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© INEN 2014.
Quito – Ecuador
NORMA TÉCNICA
ECUATORIANA
NTE INEN-ISO 22119
Primera edición 2014-01 MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS PARA CONSUMO HUMANO Y ANIMAL. REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) EN TIEMPO REAL PARA LA DETECCIÓN DE PATÓGENOS EN LOS ALIMENTOS. REQUISITOS GENERALES Y DEFINICIONES (ISO 22119:2011, IDT)
MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING STUFFS. REAL-TIME POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) FOR THE DETECTION OF FOOD-BORNE PATHOGENS. GENERAL REQUIREMENTS AND DEFINITIONS. (ISO 22119:2011, IDT)
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Correspondencia:
Esta Norma Técnica Ecuatoriana es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 22119:2011.
DESCRIPTORES: Microbiología, alimentos, consumo humano, animal, reacción, polimerasa, tiempo real, patógenos ICS: 07.100.30
18 Páginas
EXTRACTO
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2014-1087 i
Prólogo nacional
Esta Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN-ISO 22119 es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 22119:2011, “Microbiology of food and animal feeding stuffs. Real-time polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens. General requirements and definitions”, la fuente de la traducción es la norma adoptada por AENOR. El comité nacional responsable de esta Norma Técnica Ecuatoriana y de su adopción es el Comité Interno del INEN.
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EXTRACTO
- 5 - ISO 22119:2011
ÍNDICE
Página
PRÓLOGO ... 6
INTRODUCCIÓN ... 7
1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN ... 7
2 NORMAS PARA CONSULTA ... 8
3 TÉRMINOS Y DEFINICIONES ... 8
4 PRINCIPIO... 11
4.1 Generalidades ... 11
4.2 Sondas para PCR a tiempo real ... 11
5 REQUISITOS GENERALES DEL LABORATORIO ... 12
6 MATERIALES Y REACTIVOS ... 12
6.1 Generalidades ... 12
6.2 ADN polimerasa y tampón de reacción ... 12
6.3 Desoxiribonucleótidos trifosfato (dNTPs) para PCR ... 13
6.4 Cebadores ... 13
6.5 Sondas fluorescentes para la detección a tiempo real ... 13
6.6 Control interno de amplificación ... 13
6.7 Reactivos para prevenir la contaminación cruzada ... 13
7 APARATOS ... 13
7.1 Generalidades ... 13
7.2 Equipamiento y aparatos especiales ... 14
8 MUESTRA DE LABORATORIO ... 14
9 PROCEDIMIENTO ... 14
9.1 Preparación de la muestra ... 14
9.2 Amplificación ... 14
9.3 Controles ... 15
9.4 Análisis de los datos de fluorescencia ... 15
10 EVALUACIÓN Y DOCUMENTACIÓN ... 17
BIBLIOGRAFÍA ... 18
EXTRACTO
PRÓLOGO
ISO (Organización Internacional de Normalización) es una federación mundial de organismos nacionales de normalización (organismos miembros de ISO). El trabajo de preparación de las normas internacionales normalmente se realiza a través de los comités técnicos de ISO. Cada organismo miembro interesado en una materia para la cual se haya establecido un comité técnico, tiene el derecho de estar representado en dicho comité. Las organizaciones internacionales, públicas y privadas, en coordinación con ISO, también participan en el trabajo. ISO colabora estrechamente con la Comisión Electrotécnica Internacional (IEC) en todas las materias de normalización electrotécnica.
Las normas internacionales se redactan de acuerdo con las reglas establecidas en la Parte 2 de las Directivas ISO/IEC.
La tarea principal de los comités técnicos es preparar normas internacionales. Los proyectos de normas internacionales adoptados por los comités técnicos se envían a los organismos miembros para votación.
La publicación como norma internacional requiere la aprobación por al menos el 75% de los organismos miembros que emiten voto.
Se llama la atención sobre la posibilidad de que algunos de los elementos de este documento puedan estar sujetos a derechos de patente. ISO no asume la responsabilidad por la identificación de cualquiera o todos los derechos de patente.
La Norma ISO 22119 ha sido preparada por el Comité Europeo de Normalización (CEN) Comité Técnico CEN/TC 275, Análisis de los productos alimenticios. Métodos horizontales, en colaboración con el Comité Técnico ISO/TC 34, Productos alimenticios, Subcomité SC 9, Microbiología, conforme al acuerdo de cooperación técnica entre ISO y CEN (Acuerdo de Viena).
EXTRACTO
- 7 - ISO 22119:2011
INTRODUCCIÓN
Se ha demostrado que la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es un método rápido, sensible y específico para la detección de patógenos presentes en los alimentos. Los ulteriores desarrollos de esta tecnología permiten la detección de los productos de PCR específicos generados por el proceso de amplificación. El principio se basa en la excitación de marcadores fluorescentes durante el proceso de PCR.
Esta norma internacional es parte de una serie de documentos agrupados bajo el título general de Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real para la detección de patógenos en los alimentos:
ISO/TS 20836, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de patógenos en los alimentos. Criterios de funcionamiento de los termocicladores.
ISO 20837, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de patogénos en los alimentos. Requisitos para la preparación de las muestras para la detección cualitativa
ISO 20838, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de patógenos en los alimentos. Requisitos para la amplificación y la detección para los métodos cualitativos.
ISO 22118, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de patógenos en los alimentos. Características de funcionamiento de los métodos de detección molecular.
ISO 22119, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real para la detección de patógenos en los alimentos. Requisitos generales y definiciones.
ISO 22174, Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de patógenos en los alimentos. Requisitos generales y definiciones.
La siguiente especificación técnica se encuentra en preparación:
ISO/TS 13136, Microbiología de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Método horizontal para la detección de Escherichia coli productora de toxina de Shiga (STEC) perteneciente a los serogrupos O157, O111, O26, O103 y O145. Método basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a tiempo real cualitativa.
1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN
Esta norma internacional define términos para la detección de patógenos de alimentos presentes en los productos alimenticios y en aislados procedentes de ellos mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Esta norma internacional también describe los requisitos para la amplificación y la detección de secuencias de ácidos nucleicos (ADN o ARN tras transcripción inversa) mediante PCR a tiempo real.
Los requisitos mínimos establecidos en esta norma internacional proporcionan la base para la obtención de unos resultados comparables y reproducibles, dentro de cada laboratorio individual y entre diferentes laboratorios.
Esta norma internacional también resulta aplicable, por ejemplo, para la detección de patógenos de alimentos presentes en muestras ambientales y productos para la alimentación animal.
NOTA Debido al rápido progreso en este campo, los ejemplos que se proporcionan son los utilizados con mayor frecuencia en el momento de creación de esta norma internacional.
EXTRACTO
22119 LA POLIMERASA (PCR) EN TIEMPO REAL PARA LA DETECCIÓN DE PATÓGENOS EN LOS ALIMENTOS.
REQUISITOS GENERALES Y DEFINICIONES (ISO 22119:2011, IDT)
ORIGINAL:
Fecha de iniciación del estudio:
2013-11-25
REVISIÓN:
La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma
Oficialización con el Carácter de por Resolución No.
publicado en el Registro Oficial No.
Fecha de iniciación del estudio:
Fechas de consulta pública: 2013-11-27 al 2013-12-12 Comité Interno del INEN:
Fecha de iniciación: 2013-12-13 Fecha de aprobación: 2013-12-13 Integrantes del Comité Interno:
NOMBRES: INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Eco. Agustín Ortiz (Presidente) Ing. José Luis Pérez
Ing. Paola Castillo
DIRECCION EJECUTIVA
COORDINACIÓN GENERAL TÉCNICO DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
Ing. Tatiana Briones DIRECCIÓN DE VALIDACIÓN Y
CERTIFICACIÓN Ing. Laura González
Ing. Bolívar Cano
DIRECCIÓN DE METROLOGÍA DIRECCION DE REGLAMENTACIÓN Ing. Gonzalo Arteaga (Secretaría Técnica) DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
Otros trámites: Compromiso Presidencial N° 20549 del 08 de junio del 2013, para el fortalecimiento de normas del Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN
La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma
Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No. 13531 de 2013-12-20 Registro Oficial Suplemento No. 155 de 2014-01-06
EXTRACTO
Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815
Dirección Ejecutiva: E-Mail: [email protected] Dirección de Normalización: E-Mail: [email protected]
Regional Guayas: E-Mail: [email protected] Regional Azuay: E-Mail: [email protected] Regional Chimborazo: E-Mail: [email protected]
URL:www.inen.gob.ec