Centra de lnuestipllión en lllmantación Y Desarrollo, A. c.
INACTIVACIÓN GENÉTICA DE ESPERMA E INDUCCIÓN DE GINOGÉNESIS Y DE TRIPLOIDÍA EN EL BOTETE DIANA Sphoeroides
annulatus, (JENYNS, 1842).
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LENIN ARIAS RODRIGUEZ 1,1111
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EN ACUICULTURA Y MANEJO At:81!1\I IA? :_:_ ..
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MAESTRIA EN CIENCIAS C.I.A.D, A.C.
RECIBIDO 1 4_ FEB. 2G:J2
60 l 7
BIBLIOTECA
MAZATLAN, SINALOA, MEX. SEPTIEMBRE DEL 2001
RESUMEN
El impulso del cultivo de peces marinos en México, como una alternativa a la camaronicultura, ha fomentado el interés en varias áreas de investigación en
especies de importancia comercial como es el botete diana Sphoeroides annulatus, con el fin de implementar las bases teóricas y prácticas de su cultivo. Dichas
prácticas y bases requieren de un manejo genético adecuado de la especie con el propósito de fijar en el genotipo algunos caracteres de interés como resistencia a parásitos, mayor crecimiento, etc., esto puede lograrse mediante biotecnologías como la manipulación crornos6mica, por ello el presente trabajo tuvo como objetivo ia inactivación genética de esperma, y le inducción de ginogénesis y de triploidía en el botete diana.
Se avaluó el efecto de cuatro soluciones extendedoras de la motilidad: solución fisiologica (SFIS), solución salina inmovilizadora de la motilidad (SSIM), solución Cortlan modificada (SCM), y la solución no activadora de le motilidad (SNAM), en la inmovilización del esperma, los resultados obtenidos Indican que la SFIS y SSIM, no permiten una adecuada inmovilización de los espermatozoides, mientras que la SCM y SSIM inmovilizaron adecuadamente los espermatozoides, pero al ser comparadas en tres diluciones (1:10, 1:20 y 1:50) y tres tiempos de exposición (5, 10 y 15 min), considerando parámetros de calidad del semen como son la duración del
movimiento en segundos (T), y los índices de motilidad (I.M.), se observó que la SSIM mostró valores de calidad del semen bajos. Sin embargo, la SCM generó valores de Te I.M. altos en las tres diluciones y tres tiempos de exposición, por lo que se sugiere el empleo de la dilución 1:50 para los experimentos de inactivación genética de esperma.
Se realizaron experimentos de carácter exploratorio, para comparar el efecto de nueve dosis (0.2 a 1.0 J/cm2) de radiación ultravioleta (UV) en los valoras de T e I.M. y en los porcentajes de sobrevivencia a las 24, 48 y 72 horas de incubación. Los
resultados indican que los valores T de las muestras que fueron irradiadas con las dosis 0.2 a 0.9 J/cm2 no fueron afectados, en la dosis 1.0 J/cm2 se identificaron valores nulos.
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irradiadas COl1 las dosis 0.2 a 0.9 Jlcm' no fueron afectados, en la dosis 1.0 J/cm2 "" idenüficaron valores nulos. Con la sobrevlver>cia, se describió la presencia del efecto Hertwlg, caracterizOOo por un descenso en las dosis de radiaciOn bajas. En las d s 0.5 a 0.8 J/crrf se identilic6 una ligera recuperación, con porcentajes altos en la dosis 0.7. La dosis 1.0
J/cm'-
mostro una sobrevivencia nula a las 72 horas de 111cubaci6n. Con los resultados obtenidos se contrastó el efecto de las dosis 0.5 a 0.9 Jlcrr1- en los ?arámelros Te I.M .. Los resultados de T mostraron valores apa¡entemente més altos que los obtenioos por el control, pero dichas diferer,das no fueron sigrnficativas. En los 1.M., las muestras irradiadas roostramn dos subgrupos (O 5 - 0.7 y O.a - 0.9 Jlem2 ).Con los resultados anterio,es se op mlzó la dosis de mdlacl6n mas adecuada [0.6, 0.7 y 0.8 J/cm') en la lnactivación genética de semen. El efecto se evaluó registrando los valores T e I.M., aj número de espennatoZO<des por mi de semen, la sobrev,vencia a las 3, 24, 48 y 72 hrs de Incubación, y las caracterlsticas morfológicas y de desarrollo a las 96 horas de Incubación utilizando cinco categorlas {A, B, C, D y E), desde normal (A) hasta completamente anormal (E).
Los resultados de Te I.M. mostraron un comportami..,,to similar al se alado en el experimento anterior. Los porcentajes de sobrev,vencla de los controles mostraron valores altos en relación con les muestras irradiadas. La dosás 0.7 J/cm' mostró la sobrevivenc,a más alta, siendo la más adecuada para los experimentos de diploidización. Los rasultados y los porcentajes de ocurrencia explican que la categoría A (embriones normales sin dalom,idades) y B (embnones con el sindrome haploide) estU\lleron en función de los tratamientos trtilizados. En el resto de categorlas (C, D y E) los valores de ,2 fueron bajos, pero la ocurrencia tuvo un Incremento sustancial en las muestras irradiadas.
También, fué evaluado el efecto del choque térmico (37.0 t 0.5 "C) en la Inducción de ginogénesis diploide y de triploid1a utilizando tres liempos posfertillzación (4, 6 y 10 min) y dos bempos de duración de choque (6 y 9 min), en muestres de sem..,, irradiadas (0.7 J/cm') y sin Irradiar ambas con el
choque té,mico y muestras contr!> de semen irradiado y sin Irradiar.
Simulttlneamente se comparó el empjeo de portaobjetos
y
fibras como superficies de adhesión.Los controles mostraron porcentajes de soorevjvencia
y
eciosl611 altos. Los lratamientos con una duración de nueve min de choque generó porcentajes de sobrevivencia bajosy
en los tratamientos con seis min de moque sa obtuvieron porcenta;es de sobrevivencia y eclosión altos an comparaci611 con su grupo homólogo. En las muestras de semen irradiadasy
con choque ténnico, k>s siete min posfertilización mostraron los mejores poroentajes de sobre\livenciay
eclosión (ginc,génesis),
y
en las muestras sin irradiar, los diez min posfertilización resultaron ser mejores (triplo1des). ambos con 6 min de choque.En las superlicies de adhesión los resultados indican sobrevivencias similares.
