Antonio Buño Soto
Servicio Análisis Clínicos
Hospital Universitario La Paz – Madrid
16 de noviembre de 2.017
Aportación del laboratorio clínico en las enfermedades raras
desde diferentes enfoques:
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
looking beyond the obvious
J Pediatr 2016;172:181-6
•
4 isoenzimas
codificadas por genes distintos:
•
3 específicas de tejido (intestinal, de placenta y células
germinales)
cromosoma 2
•
1 no específica de tejido ubicua pero abundante en hígado y
hueso y riñón
cromosoma 1 (ALPL)
•
Sustratos
sobre los que actúa (… y se acumulan):
•
Pirofosfato inorgánico (PPi): defectos en la mineralización ósea y
afecta al metabolism P/Ca
•
Piridoxal 5’-fosfato (PLP o vitamina B6): deficits neurológicos,
convulsiones
•
Fosfoetanolamina (PEA)
Fosfatasa Alcalina
Ciclo diagnóstico de Laboratorio
Ciclo diagnóstico de Laboratorio
Errores en el laboratorio clínico
Método de Referencia IFCC
•
Abbott
: medición cinética a 405 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y HEDTA (N-(2-hidroxietil)-etilendiamino triacético)•
Beckman
: medición cinética a 410/480 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y AMP (2-amino-2-methyl-1-propanol)•
Ortho (Vitros):
medición cinética a 405 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Mg y AMP•
Roche
: medición cinética a 450/480 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y HEDTA•
Sekisui:
medición cinética a 415 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y HEDTA•
Siemens:
medición cinética a 405 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y HEDTA•
Vitro Scient:
medición cinética a 415 nm con sustrato p-nitrofenil fosfato (p-NPP) + tampón de Zn, Mg y HEDTAMétodos de medida
EQA SEQC
ML
2016
0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 20 25 Lote 1 77,8 33,1 0 50 100 150 200 250 0 5 10 15 20 25 Lote 3 213,4 92,7 0 50 100 150 200 0 5 10 15 20 25 Lote 2 149,5 63,9 0 100 200 300 400 0 5 10 15 20 25 Lote 4 344,6 159,5 x 2,4 x 2,3 x 2,3 x 2,1Intervalos de Referencia Biológicos (IRBs)
Abbott
(suero/plasma) (U/L): (Tietz 1994)
Hombres Mujeres 1-12 años: <500 1-12 años: <500 12-15 años: <750 >15 años: 40-150 >20 años: 40-150
Se recomienda que cada laboratorio determine su propio intervalo de valores de referencia basado en las características específicas de la población y la localidad
IFU de proveedores: valores esperados
Beckman Coulter
(suero/plasma) (U/L): ref alemana 1998
Varón (U/L) Mujer (U/L) 1 – 30 d 75 – 316 48 – 406 30 d – 1 a 82 – 383 124 – 341 1 – 3 a 104 – 345 108 – 317 4 – 6 a 93 – 309 96 – 297 7 – 9 a 86 – 315 69 – 325 10 – 12 a 42 – 362 51 – 332 13 – 15 a 74 – 390 50 – 162 16 – 18 a 52 – 171 47 – 119 Adultos >17a 30 – 120 30 – 120
Cada laboratorio debe verificar las posibilidades de transferir los valores previstos a su propia población y si es necesario, determinar su propio intervalo de referencia
IFU de proveedores
Ortho (Vitros)
(U/L): (273 sujetos, 154 mujeres y 119 varones)
38 – 126 (ambos sexos)
Cada laboratorio debe confirmar la validez de este intervalo para su población
IFU de proveedores
Roche
(suero/plasma) (U/L): (niños CALIPER y adultos CCLM 2001)
Varón (U/L) Mujer (U/L) 1 – 14 d 83 – 248 83 – 248 15 d – 1 a 122 – 469 122 – 469 1 – 10 a 142 – 335 142 – 335 10 – 13 a 129 – 417 129 – 417 13 – 15 a 116 – 468 57 – 254 15 – 17 a 82 – 331 50 – 117 17 – 19 a 55 – 149 45 – 87 Adultos >19a 40 – 129 35 – 104
Roche no ha evaluado intervalos de referencia en la población pediátrica
IFU de proveedores
Siemens
(suero/plasma) (U/L): (datos propios)
46 – 116 para adultos (ambos sexos)
Cada laboratorio debe determinar su propio intervalo de referencia para la evaluación diagnóstica de los resultados del paciente
IFU de proveedores
Estudio CSCC WG on Reference Interval Harmonization
Estudio CSCC WG on Reference Interval Harmonization
Estudio CSCC WG on Reference Interval Harmonization
Estudio CSCC WG on Reference Interval Harmonization
Estudio CSCC WG on Reference Interval Harmonization
Resumiendo …
Iniciativa CALIPER
•
CALIPER =
CA
nadian
L
aboratory
I
nitiative on
P
a
E
diatric
R
eference Intervals
•
Surge en 2009 en la Canadian Society of Clinical Chemists (CSCC)
Iniciativa CALIPER
Colantonio DA et al. Clinical Chemistry 2012; 58(5):854-868
•
Canadá: estudio multicéntrico
•
2188 muestras (RN a 18 años)
•
Población: multietnia
•
40 magnitudes bioquímicas
•
Abbott Architect c8000
•
Protocolo CLSI C28-A3
Iniciativa CALIPER
Colantonio DA et al. Clinical Chemistry 2012; 58(5):854-868
Iniciativa CALIPER
Estey MP, et al. Clinical Biochemistry 2013; 46:1197-1219
Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory, 3rd Edition
Measurement Procedure Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples, 3rd Edition
Iniciativa CALIPER
Clinical Biochemistry 2013; 46:1197-1219
87%
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Iniciativa CALIPER
Iniciativa CALIPER
CALIPER App
Otros ejemplos de armonización de IRBs
•
AACB en Australia y Nueva Zelanda
(
Clin Biochem Rev 35 (4) 2014; 213:235
)
Data mining
•
ACB en Reino Unido
(
Annals of Clinical Biochemistry 2011; 48: 195–197
)
Grupo de expertos; revisan nombres, unidades e IRBs; BQ y hematología
•
Noruega
(
Scand J Clin Lab Invest 2004; 64: 271 – 284
)
Prospectivo; solo adultos; 102 laboratorios; 25 magnitudes
•
JAMT en Japón
(Clin Chem Lab Med 2013; 51(8): 1663–1672)
Prospectivo; adultos; multicéntricos; 35 magnitudes
Está la hipofosfatasia infradiagnosticada?
I N F R A D I A G N O S T I C A D O S
De ahora en adelante (PROSPECTIVO)
•
Conocer mejor la enfermedad (estudiar/formación)
•
Adoptar IRBs adecuados a edad y sexo
•
Añadir comentarios interpretativos en el informe de resultados
Con lo ya hecho (RETROSPECTIVO)
•
Búsqueda activa de pacientes en nuestras bases de datos
¿Qué podemos hacer desde el laboratorio clínico?
Ejemplo de algoritmo diagnóstico
J Pediatr 2016;172:181-6
