Efecto In Vitro Del Aceite Esencial Del Eucalyptus Globulus (Eucalipto) En Diferentes Concentraciones Sobre Cepas Estandarizadas Del Enterococcus Faecalis Atcc 29212

Texto completo

(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. IN. FO R. MA TI. CA. FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE ESTOMATOLOGÍA. SI S. TE. MA S. E. “EFECTO IN VITRO DEL ACEITE ESENCIAL DEL Eucalyptus globulus (EUCALIPTO) EN DIFERENTES CONCENTRACIONES SOBRE CEPAS ESTANDARIZADAS DEL Enterococcus faecalis ATCC 29212”. TESIS. PARA OPTAR EL GRADO DE. A. DE. BACHILLER EN ESTOMATOLOGÍA Autor:. OF. IC. IN. PETER ALEXANDER MORALES CASTILLO Asesor:. DR. CESAR A. JIMÉNEZ PRADO Trujillo - Perú 2012. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. INDICE. RESUMEN………………………………………………………………………… INTRODUCCIÓN……………………………………………………... 01. II.. MATERIAL Y MÉTODO…………………………………………........11. III.. RESULTADOS……………………………………………………...….22. IV.. DISCUSIÓN…………………………………………………………….27. V.. CONCLUSIONES……………………………………………………...31. VI.. RECOMENDACIONES…………………………………….….………32. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………...33. VIII.. ANEXOS………………………………………………...……………...38. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. I.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DEDICATORIA. CA. A Dios….por haberme permitido llegar hasta este punto y haberme dado. MA TI. salud para lograr mis objetivos, además de su infinita bondad y amor.. FO R. Margarita y Alejandro... mis padres, por ser quiénes son y estar conmigo incondicionalmente durante todos estos años; quienes me. E. IN. dieron su apoyo y comprensión.. MA S. A mi hermana Karin, por cuidarme tanto, por demostrarme un amor inigualable, porque siempre he contado con ella para todo,. DE. SI S. TE. por guiarme y ser un ejemplo para mí.. A mis amigos… Que nos apoyamos mutuamente en nuestra formación. OF. IC. IN. A. profesional y que hasta ahora, seguimos siendo amigos.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. AGRADECIMIENTO. CA. A la Dra. Elva Mejía Delgado,. MA TI. por su inestimable ayuda, sus consejos, su cuidado, y su detallado trabajo realizado conmigo. FO R. en la ejecución del proyecto.. IN. Al Dr. Cesar A. Jiménez Prado, mi asesor, por su constante orientación, tiempo y paciencia,. MA S. E. por haber hecho posible el desarrollo y. TE. la culminación de esta investigación.. SI S. . Al Dr. Guillermo Ruiz, por su valiosa y generosa asistencia durante la investigación, misma que significó una importante fuente. DE. el desarrollo de esta. A. por haber hecho posible el desarrollo y. OF. IC. IN. la culminación de esta investigación.. Por último, pero no menos importante, quiero dar las gracias a. todos mis compañeros. De una forma u otra han colaborado en el. término de este trabajo. Especialmente y quienes han estado más cerca de mí, que son Ellen Mejía Gil y Rosario Aguilar León.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESUMEN. El presente estudio de investigación de tipo experimental comparativo. CA. tuvo como objetivo conocer la susceptibilidad bacteriana in vitro del. MA TI. Enterococcus faecalis frente a diferentes concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) en comparación con. FO R. hipoclorito de sodio al 2.5%.. El efecto antibacteriano (halo de inhibición) se determino mediante la. IN. técnica por difusión en Agar, formándose 5 grupos experimentales, correspondientes a 4 concentraciones de aceite esencial, y un grupo. MA S. E. control donde se utilizó únicamente hipoclorito de sodio al 2.5%, La muestra estuvo constituida por 80 repeticiones realizadas (con aceite. TE. esencial de eucalipto a diferentes concentraciones o con hipoclorito de sodio al 2.5%) en cada placa petri con la cepa de Enterococcus faecalis.. SI S. Se encontró que la susceptibilidad bacteriana in vitro del Enterococcus. DE. faecalis frente al aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) al. IN. A. 100% y 75% fue mayor en comparación con hipoclorito de sodio al 2.5%.. IC. Palabras Clave: Susceptibilidad bacteriana, efecto antibacteriano,. OF. Enterococcus faecalis, aceite esencial de Eucalyptus globulus.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ABSTRACT. The objective of this comparative experimental study is knowing bacterial Enterococcus. of. essential. faecalis. oil. in. vitro. Eucalyptus. against. different. globulus. essential. oil. MA TI. concentrations. of. CA. susceptibility. (eucalyptus) compared with 2.5% sodium hypochlorite.. The antibacterial effect (growth inhibitory zone) was determined by the. FO R. Agar diffusion method; there were used 5 experimental groups,. IN. corresponding to 4 increasing essential oil concentrations; and a control group, where there was used 2.5% sodium hypochlorite only.. E. The sample consisted of 80 repetitions (with eucalyptus essential oil at. dish. with. Enterococcus. MA S. different concentrations or with 2.5% sodium hypochlorite) in each petri faecalis. strain.. We. found. that. bacterial. TE. susceptibility in vitro against Enterococcus faecalis with Eucalyptus. SI S. globulus (eucalyptus) essential oil at 100% and 75% was higher compared. DE. with 2.5% sodium hypochlorite.. A. Keywords: Bacterial susceptibility, antibacterial effect, Enterococcus. OF. IC. IN. faecalis, Eucalyptus globulus essential oil.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.. INTRODUCCION. La cavidad oral incluyendo en ella a la superficie de los dientes y de las encías, es una de las regiones del cuerpo humano que. CA. posee la flora microbiana más variada y compleja. (1). MA TI. La presencia de microorganismos en la boca comienza a manifestarse desde pocas horas del nacimiento del niño. Si bien es. FO R. cierto que en el momento del alumbramiento, la boca esta excenta de microbios y es por tanto estéril. Durante la aparición de los. IN. primeros dientes, se incorporan a la flora normal de la boca las. MA S. lactobacilos. (1). E. espiroquetas, bacteroides, fusobacterios, vibriones anaeróbicos y. TE. El tratamiento de conductos pretende prevenir y/o curar la patología periapical. La causa más frecuente de esta patología son. SI S. los microorganismos. Una de las causas más importantes que. DE. dificultan la eliminación de los microorganismos es la anatomía del sistema de conductos. Las zonas a tratar son variadas y de. A. características. diferentes,. distinguiendo. entre. anatomía. IC. IN. macroscópica y microscópica. (3). OF. En la mayoría de áreas de la anatomía macroscópica se limpian. con las limas y el líquido irrigante es el encargado de reducir la infección en las áreas microscópicas, ya que existen estudios que afirman que hay zonas del sistema de conductos que son inaccesibles para las limas pero no para el irrigante. (3). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Pero a pesar del trabajo en conjunto del sistema de instrumentado e irrigante se encuentra en conductos la presencia de bacterias anaerobias. CA. El no correcto tratamiento conlleva a crear un microhabitad para. MA TI. microorganismos oportunistas y ello son los anaerobios facultativo y anaerobios estrictos.. FO R. Los fracasos endodónticos se asocian con la presencia de determinadas bacterias anaerobias como: Enterococcus faecalis, nucleatum,. Porphyromonas. IN. Fusobacterium. endodontalis. y. que. dichas. bacterias. MA S. demostrado. E. gingivalis, Actinomyces israelí y Propioni bacterium acnés. Se a penetran. a. diferentes. profundidades en los túbulos dentinarios y entre ellas las más. TE. sobresaliente son: el Enterococcus faecalis, Propioni bacterium. SI S. acnés y el Actinomyces israelí que son capaces de resistir tanto las adversidades del medio, como las constricción tubular y los. DE. procesos odontoblásticos, por ser capaces de replicarse y avanzar. A. en los túbulos, gracias a sus peculiares características fisiológicas. IC. IN. y morfológicas. (4). OF. El Enterococcus faecalis ha sido el microorganismo patógeno más. asociado a las infecciones endodónticas persistentes, este microorganismo es el que mejor se adapta y tolera las condiciones ecológicas existentes en los conductos radiculares obturados,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. gracias a ciertas características microbiológicas como sus factores de virulencia y su capacidad de formar biopelículas.(5) La microbiota que se encuentra en los dientes con fracaso en el endodóntico. es. predominantemente. anaerobia. CA. tratamiento. MA TI. facultativa y Gram positiva, siendo Enterococcus faecalis la especie que se aísla con mayor frecuencia. (6). FO R. El E. faecalis es una bacteria gran positiva oportunista, capaz de resistir condiciones extremas, y mantener su viabilidad por períodos. en. ausencia. de. IN. extensos. nutrientes,. volviéndose. E. resistente a la desinfección del sistema de conductos radiculares.. MA S. También es capaz de suprimir el crecimiento de otras bacterias lo que explica el por qué son capaces de crecer como una. TE. monoinfección, en ausencia de interacciones sinérgicas. Se ha. SI S. reportado una prevalencia entre el 22% y 77% de los casos, encontrándose como una de los principales especies bacterianas. DE. responsables de los fracasos endodónticos, ya que se han. A. asociado a la formación de biofilms en infecciones endodónticas. IC. IN. refractarias, siendo poco frecuente en infecciones primarias. (7). OF. La importancia clínica terapéutica del Enterococcus faecalis ha. aumentado, debido a que esta bacteria es difícil de controlar con los medicamentos que se utilizan dentro del conducto actualmente. La instrumentación mecánica, sola o en combinación con agentes. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. de irrigación antimicrobianos, ha mostrado ser insuficiente para la completa eliminación de microorganismos. (8) Diversas soluciones se aplican en la irrigación, entre ella tenemos:. CA. hipoclorito de sodio (0.5% a 5.25%), gluconato de clorhexidina,. MA TI. solución saturada de hidróxido de calcio, agentes quelantes, solución salina, soluciones anestésicas peróxido de hidrogeno 3%,. FO R. peróxido de urea, ácidos fosfórico, láctico, cítrico, entre otros; y cada una de ellas con sus ventajas y desventajas. (9). IN. La solución irrigadora más difundida en endodoncia es el. E. hipoclorito de sodio en diferentes concentraciones. Pero desde. MA S. hace más de una década distintos autores recomiendan el uso de. TE. solución de clorhexidina al 2%.(10). El hipoclorito de sodio ha sido definido por la Asociación Americana. SI S. de Endodoncistas como un líquido claro, pálido, verde-amarillento,. DE. extremadamente alcalino y con fuerte olor clorino, que presenta una acción disolvente sobre el tejido necrótico y restos orgánicos y. IN. A. además es un potente agente antimicrobiano.(11). IC. Es de vital importancia que el irrigante a usar sea biocompatible. OF. con los tejidos. Se sabe que el NaOCl ha sido utilizado durante mucho tiempo a diferentes concentraciones (0.5-5.25%) durante la instrumentación, encontrando que a altas concentraciones, es citotóxico. para los. tejidos y a bajas concentraciones es. relativamente menos citotóxico pero en cuanto a su efectividad. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. antimicrobiana, microorganismos como el Enterococcus faecalis son resistentes a ésta concentración. (12) Un irrigante ideal debe de poseer ciertas propiedades, estos son:. CA. solvente de tejidos o desechos, baja toxicidad, lubricante,. MA TI. desinfectante y eliminación de la capa de desecho. (13). En la actualidad se investiga alternativas terapéuticas de origen. FO R. natural para ser aplicadas en el campo médico, las que incluyen sustancias químicas sintetizadas a partir de productos que. IN. provienen de la naturaleza. Es así que etno-farmacologos,. E. botánicos, microbiológicos y bioquímicos, investigan los principios. MA S. activos de sustancias fitoquimicas para desarrollar tratamientos contra enfermedades infecciosas basados en productos naturales.. TE. (14). SI S. Los compuestos de origen natural no sólo poseen una importancia. DE. farmacéutica, sino que su importancia también radica en que pueden funcionar como precursores en la elaboración de los. IN. A. fármacos semisintéticos. (15). IC. No debemos olvidar que los compuestos a base de plantas. OF. medicinales presentan una inmensa ventaja con respecto a los tratamientos químicos. En las plantas los principios activos se hallan siempre biológicamente equilibrados por la presencia de sustancias complementarias, que van a potenciarse entre sí, de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. forma que en general no se acumulan en el organismo, y sus efectos indeseables están limitados. (16) Los aceites esenciales son sustancias olorosas obtenidas a partir. CA. de plantas mediante destilación en corriente de vapor o por. MA TI. expresión del material vegetal. (17). Se han realizado numerosos estudios sobre el efecto de los. FO R. aceites esenciales de plantas aplicados en la odontología, demostrándose sus propiedades, como es el caso de las especies. IN. Plantago major L “llantén” y Citrus paradisi “toronja” por su poder. E. antiinflamatorio; de igual manera se ha demostrado el poder. MA S. antifúngico de Piperan gustifolium “matico” siendo de gran utilidad en el tratamiento de candidiasis subprotésica. El Aloe vera o. SI S. de garganta. (18). TE. “sábila” disminuye la cantidad de placa, y la inflamación gingival y. DE. Los principios activos del aceite esencial de eucalipto son: eucaliptol, pineno, eudesmol, canfeno, pinocarvona, mirtenal,. A. carvona, alcoholes sesquiterpénicos, aldehidos, cetonas. También. IC. IN. contiene taninos, ácido elágico y ácido gálico, así como un 2.8% de sustancia. denominada. eucaliptina,. de. efectos. OF. una. bacteriostáticos.(19) Lui B. Humberto y col (Perú 2002) estudiaron in vitro la actividad antibacteriana de extractos de Caesalpinia spinosa “tara” y de. Eucalyptus sp. “eucalipto” sobre cepas bacterianas Gram positivas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. (Staphylococcus aureus y Bacillus subtilis) y Gram negativas (Escherichia coli, Klebsiella sp. y Shigella flexneri), dando como resultado actividad selectiva sobre las bacterias Gram positivas. CA. evaluadas. (20). MA TI. Cuellar y col (Uganda 2009) evaluaron el rendimiento y actividad microbiana de los aceites esenciales de Eucalytus globulus,. FO R. Cymbopogon citratus y Rosmarinus officinalis, obteniendo como resultado actividad antimicrobiana del 40% sobre Staphylococcus. IN. aureus, E. coli y Candida albicans, observándose que las. E. diluciones de los mismos fueron más activas que los aceites puros. Biljana. y. col. MA S. evaluados. (21). (Montenegro,. 2011). investigaron. el. efecto. TE. antimicrobiano del aceite de Eucalyptus globulus, obteniendo como. SI S. resultado una fuerte actividad antimicrobiana sobre Streptococcus pyogenes, Escherichia coli, Candida albicans, Staphylococcus. DE. aureus, Acinetobacter baumannii, y Klebsiella pneumoniae; y como. A. resultado a la concentración mínima inhibitoria de mínima frente al. IN. Pseudomonas aeruginosaySalmonela infantis(3.13 mg/ml) mientras. IC. que la mayor actividad fue en contra de S. aureus, E. coli, and S.. OF. pyogenes(0.09 mg/ml). (22) Kumar A. y col (India 2004) evaluaron la actividad antimicrobiana. del aceite esencial de Eucalyptus globulus sobre diferentes cepas como el E colispp.,. Klebsiella, S. aureus, Proteus spp.,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Pseudomonas spp.; los resultados del estudio revelaron que el aceite de eucalipto tiene propiedades antibacterianas frente a las bacterias Gram-positivas como a las bacterias Gram-negativas. (23). MA TI. CA. 1.1. JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN 1.1.1. Importancia. FO R. Esta investigación fue planteada debido a la búsqueda incesante del irrigante ideal en base a la biodiversidad de. IN. plantas medicinales que permita conseguir los objetivos en la terapia endodóntica, libre de cualquier efecto secundario. MA S. E. posible. 1.1.2. Trascendencia. TE. Los resultados de esta investigación permitirán conocer lo. SI S. efectos antibacterianos del Eucalyptus globulus sobre cepas de Enterococcus faecalis, con la finalidad de elaborar un. DE. irrigante ideal libre de cualquier posible citotoxicidad que. IN. A. intervenga en la terapia endodóntica.. OF. IC. 1.1.3. Pertinencia Los. datos. obtenidos. serán. de. intereses. para. todo. odontólogo tanto especialista como a los no especialistas, pero que en la práctica clínica ejercen la endodoncia, permitiendo elaborar un irrigante biocompatible libre de cualquier posible efecto adverso. Además, los resultados de. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. este estudio servirán como punto de partida para que otros investigadores puedan profundizar en otras variables que se. PROBLEMA. MA TI. 1.2.. CA. encuentren en relación con las ya mencionadas.. ¿Cuál es la susceptibilidad bacteriana in vitro del Enterococcus faecalis ATCC 29212, frente a diferentes concentraciones de aceite. FO R. esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) en comparación con. HIPÓTESIS. E. 1.3.. IN. hipoclorito de sodio al 2.5 %?. MA S. Existe susceptibilidad bacteriana in vitro del Enterococcus faecalis frente a diferentes concentraciones de aceite esencial de. OBJETIVOS. DE. 1.4.. SI S. sodio al 2.5%.. TE. Eucalyptus globulus (eucalipto) en comparación con hipoclorito de. 1.4.1. Objetivo general. OF. IC. IN. A.  Conocer la susceptibilidad bacteriana in vitro Enterococcus. faecalis. frente. a. del. diferentes. concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus globulus (Eucalipto) en comparación con hipoclorito de sodio al 2.5%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 1.4.2. Objetivos Específicos  Determinar la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de aceite esencial de Eucalyptus globulus sobre el. CA. crecimiento de la cepa ATCC 29212 de Enterococcus. MA TI. faecalis, in vitro..  Determinar la susceptibilidad bacteriana in vitro de la. FO R. cepa ATCC 29212 de Enterococcus faecalis, frente al. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. hipoclorito de sodio al 2.5%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II. 2.1.. MATERIALES Y MÉTODOS. MATERIAL DE ESTUDIO 2.1.1. Tipo y área de estudio. CA. El presente trabajo siguió un diseño de investigación. MA TI. aplicada (de acuerdo al grado de utilidad de los resultados) y experimental comparativa (de acuerdo a la interferencia del investigador en el fenómeno que , y se realizó en los ambientes de la. (24). FO R. se analiza). IN. sección de Microbiología de la Facultad de Medicina. MA S. E. de la Universidad Nacional de Trujillo.. 2.1.2. Definición de la población muestral El universo muestral estuvo constituido por las cepas. TE. estandarizadas del Enterococcus faecalis obtenidas. SI S. en el laboratorio de la Sección de Microbiología de la. DE. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de. IN. A. Trujillo.. OF. IC. 2.1.3. Consideraciones Éticas El presente estudio contó con la autorización de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo, en concordancia con las recomendaciones establecidas en la declaración de Helsinki, adoptada por la 18º Asamblea Médica Mundial en Helsinki,. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Finlandia, junio 1964 y modificada por la Asamblea Médica Mundial en Tokio, enero 2004.(25). CA. 2.1.4. Diseño estadístico del muestreo. MA TI. Unidad de Análisis. La unidad de análisis lo constituyo cada repetición realizada. FO R. (con diferentes concentraciones de aceite esencial de eucalipto o hipoclorito de sodio al 2.5%) en cada petri con la. IN. cepa de Enterococcus faecalis.. E. Unidad de Muestreo. MA S. La unidad de muestreo lo constituyó cada repetición realizada (con diferentes concentraciones aceite esencial de. TE. eucalipto o con hipoclorito de sodio al 2.5%) en cada placa. SI S. petri con la cepa de Enterococcus faecalis. Tamaño muestral. DE. Para determinación de la muestra del estudio se estableció. A. los siguientes criterios: Para un nivel de confianza del 95%. Z β = 0.84. Para Una Potencia de Prueba del 80%. OF. IC. IN. Z α/2 = 1.96. Asumiendo que no se conoce la varianza y que: σ2δ = δ2 2. 𝑛=. (𝑍𝛼⁄2 + 𝑍𝛽 ) 2𝜎𝛿2 𝛿2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Luego reemplazando se tiene que: n = 15.68 16 repeticiones como mínimo para cada grupo experimental a evaluar. Para efectos de este trabajo se tomó 5 grupos para la. Grupo 1: 16 repeticiones en placas petri con. MA TI. . CA. evaluación.. siembra de Enterococcus faecalis, utilizando. FO R. aceite esencial de Eucalyptus globulus al 100%.. Grupo 2: 16 repeticiones en placas petri con. IN. . E. siembra de Enterococcus faecalis, utilizando. . MA S. aceite esencial de Eucalyptus globulus al 75%. Grupo 3: 16 repeticiones en placas petri con. TE. siembra de Enterococcus faecalis, utilizando. SI S. aceite esencial de Eucalyptus globulus al 50%.. . siembra de Enterococcus faecalis, utilizando. DE A IN IC OF. Grupo 4: 16 repeticiones en placas petri con. aceite esencial de Eucalyptus globulus al 25%. . Grupo 5: 16 repeticiones en placas petri con siembra de Enterococcus faecalis, utilizando Hipoclorito de sodio al 2.5%.. 2.1.5. Criterios de control y balance Fueron excluidos del estudio, aquellos cultivos en los que se observe deficiencias de manipulación.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.2.. MÉTODOS Y TÉCNICAS 2.2.1. Instrumento de recolección de datos Los datos obtenidos fueron registrados en una Ficha. CA. (Anexo 01), que contendrá datos sobre la efectividad. FO R. sustancia química utilizada.. MA TI. antibacteriana frente al Enterococcus faecalis y la. 2.2.2. Material biológico y químico. IN. Material botánico. (Eucalyptus. globulus),. procedente. del. MA S. Eucalipto. E. Para la obtención de aceite esencial, se utilizo. distrito de Usquil provincia de Otuzco.. TE. Cepas bacterianas. SI S. La cepa de Enterococcus faecalis, fue obtenida del cepario del Departamento de Microbiología de la. DE. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de. OF. IC. IN. A. Trujillo.. Sustancia antimicrobiana El hipoclorito de sodio fue obtenido del hipoclorito de sodio “Zonident” al 5% elaborado por la empresa Proquident S.A.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.2.3. Procedimientos A. Obtención de las sustancias antimicrobianas i.. De la elaboración del aceite esencial:. CA. La obtención del aceite esencial de Eucalyptus. MA TI. globulus se llevo a cabo en el laboratorio de farmacognosia de la Facultad de Farmacia de la. FO R. Facultad y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, y fue procesado de la siguiente manera. se. realizo. manualmente. y. se. IN. Selección:. E. eliminaron las hojas que no se mostraron aptos. MA S. para su procesamiento. El estado óptimo de las hojas para ser procesado presenta un color. TE. verde con olor característico.. SI S. Recepción / pesado: El eucalipto presento un color verde signo de calidad, estuvo libre de. OF. IC. IN. A. DE. piedras y exento de tierra. Se realizo un pesado de la materia prima. Deshojado: Se realizo manualmente. Pesado:. las. hojas. seleccionadas. fueron. pesadas en 100 g en una balanza analítica. Se tomo mucho cuidado en el peso ya que sirvió para poder determinar el rendimiento. Destilación: se utilizo un equipo para la destilación por arrastre con vapor.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Diluciones del aceite esencial El aceite de Eucalyptus globulus fue obtenido en estado de 100% de pureza, siendo este. CA. diluido con etanol al 75%, 50% y 25%. Dichas. estudio bacteriológico.. De la elaboración del hipoclorito de sodio. FO R. ii.. MA TI. diluciones fueron guardadas a 4ºC para el. El hipoclorito de sodio al 2.5% fue obtenido del. IN. Hipoclorito de sodio “Zonident” al 5%, el cual fue. E. diluido empleando agua destilada.. MA S. B. Preparación de la cepa bacteriana Obtenida la cepa, esta se cultivó en tubos de ensayo. TE. cerrados herméticamente conteniendo el medio Agar. SI S. Soya tripticasa, y se incubó bajo condiciones de microanaerobiosis a 37oC con el fin de obtener. DE. colonias jóvenes. Luego de 24 horas se agregó. OF. IC. IN. A. solución salina estéril, hasta obtener una turbidez semejante al tubo número 1 de la escala de Mac Farland. Los tubos que contienen las bacterias fueron girados entre las manos durante 30 segundos antes de. proceder. al. sembrado. para. distribuir. los. microorganismos adecuadamente.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. i.. Sembrado Un hisopo estéril, el cual fue embebido en la solución preparada de Enterococcus faecalis y a una distancia. CA. de 10 cm de la llama del mechero se procedió al. MA TI. sembrado en camada en placas petri conteniendo Agar Mueller Hinton, hisopando uniformemente sobre. FO R. toda la superficie del agar y girando cada placa 30 grados 10 veces aproximadamente.. IN. Las placas recién sembradas fueron incubadas en. E. condiciones de microanaerobiosis a 37º C por 24. ii.. MA S. horas.. Prueba de susceptibilidad. TE. Se utilizó el método de difusión de discos, el cual. SI S. consiste en preparar discos de papel de filtro estériles, los cuales fueron sumergidos dentro de cada. DE. disolución por el periodo de 1 horas luego con una. OF. IC. IN. A. aguja estéril éstos se colocaron sobre los cultivos de Enterococcus faecalis en las placas petri previamente preparados; las placas se mantuvieron en la misma posición por un periodo de 5 minutos. Luego de este tiempo las placas se voltearon de posición y se incubó en una cámara de anaerobios utilizando la jarra de GasPack, con el método de vela, mediante. el. cual. se. obtuvo. un. ambiente. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. aproximadamente de 5 a 10% de CO2, a una temperatura de 37º C durante 24 horas. Todo el. 10 cm de la llama de un mechero.. CA. procedimiento ser llevo cabo dentro del diámetro de. MA TI. La lectura se llevó a cabo a las 24 horas mediante la inspección visual de cada placa. La cual se efectuó tomando el registro en milímetro de los halos de. IN. FO R. inhibición del crecimiento de Enterococcus faecalis.. 2.2.4. Variables y escalas de medición. MA S. E. a. Variables Independientes Soluciones inhibitorias de Enterococcus faecalis Aceite esencial de Eucalyptus globulus. TE. . Hipoclorito de sodio. SI S. . . Susceptibilidad. bacteriana. en. cepas. de. Enterococcus faecalis.. OF. IC. IN. A. DE. b. Variables dependientes. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ESCALA VARIABLE. CATEGORIA INDICADOR TIPO. DE. Soluciones. esencial de. 75%. inhibitorias de. Eucalyptus. 50%. Enterococcus. globulus. 25%. faecalis. Hipoclorito. 2.5%. MA TI. 100%. Categórica. Nominal. FO R. Aceite. CA. MEDICION. de sodio Susceptibilidad. Diámetro. cepas de. del halo en. IN. bacteriana en. De razón. E. Numérica. mm.. MA S. Enterococcus faecalis. SI S. TE. 2.2.5. Definiciones operacionales Soluciones inhibitorias de Enterococcus faecalis. DE. a. Aceite esencial de Eucalyptus globulus(eucalipto). OF. IC. IN. A. Definición conceptual: La esencia proveniente del “Eucalyptus. globulus”. tiene. sabor. fresco. y. aromático, olor ligeramente alcanforado y es de color amarillo canario pálido. (26) Definición operacional: Según a designación de la concentración utilizada: 25 %, 50%, 75%, 100%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. b. Hipoclorito de Sodio Definición conceptual: El hipoclorito de sodio ha sido definido por la Asociación Americana de. CA. Endodoncistas como un líquido claro, pálido, verde-. MA TI. amarillento, extremadamente alcalino y con fuerte olor clorino, que presenta una acción disolvente. FO R. sobre el tejido necrótico y restos orgánicos y además es un potente agente antimicrobiano. (27) operacional:. Se. diluyo. con. agua. IN. Definición. E. destilada el hipoclorito de sodio al 5% para obtener. MA S. una concentración de 2.5%. Susceptibilidad. bacteriana. en. cepas. de. TE. Enterococcus faecalis. SI S. Definición conceptual: Sensibilidad o resistencia de la cepa de Enterococcus faecalis bajo la acción de. DE. las diferentes concentraciones de aceite esencial. OF. IC. IN. A. de Eucalyptus globulus. (2). Definición operacional: Correspondió a la medida del diámetro del halo de susceptibilidad en placas petri con siembra de este microorganismo medido a las 24 horas en milímetros de cada UFC.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 2.2.6. Análisis estadístico Procesamiento y análisis de datos Luego de la aplicación del instrumento, los datos. CA. fueron procesados de manera automatizada, en una. MA TI. computadora, utilizando los siguientes Software: Procesador de texto Microsoft Word 2007, Microsoft. FO R. Excel 2007, Programa Estadístico SPSS 12.. El análisis de la información se realizó mediante la. IN. aplicación de la estadística descriptiva (tablas de. E. frecuencias y porcentajes, gráficos de barras) y la. MA S. estadística inferencial para la comprobación de la hipótesis y el cumplimiento de los objetivos.. TE. Para el análisis estadístico se emplearon la Prueba. SI S. de análisis de varianza y la Prueba de Duncan tanto. OF. IC. IN. A. DE. para la Concentración Inhibitoria Mínima.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RESULTADOS El efecto antibacteriano in vitro. del aceite esencial de Eucalyptus. globulus (Eucalipto) sobre la cepa ATCC 29212 de Enterococcus. CA. faecalis se midió a través de los halos de inhibición obtenidos por el. MA TI. método de Difusión en discos; dichos halos de inhibición presentaron los siguientes promedios Aceite Esencial de Eucalypto al 25% con 11.5 mm., Aceite Esencial de Eucalypto 50% con 14.3 mm., Aceite. FO R. Esencial de Eucalypto 75% con 22.1., Aceite Esencial de Eucalypto. IN. 100% con 34.0 mm., y como medio de control al Hipoclorito de Sodio. E. 2.5% con 14.3 mm.. MA S. Los halos de inhibición se observaron como una zona transparente rodeando a los discos de papel filtro (ausencia de crecimiento. TE. bacteriano), diferenciándolos del resto de la placa por el color amarillo. DE. SI S. pálido y opaco de esta (crecimiento bacteriano en forma puntiforme).. El análisis estadístico de los promedios de los halos de inhibición,. A. que se utilizo el Test de ANOVA nos permitió determinar la existencia. IN. de efecto antibacteriano del aceite esencial de Eucalyptus globulus. OF. IC. sobre la cepa estudiada, lo que nos muestra la existencia de una diferencia. significativa. entre. las. soluciones. inhibitorias. de. Enterococcus faecalis, dado que el valor de p de la prueba estadística es menor que 0.05. (Tabla Nº 01). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. La Prueba de Duncan para determinar diferencias significativas entre los grupos experimentales se encontró 3 grupos estadísticamente significativos, en el grupo Nº 01 (G1) formado por las soluciones que son aceite esencial de. CA. inhibitorias de Enterococcus faecalis. MA TI. eucalypto al 25%, Hipoclorito de Sodio 2.5%, aceite esencial de eucalypto al 50%; en el grupo Nº 02 (G2) formado por aceite esencial de Eucalypto al 75%; en el grupo Nº 03 (G3) formado por aceite. FO R. esencial de Eucalypto al 100%; de los 3 grupos formados resulta que. IN. el mayor halo de inhibición se da en el AEE 75% (G2) y el AEE 100%. E. (G3). (Tabla Nº 02). MA S. Los valores obtenidos en las mediciones de los halos de inhibición de cada concentración nos revelan que el promedio de inhibición es. que. las. concentraciones. SI S. Eucalypto;. TE. mayor conforme es más la concentración del aceite esencial de conforme. es. su. mayor. DE. concentración (Tabla Nº 03). A. El análisis comparativo de los valores de la susceptibilidad bacteriana. IN. en los diferentes grupos de soluciones inhibitorias de Enterococcus. OF. IC. faecalis reveló que los valores de las concentraciones de aceite esencial de Eucalypto de 75% y 100% son superiores que de las concentraciones de 25%, 50% y grupo control. (Anexo Nº 06). Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 01 Análisis de Varianza para Determinar Diferencias Significativas entre Soluciones Inhibitorias de Enterococcus Faecalis. Grados Suma de. Cuadrado Prueba de. Posibilidad. cuadrados. medio libertad. (SC). (CM). 5374.075. 4. 1691.875. 75. 7065.95. Intra grupos. 59.56. 0.0000. 22.56. E. (error). 1343.52. IN. concentraciones. MA S. Entre. (p). (F). FO R. (GL). f. MA TI. FV. CA. ANOVA. 79. TE. total. La Tabla anterior muestra que existe diferencia significativa entre las. SI S. soluciones inhibitorias de EF, dado que el valor de p de la prueba. OF. IC. IN. A. DE. estadística de ANOVA es menor que 0.05. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 02 Diámetro del halo de inhibición utilizando aceite esencial de Eucalyptus globulus Soluciones Inhibitorias de ni. Grupos para Alfa = 0.05. G2. G3. Aceite Esencial de Eucalypto 25%. 16. 11.5. Hipoclorito de Sodio 2.5%. 16. 14.3125. Aceite Esencial de Eucalypto 50%. 16. Aceite Esencial de Eucalypto 75%. 16. FO R. Aceite Esencial de Eucalypto 100%. IN. MA TI. G1. CA. Enterococcus faecalis. 22.125 34.0625. MA S. E. 16. 14.375. Según la prueba de DUNCAN ratifica la significancia, ya que existen 3 grupos. TE. estadísticamente significativos, el cual nos indica que hay diferencia entre los. SI S. promedios de los halos de inhibición para cada concentración, teniendo el mayor. OF. IC. IN. A. DE. halo de inhibición el AEE 100% y el AEE 75%. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA N° 03Diámetro Promedio del halo de Inhibición (mm) ni. X̅. S. Hipoclorito de Sodio 2.5%. 16. 14.31. 2.549. Aceite Esencial de Eucalypto 25%. 16. 11.50. 2.582. Aceite Esencial de Eucalypto 50%. 16. 14.38. 1.708. Aceite Esencial de Eucalypto 75%. 16. Aceite Esencial de Eucalypto 100%. 16. MA TI. CA. Soluciones Inhibitorias de. 3.612. 34.06. 9.147. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. 22.13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. DISCUSIÓN Se ha evaluado la susceptibilidad in vitro del Enterococcus faecalis frente a diferentes concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus globulus. CA. (eucalipto) en comparación con hipoclorito de sodio al 2.5%, habiendo. MA TI. encontrado resultados eficaces, manifestados a través de los halos de susceptibilidad bacteriana, lo cual demuestra que el aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) tiene efectos inhibitorios sobre el. FO R. crecimiento del Enterococcus faecalis.. IN. Se determinó el efecto antibacteriano del aceite esencial de Eucalyptus globulus sobre Enterococcus faecalis utilizando el método de difusión de. E. discos, para lo cual se formaron 5 grupos experimentales a 5. MA S. concentraciones crecientes de aceite esencial de eucalipto, y un grupo control donde se utilizo hipoclorito de sodio al 2.5%, observándose un. TE. aumento creciente de los promedios de halo de inhibición del crecimiento. SI S. bacteriano del Enterococcus faecalis a medida que la concentración de. La. acción. DE. aceite esencial de eucalipto se incrementa. antibacteriana. del. aceite. esencial. de. Eucalyptus. A. globulus(eucalipto) sobre la cepa 29212 de Enterococcus faecalis ATCC,. diferencia. significativa. entre. las. soluciones. inhibitorias. de. OF. IC. una. IN. se evaluó mediante el test de ANOVA, lo que nos muestra la existencia de. Enterococcus faecalis, dado que el valor de p de la prueba estadística es menor que 0.05; y para determinar cuál de las concentraciones usadas fue la que presentó un mayor efecto antibacteriano se aplicó la Prueba de Duncan, mediante comparaciones del diámetro de inhibición entre las. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. diferentes concentraciones de aceite esencial (25%, 50%, 75%, 100%) y el grupo control por hipoclorito de sodio al 2.5%; se comprobó la existencia de 3 grupos estadísticamente significativos. El primer grupo. CA. incluye a las concentraciones de 25%, 50% AEE e hipoclorito de sodio al. MA TI. 2.5% con halo de inhibición de 11.5 mm., 14.37 mm. y 14.31 mm. respectivamente. El segundo grupo corresponde a la concentración de 75% AEE, con un halo de inhibición de 22.12 mm. El tercer grupo incluye. FO R. a la concentración de 100% AEE, con un halo de inhibición de 34.06 mm.. IN. Por lo que se concluye que el segundo y tercer grupo resultan ser significativamente más altos, es decir su efecto sobre la bacteria fue. E. mayor.. MA S. Los resultados se asemejan al hallazgo encontrado por otros autores, como lo demostrado por Lui B. Humberto y col. ;Biljana y col. (20). ,. (22). bactericida. selectiva. SI S. actividad. TE. quienes afirman que el aceite obtenido del Eucalyptus sp. “eucalipto” tiene contra. especies. Gram. positiva. DE. (Staphylococcus aureus y Bacilus subtilis); lo que comprueba con el presente estudio que el Enterococcus faecalis siendo una bacteria Gram. A. positiva es susceptible al aceite esencial de Eucalyptus globulus. En el. IN. estudio de Lui B. sólo utilizó el aceite esencial de Eucalyptus sp.. OF. IC. “eucalipto” al 100%, en cambio el presente estudio, se comparó la acción bactericida del aceite esencial de Eucalyptus globulus al 100%, 75%, 50% y 25%; teniendo como mayor respuesta antibacteriana al Enterococcus faecalis las concentraciones de 75% y de 100%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Otros estudios también confirman la acción antimicrobiana del aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto), como lo investigado por Cuellar y col. , quienes afirman que el aceite esencial de eucalipto tiene. (21). CA. efecto antibacteriano contra el Staphylococcus aureus, Candida albicans, actividad antimicrobiana en las. MA TI. y que además se muestra mayor. diluciones que en los aceites puros, como se demuestra en el presente estudio que el halo de inhibición desarrollado por la concentración de. FO R. aceite esencial al 75%, que en algunos ensayos se observo el halo de. IN. inhibición era mayor que cuando se utilizó la concentración de aceite esencial al 100%.. E. El efecto antibacteriano del aceite esencial de Eucalyptus globulus sobre. MA S. el Enterococcus faecalis se basa en los principales principios activos antibacterianos: eucaliptol (1,8-cineol), flavonoides, eucaliptina, taninos,. SI S. bacteriostáticas. (19). TE. compuestos que en conjunto poseen propiedades bactericidas y. DE. Los principios activos del aceite esencial de Eucalyptus globulus tienen poder antibacteriano debido a que causan daño a los mecanismos de. A. transporte y de inhibición de enzimas (precipitación de enzimas. IN. extracelulares) asociadas a la pared celular, provocando liberación de los. OF. IC. componentes citoplasmáticos, alteración en la morfología y disminución del volumen celular. (23) Los promedios de halo de susceptibilidad bacteriana del Enterococcus faecalis en el presente trabajo, mostraron un aumento a medida que la concentración del aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) se. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. incrementa. Estos resultados, demuestran que el aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto), además de tener acción antibacteriana, tiene relación directa con la concentración utilizada del aceite de. CA. eucalipto; es decir, que a mayor concentración del aceite de eucalipto se. MA TI. tiene mayor efecto antibacteriano; considerando que en el presente trabajo se utilizo el aceite de eucalipto en diferentes concentraciones (25%, 50%, 75%, 100%), lo cual no se realizó en los trabajos referidos.. FO R. Se demuestra también, que la susceptibilidad bacteriana in vitro del. IN. Enterococcus faecalis frente al aceite esencial de Eucalyptus globulus (eucalipto) al 100% y 75% fue mayor que la susceptibilidad bacteriana in. E. vitro del Enterococcus faecalis frente al hipoclorito de sodio al 2.5%, y. MA S. este fue semejante al obtenido por el aceite de eucalipto de 25% y 50%. El hipoclorito de sodio ocasiona la alteración biosintética del metabolismo. TE. celular, destrucción de fosfolipidos y formación de cloraminas que. SI S. interfieren en el metabolismo celular, y su acción oxidativa lleva a. DE. inactivación enzimática y degradación de lípidos y ácidos grasos. El promedio del halo de susceptibilidad bacteriana del Enterococcus faecalis. IN. OF. IC. mm.. A. frente al hipoclorito de sodio al 2.5% encontrado en el estudio fue de 14.3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CONCLUSIONES.  Las cuatro concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus. CA. globulus (eucalipto) estudiadas, presentan efecto antibacteriano.  Enterococcus. faecalis. fue. MA TI. sobre la cepa 29212 de Enterococcus faecalis ATCC, in vitro.. susceptible. frente. a. todas. las. FO R. concentraciones de aceite esencial de Eucalyptus globulus. IN. (eucalipto) y esta susceptibilidad fue directamente proporcional a la. E. concentración utilizada.. de. 75%. y. MA S.  Enterococcus faecalis es susceptible frente a las concentraciones 100%. de. aceite. esencial. de. Eucalyptus. TE. globulus(eucalipto) y esta susceptibilidad fue mayor que la. OF. IC. IN. A. DE. SI S. registrada por el hipoclorito de sodio 2.5%.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. RECOMENDACIONES. resultados obtenidos en esta investigación.. CA.  Realizar ensayos clínicos con los que se pueda corroborar los. MA TI.  Realizar estudios in vitro y ensayos clínicos del nivel de perfusión del aceite esencial en las microestructuras del conducto..  Realizar estudios clínicos que permitan medir su efecto sobre. FO R. diferentes afecciones bucales.. IN.  Realizar investigaciones en animales de experimentación y luego. uso en seres humanos.. E. en personas para probar la eficacia, tolerancia y seguridad de su. MA S.  Recomendar el uso racional de sustancias terapéuticas toxicas en los tratamientos endodónticos y promover la búsqueda de. TE. alternativas de origen natural.. SI S.  Promover la investigación científica sobre nuestros productos. OF. IC. IN. A. DE. naturales en la aplicación terapéutica estomatológica.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. II. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Guerra M. Microbiología bucal. Universidad Mayor de San Andrés. La Paz. Pr.. Rosenthal. KS,. Kobayashi. GS,. Faller. CA. 2. Murray. MA.. MA TI. Microbiología Médica. 4ºta Ed. Madrid: Elservierscience; 2002, p 167-190.. 3. SirventF., García E., Biofilm. Un nuevo concepto de infección en. FO R. Endodoncia. Endodoncia 2010; 28(4):241-256. IN. 4. Correa S, Ocampo E, Ochoa J. Efectividad antimicrobiana del digluconato de clorhexidina al 0.2% y del clorhidrato de. E. bencidamina al 0.15%, usados como irrigantes intraconducto. MA S. contra Enterococcus faecalis. Un estudio in vitro, Instituto de ciencia de la salud; Medellín 2007.. TE. 5. Díaz A. Aspectos relevantes de Enterococcus faecalis y su. SI S. participación en las infecciones de origen endodóntico.. DE. Universidad Central de Venezuela 2008. [consultado 28/05/12]. Disponible. en:. A. http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitado. IC. IN. old/odontoinvitado_55.htm. OF. 6. Pardi G, GuilarteC; de Enterococcus. Cardozo E;. faecalis en. dientes. Briceño N. Detección con. fracaso. en. el. tratamiento endodóntico. Acta Odontológica Venezolana 2009; 47(1).. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 7. Caviedes J, Guzmán B, Pereira V. Retratamiento endodóntico no quirúrgico: Criterios reales que definen la necesidad de su aplicación.. Canal. abierto,. Revista. de. Sociedad. de. CA. Endodoncia de Chile 2010; 22(1) 6-19. la. MA TI. 8. Heredia T. Aspectos microbiológicos de la periodontitis apical crónica persistente. Universidad Central de Venezuela, 1999. [consultado. 28/05/12].. Disponible. en:. FO R. http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitado. IN. old/odontoinvitado_41.htm. 9. Azuero M. Herrera C.Irrigantes de uso endodóntico. Postgrado. E. en Endodoncia de la Facultad de Odontología de la Pontificia. Disponible. MA S. Universidad Javeriana, Colombia, 2006 [consultado 28/05/12]. en:. SI S. n31.html.. TE. http://www.javeriana.edu.co/academiapgendodoncia/i_a_revisio. DE. 10. Olmos F, Carril M, Saguir S, García A. Limpieza de las paredes del conducto usando una combinación de hipoclorito de sodio. A. 2,5% - ácido cítrico 10% y clorhexidina 2% - ácido citrico 10%.. IN. Universidad Nacional de Tucumán, Argentina 2009, 27(2).. OF. IC. 11. Bairan E, Caldera M. Una visión actualizada del uso del hipoclorito de sodio en endodoncia. Universidad Central de Venezuela. 2001.. [consultado. 28/05/12].. Disponible. en:. http://www.carlosboveda.com/Odontologosfolder/odontoinvitado old/odontoinvitado_18.htm.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 12. Azuero M, Ordóñez A,. Tinjacá V. Comparación de tres. soluciones irrigantes utilizadas en endodoncia. Postgrado en Endodoncia de la Facultad de Odontología de la Pontificia. CA. Universidad Javeriana, Colombia, 2006. [consultado 28/05/12]. en:. MA TI. Disponible. http://www.javeriana.edu.co/academiapgendodoncia/i_a_revisio n38.html. FO R. 13. Lahoud V, Gálvez L, Irrigación Endodóntica con el uso de. IN. hipoclorito de sodio. Odontología Sanmarquina 2006; 9(1); 2830.. E. 14. Gallardo V et al. Farmacognosia: breve historia de sus orígenes. MA S. y su relación con las ciencias médicas. Universidad de Veracruz México 2004, 15; 123- 136.. TE. 15. Osorio E, Aspectos Básicos de farmacognosia, Facultad de. SI S. Química Farmacéutica de la Universidad de Antioquia, 2009.. DE. 16. Estrada S. Determinación de la actividad antibacteriana in vitro de los extractos de romero (Rosmarinus officinalis) y tomillo. A. (Thymus vulgaris), Tesis para optar el título profesional de. IN. Bioquímico Farmacéutico. Escuela Superior Politécnica de. OF. IC. Chimborazo. Ecuador 2010.. 17. Martínez A. Aceites esenciales. Facultad Química Farmacéutica de la Universidad de Antioquia, Medellín 2003.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 18. Calixto M. Plantas medicinales utilizadas en odontología. Facultad de Odontología de la Universidad San Martin de Porres, Articulo de revisión 2008; 80-85.. [consultado. 28/05/12].. Disponible. en:. MA TI. Herbolarios.. CA. 19. Dueñas R. Eucalipto compuesto, Laboratorio de Remedios. http://www.redsa.com.mx/index_htm_files/Eucalipto%20Compu esto.pdf. FO R. 20. Humberto L. Evaluación de la actividad antibacteriana in vitro. IN. de los extractos de Caesalpinia spinosa “tara” y Eucalyptus sp. (Eucalipto). Facultad de Medicina Humana de la Universidad de. E. San Martin de Porres. Lima. A.. Evaluación. del. MA S. 21. Cuellar. rendimiento. y. la. actividad. antimicrobiana de los aceites esenciales de Eucalyptus. TE. globulus, Cymbopogon citratus y Rosmarinus officinalis en el. SI S. distrito de Mbarara (Uganda). Universidad de Ciencia y. DE. Tecnología de Uganda. 22. Biljana et al. Antimicrobial effect of essential oil isolated from. A. Eucalyptus globulus Labill, from Montenegro. Universidad de. IN. Belgrado 2011. 29(3); 277-284.. OF. IC. 23. Kumar A, et al. Antibacterial properties of different Eucalyptus oils. Fitoterapia, from India. 198; 2: 141-4.. 24. Bocanegra D. F. Bases Metodológicas de la Investigación Científica. Perú. PubliCiencia, 2002.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 25. Carter, Greco, Kloiber, Letlape y Nelson. Informe del grupo de trabajo sobre La Revisión del párrafo 30 De La Declaración De Helsinki. Asociación Médica Mundial. 2004.. 28/05/12]. Disponible. en:. MA TI. [Consultado. CA. 26. Aceite esencial de eucalipto, extracción [Updated: Dic 13,2009].. http://www.aceitesesencialesde.com/Aceite-esencial-deEucalipto-extraccion/133. FO R. 27. Massó Q. Maugard T. Montiel T. Evaluación in vitro de la. IN. desinfección de conductos radiculares mediante el uso del Sistema Endox en comparación con la preparación biomecánica. E. convencional. Tesis para optar el título profesional de Cirujano. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. Dentista Universidad de Valparaíso. Chile 2007.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO Nº 01 Aceite esencial de Eucalyptus globulus al 50% vs Enterococcus faecalis. CA. Control 24 Horas Concentración de Eucalyptus. Medición de los halos de. globulus. inhibición en mm. 2. 12. 3. 12. 4. 13. 5. 13. MA S. X X X X X. 8. X. 17. X. 9. X. 9. X. 10. 9. X. 11. 12. X. DE. 6. 12. 8. X. 13. 15. X. 14. 14. X. 15. 10. X. 16. 11. X. 7. SI S. 9. IN. A. repeticiones. TE. 8. Número de. OF. IC. IN. 12. E. 1. Sensible Resistente. FO R. 25 %. MA TI. Observaciones. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 02 Aceite esencial de Eucalyptus globulus al 50% vs Enterococcus faecalis. CA. Control 24 Horas Concentración de Eucalyptus. Medición de los halos de. globulus. inhibición en mm. 2. 17. 3. 13. 4. 14. 5. 13. MA S. X X X X X. 14. X. 14. X. 16. X. 12. X. 10. 15. X. 11. 11. X. DE. 6. 12. 13. X. 13. 15. X. 14. 15. X. 15. 16. X. 16. 17. X. 7. SI S. 9. IN. A. repeticiones. TE. 8. Número de. OF. IC. IN. 15. E. 1. Sensible Resistente. FO R. 50 %. MA TI. Observaciones. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.



(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 05 Mediciones del halo de susceptibilidad bacteriana in vitro del Enterococcus faecalis frente a Hipoclorito de sodio al 2.5%. Medición de los halos de. hipoclorito de. 2. 17. 3. 15. 4. 14. 5. 15. 6. 16. IN. 10. X X X X X. 16. X. 21. X. 13. X. 14. X. 11. 12. X. 12. 12. X. 13. 12. X. 14. 13. X. 15. 14. X. 16. 15. X. 8. Número de repeticiones. 9. OF. IC. IN. A. SI S. 10. TE. 7. X. DE. MA S. E. 1. Sensible Resistente. FO R. inhibición en mm. sodio al 2.5%. Observaciones. MA TI. Concentración de. CA. Control 24 Horas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(49) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO Nº 06 Gráfico estadístico Gráfico Comparativo de Susceptibilidad Bacteriana en Cepas de. CA. Enterococcus Faecalis por Soluciones Inhibitorias de Enterococcus. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. Faecalis. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(50) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO 07 FOTOGRAFÍAS. Cepa de Enterococcus faecalis. Dilución de cepa semejante a tubo nº1 de Mc Farland. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. SEMBRADO DE LA CEPA BACTERIANA. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(51) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Discos embebidos en diferentes concentraciones de aceite esencial. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. Sembrado de cepa en placas petri. Colocación de los discos embebidos en diferentes concentraciones colocados en cultivo de E. faecalis. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(52) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Resultados (Observación 24 horas). Observación y medición de Halos de inhibición. Observación y medición de Halos de inhibición. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. Observación y medición de Halos de inhibición. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(53) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Ausencia de Halos de inhibición. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. CA. Ausencia de Halos de inhibición. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(54) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 08 EVALUACION DE LA TESIS El Jurado deberá: Consignar las observaciones y objeciones pertinentes. CA. a.. b.. Anotar el calificativo final.. c.. Firmar los tres miembros del jurado.. MA TI. relacionadas a los siguientes ítems.. FO R. TESIS:........................................................................................................... ....................................................................................................................... 1.. DE LAS GENERALIDADES:. IN. ................................................................................................................ E. Titulo:………………………………………….………………………. 2.. MA S. Tipo de Investigación:……………………………………………… DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN: Antecedentes:.................................................................................. TE. Justificación:.................................................................................... SI S. Problema:........................................................................................ Objetivos:........................................................................................ Hipótesis:......................................................................................... DE. Diseño de contrastación: ….......................................................... Tamaño Muestral:............................................................................ IN. A. Análisis Estadístico:....................................................................... IC. 3. RESULTADOS:....................................................................................... OF. 4. DISCUSIÓN: .......................................................................................... 5. CONCLUSIONES: ................................................................................. 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:..................................................... 7. RESUMEN:.............................................................................................. 8. RELEVANCIA DE LA. INVESTIGACIÓN:……………………...………. ORIGINALIDAD: ............................................................................................ Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(55) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 10. SUSTENTACION Formalidad:…………………..…………………………………. 10.2. Exposición:……………………………………………………. 10.3. Conocimiento del Tema:..................................................... CALIFICACIÓN: (Promedio de las 03 notas del Jurado). Nombre. Código. FO R. JURADO:. MA TI. CA. 10.1. Firma. Presidente: Dr. (a).......................... IN. Docente. ..................... ……………….... ..................... MA S. Secretario: Dr. (a).......................... E. Grado Académico: …………………………………………………………… …….…….….…. Grado Académico: …………………………………………………………… Miembro:. Dr. (a)........................ .................... …………………. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. Grado Académico: …………………………………….…………………….... Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.