Efecto Inhibitorio "In Vitro" De La Infusión De Anís Estrella (Illium Verum) Sobre El Crecimiento De Streptococcus Mutans

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(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. FO R. MA TI. CA. ESCUELA DE ESTOMATOLOGÍA. MA S. E. IN. “EFECTO INHIBITORIO “in vitro” DE LA INFUSIÓN DE ANÍS ESTRELLA (Illium verum) SOBRE EL CRECIMIENTO DE Streptococcus mutans”.. TE. TESIS. PARA OPTAR EL GRADO DE. DE. SI S. BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA AUTOR. OF. IC. IN. A. ELENA KARÍN VALLADARES OTOYA.. ASESOR. DR. GUSTAVO GUARDIA MÉNDEZ. CO-ASESOR DRA. ELVA MEJIA DELGADO. TRUJILLO – PERÚ 2011. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DEDICATORIA. CA. A Dios, Padre Bendito, por mostrarme cada día la belleza de la vida, por. MA TI. permitir compartir mis días al lado de una maravillosa familia, amigos que. E. IN. FO R. me entregan su amor y comprensión a cada momento.. MA S. A Tino y Clara, mis padres, el mejor regalo que el Señor me ha dado, con su ejemplo de perseverancia y de amor en cada momento me han. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. demostrado que siempre puedo contar con ellos.. A Persy, mi hermano querido, quien me muestra su apoyo y su amor en cada momento de manera incondicional y con él que sé que puedo contar siempre.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. A mis tíos Germán y Segundo, gracias por su apoyo. IN. FO R. MA TI. CA. desinteresado, consejos y por el amor brindado.. E. A Edy y Rosita, mis abuelitos, quienes me han dado ejemplo. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. de superación, amor y alegría.. OF. A mis amigos, quienes me han apoyado incondicionalmente durante estos seis años de vida universitaria compartiendo momentos imborrables en nuestras vidas. Gracias chicos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. AGRADECIMIENTOS. MA TI. Al Doctor Gustavo Guardia Méndez, mi asesor,. por su orientación, amistad y ayuda durante mis estudios universitarios. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. y en la realización de esta investigación.. A la Doctora Elva Mejía Delgado, mi Co-asesora,. DE. por brindarme la oportunidad de contar con su capacidad científica y. investigación.. OF. IC. IN. A. humana ;por su colaboración y apoyo en el desarrollo de esta. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESUMEN La presente investigación de tipo experimental “in vitro”, tuvo como propósito determinar el efecto inhibitorio de la infusión del fruto de anís. CA. estrella, sobre el crecimiento de Streptococcus mutans, con el fin de. MA TI. buscar nuevas alternativas para la prevención de caries dental.. FO R. Este estudio se realizo utilizando cinco diferentes concentraciones de la infusión de anís estrella (5%, 25%, 50%,75% y 100%), las cuales fueron. IN. puestas en contacto con el microorganismo de estudio y así se pudo. MA S. E. determinar el efecto en el crecimiento de este.. Los resultados finales indican que la inhibición en el crecimiento para este. TE. microorganismo fue evidente utilizando concentraciones al 25%, 50%,. DE. estrella al 5%.. SI S. 75% y 100%. No se observó inhibición al utilizar la concentración de anís. Estos hallazgos permiten situar a esta planta como una posible alternativa. IC. IN. A. en el campo de la odontología preventiva para la población.. OF. Palabras Claves: Infusión,. anís estrella, Streptococcus mutans,. inhibición bacteriana.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ABSTRACT. This experimental research "in vitro", was to determine the inhibitory effect. MA TI. to seek new alternatives for prevention of dental caries.. CA. of the infusion of star anise fruit, on the growth of Streptococcus mutans,. FO R. This study was conducted using five different concentrations of star anise infusion (5%, 25%, 50%, 75% and 100%), which were put in contact with. IN. the organism of study and so could be determined the effect on the growth. MA S. E. of this.. The results indicated that growth inhibition for this organism was evident. TE. using concentrations of 25%, 50%, 75% and 100%. No inhibition was. SI S. observed when using star anise concentration of 5%.. DE. These findings allow us to place this plant as a possible alternative in the. IC. IN. A. field of preventive dentistry for the population.. OF. Keywords: Tea, star anise, Streptococcus mutans, bacterial inhibition.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ÍNDICE. CA. DEDICATORIA. MA TI. AGRADECIMIENTOS RESUMEN. IN. INTRODUCCION…………………………………………………....... E. I.. FO R. ABSTRACT. Pág. 1 10. III. RESULTADOS ………………………………………….………….. 20. IV. DISCUSIÓN ……………………………….…………………............ 24. V. CONCLUSIONES …………………………………………...…....... 27. SI S. TE. MA S. II. MATERIAL Y MÉTODOS………………………………….……...... 28. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………....…………. 29. A. DE. VI. RECOMENDACIONES………………………………….……......... OF. IC. IN. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCION. La caries dental ha sido definida, tradicionalmente como una enfermedad multifactorial, que comprende la interacción de factores de huésped, la. CA. dieta y la placa dental1, 2. La caries dental es considerada como una. MA TI. enfermedad infecciosa y transmisible de los dientes, que se caracteriza por la desintegración progresiva de sus tejidos calcificados, debido a la. FO R. acción de microorganismos sobre los carbohidratos fermentables provenientes de la dieta. Como resultado se produce la desmineralización. E. consustanciales de la dolencia 3, 4,5.. IN. de la porción mineral y la disgregación de su parte orgánica, referentes. MA S. Se han planteado diferentes teorías del proceso carioso entre ellas se encuentra la Teoría Acidogénica. En la actualidad es la teoría que más se. TE. acerca a la etiología de la caries, fue propuesta por Miller en 1980 quien. SI S. plantea que las bacterias utilizan los carbohidratos de la dieta, usando la sacarosa como sustrato, y el resultado es la producción de acido, el cual. DE. inicia el proceso de desmineralización 6.. A. La placa dental ha sido definida como: una masa blanda, translúcida y. IN. muy adherente que se acumula sobre la superficie de los dientes,. IC. formada casi exclusivamente por bacterias y sus subproductos 3. La OMS. OF. la define como “Una entidad bacteriana proliferante, enzimáticamente activa, que se adhiere firmemente a la superficie dentaria y que por su actividad bioquímicamente metabólica ha sido propuesta como el agente etiológico principal en el desarrollo de la caries”. Su acumulación. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. constituye. una. sucesión. de. acontecimientos. muy. ordenados. y. organizados 7.. CA. De los muchos microorganismos presentes en la cavidad bucal,. MA TI. Streptococcus es el género que está implicado con mayor frecuencia en la formación de la placa dentaria y como causa de caries. 1-3,8.. Los Streptococos son cocos Gram positivos, generalmente acapsulados,. FO R. no motiles, facultativos, que se dividen en un solo plano, y pueden. IN. presentarse como cocos aislados, diplococos y, típicamente, en forma de cadenas debido a que no se separan fácilmente después de su división 5.. E. Poseen un metabolismo fermentador y tienen actividad catalasa negativa,. MA S. lo que los diferencia de los estafilococos 9. En la flora bacteriana de la placa se encontró que los cocos constituyen la mayor parte de la flora, y. TE. entre ellos especialmente los Streptococos11. Siendo el Streptococcus. SI S. mutans, el que se correlaciona con caries dental en los seres humanos8.. DE. El rol de S. mutans, en cuanto a su participación en la iniciación y progresión de la caries dental ha sido estudiado durante muchos años.. A. Algunas características fenotípicas de estas bacterias son determinantes. IN. en su cariogenicidad. Su capacidad de virulencia está asociada a varios. OF. IC. factores, como son su poder acidogénico, ya que metaboliza hidratos de carbono a ácidos; poder acidofílico pues es capaz de crecer a pH 5.2 y su carácter acidúrico, ya que puede mantenerse metabólicamente activo a pesar de un pH bajo 9. Hay que destacar que no todas las cepas poseen estas características y que unas son más patógenas que otras, por lo que. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ha cobrado una gran relevancia el estudio de variantes genotípicas dentro de la especie. Las propiedades de patogenicidad de algunas de ellas permiten su adaptación y crecimiento sobre la película adquirida del. CA. esmalte y así la colonización del diente. En esta etapa influyen, también. MA TI. factores exógenos como el mayor o menor consumo de sacarosa en la dieta. Para que S. mutans se disemine entre las superficies dentarias debe estar presente en cantidad suficiente en la saliva, para poder vencer. FO R. la resistencia a la colonización que opone la microbiota bucal normal 10,11.. IN. La habilidad de S. mutans, en cuanto a su participación en la formación de placa bacteriana, está relacionada con la producción de las. E. glucosiltransferasas, enzimas que tienen un rol principal en las adhesivas. y. expresión. MA S. interacciones. de. virulencia. de. estos. microorganismos debido a que catalizan la síntesis de polisacáridos. TE. extracelulares (glucanos solubles e insolubles en agua) que promueven la. SI S. adhesión de estreptococos cariogénicos a la superficie del diente. 11,12. .. DE. Dichas enzimas proporcionan a la célula un sustrato de dónde obtener energía y mantener la producción de ácido durante largos periodos de. IN. A. tiempo 12.. OF. IC. A partir del metabolismo de la sacarosa estos microorganismos producen principalmente ácido láctico, el cual es fundamental en la virulencia debido a que, aparentemente, es el ácido más potente que interviene en la desmineralización del diente 13.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Otra característica del S. mutans es su corto efecto post-pH, que puede definirse como el tiempo necesario para recuperar su actividad de crecimiento habitual, tras estar sometido a un bajo pH éste vuelve a la. CA. normalidad. Según lo expuesto, no es de extrañar que estas especies. MA TI. bacterianas sean las que consigan alcanzar más rápidamente el pH crítico 4.5 necesario para iniciar el proceso de desmineralización. S. mutans forma parte de la microbiota normal de la boca y aparece junto con la. 14. . Debido a esto el S. mutans es base de. IN. proporción relativa en la boca. FO R. erupción de las piezas dentarias, pero se hace patógeno al aumentar su. numerosos estudios destinados a investigar sobre la prevención. de. E. caries dental, poniendo especial énfasis en las medidas que controlen la. MA S. formación de placa bacteriana dental y así reducir la presencia del agente patógeno. Es así como, paralelo al desarrollo tecnológico de la industria. TE. farmacéutica, existe un gran interés por parte de los investigadores en. SI S. estudiar sustancias naturales que posean propiedades farmacológicas. DE. antibacterianas 15.. A. Las plantas medicinales han sido utilizadas desde épocas primitivas en el. IN. tratamiento de enfermedades. Durante mucho tiempo los fármacos. OF. IC. naturales y sobre todo las plantas medicinales, fueron el principal e incluso el único recurso del que disponían los médicos. Esto hizo que se profundizara en el conocimiento de especies vegetales con propiedades medicinales y que se ampliara la investigación a cerca de los productos que de ellas se extraen 15,16.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Anís estrella corresponde al fruto de la especie Illicium verum Hook. f. de la familia Illiaceae, árbol pequeño de hoja perenne, conocido como “badianero” que alcanza una altura de 8 a 15 m. Se presenta de color. CA. siempre verde, con hojas perennes de forma lanceolada y flores de color. MA TI. amarillo. Los frutos están formados por folículos en forma de barca, de color marrón rojizo, insertados en estrella sobre. un pecíolo central,. presentan de seis a once folículos careniformes, rugosos y de color pardo. FO R. rojizo. Cada folículo se abre por el borde superior permitiendo la. IN. observación de una semilla ovoide de color marrón brillante17. Se recolectan antes de su completa maduración cuando el contenido en. E. aceite esencial es máximo. Se cultiva de forma extensiva en el sureste de. MA S. China, su mayor exportador, pero también se encuentra en Laos, Filipinas, la zona oeste de Norteamérica y en el extremo noreste de la. TE. India18.. SI S. Los componentes activos principales del anís estrella son el abundante. DE. aceite esencial (5%- 8%), anetol (80-90%), tran-anetol, monoterpenos, aldehídos y cetonas anísicas, estragol, safrol, acidos grasos, flavonoides. estrella tiene. IN. Anís. A. y taninos 19.. efectos. farmacológicos como. expectorante y. OF. IC. antiespasmódico para el tracto gastrointestinal. Los aceites esenciales y los flavonoides actúan sobre el musculo liso del tracto gastrointestinal y sobre la mucosa del tracto respiratorio. El aceite esencial determina la acción aperitiva, carminativa, eupéptica, espasmolítico, antiséptica, antidiarreica, expectorante, emanagoga y galactogena. Se usa bastante. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. como corrector organoléptico de olor y sabor. En uso externo es parasiticida 20.. CA. En el ámbito odontológico, el importante crecimiento mundial de la. MA TI. fitoterapia dentro de programas preventivos y curativos ha estimulado la investigación con el fin de avalar la actividad antimicrobiana de distintos extractos de plantas con el fin de ayudar en el control de la placa. FO R. bacteriana y por consiguiente en la disminución de la incidencia de caries. IN. dental 15.. E. Mukhopadhyay R, Miró M, Sen P, Banerjee AB, en 2002 publicaron un. MA S. trabajo acerca de la acción antimicrobiana de ciertas plantas como el “Illicium verum conocido vulgarmente como anís estrellado”. Los estudios. TE. químicos realizados indican que la mayor parte de esta actividad. SI S. antimicrobiana se debe al anetol [1-metoxi-4-(1-propenil)-benceno]. DE. presente en el fruto desecado de esta planta. Ensayos de concentración mínima inhibitoria (CMI) con el anetol aislado, en comparación con un de. anetol,. A. patrón. indicaron. que. es. efectivo. sobre. diferentes. IN. microorganismos, entre los que se encuentran cepas de bacterias,. OF. IC. levaduras y hongos. (Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Candida albicans y Saccharomyces cerevisiae) 21.. Iauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, Blandino G, en. 2003.. Realizaron un estudio para evaluar la actividad antibacteriana de Althaea. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. officinalis L. raíces, flores Arnica montana L., Calendula officinalis L. flores, Hamamelis virginiana L. hojas, Illicium verum Hook. frutas y hojas de Melissa officinalis L., contra bacterias anaeróbicas y facultativas. Fusobacterium Eikenella. Porphyromonas. nucleatum,. corrodens,. gingivalis,. Capnocytophaga. Peptostreptococcus. Prevotella. CA. aeróbica:. gingivalis,. spp.,. Veillonella,. MA TI. periodontal. micros. y. Actinomyces. odontolyticus. Los extractos de metanol de virginiana H y A. montana y,. FO R. en menor medida, A. officinalis se demostró que poseen una actividad. IN. inhibidora (CMI <o = 2048 mg / L) en contra de muchas de las especies estudiadas. En comparación, M. officinalis y C. Extractos officinalis había. E. una menor actividad inhibitoria (CMI> o = 2048 mg / L) en contra de todos. MA S. los la especie estudiada, con la excepción de Prevotella. El extracto de. SI S. contra E. corrodens 22.. TE. Illiium verum demostró ser muy activa contra estas bacterias, en particular. DE. Debido a elevados costos en los tratamientos de las enfermedades bucales como la caries, muchas veces la población queda fuera del. A. alcance económico de ellos, por lo que es necesario buscar alternativas. IN. en la prevención de dicha enfermedad, que sean efectivas, fáciles de. OF. IC. obtener, de bajo costo y accesibles a la mayoría de la población.. Teniendo en cuenta la amplia y variada cantidad de propiedades curativas que presenta el anís estrella en diversas enfermedades, nace el interés en determinar la existencia de propiedad antimicrobiana frente al. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. microorganismo principal causante de la caries, siendo la enfermedad más frecuente de la cavidad oral. Puesto a que existen pocos estudios científicos orientados hacia el uso del anís estrella en el campo. CA. odontológico, el presente trabajo pretende contribuir a aumentar dicha. MA TI. información.. Por lo tanto, el propósito del presente estudio es conocer la concentración. FO R. mínima inhibitoria del anís estrella (Illium verum), sobre el crecimiento de. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. S. mutans, microorganismo principal en la etiología de caries dental.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.1 PROBLEMA ¿Cuál es la concentración mínima inhibitoria de la infusión de anís estrella. MA TI. CA. (Illium verum), sobre el crecimiento del Streptococcus mutans,” in vitro”?. 1.2 HIPÓTESIS. La infusión de anís estrella (Illium verum) inhibe el crecimiento de el. IN E. 1.3 OBJETIVOS. MA S. 1.3.1 Objetivo General . FO R. Streptococcus mutans “in vitro”.. Determinar el efecto inhibitorio “in vitro” de la infusión de anís. TE. estrella (Illium verum) a diferentes concentraciones sobre el. SI S. crecimiento de Streptococcus mutans.. Determinar si el efecto inhibitorio de la infusión de anís estrella. A. . DE. 1.3.2 Objetivos Específicos. IN. (Illium verum) varia al utilizar concentraciones al 5%, 25%,50%,. IC. 75% y. 100% de esta sobre el crecimiento del Streptococcus. OF. mutans.. . Determinar la concentración mínima inhibitoria de la infusión de anís estrella (Illium verum), sobre el crecimiento del Streptococcus mutans. para obtener el efecto inhibitorio deseado.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II. MATERIAL Y MÉTODOS. 2.1 TIPO Y ÁREA DE ESTUDIO. CA. El presente trabajo de investigación corresponde al tipo experimental. MA TI. “in vitro”. El cual se desarrolló en el Laboratorio del Departamento de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional. FO R. de Trujillo. 2.2 MUESTRA. IN. El cálculo para el número de ensayos se determinó mediante la. Siendo:. : Número de repeticiones a efectuar en cada investigación.. IN. A. n. DE. SI S. TE. MA S. E. fórmula:. para α = 0.05.. IC. Z α/2 : 1.96 :. S. : 0.6. OF. Zβ. 0.84 para β = 0.20. (x1 – x2) valor asumido por no haber estudios previos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Lo cual dio como resultado seis, que es el número mínimo de repeticiones por intervención.. MA TI. 6 colocándole infusión de Anís estrella al 75%.. CA. 6 colocándole infusión de Anís estrella al 100%.. 6 colocándole infusión de Anís estrella al 50%.. FO R. 6 colocándole infusión de Anís estrella al 25%.. TE. MA S. 6 colocándole tioglicolato.. E. IN. 6 colocándole infusión de Anís estrella al 5%.. SI S. 2.3 TÉCNICA Y PROCEDIMIENTO. DE. 2.3.1 PREPARACION DE LAS INFUSIONES DE ANIS ESTRELLA Para este estudio se utilizaron los frutos de anís estrella (Illium. IN. A. verum), los cuales fueron obtenidos en un puesto de venta de. IC. plantas medicinales de uso popular del mercado “Palermo” de la. OF. ciudad de Trujillo. Los frutos de anís estrella fueron triturados hasta reducirlos al menor tamaño posible, quedando completamente pulverizadas. Las infusiones se. prepararon de forma similar al uso cotidiano. (infusiones acuosas).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. De los frutos se pesaron 300 gramos y se llevaron a 300ml. de agua destilada, se llevó a ebullición durante 15 minutos en un recipiente tapado herméticamente para evitar, en lo posible, una. CA. cantidad considerable de perdida acuosa por evaporación.. MA TI. Posteriormente se filtro el agua con los frutos de anís estrella para impedir el paso de partículas mayores a la misma y se llevaron nuevamente a volumen (300ml.) Se colocaron en 5 frascos 5ml, 25ml, 50ml, 75ml y 100 ml de la. FO R. distintos la cantidad de. IN. infusión de anís estrella. Luego se añadió a cada frasco la cantidad faltante en mililitros de agua destilada hasta obtener la cantidad de. E. 100ml respectivamente a excepción del último frasco que contiene. MA S. 100 ml. De esta manera se obtuvieron las concentraciones al 5%,. TE. 25%, 50%, 75% y 100% respectivamente 14.. SI S. Cada una de ellas fue almacenada en frascos de color ámbar debidamente rotulados, que inmediatamente fueron esterilizados. DE. en autoclave por 15 minutos 121C a 15 libras de presión para su. IN. A. posterior experimentación.. IC. 2.3.2 OBTENCIÓN DE LA CEPA.. OF. Las cepas de Streptococcus mutans fue obtenida del cepario del Laboratorio del Departamento de Microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.3.3 PREPARACIÓN DE LA CEPA. Una vez obtenida las cepas, éstas fueron cultivadas en tubos de ensayo con tapa rosca conteniendo el medio Soya tripticasa,. CA. incubándose a 37 °C con el fin de obtener colonias jóvenes. Luego. MA TI. de 24 horas de cultivadas se les agregó solución salina estéril, obteniéndose una turbidez semejante al tubo número 1 de la escala. FO R. de Mac Farland.. IN. Los tubos que contenían la bacteria estudiada, fueron girados entre las manos durante 30 segundos, antes de proceder al sembrado,. 2.3.4 SEMBRADO.. MA S. E. para distribuir los microorganismos adecuadamente.. TE. Con un hisopo estéril, el cual fue embebido en el tubo de la cepa. SI S. de cada bacteria y a una distancia de 10 cm de la llama del. DE. mechero, se hará el sembrado en placas petri, conteniendo Agar Sangre, hisopando uniformemente sobre toda la superficie del agar. A. y girando cada placa 30 grados por 10 veces aproximadamente.. IC. IN. Las placas recién sembradas fueron colocadas dentro de una. OF. estufa a 37 ºC de temperatura durante 10 minutos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.3.5 DETERMINACION DEL EFECTO ANTIBACTERIANO (PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD). Para la prueba de susceptibilidad, se prepararon 5 diluciones a las. CA. concentraciones de 5%, 25%, 50%, 75% y 100%. Dichas diluciones. MA TI. se conservarán a 4 ºC para el estudio microbiológico.. Para la prueba de susceptibilidad se utilizó el método de Difusión. FO R. en Discos. Se prepararon discos de papel de filtro estériles, los. IN. cuales fueron sumergidos dentro de cada concentración de infusión de Illium verum, luego con una aguja estéril estos fueron colocados. E. sobre los cultivos de Streptococcus mutans en placas petri. MA S. previamente preparados. En las placas destinadas al grupo control. TE. se utilizó agua destilada.. SI S. Posteriormente las placas se incubaron a 37°C en microaerobiosis utilizando la Jarra Gas-Pack (con el método de la vela, mediante el. DE. cual se obtuvo un ambiente aproximado de 5 a 10 % de CO2). Todo. A. el procedimiento se llevó a cabo dentro del diámetro de 10 cm. de. IC. IN. la llama de un mechero.. OF. La siembra del microorganismo fueron seis, un control con dilución de. tioglicolato. y. las. otras. cinco. con. cada. una. de. las. concentraciones de la infusión de anís estrella. Los valores que se obtuvieron en las distintas concentraciones de la infusión de anís. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. estrella se compararon con el valor obtenido en la siembra a la que únicamente se colocó sólo tioglicolato, la cual sirvió de control. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas. Se midieron los halos de. CA. inhibición (susceptibilidad) de cada concentración de la infusión,. MA TI. incluyendo el área del disco de papel de filtro, con una regla. 2.3.6 DETERMINACION. DE. FO R. milimetrada, procediéndose de igual manera con el tioglicolato. LA. CONCENTRACION. IN. INHIBITORIA (CMI).. MINIMA. E. La determinación de la CMI se realizó por el método de Diluciones. MA S. en tubos, se utilizaron 10 tubos de ensayo enumerados del 1 al 10, en el tubo número 1 se colocó la infusión de anís estrella de una. TE. determinada concentración, en el tubo número 2 de colocará 0.2. SI S. ml. de infusión de anís estrella y 0.6 ml. de tioglicolato, en el tercer tubo se coloco 0.2 ml. de la dilución del tubo anterior y 0.2 ml. de y así sucesivamente hasta el tubo número 10;. DE. tioglicolato,. A. posteriormente se colocó 0.2 ml. de la dilución de la cepa. IN. (semejante a tubo #1 de Mac Farland) en cada uno de los 10 tubos,. IC. agitándolos para uniformizarlos. Los tubos fueron colocados en la. OF. estufa a 37 °C por 24 horas. Este procedimiento se realizó con cada uno de las diferentes concentraciones de infusión de anís estrella.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Posteriormente en los tubos que no presentaron turbidez (UFC’s), se determinó las cuentas viables, sembrando 0.1 ml. de solución de cada uno de los tubos en placas petri con siembra de la cepa. CA. estudiada, utilizando el asa de Driglasky para dispersar la muestra,. MA TI. dichas placas fueron colocadas en estufa por 24 hrs. a 37°C, luego de lo cual se procedió a la observación del crecimiento bacteriano mediante el conteo de las Unidades Formadoras de Colonias. FO R. (UFC´s), considerándose como la CMI a la menor concentración en. IN. la cual no se observó UFC’s. Todo el procedimiento se llevó a cabo. E. dentro del diámetro de 10 cm. de la llama de un mechero. MA S. .. TE. 2.4 INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS. OF. IC. IN. A. DE. (Anexo 1). SI S. Para el presente estudio se elaboró una ficha de recolección de datos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.5 OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES. Indicador. Tipo. Escala. CA. Variable. Independiente. Concentraciones. Discreta. Variable Dependiente. MA S. E. IN. 75% y 100%.. Cuantitativa. FO R. al: 5%, 25%,50%, Infusión de Anís Estrella. MA TI. Variable. crecimiento de las. DE. colonias de. colonias según. SI S. Inhibición del. TE. Conteo de. Streptococcus. Cuantitativa. Discreta. el número de. colonias. (UFC´s). OF. IC. IN. A. mutans. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.6 DEFINICIÓN DE VARIABLES. 2.6.1 Variable Independiente: Infusión de Anís Estrella.. CA. Las concentraciones de la infusión de anís estrella se obtiene. MA TI. colocando en frascos distintos la cantidad de 5ml, 25ml, 50ml, 75ml y 100 ml de infusión de anís estrella (previa preparación).. FO R. Posteriormente se añade la cantidad necesaria en milímetros de agua destilada hasta obtener en cada frasco la cantidad uniforme. IN. de 100ml. De esta manera se obtuvieron las concentraciones al. MA S. E. 5%, 25%, 50%, 75% y 100% peso /volumen respectivamente.. TE. 2.6.2 Variable Dependiente: Inhibición del crecimiento de las colonias. SI S. de Streptococcus mutans.. DE. Resultado de medir el crecimiento bacteriano mediante el conteo de las Unidades Formadoras de Colonias (UFC´s) en las placas. OF. IC. IN. A. petri respectivas.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.7. ANALISIS. ESTADISTICO. Y. INTERPRETACION. DE. LA. INFORMACION Con la información recolectada se construyó una base de datos que. CA. fue procesado de manera automatizada con el soporte del paquete. MA TI. estadístico SPSS - 15.0, para luego presentar los resultados en tablas estadísticas de entrada simple y doble, de acuerdo a los objetivos propuestos.. FO R. En el análisis estadístico se hizo uso de la prueba Chi cuadrado de independencia de criterios, considerando que existen evidencias. IN. suficientes de significación estadística si la probabilidad de. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. equivocarse es menor al 5% (p<0.05).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. III. RESULTADOS. En el presente estudio de tipo experimental “in vitro”, cuyo propósito fue. CA. de determinar el efecto de inhibición de la infusión anís estrella en el. MA TI. crecimiento del Streptococcus mutans, se utilizaron 5 concentraciones de la infusión de anís estrella (5%, 25%, 50%, 75% y 100%) y un grupo. FO R. control, se hallaron los siguientes resultados:. IN. Con respecto al promedio de Diámetro de inhibición: al 5% y grupo control. E. no presento halo de inhibición, al 25% con diámetro de 1.23cm, al 50% y. MA S. 100% con 1.48cm y 1.46cm respectivamente, al 75% presentó el valor de 2.58 cm. Presentando esta última concentración mayor susceptibilidad. SI S. TE. antibacteriana. (TABLA 1 y 2). Respecto a los valores de unidades formadoras de colonias: al 5%. DE. presentó el valor de 2.55, al 25% con 0.75, al 50% con -1.20, al 75% con 1.08 y al 100% con un valor de -2.12. Según la prueba de kruskal-Wallis. IN. A. la concentración al 25% se obtuvo como la Concentración Mínima. OF. IC. Inhibitoria. (CUADRO 1). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 1. Análisis de Varianza para Diámetro del Halo de Inhibición como indicador de la suceptibilidad del Streptococcus mutans frente a. CM. Concentraciones 29.489. 5. 5.898. Error. 0.463. 30. 0.015. Total. 29.952. 35. F. P. 381.871. 0.000. IN. FO R. gl. E. SC. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. FV. MA TI. CA. cada concentración de infusión anís estrella.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 2. Medidas descriptivas de Promedios y Desviaciones. estándar del. Halo de Inhibición como indicador de la suceptibilidad del. CA. Streptococcus mutans frente a cada concentración de infusión anís. MA TI. estrella. (Prueba de Duncan).. Grupo Control. 6. 5%. 6. 25%. 6. FO R. S 0. 0. 0. 6. 1.4833. 0.1169. 6. 2.5833. 0.2563. 6. 1.4667. 0.0816. OF. IC. IN. A. DE. SI S. 100%. X cm 0. 0.0816. MA S. 75%. 0.05. 1.2333. TE. 50%. Nivel de Significancia. IN. ni. E. Concentraciones infusión anís estrella. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CUADRO 1. Medidas descriptivas de Mediana y Promedios de Conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) de Streptococcus mutans de la Concentración mínima inhibitoria de la. CA. como indicador. N. Mediana. Clasificación. Anís estrella.. FO R. Concentraciones. MA TI. Infusión Anís Estrella. (Prueba de KRUSKAL-WALLIS). Z. del promedio. 10. 1.95500E+02. 36.0. 1.10. 5%. 10. 2.07500E+02. 43.4. 2.55. 25%. 10. 1.98500E+02. 34.3. 0.75. 50%. 10. 9.55000E+01. 24.4. -1.20. 75%. 10. 0.000000000. 25.1. -1.08. 100%. 10. 0.000000000. 19.8. -2.12. General. 60. 30.5. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. Grupo Control. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IV. DISCUSIÓN El presente estudio de tipo experimental “in vitro”, tuvo como propósito determinar el efecto inhibitorio de la infusión de anís estrella sobre el. CA. crecimiento del Streptococcus mutans, utilizando cinco concentraciones. MA TI. diferentes de infusión (5%, 25%, 50%, 75% y 100%), el procedimiento se realizo de acuerdo con lo que se ha reportado en la literatura y con. IN. microbiología de la facultad de medicina.. FO R. procedimientos que se han utilizado en el laboratorio del departamento de. buscan. explicar. y dar a conocer. MA S. medicinales. E. La mayoría de estudios realizados hasta el momento sobre las plantas sus propiedades. antibacterianas frente a ciertos microorganismos, dando así diversas. TE. alternativas en tratamientos, surgiendo en la actualidad diversos estudios. muy utilizada las. 14, 15, 16,20. . En el ámbito odontológico es. SI S. que confirma dichas propiedades. propiedades de diversas plantas medicinales como. DE. parte de tratamientos preventivos y curativos, obteniéndolos en. IN. A. presentaciones como enjuagues, pastas dentales, cremas, etc.. IC. Debido a que no hay estudios antecesores sobre el efecto inhibitorio del. OF. anís estrella sobre el streptococcus mutans, este estudio se centra en determinar cierta relación. En la literatura se ha reportado que taninos, compuestos fenólicos, aceites y otros principios de ciertos vegetales, pueden tener un efecto inhibitorio sobre las células bacterianas. 16, 17,18. .. Los reportes científicos de Mukhopadhyay R, Miró M, Sen P, Banerjee. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. AB, en 2002 actividad. 21. , publicaron estudios químicos realizados sobre la. antimicrobiana. del. anís. estrella. sobre. bacterias. del. gastrointestinales indicando que la mayor parte de esta actividad. CA. antimicrobiana se debe al anetol [1-metoxi-4-(1-propenil)-benceno]. MA TI. presente en el fruto desecado de esta planta, los resultados obtenidos en esta investigación muestran relación con respecto al estudio anterior sobre el efecto inhibitorio del anís estrella frente al Streptococcus mutans. FO R. a concentraciones al 25%, 50%, 75% y 100% , el cual se vio determinado. IN. por el compuesto del anetol.. E. Estudios reportados por Iauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, 2003. 22. .. Demostraron la existencia de suceptibilidad. MA S. Blandino G, en. bacteriana de anís estrella frente a microoganismos causantes de la. anís estrella sobre principales microorganismos. SI S. los componentes del. TE. enfermedad periodontal, dando a conocer el amplio poder inhibitorio de. DE. causantes de dicha enfermedad.. A. De esta manera el efecto inhibitorio del anís estrella, el cual se observó en. IN. la investigación sobre el strepotococcus mutans, es similar al que se ha 14,17.. Lo anterior sugiere que. OF. IC. observado con otras especies vegetales. podría haber más de una especie vegetal que tuviera la capacidad inhibitoria del crecimiento de este microorganismo, lo cual pone de manifiesto el potencial terapéutico que tiene la flora y en particular el anís estrella, al ser utilizada en el campo de la prevención siendo este tipo de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. investigaciones necesarias para poder proporcionar otras alternativas de tratamientos preventivos a nivel bucal dando a conocer a la población las. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. propiedades medicinales de esta planta.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. V. CONCLUSIONES . La infusión de anís estrella tiene efecto inhibitorio sobre el crecimiento. Se demostró que la concentración al 75% de infusión anís estrella. MA TI. . CA. de Streptococcus mutans a partir de la concentración al 25%.. (Illium verum) obtuvo mayor efecto inhibitorio en el crecimiento de. No se observó efecto inhibitorio de la concentración al 5% de la. IN. . FO R. Streptococcus mutans.. . MA S. E. infusión anís estrella sobre el crecimiento del Streptococcus mutans.. Se demostró que la concentración al 25% de infusión estrella (Illium. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. verum) es la concentración mínima inhibitoria.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI. RECOMENDACIONES. . Seguir realizando estudios con plantas medicinales para encontrar. . MA TI. CA. nuevas alternativas de prevención de enfermedades bucales.. Continuar las investigaciones a nivel nacional, para poder determinar. FO R. mediante diversos estudios las propiedades filoterapéuticas a nivel. Comprobar clínicamente el efecto inhibitorio de los frutos de anís. E. . IN. cariogénico.. MA S. estrella (Illium verum), sobre el crecimiento de microorganismos. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. cariogénicos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1. Hinostroza G., Arana A. Diagnostico de Caries Dental.. CA. Universidad Peruano Cayetano Heredia; 2005.. Lima: Editorial. MA TI. 2. Pérez A. Caries Dental en dientes deciduos y permanentes jóvenes. Lima: Editorial Universidad Peruana Cayetano Heredia. Perú; 2004. Operatoria Dental, Arte y. FO R. 3. Studervant C. Roberson T, Heymann H.. Ciencia. 3ª ed. Mexico: MC Graw-Hill Interamericana; 2001. R y Navia J. “Bases Biológicas de la Caries. IN. 4. Menaker. L, Horhart. E. Dental”. 3 ª ed. Salvat; 1986.. MA S. 5. Graham J. Conservacion y restauración de la estructura dental. 1ª. ed. Madrid: Editorial Panamericana; 1999. E.. Cariología.. TE. 6. Newbum. 4ª. ed.. Mexico:. Nueva. Editorial. SI S. Interamericana; 1985.. 7. Urzúa I, Stanke F. Nuevas Estrategias en Cariología. Factores de. DE. Riesgo y Tratamiento. 3ª ed. Stgo de Chile: Arancibia; 1999.. A. 8. Kats, Mc Donald, Stookey S. Odontologia Preventiva en Acción. 3ª ed.. IN. Buenos Aires: Editorial Médica Panamericana; 1990.. IC. 9. Mouton C, Robert J-C. Bacterias grampositivas. En: Mouton C, Robert. OF. J-C. Bacteriología bucodental. Barcelona: Masson; 1995.. 10. Keyes PH. Recent advances in dental caries research. Bacteriological findings and biological implications. Int. Dent. J. 1962; 12(4):443-464.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 11. Street CM, Goldner. M and Le Riche WH. Epidemiology of Dental. Caries in Relation to Streptococcus Mutans on Tooth Surfaces in 5-. CA. Year-Old Children. Archs. Oral Biol. 1976 ;( 21):273-275. 12. Fitzgerald RJ, Keyes PH. Demostration of the etiologic role of. MA TI. streptococci in experimental caries in the hamster. J Am Dent Assoc.. FO R. 1960; (61): 9-33.. 13. Loesche WJ. Antimicrobials, Can They Be Effective. In: Cariology. IN. Today. Int. Congr., Zürich 1983; 293-300.. E. 14. De León A. Estudio del efecto inhibitorio de la infusión de corteza de. MA S. Encino (Quercus peduncularis), sobre microorganismos cariogenicos.. SI S. Odontología; 2001.. TE. [Tesis doctoral]. Guatemala: Universidad de San Carlos, Facultad de. 15. Rodrigues. C.” Eficacia Antimicrobiana de Soluçiões Irrigadotas de. DE. Canais Radiculares. [Tesis doctoral].Brasil: Medicina Tropical de. A. Universidad Federal de Goiás; 2000.. IN. 16. Cecchini T. Enciclopedia de las hierbas y plantas medicinales.. OF. IC. Barcelona: editorial de Vecchini, S.A; 1973. 17. Arévalo A, Caracterización de la finca cooperativa agrícola integral Chirrepec, R.L. Cobán, Alta Verapaz; con énfasis a la producción y comercialización del Té (Camelia sinensis), estudio de sistemas, Guatemala: Universidad de San Carlos, Facultad de Agronomía; 1990.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 18. Alonso JR. Tratado de Filomedicina Médica: Bases Clínicas y Farmacológicas. Buenos Aires: Isis; 1998.. CA. 19. Ize-Ludlow D, Ragone S, Bernstein JN. Chemical composition of Chinese star anise (Illicium verum) and neurotoxicity in infants. JAMA. Rodríguez R.. P, Serrano O, Castro P, Panadero E,. FO R. 20. Brandstrup A, Vázquez. MA TI. 2004; 291: 562-563.. Anís estrellado, ¿es realmente inocuo? Acta Pediátra. IN. (Esp) 2002; 60 (1): 42-44.. E. 21. Mukhopadhyay R, Miró M, Sen P, Banerjee AB. Antimicrobial properties. MA S. of star anise (Illicium verum Hook. f.). Phytotherapy Research 2002; 16. TE. (1): 94-95.. SI S. 22. Iauk L, Lo Bue AM, Milazzo I, Rapisarda A, Blandino G. Antibacterial activity of medicinal plant extracts against periodontopathic bacteria.. OF. IC. IN. A. DE. Phytother Res.2003; 17(6):599-604.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. ANEXOS. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 01. Concentración Infusión de anís estrella.. MA TI. CA. FICHA PARA RECOLECCION DE DATOS.. Número de Repeticiones.. 2. 4. 5. 6. E. IN. 100% p/v. 3. FO R. 1. MA S. 75% p/v. SI S. DE. 25% p/v. TE. 50% p/v. IN. A. 5% p/v. OF. IC. Grupo control. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 02 EVALUACIÓN DE LA TESIS El Jurado deberá:. CA. a. Consignar las observaciones u objeciones pertinentes relacionadas a los siguientes ítems.. MA TI. b. Anotar el calificativo final. c. Firmar los tres miembros del jurado.. FO R. TESIS:………………………………………………............................………… ………………………………………………………………………………………. IN. ……………………………………………………………………………………… 1. DE LAS GENERALIDADES. E. El Título: ……………………………………………………………………….. MA S. …………………………………………………………………………………. Tipo de Investigación: ……………………………………………………….. TE. .………………………………………………………………………………….. SI S. 2. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN Antecedentes: ………………………………………………………………... DE. Justificación: …………………………………………………………………. Problema:……………………………………………………………………... IN. A. ………………………………………………………………………………….. IC. Objetivos: …………………………………………………………………….. OF. Hipótesis: ……………………………………………………………………. Diseño de Contrastación:…………………………………………………… Tamaño Muestral:…………………………………………………………… Análisis Estadístico: …………………………………………………………. 3. RESULTADOS:……………………………………………………………….. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 4. DISCUSIÓN: …………………………………………………………………. 5. CONSLUSIONES: …………………………………………………………… 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ………………………………………. ………………………………………………………………………………….. CA. 7. RESUMEN: ……………………………………………………………………. MA TI. …………………………………………………………………………………. 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN: ………………………………….. FO R. …………………………………………………………………………………. 9. ORIGINALIDAD: …………………………………………………………….... IN. 10. SUSTENTACIÓN:. 10.1Formalidad: ……………………………………………………….... E. 10.2Exposición:………………………………………………………….. TE. CALIFICACIÓN. MA S. 10.3Conocimiento del Tema: ………………………………………….. JURADO. DE. SI S. (Promedio de las 03 notas del jurado). Nombre. Código. Firma. IN. A. Presidente: Dr. ………………………….. ………………… ……………….. IC. Grado Académico: ………………………………………………. OF. Secretario: Dr. ………………………….. ………………… ………………. Grado Académico: ……………………………………………… Miembro: Dr. …………………………… ………………… ………………. Grado Académico: ………………………………………………. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 03 RESPUESTAS DEL TESISTA A OBSERVACIONES DEL JURADO. MA TI. jurado a manuscrito en el espacio correspondiente:. CA. El Tesista deberá responder en forma concreta a las observaciones del. Fundamentando su discrepancia.. b.. Si está de acuerdo con la observación registrada.. c.. Firmar.. FO R. a.. TESIS: …………………………………………………………............................ IN. ………………………………………………………………………………………. MA S. 1. DE LAS GENERALIDADES. E. ………………………………………………………………………………………. El Título: ………………………………………………………………………. TE. …………………………………………………………………………………. SI S. Tipo de Investigación: ……………………………………………………… ………………………………………………………………………………….. DE. 2. DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN Antecedentes: ………………………………………………………………... A. Justificación: ………………………………………………………………….. IN. Problema:……………………………………………………………………... IC. ………………………………………………………………………………….. OF. Objetivos: …………………………………………………………………….. Hipótesis: …………………………………………………………………….. Diseño de Contrastación:…………………………………………………… Tamaño Muestral:…………………………………………………………… Análisis Estadístico: …………………………………………………………. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 3. RESULTADOS:………………………………………………………………. 4. DISCUSIÓN: …………………………………………………………………. 5. CONSLUSIONES: ……………………………………………………………. CA. 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ……………………………………….. MA TI. …………………………………………………………………………………. 7. RESUMEN: ……………………………………………………………………. FO R. …………………………………………………………………………………. 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN: ………………………………….. IN. ………………………………………………………………………………….. 10. SUSTENTACIÓN:. MA S. E. 9. ORIGINALIDAD: …………………………………………………………….... TE. 10.1Formalidad:………………………………………………………………. SI S. 10.2Exposición: ………………………………………………………………. OF. IC. IN. A. DE. 10.3Conocimiento del Tema: ……………………………………………….. ……………………………………… Nombre Firma. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. CA. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGÍA. MA TI. CONSTANCIA DE ASESORAMIENTO DE TESIS. YO, Gustavo Guardia Méndez, Cirujano dentista, Docente principal a. FO R. dedicación exclusiva de la Escuela de Estomatología, Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, dejo constancia de haber. IN. asesorado la tesis titulada: “EFECTO INHIBITORIO “in vitro” DE LA DE. ANÍS. ESTRELLA. (illium. E. INFUSIÓN. verum). SOBRE. EL. MA S. CRECIMIENTO DE Streptococcus mutans” cuyo autor es la alumna Elena Karin Valladares Otoya, alumna de la. mencionada escuela. Trujillo, 21 de Enero del 2011.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. identificada con Nº de matrícula 0022100305.. Dr. Gustavo Guardia Méndez. ASESOR COP: 3221. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. CA. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGÍA. FO R. MA TI. CONSTANCIA DE ASESORAMIENTO DE TESIS. YO, Elva Mejía Delgado, Docente asociado. a tiempo completo de la. IN. Facultad de Medicina - Departamento de Microbiología, de la Universidad. ESTRELLA. (illium. Streptococcus. “in vitro” DE LA INFUSIÓN. MA S. INHIBITORIO. verum). SOBRE. EL. DE ANÍS. CRECIMIENTO. mutans” cuyo autor es la alumna. TE. “EFECTO. E. Nacional de Trujillo, dejo constancia de haber asesorado la tesis titulada:. DE. Elena Karin. SI S. Valladares Otoya, alumna de la Escuela de Estomatología de la Universidad Nacional de Trujillo identificada con Nº de matrícula. Trujillo, 21 de Enero del 2011.. OF. IC. IN. A. DE. 0022100305.. Dra. Elva Mejía Delgado. CO-ASESOR CMP: 3147. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

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