ASESOR DRA. ELVA MEJIA DELGADO. TRUJILLO – PERÚ. 2011. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. DEDICATORIA. MA TI. A DIOS:. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. Por haberme permitido llegar hasta este punto y haberme dado salud para lograr mis objetivos, además de su infinita bondad y amor.. A MIS QUERIDOS PADRES: FRANCISCO Y NORA. Quienes siempre han sabido conducirme por el buen camino de la vida y porque a pesar de las adversidades y sacrificios que ustedes han hecho por mí, hoy pueden sentirse orgullosos y ver que sus esfuerzos no fueron en vano. A ustedes les debo ser ahora un profesional, no lo hubiera logrado sin compresión, amor cariño y sobre todo su apoyo incondicional que me brindaron durante toda mi carrera profesional. Les dedico el resente trabajo de investigación y todos los éxitos que logre alcanzar en mi vida y si Dios me lo permite, ténganlo por seguro tratare de no defraudarles. A ustedes entrego hoy el fruto de su labor: SER ODONTOLOGO. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA TI. IN. FO R. Quien con su entrega y dedicación y ayuda hacia otras personas me enseño y se convirtió en un modelo a a seguir adelante en mi carrera profesional. ¡Gracias Abuelito Querido. CA. A LA MEMORIA DE MI ABUELO QUERIDO: ROSTANIO ALFARO. Quienes con sus ocurrencias, bromas, consejos y ejemplo me ayudaron a conseguir mis metas y así llegar a ser un profesional.. DE. SI S. TE. MA S. E. A MIS QUERIDOS HERMANOS: LUIS, ERIKA, CECILIA Y LALY. A. A MIS AMIGOS. OF. IC. IN. A quienes les agradezco mucho el tiempo que me dedicaron cuando os necesitaba, gracias por estar en el moento justo y por sus consejos para poder alcanzar todas mis metas trazadas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. AGRADECIEMENTO. MA TI. EXPRESO MI AFECTO Y GRATITUD A MI ASESOR:. OF. IC. IN. A. DE. SI S. IN E. TE. MA S. Gracias por brindarme su tiempo, no solo como asesor sino como amigo, por compartir sus conocimientos y experiencias; por escuchar y corregir mis errores. Por inculcar en mí el espíritu de superación.. FO R. Dr. CÉSAR JIMÉNEZ PRADO. MI SINCERO AGRADECIMIENTO: AL PERSONAL DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA Y EN ESPECIAL A MI COASESORA: DR. ELVA MEJIA DELGADO Por su amistad, colaboración, orientación, tiempo y apoyo desinteresado durante la realización del presente estudio de investigación.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESUMEN El presente estudio del tipo experimental, in vitro, se realizó en el. CA. laboratorio de microbiología de la facultad de medicina de la universidad. mínima. inhibitoria. del. extracto. MA TI. nacional de Trujillo, teniendo como objetivo: Conocer la concentración etanólico. del. propóleo. sobre. FO R. Enterococcus faecalis, utilizando siete concentraciones del extracto etanólico de propóleo de 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% y 90%, el. IN. tamaño de la muestra estuvo conformada por 70 observaciones para la. E. concentración mínima inhibitoria y 70 observaciones más para la. MA S. prueba de susceptibilidad. El estudio estuvo divido en dos etapas: primero en la obtención del extracto etanólico de propóleo durante 2 y,. el. procesamiento. microbiológico,. donde. cada. TE. semanas;. SI S. concentración fue puesta en contacto con el microorganismo de estudio, determinándose así el efecto en el crecimiento del E. faecalis.. DE. Los resultados mostraron la formación de halos de inhibición de: siendo el más efectivo el extracto de propóleo al 90% (de 8 a 10mm). En las. IN. A. UFC se observó que cuanto mayor es la concentración del extracto. IC. mayor es el efecto antibacteriano. Concluyendo que la concentración. OF. mínima inhibitoria del extracto etanólico de propóleo es del 50%. Palabras claves: extracto etanólico de propóleo, enteroccoccus faecalis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ABSTRACT This experimental study, in vitro, that was performed in the Microbiology. CA. laboratory of the Faculty of Medicine of The National University of. MA TI. Trujillo, aiming at:. To know the minimum inhibitory concentration of propolis ethanolic. FO R. extract on Enterococcus faecalis, using seven concentrations of propolis ethanolic extract: 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% and 90%;. IN. the sample size consisted of 70 observations for the minimum inhibitory. E. concentration and 70 observations for susceptibility testing.. MA S. The study was divided in two stages: first to obtain the propolis ethanolic extract for 2 weeks, and the microbiological process, where. TE. each concentration was put in contact with the organism of study to. SI S. determinate the effect on this growth.. DE. The results showed the formation of inhibition halos: the most effective being the propolis extract 90% (8 to 10 mm). In the UFC was noted. IN. A. higher the concentration of the extract the antibacterial effect increase.. IC. Concluding that the minimum inhibitory concentration of the propolis. OF. ethanolic extract is 50%.. Keywords: Propolis ethanolic extract, Enterococcus faecalis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. ÍNDICE. MA TI. DEDICATORIA AGRADECIMIENTOS. FO R. RESUMEN. E. IN. ABSTRACT. I.. MA S. Pág.. INTRODUCCION…………………………………………………....... TE. II. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………….……...... SI S. III. RESULTADOS ………………………………………….…………. IV. DISCUSIÓN ……………………………….…………………............ DE. V. CONCLUSIONES …………………………………………...…....... A. VI. RECOMENDACIONES………………………………….……......... IC. IN. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………....…………. OF. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCION. La patología pulpar en general es una reacción a las bacterias y. CA. productos bacterianos. Esto puede ser una respuesta directa a la. MA TI. caries, la microfiltración de bacterias en torno a obturaciones y coronas, o a la contaminación bacteriana después de traumatismos, sea físico o. FO R. iatrogénico1.. La reacción pulpar a la caries es progresiva. Al aumentar la profundidad. IN. de esta, se incrementa el grado de lesión. Sin embargo, la pulpa puede. MA S. E. soportar una lesión cariosa muy profunda, pero no penetrante1. Inicialmente, se puede tratar de una pulpitis reversible cuya inflamación. TE. se circunscribe a la base de los túbulos afectados. La penetración franca de bacterias en la pulpa suele ser el punto crucial para la pulpitis. SI S. irreversible, caracterizada porque la pulpa se ha dañada más allá de. DE. cualquier reparación posible, y aun cuando se elimine el factor irritante. A. no cicatrizará1.. IN. Conforme avanza la inflamación, el tejido sigue desintegrándose en el. IC. centro, para formar una región progresiva de necrosis por licuefacción.. OF. La falta de circulación colateral y la rigidez de las paredes de la dentina, hay un drenaje insuficiente de líquidos inflamatorios, esto ocasiona una alta presión en los tejidos, que da lugar a una destrucción progresiva e inadvertida, hasta que la pulpa se necrosa2.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. La necrosis pulpar, es una secuela de la inflamación aguda o crónica de la pulpa o de un cese inmediato de la circulación debido a una lesión. CA. traumática3.. MA TI. La exposición pulpar de los túbulos dentinarios por fracturas o por cortes hechos en preparación de cavidades con exposición de muñones. FO R. dentales da lugar a la contaminación inmediata por saliva, lo cual hace posible la penetración y el establecimiento de todos los miembros de la. IN. microbiota bucal, excepto los aerobios estrictos4.. E. Los microorganismos llegan a la cámara pulpar por diferentes vías: por. MA S. fractura del tejido dentario, como resultado de la evolución natural de la caries dental y por procedimientos odontológicos. Otras fuentes de. TE. infección son los túbulos dentinarios expuestos en la superficie de la. DE. periodontal5.. SI S. raíz debido a fisuras en el cemento, caries radicular y/o enfermedad. Los microorganismos tienden a ubicarse en zonas específicas del. A. conducto radicular, que garanticen su supervivencia, así como también. IN. el poder expresar los factores de patogenicidad que les permitan. OF. IC. agregarse, penetrar y colonizar los tejidos afectados6. Fueron aisladas de los conductos radiculares más de dos centenas de especies bacterianas y la variedad de microorganismos presentes en el sistema de conductos radiculares, dependerá de la disponibilidad de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. nutrientes, del tenor de oxígeno y de las interacciones entre ellos, así tenemos7: (anexo 1). Género. Enterococcus. semejantes. a. un. los. conjunto. de. especies. estreptococos.. Las. más. MA TI. morfológicamente. engloba. CA. El. frecuentemente aisladas en clínica son Enterococcus faecalis (80-90%). FO R. y Enterococcus faecium (5-10%). Causan infecciones muy diversas y poseen un creciente interés en el caso de los procesos oportunistas. Se. IN. asocian en parejas y cadenas cortas y si bien, su hábitat natural es el. E. intestino, se han podido aislar a veces como microbiota normal en la. aislamientos. de. infecciones. pulpo-periapicales. y. de. bolsas. TE. periodontales8.. MA S. mucosa bucal y dorso de la lengua. También se han descrito. SI S. Diversos estudios han revelado que la microbiota de los dientes con fallas en el tratamiento endodóntico difiere de la microbiota encontrada. DE. normalmente en los conductos de dientes no tratados. La microbiota. A. que se encuentra en los dientes con fracaso en el tratamiento. IN. endodóntico es predominantemente anaerobia facultativa y Gram. IC. positiva, siendo E. faecalis la especie que se aísla con mayor. OF. frecuencia9. E. faecalis es un coco Gram positivo, anaerobio facultativo, inmóvil y no esporulado. El tamaño de cada célula oscila entre 0,5 y 0,8 micrómetros. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. y es habitante normal del tracto gastrointestinal humano. Esta bacteria ha atraído recientemente la atención de diversos investigadores porque. CA. ha sido identificada como una causa frecuente de infecciones. MA TI. periapicales persistentes10. Una característica notable de E. faecalis la constituye su capacidad. FO R. para sobrevivir y crecer en microambientes que pudieran ser tóxicos para muchas bacterias, en particular zonas con altas concentraciones. IN. de sales (6,5% de Cloruro de Sodio), temperaturas extremas (15-60ºC). E. y puede resistir además a la acción de colorantes como Azul de. MA S. Metileno al 0,1%. Esta capacidad de resistencia por parte de E. faecalis en microambientes tóxicos está relacionada con su capacidad de. TE. supervivencia en los conductos radiculares de dientes que han sido. SI S. sometidos a tratamiento endodóntico y en los cuales los nutrientes son limitados, añadiéndose a esta situación el hecho de que algunos antimicrobianos. pudieran. influir. en. que. esta. especie. DE. agentes. permanezca en los conductos de los dientes afectados. Debido a su. IN. A. excelente acción bactericida, el Hidróxido de Calcio es el agente. IC. antimicrobiano que se emplea de elección como medicamento. OF. intrarradicular11. E. faecalis es la especie más representativa y significativa del genero enterococcus, constituye un patógeno oportunista implicado en la persistencia de la infección, influyendo en el pronóstico del tratamiento. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de conductos. Se aísla frecuentemente en infecciones endodonticas refractarias, gracias a una amplia variedad de factores de virulencia. CA. entre los que se incluyen: enzimas líticas, citolisisina, sustancia de. MA TI. agregación, feromonas y ácidos lipoteicoicos. Puede adherirse a las células del hospedador y expresar proteínas que compiten con otras. FO R. células alterando la repuesta del mismo. 12. E. faecalis es capaz de suprimir la acción de los linfocitos lo cual. IN. contribuye potencialmente al fracaso del tratamiento de conductos13.. E. Sin embrago, la resistencia de esta bacteria no depende tanto de sus. MA S. factores de virulencia como de su capacidad para sobrevivir y persistir como patógeno en el interior de los conductos radiculares, lo que. TE. consigue por distintos motivos: 14. Presenta una amplia variedad de polimorfismos genéticos.. o. Produce gelatinasa y proteínas de unión al colágeno (ACE) que. DE. SI S. o. le ayuda a unirse a la dentina. Su tamaño es lo suficientemente pequeño como para invadir así. A. o. IC. IN. como vivir en los túbulos dentinarios.. OF. o. Puede subsistir largas temporadas de escases de nutrientes y utilizar el suero como fuente de alimento. Además el suero procedente del hueso alveolar y ligamento periodontal le sirve de ayuda para unirse al colágeno tipo I.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Resiste a la medicación intraconducto con hidróxido de calcio. o. durante más de 10 días en el interior de los túbulos.. más. resistentes. a. la. fagocitosis,. anticuerpos. y. MA TI. veces. CA. Por último, crece formando biopelículas siendo hasta 1000. o. FO R. antimicrobianos que cuando crece en forma planctónica.. Algunas investigaciones han reportado la presencia de biopelículas. IN. (biofilms) de E. faecalis en el sistema de conductos de dientes. E. monorradiculares extraídos y que habían sido obturados con cemento a. MA S. base de Hidróxido de Calcio. La formación de la biopelícula constituye una evidencia contundente de que E. faecalis puede colonizar los. TE. conductos radiculares medicados15.. SI S. Cuando esta especie crece en las biopelículas, puede ser hasta mil veces más resistente a la acción de los antimicrobianos que cuando se. DE. halla como bacteria planctónica (suspendida en un medio líquido y no. A. adherida a ninguna superficie).16. IN. Considerada una de las áreas del organismo de altísima actividad. OF. IC. metabólica, la región apical y periapical atribuye a la endodoncia actual un papel fundamental. Los productos tóxicos de descomposición pulpar, constituidos por elementos tales como la putrecina y la cadaverina, además del amoniaco, el gas sulfhídrico, sustancias grasas y otros,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ejercen una acción irritantes sobre los tejidos periapicales. En el caso de las gangrenas, además de los productos mencionados existen. CA. también los microorganismos, sus toxinas y enzimas17.. MA TI. Estas sustancias tóxicas, los microorganismos y sus toxinas, ejercerán una acción agresiva sobre los tejidos periapicales, originando variadas. FO R. formas de reacción, algunas aparecerán en un corto espacio de tiempo con signos y síntomas bien característicos y otras se desarrollaran en lenta. y. progresiva,. y. estarán. en. general,. totalmente. IN. forma. E. asintomáticos17.. MA S. El éxito de un tratamiento endodóntico tiene como base la triada de limpieza y desinfección, la instrumentación del conducto y la obturación Factores. tales. TE. tridimensional.. como. la. persistencia. bacteriana,. SI S. radiolucidez preoperatoria, sub o sobre extensión en la obturación del conducto, y piezas dentarias sin la debida restauración post. DE. endodóntica, son las causas principales del fracaso en el tratamiento de. A. conductos18.. IN. La medicación intraconducto se caracteriza por la localización de un. OF. IC. fármaco en el interior de la cavidad pulpar entre las sesiones necesarias para la conclusión del tratamiento endodóntico7. La elección de una medicación intraconducto entre sesiones requiere de las mismas consideraciones que la aplicación de cualquier fármaco. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. en otra región del organismo humano. Por lo tanto es necesario considerar:7 Cantidad: se debe precisar la cantidad y la concentración del. CA. a). MA TI. fármaco, para ejercer el efecto deseado sin lesionar los tejidos circundantes. En conductos estrechos las condiciones son diferentes a. FO R. las encontradas en conductos amplios. b). Localización: es indispensable tener en cuenta el mecanismo. IN. de acción de la sustancia para determinar la forma apropiada para su. E. colocación, por ejemplo en los casos de mortificación pulpar con. MA S. rarefacción periapical, al utilizar hidróxido de calcio, que actúa por contacto, debe llenarse todo el conducto radicular. Tiempo de aplicación: es preciso conocer el tiempo que la. TE. c). SI S. sustancia permanece activa. Cada una tiene un tiempo de vida útil, después del cual su efecto de reduce o desaparece. Algunos. DE. medicamentos pierden sus propiedades en presencia de material orgánico como sangre, exudado y pus.. IN. A. Los fundamentos en que se basa la medicación intraconducto son la. IC. destrucción de los microorganismos residuales, sus toxinas y la. OF. remoción de tejido orgánico; este objetivo se alcanza en gran parte durante la preparación del conducto, pero la complejidad de los sistemas de conductos radiculares es tal que no se eliminan todos los microorganismos19.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Simultáneamente al desarrollo tecnológico de la industria farmacéutica, ha desplegado un gran interés de parte de los investigadores por. CA. estudiar sustancias naturales que posean algunas propiedades. MA TI. farmacológicas con efecto microbiano20.. El propolis o propóleos es un compuesto resinoso y pegajoso,. FO R. elaborado por la abeja Apis mellifera, a partir de exudados vegetales y mezclado con sustancias salivales. La palabra propolis deriva del griego. E. ciudad (o la colmena)”. 21. IN. pro, para o en defensa, y polis, la ciudad, es decir, “defensa de la. MA S. En la colmena, las abejas utilizan al propóleos con diversos fines tales como: cerrar grietas, reducir al mínimo las vías de acceso, recubrir y. TE. aislar restos de animales que se hayan introducido en la colmena. SI S. evitando su descomposición, consolidar componentes estructurales, barnizar el interior de las celdillas con fines desinfectantes y evitar. DE. vibraciones. 22. A. En general, revisiones sobre la composición química del propóleo, dan. IN. cuenta de los siguientes grupos químicos: aldehídos, ácidos y ésteres. OF. IC. alifáticos, aminoácidos, ácidos y ésteres aromáticos, chalconas y dihidrochalconas, flavanonas, flavonas, flavonoides, ácidos grasos, cetonas, terpenoides, esteroides y azúcares 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. El grupo más importante de compuestos encontrado en propóleos son los denominados fenoles, los cuales, constituyen más del 50% del peso Las. propiedades. médicas. del. propolis. son. atribuidas. CA. total.. MA TI. principalmente a la presencia de estas sustancias. Más aún, la literatura apunta que algunas de las actividades pueden ser fuertemente relacionadas a los flavonoides, el principal compuesto fenólico del. FO R. propolis. 24. IN. Los flavonoides son pigmentos vegetales, sintetizados a partir del. E. aminoácido fenilalanina, que generalmente exhiben brillantes colores,. MA S. como el de los pétalos de las flores. La mayoría de las veces emiten fluorescencia cuando son excitados por la luz UV, y se localizan en las. TE. células de las plantas verdes. Los flavonoides son usados por los. SI S. botánicos para clasificación taxonómica. Ellos regulan el crecimiento de las plantas e influencian otras células biológicas de diversas maneras.. DE. Los flavonoides inhiben o destruyen muchas especies bacterianas, inhiben importantes enzimas virales, tales como la transcriptasa reversa. IN. A. y otras proteasas, además, destruyen algunos importantes protozoos.. IC. Poseen actividad antialérgica, antiinflamatoria, antioxidante, atrapadora. OF. de radicales libres, antimutagénica y moduladora de actividad enzimática. Además, se puede decir que aportan grandes beneficios para la salud al actuar como agentes quimiopreventivos en cáncer y prevención de ataques al corazón. Su toxicidad a células animales es. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. baja. Muchos profesionales están incrementando el uso de flavonoides puros para tratar muchas importantes enfermedades, debido a su. CA. comprobada habilidad de inhibir enzimas específicas, simular algunas. MA TI. hormonas y neurotransmisores, y eliminar radicales libres. 25. En un trabajo realizado por Al-Shaner et, para investigar agentes. FO R. antimicrobianos alternativos para conductos endodónticos, comparó la tolerancia de propolis e hidróxido de calcio in vitro sobre fibroblastos del. IN. ligamento periodontal y de la pulpa dental, logrando toxicidades diez. E. veces menores para propóleos, con un 75% más de viabilidad celular,. MA S. en comparación con hidróxido de calcio. 26 En Cuba, se utilizó una pasta dental a base de propóleos, con la cual se. TE. realizaron ensayos en un grupo de niños, analizándose la variación en. SI S. el índice de COPD, lográndose una disminución significativa en el. DE. índice de caries. 23. Ikeno et, demostró que al incluir un extracto etanólico de propóleo,. A. proveniente de China, en agua, a una concentración de 1mg/ml, la. IC. IN. incidencia de caries disminuyó de 62,2% a 56,2%.27. OF. En un estudio clínico que se realizó para investigar el efecto del propolis en la reducción de placa bacteriana, el cual se realizó durante 3 días, el índice de placa se redujo en un 44,7% aproximadamente después del tratamiento, comparado con el placebo. Además, el colutorio redujo la. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. concentración de polisacáridos insolubles en la placa en un 61,7% comparado con el placebo. 26. CA. Se ha determinado además, que el propóleo es capaz de inhibir in vitro. MA TI. la enzima glucosiltransferasa. Esta enzima es producida por el Streptococcus mutans y constituye un factor de virulencia asociado con. solubles. e. insolubles. a. partir. FO R. caries dental. Glucosiltransferasa cataliza la formación de glucanos de. sacarosa,. y. contribuye. IN. significativamente a la formación de la matriz de polisacáridos de la. E. placa dental. 27. MA S. Shub et. (1978) preparó extractos de muestras de propolis recolectados en 18 regiones de la URSS. Estos extractos estaban diluidos en agar,. TE. en placas petri. Los placas fueron entonces inoculados con la bacteria. SI S. Bacillus, Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomonas aeraginosa, y la Candida albicans, e incubados en 37 oC ó 20-25 oC por. DE. 48h. Propolis en 125-500 ug/ml inhibió el crecimiento de S. auneus y B.. A. Cereus, pero a las otras 2 bacterias las inhibió a concentraciones. IN. superiores de 1000 ug/ml. 28. OF. IC. Kedzia, A (1986) determinó las concentraciones inhibitorias mínimas (MIC) del extracto etanólico de propóleo (EEP) para 112 cepas de bacterias anaerobias. EEP demostró la efectividad máxima en contra de las cepas de Bacteroides y peptostreptococcus; De 37 cepas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. examinadas, 18 estaban inhibidos en 0.01-0.50 mg/ml. EEP fue ligeramente menos efectivo en contra de las cepas Gram positivas de. CA. Propionibacterium, Arachinia y Eubacterium (MIC 0.50-1.00 mg/ml). 29. MA TI. Velikova et al (2001), mediante difusión en agar, evaluaron la actividad antimicrobiana y la composición química de propóleos proveniente de. FO R. Turquía frente a Staphylococcus aureus y Eschericchia coli, obteniendo resultados positivos para S. aureus; para E. coli obtuvieron una menor. IN. inhibición de crecimiento. 30. E. Santos et al, 2002, Evaluaron in vitro la susceptibilidad de Prevotella. MA S. Intermedia y Porphyromonas gingivalis frente a seis antimicrobianos prescritos en odontología en el Brasil, y el propóleo (pegamento de la. TE. abeja). Los agentes antimicrobianos probados eran tetraciclina,. SI S. penicilina, clindamicina, eritromicina, metronidazol, meropenem y seis extractos etanólicos de los propolis (EEPs) del Brasil. Todas las cepas. DE. eran susceptibles a la penicilina, eritromicina, meropenem, metronidazol. A. y al 95% de ellos (n=19) a la tetraciclina. Treinta y seis por ciento (n=7). IN. de los del P. intermedia probados eran resistentes a la clindamicina. En. IC. cuanto a actividad del propolis, todas las especies eran susceptibles y. OF. los valores inhibitorios mínimos de la concentración se extendieron a partir del 64 a 256 ug/ml. Cuando la concentración del propóleo era de 256 ug/ml, la muerte fue observada dentro de 3 h de incubación para. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. los Porphyromonas gingivalis y dentro de 6 h para el Prevotella intermedia.31. CA. Pinheiro et al (2003), estudió la microflora bacteriana asociada a. MA TI. fracasos en endodoncia en 30 conductos radiculares. Se aislaron un total de 55 especies bacterianas, pertenecientes a 29 géneros de. las. cuales,. el. 58%. estuvo. FO R. diferentes,. representada. por. microorganismos anaerobios facultativos y el 42% por anaerobios predominando. las. especies. Gram. positivas. (80%).. IN. estrictos,. E. Enterococcus faecalis fue la especie aislada con más frecuencia,. MA S. seguido por Peptostreptococcus y Actinomyces. 32 Fajuri et al (2004), estudió el efecto del propolis sobre diferentes. mutans,. orales,. entre. Porphyromonas. los. gingivalis,. cuales. incluyó. Streptococcus. SI S. Streptococcus. patógenos. TE. microorganismo. pyogenes, Staphylococcus aureus y Cándida albicans. Sus resultados. DE. mostraron inhibición de crecimiento de todos ellos, excepto de. A. Porphyromonas gingivalis, fueron susceptibles al propóleos. 33. IN. Chavez de Paz et al (2006), realizó un estudio donde analizó los niveles. OF. IC. de resistencia de un grupo de siete especies, aisladas en canales radiculares infectados a un medio altamente alcalino, donde los resultados demostraron que el total de sietes especies, incluyendo: enterococcus faecalis, Streptococcus anginosus, streptococcus oralis,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. streptococcus. gordonii,. lactobacillus. paracasei,. olsenella. uli. y. fusobacterium nucleatum, en todas se observó un incremento en su. CA. resistencia al estrés alcalino cuando crecían adheridos a una. MA TI. superficie.34. Machado M. (2007), realizó un estudio in vitro de la actividad. FO R. antibacteriana del Paramonoclorofenol Alcanforado, de la Clorhexidina al 2% y del Extracto de Própolis al 50% sobre el Enterococcus faecalis,. IN. Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus; en la que concluyo. E. que el Paramonoclorofenol Alcanforado y la Solución de Clorhexidina al. MA S. 2% poseen acción antibacteriana y que el extracto de Própolis al 50% posee actividad antibacteriana sobre S. aureus, pero no posee sobre E.. TE. faecalis y P. aeruginosa. 35. SI S. Koru O, Toksoy F y col (2007) realizaron un estudio: la actividad antimicrobiana de cinco muestras de los propolis, recogida a partir de. DE. cuatro diversas regiones en Turquía y Brasil, contra nueve cepas. A. anaerobias fueron evaluadas. Los extractos del etanol de los propolis. IN. (EEP) fueron preparados muestras y de los propolis determinaron. IC. concentraciones inhibitorias mínimas (MIC) y las concentraciones. OF. bactericidas mínimas (MBC) de EEP en el crecimiento de los microorganismos de la prueba usando método de la dilución del agar. Todas las cepas eran susceptibles y MIC los valores se extendieron a partir del 4 a 512mug/ml para la actividad de los propolis. Propolis de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Kazan-Ankara demostró la mayoría de los valores eficaces MIC a los microorganismos estudiados. Los valores de MBC de las muestras de. CA. Kazan-Ankara EEP fueron extendidos a partir del 8 a 512mug/ml. La. MA TI. muerte fue observada dentro de 4h de la incubación para el anaerobius de Peptostreptococcus y los micros y lactobacillus acidophilus y naeslundii de los actinomicetos, mientras que 8h para los oralis de. FO R. Prevotella y el melaninogenica de Prevotella y los gingivalis de Porphyromonas, 12h para el nucleatum de 9 Fusobacterium, 16h para. IN. el parvula de Veillonella. Fue demostrado que las muestras de los. E. propolis eran más eficaces contra las bacterias anaerobias Gram. MA S. positivas que Gram negativas. 36. TE. Actualmente existen nuevos estudios sobre el extracto de propóleo que. SI S. están siendo utilizados en muchos países como medicamento de uso odontológico. Estas soluciones, según los investigadores, poseen. DE. propiedades antiinflamatorias, antimicrobianas, regenerativas y sobre todo que no son tóxicas para el organismo. Teniendo en cuenta la. IN. A. amplia y variada cantidad de propiedades curativas que presenta el. IC. propóleo en diversas enfermedades, nace el interés en determinar el. OF. efecto antibacteriano del propóleo, frente al principal microorganismo. causante de infecciones periapicales persistentes post-endodoncia.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Por lo tanto, el propósito del presente estudio es conocer la concentración mínima inhibitoria del extracto etanólico del propóleo. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. sobre el crecimiento de Enterococcus faecalis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ¿Cuál es la concentración mínima inhibitoria del extracto etanólico del. MA TI. CA. propóleo sobre Enterococcus faecalis?. FO R. 1.2 HIPÓTESIS. A mayor concentración de la solución del extracto etanólico del. IN. propóleo mayor actividad antibacteriana sobre el Enterococcus. TE. 1.3 OBJETIVOS. MA S. E. faecalis. Determinar la concentración mínima inhibitoria del extracto. DE. . SI S. 1.3.1 Objetivo General. IN. A. etanólico del propóleo sobre el Enterococcus faecalis.. OF. IC. 1.3.2 Objetivos Específicos  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de propóleo al 30% sobre el Enterococcus faecalis.  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de propóleo a 40% sobre el Enterococcus faecalis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT.  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de propóleo a 50% sobre el Enterococcus faecalis.. CA.  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de. MA TI. propóleo 60% sobre el Enterococcus faecalis..  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de propóleo a 70% sobre el Enterococcus faecalis.. FO R.  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de. IN. propóleo a 80% sobre el Enterococcus faecalis.  Determinar la actividad antibacteriana del extracto de. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. propóleo a 90% sobre el Enterococcus faecalis.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II. MATERIAL Y MÉTODOS. 2.1. TIPO Y ÁREA DE ESTUDIO. CA. El presente trabajo de investigación corresponde al tipo experimental “in. MA TI. vitro”. El cual se desarrollará en el Laboratorio del Departamento de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de. FO R. Trujillo.. IN. 2.2. MUESTRA. Para determinar el tamaño de la muestra por ser experimental se hará. MA S. E. uso de la siguiente fórmula:. (Zα/2 + Zβ)2 2S2. TE. n=. ( X1- X2)2. SI S. Dónde:. DE. Zα/2 = 1.96 para un α = 0.05. A. Zβ = 0.84 para un β = 0.20. IN. S = 0.8 (X1- X2) / donde 0.8 es valor asumido por no haber estudios. OF. IC. previos.. (1.96 + 0.84)2 2 (0.64) ( X1- X2)2 n= ( X1- X2)2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 10.02. n=. 10. CA. n=. .Con estos datos se determinaro muestras de 10 observaciones para. FO R. MA TI. cada concentración. 2.3. DISEÑO DE CONTRASTACIÓN. IN. La presente investigación se puede ajustar a un diseño completamente. MA S. E. aleatorizado.. TE. El esquema puede representarse de la siguiente manera:. Dónde:. DE. SI S. Yij = μ + ʈi + εij. IN. A. i = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7. OF. IC. j = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10.. Cada grupo realizará la prueba en diferentes momentos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.4 TÉCNICA y PROCEDIMIENTO 2.4.1 PROCEDIMIENTO:. CA. 2.4.1.1 PREPARACION DE LAS SOLUCIONES. MA TI. El extracto fue elaborado en el laboratorio multidisciplinario de la Universidad Nacional De Trujillo en la Facultad de Farmacia. Es un. FO R. producto ya estandarizado y elaborado bajo las normas adecuadas.. OBTENCION DEL EXTRACTO DE PROPOLEO: 38. IN. 1. Cosecha del propóleo en apiarios de Lambayeque (las colmenas. E. son de las abejas del género y especie Apis Mellifera). MA S. 2. Se almacenó el propóleo en frascos de vidrio transparentes. 3. Se colocó de manera conjunta en bolsas oscuras alejado de la luz,. TE. los principios activos del propóleo se oxidan en presencia de la luz). SI S. 4. Se transportó hacia el laboratorio 5. En el laboratorio se eliminó las impurezas burdas (alas, patas y. DE. cuerpos de abejas, porciones de cera, etc). A. 6. Se congeló la masa de propóleo a temperatura de -20 A -40 ºC por. IN. 48 horas.. IC. 7. Se procedió a pulverizar la masa de propóleo (uso de mortero o. OF. sistema mecánico) 8. Extracción del propóleo con solución hidroalcoholica al 96%. 9. Se procederá a la filtración del extracto 10. Evaporación de alcohol en horno a temperatura de 40°C.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 11. Se obtuvo los principios activos del propóleo. 12. Envase en frascos color ámbar. Se obtuvo un extracto de propóleo al:. MA TI. CA. 13. Conservación en lugar seco y fresco alejado de la luz. FO R. · Solución de extracto de propóleo a 30% · Solución de extracto de propóleo a 40%. IN. · Solución de extracto de propóleo a 50%. E. · Solución de extracto de propóleo a 60%. MA S. · Solución de extracto de propóleo a 70% · Solución de extracto de propóleo a 80%. SI S. TE. · Solución de extracto de propóleo a 90%. DE. 2.4.1.2 OBTENCION DE LA CEPA. A. Las cepa de Enterococcus faecalis ATCC29212 fue obtenida del. IN. cepario del Laboratorio de la Sección de Microbiología de la Facultad de. OF. IC. Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. . PREPARACIÓN DE LA CEPA:. Una vez obtenida las cepas, éstas fueron cultivadas en tubos de ensayo. CA. con tapa rosca conteniendo el medio Soya tripticasa, incubándose a 37. MA TI. °C y colocado en jarra Gas-Pak colocando una vela encendida y cerrando herméticamente la jarra a fin de darle una concentración de. FO R. CO2 del 5 al 10 %; así se obtuvieron colonias jóvenes. Luego de 24 horas de cultivadas se les agregó solución salina estéril, obteniéndose. IN. una turbidez semejante al tubo número 1 de la escala de Mac Farland.. E. Los tubos que contienen la bacteria estudiada, fueron girados entre las. MA S. manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado, para. SEMBRADO:. SI S. . TE. distribuir los microorganismos adecuadamente.. Con un hisopo estéril, el cual fue embebido en el tubo de la cepa de. DE. cada bacteria y a una distancia de 10 cm de la llama del mechero, se hizo el sembrado en placas Petri, conteniendo Agar soya tripticasa. IN. A. sangre de conejo, hisopando uniformemente sobre toda la superficie del. IC. agar y girando cada placa 30 grados por 10 veces aproximadamente.. OF. Las placas recién sembradas fueron colocadas dentro de una estufa a 37 ºC en jarra Gas-Pak, como en el procedimiento anterior durante 24 horas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.4.1.3. DETERMINACIÓN. (PRUEBA DE. DEL. EFECTO. ANTIBACTERIANO. SUSCEPTIBILIDAD):. CA. Para la prueba de susceptibilidad, se prepararon 7 soluciones a las. MA TI. concentraciones de 30%, 40%, 50%. 60%, 70%, 80%y 90% de extracto etanólico de propóleo.. FO R. Para la prueba de susceptibilidad se utilizó el método de Difusión en Discos. Se prepararon discos de papel de filtro estériles, los cuales. IN. fueron sumergidos dentro de cada una de las concentraciones del. E. propóleo, luego con una aguja estéril éstos fueron colocados sobre los. MA S. cultivos de Enterococcus faecalis en placas Petri previamente preparados.. TE. Posteriormente las placas se incubaron a 37°C en microanaerobiosis. SI S. utilizando la Jarra Gas-Pack (con el método de la vela, mediante el cual. DE. se obtendrá un ambiente aproximado de 5 a 10 % de CO2). Todo el procedimiento se llevó a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de la llama. IN. A. de un mechero.. IC. La siembra del microorganismo fueron para cada una de las. OF. concentraciones en total, del extracto etanólico de propóleo. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas. Se medieron los halos de inhibición (susceptibilidad) de cada una de las concentraciones,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. incluyendo el área del disco de papel de filtro, con una regla. DETERMINACIÓN. DE. LA. CONCETRACIÓN. MA TI. 2.4.1.4.. CA. milimetrada.. MÍNIMA. INHIBOTORIA (CMI) IN VITRO DE ENTEROCOCCUS FAECALIS. FO R. La determinación de la CMI se realizó por el método de Diluciones en tubos, se utilizaron 08 tubos de ensayo enumerados del 1 al 8, en los 7. IN. primeros tubos de coloco 0.3mm de cada una de las concentraciones. E. del extracto etanólico de propóleo, posteriormente se colocó 0.6ml de. MA S. tioglicolato en cada uno de los 8 tubos de ensayo; posteriormente se colocó 0.2 ml. de la dilución de la cepa (semejante a tubo #1 de Mac. TE. Farland) en cada uno de los 8 tubos, agitándolos para uniformizarlos.. se. realizó. con. cada. uno. de. las. diferentes. DE. procedimiento. SI S. Los tubos fueron colocados en la estufa a 37 °C por 24 horas. Este. concentraciones de infusión de anís estrella.. IN. A. Posteriormente en los tubos que no presentaron turbidez (UFC), se. IC. determinó las cuentas viables, sembrando 0.1 ml. de solución de cada. OF. uno de los tubos en placas Petri con siembra de la cepa estudiada, utilizando el asa de Driglasky para dispersar la muestra, dichas placas fueron colocadas en estufa por 24 horas. a 37°C, luego de lo cual se procedió a la observación del crecimiento bacteriano mediante el conteo. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC), considerándose como la CMI a la menor concentración en la cual no se observó UFC. Todo el. CA. procedimiento se llevó a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de la llama. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. de un mechero.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.5 OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES:. TIPO. propóleo.. 50%. (variable independiente). 60%. nominal. Cuantitativa. razón. E. 70%. Cualitativa. IN. 40%. FO R. Concentraciones al: 30% Extracto etanólico de. ESCALA. CA. INDICADOR. MA TI. VARIABLE. 80%. de las colónias de. Conteo de. colonias según el. TE. Efecto antibacteriano. MA S. 90%. SI S. Enterococcus faecalis. número de. colonias. (UFC´s). OF. IC. IN. A. DE. (variable dependiente). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.6 DEFINICIÓN DE VARIABLES. Extracto etanólico de propóleo. MA TI. . CA. 2.6.1 VARIABLE INDEPENDIENTE:. Es el “arma química” contra los microorganismos patógenos, que proporciona una acción eficaz contra el crecimiento de bacterias y otros. MA S. E. 2.6.2 VARIABLE DEPENDIENTE:. IN. FO R. microorganismos.39. Efecto antibacteriano de las colonias de Enterococcus faecalis.. TE. Efecto de inhibir El crecimiento de E. faecalis por la acción del extracto. DE. SI S. etanólico de propóleo y paramonoclorofenol alcanforado.. A. 2.7 INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS. IN. Se hicieron las mediciones de los halos con una regla, sobre la. IC. superficie de la placa Petri.. OF. Para el presente estudio se elaboró una ficha de recolección de datos. (Anexo 01)37. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.8. ANÁLISIS ESTADÍSTICO E INTERPRETACIÓN DE LA. CA. INFORMACIÓN. MA TI. Para analizar la información se construyeron tablas de distribución de frecuencias de una sola entrada y para determinar si hay diferencia. FO R. significativa entre los tratamientos se hizo un análisis de variancia para un diseño completamente aleatorio y luego se realizó la prueba de. IN. comparación múltiple (prueba Duncan). Ambas a un nivel de. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. significancia al 5%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III.. RESULTADOS. En el presente estudio de tipo experimental “in vitro”, cuyo propósito. CA. fue, determinar la concentración mínima inhibitoria del extracto se utilizaron 7. MA TI. etanólico del propóleo sobre Enterococcus faecalis,. concentraciones de la infusión de anís estrella (30%, 40%, 50%, 60%, y un grupo control, se hallaron los siguientes. FO R. 70%, 80% y 90%) resultados:. IN. Con respecto al promedio de Diámetro de inhibición: el extracto de. E. propóleo al 30% (de 6 a 7mm), el extracto de propóleo al 40% ( de 6.5 a. MA S. 8mm), el extracto de propóleo al 50% (de 7 a 8mm), el extracto de propóleo al 60% (de 7 a 9mm), el extracto de propóleo al 70% (de 8 a. TE. 11mm), el extracto de propóleo al 80% (de 7 a 10mm), el extracto de. SI S. propóleo al 90% (de 8 a 10mm). Presentando. esta última. DE. concentración mayor susceptibilidad antibacteriana. (TABLA 1 y 2). Respecto a los valores de unidades formadoras de colonias: el extracto. IN. A. de propóleo al 30% (21.70 UFC), el extracto de propóleo al 40% (20.50. IC. UFC), el extracto de propóleo al 50% (17.30 UFC), el extracto de. OF. propóleo al 60% (17.60 UFC), el extracto de propóleo al 70% (17.70 UFC), el extracto de propóleo al 80% (18.30 UFC), el extracto de propóleo al 90% (17.20 UFC). (TABLA 3 y 4).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 1 Análisis de Varianza para Diámetro del Halo de Inhibición como indicador de la susceptibilidad del Enterococcus faecalis frente a. gl 6 63 69. CM 12.189 0.631. F 19.331. FO R. SC 73.136 39.725 112.861. P 0.000. TE. MA S. E. IN. FV Tratamientos Error Total. MA TI. CA. cada concentración de extracto etanólico de propoleo.. SI S. En el análisis de varianza se observa que hay una diferencia altamente significativa del promedio del halo formado entre cada una de las. OF. IC. IN. A. DE. concentraciones.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 2. CA. Medidas descriptivas de Promedios del Halo de Inhibición como indicador de la susceptibilidad del Enterococcus faecalis frente a. MA TI. cada concentración del extracto etanólico de propóleo. (Prueba de. 3. 7.50 7.80 7.90. 8.80 9.40. DE. SI S. TE. MA S. 10 10 10 10 10 10 10. 1 6.20 6.75. IN. 30% 40% 50% 80% 60% 90% 70%. alfa = 0.05 2. E. Propoleo ni. FO R. Duncan).. A. Según la prueba de Duncan:. IN. No hay diferencia significativa en formación de halos de inhibición entre. IC. las concentraciones de extracto de propóleo de 30 y 40%; tampoco. OF. entre las concentraciones de 50, 60 y 80%; tampoco hay diferencia entre las concentraciones de 70 y 90%. Pero si existe diferencia significativa entre estos tres grupos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 3. CA. Análisis de Varianza del Promedio de Conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) de Enterococcus faecalis como. MA TI. indicador de la Concentración mínima inhibitoria del extracto. CM 43.381 6.178. IN. gl. 6 63 69. F 7.022. P 0.000. E. SC 260.286 389.200 649.486. SI S. TE. MA S. FV Tratamientos Error Total. FO R. etanólico de propóleo. DE. En el análisis de varianza se observa que hay una diferencia altamente significativa entre cada una de las concentraciones para inhibir la. OF. IC. IN. A. formación de colonias bacterianas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 4. CA. Medidas descriptivas del Promedio de Conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) de Enterococcus faecalis como. MA TI. indicador de la Concentración mínima inhibitoria del extracto. FO R. etanólico de propóleo. TE. IN. MA S. 10 10 10 10 10 10 10. 2. 20.50 21.60 21.70. SI S. 90% 50% 60% 70% 40% 80% 30%. ni. E. Propoleo. alfa = 0.05 1 17.20 17.30 17.60 17.70. A. DE. En el grupo control se encontraron 108 bact/mm3. IN. Según la prueba de Duncan:. OF. IC. No hay diferencia significativa en la inhibición de formación de colonias bacterianas entre las concentraciones de 30 y 40%; tampoco entre las concentraciones del 50 al 90%. Pero si existe diferencia entre estos dos grupos de concetraciones.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV.. DISCUSIÓN. La presente investigación del tipo experimental “in vitro”, tuvo como. CA. propósito determinar la concentración mínima inhibitoria del extracto. MA TI. etanólico del propóleo sobre Enterococcus faecalis, utilizando siete concentraciones del extracto etanólico de propóleo de 30%, 40%,. FO R. 50%, 60%, 70%, 80% y 90%.. IN. Cuando el E. faecalis crece en biopelículas, puede ser hasta mil veces. E. más resistente a la acción de los antimicrobianos que cuando se halla. MA S. como bacteria planctónica (suspendida en un medio líquido y no adherida a ninguna superficie)16. En esta ocasión se trató a la bacteria. TE. en forma planctónica observándose la acción antibacteriana del. SI S. extracto etanólico de propóleo sobre dicha bacteria, a partir del cual se podrá tener referencias, para así, poder probar el efecto antibacteriano. DE. del propóleo sobre biopeliculas de E. faecalis.. IN. A. Kedzia, A (1986) determinó las concentraciones inhibitorias mínimas. IC. (MIC) de extracto de etanol de propolis para 112 cepas de bacterias. OF. anaerobias. EEP demostró la efectividad máxima en contra de las cepas de Bacteroides y peptostreptococcus; De 37 cepas examinadas, 18 estaban inhibidos en 0.01-0.50 mg/ml. EEP fue ligeramente menos efectivo en contra de las cepas Gram positivas de Propionibacterium,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Arachinia y Eubacterium (MIC 0.50-1.00 mg/ml).. 29. . Dicho estudio no. presentó una gran efectividad contra cepas Gram positivas; en el. CA. presente estudio siendo el E. faecalis una bacteria anaerobia. MA TI. facultativa Gram positiva, esta presento susceptibilidad frente al extracto etanólico de propóleo.. FO R. Respecto a la susceptibilidad de esta bacteria frente a la medicina natural, Machado. M. (2007), realizo un estudio in vitro de la actividad. IN. antibacteriana del Paramonoclorofenol Alcanforado, de la Clorhexidina. E. al 2% y del Extracto de Própolis al 50% sobre el E. faecalis,. MA S. Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus; en la que concluyó que el Paramonoclorofenol Alcanforado y la Solución de. TE. Clorhexidina al 2% poseen acción antibacteriana y que el extracto de. SI S. Própolis al 50% posee actividad antibacteriana sobre S. aureus, pero no posee sobre E. faecalis y P. aeruginosa.35.. Sus resultados no. DE. mostraron inhibición de crecimiento. Lo cual es contradictorio con los. A. resultados obtenidos en nuestra investigación.si bien al 30% y 40% no. IN. se observó acción antibacteriana; el extracto etanólico de propóleo al. IC. 50% presento un halo de inhibición promedio de 7.5mm de diámetro y. OF. además no permitió el crecimiento normal bacteriano, por lo que dicha concentración resultó ser la concentración mínima inhibitoria.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. En esta investigación se estudió al E. faecalis, determinándose que cuanto mayor es la concentración del extracto etanólico de propóleo. CA. mayor es el promedio del halo inhibitorio: el extracto de propóleo al. MA TI. 30% (de 6 a 7mm), el extracto de propóleo al 40% ( de 6.5 a 8mm), el extracto de propóleo al 50% (de 7 a 8mm), el extracto de propóleo al 60% (de 7 a 9mm), el extracto de propóleo al 70% (de 8 a 11mm), el. FO R. extracto de propóleo al 80% (de 7 a 10mm), el extracto de propóleo al. IN. 90% (de 8 a 10mm).. E. De acuerdo al análisis estadístico no existe diferencia significativa en. MA S. la inhibición de colonias de E. faecalis entre las concentraciones de propóleo de 50%, 60%, 70%, 80% y 90% pero si estas difieren. TE. significativamente con la concentraciones de 30% y 40% en las que se. SI S. observó mayor formación de colonias bacterianas.. DE. De acuerdo promedio de conteo de unidades formadoras de colonias. A. (UFC), en las concentraciones de 30 y 40% ya se observan una. IN. reducción del número de colonias bacterianas, sin embargo se. IC. observó que dichas concentraciones no formaron un halo de inhibición. OF. significativo; en contraste, la concentración del 50% produjo tanto la formación de un halo de inhibición promedio de 7.5mm y además una reducción significativa del número de colonias bacterianas, con lo que se determinó que esta es la concentración mínima inhibitoria.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. En la actualidad existen diversas soluciones. irrigadoras. con. CA. propiedades antibacterianas, quelantes, surfactantes, así como, otras. MA TI. probadas a nivel sistémico como los antibióticos, e incluso productos de origen natural como el triclosán y el propóleo, cuya efectividad frente a biopelículas de E. faecalis es desconocida; un mejor. FO R. conocimiento de todos ellos permitirá incrementar la eficacia y desinfección de los conductos radiculares y, por ende, mejorar el. IN. pronóstico de la terapia endodóntica. En definitiva mejorar la vida. E. media de los dientes. En la presente investigación se obtuvieron datos. MA S. efectivos contra el E. faecalis forma planctónica.. TE. Los resultados del presente trabajo se pueden extrapolar a situación. SI S. clínica real. Por ello se requieren investigaciones que simulen las condiciones endodonticas in vitro e in vivo para reproducir las. DE. circunstancias en que las bacterias crecen en el interior del sistema de. OF. IC. IN. A. conductos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. V.. El extracto de propóleo al 30% y 40% presenta una actividad. CA. . CONCLUSIONES. MA TI. antibacteriana casi nula en comparación con las demás soluciones, presentando éstas un halo de inhibición que va de 6 a 7mm.. Se observó que a mayor concentración del extracto, mayor es el. FO R. . efecto antibacteriano, siendo la concentración del 90% la más. E. IN. efectiva.. La. concentración mínima inhibitoria del extracto etanólico del. MA S. . OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. propóleo sobre el Enterococcus faecalis es del 50%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI.. Realizar estudios para determinar la actividad antibacteriana del. CA. . RECOMENDACIONES. MA TI. extracto de propóleo en otras bacterias anaerobias e inclusive en bacterias aerobias presentes en patología pulpar y patología. Realizar estudios para determinar la actividad antibacteriana del. IN. . FO R. periapical.. extracto de propóleo sobre biofilms, para poder establecer la. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. efectividad del mismo asociada a otras bacterias.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Ingle J Leifk Bakland. “ENDODONCIA”. Editorial Mc Graw-Hill. CA. Interamericana .5ª edicion. 2004.. MA TI. 2. Canalda C. Esteban Brau Aguade “ENDODONCIA, técnicas clínicas y bases cientificas” Editorial Masonas, 2001 Barcelona, España.. FO R. 3. Franklin S. Weine,”Tratamiento Endodontico” Editorial Harcourt Brace, 1997, España.. IN. 4. Mondragon, “Endodoncia” Editorial Mc Graw-Hill Interamericana, 1995. E. 5. Canalda C. Esteban Brau A. “ENDODONCIA, técnicas clínicas y. MA S. bases cientificas” Editorial Masonas, 2001 Barcelona, España. 6. Peters LB, Wesselink PR. Periapical healing of endodontically treated. TE. teeth in one and two visits obturated in the presence or absence of. SI S. detectable microorganisms. Int Endod J. 2002; 35(8):660-7. 7. Soares I, Goldberg F. Endodoncia Técnica y Fundamentos. Primera. DE. Edición. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires. 2002. 8. Liébana Ureña J. Microbiología Oral. 2 ed. Madrid. Ed. Mc Graw-Hill-. IN. A. Interamericana de España, S.A.U.; 2002.. IC. 9. Pinheiro et, gomes bpfa, ferraz ccr, teixeira fb, zaia aa, sousa-filho fj.. OF. Evaluation of root canal microorganisms isolated from teeth with endodontic failure and their antimicrobial susceptibility. Oral Microbiol Immunol 2003; 18: 100-3.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 10. Molander a, reit c, dahlen g, kvist t. Microbiological status of root-filled teeth with apical periodontitis. Int Endod J 1998; 31: 1-7.. CA. 11. Sjögren u, fidgor d, spandberg i, sundqvist g. The antimicrobial effect. MA TI. of calcium hydroxide as a short-term intracanal dressing. Int Endod J 1991; 24: 119-25.. 12. Rocas IN, Siqueira Jf Jr. Santos KR. Association of Enterococcus. FO R. Faecalis with different forms of periradicular diseases. J Endod 2004; 30:315-20.. IN. 13. Lee W. Lim S, Son HH, Bae KS. Sonicated extract of Enterococcus. E. Faecalis induces irreversible cell cycle arrest in phytohemegglutinin-. MA S. activated huaman lymphocytes. J Endond 2004:30 209.12. 14. Love RM Enterococcus Faecalis: a mechanism for its role in. TE. endodontic failure. Int Endod J 2001; 34;399-405.. SI S. 15. Duggan J, sedgley C. Biofilm formation of Oral and Endodontic Enterococcus faecalis. J Endod 2007; 33: 815-8.. DE. 16. Costerton JW, Stewart PS, Greenberg EP. Bacterial biofilms; a. A. common cause of persistent infections. Science 1999; 284: 1.318-22.. IN. 17. Leonardo M. Endodoncia Tratamiento de conductos Radiculares:. IC. Principios técnicos y biológicos. Editorial Artes Médicas. Sao Paulo.. OF. 2005. 18. Lin LM, Skribner JE, Gaengler P. Factors associated with endodontic treatment failures. J Endod. 1992; 18(12):625-7.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 19. Stock C, Walker R, Gulabilava K, Goodman J. Atlas en Color y Texto de Endodoncia. Segunda Edición. Editorial Harcourt Brace. Madrid.. CA. 1997. Pág. 145-149. MA TI. 20. Bavestrello P.(2003). Introducción a la Fitoterapia. Universidad Católica de Chile.. 21. Ghisalberti EL. (1979). Propolis a Review. Bee Word 60: 59-84. FO R. 22. Chaillou LL (2004). Estudio del Propoleos de Santiago del Estero. Argentina.. IN. 23. Marcucci MC (1995). Propolis: chemical composition, biological. E. properties and therapeutic activity. Apidologie 26: 83-89. Method. for. MA S. 24. Brushi ML, Franco SL, Gremiao MP (2003). Application of an HPLC Analysis. of. Propolis. Extract.. Journal. of. Liquid. TE. Chromatography & Related Technologies 26(14): 2399-2409. SI S. 25. Havsteen B. (2002). The biochemistry and medical significance of the flavonoids. Pharmacology & Therapeutics 96(2-3) 67-202. DE. 26. Al-Shaner A, Wallace J, Agarwal S, Bretz W, Bagh D, (2004). Effect of. A. propolis on human fibroblasts from the pulp and periodontal ligament.. IN. Journal of Endodontics 30(5): 359-361. IC. 27. Koo H. (2002). Effect of a moutrinse containing selected propolis on 3-. OF. day dental plaque accumulation and polysaccaride formation. Caries Res 36(6): 445-449. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 28. Shub, T.A.; Kagramanova, K.A.; Voropaeva, S.D.; Kivman, G. YA. (1981): Effect of propolis on strains of staphylococcus anveus resistant. CA. to antibiotics. Antibiotik 26 (4) 268-271.. MA TI. 29. Kedzia, A. (1986): Effect of ethauol extract of propolis (EEP) on anaerobic bacteria.Herba polonica 32 (1) 53-58.. 30. Velikova M, Bakova V, Sorkun K, Popova S, Kujumgiev A. (2001). FO R. Chemical composition and biological activity of propolis from Turkish and Bulgarian origin. Mellifera 1(1): 57-59. IN. 31. Santos F, Bastos E, Rodriguez P, Uzeda M, Carvalho M, Farias L,. E. Moreira E, (2002). Susceptibility of Prevottella inteermedia/Prevotella. MA S. nigrescens (and Porphyromona gingivalis) to Propolis (Bee Glue) and other Antimicrobial Agents. Anaerobe 8(1): 9-15. TE. 32. Pinheiro.E.T., Gomes B.P. Evaluation of root canal microorganisms. SI S. isolated from teeth with endodontic failure and their antimicrobial susceptibility.Oral microbiology and Inmunology.. DE. 33. Fajuri M, Huerta J, Silva N. (2004). Eficacia del propóleo chileno como. A. antimicrobiano contra microorganismos de interés en Odontología.. IN. Trabajo de Investigación para optar al título de cirujano dentista.. IC. Facultad de Odontología, Universidad de Chile. OF. 34. Chavez de Paz et al (2006), biofilms (biopeliculas) microbianas en infecciones endodonticas. Revista de la sociedad de endodoncia de chile. N°14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.