Efecto “in vitro” de Imidacloprid y Acetamiprid sobre la germinación y el crecimiento de Trichoderma viride FP UNT 01 nativa

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AC IÓ. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA. N. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. DE. SI ST. EM. AS. DE. Efecto “in vitro” de Imidacloprid y Acetamiprid sobre la germinación y el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO DE. CC. IO. N. BIÓLOGO - MICROBIÓLOGO. DI. RE. AUTOR: Br. MELÉNDEZ MELÉNDEZ NORVIL ALEXANDER. TRUJILLO-PERÚ 2012. i. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. Orlando Velásquez Benites. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. IC. A. Y. CO. M. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ÁT. Dra. Vilma Julia Méndez Gil. RM. VICE-RECTORA ACADÉMICA DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. EM. AS. DE. IN FO. TRUJILLO. Dra. Flor Marlene Luna Victoria Mori. NACIONAL DE TRUJILLO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. VICE-RECTORA ADMINISTRATIVA DE LA UNIVERSIDAD. Dr. Regné Cortéz Lara. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CO. Dr. Hermes Mario Escalante Añorga. M. UN IC. AC IÓ. N. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO QUE OTORGAN EL TÍTULO PROFESIONAL DE BIÓLOGO-MICROBIÓLOGO. ÁT. IC. A. Y. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. RM. Dr. César Agusto Jara Campos. EM. AS. DE. IN FO. SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. SI ST. Ms. C. Pedro Arnaldo Alvarado Salinas. MICROBIOLOGÌA Y PARASITOLOGÍA. DI. RE. CC. IO. N. DE. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE. iii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. N. DEL ASESOR. El que suscribe: Ms.C. Juan Héctor Wilson Krugg asesor de la presente Imidacloprid y Acetamiprid sobre la. UN IC. tesis titulada: Efecto “in vitro” de. CO. M. germinación y el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa.. IC. A. Y. CERTIFICA:. ÁT. Que, la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su. RM. correspondiente proyecto de tesis y teniendo en cuenta las orientaciones pertinentes.. IN FO. Que, el informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las observaciones y sugerencias alcanzadas. Por ello, autorizo al Bachiller Norvil. DE. Alexander Meléndez Meléndez. para continuar con los procedimientos. EM. AS. correspondientes según sus fines.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. Trujillo, Mayo del 2012. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg ASESOR. iv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AC IÓ. N. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:. Cumpliendo con las disposiciones establecidas por el Reglamento de. UN IC. Grados y Títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, presento a su consideración y elevado criterio la presente Tesis titulada: Efecto “in vitro” de crecimiento de. M. Imidacloprid y Acetamiprid sobre la germinación y el. CO. Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa, con el objetivo de obtener el título. Trujillo, Mayo del 2012. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. Espero que este trabajo sea de su aprobación.. IC. A. Y. profesional de Biólogo-Microbiólogo.. DI. RE. CC. Br. Norvil Alexander Meléndez Meléndez. v. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. MIEMBROS DEL JURADO. --------------------------------------------. M. Ms.C. Gerardo Alayo Espinoza. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. PRESIDENTE. --------------------------------------------. SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg. -----------------------------------------------Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. vi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado dictaminador, declaran que el presente Informe de Tesis titulado: Efecto “in vitro” de Imidacloprid y. AC IÓ. N. Acetamiprid sobre la germinación y el crecimiento de Trichoderma viride FPUNT 01 nativa, ha cumplido con los requisitos formales y fundamentales, siendo. IC. A. Y. CO. M. UN IC. APROBADO por UNANIMIDAD.. ÁT. --------------------------------------------. RM. Ms.C. Gerardo Alayo Espinoza. EM. AS. DE. IN FO. PRESIDENTE. Ms. C. Juan Héctor Wilson Krugg SECRETARIO. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. --------------------------------------------. -----------------------------------------------Ms.C. Eduardo Muñoz Ganoza VOCAL. vii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios por su amor, protección y por permitirme ser. AC IÓ. N. como soy.. CO. M. toda la paciencia que tuvieron para conmigo. UN IC. A mis padres José y Nery por todo su apoyo y por. A mis hermanos Pamela y Pepe por su afecto y cariño. IC. A. Y. y a Simonita allá en el cielo. ÁT. A mis abuelos Norvil y Basilia por hacer de mí, los. IN FO. RM. primeros años de mi vida la persona que ahora soy. DE. A Criss por su amor, compañía, su apoyo y por todas. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. las sonrisas compartidas…. viii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AGRADECIMIENTOS. CO. M. Al Ms.C. Juan Héctor Wilson Krugg, Profesor Auxiliar D.E. del Departamento de Microbiología y Parasitología de la Universidad Nacional de. RM. ÁT. IC. A. Y. Trujillo, por otorgarme el asesoramiento en al realización de la presente Tesis.. IN FO. Al Ms.C. Miguel Ángel Muñoz Ríos, Profesor Auxiliar T.C. del. DE. Departamento de Microbiología y Parasitología de Universidad Nacional de. SI ST. EM. AS. Trujillo por su apoyo incondicional para la realización de este trabajo.. DI. RE. CC. IO. N. DE. A todos mis amigos que me brindaron su apoyo para el logro de mis objetivos.. ix. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. Se determinó el efecto de diferentes concentraciones de los insecticidas Imidacloprid y. AC IÓ. N. Acetamiprid sobre la germinación y el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01. nativa, para esto se trabajó con tres concentraciones de Imidacloprid (150ppm, 250 ppm. UN IC. y 350 ppm) y con tres concentraciones de Acetamiprid (100 ppm, 150 ppm y 200 ppm),. M. además de un control (0ppm) por cada insecticida. El efecto de los dos insecticidas sobre. CO. el porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa se evaluó en. Y. placas de Petri conteniendo agar agua con el respectivo insecticida, sobre las cuales se. IC. A. adicionó 4 gotas de una suspensión (5,04 x106 con/mL) de las diferentes concentraciones. ÁT. del insecticida en cuestión, la lectura se realizó a las 24 horas hasta completar un recuento. RM. de 100 esporas entre germinadas y no germinadas. en cada concentración. Para el. IN FO. porcentaje de crecimiento se incorporó cada insecticida en agar Sabouraud, y se sirvió en. DE. placas Petri, asi como también una placa control para cada insecticida, se sembró por puntura en la parte central de las placas de Petri de acuerdo a su correspondiente. EM. AS. concentración de cada insecticida, incubándose a temperatura ambiental durante 3 días.. SI ST. Se encontró que Imidacloprid y Acetamiprid no disminuyen significativamente la germinación in vitro, y tampoco tienen un efecto significativo sobre el crecimiento de. DE. Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. Se observó tambien que las tres concentraciones. N. de los insecticidas tienen el mismo efecto sobre la germinación, y el porcentaje de. CC. IO. crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa no se ve afectado por los. DI. RE. insecticidas evaluados.. x. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONTENIDO Pág.. AC IÓ. Asesor............................................................................................................ N. Autoridades de la Universidad Nacional de Trujillo .................................... UN IC. Presentación.................................................................................................. Miembros del Jurado ..................................................................................... CO. M. Aprobación……………………………………………………………….... Y. Dedicatoria..................................................................................................... IC. A. Agradecimientos............................................................................................ iv v vi vii viii ix x. IN FO. RM. ÁT. Resumen........................................................................................................ ii. DE. INTRODUCCIÓN......................................................................................... AS. MATERIAL Y MÉTODOS .......................................................................... EM. 1. Material de estudio................................................................................ SI ST. 2. Procedimiento........................................................................................ 1. 7 7 7. DE. 2.1 Evaluación de los insecticidas Imidacloprid y. DI. RE. CC. IO. N. Acetamiprid sobre T. viride FP-UNT 01 nativa …..…...……….. 7. 2.1.1 Evaluación del efecto de los insecticidas sobre la germinación de esporas de T. viride FP-UNT 01 nativa………………. 7. 2.1.1.1 Preparación de las soluciones doble. xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. concentradas. de. los. insecticidas. Imidacloprid y Acetamiprid……… del. medio. para la 8. AC IÓ. germinación…………………………….... N. 2.1.1.2 Preparación. 7. 2.1.1.3 Reactivación del cultivo de Trichoderma. UN IC. viride FP-UNT 01 nativa……………. 9. CO. M. 2.1.1.4 Preparación del inóculo de esporas…….... 8. Y. 2.1.1.5 Inoculación e incubación……………….... 10. IC. A. 2.1.1.6 Lectura de los resultados………………. 9. Evaluación del efecto de Imidacloprid y. ÁT. 2.2.2. RM. Acetamiprid sobre el crecimiento de T. viride FP11. 2.2.1.1 Preparación del medio de cultivo………. 11. DE. IN FO. UNT 01 nativa……………………. AS. 2.2.1.2 Siembra e incubación……………………. EM. 2.2.1.3 Lectura de los resultados………………. 12 12. SI ST. 2.2 Análisis de datos…………………………………………. 11. DE. RESULTADOS............................................................................................ 13. DI. RE. CC. IO. N. Fig. 1. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida. Acetamaprid a las 24 horas de incubación.................................................... 14. Fig. 2. Observación microscópica (40x) de esporas de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del. xii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. insecticida Acetamiprid…………………………………………. 15. AC IÓ. nativa frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida. N. Fig. 3. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01. UN IC. Imidacloprid, en condiciones de laboratorio y a las 24 horas de incubación……........................................................................... 16. CO. M. Fig.4. Observación microscópica (40x) de esporas de Trichoderma. Y. viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del Imidacloprid. IC. A. insecticida. 17. ÁT. (ppm)…………………………………………….. frente. a. diferentes concentraciones del insecticida. IN FO. nativa. RM. Fig. 5. Porcentaje de Crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01. DE. Acetamiprid, en condiciones de laboratorio y a los 3 días de 18. EM. AS. incubación................................... SI ST. Fig. 6. Crecimiento radial de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del insecticida Acetamiprid, en. DE. condiciones. de. laboratorio. y. a. los. 3. días. de 19. IO. N. incubación............................................................................. DI. RE. CC. Fig.7. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida. Imidacloprid, en condiciones de laboratorio y a los 3 días de incubación…….. 20. xiii. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 8. Crecimiento radial de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del insecticida Imidacloprid, en condiciones. de. laboratorio. y. a. los. 3. días. de 21. UN IC. AC IÓ. N. incubación……………………….. Y. CO. M. DISCUSIÓN................................................................................................. ÁT. IC. A. CONCLUSIONES...................................................................................... IN FO. RM. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ....................................................... DE. ANEXOS……………………………………………………………….... AS. Anexo 1. Observación microscópica y macroscópica de Trichoderma. EM. viride FP-UNT 01 nativa.. SI ST. Anexo 2. Soluciones doble concentradas de los insecticidas a) Imidacloprid y b) Acetamiprid. DE. Anexo 3. Inoculación en agar agua de la suspensión de esporas en las. IO. N. diferentes concentraciones de los insecticidas y el control.. DI. RE. CC. Anexo 4. Placas Petri conteniendo azul de lactofenol y laminilla en los puntos donde se sembró la suspensión después de las 24 horas de incubación. Anexo 5.. Preparación del medio agar Sabouraud para evaluar el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa.. xiv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 6. Siembra e incubación del cultivo puro de T. viride FP-UNT 01 nativa en la parte central de las placas Petri conteniendo agar. AC IÓ. Anexo 7. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01. N. Sabouraud envenenado con los insecticidas.. UN IC. nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. Y. CO. M. Acetamiprid (ppm).. IC. A. Anexo 8. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01. ÁT. nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. RM. Imidacloprid (ppm). IN FO. Anexo 9. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01. DE. nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. AS. Acetamiprid (ppm). EM. Anexo 10. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01. SI ST. nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. Imidacloprid (ppm).. DE. Anexo 11. Crecimiento radial promedio de Trichoderma viride FP-UNT. CC. IO. N. 01 nativa (cm) luego de ser sometido a diferentes aplicaciones. del insecticida Acetamiprid, después de 3 días de evaluación.. DI. RE. Anexo 12. Crecimiento radial promedio de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa (cm) luego de ser sometido a diferentes. aplicaciones del insecticida Imidacloprid, después de 3 días de evaluación.. xv. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 13.. Análisis de varianza (ANAVA) del. porcentaje de. germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida Imidacloprid,. AC IÓ. Análisis de varianza (ANAVA) del. porcentaje de. UN IC. Anexo 14.. N. utilizando el método HSD de Tukey.. germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente. CO. M. a las diferentes concentraciones del insecticida Acetamiprid,. IC. A. Y. utilizando el método HSD de Tukey.. porcentaje de. ÁT. Anexo 15. Análisis de varianza (ANAVA) del. RM. crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a. IN FO. las diferentes concentraciones del insecticida Imidacloprid,. DE. utilizando el método HSD de Tukey. porcentaje de. AS. Anexo 16. Análisis de varianza (ANAVA) del. EM. crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a. SI ST. las diferentes concentraciones del insecticida Acetamiprid. DI. RE. CC. IO. N. DE. utilizando el método HSD de Tukey.. xvi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. El avance en el crecimiento de la población humana, propicia. AC IÓ. N. la búsqueda de nuevas alternativas para incrementar y mejorar la. producción de alimentos. Una forma de lograr este objetivo es mediante la. UN IC. reducción de las pérdidas en cultivos agrícolas provocadas por organismos causantes de enfermedades y plagas (insectos, nematodos y hongos. CO. M. patógenos de vegetales) 1. Y. Uno de los métodos que más se utilizan para contrarrestar a. A. éstos organismos es el uso de agroquímicos. Estos productos representan. ÁT. IC. un papel muy importante en la reducción de los daños económicos en los. RM. cultivos. Sin embargo la toxicidad elevada de algunos de ellos, su persistencia en el medio y su mal uso han llevado a un replanteamiento de. IN FO. las técnicas de control de plagas.2. DE. A pesar de todo los beneficios que ofrecen los controladores. AS. químicos o plaguicidas, como es el caso de los insecticidas, pueden. EM. convertirse en un serio problema para el agricultor y la sociedad, ya que. SI ST. toda sustancia química usada en la agricultura puede provocar un efecto negativo en el ambiente si es mal aplicada o utilizada en altas dosis,. DE. pudiendo causar el uso prolongado de un mismo plaguicida problemas de resistencia, fenómeno que consiste en la aparición de biotipos tolerantes de. DI. RE. CC. IO. N. una especie anteriormente controlada por un plaguicida.3. Como todo plan de manejo integrado de plagas, el control biológico no es el único tipo de control que se aplica a los campos de cultivo, ya que varios tipos de control cultural y químicos son aplicados. Dentro de los productos químicos que se utilizan están los insecticidas, los cuales son aplicados directamente a los vegetales.. 1. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Uno de los insecticidas de uso considerable es el “Amiprid 20 SP” cuyo principio activo es el Acetamiprid, es un insecticida que pertenece al grupo neonicotinoide, de amplio espectro que presenta una actividad translaminar y sistémica actuando por contacto e ingestión. Es. AC IÓ. N. empleado para el control de órdenes como: Lepidoptera, Thysanoptera, Coleoptera y Hemíptera (mosquitas blancas, pulgones, langostinos),. UN IC. áfidos, thysanópteros y lepidópteros a través de aplicaciones foliares, en un amplio rango de cultivos, especialmente vegetales como el tomate,. CO. M. espárragos, frutos y te.4. Y. “Amiprid 20 SP” es empleado en el cultivo del espárrago para. IC. A. el control de la mosquilla de los brotes (Prodiplosis longifila), actuando imita la acción de. ÁT. como un análogo de acetilcolina, éste insecticida. RM. neurotransmisor acetilcolina bloqueando los receptores e interrumpiendo la transmisión de impulsos de entre las células nerviosas, produciendo una. IN FO. excitación nerviosa continúa en el insecto que le provoca la muerte5. DE. Otro de los insecticidas que tienen un uso considerable es el. AS. “Lancer” cuyo principio activo es el Imidacloprid; es un insecticida. EM. sistémico, primer representante del grupo de los cloronicotinilos o. SI ST. neonicotinoides.6 Es muy activo contra insectos chupadores tales como langostinos, áfidos, trips, mosquitas blancas y chanchitos blancos;7, 8 actúa. DE. sobre los receptores nicotinérgicos para la acetilcolina en el área postsináptica del sistema nervioso central de muchos insectos plaga,. DI. RE. CC. IO. N. interfiriendo en la transmisión química de las señales9. Las altas dosis de insecticidas que contaminan el ambiente, el peligro de intoxicación de los operarios, el riesgo de residuos tóxicos para el consumidor y desarrollo de resistencia en los insectos causa reducciones considerables en las cosechas en las regiones tropicales y subtropicales. Además, el rompimiento del equilibrio del ecosistema; así como emergencia de plagas secundarias, problemas en la salud humana e. 2. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. incremento en los costos de desarrollo de nuevos plaguicidas,10, 11 obligan a encontrar métodos alternos de control de plagas que sean económicos y menos contaminantes del medio ambiente.. AC IÓ. N. El control biológico se define como la reducción de la cantidad de inóculo o de la actividad que produce la enfermedad de un. UN IC. agente patógeno obtenido por o mediante uno o más organismos diferentes al hombre.12 Es por ello que ha sido visto como una de las técnicas de. M. control de plagas y enfermedades más seguras desde el punto de vista. CO. ambiental y la que supone menos riesgos para otras especies. Esta. Y. característica es una de las razones, junto a la excelente relación. IC. A. costo/beneficio, que explican la expansión, el interés permanente de los. ÁT. usuarios y la imagen amigable del control biológico en la sociedad no. RM. involucrada directamente con las actividades agrícolas.13 Muchas especies saprofitas de hongos, son antagonistas de importantes plagas, incluyendo. IN FO. los organismos patógenos de las plantas, malas hierbas e insectos14.. DE. Entre los hongos utilizados para el biocontrol de patógenos. AS. habitantes del suelo, varias especies de Trichoderma15 han sido. EM. merecedoras de una mayor atención debido a su ubicuidad, a su facilidad. SI ST. para ser aisladas y cultivadas, a su crecimiento rápido en un gran número de sustratos y que no atacan a plantas superiores,16,. 17. así también sus. DE. diferentes cepas, pueden controlar a cada hongo patógeno para lo cual se ha diseñado un programa de biocontrol. Se ha descubierto recientemente,. IO. N. que algunas cepas pueden inducir a las plantas para que “enciendan” su otros patógenos a parte de los hongos.18. DI. RE. CC. mecanismo nativo de defensa, esto hace pensar que se podrían controlar a. Los principales problemas que enfrenta la agricultura se deben a la presencia de plagas, y enfermedades provocadas por diversos microorganismos; tales como bacterias, algas, virus nemátodos, hongos, etc.. 19,20. Es por ello que se busca la utilización de todo un conjunto de. 3. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. métodos de control, culturales, biológicos, químicos, etc.; usando el más adecuado según sea el problema a tratar, teniendo en cuenta que existen niveles de plaga que se pueden permitir sin sufrir un perjuicio económico, por lo que en estos casos el fin no es erradicar sino retrasar su expansión,. AC IÓ. N. es así que surge el Manejo Integral de Plagas (MIP), con el propósito de lograr una respuesta positiva al control de plagas y minimizar los efectos. UN IC. indeseables en el ambiente.21. Por tanto, vemos que el Manejo Integrado de Plagas utiliza un. M. enfoque de sistemas para evitar el daño por plagas a niveles tolerables,. CO. mediante una variedad de métodos. A menudo se usan dos o más métodos. este. programa. implica. A. Efectivamente,. una. cuidadosa. IC. plaga.21. Y. de control juntos en un enfoque coordinado para enfrentar con éxito a una. ÁT. consideración de todas las técnicas disponibles para el control de daños, y. RM. la posterior integración de medidas adecuadas que no permitan el desarrollo de patógenos y mantengan a los productos fitosanitarios y otras. IN FO. formas de intervención en niveles económicamente justificables llegando a reducir los riesgos para el hombre, los animales, los ecosistemas, y la 23. Para el éxito de este programa, los métodos de control. DE. biosfera.22,. AS. utilizados deben ser compatibles entre sí.24 Es por ello que si entre los. EM. métodos de control a utilizar no existe compatibilidad, se produciría el. SI ST. fracaso de la protección de una cosecha.. DE. La compatibilidad o interacción positiva de los hongos con. los agroquímicos empleados en la agricultura, se ha venido estudiando. IO. N. desde inicios del siglo XXI25 así tenemos que se han realizado. DI. RE. CC. combinaciones de B. bassiana con diversos insecticidas, como Carbaril26, Fenvalerate27 , Triflumurón28 encontrando compatibilidad entre estos y el hongo. Además Castiglioni, y col. estudiaron la compatibilidad in vitro de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae con Nimkol-L® contra Heterotermes tenuis, detallando que el efecto de este insecticida a diferentes concentraciones varia en el crecimiento vegetativo, la. 4. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. conidiogénesis y la germinación de los conidios de estos hongos entomopatógenos29.. Asimismo, estudios de evaluación de la acción tóxica de los. AC IÓ. N. plaguicidas: mancozeb, tebuconazole, clorotalonil, oxicloruro de cobre,. abamectina, óxido de fenibutatina, glifosato, trifluralina, ametrina. UN IC. reduziram y triclorfon, sobre M. anisopliae, realizados por Mochi et al, confirmaron que existía compatibilidad, lo que sugirió que este bioagente. M. control de plagas se puede utilizar en combinación con estos plaguicidas. CO. sin poner en peligro su actividad.30. A. Fenoxicarb encontrando que a diferentes. IC. bassiana con el insecticida. Y. Vásquez y col. evaluaron la compatibilidad de Beauveria. ÁT. concentraciones de este insecticida, no se inhibía la germinación conidial. RM. ni el crecimiento micelial del hongo, mostrando la acción sinérgica del químico con el agente biológico.31 Goswami, et al. estudiaron la acción de. IN FO. un controlador químico (aceite natural de mostaza) junto con los dos controladores, Paecilomyces lilacinus y Trichoderma viride, y encontraron juntos. disminuían. eficientemente. DE. que. a. Meloidogyne. incognita,. EM. AS. comprobando así la existencia de compatibilidad entre ellos.32.. SI ST. En relación a la incompatibilidad o interacción negativa se ha. encontrado que los hongos entomopatógenos Metarhizium anisopliae,. DE. Paecilomyces y Lecanicillium lecanii presentaban una completa inhibición en su germinación y crecimiento frente a los funguicidas Dithane 80 WP,. IO. N. Ridomil MZ 88 WP, Daconil 82.5 WG, Kocide 77WP y Tiovit 80 WG, lo entomopatógenos y los fungicidas.33. DI. RE. CC. que indica la imposibilidad de la aplicación conjunta de estos hongos. Ante la escasa información sobre la compatibilidad de los agroquímicos y otros hongos habitantes del suelo como T. viride, es crucial que el agricultor conozca acerca de los impactos adversos que Imidacloprid y Acetamiprid pueda tener sobre la eficacia de organismos. 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. utilizados como controladores biológicos, esto permitirá a los agricultores encontrar la dosis apropiada entre los controladores biológicos y los químicos, para así planificar mejor la aplicación de los tratamientos fúngicos y/o químicos adecuados a efecto de minimizar cualquier efecto. AC IÓ. N. nocivo a la actividad de los hongos habitantes del suelo.. UN IC. Por tal razón, el presente trabajo de investigación tiene como. objetivo conocer el efecto “in vitro” de Imidacloprid y Acetamiprid sobre. M. la germinación y crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa,. CO. a fin de conocer si existe alguna incompatibilidad entre T. viride,. Y. Imidacloprid y Acetamiprid ya que de darse dicha incompatibilidad sería. IC. A. muy importante un cambio inmediato en las medidas de control que se. ÁT. dan en las empresas agrícolas, como las de La Libertad donde se efectúan. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. este tipo de control.. 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODO. 1. Material de estudio Cultivo puro de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. AC IÓ. N. . proporcionado por la cátedra de Fitopatología del Departamento de. Insecticidas “LANCER” y “AMIPRID® 20 SP”, cuyo principio. M. . UN IC. Microbiología y Parasitología. Universidad Nacional de Trujillo.. Acetamiprid, respectivamente.. CO. activo es el Imidacloprid y. A. Y. 2. Procedimiento. ÁT. IC. 2.1 Evaluación del efecto de los insecticidas Imidacloprid y. RM. Acetamiprid sobre T. viride FP-UNT 01 nativa.. IN FO. 2.1.1 Evaluación del efecto de los insecticidas sobre la germinación de esporas de T. viride FP-UNT 01 nativa.. DE. 2.1.1.1 Preparación de las soluciones doble concentradas de los. Se. realizaron. diferentes. diluciones. de. los. insecticidas en agua destilada estéril hasta alcanzar las concentraciones de 300, 500, y 700ppm para el insecticida Imidacloprid y 200, 300, y 400 ppm para el insecticida Acetamiprid, a partir de las respectivas muestras originales.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. insecticidas Imidacloprid y Acetamiprid. 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.1.1.2 Preparación del medio para germinación Se. preparó. Agar. agua. en. cuatro. matraces. AC IÓ. N. conteniendo 70 mL de medio cada uno, para cada. UN IC. insecticida. El medio de cultivo fue esterilizado en autoclave y se dejó enfriar hasta una temperatura. CO. M. aproximada de 50 °C. Estando aún fundido el medio, a. Y. tres de los matraces se les adicionó el insecticida una. IC. A. Imidacloprid en cantidad suficiente para obtener. ÁT. concentración final de 150, 250, y 350 ppm,. RM. respectivamente. Del mismo modo se adicionó el. IN FO. insecticida Acetamiprid una. concentración final de 100, 150, y 200. DE. obtener. en cantidad suficiente para. Al medio contenido en el. AS. ppm, respectivamente.. EM. matraz restante no se le agregó el insecticida, a fin de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. utilizarlo como control. Luego, el medio de cultivo de cada uno de los cuatro matraces fue servido en placas. de Petri estériles. 2.1.1.3 Reactivación del cultivo de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. Para la reactivación de T. viride FP-UNT 01 nativa a partir del cultivo puro guardado se procedió a sembrar por puntura en frascos planos. 8. con agar Sabouraud. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. inclinado y luego se incubó. durante 7 a 10 días a. temperatura ambiental 2.1.1.4 Preparación del inóculo de esporas. AC IÓ. N. El inóculo de esporas se obtuvo agregando 10 mL de. UN IC. agua destilada estéril a cada frasco plano con Agar Sabouraud que contenía T. viride FP-UNT 01 nativa. CO. M. Luego se agitó moderadamente con el fin de liberar las. un. matraz. estéril,. donde. se. determinó. la. IC. A. en. Y. esporas del hongo y la suspensión resultante se colocó. ÁT. concentración de esporas mediante el recuento en. agua. destilada. IN FO. con. RM. Cámara de Neubauer. Luego, esta suspensión se diluyó estéril. hasta. obtener. una. AS. DE. concentración final de 5,04 x106 esporas/mL.. EM. 2.1.1.5 Inoculación e incubación para la evaluación de la. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. germinación. Se colocó 2 mL de cada dilución de los insecticidas doble concentrado en frasquitos de penicilina estériles, a los cuales se les agregó 2mL de la suspensión de esporas obtenido previamente, con lo cual se obtuvo una dilución de 2,52x106 esp/mL y concentraciones finales de 150, 250, y 350 ppm para el insecticida Imidacloprid y 100, 150, y 200 ppm para el insecticida Acetamiprid. Se preparó también una suspensión de. 9. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. esporas control (0 ppm), agregándole 2 mL de la suspensión de esporas en 2mL de agua destilada estéril. De cada suspensión de esporas en las diferentes. una gota. de suspensión con ayuda de una. UN IC. colocó. AC IÓ. N. concentraciones de los insecticidas y el control, se. tuberculina, en 4 puntos diferentes de la superficie de Agar agua con las. preparadas. de. en. los. el. insecticidas, paso. 2.1.1.2,. IC. A. previamente. concentraciones. Y. diferentes. CO. M. las placas de Petri conteniendo. RM. IN FO. 24 horas34.. ÁT. posteriormente se incubó a temperatura ambiental por. DE. 2.1.1.6 Lectura. AS. Se agregó una gota de azul de lactofenol y una. EM. laminilla en cada unos de los puntos donde se sembró la. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. suspensión (dos placas de cada concentración de los insecticidas y el control), luego se observó y se realizó el recuento en el microscopio a 40x hasta contar 100 esporas (número de esporas germinadas y número de esporas no germinadas). Los resultados se expresaron. como porcentaje promedio de germinación el cual fue obtenido comparando el número de esporas germinadas en las placas con las diferentes concentraciones de los insecticidas en relación a las del grupo control.. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 2.2.2 Evaluación del efecto de los insecticidas Imidacloprid y. AC IÓ. N. Acetamiprid sobre el crecimiento de T. viride FP-UNT 01. 2.2.1.1 Preparación del medio de cultivo. UN IC. nativa. CO. M. El medio de cultivo para la evaluación del crecimiento fue preparado de manera similar que para. A. Y. el medio de germinación de las esporas de T. viride FP-. ÁT. IC. UNT 01 nativa, que el paso 2.1.1.2. Pero en este caso se. IN FO. RM. empleó agar Sabouraud.. DE. 2.2.1.2 Siembra e incubación. AS. A partir del cultivo puro de T. viride FP-UNT 01. EM. nativa se sembró por puntura en la parte central de las. preparadas en el paso anterior (5 placas por concentración incluidas las placas del control); las cuales fueron incubadas a temperatura ambiental por los 3 días que tardó el hongo en cubrir toda la placa control.. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. placas Petri conteniendo agar Sabouraud previamente. 2.2.1.3 Lectura. 11. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A partir del primer día de siembra, y hasta el tercer día, se midió el radio de crecimiento micelial en centímetros (cm.) del hongo en diferentes direcciones,. AC IÓ. N. obteniendo un radio promedio de crecimiento por día. UN IC. por cada concentración de los insecticidas y el grupo control. Los resultados de crecimiento de T. viride FPy en. CO. M. UNT 01 nativa se expresaron en centímetros. Y. porcentaje de crecimiento (%C), teniendo en cuenta el. 2.2 Análisis de datos. IN FO. RM. ÁT. la siguiente manera:. IC. A. crecimiento alcanzado por el grupo control (100%), de. DE. La determinación del efecto de los insecticidas Imidacloprid y T. viride FP-UNT 01 nativa, se realizó. AS. Acetamiprid sobre. EM. analizando el porcentaje de germinación y el porcentaje de. SI ST. crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa, en las. DE. diferentes concentraciones de dichos insecticidas, procesando los. (ANOVA), según el paquete estadístico SPSS v. 1.35. RE. CC. IO. N. datos en base a la prueba de Análisis de Varianza Unidireccional. DI. RESULTADOS. En la Figura 1.. Se observa que las tres concentraciones del insecticida. Acetamiprid tienen el mismo efecto sobre la germinación de Trichoderma. 12. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. viride FP-UNT 01 nativa, mientras que en la fig.2. Se presenta la observación microscópica de las conidias germinadas y no germinadas de Trichoderma. AC IÓ. N. viride FP-UNT 01 nativa.. UN IC. En la Figura 3. Se observa que las tres concentraciones del insecticida Imidacloprid tienen el mismo efecto sobre la germinación de Trichoderma. CO. M. viride FP-UNT 01 nativa, mientras que en la fig.4. se presenta la observación. Y. microscópica de las conidias germinadas y no germinadas de Trichoderma. ÁT. IC. A. viride FP-UNT 01 nativa.. RM. En la Figura 5. Se observa que el porcentaje de crecimiento de Trichoderma. IN FO. viride FP-UNT 01 nativa,no se ve afectado por el insecticida Acetamiprid,. DE. mientras que en la fig.6. observamos el crecimiento radial de Trichoderma. AS. viride FP-UNT 01 nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. EM. Acetamiprid.. SI ST. En la Figura 7. Se observa que el porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa no se ve afectado por el insecticida Imidacloprid,. DE. mientras que en la fig.8. Observamos el crecimiento radial de Trichoderma. IO. N. viride FP-UNT 01 nativa frente a las diferentes concentraciones del insecticida. DI. RE. CC. Imidacloprid.. 13. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. 100 84.19. 90. 80.91. 80. 60. a. CO. M. 70. UN IC. 90.77. b. b. b. Y. 50. IC. A. 40. ÁT. 30. RM. 20 10 0. 100 PPM. 150 PPM. 200 PPM. DE. 0 PPM. IN FO. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FPUNT 01 nativa (%). 100. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. EM. Fig.1.. AS. Concentraciones de Acetamiprid (ppm). a. SI ST. frente. diferentes. concentraciones. (ppm). del. insecticida. DE. Acetamiprid a las 24 horas de incubación.. b: p>0.05 No existe diferencia significativa. DI. RE. CC. IO. N. a: p<0.05 Si existe diferencia significativa. 14. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 100ppm. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. Control. 200ppm. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. 150ppm. DE. Fig.2. Observación microscópica (40x) de conidias germinadas y no germinadas. del insecticida Acetamiprid (ppm).. DI. RE. CC. IO. N. de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones. 15. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC IÓ. 100 86.90. 80. a. b. b. b. CO. 70. 83.98. UN IC. 85.98. 90. M. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FPUNT 01 nativa (%). 100. Y. 60. A. 50. ÁT. IC. 40. RM. 30. IN FO. 20 10 0. DE. 150 PPM 250 PPM Concentraciones de Imidacloprid (ppm). 350 PPM. EM. AS. 0 PPM. SI ST. Fig. 3. Porcentaje de germinación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. DE. frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida Imidacloprid a. a: p<0.05 Si existe diferencia significativa b: p>0.05 No existe diferencia significativa. DI. RE. CC. IO. N. las 24 horas de incubación.. 16. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) 150ppm. 250ppm. 350ppm. EM. AS. DE. IN FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M. UN IC. AC IÓ. Control. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SI ST. Fig.4. Conidias germinadas y no germinadas de Trichoderma viride FP-UNT. DI. RE. CC. IO. N. DE. 01 nativa frente a diferentes concentración del insecticida Imidacloprid.. 17. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 94.47. 100. 89.87. 88.85. AC IÓ. 90. a. a. UN IC. 80 70. N. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa (%). 100. a. a. 60. CO. M. 50 40. Y. 30. IC. A. 20. ÁT. 10. RM. 0 0 PPM. 100 PPM. 150 PPM. 200 PPM. AS. DE. IN FO. Concentraciones de Acetamiprid(ppm). SI ST. EM. Fig.5. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida Acetamiprid,. DE. en condiciones de laboratorio y a los 3 días de incubación.. DI. RE. CC. IO. N. a: p>0.05 No existe diferencia significativa. 18. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE. 150ppm. 100ppm. 200ppm. ST. EM. AS. Control. DE. SI. Fig.6. Crecimiento radial de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del insecticida Acetamiprid, en. DI. RE. CC I. O. N. condiciones de laboratorio y a los 3 días de incubación. 19. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 100. 98.89. UN IC. 94.07. 100. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa (%). AC IÓ. N. .. 88.62. 90. a. 70. CO. M. 80. a. a. A. Y. 60. a. IC. 50. ÁT. 40. RM. 30. IN FO. 20 10. DE. 0. 0 PPM. 150 PPM. 250 PPM. 350 PPM. SI ST. EM. AS. Concentraciones de Imidacloprid (ppm). DE. Fig.7. Porcentaje de crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. en condiciones de laboratorio y a los 3 días de incubación. a: p>0.05 No existe diferencia significativa. DI. RE. CC. IO. N. frente a diferentes concentraciones (ppm) del insecticida Imidacloprid,. 20. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) DE. IN FO. RM ÁT. IC. A. Y. CO. M UN IC AC IÓ. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AS. 250ppm. 150ppm. DE. SI. ST. EM. Control. 350ppm. N. Fig.8. Crecimiento radial de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa frente a diferentes concentraciones del insecticida Imidacloprid, en. DI. RE. CC I. O. condiciones de laboratorio y a los 3 días de incubación.. 21. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. En relación al efecto de las diferentes concentraciones de los insecticidas. AC IÓ. N. Imidacloprid y Acetamiprid sobre la germinación de Trichoderma viride FP-. UN IC. UNT 01 nativa (Figuras 1 y 3), se observa que las concentraciones utilizadas no. tienen un drástico efecto inhibitorio sobre la germinación de este hongo, es. CO. M. decir al emplear estos insecticidas, existe una leve disminución de la germinación de este hongo, lo cual probablemente se deba a que cuando se. IC. A. Y. inicia el proceso de germinación, la espora absorbe agua del medio ambiente36. ÁT. previo a la germinación propiamente dicha, las conidias de Trichoderma viride. RM. deben absorber agua y nutrientes ocasionando el hinchamiento de esta, lo que. IN FO. es conocido como hinchamiento hidrostático donde la conidia absorbe agua37. lo que podría ocasionar que los insecticidas que han sido. AS. germinación,. DE. del medio externo en este caso del medio del agar agua empleado para la. EM. disueltos con el agar agua en el momento de la preparación de este medio. DE. SI ST. ingrese junto con el agua a la conidia, afectando asi su germinación.. de la germinación con respecto al control y con. las. IO. N. La disminución. DI. RE. CC. concentraciones de los insecticidas empleados se dio aproximadamente entre un 10 y un 20% y las 3 concentraciones mantuvieron un rango constante, es decir si aumentaríamos las concentraciones de los insecticidas las disminución de la germinación seria constante y esta variación de la germinación del hongo también. podría deberse a que el agroquímico evaluado bloquearía las. 22. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. funciones metabólicas de la espora. Asimismo, dicho bloqueo metabólico también podría verse favorecido por la acumulación de iones sobre la superficie de la membrana celular. Dichas moléculas, análogas a los grupos. AC IÓ. N. prostéticos, se difundirían en el citoplasma donde serían captadas por receptores específicos, afectándose la permeabilidad de la membrana y la. UN IC. síntesis enzimática, y consecuentemente los procesos metabólicos38.. CO. M. Estudios realizados por Boucias et al.39 establecen otra probable explicación. Y. para la inhibición de la germinación de esporas; ellos demostraron que el. IC. A. tratamiento de las esporas de los hongos con productos agroquímicos, tanto. ÁT. iónicos como moleculares, pueden neutralizar la carga electrostática de la. RM. superficie y/o remover la capa mucosa que recubre la espora, afectando así el. AS. DE. iniciación de la germinación.. IN FO. proceso de reconocimiento de sustrato y la transducción de las señales de. EM. El porcentaje de disminución de la germinación de Trichoderma viride FP-UNT. SI ST. 01 nativa para ambos insecticidas es relativamente bajo, apreciando también. que gran porcentaje de conidias si germinaron, esto puede deberse a que existe. DE. una variabilidad genética entre conidias y asi poseer una versatilidad. IO. N. metabólica, resistencia a inhibidores microbianos y asi resistir a las. DI. RE. CC. condiciones adversas dadas por los insecticidas.. Tambien se puede apreciar que realizando el análisis estadístico de HSD de Tukey se encuentra que las concentraciones de los insecticidas evaluados son estadísticamente iguales, eso quiere decir que estos agroquímicos tienen el. 23. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. mismo efecto y actúan de manera similar en el proceso de germinación de. AC IÓ. N. Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa. (Fig. 1y 3).. horas de incubada,. UN IC. Referente a las observaciones microscópicas realizadas después de las 24 Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa (Fig.2 y 4.), conforme las. insecticidas Imidacloprid. y Acetamiprid iban en. Y. concentraciones de los. CO. M. mostraron una disminución moderada en la germinación y. IC. A. aumento, la germinación se mantenía en un rango constante. Esto indicaría que. ÁT. al haber sido alterado el proceso metabólico fúngico por los agroquímicos, la. RM. conidia no sólo no sería capaz de absorber las cantidades necesarias de agua;. IN FO. sino también de nutrientes, puesto que su batería enzimática (celulasas, liberada al comienzo de la. DE. glucanasas, lipasas, proteasas y quitinasas). SI ST. EM. AS. germinación de la espora podrían haberse visto dañada40.. Con respecto al efecto de las diferentes concentraciones de estos. DE. insecticidas sobre el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa,. IO. N. según el análisis estadístico no existe diferencia significativa entre las. DI. RE. CC. concentraciones evaluadas y su control esto quiere decir que los insecticidas evaluados no tienen efecto sobre el crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa (Fig. 5 y 7) tambien se puede observar que después de los tres días de. haber sido incubadas el hongo, el crecimiento radial fue de manera normal (Fig. 6 y 8). Ello implicaría que los agroquímicos en evaluación no afectan, de. 24. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. forma significativa. los procesos que ocurren en la pared celular durante el. desarrollo del hongo; así como, no produciría cambios en la actividad metabólica a nivel vesicular pues Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa tendría. UN IC. AC IÓ. N. la energía suficiente para efectuar su crecimiento41.. CO. M. Cabe indicar además que el efecto inhibitorio de los insecticidas sobre el. Y. crecimiento de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa es mucho menor que el. IC. A. producido sobre la germinación, debido a que durante el crecimiento el hongo. ÁT. presenta un mayor número de mecanismos que le permiten resistir el efecto de. IN FO. RM. estos insecticidas42.. DE. Los resultados obtenidos concuerdan con lo reportado por. AS. Cholango (2009)43 quien encontró que el agroquímico Score, el cual no debería. EM. afectar a Trichoderma, ya que sus hongos diana son Erysiphe spp., Alternaria. SI ST. spp., Botrytis cinerea, es incompatible con Trichoderma sp; asimismo Muiño y col44, encontraron que Trichoderma spp.es incompatible con el agroquímico. DI. RE. CC. IO. N. DE. benomil que está diseñado para controlar solamente a hongos fitopatógenos.. Estudios de compatibilidad tambien mencionan que ciertos agroquímicos. son compatibles con Trichoderma viride; por ejempo; Muiño y col, también reportan que Trichoderma spp, son compatibles con zineb, mancozeb y thiram,. 25. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. además de reportar que dicho hongo es compatible con oxicloruro de cobre, metalaxyl, dimethomorph, trifluralin, napropamida y dimetoato. Goswami, et al. estudiaron la acción de un controlador químico (aceite natural. AC IÓ. N. de mostaza) junto con los dos controladores, Paecilomyces lilacinus y. UN IC. Trichoderma viride, y encontraron que juntos disminuían eficientemente a Meloidogyne incognita, comprobando así la existencia de compatibilidad entre. A. Y. CO. M. ellos.. ÁT. IC. Trabajos tambien realizados por Valdez y Velásquez45 encontraron. RM. compatibilidad entre Trichoderma viride y los agroquímicos captam y. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. carbotiram.. 26. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. N. en el rango de 150 ppm a 350 ppm y. AC IÓ. Los insecticidas Imidacloprid. UN IC. Acetamiprid en el rango de 100 ppm a 200 ppm no disminuyen significativamente la germinación in vitro de Trichoderma viride FP-UNT 01. CO. M. nativa.. y. A. Y. Los insecticidas Imidacloprid en el rango de 150 ppm a 350 ppm. ÁT. IC. Acetamiprid en el rango de 100 ppm a 200 ppm no tienen efecto significativo. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. IN FO. RM. sobre el crecimiento in vitro de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa.. 27. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UN IC. AC IÓ. N. RECOMENDACIÓNES. Cabe resaltar que los resultados encontrados en el laboratorio pueden. CO. M. diferir con los obtenidos en campo, en consecuencia es recomendable realizar. Y. estudios en campo para evaluar el efecto real que ejercen estos insecticidas sobre. IC. A. Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa y hasta que punto las concentraciones de. ÁT. Imidacloprid y Acetamiprid que manejan los agricultores en campo son. RM. compatibles con la aplicación de Trichoderma viride FP-UNT 01 nativa para así. IN FO. poder programar mejor la aplicación de ambos controladores dentro de un plan de. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI ST. EM. AS. DE. manejo integrado.. 28. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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