Efecto sinérgico in vitro del fluconazol y el aceite esencial de origanum vulgare frente a candida albicans

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE MEDICINA. M. ed. ici. na. ESCUELA DE MEDICINA. “EFECTO. ca. de. SINERGICO IN VITRO DEL FLUCONAZOL Y EL ACEITE ESENCIAL DE ORIGANUM VULGARE FRENTE A CANDIDA ALBICANS” TESIS PARA OBTENER EL GRADO DE:. lio te. BACHILLER EN MEDICINA Noel Martell, Ciara Estefania. ASESOR:. Dra. Elva Mejía Delgado. Bi b. AUTOR:. TRUJILLO - PERÚ 2017. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. na. DEDICATORIA. A mi padre Wilfredo y a mi madre Adriana por su amor,. ici. comprensión y apoyo incondicional.. ed. A mis hermanos Wilfred, Juliana, Martin y Erika por cuidarme,. M. aconsejarme y darme la confianza que necesitaba.. de. A mis sobrinos Patrick, Valeria, Matías e Ian que son el motivo. ca. de cada esfuerzo realizado.. cuidandome.. Bi b. lio te. Y a Marcos por su cariño, apoyo y por estar siempre a mi lado. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) ed. ici. AGRADECIMIENTOS. na. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. M. A Dios, que siempre está presente guiándome. A mi familia, por inculcarme valores.. de. A mi asesora y amigos que han contribuido en la realización de. Bi b. lio te. ca. esta investigación.. EL AUTOR.. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE PAGINA 5. ABSTRACT. 6. I. INTRODUCCION. 7. na. RESUMEN. II. MATERIALES Y METODOS. 10 15. ici. III. RESULTADOS. 19. ed. IV. DISCUSIÓN V. CONCLUSIONES. M. VI. RECOMENDACIONES. 23 24 29. Bi b. lio te. ca. VIII. ANEXOS. de. VII. REFERENCIAS BILIOGRÁFICAS. 22. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESÚMEN Introducción: La candidiasis es una enfermedad oportunista, con manifestaciones clínicas que van desde infecciones superficiales hasta sistémicas. La creciente incidencia y aparición de resistencia hace necesaria la propuesta de nuevas alternativas;. na. ante ello, la combinación de la biodisponibilidad y eficacia de fluconazol, con la potencia antimicótica del aceite esencial de Origanum vulgare, se presenta como una. ici. opción tentativa para el tratamiento de candidiasis. Objetivo: Evaluar el efecto. ed. sinérgico del aceite esencial de Origanum vulgare y el fluconazol frente a Candida albicans. Material y método: El estudio experimental se ejecutó bajo un diseño de. M. “posprueba y grupo control”. La población objetivo consistió en Candida albicans cepa ATCC 10231 y el número de repeticiones para cada tratamiento fue de 15. Se utilizó la. de. prueba del antibiograma, enfrentando el espécimen frente a 4 tratamientos (20µg. ca. fluconazol, 40µg fluconazol, 2µL aceite esencial de Origanum vulgare y el tratamiento conjunto 40µg de fluconazol+2µL aceite esencial). Resultados: Los halos de inhibición. lio te. en los grupos tratados con 20µg fluconazol (𝑥̅ =6.0mm), 40µg fluconazol (𝑥̅ =11.64mm), 2µL aceite de orégano (𝑥̅ =81.71mm) y tratamiento conjunto (𝑥̅ =84.98mm) muestran diferencias significativas (p=0.00). La prueba de Tukey arroja semejanza entre los dos. Bi b. últimos grupos (p=0.905), además de halos significativamente mayores a los dos primeros (p=0.000). Conclusiones: El efecto combinado inhibitorio del orégano y fluconazol fue alto al igual que el de solo orégano. Palabras clave: Fluconazol, Origanum vulgare, Candida albicans, Interacción hierba – droga.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT Introduction: Candidiasis is an opportunistic disease with clinical manifestations ranging from superficial to systemic infections. The increasing incidence and emergence of resistance requires the proposal of new alternatives; in response, the. na. combination of the bioavailability and efficacy of fluconazole with the antifungal potency of the essential oil of Origanum vulgare is presented as a tentative option to the. ici. treatment of candidiasis. Objective: To evaluate the synergistic effect of the essential. ed. oil of Origanum vulgare and fluconazole against Candida albicans. Methods: The experimental study was carried out under a design "posttest and control group". The. M. target population consisted of Candida albicans strain ATCC 10231 and the number of repetitions for each treatment was 15. Antibiogram testing was used, facing the. de. specimen versus 4 treatments (20μg fluconazole, 40μg fluconazole, 2μL essential oil of. ca. Origanum vulgare and set 40μg fluconazole + 2μL essential oil treatment). All the protocol was performed under the criteria of a biosafety level type 1. Results: The. lio te. inhibition halos in the groups treated with 20μg fluconazole (𝑥̅ =6.0mm), 40μg fluconazole (𝑥̅ =11.64mm), 2μL oregano´s oil (𝑥̅ =81.71mm) and treatment group (𝑥̅ =84.98mm) showed significant differences (p = 0.00). The Tukey test shows. Bi b. similarity between the last two groups (p = 0.905), and significantly higher halos to the first two (p = 0.000). Conclusions: The combined inhibitor effect of oregano and fluconazole was high as was that of oregano alone.. Key words: Fluconazole, Origanum vulgare, Candida albicans, Herb-drug interactions.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I.. INTRODUCCIÓN. La candidiasis es una enfermedad oportunista causada por el género Candida, siendo la especie Candida albicans el agente causal más frecuente.1,. 2, 3. Sus manifestaciones. clínicas van desde infecciones superficiales: candidiasis de piel y faneras, digestiva y. na. genitourinaria; hasta infecciones sistémicas que aparecen especialmente en sujetos con. ici. déficit inmunitario.4. ed. Datos epidemiológicos revelan que la incidencia de las micosis invasivas en el Perú ha. M. ido en aumento significativo en los últimos años, siendo las infecciones por Candida spp responsable del 5% a 10% de sepsis nosocomiales. 5 En los últimos 30 años,. de. Candida albicans, ha sido el segundo agente etiológico de dermatomicosis más encontrado, con una prevalencia del 15.3% en este país. 6 En un estudio de incidencia de. ca. candidiasis orofaríngea realizado en pacientes infectados con el Virus de. lio te. Inmunodeficiencia Humana VIH/SIDA, se hallaron cultivos positivos para Candida spp en un 60.2% y de la especie C. albicans en un 96%.7 Otra investigación pone en evidencia que la candidiasis vaginal constituye la segunda causa de vaginitis en mujeres. Bi b. en edad fértil, así como en adolescentes; en quienes Candida spp afecta en un 22,7 a 28% y C. albicans en un 80%. La prevalencia en mujeres adultas es del 6 al 13.8% de las mujeres en actividad sexual, de las cuales el 74 al 94% es producido por C. albicans y el resto se debe a otras especies de Cándida.2. Tanto para el tratamiento de la candidiasis orofaríngea, esofágica como vaginal; el fluconazol es el azol sistémico antifúngico que supera, en actividad, a otros derivados. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. tiazólicos, con ventajas farmacocinéticas evidentes, debido a la baja incidencia de efectos secundarios y elevada difusión a tejidos y líquido cefalorraquídeo. Altera la permeabilidad de la membrana micótica, y consigo, el ambiente intracelular necesario para su desarrollo y división celular. 8. na. No obstante, en la actualidad, la resistencia de Candida albicans al fluconazol es. ici. cercana al 3%, con variaciones regionales y locales muy notorias. La resistencia de esta especie representa un reto terapéutico que deja un menor número de posibilidades para. ed. el tratamiento de estas infecciones que se caracterizan, a su vez, por una alta. M. morbimortalidad.9, 10, 11 Es por esto, que nacen nuevas alternativas que pretenden lograr una aumentada eficacia del tratamiento, entre ellos se encuentran los aceites esenciales. de. vegetales como el de Origanum vulgare (Orégano).12,13. ca. Diversos trabajos de investigación han demostrado que el aceite esencial de esta planta,. lio te. es un antimicótico con capacidad de inhibición de toda cepa fúngica por su elevada reactividad frente a radicales libres activos, además de ostentar propiedades como. Bi b. estrogénica, antigenotóxica e insecticida. 1, 14, 15, 16. La combinación de la biodisponibilidad y potencia de fluconazol, con la eficacia antimicótica del aceite esencial de Origanum vulgare, se presenta como una opción tentativa para el tratamiento de candidiasis; sin embargo, no se encuentran evidencias sobre las consecuencias de su uso paralelo. Por lo que la falta de información de la interacción de estas dos medidas profilácticas impulsó a realizar este estudio in vitro,. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. cuyo objetivo es el de evaluar el efecto conjunto del aceite esencial de Origanum vulgare y el fluconazol frente a Candida albicans.. 1.1. Enunciado del problema científico ¿Existe efecto sinérgico in vitro del aceite esencial de Origanum vulgare y. ici. na. fluconazol frente a Candida albicans?. 1.2. Hipótesis. ed. H1: Si, el aceite esencial de Origanum vulgare y fluconazol tienen efecto. M. sinérgico in vitro frente a Cándida albicans. H0: No, el aceite esencial de Origanum vulagre y fluconazol no tienen efecto. 1.3. Objetivos. ca. de. sinérgico in vitro frente a Cándida albicans. lio te. 1.3.1. Objetivo general. Evaluar el efecto sinérgico del aceite esencial de Origanum vulgare y fluconazol frente a Cándida albicans.. Bi b. 1.3.2. Objetivos específicos - Determinar el efecto antimicótico in vitro de Origanum vulgare frente a Cándida albicans. - Determinar el efecto antimicótico in vitro de fluconazol frente a Cándida albicans. - Determinar el efecto sinérgico antimicotico in vitro de Origanum vulgare y fluconazol frente a Cándida albicans. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. - Comparar el efecto combinado de Origanum vulgare y fluconazol con solo Origanum vulgare frente a Cándida albicans. - Comparar el efecto combinado de Origanum vulgare y fluconazol con solo. II.. METODOLOGÍA. ici. Selección y descripción de los participantes. na. fluconazol frente a Cándida albicans. ed. El estudio experimental se ejecutó bajo un diseño de “posprueba y grupo control”. 17 La. M. población objetivo consistió en Candida albicans (ATCC® 10231™). La unidad de análisis lo constituyó cada repetición realizada para el tratamiento de. de. fluconazol, aceite esencial de Origanum vulgare y el tratamiento con la mezcla de. ca. ambos.. Los criterios de inclusión abarcaron a toda colonia viable para cultivo en placa, obtenido. lio te. tras el proceso de rehidratación; se excluyeron del trabajo a toda unidad de análisis que no cumpla con los criterios de control de calidad interno, sugeridos por el manual del Instituto Nacional de Salud del Perú para pruebas de sensibilidad por el método de disco. Bi b. difusión.18. Se utilizó la prueba del antibiograma. El número de repeticiones para cada tratamiento fue calculado con la siguiente fórmula: 𝑛=. Donde:. (𝑍∝⁄2 + 𝑍𝛽 )2 ∗ 2 ∗ 𝑆 2 (𝑥 ̅̅̅1 − ̅̅̅) 𝑥2 2. 𝑍∝⁄2 = 1.96 para un α=0.05. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 𝑍𝛽 = 0.84 para un β=0.20 S= 0.75*(𝑥 ̅̅̅1 − ̅̅̅), 𝑥2 valor asumido por no haber estudio previo.. 𝑛=. (1.96 + 0.84)2 ∗ 2 ∗ (0.8 ∗ (𝑥 ̅̅̅1 − ̅̅̅)) 𝑥2 2 (𝑥 ̅̅̅1 − ̅̅̅) 𝑥2 2. na. 𝑛 = 8.82. ici. Se realizaron 15 repeticiones para cada tratamiento con la finalidad de lograr mayor. ed. nivel de generalización de los resultados de la investigación. Definición operacional de variables. SOLUCIONES INHIBITORIAS DE. Aceite esencial de Origanum Cuantitativa de razón vulgare (2µL). Fluconazol (20µg y 40µg). Cuantitativa de razón. Fluconazol (40µg) + aceite Cuantitativa de razón. lio te. (Variable. TIPO. ca. Candida albicans. M. CATEGORIA. de. VARIABLE. independiente). esencial. de. Origanum. vulgare(2µL). Bi b. EFECTO. INHIBITORIO In. Escala de Duraffourd: 1. Nula (<8mm). vitro SOBRE CEPAS. 2. Baja (8 – 14mm). DE Candida albicans. 3. Media (14 – 20mm). ATCC 10231. Cuantitativa de razón. 4. Alta (>20mm).. (Variable dependiente). 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. . Aceite esencial de Origanum vulgare: Aceite obtenido por arrastre de vapor de sumidades floridas de Origanum vulgare, concentrado al 100%.. . Solución de Fluconazol: Solución de fluconazol de presentación inyectable (200mg/100ml).. . Tratamiento conjunto: Fluconazol (40µg) + aceite esencial. Efecto inhibitorio in vitro: Capacidad para producir la muerte o evitar la. ici. . na. vulgare (2µL). de Origanum. inhibición en la prueba de antibiograma.. Escala de Duraffourd: Escala utilizada para determinar cualitativamente el. M. . ed. reproducción de un microorganismo, evidenciable por la presencia de halos de. efecto inhibitorio in vitro, según el diámetro de halos de inhibición:. lio te. Procedimientos. ca. de. Nula (<8mm), Baja (8 – 14mm), Media (14 – 20mm) y Alta (>20mm).. Diseño de investigación: -. Obtención del aceite esencial de Origanum vulgare: Adquirido de la empresa. Bi b. Essential Oils Perú S.A.C por procesamiento de Origanum vulgare procedente de la ciudad de Tacna (Perú), con certificado de pureza (Anexo nº 1) y protocolo de conservación (Anexo nº 2). -. Preparación del inóculo: A partir de cepas jóvenes de 18 a 24 horas en tubo de ensayo se cogió varias colonias con un asa y se ajustó el inóculo a una turbidez equivalente al 0.5 de la escala de MacFarland 0.5 en suero fisiológico (método de suspensión directa de colonias).. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. -. Inoculación de las placas: Antes de que transcurran 15 minutos de haber ajustado el inóculo, se introdujo un hisopo estéril dentro de la suspensión y se inocularon las placas sin dejar una zona libre. Esto se consiguió deslizando el hisopo por la superficie del agar tres veces, rotando la placa unos 60º cada vez y pasándola por último por la periferia del agar para conseguir una siembra. Dispensación del medicamento: En el interior de los pocillos formados dentro. ici. -. na. uniforme.. de la placa, se infundió la cantidad exacta del tratamiento a evaluar, con el uso. Lectura de los resultados: Después de 24 horas de incubación se midió el. M. -. ed. de una micropipeta.. diámetro de las zonas de completa inhibición con una regla.. de. El Protocolo está basado en las normas del Instituto Nacional de Salud del Perú,. ca. modificado al método de difusión desde pocillos, dicho método es utilizado cuando la cantidad del medicamento excede la capacidad de retención de los discos (papeles. Bi b. lio te. filtro watman N° 1).18. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. lio te. ca. de. M. ed. ici. na. Diseño de contrastación:. Análisis estadístico. Para comparar el efecto fungicida de los tratamientos, se realizó la prueba estadística. Bi b. ANOVA sobre los resultados obtenidos en la medición de los halos de inhibición. En los casos en los que se obtuvo diferencia significativa se realizó la prueba HSD de Tukey para determinar al de mayor efecto. Además, se realizó la prueba estadística Chi-cuadrado para determinar una relación entre los niveles de sensibilidad de Candida albicans a los tratamientos expuestos. Los datos fueron procesados con el paquete estadístico SPSS v.21.0.0 y se consideró estadísticamente significativo un p <0.05.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Ética La cepa de Candida albicans utilizada no es peligrosa, como es definida por la Occupational Safety and Health Administration. Sin embargo; este producto fue manipulado con las buenas prácticas de laboratorio, considerando un nivel de. ici. RESULTADOS. ed. III.. na. bioseguridad tipo 1.. La media de los halos de inhibición de los cuatro tratamientos en estudio fue: fluconazol. M. 20 ug (M= 6.0 ± 1.870 mm), fluconazol 40 ug (M= 11.64 ± 2.346 mm), aceite 2 ul (M=. de. 81.71 ± 16.2 mm) y tratamiento conjunto (M= 84.980 ± 11.934 mm); mostraron diferencias significativas entre estos (p<0.05) (ver tabla 1).. ca. La prueba de comparaciones múltiples HSD de Tukey entre los distintos tratamientos. lio te. dió como resultado diferencia significativa entre estos con excepción de los grupos a los que se les administró 2 µl de aceite y el tratamiento conjunto de fluconazol y aceite (p=0.905) (ver tabla 2). Siendo estos dos últimos grupos los que presentan un mayor. Bi b. halo de inhibición.. Candida albicans presenta una sensibilidad alta al aceite de orégano, ya sea solo o como tratamiento combinado, en la totalidad de las placas (Ver tabla 3). Mientras que, para el fluconazol, presenta una sensibilidad baja en el 80% de las repeticiones tratadas con 40 µg y una sensibilidad nula en el 100% de las repeticiones tratadas con 20 µg. La prueba de Chi-cuadrado arrojó diferencias significativas entre los tratamientos (p=0.00). 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 1. Medias de halos de inhibición por grupos de experimentación Grupo. Media* Desviación estándar Error estándar ANOVA 6.000. 1.870. 1.140. Fluconazol 40µg. 11.640. 2.346. 1.543. Aceite 2 µl. 81.710. 16.210. 5.126. Tratamiento conjunto. 84.980. 11.934. 3.773. 0.000. na. Fluconazol 20µg. ici. * Todos los datos mostrados están calculados en mm.. Bi b. lio te. ca. de. M. de la Universidad Nacional de Trujillo.. ed. Fuente: Datos obtenidos en el laboratorio de microbiología de la facultad de Medicina. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 2. Resultados de la prueba de comparaciones múltiples HSD de Tukey Flu 40 †. Ace 2 ‡. Trat §. Flu 20 *. -. 0.009. 0.000. 0.000. Flu 40 †. -. -. 0.000. 0.000. Ace 2 ‡. -. -. -. 0.905. Trat §. -. -. -. -. na. Flu 20 *. ici. *Flu 20: Grupo tratado con 20 µg †Flu 40: Grupo tratado con 40 µg de fluconazol ‡Ace 2: Grupo tratado con 2 µg de aceite esencial de orégano §Trat: Grupo tratado con 40 µg. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. de fluconazol y 2 µg de aceite esencial de orégano.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 3. Nivel de sensibilidad de Candida albicans. Sensibilidad* Baja. Media. Alta. Fluconazol 20µg. 15. 0. 0. 0. 15. Fluconazol 40µg. 3. 12. 0. 0. 15. Aceite 2µl. 0. 0. 0. 15. 15. Tratamiento conjunto. 0. 0. 0. 15. 15. na. Nula. ici. Estímulo. Total. * Los niveles de sensibilidad están basados en la escala de Duraford. Bi b. lio te. ca. de. M. de la Universidad Nacional de Trujillo.. ed. Fuente: Datos obtenidos en el laboratorio de microbiología de la facultad de Medicina. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV.. DISCUSIÓN. El método de destilación por arrastre de vapor de agua, es el más sencillo y más común para extraer aceites esenciales, debido a que no se requiere de ningún disolvente y por ser un método más seguro y que además la extracción del aceite por este método no. na. altera sus propiedades, esto coincide con el estudio de Maravi G. 2012.19 En lo estudios in vitro de Maravi G. 2012, Samber N. et al. 2015, Brum C. et al. 2013,. ici. la cepa de Candida albicans ATCC 10231 fue utilizada con el fin de probar la acción. ed. antifúngica de Origanum vulgare, hallando un efecto inhibitorio medio-alto de acuerdo a la Escala de Duraffourd19 20,21 y en el estudio de Rueda F. et al. 2016, la misma cepa. M. mostró resistencia al fluconazol, lo que concuerda con los resultados del presente. de. estudio.22. El método aplicado, en el presente estudio, para medir cuantitativamente el efecto. ca. inhibidor del Origanum vulgare fue el de difusión en agar por pozos, esto permitió. lio te. infundir la cantidad exacta del tratamiento a evaluar, lo que no ocurriría con el método por difusión con discos, así como mencionan los trabajos realizados por Maravi G. 2012, Moura J. et al. 2011 y Carretto C. et al. 2010. 19, 23, 24. Bi b. En la prueba de antibiograma, un determinado medicamento es concentrado en una pequeña área del agar, a partir del cual se distribuye radialmente. A medida que difunde, el gradiente de concentración disminuye, en este aspecto las placas que contenían fluconazol mostraron halos de inhibición típicos, de acorde a la literatura que reafirman la resistencia a patógenos humanos.11, 22 El perímetro dibujado indica el punto en el cual la concentración del medicamento ha llegado a la mínima concentración inhibitoria (MCI).18. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Para el caso del tratamiento con aceite esencial de orégano (2µL), la media del diámetro de inhibición fue de 81.710+16.210mm, cercano a la capacidad límite de la placa Petri estándar de 90mm. Bajo este método, el halo de inhibición del aceite de orégano supera por casi 7 veces la del fluconazol (40µg), habiendo sido el primero aplicado en cantidades ínfimas de 2 µL. La elevada actividad inhibitoria del aceite esencial de. na. Origanum vulgare coincide con los estudios de Maravi G. 2012, Brum C, et al 2013 y. ici. Villacencio J. 2016.19, 21, 25. ed. El MCI se logra con cantidades mucho más bajas del aceite de orégano, trabajos hechos con otros aceites esenciales presentan halos de inhibición menores o similares al del. M. fluconazol, lo que sugiere que su potencia no sería influida por la consistencia oleosa, sino por los componentes fungicidas particulares del aceite, para este caso,. de. principalmente: timol, carvacrol y cimeno. Sin embrago, métodos cuantitativos de dilución sugieren que el MCI para fluconazol se hallaría 0.125µg/ml, los mismos. ca. métodos que asignan 0.125 mg/ml para el aceite esencial de orégano. 26,27 Las. lio te. variaciones en los datos, ya sea por la naturaleza de la prueba, la sensibilidad de la cepa o particularidades en la composición; no dejan de concluir en el potente efecto fungicida. Bi b. que presenta el aceite esencial de Origanum vulgare. Hasta la fecha no hay reportes que describan posibles interacciones del uso simultáneo de ambos tratamientos. Los resultados in vitro del uso conjunto en el experimento mostraron un halo de inhibición sin diferencia estadística significativa con respecto al uso de únicamente aceite esencial. Lo cual indica que no existe interacción farmacéutica entre ambos, es decir, no hay evidencia de interferencia directa entre los componentes químicos de cada tratamiento. El fluconazol es de naturaleza hidrofílica mientras que el. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. aceite esencial es hidrofóbico. Teóricamente, al no ser miscibles, no se favorece ningún tipo de interacción química que pudiera alterar sus componentes.. 28,29. En cuanto a la sinergia farmacodinámica, la literatura refiere para el mecanismo de acción del fluconazol, como un inhibidor de la síntesis de ergosterol, componente. na. importante de la membrana citoplasmática fúngica, para ello, primero debe entrar en el citoplasma, que es el lugar donde se da el proceso de síntesis. Mientras que en el caso. ici. del aceite esencial de orégano, de las muchas dianas propuestas; tienen mayor respaldo. ed. el efecto directo sobre la membrana celular. La naturaleza hidrofóbica del aceite hace que este tenga afinidad por la membrana lipídica, de manera que a diferencia del. M. fluconazol, el aceite ejerce un efecto inmediato al solo contacto. 30. de. En combinación, la alteración inmediata de la permeabilidad de la membrana provocada por el aceite esencial podría facilitar el ingreso del fluconazol al citoplasma, asegurando. ca. un efecto continuo de estrés celular. La media del halo de inhibición generado en los casos de tratamiento conjunto de aceite esencial y fluconazol fue de 84.980+11.93 mm,. lio te. que similar al tratamiento de solo aceite esencial, está muy cerca del límite del tamaño de la placa Petri, este resultado no descarta el modelo propuesto de actividad sinérgica;. Bi b. sin embargo, se requieren más estudios para confirmarlo. 28 29 La literatura también refiere un efecto añadido tras el paso del aceite esencial al citoplasma que media la alteración de las membranas mitocondriales, la cadena de electrones y sitios activos de enzimas; todo ello podría ser la causa de la mayor potencia fungicida.31 La sensibilidad in vitro de Candida albicans evidencia no solo la eficacia del tratamiento, sino que es también un indicador de la potencia. La eficacia entendida. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. como la capacidad de producir un efecto máximo se alcanza significativamente con el aceite esencial de Origanum vulgare y con el tratamiento conjunto. La potencia, que hace referencia a la dosis requerida para producir un determinado efecto, resultó ser mayor para el caso del aceite esencial. El tratamiento conjunto mostró ser eficaz y. na. potente.28,29 El experimento tuvo como limitación el no poder valorar el efecto completo del aceite. ici. esencial y del tratamiento conjunto, por presentar halos de inhibición mayores de 90. ed. mm (capacidad máxima de las placas Petri utilizadas), de modo que el efecto pudiese. La interacción farmacéutica es muy baja y la interacción farmacodinámica es. ca. 1.. CONCLUSIONES. de. V.. M. ser mucho mayor que lo registrado.. indiferente al uso solo de orégano. El efecto inhibitorio del Origanum Vulgare fue alto frente a Candida albicans.. 3.. El efecto inhibitorio del fluconazol fue bajo frente a Candida albicans.. 4.. El efecto combinado inhibitorio del Origanum vulgare y fluconazol fue alto. lio te. 2.. Bi b. comparado con el de solo fluconazol.. 5.. El efecto combinado inhibitorio del Origanum vulgare y fluconazol fue alto al igual que el de solo Origanum vulgare.. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI.. . RECOMENDACIONES. Realizar futuras investigaciones para evaluar posibles efectos citotóxicos del aceite esencial de orégano utilizado en esta investigación.. . Realizar el estudio in vivo, para la identificación de variables intervinientes y la. Realizar trabajos de investigación sobre el efecto sinérgico inhibitorio de. ici. . na. valoración del tratamiento práctico.. Origanum Vulgare con otros fármacos frente a hongos y bacterias Gram. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. positivas y negativas.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Arcila C, Loarca G, Lecona S, González E. El orégano: propiedades, composición y actividad biológica de sus componentes. ALAN [Internet]. 2004 Mar [cited 2016 Nov 28];. 54(1):100–11.. Available. from:. na. http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S000406222004000100015&lng=es. ed. [cited 2016 Nov 28]; 4(6):121-7. Available from:. ici. 2. Pimentel B, Reynolds E. Candidiasis Vaginal. Rev Paceña Med Fam [Internet]. 2007. http://www.mflapaz.com/Revista_6/revista_6_pdf/6%20Candidiasis%20vaginal.pdf. M. 3. Yu Q, Zhang B, Yang B, Chen J, Wang H, Jia C, et al. Interaction among the vacuole, the mitochondria, and the oxidative stress response is governed by the transient. ca. 2014; 77:152–67.. de. receptor potential channel in Candida albicans. Free Radical Biology and Medicine.. 4. Enache A. Reglas de interpretación de las infecciones por Candida. Acta Bioquim. lio te. Clin Latinoam [Internet]. 2007 [cited 2016 Nov 29]; 41(4):587-93. Available from: http://www.redalyc.org/resumen.oa?id=53541416 5. Paz E, Ponce D, Ramírez R. Resistencia bacteriana en cuidados intensivos y. Bi b. tendencia actual: Departamento de Cuidados Críticos, Servicio de Cuidados Intensivos del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen, Essalud, Lima, Perú, 2004-2006. Acta Med Per [Internet]. 2008 Jul [cited 2016 Nov 29]; 25(3):140–7. Available from: http://www.scielo.org.pe/pdf/amp/v25n3/a04v25n3.pdf 6. Bejar V, Villanueva F, Guevara JM, González S, Vergaray G, Abanto E, et al. Epidemiología de las dermatomicosis en 30 años de estudio en el Instituto de Medicina Tropical Daniel A Carrión, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. An Fac Med [Internet]. 2014 Apr [cited 2016 Nov 29]; 75(2):167–72. Available from: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S102555832014000200013&lng=es&nrm=iso 7. Narvarte G, Bussalleu A, Echevarría J, Antúnez E, Bustamante B, Gotuzzo E. Hallazgos endoscópicos en pacientes con infección por el virus de la inmunodeficiencia. na. humana (vih) con síntomas esofágicos. Experiencia en el hospital nacional Cayetano. ici. Heredia. Rev. gastroenterol. Perú [Internet]. 2001 Oct [cited 2016 Nov 29]; 21(4):287– 99. Available from: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1022-. ed. 51292001000400006. ed. Barcelona: Elsevier; 2008. 1039.. M. 8. Mediavilla A, Peralta G, Flórez J. Farmacología humana: Fármacos antifúngico. 5º. de. 9. Gómez C. Resistencia de levaduras del género Candida al fluconazol. Infect. [Internet]. 2010 Dec [cited 2016 Nov 28]; 14(2):172-80. Available from:. ca. http://www.scielo.org.co/pdf/inf/v14s2/v14s2a09.pdf. lio te. 10. Reboli A, Shorr A, Rotstein C, Pappas P, Kett D, Schlamm H, et al. Anidulafungin compared with fluconazole for treatment of candidemia and other forms of invasive candidiasis caused by Candida albicans: a multivariate analysis of factors associated. Bi b. with improved outcome. BMC Infect Dis. 2015; 11:261. 11. Pozzatti P, Scheid L, Spader T, Atayde M, Santurio J, Alves S. In vitro activity of essential oils extracted from plants used as spices against fluconazole-resistant and fluconazole-susceptible Candida spp. Can J Microbiol. 2008 Nov 1; 54(11):950–6. 12. Cleff M, Madrid I, Meinerz A, Araújo M, Braga J, Rodrigues M, et al. Essential oils against Candida spp: in vitro antifungal activity of Origanum vulgare. Afr J Microbiol Res [Internet]. 2013 [cited 2016 Nov 28]; 7(20): 2245-50. Available from:. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. http://www.academicjournals.org/article/article1380188894_Cleff%20et%20al.pdf 13. Cleff M, Meinerz A, Xavier M, Schuch L, Schuch L, Araujo Meireles M, et al. In vitro activity of Origanum vulgare essential oil against candida species. Braz J Microbiol [Internet]. 2014 [cited 2016 Nov 28];41(1):116–23. Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S1517-83822010000100018&script=sci_arttext. na. 14. Matos A, Quispe S, Quito M. Evaluación de la Capacidad Antimicrobiana del. ici. Aceite Esencial de Orégano (Origanum vulgare) Microencapsuladas en β-ciclodextrina Aplicados en Cultivos Microbianos. Rev investig cienc tecnol aliment [Internet]. 2010 5. [cited. 2016. Nov. 29];. 1(01):18-24.. ed. Feb. Available. from:. M. http://revistasinvestigacion.upeu.edu.pe/index.php?journal=ri_alimentos&page=article &op=view&path%5B%5D=123. de. 15. Albado E, Saez G, Gabriel S. Composición química y actividad antibacteriana del aceite esencial del Origanum vulgare (orégano). Rev Med Hered [Internet]. 2001 Jan 2016. Nov. 29];. ca. [cited. 12(1):16–9.. Available. from:. lio te. http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1018130X2001000100004&lng=es&nrm=iso 16. Amadio C, Medina R, Dediol C, Zimmermann M, Miralles S. Aceite esencial de. Bi b. orégano: un potencial aditivo alimentario. Rev. FCA UNCUYO [Internet]. 2013[cited 2016. Nov. 29];43(1):237-245.. Available. from:. http://www.scielo.org.ar/pdf/refca/v43n1/v43n1a17.pdf 17. Sampieri R, Collado C, Lucio P. Metodología de la investigación. 5º ed. México: Mc Graw Hill Interamericana; 2010.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 18. Sacsaquispe R, Velásquez J. Manual de procedimientos para la prueba de sensibilidad antimicrobiana por el método de Disco Difusión. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud; 2002. 19. Maravi G. Efecto antibacteriano y antifúngico del aceite esencial de: Menta piperita (MENTA), Origanum vulgare (ORÉGANO) y Cymbopogon citratus (HIERBA LUISA). na. sobre Streptococcus mutans ATCC 25175, Lactobacillus acidophilus ATCC 10746 y. Lima: Universidad Privada Norbert Wiener; 2012.. ici. Cándida albicans ATCC 10231. [Trabajo para optar el título de Cirujano dentista].. ed. 20. Samber N, Magiatis P, Hantschke M, Bassukas I, Velegraki A, Gaitanis G, et al.. M. Evaluation of Origanum vulgare Essential Oil and its Major Constituents for Antifungal Activity in Candida spp. Pharm Biol. 2015; 53(10): 494-504.. de. 21. Brum C. In vitro activity of Origanum vulgare essential oil against Candida species. Brazilian Journal of Microbiology. 2013; 41: 116-123.. ca. 22. Rueda F, Hernandez S, Carrillo B, Lama E, Rodriguez M, Godoy C. Suceptibilidad. lio te. antifúngica in vitro de Candida albicans aislada de bolsas periodontales de pacientes con enfermedad periodontal. Rev Odontol Latinoam. 2016; 8(1): 21-24. 23. Moura J, Baldo A, Monod M, Mathy A, Cambier L, Bagut E, et al. Actividad. Bi b. antifúngica del aceite esencial de Origanum vulgare sobre cepas de Candida spp de aislados clínicos. Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas. 2012; 11: 208-17. 24. Carretto C, Vidotto V, Garcia R, Ponce L, Valverde M, Bruatto M, et al. Atividad antimicrobiana de Origanum vulgare sobre Candida spp. Braz Dent Sci 2010; 13 (1): 4– 9.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 25. Villavicencio J, Moromi H, Salcedo D, Pineda M, Ramos D, Zambrano L, et al. Efecto antimicotico in vitro de Origanum vulgare sobre cepas de Candida Albicans, Odontol Sanmarquina 2016; 19 (2): 5-8.. 26. Souza A, Hartz S, Alves D, Watte G, Bittencourt C, da Silva L, et al. Sensibilidad. na. de aislamientos de Candida albicans de hemocultivos a 3 fármacos: estudio. ici. retrospectivo en Rio Grande do Sul, Brasil, 1999 a 2009. Rev Iberoam Micol. 2013 Oct; 30(4):243–7.. ed. 27. Manohar V, Ingram C, Gray J, Talpur N, Echard B, Bagchi D, et al. Antifungal. M. activities of origanum oil against Candida albicans. Mol Cell Biochem. 2016 Dec; 228(1 2):111–7.. de. 28. Katzung B, Masters S, Trevor A. Farmacología Básica y Clínica. 12° edición. México: Mc Graw-Hill Interamericana; 2013.. ca. 29. Brunton L, Chabner B, Knollmann B. Goodman & Gilman. Las Bases. 2012.. lio te. Farmacológicas de la Terapéutica. 12° Edición. México: Mc Graw-Hill Interamericana;. 30. García R, Palou E. Mecanismos de acción antimicrobiana de timol y carvacrol sobre. Bi b. microorganismos de interés en alimentos. Temas Selectos de Ingeniería de Alimentos. 2016; 2(2):41-5.. 31. Vale L, Silva J, Oliveira D, Gonçalves J, Cavaleiro C, Salgueiro L, et al. Correlation of the chemical composition of essential oils from Origanum vulgare subsp. virens with their in vitro activity against pathogenic yeasts and filamentous fungi. J Med Microbiol. 2015 Feb; 61(2):252–60.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) ici. na. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ANEXOS. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 1: CERTIFICADO DE PUREZA DEL ACEITE ESENCIAL DE. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ici. na. ORIGANUM VULGARE. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ici. na. ANEXO 2: PROTOCOLO DE CONSERVACIÓN DE ACEITES ESENCIALES. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 3: CRITERIOS DE EVALUACIÓN DEL INFORME FINAL DE LOS TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN EN LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNT ASPECTOS. PUNTAJES. 1. 2. RESUMEN. ed. a. Tiene no más de 200 palabras y palabras clave. b. Tiene más de 200 palabras y palabras clave. c. Tiene más de 200 palabras o no tiene palabras clave.. ici. na. 1.TITULO a. Contiene las variables del problema de investigación. No es mayor a quince palabras. b. El título refiere de manera general las variables del problema. Tiene más de 15 palabras. c. El título no refleja el contenido del trabajo.. 3. ABSTRACT. 0.5 0.1 0.5 0.3 0.1. 0.5. b. Tiene más de 200 palabras y palabras clave con correcto uso del idioma inglés.. 0.3. de. M. a. Tiene no más de 200 palabras y palabras clave con correcto uso del idioma inglés.. c. Tiene más de 200 palabras en idioma inglés o no tiene palabras clave o uso incorrecto del idioma inglés.. 0.1. ca. 4. INTRODUCCIÓN. lio te. a. Se basa en antecedentes de conocimientos previos, presenta el problema con sustento, la hipótesis es coherente con el problema y objetivos. b. Se basa en antecedentes de conocimientos previos, el problema no está bien sustentado o la hipótesis no es coherente con el problema y/o objetivos.. Bi b. c. Se basa en antecedentes de conocimientos previos. No presenta problema y/u objetivos.. 3.5. 2 1. 5. MATERIAL Y MÉTODO a. La muestra recolectada es representativa, adecuada y plantea un diseño experimental apropiado a la solución del problema.. 3. b. La muestra recolectada es representativa, adecuada y no plantea un diseño experimental apropiado a la solución del problema.. 2. c. La muestra recolectada no es representativa, ni adecuada.. 1. 6. RESULTADOS a. Presenta los resultados en forma sistemática en función de las variables del problema e incluye pruebas estadísticas, figuras y tablas de. 4. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. acuerdo a las normas internacionales. b. Presenta los resultados en forma sistemática en función de las variables del problema. No incluye pruebas estadísticas, figuras y tablas de acuerdo a las normas internacionales. c. No presenta los resultados en forma sistemática en función de las variables del problema.. 2 1. 7. ANALISIS Y DISCUSION. 4. na. a. Discute cada uno de los resultados para probar su validez y contrasta con las pruebas estadísticas mencionadas en los resultados. Busca generalizaciones y establecer las posibles implicancias de los nuevos conocimientos.. ici. b. Discute algunos resultados para probar su validez y no contrasta con las pruebas estadísticas mencionadas en los resultados. Busca generalizaciones y establecer las posibles implicancias de los nuevos conocimientos.. ed. c. Discute algunos resultados para probar su validez y no contrasta con las pruebas estadísticas mencionadas en los resultados. No busca generalizaciones.. 1. de. M. 8. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES a. Replantea sumariamente el problema y las características de la muestra. Formula conclusiones lógicas y emite recomendaciones viables. b. Replantea sumariamente el problema y las características de la muestra. No formula conclusiones lógicas o no emite recomendaciones viables.. 2. ca. c. No replantea sumariamente el problema, ni las características de la muestra.. 2. 1 0.5. lio te. 9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Bi b. a. Presentan citas justificables y asentadas de acuerdo a un solo sistema de referencia bibliográfica reconocido internacionalmente b. No presenta citas justificables que están asentadas de acuerdo a un solo sistema de referencia bibliográfica reconocido internacionalmente c. Presenta citas que no se justifican o usa más de un sistema de referencia bibliográfica reconocido internacionalmente. 1 0.5 0.2. 10. APÉNDICE Y ANEXOS. a. Presentar valores ordenados sistemáticamente de acuerdo a las normas internacionales. b. Presentar valores desordenados, pero de acuerdo a las normas internacionales. c. Presentar valores desordenados que no están de acuerdo a las normas internacionales. 0.5 0.3 0.1. CALIFICACIÓN DEL INFORME FINAL. 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 4: CRITERIOS DE EVALUACIÓN DE LA DEFENSA DE LA TESIS EN LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNT Puntajes. ca. de. M. ed. ici. na. Aspectos 1. EXPOSICIÓN a. Formalidad lógica, lingüística y metodológica y uso adecuado de medios audio/visuales b. Exposición con formalidad lógica lingüística y metodológica pero no hace uso adecuado de los medios audiovisuales c. Incongruencia en la formalidad lógica, lingüística y metoclol6gica y uso inadecuado de medios audiovisuales. 2. CONOCIMIENTO DEL TEMA a. Fluidez, dominio del tema y suficiente en responder preguntas b. Fluidez, dominio del tema pero lentitud e inseguridad en las respuestas c. No dominio del Tema, respuestas contradictorias o no responde 3. RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN a. Relevancia completa de las conclusiones en la salud. b. Relevancia parcial. c. Ninguna relevancia 4. ORIGINALIDAD a. Original. b. Repetitivo en nuevo ámbito c. Repetitivo 5. FORMALIDAD a. Presentación personal formal acorde con el acto académico. b. Presentación formal pero no acorde con el acto académico. c. Presentación informal CALIFICACION DE LA DEFENSA DE LA TESIS. x3=. CALIFICACION DE LA DEFENSA DE LA TESIS (B):. x1=. Bi b. lio te. CALIFICACION DEL INFORME FINAL (A):. 5 3 1. 5 3 1 4 2 1 4 2 1 2 1 0.5. SUBTOTAL(A+B) / 4 = NOTA NOTA:. Jurado: _____________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________ _________________________________________________________. 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 5: IDENTIFICACIÓN DE LA TESIS. Nombre: “Efecto sinérgico in vitro del fluconazol y el aceite esencial de Origanum vulgare frente a Candida albicans”. na. Autor: Ciara Estefania Noel Martell CALIFICACIÓN FINAL. ed. Nombre. Código. Firma. M. JURADO:. ici. (Promedio de las 03 notas del Jurado). de. Docente. Dr.……………………........ …………… ……………. Grado Académico:. ……………………………………………………. lio te. Bi b. Secretario:. ca. Presidente:. Dr.…………………………. …………… …………….. Grado Académico:. ……………………………………………………. Miembro:. Dr…………………….......... …………… ……………... Grado Académico:. …………………………………………………….. 35 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO 6: EVALUACIÓN DE LA TESIS El Jurado deberá consignar las observaciones y objeciones pertinentes, si los hay, relacionados a los siguientes ítems:. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ici. na. TESIS:……………………………………………………………………………...…… …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… TÍTULO:…………………………………………………………………………..…… ………………………………………………………………………………… RESUMEN:………………………………………………………………………..…… ………………………………………………………………………………… ABSTRACT:……………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………... INTRODUCCIÓN:………………………………………………………………..…… …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… MATERIAL Y MÉTODOS: …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… RESULTADOS:…………………..……………………………………………….….… ………………………………………..……………………………………….……….… ………………………………………..…………………………………. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN: …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES: …………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ……………………………………………………………………………………… ANEXOS: ……………………………………………………………………………………… ………………………........ Nombre Firma. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ANEXO N° 7: RESPUESTAS DE TESISTAS A OBSERVACIONES DEL JURADO El Tesista deberá responder en forma concreta de las observaciones del jurado a manuscrito en el espacio correspondiente: a) Fundamentando su discrepancia. b) Si está de acuerdo con la observación también registrarla. c) Firmar.. na. TESIS: “Efecto sinérgico in vitro del fluconazol y el aceite esencial de Origanum vulgare frente a Candida albicans”. ici. 1.- DE LAS GENERALIDADES:. El Titulo……………………………………………………………………………. ed. ……………………………………………………………………………….…… TipodeInvestigación………………………………………………………….…………. 2.- DEL PLAN DE INVESTIGACIÓN:. M. …..……………………………………………………………………………. de. Antecedentes:………………………………………………………………………. Justificación:………………………………………………………………………. ca. Problema:……………………………………………………………….………… Objetivos:…………………………………………………………….……………. lio te. Diseño de Contrastación:…………………………………………………………. Tamaño Muestral:……………………………………………………….…..……. Análisis Estadístico:…………………………………………………………...…. 3.- RESULTADOS:………………………………………………………….…... Bi b. 4.- DISCUSIÓN:…………………………………………………………….….. 5.- CONCLUSIONES:…………………………………………………….….… ………………………………………………………………………………..….. 6.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:………………………………….… …………………………………………………………………………………... 7.- RESUMEN:…………………………………………………………….…… ………………………………………………………………………………….. 8.- RELEVANCIA DE LA INVESTIGACIÓN:…………………………….. 9.- ORIGINALIDAD:………………………………………………………….. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 10.- SUSTENTACIÓN:……………………………………………………….. Formalidad:………………………………………………………... 10.2. Exposición:…………………………………………….…………... 10.3. Conocimiento:…………………………………………...…………. na. 10.1. Nombre Firma. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ici. ……………………………………...... 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Bi b. lio te. ca. de. M. ed. ici. na. ANEXO 8:. 39 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.



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