NORMA TÉCNICA
NTC
COLOMBIANA
6126
2015-07-22
CALIDAD DEL AGUA.
DETECCIÓN Y RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS.
PARTE 1: RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS ARN
F ESPECÍFICOS
E: WATER QUALITY. DETECTION AND ENUMERATION OF
BACTERIOPHAGES. PART 1: ENUMERATION OF F SPECIFIC RNA BACTERIOPHAGES
CORRESPONDENCIA: esta norma es una adopción idéntica (IDT) respecto a su documento de referencia la norma ISO 10705-1: 1995.
DESCRIPTORES: calidad de agua; bacteriófagos.
I.C.S.: 07.100.20
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC) Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435
PRÓLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo.
La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último caracterizado por la participación del público en general.
La NTC 6126 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2015-07-22.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a través de su participación en el Comité Técnico 25 Microbiología.
ALIMENTOS CÁRNICOS S.A.S. ALPINA S.A.
ALQUERÍA S.A. ASINAL LTDA.
BECTON DICKINSON DE COLOMBIA S.A. BOLSA MERCANTIL DE COLOMBIA
COOPERATIVA COLANTA GRUPO ÉXITO LTDA.
INDUSTRIAS ALIMENTICIAS ZENU S.A. IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. LABORATORIOS SFC LTDA.
NULAB LTDA.
PAF LABORATORIOS LTDA.
Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las siguientes empresas:
ALGARRA S.A. BAVARIA S.A.
BIOCONTROL LTDA.
COMPAÑÍA NACIONAL DE CHOCOLATES EMPRESA DE ACUEDUCTO Y ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ S.A. E.S.P. FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A. FRUGAL S.A.
FUNDACIÓN LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA VEGETAL S.A.
GASEOSAS POSADA TOBON S.A. INGENIO PROVIDENCIA S.A. KOYOMAD S.A.
LA CAMPIÑA S.A.S.
LABORATORIO MICROBIOLÓGICO BARRANQUILLA LTDA.
LABORATORIOS CALIFORNIA S.A. LARKIN LTDA.
MEALS DE COLOMBIA S.A.S.
MINISTERIO DE LA PROTECCIÓN SOCIAL PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA PRODUCTORA DE JUGOS S.A.S.
PRODUCTOS LÁCTEOS EL RECREO S.A. SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE -SENA-
VILASECA S.A.S.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.
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RESUMEN
CONTENIDO
Página
0. INTRODUCCIÓN ... 1
1. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN ... 1
2. REFERENCIAS NORMATIVAS ... 1
3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES ... 2
4. PRINCIPIO ... 2
5. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD ... 2
6. DILUYENTE, MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS ... 2
6.1 MATERIALES BÁSICOS ... 2
6.2 DILUYENTE ... 3
6.3 REACTIVOS ... 3
6.4 CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS DE REFERENCIA ... 3
7. APARATOS Y MATERIAL DE VIDRIO ... 3
8. MUESTREO ... 5
9. PREPARACIÓN DE LOS MATERIALES DE ENSAYO ... 5
9.1 CULTIVO Y MANTENIMIENTO DE LAS CEPAS HUÉSPED WG 49 y E. coli K12 Hfr ... 5
9.2 CALIBRADO DE LAS MEDIDAS DE TURBIDEZ ... 6
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10. PROCEDIMIENTO ... 7
10.1 PROCEDIMIENTO NORMALIZADO ... 7
10.2 MÉTODOS PARA MUESTRAS QUE PRESENTEN UNA ABUNDANTE FLORA BACTERIANA ... 8
10.3 ENSAYO DE CONFIRMACIÓN ... 8
10.4 MUESTRAS CON BAJO RECUENTO DE FAGOS ... 9
10.5 ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ... 9
11. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS ... 9
12. INFORME DE ENSAYO ... 10
DOCUMENTO DE REFERENCIA ... 17
ANEXOS ANEXO A (Normativo) MEDIOS DE CULTIVO, REACTIVOS Y DILUYENTES ... 11
ANEXO B (Informativo) DESCRIPCIÓN GENERAL DE LOS BACTERIÓFAGOS ARN F ESPECÍFICOS ... 14
ANEXO C (Informativo) CULTIVO DEL BACTERIÓFAGO MS2 ... 15
ANEXO D (Informativo) MODIFICACIONES INTRODUCIDAS EN LA PRESENTE NORMA CON RELACIÓN AL DOCUMENTO DE REFERENCIA, LA NORMA ISO 10705-1:1995 ... 16
FIGURAS Figura 1. Matraces cónicos nefelométricos para el cultivo de las cepas huésped ... 4
Figura 2. Esquema para el cultivo, mantenimiento y control de calidad de la cepa huésped WG 49 ... 5
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RESUMEN
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CALIDAD DEL AGUA.
DETECCIÓN Y RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS.
PARTE 1: RECUENTO DE BACTERIÓFAGOS ARN F ESPECÍFICOS
0. INTRODUCCIÓN
En esta norma se han hecho modificaciones con respecto a su documento de referencia, la norma ISO 10705-1:1995, las cuales se relacionan en el Anexo C (Informativo).
1. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN
Esta norma específica un método para la detección y recuento de bacteriófagos ácido ribonucleico (ARN) F específicos por incubación de la muestra sobre una célula huésped de una cepa adecuada. El método puede aplicarse a todos los tipos de agua, sedimentos y lodos, tras dilución si es necesario. En caso de que la población sea baja, puede ser precisa una etapa de pre-concentración. El método puede aplicarse también a extractos de moluscos. Dependiendo de la abundancia relativa de bacteriófagos ARN F específicos con respecto a otros microorganismos, pueden ser necesarios ensayos confirmativos adicionales que también se especifican en esta norma.
La presencia de bacteriófagos ARN F específicos en una muestra de agua, generalmente indica polución por aguas residuales contaminadas con materias fecales de origen humano o animal. Su supervivencia en el medio ambiente, su eliminación en los procesos de amplia utilización en el tratamiento del agua y la concentración o retención en moluscos, se parece a la de los virus entéricos humanos presentes en el agua y en los alimentos, por ejemplo los enterovirus, el virus de la hepatitis A y los rotavirus.
2. REFERENCIAS NORMATIVAS
Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicación de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica únicamente la edición citada. Para referencias no fechadas, se aplica la última edición del documento normativo referenciado (incluyendo cualquier corrección).
NTC 5395, Agua para uso en análisis de laboratorio. Especificación y métodos de ensayo. NTC-ISO 5667-1, Calidad del agua, muestreo. Parte 1: Directrices para el diseño de programas y técnicas de muestreo.
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NTC-ISO 5667-3, Calidad del agua, muestreo. Parte 3: Directrices para la preservación y manejo de las muestras.
ISO 5667-2:1991, Water Quality. Sampling. Part 2: Guidance on Sampling Techniques.
ISO 6887:1983, Microbiology. General Guidance for the Preparation of Dilutions for Microbiological Examination.
ISO 8199:1988
,
Water Quality. General Guide to the Enumeration of Micro-Organisms by Culture.3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES
Para los propósitos de este documento normativo, se aplican los siguientes términos y definiciones.
3.1 Bacteriófagos RNA F específicos. Virus bacterianos capaces de infectar una célula
huésped de una cepa específica que posea pili sexuales o pili F que produzcan cajas de crecimiento visibles de lisis bacteriana, sobre un crecimiento de fondo de bacterias confluentes desarrolladas en condiciones apropiadas, mientras que el proceso infeccioso está inhibido en presencia de una concentración de 40 (a veces 400) g/ml de RNasa en el medio sembrado. …
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