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Efecto del decocto de gentianella alborosea “hercampuri” sobre niveles séricos de creatinina en rattus norvegicus var albinus

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Academic year: 2020

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. O Q. UÍ. M. IC. A. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. IA. Y. BI. TESIS II. FA. RM. AC. EFECTO DEL DECOCTO DE Gentianella alborosea “hercampuri” SOBRE NIVELES SÉRICOS DE CREATININA EN Rattus norvegicus var. albinus. DE. PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE:. TE CA. BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BI BL I. O. AUTOR: -. Benites Rodríguez, Edwin Willy.. -. Dra. Ana Elena Mantilla Rodríguez.. ASESORA:. TRUJILLO – PERÚ 2011. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIA Ha sido el omnipotente, quien ha permitido que la sabiduría dirija y guíe mis pasos.. A. Ha sido el todopoderoso,. M. IC. quien ha iluminado mi sendero. O Q. UÍ. cuando más oscuro ha estado,. BI. Ha sido el creador de todas las cosas,. RM. AC. cuando a punto de caer he estado;. IA. Y. el que me ha dado fortaleza para continuar. FA. por ello, con toda la humildad. DE. que de mi corazón puede emanar,. BI BL I. O. TE CA. dedico mi trabajo a Dios.. De igual forma, a mis padres, quienes han sabido formarme con buenos. sentimientos, hábitos y valores, lo cual me ha ayudado a salir adelante buscando siempre el mejor camino.. Edwin. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO. IC. A. Un especial agradecimiento a la. O Q. UÍ. M. Dra. Ana Elena Mantilla Rodriguez,. BI. por su capacidad professional y. AC. IA. Y. su incondicional apoyo. RM. para el desarrollo y culminación. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. del presente trabajo.. Edwin. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AC. IA. DR. GUILLERMO SEGUNDO RUIZ. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. JURADO DICTAMINADOR. (PRESIDENTE) (MIENBRO). DR. ROBERTO IBAÑEZ JULCA. (MIENBRO). BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. DRA. ANA ELENA MANTILLA RODRÍGUEZ. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores miembros del jurado dictaminador:. IC. A. Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de grados y títulos de. UÍ. M. la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a. O Q. vuestra consideración y elevado criterio professional la presente Tesis II titulada:. Y. BI. EFECTO DEL DECOCTO DE Gentianella alborosea “hercampuri” SOBRE NIVELES. AC. IA. SÉRICOS DE CREATININA EN Rattus norvegicus var. albinus.. RM. Es propicia esta oportunidad para manifestar mi más sincero reconocimiento a. FA. nuestra alma mater y toda su plana docente, que con su capacidad y buena voluntad. DE. contribuyeron a mi formación professional.. BI BL I. O. presente Tesis.. TE CA. Dejo a vuestro criterio señores miembros del jurado dictaminador la calificación de la. Trujillo, Agosto 2011. Benites Rodríguez Edwin Willy. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. Pág. Resumen……………………………………………...………………………… i Abstract…………..……………………………………………….…………… ii. Introducción…………………………………………………………………… 1. II.. Material y Método………………………………………………………….…. 5. III.. Resultados…………………………………………………………………….. 13. IV.. Discusión…………………………………………………………………….... 18. V.. Conclusiones………………………………………………………………….. 20. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. I.. Referencias Bibliográficas……………………………………………...……. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN. El presente trabajo tuvo como objetivo principal determinar si la administración del decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” a dos dosis diferentes. provoca. cambios significativos sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus. Se usaron 36 ejemplares aparentemente sanos, machos de 3 a 4 meses de edad, con un peso corporal de 200 a 250 g, procedentes del Instituto Nacional de Salud, Chorrillos-Lima. Los animales fueron divididos aleatoriamente en tres grupos (grupo. IC. A. control, grupo problema I y grupo problema II) de 12 animales cada uno, que recibieron. solamente 1ml solución salina fisiológica. Los. O Q. mg/Kg. El grupo control recibió. UÍ. M. el decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” en las dosis de 150 mg/Kg y 300. animales recibieron, diariamente dos veces al día durante 30 días, el decocto de. Y. BI. Gentianella alborosea “hercampuri” en las respectivas dosis. Se obtuvieron muestras. AC. basales y al tiempo final después del día 30.. IA. de sangre en dos oportunidades: después del periodo de adaptación de 15 días, los. RM. El dosaje de Creatinina sérica fue realizado en el Laboratorio de Análisis Clínicos. FA. Peruano - Americana. Los resultados obtenidos muestran que el decocto de Gentianella. DE. alborosea “hercampuri” en las dosis utilizadas no provocaron cambios significativos. BI BL I. O. TE CA. en los niveles de Creatinina sérica (p > 0.05) entre los tres grupos de investigación.. Palabras Clave: Gentianella alborosea, Creatinina sérica.. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT. This paper's main objective was to determine whether the administration of decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" at two different doses caused significant changes on serum creatinine in Rattus norvegicus var. albinus. 36 specimens were used apparently healthy males from 3 to 4 months of age with a body weight of 200 to 250 g, from the National Institutes of Health, Chorrillos-Lima. The animals were randomly divided into three groups (control group, group problem I and problem II) of 12 animals each,. IC. A. receiving the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" in doses of 150 mg / kg. UÍ. M. and 300 mg / kg. The control group received only 1 ml physiological saline. The. O Q. animals received daily twice daily for 30 days, the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" in the different doses. Blood samples were obtained on two occasions. IA. Y. BI. after the adaptation period of 15 days, the baseline and final time after day 30.. AC. The dosage of serum Creatinine was performed in the Clinical Laboratory Peruano -. RM. Americano. The results show that the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri". BI BL I. O. TE CA. DE. among the three research groups.. FA. in the doses used did not cause significant changes in serum creatinine levels (p> 0.05). Keywords: Gentianella alborosea, serum Creatinine.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. En la prehistoria, los humanos probablemente observando las costumbres de los animales, empezaron a manipular las plantas medicinales. El hombre de Neardenthal ya utilizaba plantas medicinales. Los conocimientos sobre las plantas medicinales, antes del nacimiento de la escritura, se realizaban oralmente. Se sabe que el primer texto escrito sobre el uso de plantas medicinales tiene unos 4000 años de antigüedad y aparece en una tablilla de arcilla en la cultura de los Sumerios, un antiguo pueblo que. A. vivía al sur de los ríos Éufrates y Tigris, lo que equivaldría al actual Iraq. Como y. IC. porque una determinada planta tiene propiedades curativas debió ser un misterio para. UÍ. M. aquellos pueblos primitivos, por esta razón las personas que tuvieron un interés. O Q. especial en las cualidades curativas de las plantas y que adquirieron una cierta. BI. experiencia sobre el tema consiguieron ocupar un lugar importante en la sociedad. Los. Y. pueblos primitivos atribuían sus efectos curativos a la intervención de uno de sus. IA. dioses. Por esta razón, los "médicos" primitivos quedaron asociados al conjunto de. AC. estructuras de las creencias religiosas de los pueblos. Muchos de ellos fueron. RM. sacerdotes que actuaban como instrumento de los dioses, de los que recibían poderes. FA. para curar. El conocimiento de las plantas medicinales se extiende a cualquier parte del mundo donde el hombre tradicionalmente ha necesitado de estos seres para curar. DE. sus enfermedades. El paso de las diferentes culturas ha creado todo un conocimiento. TE CA. de remedios vegetales que ha constituido la base de la medicina moderna. Un patrimonio que no puede atribuirse a ninguna cultura en particular sino al hombre en. BI BL I. O. su globalidad y que nos corresponde a todos conocer y salvaguardar 1.. El conocimiento empírico acerca de las plantas medicinales y sus efectos curativos se acumuló durante milenios y posteriormente pasó a ser parte integral de sistemas y tradiciones curativas como el Ayurveda en la India, la medicina tradicional china o las tradiciones. curativas. de. los. indios. norteamericanos.. Hoy. en. día. se. reportan numerosos descubrimientos científicos que confirman el enorme potencial curativo que posee el mundo vegetal y que están transformando la Fitoterapia en una práctica muy distinta a la de nuestros antepasados 1.. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La medicina tradicional se viene utilizando desde hace miles de años, y sus practicantes han contribuido enormemente a la salud humana, en particular como proveedores de atención primaria de salud al nivel de la comunidad. La medicina tradicional ha mantenido su popularidad en todo el mundo. A partir del decenio de 1990 se ha constatado un resurgimiento de su utilización en muchos países desarrollados y en desarrollo. En algunos países asiáticos y africanos, el 80% de la población depende de la medicina tradicional para recibir atención primaria de salud. En muchos países desarrollados, del 70% al 80% de la población ha recurrido alguna. A. vez a una u otra forma de medicina alternativa o complementaria. La OMS y sus. IC. Estados Miembros colaboran para promover el uso de la medicina tradicional en la. UÍ. M. atención de salud. 2. La reconocida dependencia creciente del uso de sistemas de. O Q. medicina alternativa para reducir costes y conseguir objetivos de asistencia sanitaria ha hecho que gobiernos de todo el mundo aumenten la inversión en medicinas. Y. BI. complementarias y alternativas 3. AC. IA. El Perú es considerado un país mega diverso por ser uno de los primeros en número de. RM. especies de plantas de propiedades conocidas y utilizadas por la población; alberga cerca de 80 mil especies de flora, de las cuales unas dos mil son utilizadas por los. FA. nativos con fines curativos. De la flora se calculan un 10% total del mundial. Tiene. DE. una vasta reserva en plantas medicinales (4400 especies), ornamentales (1600. TE CA. especies) y plantas alimenticias (unas 1200 especies). Es depositario de importantes recursos fitogenéticos; diversas especies de plantas contienen un enorme potencial de. BI BL I. O. importancia estratégica para la industria farmacológica 4. La familia Gentianaceae consiste en unos 75 géneros y aproximadamente 1000 especies de distribución cosmopolita, pero más común en regiones templadas y subtropicales y en pequeñas montañas tropicales. El género más grande es Gentianella, con 400 especies 4. El Hercampuri (Gentianella alborosea) es una planta oriunda de la sierra del Perú, crece entre los 3,500 y 4,300 metros sobre el nivel del mar. Desde los tiempos del Imperio Incaico, ha sido usado para aliviar dolores estomacales y combatir las fiebres producidas por el paludismo. El extracto acuoso de la planta entera ha sido usado en nuestra medicina tradicional peruana como un remedio para la hepatitis, para el tratamiento de la obesidad y como un colagogo. Investigaciones realizadas sugieren que es un gran regulador del metabolismo de las grasas, motivo 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. por el cual se le utiliza para ayudar a reducir la obesidad. Esta especie contiene sustancias amargas de tipo glucosídicas, como eritaurina (sustancia amarga de tipo glucosídica), amarogencina y genciopicrina, eritrocentaurina, genciopicrósidos (lactonas insaturadas), alcaloides, saponinas, taninos, resinas, hemicelulosa y minerales; asimismo, aceites volátiles, azúcares, mucílagos, ácido genciánico, terpenoides y entre ellos los monoterpenos del pentano-secoiridoides (secologanósido, amarosverina, amarogentina) y sesterpenoides (alborosin). Además la presencia de. A. sales de aluminio, calcio, potasio, magnesio, sodio y cloro 5,6.. IC. La creatinina se forma a partir de la fosfocreatinina muscular, que tiene su origen en. UÍ. M. los aminoácidos arginina y glicina, siendo por consiguiente, un producto endógeno del. O Q. catabolismo de la creatina a nivel muscular principalmente. Se elimina por los riñones. BI. en cantidades constantes a través de la filtración glomerular. Sus valores son. Y. independientes de la ingestión de proteínas y no son afectados por el volumen urinario.. IA. En los humanos, los valores normales de creatinina oscilan entre 0.5 y 1.6mg/dL. Es. AC. el elemento nitrogenado de sangre menos variable, ya que los daños y perjuicios. RM. pequeños que ocurren a nivel renal no son capaces de promover sus alteraciones. FA. séricas. El aumento de concentración sérica de creatinina ocurre por insuficiencia renal. DE. debido a patologías o anomalías a nivel renal7.. TE CA. En el Perú, el Instituto Nacional de Salud, es la entidad que se encarga de proponer políticas y normas, promover, desarrollar y difundir la investigación científica-. O. tecnológica y brindar servicios de salud en los campos de salud pública, control de. BI BL I. enfermedades transmisibles y no transmisibles, alimentación y nutrición, producción de biológicos, control de calidad de alimentos, productos farmacéuticos y afines, para contribuir a mejorar la calidad de vida de la población 8.. El presente estudio está orientado a determinar efecto del decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus. Por todo lo expuesto se planteó el siguiente problema:. ¿Cuál es el efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus? 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Hipótesis: El efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri”, no produce cambios significativos sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus. Objetivo General:.  Determinar si la administración del decocto de Gentianella alborosea. IC. A. “Hercampuri” provoca cambios significativos sobre los niveles séricos de. O Q. UÍ. M. Creatinina en Rattus norvegicus var albinus.. BI. Objetivos Específicos:. IA. Y.  Determinar los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var albinus. AC. antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea. DE. FA. RM. “Hercampuri” a dosis de 150mg/kg p.c.. TE CA.  Determinar los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var albinus antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea. BI BL I. O. “Hercampuri” a dosis de 300mg/kg p.c. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II.. MATERIAL Y MÉTODO. 2.1 Material de Estudio: 2.1.1 Material Biológico: a. Animales de experimentación: Se empleó 36 ejemplares de la especie Rattus norvegicus var. albinus,. A. aparentemente sanos, machos de 3 a 4 meses de edad, con peso. M. IC. corporal de 200 a 250 g, procedentes del Instituto Nacional de Salud,. O Q. UÍ. Chorrillos-Lima. Los especímenes fueron sometidos a similares. BI. condiciones ambientales y de alimentación por 15 días antes de iniciar. AC. IA. Y. el estudio.. aproximadamente 1.5 Kg. de hojas y tallos de. FA. Se emplearon. RM. b. Vegetales:. DE. Gentianella alborosea “hercampuri”, procedente del Distrito:. TE CA. Atuncolla, Provincia de Puno y Departamento de Puno.. O. La muestra fue obtenida del centro autorizado de medicina tradicional. BI BL I. “Shangri - La”, ubicado en el centro de la ciudad de Trujillo. N° de Lote: 2010. La especie en estudio se identificó en el Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo, según el sistema de clasificación Fitogenético de A. Engler (1994).. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. : Angiospermae. Clase. : Dicotyledoneae. Subclase. : Metachlamydeae. Orden. : Campanulales. Familia. : Asteraceae. Género. : Gentianella. Especie. : Alborosea. Nombre común. : Hercampuri, té amargo, té de. M. IC. A. División. BI. O Q. UÍ. Chavin, harcapura, té indio. Y. 2.1.2 Material de Laboratorio:. RM. AC. IA. a. Equipos:. Balanza analítica Sanrotius Ag Gottingen PT 310. -. Cocina eléctrica Glovana S 001. -. Balanza de canastilla “O Haus”. TE CA. DE. FA. -. O. b. Material de vidrio:. Probetas 100 ml. -. Vasos de 150, 250 ml. -. Pipetas de 5 y 10 ml. -. Tubos de ensayo de 15 ml. -. Vasos de precipitación de 50 y 100 ml. -. Varillas de vidrio. -. Placa de porcelana. BI BL I. -. c. Reactivos: -. Solución salina fisiológica al 0.9%. -. Kit comercial Creatinina (Wiener Lab) 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. d. Farmacos: -. Ketamina ampolla. -. Algodón. -. Alcohol de 70°. -. Jeringas de 1 y 5 ml. -. Jaulas metálicas. -. Sondas nasogástricas Medex N°2. IC. Agua destilada. O Q. UÍ. M. -. A. e. Otros:. Y. BI. 2.2. MÉTODO:. AC. IA. 2.2.1 Tipo y Diseño de Estudio:. RM. Se realizó un estudio experimental in vivo siguiendo al diseño clásico de estímulo creciente para el que se utilizó un grupo control y dos grupos. FA. problemas con controles previos y sucesivos. Luego los especímenes de. DE. Rattus norvegicus var. albinus recibieron la administración del decocto. TE CA. de Gentianella alborosea “hercampuri” por vía oral durante 30 días.. O. 2.2.2. Preparación de la especie vegetal:. BI BL I. 2.2.2.1. Recolección y selección de la especie vegetal: Después de adquirir las hojas y tallos de Gentianella alborosea, se procedió a realizar una inspección visual para verificar el buen estado de la superficie. Se seleccionó aquellas hojas y tallos, luego fueron lavadas y secadas.. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.1.2. Preparación del decocto: Para la preparación del decocto se inició de la dosis recomendada en medicina popular: 2 vasos (250 mL) para una persona de 70 Kg, se calentó en un recipiente adecuado 100 g de agua, una vez alcanzado el punto de ebullición, se agregó 5 g de Gentianella alborosea “hercampuri” dejando hervir por un. A. espacio de 5 minutos, luego se retiró del fuego y se dejó en. M. IC. reposo por 10 minutos hasta enfriar. Se preparó el decocto con. O Q. UÍ. las hojas y tallos, y con el volumen obtenido se determinó el. BI. extracto seco del decocto, tomando 5ml para llevar a sequedad. Y. hasta peso constante obteniéndose un peso promedio de. AC. IA. 63mg/mL del decocto, posteriormente se calculó la dosis a. RM. utilizar en peso del extracto seco de la hoja y tallo obteniéndose. Tratamiento de los Animales:. TE CA. 2.2.3.. DE. FA. 225mg/kg p.c.11.. BI BL I. O. 2.2.3.1. Alimentación de los animales de experimentación: Los especímenes fueron alimentados con una dieta balanceada. a base de maíz, cebada y purina durante el desarrollo del estudio.. 2.2.3.2. Distribución de los grupos en experimentación: Los animales de experimentación fueron. distribuidos. aleatoriamente en 3 grupos, identificados y distribuidos de la siguiente manera:. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Grupo I (Grupo Control): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró 1 mL de solución salina fisiológica dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30 días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica (lectura final).. Control Lectura Final. A. 30 días. Grupo II (Problema I): Formado por 12 animales de. O Q. . UÍ. M. IC. Grupo I: Lectura Basal. BI. experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los. Y. niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró el. IA. decocto de Gentianella alborosea” a la dosis menor (150mg/kg). AC. dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30. RM. días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica. DE. FA. (lectura final).. TE CA. Estímulo X 30 días. Lectura Final. BI BL I. O. Grupo II: Lectura Basal. Donde: Estímulo X: Se le administró la dosis de 150 mg/kg p.c. del decocto de Gentianella alborosea por vía oral.. . Grupo III (Problema II): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró el decocto de Gentianella alborosea a la dosis mayor (300mg/kg). 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30 días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica (lectura final).. Estímulo 2X Grupo III: Lectura Basal. 30 días. Lectura Final. IC. A. Donde:. UÍ. M. Estímulo 2X: Se le administró la dosis de 300 mg/kg p.c. del. BI. O Q. decocto de Gentianella alborosea por vía oral.. IA. Y. 2.2.3.3. Evaluación de las pruebas bioquímicas:. AC. A todos los animales de experimentación se les sometió a ayuno. DE. FA. Creatinina.. RM. de 10 a 12 horas para determinar los niveles séricos de. BI BL I. O. TE CA. 2.2.3.4. Determinación de las pruebas bioquímicas:. A) Obtención de la muestra: Se obtuvo 1 mL de sangre haciendo un corte en el extremo distal de la cola del animal de experimentación previamente anestesiado con Ketamina a la dosis de 100 mg/Kg p.c. La muestra de sangre se recolectó en tubos heparinizados. El suero obtenido por centrifugación a 1500 rpm durante 15 min, se utilizó para determinar Creatinina sérica. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. B) Procesamiento de la muestra: . Determinación de los niveles séricos de Creatinina: Fundamento: La Creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan con el ácido pícrico en medio alcalino dando un complejo color rojo que se cuantifica mediante lectura fotométrica. La determinación de Creatinina puede. A. llevarse a cabo por medio de una técnica de punto final. M. IC. eliminándose el color que se debe a los cromógenos no. O Q. UÍ. Creatinina. La adición de ácido al medio, destruye el picrato. BI. de Creatinina pero no el color formado por los demás. Y. compuestos. Por lo tanto la diferencia entre la lectura. AC. IA. fotométrica antes y después del agregado de ácido, permite. RM. cuantificar la Creatinina en forma específica.. FA. Procedimiento: Se rotulan 3 tubos de ensayo como. DE. “muestra”, “patrón” y “blanco reactivo”. Posteriormente. BI BL I. O. TE CA. añadir a cada tubo:. Tubo blanco. Tubo estándar. Tubo muestra. 0.1 ml. -. -. Estándar. -. 0.1 ml. -. Muestra. -. -. 0.1 ml. Reactivo de Trabajo. 1 ml. 1 ml. 1 ml. Stopper. 50 ul. -. 50 ul. Agua Destilada. Mezclar. Incubar 10 minutos en baño a 37°C. Dentro de los 15 minutos de retirado del baño, leer el Estándar y la. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Muestra en Espectrofotómetro a 510 nm. Luego agregar: Stopper, Mezclar. Dejar los tubos 5 minutos a temperatura ambiente y volver a leer los tubos en Espectrofotómetro a 510 nm. Valores normales: 0.4 – 1.4 mg/dL 12, 13,14.. 2.2.3.5. Análisis Estadístico:. A. Para determinar la variabilidad interindividual e intergrupal de los. M. IC. efectos en los grupos problema y control se aplicó el Análisis de. O Q. UÍ. Varianza y para determinar la significancia estadística entre los. BI. grupos problema y el control se aplicó el Método de Duncan con. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. un nivel de significancia de 0.05 15.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) RESULTADOS. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. III.. AC. IA. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA 1: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus norgevicus var. albinus. Grupo I (grupo control). Creatinina sérica (mg/dL). Creatinina sérica (mg/dL). Animal de Análisis (N°). Lectura Basal. Lectura Final. 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12. 0,58 0,62 0,60 0,55 0,62 0,56 0,70 0,65 0,60 0,63 0,60 0,65. 0,56 0,67 0,61 0,50 0,61 0,50 0,65 0,67 0,59 0,63 0,61 0,65. RM. AC. IA. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. Grupo I. FA. TABLA 2: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus. Creatinina sérica (mg/dL). TE CA. Grupo II. DE. norvegicus var. albinus. Grupo II (grupo problema I). Creatinina sérica (mg/dL). Lectura Basal. Lectura Final. 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12. 0,55 0,70 0,52 0,63 0,60 0,55 0,61 0,63 0,61 0,59 0,65 0,56. 0,47 0,76 0,49 0,60 0,56 0,57 0,65 0,60 0,63 0,59 0,66 0,61. BI BL I. O. Animal de Análisis (N°). 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA 3: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var. albinus. Grupo III (grupo problema II). Creatinina sérica (mg/dL). Creatinina sérica (mg/dL). Animal de Análisis (N°). Lectura Basal. Lectura Final. 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12. 0,60 0,61 0,59 0,61 0,70 0,72 0,65 0,63 0,63 0,59 0,57 0,61. 0,58 0,58 0,63 0,47 0,83 0,67 0,57 0,61 0,59 0,63 0,60 0,58. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. Grupo III. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA 4: Análisis de Varianza de Creatinina sérica antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.. GRUPO. BASALES X ± D.S.. FINALES (30 días) X ± D.S.. 12. 0,61 ± 0,04. 0,60 ± 0,05. Grupo II**. 12. 0,60 ± 0,05. 0,59 ± 0,08. Grupo III***. 12. 0,62 ± 0,07. A. Grupo I*. P. 0,16. UÍ. M. Creatinina sérica (0.4 – 1.4mg/dL). N°. IC. VARIABLE. FA. RM. : Control : Hercampuri 150 mg/kg : Hercampuri 300 mg/Kg : Significancia Estadística : Análisis de Varianza. DE. * ** *** P < 0,05 ANOVA. BI BL I. O. TE CA. Leyenda:. AC. IA. Y. BI. O Q. 0,61 ± 0,08. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. TABLA 4.1: Análisis DUNCAN para Creatinina sérica después de la administración oral del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus.. TRATAMIENTO. ni. alfa = 0.05 Grupo I. Grupo II. 12. 0,599. Control. 12. 0,604. Hercampuri 150 mg/kg. 12. 0,612. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O Q. UÍ. M. IC. A. Hercampuri 150 mg/kg. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. Gentianella alborosea es un desintoxicante sanguíneo que ayuda a eliminar los lípidos de baja densidad de la sangre. Facilita la circulación y debido a su acción diurética se usa para normalizar la presión sanguínea. El. hercampuri ayuda a energizar el. organismo debido a que contribuye a balancear el metabolismo ya que mejora la circulación 16.. . Los fitoesteroles son particularmente abundantes en el reino vegetal: están presentes en. IC. A. los frutos, semillas, hojas y tallos de prácticamente todos los vegetales conocidos. Los. M. fitoesteroles presentes en esta planta y cuya estructura química son muy similares a la. UÍ. del colesterol; sin embargo, los fitoesteroles difieren estructuralmente del colesterol. O Q. (que posee 27 carbonos, C27) por la presencia de sustituyentes de tipo metilo o etilo en. Y. BI. la cadena lateral de la molécula 17.. AC. IA. No está totalmente elucidado el mecanismo mediante el cual los fitoesteroles ejercen. RM. efectos hipocolesterolémicos. Sin embargo, basado en sus propiedades fisicoquímicas, se ha postulado que estas sustancias actúan a tres niveles diferentes: a) inhiben la. FA. absorción a nivel intestinal del colesterol, tanto aquel de origen dietario como biliar, b). DE. inhiben la reesterificación del colesterol a nivel de la actividad de la enzima acilCoA-. TE CA. colesterol-acil-tranferasa (ACAT), c) aumentan la actividad y la expresión del transportador tipo ABC (de ATP Binding Casette), acelerando el eflujo de colesterol. O. desde las células intestinales al lumen intestinal. Debido a que los fitoesteroles son más. extensión. BI BL I. lipofílicos que el propio colesterol, propiedad derivada de las características de mayor y. complejidad. de. la. cadena. lateral,. los. esteroles. desplazarían. competitivamente al colesterol desde la micela mixta formada por la acción de los fosfolípidos y de las sales biliares en el lumen intestinal. De esta forma, al tomar contacto la micela mixta con el ribete en cepillo formado por las microvellocidades de las células intestinales, los fitoesteroles ocuparían el lugar del colesterol 18.. En las Tablas 4 y 4.1; se muestra el análisis estadístico realizado a los valores de Creatinia sérica que se encuentran en las Tablas 1, 2 y 3 correspondientes a los tres grupos de investigación, post – administración del decocto de Gentianella alborosea.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En la Tabla N°4 se muestra los valores promedio, desviación estándar y el análisis de varianza de Creatinina sérica de los tres grupos investigados. Analizando los valores de Creatinina sérica, observamos que no existe una diferencia significativa entre los valores del grupo Control y los dos grupos Problema (p > 0.05). Estos resultados se reafirman en la Tabla 4.1 con la Prueba de Duncan, donde se evidenció que no existe variabilidad significativa del parámetro en estudio después de 30 días de administración del decocto de Gentianella alborosea en los grupos de investigación.. Al considerar los valores normales de Creatinina sérica para las ratas de estudio. IC. A. de 0.4 – 1.4 mg/dL 12, 13, 14. Las variaciones encontradas en los dos tratamientos fueron. UÍ. M. mínimas como para establecer cualquier alteración fisiológica en los animales. La. O Q. Creatinina es el elemento nitrogenado de la sangre menos variable, ya que los daños y perjuicios pequeños que ocurren a nivel renal no son capaces de promover sus. Y. BI. alteraciones séricas 7. La Creatinina se forma a partir de la fosfocreatina muscular, que. IA. tiene su origen en los aminoácidos arginina y glicina, siendo por consiguiente, un. AC. producto endógeno del catabolismo de la Creatina a nivel muscular. Se elimina por los. RM. riñones en cantidades constantes a través de la filtración glomerular. Sus valores son. FA. independientes de la ingestión de proteínas y no son afectados por el volumen urinario 7.. DE. El aumento de la concentración sérica de Creatinina ocurre por insuficiencia renal. TE CA. cuando se incrementa la cantidad de urea. En los Humanos, en la glomerulonefritis crónica con uremia las proporciones suben hasta 35 mg/dL cuando puede ocurrir un. O. problema letal. Valores superiores a 5 mg/dL evidencian ya una insuficiencia renal. Las. BI BL I. obstrucciones urinarias, por afecciones en la próstata, vejiga o uretra, como también la oliguria refleja provocada por la nefrolitiasis, muestran índices muy altos de Creatinina, y este cuadro es reversible cuando se retira la causa de la obstrucción 7.. Los resultados obtenidos indican que la administración del decocto de Gentianella alborosea, en las dosis empleadas a lo largo del experimento, no ha producido cambios significativos cuando se midieron los niveles de creatinina sérica en las ratas de experimentación.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V.. CONCLUSIONES. De los resultados obtenidos en el presente trabajo se puede concluir:  La administración de 30 días del decocto de Gentianella alborosea, no provocó cambios significativos en los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var. albinus.. A.  Los niveles de Creatinina sérica no mostraron diferencia significativa. IC. entre los valores basales (0,60 ± 0,05) y los valores finales (0,59 ± 0,08). M. después de la administración del decocto de Gentianella alborosea. BI. O Q. UÍ. “Hercampuri” a dosis de 150 mg/Kg en Rattus norvegicus var albinus.. Y.  Los niveles de Creatinina sérica no mostraron diferencia significativa. AC. IA. entre los valores basales (0,62 ± 0,07) y los valores finales (0,61 ± 0,08) después de la administración del decocto de Gentianella alborosea. BI BL I. O. TE CA. DE. FA. RM. “Hercampuri” a dosis de 300 mg/Kg en Rattus norvegicus var albinus.. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.- Biomanantial. Historia de las plantas medicinales [en línea]. Soporte URL 2005. [Fecha de acceso 23 de Julio de 2011]. Formato html. Disponible en: http://www.biomanantial.com/historia-plantas-medicinales-a-87.html. 2.- Organización Mundial de la Salud. Estrategia de la OMS sobre Medicina Tradicional 2002 – 2005. [en línea]. Soporte URL 2005 [fecha de acceso 23 de Julio de 2011]. Formato pdf. Disponible en:. M. IC. A. http://whqlibdoc.who.int/hq/2002/WHO_EDM_TRM_2002.1_spa.pdf. UÍ. 3.- Chakma T. Análisis del efecto de las plantas medicinales en Bangladesh en la. O Q. duración del sueño [en línea]. Soporte URL 2006 [fecha de acceso 24 de Julio de. BI. 2011]. Formato pdf. Disponible en:. IA. Y. http://www. farmacia.ugr.es/ars/pdf/353.pdf. AC. 4.- Pavlusha J. Historia de la Medicina y Medicina Tradicional: Introducción al. RM. estudio de la Fitoterapia [en línea]. Soporte URL 2010 [fecha de acceso 24 de. FA. Julio de 2011]. Formato html. Disponible en:. DE. http://www.slideshare.net/.../fitoterapia-concep-desintox-3118441. TE CA. 5.- Laboratorios Hersil. Hercampuri – Gentianella Alborosea [en línea]. Soporte URL 2008 [fecha de acceso 24 de Julio de 2011]. Formato pdf. Disponible en:. BI BL I. O. http://www.hersil.com.pe/Cont3/pdf/hercampuri.pdf. 6.- Instituto Nacional de Salud. Hercampuri [en línea]. Soporte URL 2009 [fecha de acceso 24 de Julio de 2011]. Formato pdf. Disponible en: http://www.ins.gob.pe/repositorioaps/0/7/jer/.../Hercampuri_Vademecum.pdf. 7.- Toledo T. Efecto Del Monascus Sobre Albúmina, Creatinina, Urea Y Ácido Úrico En Conejos. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana. Setiembre – Diciembre. Buenos aires – Argentina. [en línea]. Soporte URL 2010 [fecha de acceso 24 de Julio de 2011]. Formato html disponible en: http://redalyc.uaemex.mx/pdf/535/53539403.pdf 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 8.- Ministerio Nacional de Salud. Instituto Nacional de Salud [en línea]. Soporte URL 2010 [fecha de acceso 24 de Julio de 2011]. Formato html. Disponible en: http://www.ins.gob.pe/. 9.-. Portal Iberoamericano Farmacéutico. Cada día más personas usan plantas medicinales como opción terapéutica [en línea]. Soporte URL 2001 [fecha de acceso 25 de Julio de 2011]. Formato html. Disponible en: http://www.pmfarma.es/.../689-cada-dia-mas-personas-utilizan-plantas-. IC. A. medicinales-como-opcion-terapeutica.html. acceso. 25. de. Julio. de. 2011].. Formato. pdf.. Disponible. en:. O Q. de. UÍ. M. 10.- Palacios E. Economía y plantas medicinales [en línea]. Soporte URL 2005 [fecha. BI. http://www.sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/publicaciones/consejo/.../pdf/a4.pdf. IA. Y. 11.- Palaci Villar L, Villavicencio V. Manual de Fitoterapia. EsSalud, OPS/OMS, [en. AC. línea]. Soporte URL 2010 [fecha de acceso 25 de Julio de 2011]. Formato pdf.. RM. Disponible en:. DE. FA. http://www.bvsde.paho.org/texcom/manualesMEC/fitoterapia/fitoterapia.html. TE CA. 12.- Ocaña S. Estudio de la Toxicidad Sub-Crónica de la Nano Planta en Rattus norvegicus var. albinus. Escuela De Bioquímica y Farmacia. Escuela Superior. BI BL I. O. Politécnica De Chimborazo. Riobamba – Ecuador. 2009. [en línea]. Soporte URL 2010 [fecha de acceso 25 de Julio de 2011]. Formato pdf. Disponible en: http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/123456789/205/1/56T00177.pdf. 13.- Hematología y Bioquímica de Rattus norvegicus var. Albinus Centro de Investigación. Hospital General Universitario de Valencia. 1990. [en linea]. Soporte URL 2005 [fecha de acceso 07 agosto de 2011]. Formato pdf. Disponible en: http://www.oc.lm.ehu.es/Fundamentos/doctorado/cursos/CirExp/Tecnicas/F-044.pdf. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 14.- Melby, E. (1990). Handbook of Laboratory Animal Science.CRC Press, Cleveland, Ohio. pp 74 – 76. 15.- Mongay F. Quimiometria 1a ed. España: Guada Impresiones S.L. 2005. Pp. 40, 44, 64, 83.. A. 16.- Llanos W, Llamoca M. Efecto del decocto Gentianella alborosea en Oryctolagus. BI. O Q. UÍ. Universidad Nacional de Trujil lo – Perú. 1995; 3-11.. M. IC. cunniculos con hiperlipidemia inducida. Tesis Bach. Farmacia y Bioquímica,. Y. 17.- Compassi S, Moritz W. Comparison of Cholesterol and Sitosterol Uptake in. AC. IA. Different Brush Border Membrane Models. American chemical Society. Soporte. RM. URL 2001 [fecha de acceso 15 de agosto de 2011]. Formato html. Disponible. DE. FA. en: http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/bi9620666. TE CA. 18.- Valenzuela A, Ronco M. Fitoesteroles Y Fitoestanoles: Aliados Naturales Para. O. La Proteccion De La Salud Cardiovascular. Revista chilena. Universidad de. BI BL I. Chile. Santiago de Chile. [en linea]. Soporte URL 2011 [fecha de acceso 15 de agosto de 2011]. Formato html. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s0717-75182004031100003&script=sci_arttext. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

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