Efecto De La Espironolactona Sobre El Remodelamiento Aórtico En Ratas Diabéticas

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(1)Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. MA TI. CA. ESCUELA DE MEDICINA. FO R. “EFECTO DE LA ESPIRONOLACTONA SOBRE EL. IN. REMODELAMIENTO AORTICO EN RATAS DIABETICAS”. E. TESIS. MA S. PARA OPTAR POR EL GRADO DE:. SI S. TE. BACHILLER EN MEDICINA. AUTOR:. ASESOR: DR. LUIS ARTEAGA TEMOCHE. OF. IC. IN. A. DE. ROBERT JESUS VILLACORTA CARRANZA. TRUJILLO-PERU 2014. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IÍNDICENDICE GENERAL. CA. ÍNDICE DE TABLAS……………………………………………………………1. MA TI. ÍNDICE DE FIGURAS…………………………………………………………..2 DEDICATORIA……………………………………………………………….....3. FO R. AGRADECIMIENTO…………………………………………………………….4. INTRODUCCIÓN………………………………………………………..6. II.. JUSTIFICACIÓN……………………………………………………….12. III.. PROBLEMA……………………………………………………………13. IV.. HIPÓTESIS………………………………………………………….….13. V.. OBJETIVOS……………………………………………………………13. VI.. MATERIALES Y MÉTODO…………………………………………..14. VII.. RESULTADOS…………………………………………………………20. VIII.. DISCUSIÓN…………………………………………………………….29. IX.. CONCLUSIÓN…………………………………………………………32. X.. BIBLIOGRAFIA………………………………………………………..33. XI.. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. I.. IN. RESUMEN…………………………………………………………………….....5. OF. IC. ANEXOS………………………………………………………………..41. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA TI. CA. ÍNDICE DE TABLAS. Tabla 1………………………………………………………………………….21. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. Tabla 2…………………………………………………………………………23. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA TI. CA. ÍNDICE DE FIGURAS. Figura 1……………………………………………………………………….24. FO R. Figura 2……………………………………………………………………....25 Figura 3………………………………………………………………………26. IN. Figura 4………………………………………………………………………27. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. Figura 5………………………………………………………………………28. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) E. IN. FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. MA S. DEDICATORIA. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. A mi madre, Luz Carranza Avalos. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) MA TI. AGRADECIMIENTOS. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. FO R. A mis hermanos-Eder, Luis, Edy, Mirian por su infinito apoyo y comprensión.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. A mi Padre-Justo.. A todas y cada una de las personas, que incondicionalmente me apoyaron. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Efecto de la espironolactona sobre el remodelamiento aórtico en ratas diabéticas -------------------------------------------------------------------------------------------RESUMEN. CA. Antecedentes: el daño vascular producido por la diabetes mellitus es uno de los principales determinantes de la morbimortalidad de la. MA TI. enfermedad. Así mismo, el bloqueo del sistema renina angiotensina aldosterona ha mostrado contrarrestar este efecto, sin embargo con el tiempo se genera aumento patológico de aldosterona y seria esta. FO R. junto a otros factores los que condicionarían el remodelamiento vascular adverso en la diabetes mellitus, frente a ello se sugiere que. IN. la espironolactona tendría un papel protector.. Objetivo: Determinar el efecto de la espironolactona. sobre el. E. remodelamiento aórtico en ratas diabéticas.. MA S. Método: Aleatoriamente un grupo de ratas macho Sprage Dawley recibieron estreptozotocina (grupo diabético) o buffer citrato (grupo control). Las ratas diabéticas fueron tratadas con SPL (50. TE. mg/kg/día). El remodelamiento aórtico se cuantifico a través de. SI S. análisis histomorformétrico.. Resultados: Los niveles de glucosa, el diámetro interno de la aorta (DIA), el área de túnica media (ATM), hipertrofia vascular (HV) y el. DE. contenido de colágeno se incrementaron significativamente en las ratas diabéticas (p<0.05). La administración de SPL previno estos. A. cambios (p<0.05), sin modificar los niveles de glucosa (p>0.05). IN. Conclusión: La espironolactona atenúa el remodelamiento aórtico. IC. en ratas diabéticas.. OF. Palabras clave: espironolactona, remodelamiento vascular, diabetes mellitus. -------------------------------------------------------------------------------------------. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. I.- INTRODUCCION La diabetes mellitus es un grupo de desórdenes metabólicos en la cual una persona posee elevados valores de glucosa, porque el. CA. organismo no produce suficiente insulina; o por que las células no. MA TI. responden a la insulina que este produce30, y otras alteraciones relacionadas con el metabolismo de las grasas y proteínas. Las complicaciones vasculares inducidas por la diabetes son la mayor. FO R. causa de morbilidad y mortalidad en estos pacientes 1,. incluso. IN. cuando el control glucémico se ha optimizado2.. La pared vascular es un órgano estructural y fisiológicamente. E. integrado, que en forma dinámica se modifica o reorganiza, en. MA S. respuesta a estímulos fisiológicos y patológicos. La compresión de los mecanismos que generan las alteraciones vasculares es una. TE. base fundamental para el desarrollo de terapéuticas que contribuyan. SI S. a la prevención y reversión del daño orgánico, iniciado en la. DE. vasculatura35.. Es conocido que la regulación del tono vascular, la permeabilidad. A. vascular y tromborresistencia es esencial para mantener la. IN. circulación sanguínea y por ende el entorno tisular bajo condiciones. OF. IC. fisiológicas3. Así mismo, las células endoteliales vasculares juegan un rol importante en el mantenimiento de la homeostasis cardiovascular. Y en suma proveen de barrera física entre la pared vascular y el lumen. Al igual que las células musculares lisas (CML),. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. la matriz extracelular subyacente y adventicia proveen el soporte estructural y fisiológico de la pared vascular. El endotelio secreta numerosos mediadores que regulan la. CA. agregación plaquetaria, coagulación, fibrinólisis y tono vascular4.. MA TI. Ante ello, son los estímulos aterogénicos principalmente los que activan la señalización celular y por lo tanto modulan irregularmente la función de las células endoteliales, generando así un conjunto de. FO R. mecanismos de compensación y daño que afecta a toda la 3,26. ; denominándose a ello. IN. estructura vascular y extravascular. disfunción endotelial. El término disfunción endotelial se define como. E. una condición en la que el endotelio ha perdido sus propiedades. MA S. fisiológicas3. Siendo ello característico en el daño cardiovascular en diabetes mellitus4,6; y otros estados patológicos asociados. En ella,. TE. observamos una pérdida de la vasodilatación dependiente del. SI S. endotelio por la disminución de la actividad del óxido nítrico (NO) en la pared vascular, ya sea por una menor producción, una producción. DE. aberrante o una mayor degradación5.. A. En efecto, los cambios moleculares relacionados con las disfunción. IN. endotelial, favorecen la generación de alteraciones morfológicas y. OF. IC. estructurales en los vasos sanguíneos; es así que evidencias han demostrado que los pacientes diabéticos pueden presentar lesiones vasculares ateroscleróticas tempranas, que están compuestas de una degeneración grasa y de un endurecimiento de la pared arterial; siendo. ello. enmarcado. dentro. de. las. complicaciones. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. macrovasculares. Se ha reportado que uno de los vasos más característicamente afectados sería la aorta, lo cual posteriormente llegaría a ser un gran factor contribuyente al daño de órgano diana28.. MA TI. independiente de mortalidad cardiovascular36.. CA. Incluso se considera que la rigidez de la aorta es un factor predictivo. El remodelamiento vascular (cambios morfológicos y estructurales vasculares), han sido descritos como procesos que implican. FO R. modificación de la estructura de la pared vascular y que pueden ir en. IN. conjunción del proceso de crecimiento9,30. Estudios experimentales en diabetes mellitus han reportado el. remodelamiento vascular. E. como cambios en el grosor de la túnica media, área de la túnica. MA S. media, diámetro intraluminal, razón entre la media y el lumen. TE. (hipertrofia vascular), contenido de colágeno y fibras elásticas28,31.. SI S. Por otro lado, en los últimos años ha quedado claro. que la. DE. aldosterona no sólo es responsable del mantenimiento de fluido y equilibrio de electrolitos, sino que debe ser considerada una. A. hormona con efectos generalizados sobre la vasculatura, el corazón. IN. y los riñones. 7, 8, 31. . Incluso se le ha atribuido mecanismos de acción. OF. IC. independientes del receptor mineralocorticoide, y vías de acción genómica y no genómica36.. A largo plazo, Estudios clínicos han demostrado que a pesar de una reducción de la activación del sistema renina angiotensina. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. aldosterona (SRAA) por inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (IECAs) o antagonistas del receptor de angiotensina II (ARAII) o de la combinación de ambos; los niveles plasmáticos de en algunos. pacientes, luego de haber. CA. aldosterona aumentan. cambios;. denominándose. a. MA TI. sufrido una disminución inicial, o haber permanecido en un nivel sin ello. ―fenómeno. de. escape. de. aldosterona‖. Este aumento también se ha demostrado en algunos. Schojoet K, et al;. 8. reportados. sugieren que durante el escape de. IN. por. FO R. modelos experimentales de diabetes mellitus.31 Datos. aldosterona a largo plazo del bloqueo del SRAA se asocia con una. E. disminución mayor en la tasa de filtración glomerular en pacientes. MA S. con diabetes tipo 1 y nefropatía diabética.. TE. Además, se sabe que la aldosterona media algunas de las acciones. SI S. de la Angiotensina (Ang) II por lo general atribuido a las acciones. DE. directas del péptido; regula el alza de los componentes del SRAA, específicamente de la enzima convertidora de angiotensina (ECA),. A. resultando. en. una. mayor. generación. IN. Contribuyendo así a la generación de. local. de. Ang. II.9,10. daño local, como se ha. OF. IC. demostrado en corazón y vasos sanguíneos.32 Un proceso inverso de. transactivación. del. receptor. mineralocorticoide. (RM). independiente de aldosterona, por parte de la Ang II ha sido señalado también;. y se le ha atribuido la regulación de genes. relacionados con cambios vasculares.9 Por consiguiente, se tiene. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. que aldosterona ejerce efecto sinérgico mitogénico con Ang II.11, 28, 31. Así mismo, parece ser que el consumo de una dieta alta en sal. CA. sensibiliza al sistema cardiovascular a los nefastos efectos. MA TI. aldosterona; tales como la fibrosis e hipertrofia cardiaca y vascular, además de alteraciones funcionales 9, 28, 31,33. Por otro lado,. hay evidencia de que la participación de la. FO R. aldosterona en la inhibición de la enzima implicada en la síntesis de. IN. óxido nítrico (NO) en situaciones patológicas12.. El bloqueo de la actividad de la aldosterona ha mostrado tener. E. efectos funcionales beneficiosos sobre la función cardiovascular. Por. MA S. ejemplo, la espironolactona ha demostrado efectos favorables frente a la insuficiencia cardiaca, en un estudio en humanos (RALES,. TE. Randomised Aldactone Evaluation Study).13 Similares beneficios. SI S. sobre la insuficiencia cardiaca fueron reportados subsecuentemente. DE. con el uso de esplerenone, un antagonista del RM más específico (EPHESUS, Eplerenone Post-AMI Heart Failure Survival Study; y. A. EMPHASIS)14,37. También espironolactona ha demostrado reducir la. IN. masa del ventrículo izquierdo y mejorar la rigidez arterial en las. OF. IC. primeras etapas de la enfermedad renal crónica15. Por otro lado, el bloqueo del RM ha prevenido la disminución de la sintasa de óxido nítrico endotelial (eNOs) asociado con hipertensión e insuficiencia cardiaca en ratas16,17. Así mismo la adición de espironolactona a la terapia convencional del bloqueo del SRAA en insuficiencia cardiaca. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. experimental, normaliza la relajación mediada por NO, por beneficio de la modulación de NO17. estudio realizado por Rossing K, et al.19 sugirió que la. Un. CA. espironolactona con seguridad se suma a los beneficios de. MA TI. protección renal y cardiovascular del tratamiento con las dosis máximas recomendadas de IECAs y ARA II por la reducción de la albuminuria y la presión arterial en pacientes diabéticos tipo 2 con. FO R. nefropatía.. IN. En el 2010 Schafer A, et al20 encontró que; esplerenone, un bloqueador especifico RM, mejoró la función endotelial y redujo la. E. formación de superóxido y aumento la biodisponibilidad del NO en. MA S. un modelo experimental de diabetes en ratas. Similares hallazgos como la disminución de la hipertrofia vascular, disminución del. TE. contenido de colágeno en túnica media, y mejora en la función. en contraposición a los beneficiosos mostrados, un. DE. Si embargo,. SI S. vascular han sido reportados por Resch M, et al31 y Salum E, et al.28. estudio realizado por Davies I. et al,. A. tratamiento con. 21. ha informado de que el. espironolactona por 1 mes empeoro la función. IN. endotelial en pacientes diabéticos tipo 2 sin insuficiencia cardíaca. El. OF. IC. grado de empeoramiento determinado durante el tratamiento con espironolactona fue correlacionado con el aumento de la HbA1c observada en estos pacientes. Así mismo; Koh P, et al22 ha realizado. un estudio experimental de aterosclerosis y diabetes, en ratones knock out deficientes de Apo E. y diabetes inducida por. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. estreptozotocina, y ha encontrado que esplerenone no atenúa la aterosclerosis en un contexto diabético. Lo que pondría en tela de juicio el probable efecto beneficioso de la espironolactona sobre. MA TI. CA. daño vascular que acompaña a la diabetes mellitus.. II. Justificación. Con base en el elevado riesgo cardiovascular y renal de los. FO R. pacientes diabéticos, son necesarios adecuados tratamientos. IN. farmacológicos que ofrezcan protección frente a complicaciones de la diabetes, particularmente a la luz del creciente número de. E. pacientes que desarrollan esta enfermedad y la cronicidad que lo. MA S. acompaña.. El bloque de la aldosterona ha seguido los pasos de la inhibición de. TE. la ECA en la reducción de la mortalidad en los pacientes con. SI S. insuficiencia cardiaca. Esto se asocia a sus efectos beneficiosos. DE. sobre la función endotelial y la variabilidad del ritmo cardíaco. La diabetes es otra área en donde se ha demostrado que la reducción. A. de la actividad de la angiotensina II ha demostrado tener particular. IN. valor. Es así que planteamos que es posible que el bloqueo de. OF. IC. aldosterona podría tener efectos beneficiosos sobre la función endotelial por ende atenuar el remodelamiento aórtico en la vasculopatía acompañante a la diabetes mellitus. Además, el presente trabajo contribuirá. evaluar la probable controversia. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. benéfica que tendría la el bloqueo de la actividad de la aldosterona sobre la función vascular en esta enfermedad. III. Enunciado del Problema. CA. ¿Cuál es el efecto de espironolactona sobre el remodelamiento. MA TI. aórtico en ratas diabéticas? IV. Hipótesis. La espironolactona atenúa el remodelamiento aórtico en ratas. FO R. diabéticas.. A.. IN. V. Objetivos Objetivo General:. E. Determinar el efecto de espironolactona sobre el remodelamiento. MA S. aórtico en ratas diabéticas B.. Objetivos Específicos:. TE. 1. Determinar el efecto de la espironolactona sobre de grosor. SI S. de la túnica media en aorta de ratas diabéticas. DE. 2. Determinar el efecto de la espironolactona sobre del área de la túnica media en aorta de ratas diabéticas. A. 3. Determinar el efecto de la espironolactona sobre el diámetro. IN. interno en aorta de ratas diabéticas. OF. IC. 4. Determinar el efecto de la espironolactona sobre la hipertrofia vascular en aorta de ratas diabéticas. 5. Determinar el efecto de la espironolactona sobre el contenido de colágeno en aorta de ratas diabética. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VI. MATERIAL Y PROCEDIMIENTO O METODO. Diseño de contrastación: diseño experimental aleatorio. A.. Esquema del diseño de estudio:. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. MA TI. B.. CA. simple de 3 grupos. Control (n=8): grupo a quien se le suministro solo buffer citrato. DM (n=8): grupo con diabetes mellitus experimental sin tratamiento. DM-ESP(n=8): grupo con diabetes mellitus experimental tratado con espironolactona.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. C.. Diseño estadístico de la muestra:. 1.. Unidad de análisis:. CA. 1 rata Sprague Dawley macho de 8 – 10 semanas de edad y/o. MA TI. alrededor de 238 ±11 gramos de peso. Obtenido del bioterio de la Universidad Peruana Cayetano Heredia (UPCH) 2.. Tamaño muestral. FO R. Para el cálculo de la muestra, se considerara un error de tipo I (α). Dónde:. SI S. n= muestra final. TE. MA S. E. mediante la siguiente fórmula:. IN. del 5% y un error tipo II (β) del 20% del tamaño maestral se obtiene. Para α =0.05 y Z β = 0.84 para β =0.20. DE. δV=1, considerando los valores asignados por Stell R y , Torrie G.23 Reemplazando:. n =7.8. IN. A. Para mayor representatividad de la muestra asumimos n= 8. IC. elementos por grupo. OF. 3.. Material.. La espironolactona (ALDACTONE ®) fue adquirida de laboratorios. Pfizer tabletas de 20mg y 100mg. La estreptozotocina fue adquirida de MERCK (Damstard, ALEMANIA) y de colorante histológico rojo sirio fue adquirido de Sigma Chemical (St. Louis, MO, EEUU).. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 4.. Preparación de la dosis de fármaco. 50 mg de espironolactona fueron diluidos en suero salino estéril, luego la dosis en ―mg‖ se convirtió a volumen mediante regla de y administro vía orogástrica a cada animal según. CA. tres simple. 5.. Modelo experimental de diabetes. Ratas. Sprague. Dawley macho;. MA TI. registro de peso.. mantenidas. a. temperatura. FO R. ambiental, con dieta balanceada (purina medicada), con agua ad. IN. libitum, con un ciclo 12 horas de luz y oscuridad. La diabetes fue inducida por una sola inyección intraperitoneal de. E. estreptozotocina (STZ) (50 mg/kg) preparado en 0.1mol/L de buffer. MA S. citrato (pH 4.5). Las ratas del grupo control (sham) se les inyectó con el mismo volumen de buffer citrato solo. Luego de tres días de. TE. la inyección de STZ se midió los niveles de glucosa por el método. SI S. enzimático, y las ratas que tuvieron valores de glucosa sérica 24. Y. DE. superior a 200mg/dL fueron consideradas en el estudio.20,. mantenidas durante 56 días, tiempo estimado en función al estudio. IN. A. piloto previo y trabajos semejantes.20, 28, 31, 34 Análisis histológico y de parámetros morfométricos de. IC. 6.. OF. los anillos aórticos Al finalizar el suministro de medicamento, los animales fueron sometidos a 12 h de ayuno. Luego fueron anestesiados con Ketamina (35mg/kg) y Xilacina (7mg/kg) por vía intra-peritoneal38.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Se registró su peso y se recolecto muestra sanguínea para medición de glucosa. Las aortas se extrajeron inmediatamente post sacrificio, mediante. CA. toracotomía anterior y exposición la porción torácica, se lavaron. MA TI. cuidadosamente con suero fisiológico, posteriormente se fijó con formalina al 10% durante 12 horas y luego fueron incluidas en bloques de parafina, ser cortadas con micrótomo, montadas en una. FO R. lámina histológica y teñidas para su posterior análisis.. IN. Las imágenes de las láminas histológicas, fueron tomadas mediante una cámara digital acoplada a microscopio MOTIC. E. (Perteneciente al Instituto de Medicina Tropical e infectologia de la. MA S. Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo). La calibración para registro de medida, se realizó haciendo uso de. TE. MOTIC slide calibration. Además se hizo uso de MOTIC image 2.0. SI S. y Image J. (ImageJ, NIH, USA) para la determinación morfometrica. DE. especifica. Un solo investigador desconocedor de la naturaleza de la naturaleza de los grupos estuvo a cargo de las determinaciones.. A. El remodelamiento aórtico concebido como el conjunto de procesos. IN. que implican modificación de la estructura de la pared vascular29,. OF. IC. contribuye a la fisiopatología de las enfermedades vasculares; 28,30, 33. como es el caso de la afección a nivel de aorta en la diabetes. mellitus.28,. 31. Para el presente trabajo se evaluó en función a los. siguientes parámetros.28, 31,32. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 6.1 Grosor de la túnica media (GTM, mm): en las láminas teñidas con hematoxilina & eosina y a un objetivo de 40X, se definió como la región delimitada por la lámina elástica externa (LEE) y la lámina. CA. elástica interna (LEI) 33. Se realizó 10 mediciones por cada sección. MA TI. de anillo aórtico.. 6.2 Área de la túnica media (ATM mm2): en las láminas teñidas con hematoxilina & eosina aun objetivo de 4X, se calculó y registro. FO R. previamente las áreas del lumen (AL, mm2) y total (AT, AT,mm2). El área de la túnica media (ATM) se obtuvo de la diferencia del AT y. IN. el AL de la aorta33.. E. 6.3 Diámetro interno de la aorta (DIA): en las láminas teñidas con. MA S. hematoxilina & eosina aun objetivo de 4x, se realizó midiendo dos diámetros internos en ángulo recto para cada sección transversal. TE. de la aorta torácica28.. SI S. 6.4 Hipertrofia vascular (HV): en las láminas teñidas con hematoxilina eosina, se. determinó por la razón entre la. DE. media/lumen o ATM/AL 28, 31, 32, 33.. A. 6.5 Contenido de colágeno: en las láminas teñidas con rojo sirio a. IN. un objetivo de 40x, la cual es una tinción específica para colágeno,. OF. IC. se determinó mediante cuantificación de densidad a través de ImageJ, teniendo en cuenta sólo el contenido de colágeno de la túnica media. 28, 31, 32. .se registraron 10 imágenes por sección. transversal de aorta.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Finalmente se analizaron 3 secciones de anillo aórtico por cada espécimen. 7. Análisis e interpretación de la información. CA. Todos los valores se expresaran como media ± desviación estándar.. MA TI. Se usó la prueba de análisis de varianza (ANOVA) para determinar la diferencia significativa entre los promedios. Así mismo se usó la post prueba de tukey para determinar entre que promedios la diferencia es. FO R. significativa. Las diferencias se consideraron significativas con un valor. GraphPad Prism 5.0 Software.. E. 8. Ética. IN. de p<0,05. Los datos fueron procesados con el paquete estadístico. MA S. El protocolo experimental de este estudio será realizado de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio,. TE. publicado por el National Health Institute (NIH Publication N° 85-23,. OF. IC. IN. A. DE. SI S. 1996)25.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VII RESULTADOS Durante la realización del estudio se evidenció un notable cambio metabólico en los grupos DM, DM-SPL;. luego del suministro de. CA. STZ, se halló valores de glucosa sérica superiores significativamente. MA TI. en el grupo DM (409.8±17.8 mg/dL) y DM-SPL(411.5±14.7mg) frente a los del grupo CONTROL (118.3± 11mg/d; p < 0.05).Además de una gran pérdida de peso significativa en los grupos DM. FO R. (169.3±13.1g) y DM-SPL (168.1± 8.8g) frente al grupo CONTROL. IN. (250.5±11.3g; p<0.05).Por otro lado se apreció mayor ingesta de alimento y agua en las ratas diabéticas (tabla 1).. E. Asociado a ello no se registró diferencia significativa de peso del. MA S. grupo DM (169.3±13.1g) en comparación al grupo de DM-SPL (169.3±13.1g, p>0.05) así mismo no hubo diferencia significativa en. TE. los valores de glucosas del grupo DM (409.8±17.8 mg/dL) frente al. OF. IC. IN. A. DE. SI S. grupo DM-SPL (411.5±14.7mg; p>0.05) (trabla1).. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. TABLA 1. Efecto de la espironolactona sobre las variables. DM. DM-SPL. (n=8). (n=8). PC(g). 250.5±11.3. 169.3±13.1*. Glucosa (mg/dl). 118.3± 11. 409.8±17.8#: 411.5±14.7#:. MA TI. CONTROL. (n=8). FO R. 168.1± 8.8*. IN. VARIABLE. CA. metabólicas. PC: peso corporal; DM: ratas con diabetes experimental; DM-SPL:. MA S. E. ratas tratadas con espironolactona. Los valores se expresan como media ± desviación estándar.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. *p<0.05 vs control; #:p :<0.05 vs control.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Respecto a los cambios morfométricos se encontró que hubo disminución significativa del GTM. en. los grupo DM frente al grupo CONTROL. (86.81±3.9 µm vs 94.45±2.02 µm respectivamente; p<0.05); sin embargo. CA. no se evidenció diferencia significativa del grupo DM (86.81±3.9 µm) en. MA TI. comparación al grupo DM-SPL (88.59±2.8 µm; p>0.05) (Tabla 2).. El ATM se incrementó significativamente en el grupo DM frente al grupo CONTROL (0.74±0.03 mm2 vs 0.59±0.06 mm2 respectivamente; p<0.05),. FO R. además, SPL logro atenuar este cambio en el grupo DM-SPL (0.67±0.06. IN. mm2) frente al grupo DM (0.74±0.03 mm2; p<0.05) (Figura 1). Con relación al DIA, éste aumentó significativamente en el grupo con DM comparación. al. grupo. CONTROL. E. en. (1549.73±94.36µm. vs,. MA S. 1339.±77.18µm respectivamente; p<0.05) (Figura 2). La HV incrementó significativamente en el grupo DM en comparación al grupo CONTROL. TE. (0.47±0.03 vs 0.40±0.04 respectivamente; p<0.05); a su vez fue menor. SI S. significativamente en el grupo DM-SPL (0.44±0.04) frente al grupo DM. DE. (47±0.03; p<0.05) (Figura 3). Con respecto al contenido de colágeno (%) de la pared arterial aórtica,. A. este aumentó significativamente en el grupo DM comparado con el grupo. IN. CONTROL (6.24±0.33 vs 3.52±0.76 respectivamente; p<0.05), aunque se. OF. IC. reportó valores menores en el grupo DM (6.24±0.33) frente al grupo DMSPL (4.98±0.42; p<0.05) (Figura 4).. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CA. TABLA 2. Efecto de la espironolactona sobre las variables. DM. DM-SPL. (n=8). (n=8). (n=8). GTM(µm). 94.45±2.02. 86.81±3.9*. ATM (mm2). 0.59±0.06. 0.74±0.03#:. 0.67±0.06. DIA(µm). 1339.±77.18. HV. 0.40±0.04. 1549.73±94.36$. 1459.24±91.32. 0.47±0.03**. 0.44±0.04. E. IN. 88.59±2.8*. 3.52±0.76. 6.24±0.33##. 4.98±0.42. TE. Colágeno (%). FO R. CONTROL. MA S. VARIABLE. MA TI. morfométricas y contenido de colágeno. SI S. GTM: Grosor de la túnica media; ATM: Área de la túnica media; DIA:. DE. diámetro interno de la aorta; HV: hipertrofia vascular; DM: ratas con diabetes experimental; DM-SPL: ratas tratadas con espironolactona. Los. IN. A. valores se expresan como media ± desviación estándar.. IC. *p <0.05 vs control; #p<0.05 vs DM-SPL; $p<0.05 vs DM-SPL;**p<0.05 vs. OF. DM-SP; ##p<0.05 vs DM-SPL.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IN. FIGURA 1. Efecto de la espironolactona sobre el ATM. E. 1.0. MA S. 0.6 0.4. TE. ATM(mm2). 0.8. 0.0. SI S. 0.2. DM. DM-SPL. DE. CONTROL. ATM: Área de la túnica media. DM: ratas con diabetes experimental; DM-. IN. A. SPL: ratas tratadas con espironolactona. Los valores se expresan como. OF. IC. media ± desviación estándar. p<0.05, DM vs DM-SPL.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) FO R. MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IN. FIGURA 2. Efecto de la espironolactona sobre el DIA. E. 2000. MA S. 1000. TE. DIA(µm). 1500. SI S. 500 0. DM. DM-SPL. DE. CONTROL. DIA: diámetro interno de la aorta; DM: ratas con diabetes experimental;. IN. A. DM-SPL: ratas tratadas con espironolactona. Los valores se expresan. OF. IC. como media ± desviación estándar. p<0.05 DM vs DM-SPL.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) MA TI. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IN. FO R. FIGURA 3. Efecto de la espironolactona sobre el HV. MA S. E. 0.6. TE. HV. 0.4. 0.0. SI S. 0.2. DM. DM-SPL. DE. CONTROL. HV: hipertrofia vascular; DM: ratas con diabetes experimental; DM-SPL:. IN. A. ratas tratadas con espironolactona. Los valores se expresan como media. OF. IC. ± desviación estándar. p<0.05 DM vs DM-SPL.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. Figura N 4. Efecto de la espironolactona sobre el contenido de. MA TI. 8. FO R. 6. IN. 4. E. 2 0. MA S. Contenido de colageno(%). CA. colágeno (%). CONTROL. DM. DM-SPL. TE. DM: ratas con diabetes experimental; DM-SPL: ratas tratadas con. SI S. espironolactona. Los valores estándar.. se expresan como media. ± desviación. OF. IC. IN. A. DE. *p<0.05 en DM vs DM-SPL.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) b. o. c. MA TI. a. FO R. CA. Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. q. y. z. x. DM. DM-SPL. SI S. TE. CONTROL. MA S. E. IN. p. Imágenes de las secciones transversales de aorta de los. DE. Figura 5.. grupos CONTROL, DM, DM-SPL respectivamente a objetivo de 4X (a, b,. A. c); 40X (p, q, r) con coloración hematoxilina eosina; 40X (x, y, z) con la. IN. aplicación de threshold para la cuantificación por densidad del contenido. OF. IC. de colágeno en las láminas Teñidas con Rojo Sirio (imageJ).. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. VIII DISCUSIÓN El daño vascular en la diabetes mellitus es un mecanismo progresivo, indesligable y principal, en los efectos deletéreos y desenlace de la. CA. enfermedad. El presente estudio, permitió evaluar en un modelo. MA TI. experimental de diabetes inducida por STZ, los cambios a nivel vascular. Conforme a similares estudios se observó el abrupto cambio metabólico en los animales45, en nuestro caso se registró disminución marcada de. FO R. peso y elevación mantenida de los valores de glucosa sérica, los cuales. IN. no fueron afectados por el suministro de SPL; lo que concuerda con estudios semejantes en los cuales se ha bloqueado el receptor. E. mineralocorticoide, pues este efecto no estaría sustentado en el control de. MA S. la glicemia22,39.. Se ha comprobado que la aldosterona no solo actuaría a nivel balance. 41-43.. . A nivel vascular se ha descrito su participación en la. SI S. organismo. TE. hidroelectrolítico, pues existen múltiples niveles de acción de esta en el. modulación de la funcionalidad del endotelio y de las células musculares. DE. lisas, por lo tanto participa en la estructura morfológica43. En estudios de. A. diabetes experimental se ha reportado alteración en la dilatación. IN. dependiente del endotelio o dilatación dependiente óxido nítrico evaluado. OF. IC. mediante uso de sistemas de órgano aislado; así mismo, alteración del mismo óxido nítrico como medio de comunicación celular a nivel de células musculares lisas20,28,44. Asociado a ello la generación del estrés oxidativo. y depósito de productos de glicación avanzada, favorecen. mecanismo de cambios en el trofismo de las células musculares lisas y en. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. el contenido de la matriz extracelular subyacente 30. Obteniéndose una pared vascular rígida, con un cociente ATM/AL (HV) alterado, un área luminal proclive a la aterotrombosis y proinflamatoria28-30,. en. CA. En relación al análisis morfométrico se han descrito cambios. las. MA TI. vasos sanguíneos de las ratas con diabetes inducida por STZ, es así que se ha reportado disminución del GTM28, hallazgo semejante en nuestro estudio, sin embargo, no se logró tener un efecto favorable en el grupo al. FO R. que se le suministro SPL. Además, se evidenció un notable incremento de la ATM, DIA y HV en el grupo DM, que fue evitado por la SPL, similares. IN. resultados se han obtenido en otros estudios20,28,31.. E. El aumento del depósito de matriz extracelular en la pared de los vasos,. MA S. principalmente el colágeno, ha sido explicado parcialmente por el efecto humoral de aldosterona, independiente de su efecto sobre la presión. TE. arterial, a través del aumento de precursores de ARNm de preproteína. SI S. endotelina ET-1; y éste a su vez regula la fibrosis local a través de la. DE. acción del factor de crecimiento transformante beta40. Confirmado mediante el bloqueo del depósito de colágeno en la pared vascular, como. A. consecuencia del bloqueo del receptor de endotelina ETA en ratas. IN. perfundidas con aldosterona41. Además, se plantea un mecanismo de. OF. IC. acción no genómico de la aldosterona independiente del receptor mineralocorticoide, específicamente mostrando actividad profibrótica vía c-Src (tyrosine kinase)42. Es por ello que estudios en modelos animales semejantes han registrado notable aumento de colágeno en la pared arterial a nivel de intima, media y adventicia, tanto como cambio en las. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. características de las fibras elasticas28-32, hallazgos similares fueron confirmados en nuestro estudio, así mismo el suministro de SPL logró disminuir el contenido de colágeno en el grupo DM-SPL. Con ello se el. efecto. atenuante. que. el. bloqueo. del. receptor. CA. apoyaría. MA TI. mineralocorticoide tendría frente al daño vascular provocado por la. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. diabetes mellitus20-31.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. IX CONCLUSIONES La espironolactona atenúa el remodelamiento aórtico en ratas diabéticas Con respecto a los objetivos específicos:. CA. 1. La espironolactona no atenúa la disminución del grosor de la túnica. MA TI. media en aorta de ratas diabéticas. 2. La espironolactona atenúa el aumento del área de la túnica media en aorta de ratas diabéticas. FO R. 3. La espironolactona atenúa el aumento del diámetro interno en aorta. IN. de ratas diabéticas. 4. La espironolactona atenúa la hipertrofia vascular en aorta de ratas. E. diabéticas.. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. aorta de ratas diabética.. MA S. 5. La espironolactona atenúa el aumento del contenido de colágeno en. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. X REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: 1. Madonna R, De Caterina R. Cellular and molecular mechanisms of vascular injury in diabetes — Part I: Pathways of vascular. CA. disease in diabetes: Review. Vascular Pharmacology.2011; 54: 68–. 2.. No. authors. listed.. Intensive. MA TI. 74.. blood-glucose. control. with. sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment. FO R. and risk of complications in patients with type 2 diabetes (UKPDS. IN. 33). UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) Group. Lancet.1998; 352:837–853. E. 3. Hirase T, Node K. Endothelial Dysfunction as a Cellular. MA S. Mechanism for Vascular Failure. Am J Physiol Heart Circ Physiol ajpheart.00325.2011; published ahead of print November 11, 2011,. TE. doi:10.1152/ajpheart.00325.2011.. SI S. 4. Avogaro A, Vigili de Kreutzenberg S, Fadini J. Endhotelial. DE. dysfunction: Causes and Consecuences in patients with diabets mellitus. Diabetes Reseach and Clinical Practice.2008; 82S: S94-. A. S101.. IN. 5.Wilcox JN, Subramanian RR, Sundell CL, Tracey WR, Pollock JS,. OF. IC. Harrison DG, et al. Expression of multiple isoforms of nitric oxide synthase in normal and atherosclerotic vessels. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1997; 17(11):2479-88. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

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(38) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 18. Bauersachs J, Heck M, Fraccarollo D, Hildemann S, Ertl G, Wehling M, Christ M. Addition of Spironolactone to AngiotensinConverting Enzyme Inhibition in Heart Failure Improves Endothelial. CA. Vasomotor Dysfunction: Role of Vascular Superoxide Anion. MA TI. Formation and Endothelial Nitric Oxide Synthase Expression. J Am Coll Cardiol 2002; 39:351– 358.. 19. Rossing K, Schjoedt K, Smidt U, Booms a F, Parving H.. Treatment. in. Diabetic. Nephropathy:. A. IN. Antihypertensive. FO R. Beneficial Effects of Adding Spironolactone to Recommended. 2005; 28(9): 2106-2112.. E. randomized, double-masked, cross-over study. Diabetes Care.. MA S. 20. Schafer A, Vogt C, Fraccarollo D, Widder J, Flierl U, Hildemann S, Ertl G, Bauersachs J. Eplerenone Improves Vascular Function. TE. And Reduces Platelet Activation In Diabetic Rats. Journal of. SI S. Physiology and Pharmacology 2010; 61(1): 45-52.. DE. 21. Davies I, Band M, Morris A, Struther A. Spironolactone impairs endothelial function and heart rate variability in patients with type 2. A. diabetes, Diabetologia.2004;47: 1687–1694.. IN. 22. Koh P, Koitka A, Cooper M, Allen T. Eplerenone does not diabetes-associated. atherosclerosis.. Journal. of. OF. IC. attenuate. Hypertension 2009; 27(7): 1431-1438. 23. Stell R, Torrie G. Comparación entre medias muestrales en: Bioestadistica: Principios y procedimientos. 2º edición. Editorial Mc Graw Hill – Interamericana. Mexico DF.1996:115-116.. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 24. Aguilar C, Ventura F, Rodríguez L. El aumento de la expresión del ARNm de la enzima convertidora de angiotensina I homóloga (ECA-2) inducido por atorvastatina se asocia a menor fibrosis e. CA. hipertrofia ventricular izquierda en un modelo de cardiomiopatía. MA TI. diabética. Rev Perú Med Exp Salud Pública. 2011; 28(2): 264-72. 25. National Research Council, Euthanasia in: NIH Guide for the care. and. use. of. laboratory. animals.. Academy. FO R. Press.Washintong. DC. 1996: 65-66.. National. IN. 26. Koh K, Han S, Quon M. Inflammatory markers and the metabolic syndrome: insights from therapeutic interventions. J. Am.. E. Coll. Cardiol. 2005; 46:1978–1985.. MA S. 27. Goyal BR, Solanki N, Goyal RK, Mehta AA. Investigation into the cardiac effects of spironolactone in the experimental model of. TE. type 1 diabetes. J Cardiovasc Pharmacol. 2009 Dec; 54 (6):502-9.. SI S. 28. Salum E, Kampus P, Zilmer M, Eha J, Butlin M, P Avolio A,. aortic. DE. Põdramägi T, Arend A, Aunapuu M, Kals J. Effect of vitamin D on remodeling. in. streptozotocin-induced. diabetes.. A. Cardiovascular Diabetology 2012, 11:58.. IN. 29. Heagerty A,. Aagerty C, Bund S, Korsgaard N, Mulvany M.. OF. IC. Small Artery in Hypertension: Dual Process of Remodeling and Growth: Brief review. Hypertension. 1993 April.21 (4):391-510. 30. Kristhna G, BirShand. Kevil B. Review article: Endhotelial. Dysfunction and Diabetes: Effects on agiogenesis,. Vascular. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. remodeling, and Would Healing. Internactional Journal of Vascular Vascular Medicine. 2012,doi: 10,1155/2012/918267. 31. Resch M, et al. Esplenerone Prevents Salt-induced Vascular in. CA. Zucker diabetic fatty rats: a preliminary report. Cardiovascular. MA TI. Diabetology. 2011;10:94.. 32. Park JB, Schiffrin EL. Fibrosis e hipertrofia cardiaca y vascular en ratas perfundidas con aldosterona: papel de la endotelina-1. Am. FO R. J Hypertens (Ed. Esp.) 2002; 4: 285-291.. IN. 33. Ocaranza MP, Moya J, Pinto M, Escudero N, Valenzuela F, Varas M, Godoy I, Chiong M, Lavandero S, Jalil J. Menores niveles. E. tisulares de la enzima convertidora de angiotensina I homóloga y. angiotensina-(1-9). MA S. (eca-2). están. asociados. a. mayor. remodelamiento de la pared aórtica de ratas hipertensas. Rev Chil. Shafiei. M,. Nobakht. SI S. 34.. TE. Cardiol 2010; 29: 69-82.. N,. Fattahi. M,. Kohneh-Shahri. L,. DE. Mahmoudian M. Histochemical assessment of nitric oxide synthase activity in aortic endothelial cells of streptozotocin-induced diabetic. A. rats. Pathophysiology. 2003; 10: 63–67.. IN. 35. Risler N, Miatello R, Cruzado Monserrat. REVISION: La pared. OF. IC. vascular en la hipertensión arterial. Rev Fed Arg Cardiol 2002;. 31:315-320. 36. Losel, R., Feuring, M., & Wehling, M..Non-genomic aldosterone action: from the cell membrane to human physiology.J Steroid Biochem Mol Biol.2002; 83:167–171.. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 37. Zannad, F., McMurray, J. J., Krum, H., van Veldhuisen, D. J., Swedberg, K., Shi, H., et al. Eplerenone in patients with systolic heart failure and mild symptoms. N Engl J Med .2011;.364:11–2.. CA. 38. Moya J, Novoa U, Escudero N, Godoy I, Chiong M, Lavandero. MA TI. S, Jalil J, Ocaranza M. Mayores niveles de ECA y Angiotensina II determinados genéticamente, se asocian a menor actividad del eje ECA2/angiotensina-(1-9) y mayor remodelamiento de la pared. FO R. aórtica de ratas hipertensas. Rev Chil Cardiol 2012; 31(2): 118-128.. IN. 39. Aguilar C, Rodriguez- Delfin L. Efecto de la administración de espironolactona sobre la pérdida de podocitos y la progresión de. E. la nefropatía diabética experimental. Rev Peru Med Exp Salud. MA S. Publica. 2012; 29(4):490-97.. 40. Park JB, Schiffrin EL: ETA receptor antagonist prevents blood. TE. pressure elevation and vascular remodeling in aldosterone-infused. SI S. rats. Hypertension 2001;37:1444-1449.. DE. 41. Bae park J, Schiffrin E .Fibrosis e hipertrofia vascular en ratas perfundidas con aldosterona: papel de la endotelina 1. AJH (ed.. A. Esp) 2002; 4: 285-291.. IN. 42. Callera G. Touys R, Tostes R, Yogy A, HeY, Malkinson. OF. IC. S.Aldosterone activates vascular p38MAP kinase and NADPH oxidase via C-Scr.Hypertension.2005;45: 773-779. 43. Van den Berg T, Rongen G, Fröhlich G, Deinum J, Hausenloy D, Riksen N. The cardioprotective effects of mineralocorticoid. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(42) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. receptor. antagonists.. Pharmacology. &. Therapeutics. .2013,. http://dx.doi.org/10.1016/j.pharmthera.2013.11.006. 44.Johnstone M, Creager S, Scales K, Cusco J, Lee B, Creager M.. CA. Impaired endothelium- dependent vasodilatacion in patients with. MA TI. insulin-dependent diabetes mellitus. Circulation 1993, 88: 228-233. 45. Wei M, et al. The Streptozotocin-Diabetic Rat as a Model of the Crhonic Complications of Human Diabetes. Heart, Lung and. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. circulation 2003; 12: 44-50.. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(43) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 1 HOJA DE RECOLECCIÓN DE DATOS N°. Control. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9. PESO CORPORAL. DIA. HV. Contenido de colágeno. FO R IN E MA S TE. OF. IC. IN. A. DE. DM + ESP. ATM. SI S. DM. Termino. GTM. MA TI. Inicio. GLUCOSA SERICA Inicio Termino. CA. GRUPO. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(44) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO N° 2. CA. HOJA PARA LA CALIFICACION DEL INFORME FINAL DE LOS TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN EN LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNT INSTRUCCIONES:. Encerrar en un círculo la letra correspondiente a la valoración asignada a cada ítem.  Cada ítem se calificará de la siguiente manera. = = =. 1 0.5 0. b b. a a a a. DE. SI S. TE. MA S. II.- PLAN DE INVESTIGACION 2.1. Antecedentes a 22. Justificación a 2.3. Problema 2.4. Objetivos 2.5. Hipótesis 2.6. Diseño de contrastación de hipótesis c 2.7. Tamaño muestral a 2.8. Análisis estadístico a. b b. c c. E. IN. I.- GENERALIDADES INFORME FINAL 1.1. El Título a 1.2. Tipo de investigación a. FO R. a b c. MA TI. . c c. b b b b. b b. c c. a. b. c. IV.-DISCUSION. a. b. c. a. b. c. IN. A. III.- RESULTADOS. V.- CONCLUSIONES. OF. IC. VI.- REFERENCIAS BIBLlOGRÁFlCAS a VII.- RESUMEN. a. VIII.- RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN a IX.-ORIGINALIDAD a. b. c c c. b. c. b. c. b. c c. 42 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(45) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. X. SUSTENTACION a a a. b b b. c c c. CA. 10.1. Formalidad 10.2. Exposición 10.3. Conocimiento del tema. MA TI. SUBTOTAL. x1. =. b:. x 0.5 =. c:. x0. E. =. IN. a:. FO R.  Calificación. MA S. NOTA:. Jurado: _______________________________________________________________. TE. _______________________________________________________________. SI S. _______________________________________________________________ IDENTIFICIÓN DE LA TESIS:. DE. Nombre:. _______________________________________________________________. A. _______________________________________________________________. IC. IN. _______________________________________________________________. OF. Autor: _______________________________________________________________. 43 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(46) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. ANEXO Nº 3 EVALUACIÓN DE LA TESIS. MA TI. CA. El Jurado deberá: a. Consignar las observaciones y objeciones pertinentes relacionados a los siguientes ítems. b. Anotar el calificativo final. c. Firmar los tres miembros del Jurado.. FO R. TESIS:…………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………… …………………………………………………………............. IN. 1. DE LAS GENERALIDADES:. Tipo de Investigación:. MA S. E. El Título………………………………………………………………….. …………………………………………………………………………..…. TE. ……………………………………………………………………………… 2. DELPLAN DE INVESTIGACIÓN:. SI S. Antecedentes:……………………………………………………………… Justificación:.................................................................................................... DE. Problema:………………………………………………………………… Objetivos:…………………………………………………………………. A. Hipótesis:……………………………………………………………………. IN. Diseño de Contrastación:……………………………………………………. IC. Tamaño Muestral:…………………………………………………………. OF. Análisis Estadístico: ………………………………………………………. 3. RESULTADOS:……………………………………………………………… 4. DISCUSIÓN:………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………. 44 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(47) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. 5. CONCLUSIONES: …………………………………………………………………………………. 6. REFERENCIAS. CA. BIBLIOGRÁFICAS:………………………………………………………... MA TI. 7. RESUMEN:……………………………………………………………………. FO R. 8. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN:………………………………. IN. 9. ORIGINALIDAD:……………………………………………………………. 10. SUSTENTACIÓN. E. 10.1Formalidad:……………………………………………………………………. MA S. 10.2 Exposici6n:……………………………………………………………………. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. 10.3 Conocimiento del Tema: …………………………………………………. 45 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.

(48) Biblioteca Digital. Oficina de Sistemas e Informatica - UNT. CALIFICACIÓN: (Promedio de las 03 notas del Jurado) Nombre. Código. CA. JURADO: Firma. MA TI. Docente. Dr.……………………........ ……………………... Grado Académico:. ……………………………………………………. Secretario:. Dr.…………………………. …………………….... Grado Académico:. ……………………………………………………. Grado Académico:. …………………………………………………….. OF. IC. IN. A. DE. SI S. TE. MA S. E. IN. FO R. Presidente:. 46 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comecial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/pe/.